326 大连水产学院学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇第 23 卷 同一阶段的培育条件一致 幼体和幼苗以褶皱臂尾 轮虫 Brachinonus plicatilis 卤虫 Brine shrimp 为主要 饵料, 每天均换水 10%, 连续冲气培养 幼体达 到域期幼蟹, 每个家系各取出 尾蟹苗

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1 第 23 卷第 5 期大连水产学院学报 Vol. 23 No 年 1 0 月 JOURNAL OF DALIAN FISHERIES UNIVERSITY Oct 三疣梭子蟹 3 个地理种群杂交子一代生长和活率的比较 高保全, 摇刘摇萍, 摇李摇健 ( 中国水产科学研究院黄海水产研究所, 山东青岛 ) 文章编号 : (2008) 摘要 : 为了培育三疣梭子蟹 Portunus trituberculatus 新品系, 开展了不同地理种群内自繁和种群间杂交的工作, 获得了 3 个自繁群体和 4 个杂交群体, 和 分别来自舟山野生种群 ( ZS) 莱州湾野生种群 (LZ) 和海州湾野生种群 (HZ) 自繁一代 ; 和 是 ZS 与 LZ 杂交一代, 和 是 LZ 与 HZ 杂交一代 运用方差分析对 7 个子一代群体的 5 个主要生长性状 ( 全甲宽 甲宽 甲长 体高 体重 ) 进行了比较, 发现一些性状在 7 个子一代群体之间表现出显著差异, 计算各项生长性状及活率的杂种优势, 4 个杂交子一代群体在一些性状方面表现出杂种优势 (0 郾 33% ~ 46 郾 12% ), 但不同杂交组合间和不同性状间的杂种优势在差异, 有的性状甚至表现出杂交劣势 获得的 7 个群体将成为进一步选育的基础群体, 子一代变异性的增加为进一步选育奠定了基础 关键词 : 三疣梭子蟹 ; 自繁 ; 杂交 ; 生长性状 ; 活率中图分类号 : Q789 摇摇摇摇文献标志码 : A 摇摇三疣梭子蟹 Portunus trituberculatus 生长快 个 体大 肉味鲜美, 已成为中国重要的渔业捕捞对象 和海水养殖对象 [1] 近年来, 随着梭子蟹养殖规 模的不断扩大, 各种病害也接连不断, 给产业和区 域经济的发展造成重大损失 [2] 杂交是改良动植 物遗传特性的重要手段, 其作用是直接利用杂种优 势或为育种制备中间材料 杂种优势是指两个遗传 背景不同的亲本杂交产生的杂种 在生长优势 生殖力 抗逆性 产量和品质上比亲本的一方或双 亲优越的现象, 对改良生物的生产性能有重要作 用 目前, 在扇贝 [3-6] 贻贝 [7] 海胆 [8] 太平洋牡 [9] [10-12] 蛎和虾类的杂交育种上已取得巨大进展 [13] 高保全等发现三疣梭子蟹不同地理种群在 形态上出现了一定分化 如莱州湾种群头胸甲的颜 色为浅黄色, 白色斑点很少 ; 海州湾种群头胸甲的 颜色为紫褐色, 白色斑点较少 ; 而舟山种群头胸甲 的颜色为深黄褐色, 白色斑点较多 本试验中作者 探索了三疣梭子蟹 3 个不同地理种群在相同育苗和 养殖条件下的差异和杂交效果, 评价了其杂交优 势, 旨在为三疣梭子蟹新品系的建立提供依据 1 摇材料与方法 1 郾 1 摇材料 三疣梭子蟹的莱州湾野生种群 ( LZ) 采自山 东省昌邑市下营港近海, 舟山野生种群 ( ZS) 采 自浙江舟山群岛近海, 海州湾种群 ( HZ) 采自江 苏连云港市海州湾近海 1 郾 2 摇方法 1 郾 2 郾 1 摇亲蟹交配摇 2006 年 9 月下旬, 挑选发育良 好的亲蟹进行交配搭配, 交配设计见表 1 其中每 种搭配组合各设 5 组, 每组亲蟹分别在一个单独水 泥池中进行交配 经过交尾 越冬, 2007 年 4 月 10 日至 4 月 15 日成功排幼得到的子一代为 HZ 1, 其中 群体 最少, 只有 3 只亲蟹成功排幼 1 郾 2 郾 2 摇子代培育和养殖摇每只亲蟹的后代即每个 家系各取 9 伊 10 4 尾玉期溞状幼体单独放入一个 6 m 3 的水泥池中培育, 培育同常规方法, 不同家系的 摇收稿日期 : 摇基金项目 : 国家高技术研究发展计划项目 (2006AA10A406); 国家科技基础条件平台项目 (2004DKA30470) 摇作者简介 : 高保全 (1980-), 男, 硕士 gaobq@ ysfri 郾 ac 郾 cn 摇通信作者 : 刘萍 (1962-), 女, 研究员 liuping@ ysfri 郾 ac 郾 cn

2 326 大连水产学院学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇第 23 卷 同一阶段的培育条件一致 幼体和幼苗以褶皱臂尾 轮虫 Brachinonus plicatilis 卤虫 Brine shrimp 为主要 饵料, 每天均换水 10%, 连续冲气培养 幼体达 到域期幼蟹, 每个家系各取出 尾蟹苗, 转移 到室外养殖 室外养殖池面积共 m 2, 用纱网 将该池平均分割成 12 个小格, 使每个小格的水环 境尽量保持一致 表 1 摇 亲蟹交配设计表 Tab 郾 1 摇 Mating design of broodstock crab 群体类型 Populations 交配组合 Mating combination 子一代标记 First filial generation design ZS (1 裔 ) 伊 ZS (3 意 ) 自繁群体 Cross LZ (1 裔 ) 伊 LZ (3 意 ) HZ (1 裔 ) 伊 HZ (3 意 ) ZS (1 裔 ) 伊 LZ (3 意 ) ZS (1 裔 ) 伊 HZ (3 意 ) ZH 1 杂交群体 Hybridization LZ (1 裔 ) 伊 HZ (3 意 ) LZ (1 裔 ) 伊 ZS (3 意 ) HZ (1 裔 ) 伊 LZ (3 意 ) HZ (1 裔 ) 伊 ZS (3 意 ) HZ 1 1 郾 2 郾 3 摇生长性状的测量摇当幼蟹生长到 120 日龄时, 从每个子一代群体中随机取 90 个个体, 用游标卡尺测量全甲宽 甲宽 甲长 体高, 精确到 0 郾 1 mm, 用电子天平称量体重, 精确到 1 g 1 郾 3 摇统计分析采用 SPSS 13 郾 0 软件计算平均值 标准差以及方差分析 计算杂交子一代杂种优势率 (H) 的公式为 F軈 1-1 / 2( P軈 1 + P軈 2 ) 摇摇摇 H(% ) =, 1 / 2( P軈 1 + P軈 2 ) 其中 : F 軈 P軈 1 P軈 2 分别代表杂种一代 亲本 1 和亲本 2 的平均值 2 摇结果 2 郾 1 摇子一代 7 个群体各性状的比较 2 郾 1 郾 1 摇子一代全甲宽的比较摇由表 2 可知 : 7 个子一代群体中, 平均全甲宽为 103 郾 18 ~ 118 郾 64 mm, 其中种群内自繁组的平均全甲宽为 103 郾 18 ~ 118 郾 53 mm, 种群间杂交组的平均全甲宽为 108 郾 89 ~ 118 郾 64 mm; 在变异系数上, 变异系数最大, 为 11 郾 05%, 变异系数最小, 为 6 郾 42% 方差分析表明, 子一代不同群体间全甲宽差异 极显著 ( P <0 郾 01) 多重分析结果表明 ( 表 3): 在极显著差异 ( P< 0 郾 01), 与 不在显著差异 ( P>0 郾 05); 在极显著差异 ( P < 0 郾 01), 与 不在显著差异 (P>0 郾 05); 与亲本的子一代 均在极显著差异 ( P < 0 郾 01); 与亲本之一的子一代 在极显著差异 ( P < 0 郾 01 ), 与 不在显著差异 ( P > 0 郾 05) 表 2 摇三疣梭子蟹不同地理种群内自繁和种群间杂交子一代的主要性状和变异参数 Tab 郾 2 摇 Main traits and variation parameters of from matings and crosses of different geographical pop 鄄 ulations 性状 Traits 全甲宽 / mm Total carapace width 甲宽 / mm Carapace width 甲长 / mm Carapace length 体高 / mm Body height 体重 / g Body weight 子一代平均数方差标准差 Means Variances S 郾 D 郾 118 郾 郾 郾 郾 郾 24 7 郾 郾 郾 83 7 郾 郾 郾 41 9 郾 郾 郾 26 8 郾 郾 郾 61 8 郾 郾 郾 52 7 郾 郾 郾 00 7 郾 郾 郾 15 3 郾 郾 郾 88 3 郾 郾 郾 32 4 郾 郾 郾 02 4 郾 郾 郾 65 3 郾 郾 郾 66 3 郾 郾 郾 01 5 郾 郾 郾 40 3 郾 郾 郾 59 3 郾 郾 郾 68 3 郾 郾 郾 88 3 郾 郾 郾 56 3 郾 郾 29 8 郾 00 2 郾 郾 10 9 郾 03 3 郾 郾 79 5 郾 58 2 郾 郾 60 3 郾 66 1 郾 郾 07 5 郾 90 2 郾 郾 10 4 郾 74 2 郾 郾 10 3 郾 25 1 郾 郾 55 4 郾 37 2 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 14 CV / % 11 郾 05 6 郾 42 6 郾 69 9 郾 52 7 郾 44 7 郾 38 6 郾 郾 56 7 郾 07 6 郾 68 9 郾 07 7 郾 29 7 郾 34 6 郾 郾 10 6 郾 22 5 郾 88 7 郾 83 6 郾 95 7 郾 06 5 郾 50 9 郾 96 8 郾 20 6 郾 45 8 郾 98 7 郾 24 6 郾 46 7 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 郾 79

3 第 5 期摇摇摇摇摇高保全, 等 : 三疣梭子蟹 3 个地理种群杂交子一代生长和活率的比较 327 表 3 摇三疣梭子蟹不同地理种群内自繁和种群间杂交子一代主要性状的多重分析 (LSD 法 ) Tab 郾 3 摇 Multiple comparison(lsd) of main traits in from matings and crosses of different geographical populations 性状 Traits 子一代 差异显著性 Significance of variance 6 郾 90 ** 1 郾 郾 18 ** 2 郾 郾 47 ** 9 郾 58 ** 5 郾 07 ** 10 郾 28 4 郾 71 ** 4 郾 57 ** 2 郾 68 全甲宽 15 郾 35 ** 0 郾 35 9 郾 64 ** 7 郾 75 ** Total carapace width 14 郾 99 ** 5 郾 71 ** 7 郾 60 ** 9 郾 28 ** 7 郾 39 ** 1 郾 88 2 郾 04 ** 0 郾 77 5 郾 00 ** 0 郾 39 4 郾 89 ** 2 郾 89 ** 2 郾 81 ** 2 郾 96 1 郾 65 * 2 郾 85 ** 0 郾 84 甲宽 5 郾 77 ** 1 郾 16 5 郾 66 ** 3 郾 65 ** Carapace width 4 郾 61 ** 0 郾 11 ** 2 郾 11 4 郾 50 ** 2 郾 50 * 2 郾 00 2 郾 50 ** 0 郾 85 5 郾 48 ** 0 郾 89 4 郾 25 ** 3 郾 13 ** 3 郾 25 ** 2 郾 98 ** 1 郾 62 ** 1 郾 75 * 0 郾 63 甲长 6 郾 33 ** 1 郾 74 ** 5 郾 10 ** 3 郾 98 ** Carapace length 4 郾 60 ** 1 郾 23 2 郾 35 * 3 郾 37 ** 2 郾 25 * 1 郾 12 2 郾 05 ** 1 郾 24 3 郾 77 ** 0 郾 74 * 2 郾 99 ** 2 郾 29 ** 0 郾 81 * 1 郾 72 ** 1 郾 31 ** 0 郾 95 * 0 郾 24 体高 2 郾 53 ** 0 郾 50 1 郾 76 ** 1 郾 05 ** Body height 3 郾 03 ** 0 郾 78 1 郾 48 * 2 郾 25 ** 1 郾 55 ** 0 郾 70 2 郾 50 ** 0 郾 85 5 郾 48 ** 0 郾 89 4 郾 25 ** 3 郾 13 ** 3 郾 35 ** 2 郾 98 ** 1 郾 62 ** 1 郾 75 * 0 郾 63 体重 6 郾 33 ** 1 郾 74 ** 5 郾 10 ** 3 郾 98 ** Body weight 4 郾 60 ** 1 郾 23 2 郾 35 * 3 郾 37 ** 2 郾 25 * 1 郾 12 注 : ** 表明差异极显著 (P<0 郾 01); * 表明差异显著 (P<0 郾 05) Notes: **means very significant difference (P<0 郾 01); *means significant difference (P<0 郾 05). 2 郾 1 郾 2 摇 子一代甲宽的比较摇 从表 2 可见 : 7 个子 不在显著差异 ; 一代群体中, 平均甲宽为 52 郾 04 ~ 57 郾 81 mm, 其中种群内自繁组的平均甲宽为 52 郾 04 ~ 57 郾 81 mm, 种群间杂交组的平均甲宽为 52 郾 15 ~ 56 郾 65 mm; 在变 在显著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本的子一代 均在极显著差异 ; 与亲本的子一代 均不在显著差异 异系数上, 的变异系数最大, 为 12 郾 56% ; 2 郾 1 郾 3 摇 子一代甲长的比较摇 从表 2 可见 : 7 个子 变异系数最小, 为 6 郾 02% 方差分析表明, 子一代不同群体间甲宽差异极显著 (P<0 郾 01) 多重分析结果表明 ( 表 3): 一代群体中, 平均甲长为 48 郾 94 ~ 55 郾 27 mm, 其中种群内自繁组的平均甲长为 48 郾 94 ~ 55 郾 27 mm, 种群间杂交组的平均甲长为 50 郾 17 ~ 53 郾 93 mm; 在变 在极显著差异, 与 异系数上, 的变异系数最大, 为 10 郾 10% ;

4 328 大连水产学院学报摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇第 23 卷 变异系数最小, 为 5 郾 50% 方差分析表明, 子一代不同群体间甲长差异极 显著 (P<0 郾 01) 多重分析结果表明 ( 表 3): 在极显著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本的子一代 均 在极显著差异 ; 在显著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本 之一的子一代 在显著差异, 与 不在显 著差异 2 郾 1 郾 4 摇子一代体高的比较摇从表 2 可见 : 7 个子 一代群体中, 平均体高为 27 郾 07 ~ 30 郾 10 mm, 其中 种群内自繁组的平均体高为 27 郾 07 ~ 29 郾 60 mm, 种 群间杂交组的平均体高为 28 郾 10 ~ 30 郾 10 mm; 在变 异系数上, 的变异系数最大, 为 9 郾 96% ; 变异系数最小, 为 6 郾 45% 方差分析表明, 子一代不同群体间体高差异极 显著 (P<0 郾 01) 多重分析结果表明 ( 表 3): 在极显著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本之一的 在极显 著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本之一 的子一代 在显著差异, 与 不在显著差 异 ; 与亲本之一的子一代 在显著差异, 表 4 摇 与 不在显著差异 2 郾 1 郾 5 摇子一代体重的比较摇从表 2 可见 : 7 个子 一代群体中, 平均体重为 72 郾 13 ~ 104 郾 80 g, 其中 种群内自繁组的平均体重为 72 郾 13 ~ 104 郾 8 g, 种群 间杂交组的平均体重为 81 郾 50 ~ 101 郾 10 g; 在变异 系数上, 的变异系数最大, 为 19 郾 04% ; 变 异系数最小, 为 15 郾 79% 方差分析表明, 子一代不同群体间体高差异极 显著 (P<0 郾 01) 多重分析结果表明 ( 表 3): 在极显著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本的子一代 在极显著差异 ; 在 显著差异, 与 不在显著差异 ; 与亲本之 一的子一代 在显著差异, 与 不在显著 差异 2 郾 2 摇杂交子一代的杂交优势率 杂种优势在不同性状 不同组合间在差异, 除 的甲长 活率和 的甲宽 甲长表现杂 种劣势外, 其他的杂交子一代各个性状均表现出一 定程度的杂种优势 (0 郾 33% ~ 46 郾 12% ) ( 表 4) 三疣梭子蟹不同地理种群间杂交子一代主要性状的杂交优势率 Tab 郾 4 摇 Heterosis of main traits in from hybridization of different geographical populations % 子一代 全甲宽 甲宽 甲长 体高 体重 活率 Total carapace width Carapace width Carapace length Body height Body weight Survival rate 2 郾 28 0 郾 33 0 郾 63 3 郾 10 4 郾 郾 12 1 郾 88 0 郾 43-0 郾 10 3 郾 10 0 郾 83-7 郾 85 0 郾 53-1 郾 91-0 郾 52 0 郾 61 1 郾 郾 00 2 郾 27 1 郾 18 1 郾 71 2 郾 22 3 郾 32 3 郾 75 3 摇讨论 杂种优势的产生, 主要是由于优良显性基因的互补作用和群体中杂合子频率的增加, 从而抑制和减弱了不良基因的作用, 提高了整个群体的平均显性效应和上位效应 从整个有机体来看, 主要表现在生活力 耐受力 抗病力和繁殖性能提高, 饵料转化率和生长速度加快 ; 从质量性状来看, 主要表现在畸形 缺陷 致死 半致死现象减少 ; 从数量性状来看, 群体各项指标的平均值提高 但个别时候, 由于某些等位基因间的相互作用会产生负的显性效应, 在个别性状上表现出杂种群体均值低于双亲均值或双亲中任何一方的现象 [6], 相对于杂种优势而言, 即所谓的 劣势冶 本试验结果显示, 大多数杂交组合显示不同程度的杂种优势, 但 的甲长 活率和 的甲宽 甲长表现出杂种劣势 原因可能是本试验中所选择的亲本都是未经选择的野生种群, 这些亲本的遗传差异很大, 因此, 用这些亲本进行杂交所得的 表型参差不齐, 是出现杂种优势减弱甚至劣势的原因 这也给进一步选育提供了较好的参考依据 种间杂交和种内杂交可以通过非加性效应改善养殖品种的性状, 无论两个亲本的等位基因差异如何, 杂交后代都会表现出不同程度的杂种优势 不过, 数量性状的杂交优势与杂交群体的基因频率直接相关 现在的杂种优势理论认为, 两杂交群体在控制某一性状的一些基因频率上差异愈大, 这个性状所表现的杂种优势也就愈大 两个群体间的基因频率相差越大, 群体选育的纯化程度越高, 所获得

5 第 5 期摇摇摇摇摇高保全, 等 : 三疣梭子蟹 3 个地理种群杂交子一代生长和活率的比较 329 的杂种优势就越大 [6] 综合比较得知, 群体比 其他 3 个群体杂种优势又大一些, 这在一定程度上 说明舟山和莱州湾两个种群之间基因频率差别最 [13] 大 这和高保全等对三疣梭子蟹 4 个野生群体 形态差异分析的结果一致 本研究中分析了 120 日龄三疣梭子蟹生长发育 和活率等 6 个性状, 结果表明, 在相同环境和同 期育苗的条件下, 4 个杂交子一代在活率和 5 个 生长指标方面, 与 3 个自繁子一代在极显著差 异, 所获得的 7 个子一代群体均产生了一定程度的 形态差异, 而且不同程度地表现出杂交优势, 这些 群体有望成为进一步选育的基础群体 参考文献 : [1] 摇吴常文, 虞顺成, 吕永林. 梭子蟹渔业技术 [ M]. 上海 : 上海科 学技术出版社,1996: [2] 摇王国良, 金珊, 李政, 等. 三疣梭子蟹 ( P. trituberculatus) 乳化病 的组织病理和超微病理研究 [ J]. 海洋与湖沼,2006,37 (4): [3] 摇 CRUZ P,IBARRA A M. Larval growth and survival of two catarina scallop( Argopecten circularis, Sowerby,1835) population and the irreciprocal crosses[ J]. J Exp Marin Biol Ecol,1997,212: [4] 摇刘小林, 常亚青, 相建海, 等. 栉孔扇贝中国种群与日本种群杂 交一代的中期生长发育 [J]. 水产学报,2003,27(3): [5] 摇常亚青, 刘小林, 相建海, 等. 栉孔扇贝中国种群与日本种群杂交一代的早期生长发育 [J]. 水产学报,2002,26(5): [6] 摇刘小林, 常亚青, 相建海, 等. 栉孔扇贝不同种群杂交效果的初步研究 [J]. 海洋学报,2003,25(1): [7] 摇 MIGUEL A, RIO-PORTILLA D, ANDY R B. Larval growth,ju 鄄 venile size and heterozygosity in laboratory reared mussels,mytilus edulis[ J]. J Exp Marine Biol Ecol,2000,254:1-17. [8] 摇 RAHMAN M A,UEHARA T,ASLAN L M. Comparative viability and growth of hybrids between two sympatric species of sea urchins ( Genus echinometra) in Okinawa[ J]. Aquaculture,2000,183: [9] 摇 ENGLISH L J,MAGUIRE G B,WARD R D. Genetic variation of wild and hatchery populations of the Pacific oyster, Crassostrea gigas( Thunberg),in Australia[ J]. Aquaculture,2000,187: [10] 摇 BENZIE J A H,KENWAY M,BALLMENT E, et al. Interspecific hybridization of the tiger prawns Penaeus monodon and Penaeus es 鄄 culentus[ J]. Aquaculture,1995,133: [11] 摇 MISAMORE M,BROWDY C L. Evaluating hybridization potential between Penaeus setiferus and Penaeus vannamei through natural mating, artificial insemination and in vitro fertilization[j]. Aqua 鄄 culture,1997,150:1-10. [12] 摇 BIERNE N,BEUZART I,VONAN V,et al. Microsatellite-associ 鄄 ated heterosis in hatchery-propagated stocks of the shrimp Penaeus stylirostris[ J]. Aquaculture,2000,184: [13] 摇高保全, 刘萍, 李健, 等. 三疣梭子蟹 4 个野生群体形态差异分析 [J]. 中国水产科学,2007,14(2): Comparative growth and viability of hybrid in different geographical populations of crab Portunus trituberculatus GAO Bao 鄄 quan, 摇 LIU Ping, 摇 LI Jian ( Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao ,China) Abstract: Hybridization was carried out within and among different geographical populations of crab Portunus tritu 鄄 berculatus to breed new strains. Seven populations of first filial generations were obtained, in which three popula 鄄 tions,designated, and,were from wild populations of Zhoushan(ZS),Laizhou Bay(LZ),and Haizhou Bay(HZ). Two populations, and were from cross between ZS and LZ, two populations and were from cross between LZ and HZ. Analysis of five growth traits, total carapace width, carapace width, carapace length, body height and body weight by ANOVA revealed that some traits were significantly different among the sev 鄄 en populations of first filial generations. There existed different extent heterosis(0. 33% % )for growth in to 鄄 tal carapace width, carapace width, carapace length, body height, body weight and livability in first filial genera 鄄 tion of four hybrids. Heterosis was different in different combinations and traits, indicating that the seven popula 鄄 tions were considered as the basic populations to breed new strains. Increased variation parameters in first filial gen 鄄 eration of cross could be a very good potential for new strain selecting. Key words: Portunus trituberculatus; cross population; mating population; trait; breeding

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