广告.indd

Size: px

Start display at page:

Download "广告.indd"

煊闻
5 years ago
Views:

1 生物工程食品科学, Vol.37, No 抑制口腔的乳酸菌筛选及其抑菌机理郭夏蕾, 张健, 杨贞耐 * ( 北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心, 食品质量与安全北京实验室, 北京 1000) 摘要 : 利用乳酸菌能抑制有害菌的特性, 从实验室保藏的乳酸菌中筛选能抑制口腔的菌株, 并测定了筛选菌株的最小抑菌浓度 (minimal inhibitory concentration,mic), 以及其对菌膜形成和黏附性的影响, 初步研究其抑菌机理结果表明, 有 5 株植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum) 对具有明显的抑制作用株指示菌中, (Streptococcus mutans) 对植物乳杆菌比较敏感植物乳杆菌对的抑制作用比其他株植物乳杆菌的作用更明显, 其 MIC 最低 ( ~ CFU/mL) 同时, 菌株对菌膜形成的抑制率较高, 还显著地降低的黏附率对菌株抑菌机理的初步研究表明, 其代谢过程中产生的乳酸和过氧化氢起到了主要的抑菌作用关键词 : ; 益生菌 ; 植物乳杆菌 ; 抑菌活性 Screening of Lactic Acid Bacteria for Inhibiting Oral Streptococcus mutans and Preliminary Study of Antibacterial Mechanism GUO Xialei, ZHANG Jian, YANG Zhennai* (Beijing Laboratory of Food Quality and Safety, Beijing Advanced Innovation Center for Food Nutrition and Human Health, Beijing Technology and Business University, Beijing 1000, China) Abstract: Considering that lactic acid bacteria (LAB) that can inhibit harmful bacteria, LAB strains stored in our laboratory were screened for inhibiting oral Streptococcus mutans. The screened strains were measured for minimum inhibitory concentration (MIC) and inhibitory effect on biofilm formation adhesion properties of S. mutans, and the underlying mechanism was preliminarily studied as well. The results showed that 5 Lactobacillus plantarum strains including,,, and exhibited clear inhibition against S. mutans. Among indicator S. mutans strains, and were more sensitive to L. plantarum. L. plantarum showed stronger inhibition than other strains against S. mutans. The MIC value ( CFU/mL) of strain was the lowest, the inhibition rate on biofilm formation of S. mutans was significantly higher, and the inhibitory effect on the adhesion ability of S. mutans was clear. Preliminary studies on the antibacterial mechanism of L. plantarum indicated that lactic acid and hydrogen peroxide produced by the strain played major roles in this activity. Key words: Streptococcus mutans; probiotic; Lactobacillus plantarum; inhibitory activity DOI: /spkx 中图分类号 :TS1.3 文献标志码 :A 文章编号 : () 引文格式 : 郭夏蕾, 张健, 杨贞耐. 抑制口腔的乳酸菌筛选及其抑菌机理 [J]. 食品科学,, 37(19): DOI: /spkx GUO Xialei, ZHANG Jian, YANG Zhennai. Screening of lactic acid bacteria for inhibiting oral Streptococcus mutans and preliminary study of antibacterial mechanism[j]. Food Science,, 37(19): (in Chinese with English abstract) DOI: /spkx 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金面上项目 ( ) 作者简介 : 郭夏蕾 (1991 ), 女, 硕士研究生, 研究方向为乳品生物技术 @qq.com * 通信作者 : 杨贞耐 (1965 ), 男, 教授, 博士, 研究方向为乳品科学及加工技术 yangzhennai@th.btbu.edu.cn

2 11, Vol.37, No.19 食品科学生物工程龋齿是一种常见的口腔疾病, 对口腔健康危害很大其原因是 (Streptococcus mutans) 与口腔中的碳水化合物共同作用, 形成的有机酸 ( 主要是乳酸 ) 不断地侵蚀包裹在牙齿外面的牙釉质, 进而使牙齿硬组织发生去矿化作用而形成龋齿 [1] 的致病作用依赖于其对光滑牙面的黏附能力, 一般来说, 这种黏附作用主要通过两个阶段实现 [2-] : 首先是通过氢键和疏水作用等蔗糖非依赖性黏附实现初始黏附 ; 然后是经蔗糖依赖性黏附, 主要是水不溶性胞外多糖, 使黏附到牙面上, 该过程在定殖到牙面的过程中发挥主要作用对于龋齿的治疗通常是使用抗生素药物, 但长期使用抗生素不仅会使口腔中微生物系统失衡, 还会使细菌耐药性增强, 不利于口腔健康 [5] 乳酸菌是一种有益于人体健康的重要微生物, 同时也存在于人口腔中, 对于维持口腔微生态平衡具有重要作用 [6] 从乳酸菌中筛选有益于口腔健康的益生菌受到了研究者们越来越多的关注随着益生菌疗法在防治胃肠道感染疾病方面的优势日益明显, 这种治疗方式也逐渐应用到口腔领域 [7-] 近年来, 很多的研究表明, 益生菌在保持口腔健康预防口腔疾病等方面都起到了重要作用 [9] 益生菌能够在一定程度上抑制致龋菌的活性, 尤其可减少的数量, 大大减小了龋病的发生率 [10] 此外, 口腔中的乳杆菌还能够抑制牙龈卟啉单胞菌 (Porphyromonas gingivalis) 等导致牙周炎的致病菌和中间普雷沃菌 (Prevotella intermedia) 的生长 [11] 所以, 利用益生菌的抑菌特性来抑制口腔中有害菌, 减少龋齿等口腔疾病的发生, 同时不破坏口腔微生物平衡, 是一种很好的预防和治疗方法本研究从实验室保藏的乳酸菌菌株中筛选出对口腔具有抑制作用的优良菌株, 并研究了乳酸菌对菌膜形成和黏附性的抑制作用, 为进一步利用乳酸菌的益生特性来预防与改善龋齿等口腔疾病提供理论基础 1 材料与方法 1.1 材料与试剂菌种乳酸菌共 96 株, 由北京工商大学食品质量与安全北京实验室保藏, 其中植物乳杆菌由吉林省农业科学院提供口腔致病菌购于中国普通微生物菌种保藏所 ; 103 购于中国工业微生物菌种保藏管理中心试剂与培养基甲醇冰醋酸结晶紫乳酸乙酸北京化工厂 ; 胰蛋白酶胃蛋白酶过氧化氢酶美国 Sigma 公司 MRS 液体培养基 : 葡萄糖 g 蛋白胨 10 g 牛肉膏 10 g 酵母浸粉 5.00 g 无水乙酸钠 5.00 g 柠檬酸钠 5.00 g 磷酸氢二钠 2.00 g 吐温-0 1 ml 七水硫酸镁 0 g 硫酸锰 5 g, 加水至 ml,1 mol/l 乙酸调至 ph kpa 条件下灭菌 15 min BHI 液体培养基 : 心提取物 5.0 g 脑提取物.5 g 蛋白胨 1 g 葡萄糖 2.0 g NaCl 5.0 g Na 2 HPO 2.5 g 琼脂 15.0 g, 蒸馏水定容至 1.0 L,pH kpa 条件下灭菌 15 min 1.2 仪器与设备 MLS-3750 高压蒸汽灭菌器日本三洋公司 ; CR21GⅢ 立式高速冷冻离心机 U-3900 紫外 - 可见分光光度计日本日立公司 ; 数显 ph 计梅特勒 - 托利多仪器上海有限公司 ;ELx00 酶标仪美国 Bio-Rad 仪器有限公司 1.3 方法抑制生长的乳酸菌筛选采用牛津杯法筛选出可以抑制的 [] 乳酸菌, 具体操作参考 Bosch 等的实验方法将 1.5 g/100 ml 的 BHI 琼脂培养基倒入平板中, 待凝固后分别取 μl 菌液涂布于平板上, 然后将牛津杯固定在平板上, 取 100 μl 提前活化好的乳酸菌的上清液加入到牛津杯中, 将平板放在 37 恒温培养箱中, 培养 2 h 测量抑菌圈的直径, 最终抑菌圈的大小可以反映菌株对生长抑制作用的强弱 [13-1] 抑菌效果按以下标准评定 : 无抑菌圈, 代表无抑制作用 (-); 抑菌圈直径 0~3 mm, 代表抑菌效果弱 (+); 抑菌圈直径 3~6 mm, 代表抑菌效果良好 (++); 抑菌圈直径 > 6 mm, 代表抑菌效果强 (+++) [10] 植物乳杆菌对生长过程的影响将筛选到的植物乳杆菌菌株按体积分数 3% 接种于 MRS 液体培养基中,37 培养 h 后 r/min 离心 15 min 得上清液, 分别测定不同植物乳杆菌培养上清液对生长的影响每株按体积分数 3% 的接种量接种于 5 ml BHI 液体培养基中, 分别添加 5 ml 植物乳杆菌培养上清液,37 培养 h, 每 h 取出一定量培养液, 在 600 nm 波长处测定其光密度 (OD) 值每组设置 3 个平行, 绘制的生长曲线以不添加植物乳杆菌上清液的的生长曲线为对照植物乳杆菌对的最小抑菌浓度的测定用紫外分光光度计将筛选出的抑菌效果较好的植物乳杆菌菌株的上清液, 调整到 CFU/mL, 分别稀释至菌液浓度

3 CFU /ml 分别对做抑菌实验方法见1.3.1节牛津杯法最小抑菌浓度以有抑菌圈的最小浓度为准 1.3. 植物乳杆菌对菌膜形成的抑制作用利用BHI液体培养基将活化好的的菌液浓度调整到 CFU/mL 将植物乳杆菌活化后 r/min 离心5 min 用滤膜 2 μm 过滤得到上清液取 100 μl菌液与100 μl上清液混合均匀加入到96 孔微量板中以只添加MRS液体培养基的孔为阴性对照 37 培养2 h后弃掉孔中培养液加入0 μl PBS 将每孔清洗3 次清洗时需不断强烈振动以除去未黏附的细菌弃掉PBS 每孔加入0 μl 95%甲醇固定15 min 弃掉甲醇后置于室温下自然干燥再在每孔加入0 μl 2% 的结晶紫革兰氏染色5 min 用去离子水冲洗去掉多余的染料室温条件下自然干燥每孔再加入0 μl 体积分数33%的冰醋酸重新将黏附在细菌上的染料溶解下来从每孔取5 μl可溶性染料转移到新的96 孔板中在630 nm波长处测定od值[15] 菌膜抑制率计算见公式 1 ODḋક 㦠㝰ᡥࠊ /% 1ˉ h100 ODᇍ 1.3.5, Vol.37, No.19 食品科学生物工程 1 植物乳杆菌对黏附性的影响参照文献[]中的方法进行细菌的黏附性实验将试管与水平面呈30 角放置并固定每组设3 个平行管每个试管分别加3 ml植物乳杆菌上清液和3 ml 119 氢酶使过氧化氢酶的最终质量浓度为 mg/ml 于2 恒温水浴2 h 后取出静置2 h后用牛津杯法测定过氧化氢酶对抑菌圈的大小对照组为不加过氧化氢酶的植物乳杆菌培养上清液蛋白酶对的影响在植物乳杆菌的培养上清液中加入一定量胃蛋白酶和胰蛋白酶使蛋白酶最终质量浓度为1 mg/ml 于 2 恒温水浴2 h后取出静置2 h后牛津杯法测定对变异链球菌的抑菌圈大小对照组为未经蛋白酶处理的植物乳杆菌培养上清液 1. 数据统计分析采用SPSS.0软件进行数据统计处理 Turkey检验方法用于比较各实验组与对照组之间差异的显著性 P 5表示差异不著性 P 5表示差异显著 2 结果与分析 2.1 对具有抑制作用的乳酸菌的筛选从实验室保藏的96 株乳酸菌中筛选到对具有一定抑制作用的7 株植物乳杆菌由表1可知不同的植物乳杆菌对株的抑菌活性不同其中菌株对株都有明显的抑菌活性且对这3 株的抑菌圈都达到了13.00 mm以上抑菌圈最大可达.30 mm 因此表明植物乳杆菌对的抑菌悬液 37 厌氧培养2 h 取出试管分别收集试管菌效果比较好另外株植物乳杆菌也具有较明显的抑菌效果抑菌圈最大也可达到.50 mm 植物乳杆菌QH25-1和QH35-3-2对变中紧密黏附松散黏附和非黏附于试管壁的细菌收集异链球菌抑制作用相对较弱方法参考周智等[17]的方法以只添加MRS培养基的孔为表1 对照将收集好的菌悬液分别加入96 孔微量板中每孔加0 μl 用PBS调零用酶标仪测定每孔630 nm波长处 Table 1 Streptococcus mutans 的吸光度按公式 2 计算细菌黏附率其中紧密黏附菌悬液的吸光度记为A紧非黏附和松散黏附菌悬液的吸光度记为A非+松㓶㧼哿䱴 /% A A ˇA䶎ˇᶮ h100 2 植物乳杆菌对抑菌机理的分析乳酸对的影响用乳酸溶液调MRS液体培养基直至与植物乳杆菌培养上清液相同的pH值 ph.0 釆用牛津杯法分别做植物乳杆菌培养上清液和乳酸培养液对的抑菌实验静置 2 h后测量抑菌圈直径实验组为用乳酸调节的上清液对照组为植物乳杆菌培养物上清液过氧化氢酶对的影响在植物乳杆菌培养上清液中分别加入适量过氧化 7 株植物乳杆菌对的抑菌效果 Inhibitory effect of seven L. plantarum strains on 菌株名称植物乳杆菌QH25-1 植物乳杆菌QH 植物乳杆菌植物乳杆菌植物乳杆菌植物乳杆菌植物乳杆菌注. 无抑制. 抑菌圈直径 7 10 mm 弱. 抑菌圈直径 mm 良. 抑菌圈直径 13 mm 强 2.2 植物乳杆菌对生长的影响植物乳杆菌对生长过程的影响如图1所示在培养过程中添加上述植物乳杆菌培养上清液可使株的生长受到不同程度的抑制其培养基OD值均低于对照组的OD 值由图1还可知添加上述植物乳杆菌培养上清液可

4 1, Vol.37, No.19 食品科学 0.7 B ሩ 植物乳杆菌对的最小抑菌浓度可以在某种程度上反映对植物乳杆菌的敏感性同时也反映植物乳杆菌对的抑菌效果抑菌浓度越低说明对植物乳杆菌越敏感植物乳杆菌的抑菌作用越强 [1-19] 由图2可知植物乳杆菌对 1.299的最小抑菌浓度为 CFU/mL 对和103菌株的最小抑菌浓度为 CFU/mL 而植物乳杆菌和对株的最小抑菌浓度相对较高在 CFU/mL之间 5 株植物乳杆菌对1.299和1.2500的最小抑菌浓度为 CFU/mL和 CFU/mL 低于对其他2 株的最小抑菌浓度表明此2 株对本实验的植物乳杆菌的抑制作用更敏感 ษ 䰤/h 2 2 ᇍ ݏ ᯊ䯈/h 2 2 ᇍ 图2 Fig ݏ ᯊ䯈/h 2 2 ሩ 0.6 D 0. 2 Ἵ ңᵶ㧼㕆ਧ 植物乳杆菌对的最小抑菌浓度图3 Fig. 3 বᓖ䫒㦠99 বᓖ䫒㦠 বᓖ䫒㦠 বᓖ䫒㦠103 ỡ чᴚ㦠㓪植物乳杆菌对菌膜形成的影响 Effect of Lactobacillus plantarum on the bioﬁlm formation of Streptococcus mutans 由图3可知 5 株植物乳杆菌对株的菌膜形成具有不同程度的抑制作用但都对 1.299具有最高的抑制率达到60%以上其次是变异 ษ 䰤/h 2 2 植物乳杆菌对变异链球菌1.299 A B C 103 D 生长的影响 Fig. 1 6 植物乳杆菌对菌膜形成的抑制作用图1 against Streptococcus mutans ਈᔲ䬮㧼 ਈᔲ䬮㧼103 Minimum inhibitory concentration of Lactobacillus plantarum 0. ਈᔲ䬮㧼99 ਈᔲ䬮㧼 C 植物乳杆菌对的最小抑菌浓度 ᴰሿᣁ㧼 ᓖ lg CFU/mL 0.7 A 㦠㝰ᡥࠊ /% 不同程度地延缓进入对数生长期从而使变异链球菌的增殖速率减慢不同的植物乳杆菌菌株对同一株生长的影响不同同一株植物乳杆菌对不同的菌株生长的影响也不同同时添加植物乳杆菌培养上清液使株的生长曲线均处于最低水平说明植物乳杆菌对的抑制活性最强与上述基于牛津杯固体培养基抑菌实验的结果一致生物工程 Effect of Lactobacillus plantarum,,, 链球菌抑制率略高于0% 说明这2 株变异链球菌对植物乳杆菌比较敏感对于1.3771和 103 植物乳杆菌对1.3771的抑制活性, on the growth of Streptococcus mutans (A), 较明显抑制率为51.1% 而其他株植物乳杆菌对菌 (B), (C) and 103 (D) 株1.3771和103菌膜形成的抑制率较低此外植物乳

5 杆菌对1.2500和103的菌膜形成抑制率表2 的抗性继而可能诱导感染疾病[15] 因此本研究筛选 5 株植物乳杆菌对株在光滑面上的黏附的植物乳杆菌培养上清液之后其黏附率不同而同一株植物乳杆菌对不同的的黏附率的影响也不同但对于株在添加了所有的植物乳杆菌培养上清液之后都比未添加时的黏附率低说明5 株植物乳杆菌都降低了株的在光滑面上的黏附率对于1.299 对照组的黏附率为7.6% 在添加植物乳杆菌培养上清液后其黏附率下降为 2.6% 比其他株植物乳杆菌对其抑制率要低说明菌株对1.299黏附的抑制效果最好同样对于其他3 株在添加了菌株之后其黏附率也低于其他株植物乳杆菌的黏附率分别为 15.6%.36%和7.02% 所以植物乳杆菌对株变异链球菌黏附的抑制作用都强于其他株植物乳杆菌据报道口腔必须首先附着于人体牙齿表面才能造成对人体牙齿的危害导致龋病的发生 [] 因此本实验筛选获得的植物乳杆菌尤其是菌株对于降低在牙齿表明的黏附防止龋病具有潜在的应用价值 60 Ἵ ңᵶ㧼 Ἵ ңᵶ㧼 Ἵ ңᵶ㧼哿䱴 /% 50 Ἵ ңᵶ㧼 Ἵ ңᵶ㧼 ሩ 㓴处理方式 S. mutans 对照组实验组对照组 15.2± ± ± ± ± ±0. 1.±0.7.15± 11.69± ± ±1.06.2±0.73 注表中数据为抑菌圈直径 /mm 过氧化氢酶对的影响比较添加和不添加对照组过氧化氢酶的植物乳杆菌培养上清液对1.299和的抑制作用表2 可知对照组的抑菌圈直径分别为 15.50±0.93 mm和 1.76±1.06 mm 而实验组的抑菌圈直径分别为.65±0.7 mm和.15± mm 对照组与实验组的抑菌圈大小有显著性差异 P 5 因此可以推测过氧化氢对菌株的抑菌作用起到了重要的贡献蛋白酶对的影响比较添加和不添加对照组蛋白酶的植物乳杆菌培养上清液对2 株的抑菌作用表2 结果表明对照组与实验组抑菌圈直径无显著差异 P 5 可以推测菌株没有产生对变异链球菌具有明显抑制作用的蛋白质类细菌素 3 讨论近年来有关益生菌对人体健康的有益作用及在疾病预防方面的研究应用越来越多[21] 有研究者发现人体口腔中的益生菌可以抑制口腔致病菌的黏附和定殖对于保持口腔微生态的平衡及龋齿等口腔疾病的预防具 30 有重要作用 [22-2] 目前报道的益生菌主要包括乳杆菌和 0 图 2.6 乳酸处理过氧化氢酶处理蛋白酶处理 S. mutans 实验组 0 双歧杆菌两大类[9] 本研究筛选到7 株对的生 10 Fig. Effect of different treatments for medium and culture supernatant of L. plantarum on its inhibition against Streptococcus mutans 降低口腔龋齿病的发生几率具有潜在的应用价值性的影响如图所示对于同一株加入不同植物乳杆菌培养上清液或培养基的不同处理方式对变异 Table 2 的5 株植物乳杆菌对于通过抑制的菌膜形成植物乳杆菌对黏附性的影响 1 链球菌的抑制作用也略高于其他株菌菌膜的形成能提高致病菌对抗生素 2.5, Vol.37, No.19 食品科学生物工程长黏附和菌膜形成具有明显抑制作用的植物乳杆菌 ਈᔲ䬮㧼㕆ਧ 103 植物乳杆菌对黏附性的影响 Effect of L. plantarum on the adhesion ability of Streptococcus mutans 植物乳杆菌对抑菌机理的分析以对具有明显抑制活性的植物乳杆菌尤其是菌株曾被报道具有良好的益生特性[25] 其在口腔疾病预防方面具有潜在的应用价值具有较强的耐酸能力通常乳酸菌对变异链球菌的抑制作用弱于对其他常见口腔致病菌的抑制表现为前者具有更小的抑菌圈[11,26] 由于具有较强的菌体聚集能力因此在采用牛津杯法进行抑菌实验为例对其作用机理进行分析乳酸对的影响时应将均匀涂布于固体培养基上以便获得由表2可知菌株培养上清液对 1.299和1.2500的抑制作用略高于对照组样品但二者差作用与其在生长繁殖过程中产生的各种初级和次级代谢产异不显著 P 5 因此植物乳杆菌的抑菌作究的抑菌实验表明植物乳杆菌的抑菌作用主要归因用与其产生的乳酸有关同时还存在其他的抑菌因素于其代谢过程中产生的乳酸和过氧化氢边缘清晰的抑菌圈据报道乳酸菌对的抑制物如乳酸过氧化氢和一些细菌素等密切相关[27] 本研

6 2, Vol.37, No.19 食品科学生物工程作为龋齿的主要病原细菌, 它能使糖转变为复杂的多糖类, 产生黏稠性多糖物质附着于牙齿表面从而形成牙斑, 并有利于黏附定殖到牙面上发挥其致病作用 [2] 本研究的黏附实验结果说明, 植物乳杆菌能有效地降低等致病菌的黏附率, 可以阻断黏附到牙齿表面的过程, 进而减少牙斑的生成黏附于口腔牙面之后会产生菌膜, 生成的菌膜又进一步促进其在牙面上的黏附, 菌膜还起到保护菌体不被酸碱抗生素等杀死的作用本研究的菌膜抑制实验结果表明, 植物乳杆菌和都可以抑制菌膜的形成, 从而减少在牙齿上的定殖黏附, 使更容易被口腔或者人体中的抑菌和杀菌物质抑制或直接将其杀死, 减少龋病的发生, 保护口腔健康参考文献 : [1] DEWITTE S N, BEKVALAC J. Oral health and frailty in the medieval English cemetery of St Mary Graces[J]. American Journal of Physical Anthropology, 10, 12(3): DOI:1002/ajpa.22. [2] BANAS J A. Virulence properties of Streptococcus mutans[j]. Frontiers in Bioscience, 0, 9: DOI:171/1305. [3] SELA M N, STEINBERG D, SEGAL R. Inhibition of the activity of glucosyltransferase from Streptococcus mutans by glycyrrhizin[j]. Oral Microbiology and Immunology, 197, 2(3): 5-. DOI:1111/ j x.197.tb00275.x. [] 杨隆强, 周乔, 刘敏川. 黏附机制的研究进展 [J]. 国际口腔医学杂志, 11, 3(2): DOI:1969/ j.issn [5] 马旭东, 杨景云. 口腔微生态失衡导致口腔异味的研究 [J]. 中国微生态学杂志, 0, (5): 0-2. DOI:1969/j.issn X.5.0. [6] TAHMOURESPOUR A. Probiotics and the reduction of dental caries risk[m]//li Mingyu. Contemporary Approach to Dental Caries. Rijeka: InTech, : [7] VRESE M D, SCHREZENMEIR J. Probiotics, prebiotics and synbiotics[j]. Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology, 0, 111: DOI:1007/10_0_097. [] MEURMAN J H. Probiotics: do they have a role in oral medicine and dentistry?[j]. European Journal of Oral Sciences, 05, 113(3): DOI:1111/j x. [9] 王胜朝, 许浩坤. 口腔益生菌防龋作用与应用 [J]. 中国实用口腔科杂志,, 5(10): [10] ÇAGLAR E, CILDIR S K, ERGENELI S, et al. Salivary mutans streptococci and lactobacilli levels after ingestion of the probiotic bacterium Lactobacillus reuteri ATCC by straws or tablets[j]. Acta Odontologica Scandinavica, 06, 6(5): DOI:100/ [11] KÕLL-KLAIS P, MÄNDAR R, LEIBUR E, et al. Oral lactobacilli in chronic periodontitis and periodontal health: species composition and antimicrobial activity[j]. Oral Microbiology and Immunology, 05, (6): DOI:1111/j X x. [] BOSCH M, NART J, AUDIVERT S, et al. Isolation and characterization of probiotic strains for improving oral health[j]. Archives of Oral Biology,, 57(5): DOI:10/ j.archoralbio [13] KOO O K, EGGLETON M, O BRYAN C A, et al. Antimicrobial activity of lactic acid bacteria against Listeria monocytogenes on frankfurters formulated with and without lactate/diacetate[j]. Meat Science,, 92(): DOI:10/j.meatsci [1] TAGG J R, MCGIVEN A R. Assay system for bacteriocins[j]. Applied Microbiology, 1971, 21(5): 93. [15] LI Wei, JI Juan, RUI Xin, et al. Production of exopolysaccharides by Lactobacillus helveticus MB2-1 and its functional characteristics in vitro[j]. LWT-Food Science and Technology, 1, 59(2): DOI:10/j.lwt [] 黄萍, 万呼春, 田婷玉, 等. 甘草水煎剂对黏附影响的体外实验 [J]. 国际口腔医学杂志, 13, 0(3): DOI:10.751/ gjkq [17] 周智, 陈惠珍, 范旭, 等. 壳寡聚糖对变形链球菌黏附的影响 [J]. 牙体牙髓牙周病学杂志, 05, 15(7): DOI:1969/ j.issn [1] 邓霜, 姜新宇, 周日宝, 等. 炎宁胶囊的体外抑菌试验研究 [J]. 湖南中医杂志, 15, 31(): [19] 李耘, 吕媛, 刘健, 等. 头孢卡品体外抗菌作用研究 [J]. 中国抗生素杂志, 13, 3(2): DOI:1969/j.issn [] 王露霏, 陆峻君. 益生菌产品种类及其对口腔生态的影响 [J]. 中国微生态学杂志, 10, 22(3): DOI:1331/j.cnki. cjm [21] 刘虹, 翦祎, 张化朋, 等. 口腔益生菌在口腔疾病防治上的研究及应用 [J]. 药学研究, 15, 3(6): DOI:13506/j.cnki. jpr [22] MADHWANI T, MCBAIN A J. Bacteriological effects of a Lactobacillus reuteri probiotic on in vitro oral biofilms[j]. Archives of Oral Biology, 11, 56(11): DOI:10/ j.archoralbio [23] SHIMAZAKI Y, SHIROTA T, UCHIDA K, et al. Intake of dairy products and periodontal disease: the Hisayama study[j]. Journal of Periodontology, 0, 79(1): DOI:1902/jop.702. [2] 王丹, 马国武. 乳杆菌代谢产物对于固定矫治患者牙周指数和龈下菌群的敏感性研究 [J]. 中国微生态学杂志, 0, (2): 6-. DOI:1969/j.issn X [25] 李常营. 植物乳杆菌的益生特性及在干酪中的应用研究 [D]. 长春 : 长春工业大学, 11: 5-9. [26] 彭悦, 孟祥晨, 朱德全, 等. 对口腔具有抑制作用的乳杆菌的筛选 [J]. 食品科技, 1, 39(7): DOI:136/j.cnki. spkj [27] VUOTTO C, LONGO F, DONELLI G. Probiotics to counteract biofilm-associated infections: promising and conflicting data[j]. International Journal of Oral Science, 1, 6(): DOI:103/ijos [2] 姚军, 张佳丽. 赤藓糖醇对作用机制的实验研究 [J]. 华西口腔医学杂志,, 30(1): DOI:1969/ j.issn

Microsoft Word tb 苏本宪sy.doc

Microsoft Word tb 苏本宪sy.doc 微生物学通报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn 研究报告 Jan. 20, 2015, 42(1): 117 124 2015 by Institute of Microbiology, CAS DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130890 乳杆菌代谢产物对化脓性链球菌的抑制作用 * 苏本宪艾静朱德全孟祥晨 ( 150030) 摘要