KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 94 頁 / 共 112 頁 15 微生物檢驗聯絡電話 :2303 15.1. 前言 : 本室分為細菌學檢驗, 黴菌學檢驗, 耐酸性桿菌染色檢驗等三大項目 15.2. 送檢時間 15.2.1 常規收件時間 : 星期一至星期六 8:00AM 至 5:30PM; 星期 8:00AM 至 04:00PM 15.2.2 非常規收件時間之檢體請交給值班人員處理 15.3. 操作時間及檢體保存 : 15.3.1 操作時間 : (1) 星期一 ~ 星期日 15.3.2 檢體保存 : 若無法馬上送達檢驗科請依下列方式適當處理及保存 (1) Urine,Sputum, 乙型鏈球菌 : 室溫運送 ; 冷藏保存 (2) CSF 淋病雙球菌: 立即接種 ; 若無法立即接種, 需放置 35 培養箱 (3) 血液培養檢體 : 室溫, 最遲 48 小時內需進行上機 (4) 其他檢體 : 室溫 15.4. 報告發出時間 : 15.4.1 血液培養陽性者, 會馬上通知該病患照護護士及醫師, 並於通知後發血液培養初步報告, 通知後三天發正式報告 15.4.2 腦脊髓液培養為陽性, 會馬上通知該病患照護護士及醫師, 並於通知後發初步報告, 通知後三天發正式報告 15.4.3 特殊細菌或可能致命的細菌, 會馬上通知該病患照護護士及醫師, 並於通知後發初步報告, 通知後三天發正式報告 15.4.4 一般嗜氧培養 : 為收件後 5 天內發報告 15.4.5 厭氧培養, 陰性者培養後 5 天發報告, 陽性則為 5~7 天內發報告 15.4.6 革蘭氏染色結果 : 於收件後 2 天內發報告 ; 抗酸菌染色結果 : 於收件後 24 小時內發報告 15.4.7 抗酸菌培養 : 培養陰性者於收件後 63 天內發報告, 陽性者發現確定會先發陽性初步報告, 菌種確認後則發菌種報告, 通知該病患之照護護士 主治醫生及感控小組, 並於 4-5 週後補發抗生素報告 ( 此項檢查外送 ) 15.5. 送檢注意事項 : 15.5.1 檢體採檢後應盡速送達細菌室培養, 以利菌種生長 15.5.2 請於檢驗單上註名醫師姓名 部位 及是否使用抗生素, 盡可能在使用抗生素或化學藥劑治療前採集檢體 15.5.3 請選擇適當的病灶部位及適合於檢查目的採集和病源菌最多的檢體 : 15.5.4 必須注意溫度, 有些檢體不能放在冰箱 15.5.5 所有檢體需標上病人姓名, 床號, 病歷號碼, 收集日期及檢體名稱 15.5.6 若對於採檢方式 輸送方式有疑問, 請電洽 2303 詢問 15.5.7 當已完成受理檢驗之檢體不接受增加或變更檢驗項目申請
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 95 頁 / 共 112 頁 15.6. 檢體種類. 採集方法和攜送須知 : 15.6.1 血液檢體 : (1) 收集血液作培養時, 因有許多微生物包括 Staphylococcus epidermidis, Bacillus spp. Propionibacterium acnes, Diphtheroid 等污染菌, 應該盡量避免污染檢體 ( 當然這些細菌有時亦為真正的病源 ) 故收集檢體時請在病人, 血瓶及採集人員之手指進行消毒動作以避免污染 (2) 抽血時刻必須在病人體溫上升收集血液二 ~ 三次, 採集血液次數需間隔 30 分 ( 僅抽血一次的分離率為 80%, 二次為 90%, 三次為 99% ) (3) 收集血液檢體, 可如下法作靜脈穿刺 : 1) 欲作靜脈穿刺前將穿刺靜脈上皮膚 抽血者的手指及血瓶上方, 以 75% 酒精,2% 碘酒,75% 酒精三道手續加以消毒 2) 大人一次抽取 10ml 血液, 先打 5ml 入厭氧瓶, 其餘 5ml 再打入需氧瓶 3) 嬰兒或小孩, 則只抽取 1~3ml 血液注入嬰兒用之需氧瓶 (4) 收集血液檢體之注意事項 : 1) 每一病人抽血次數以三次為原則 2) 每一血瓶需記載抽血的時間, 病人之標籤不可貼於血瓶條碼上 3) 若血瓶不能立刻送至檢驗科, 應置於室溫, 絕不可置於冰箱 15.6.2 尿液檢體 : 檢體收集後, 若不能馬上送檢, 應將檢體置於 (4~8 ) 冰箱內保存, 最好不超過四小時 (1) 採檢方法 1) 通常採用潔淨排泄法 (clean-voided) 先用水和中性肥皂清潔陰部, 特別是會陰部應前後擦拭乾淨 ( 男性則清潔陰莖前端, 特別是包皮附近 ) 2) 先排棄前段尿液 3) 以 50ml 無菌塑膠容器收集, 小心接取中段尿液.( 導尿及穿刺尿請註明 ) 4) 收集尿液過程中, 請勿將手伸入容器內或讓尿液滿出容器, 以免污染 15.6.3 生殖道檢體 : (1) 生殖道檢體係以無菌棉花拭子收集 : 1) 發育期或成年婦女之抹片, 應由尿道口, 子宮頸或直腸 ( 如懷疑此部份有淋病雙球菌時為之 ) 之檢體去製作 2) 若懷疑年幼女童有淋病性女陰道炎 (Gonocccal vulve-vaginitis) 時, 則檢體由陰道外圍部分取得 3) 男性懷疑有慢性淋病, 檢體可由醫師採自前列腺或精囊 15.6.4 腦脊髓液檢體 : (1) 檢體收集與輸送 : 1) 在病患用藥前, 由醫師以最嚴格之無菌操作技術作腰椎穿刺所收集的腦脊髓液分置三根無菌試管, 然後馬上將第二根送至細菌室 2) 腦脊髓液檢體之注意事項 : 檢體採集後立刻送至細菌室檢查
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 96 頁 / 共 112 頁 不可將 C.S.F. 放於 4-8 冷藏 15.6.5 糞便檢體與直腸拭子檢體 : (1) 糞便檢體 : 由病人排出後, 取含有黏液, 膿, 血液或組織碎片的部分, 直接以紅頭傳送管之棉棒旋轉沾取檢體, 立刻送至細菌室 (2) 直腸檢體 : 需以肥皂, 清水和 75% 酒精, 將肛門周圍洗淨, 然後用一根 Transtube 之無菌棉花拭子, 插入肛門約 5cm 處, 輕輕旋轉, 以便使之與直腸黏膜之表層接觸, 然後取出置於攜送培養基內, 並立刻送至細菌室 (3) 糞便檢體與直腸拭子檢體之注意事項 : 1) 若是懷疑病源菌 Salmonella spp. Shigella spp. N. gonorrhoeea. Vibrio spp. 請於檢驗單上特別註明, 以便提高此菌的分離率 2) 糞便與直腸拭子作微生物檢查時, 要特別注意攜送與接種的迅速性, 如有拖延, 可能會有一些非病源性的腸內細菌, 生長速度超過病源菌, 而使得病源菌之分離發生困難 15.6.6 鼻腔及咽喉檢體 : (1) 鼻腔檢體 : 可用一支無菌棉花拭子直接插入鼻腔採集 (2) 咽喉檢體 : 須在光線充足下, 以傳送管之無菌棉花拭子採集後置於內, 以防檢體乾燥 (3) 注意事項 : 咽喉檢體採集應盡量避免接觸舌頭及唾液 15.6.7 痰檢體 : 所採取的痰檢體, 必須真正能代表肺部之分泌物者, 通常清晨痰最多, 且最可能含病原菌 (1) 採集遵守步驟如下 : 1) 早晨以冷開水或牙刷清潔口腔及牙齒 2) 從呼吸深部咳出痰 ( 不可含有唾液 ), 痰收集量需 2-5ml, 裝於 40ml 無菌塑膠容器 3) 欲收集小孩痰檢體時, 可於清晨未進任何食物或水以前進行抽取胃容物, 並添加 0.1gm Sodium carbonate 於容器內, 送至細菌室 4) 注意事項 : 應嚴格遵守取清晨第一口痰, 並清潔口腔及牙齒 應注意痰液不可污染塑膠容器外圍., 尤其當懷疑是肺結核分枝桿菌時, 以避免在運送過程中造成工作人員之感染機率
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 97 頁 / 共 112 頁 痰檢體允收標準如下 (Sputum culture 若檢體不良時, 不執行退件, 但須於報告 備註 建議重送 ): 白血球 麟狀表皮細胞 判斷或處理 >25 <10 適當 >25 10-25 可接受 >25 >25 可接受 10-25 <10 可接受 10-25 10-25 可接受 10-25 >25 可接受 <10 <10 建議重送 <10 10-25 建議重送 <10 >25 建議重送 15.6.8 結膜檢體 : 以傳送管之無菌棉花拭子採集 採集時, 須小心的避免感染蔓延至眼部 鄰近區域, 採取後再置於攜送培養基內, 以防檢體乾燥 (1) 注意事項 : 檢體須標明左眼或右眼之檢體 15.6.9 膿或傷口檢體 : (1) 膿瘍 (abscess) 與癤 (boil) 中的膿, 可由排液法取得, 最好以針筒直接抽取 (2) 傷口若須以拭子採集, 則盡可能取深層部位之檢體, 應避免受到表層微生物污染 (3) 注意事項 : 1) 採檢前應特別注意採集部位之消毒步驟後, 再採檢 2) 無菌塑膠容器 40ml 可供作運送組織檢體 15.6.10 體液檢體 : (1) 包括胸膜液 (pleural) 腹膜液 (peritoneal) 心包液 (pericardial) 或滑液 (synovial) 通常此 類檢體由醫師以無菌技術採集 (2) 注意事項 : 1) 採取體液檢體應以 Heparin 作為抗凝劑, 以避免檢體因凝固而增加病原菌分離的困 難度 2) 厭氧培養要儘速送至細菌室接種, 避免厭氧菌死亡 15.6.11 作黴菌培養之皮膚和毛髮檢體 : (1) 皮膚檢體之收集 : 先以 75% 酒精消毒患處, 然後用無菌刀片或載玻片邊緣刮取, 並 置於 40ml 無菌塑膠容器內 (2) 指甲檢體之收集 : 同上述方法, 惟須刮取較深部之新受感染之指甲組織 (3) 毛髮或頭皮屑檢體之收集 : 一般可用紫外線燈 (Wood's lamp) 照射患部, 受感染部位 常有螢光出現, 然後以無菌夾子, 拔除毛髮或頭皮屑, 置於無菌塑膠容器
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 98 頁 / 共 112 頁 15.7. 結核分枝桿菌培養檢體的收集 : 檢體來源 Sputum Urine Tissue Gastric lavage Other type 收集方式 清晨第一口痰, 連續 3-5 次, 檢體量為 2-5ml, 盡量深咳 取早晨中段尿 任何組織檢體均需無菌採集, 並置於生理鹽水立刻送檢, 若需延 後送到, 則將檢體先予冷藏 標本收到後, 四小時內進行處理, 若運送 須時較久可添加緩衝液或 10%Sodium bicarbonate Blood,Pleural fluid,pericardial fluid,ascites, Joint fluid,bronchial washing,laryngeal swab,pus 等, 以上檢體若有需要, 可添加無 菌抗凝劑如 Heparin,Ammonium oxalate 15.8. 細菌室對微生物檢驗退件標準 拒絕標準 處理方式 下列請求厭氧培養時 : 痰. 環境標本. 皮膚. 中段尿液. 胃洗液. 口腔. 導尿液. 支氣管洗液. 迴刪去厭氧培養之請求, 除非微生物負責人認可, 始腸手術標本. 陰道分泌物. 褥瘡潰瘍. 轡腸手術行厭氧培養, 並向醫生說明理由標本. 攝護腺分泌物. 咽喉. 膿漏. 糞便. 鼻 檢體誤置固定液 ( 如福馬林 ) 尿液 : 置室溫超過兩小時 ; 容器不當 ; 容器裂痕 痰液檢體內有菜渣或為口水檢體 (AFS/Acid-Fast culture); 嚴重外漏 AFS/Acid-Fast culture: 痰液檢體少於 2 ml 退回送檢單位, 註明檢體不當, 請重送檢體 退回送檢單位, 註明檢體不當, 請重送檢體 退回送檢單位, 並註明檢體不當, 請重送檢體 退回送檢單位, 並註明檢體不足, 請重送檢體 15.8.1Sputum culture 若檢體不良時, 不執行退件, 但須於報告備註 建議重送
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 99 頁 / 共 112 頁 15.9. 危險值通報 ( 細菌組 ) 15.9.1 測試結果在下列範圍時請主動通知醫師或護理站相關人員, 若與病情不符時可重送 Recheck 15.9.2 Acid-Fast Stain 檢驗項目需於收件後 24 小時內完成檢驗 ; 若 Acid-Fast Stain 為 Positive, 需於 24 小時內完成通報作業 15.10. 微生物報告判讀標準 15.10.1. 菌量判讀標準 : (a) 生長於培養皿之第一區則為 Light (b) 生長於培養皿之第二區則為 Moderate (c) 生長於培養皿之第三區則為 Heavy (d) 從 SBG broth (Thioglycollate) 次培養於培養基則為 Enriched 15.10.2 Gram stain 判讀標準 : 價數 15.10.3 Acid fast stain 鏡檢與價數判讀的意義 : 抹片鏡檢 ( 油鏡 ) 報告結果 1-2/300F Positive (+/-) 細菌 ( 黴菌 )/ per oil immersion field 1+ <1/OIF 2+ 1-5/OIF 3+ 6-30/OIF 4+ >30/OIF 1-9/100F 1-9/10F 1-9/F >9/F Positive(1+) Positive(2+) Positive(3+) Positive(4+)
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 100 頁 / 共 112 頁 15.11 微生物檢體送檢須知 15.11.1 微生物檢體送檢須知 1 檢查項目 ACID FAST STAIN 簡碼 AFS 健保碼 ( 院內碼 ) 13206Z 抗酸菌培養 AF 13026Z Aerobic culture 13007Z Anaerobic culture Blood culture (BABY) Body fluid culture Blood culture ( 需氧 ) Blood culture( 厭氧 ) Clostridium difficile toxin 13008Z BABY 13807Z 13016Z 13406Z 13007Z 13008Z 檢體 ( 量 ) 各種疑似檢體 Sputum 體液疑似檢體 各種疑似檢體 各種適合厭氧培養疑似檢體 13007 Y Blood 1-3ml 13807Z 13016Z 13406Z 12182I 12182I CSF culture 13807Y 13003Z 各種體液 (CSF 除外 ) Blood 3-5 ml Blood 3-5 ml 液態至半固態糞便 1 ml CSF 第二管 試管 ( 容器 ) 送檢 地點 操作類別 報告時間 痰盒 24 小時 痰盒 Swab 無菌管 請參照檢體說明 Swab 或厭氧血瓶 粉紅色 Blood bottle 無菌離心管 藍色 Blood bottle 紫色 Blood bottle 63 天 ( 外送芮弗士檢驗所 ) 七天 備 註 Positive(±);1-2/ 300 F Positive(1+);1-9/100 F Positive(2+):1-9/10 F Positive(3+);1-9/F Positive(4+);>9/F 陽性會自動加做抗藥性 試驗 ( 抗酸菌鑑定 : 抗酸 菌培養陽性後 2~3 週 ; 抗酸菌藥敏試驗 : 抗酸 菌鑑定為 M.tberculosis complex 後 4~5 週 ) 適合厭氧培養檢體請參照採檢說明 七天 3 天發初步報告 七天 七天 糞便採集盒 四天 無菌離心管 CVP culture 13907X 13907X CVP 痰盒 Discharge culture 13907Y 13907Y Discharge Fungus culture 13007F 13007F Gram`s stain GRAM 13106Z 各種疑似 檢體 各種疑似 檢體 痰盒或 Swab 請參照檢體 說明 請參照檢體 說明 二週 48 小時 僅鑑定 Candid species, 其餘外送 1+:<1 隻細菌 / 油鏡 2+:1-5 隻細菌 / 油鏡 3+:6-30 隻細菌 / 油鏡 4+:>30 隻細菌 / 油鏡
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 101 頁 / 共 112 頁 Anus culture 13907A 13907A Anus Swab Strep Group B ( 乙型鏈球菌檢測 - 孕婦 ) KE0087 KE0087 陰道分泌物 Swab 檢體接種前, 需採檢後室溫立即運送,4 度 C 保存 Yeast culture 13007B 13007B 各種疑似檢體 genotype - - Sputum 體液疑似檢體 請參照檢體 二週說明痰盒 ( 外送 CDC) 無菌盒二週
KGH- MR -SOP-A-02 第 12 版第 102 頁 / 共 112 頁 15.11.2 微生物檢體送檢須知 2 India ink stain 13306Z 13306Z 各種疑似 檢體 請參照檢體 說明 24 小時 Sputum culture 13507Z 13507Z Sputum 痰盒 會註明 WBC/EP 數量 Stool culture 13407Z 13407Z Stool Swab TB PCR 12182Z 12182Z Sputum or 體液 火箭管或痰盒 3-5 天 ( 外送芮弗士檢驗所 ) Throat culture 13307Z 13307Z Throat Swab 應於 Acid-fast stain 結果為陽性, 兩天內開立檢驗單 Tip culture 13907Z 13907Z Tip 痰盒 註明部位或種類 Urine culture 13207Z 13207Z Urine Urine culture-pcn Urine culture catheter Urine culturepuncture 13207X 13207X Urine 13207Y 13207Y Urine 13207E 13207E Urine 無菌離心管無菌離心管無菌離心管無菌離心管 Vagina culture 13107Z 13107Z 分泌物 Swab Vancomycin MIC Wound pus culture 細菌藥物敏感性試驗 -1 隻菌 細菌藥物敏感性試驗 -2 隻菌 細菌藥物敏感性試驗 -3 隻菌 VAMIC KE0114 VAMIC 無菌部位無菌容器 三天 13607Z 13607Z Wound pus Swab 13009Z 13009Z - - - - 13010Z 13010Z - - - - 13011Z 13011Z - - - - 注意不同採檢方式批價碼代號即不同 2μg/mL:Susceptible 4-8μg/mL:Intermediate 16μg/mL:Resistant