583 [ 文 章 编 号 ] 摇 1007 鄄 3949(2012)20 鄄 07 鄄 0583 鄄 05 实 验 研 究 甘 氨 酸 对 高 果 糖 饮 食 诱 发 高 血 压 大 鼠 血 管 内 皮 功 能 的 影 响 吴 惠 文 1,2, 韩 德 五 1, 许 瑞 龄 1, 周 鑫 1 1, 赵 元 昌 (1. 山 西 医 科 大 学 肝 病 研 究 所 山 西 医 科 大 学 病 理 生 理 学 教 研 室, 山 西 省 太 原 市 030001; 2. 山 西 医 科 大 学 汾 阳 学 院 科 技 中 心, 山 西 省 汾 阳 市 032200) [ 关 键 词 ] 摇 甘 氨 酸 ; 摇 高 血 压 ; 摇 内 皮 功 能 紊 乱 ; 摇 胰 岛 素 抵 抗 ; 摇 内 毒 素 血 症 [ 摘 摇 要 ] 摇 目 的 摇 探 讨 甘 氨 酸 对 高 果 糖 饮 食 诱 导 高 血 压 大 鼠 内 皮 功 能 的 影 响 及 降 压 机 制 方 法 摇 模 型 组 大 鼠 以 8% 果 糖 水 喂 养, 甘 氨 酸 + 果 糖 组 给 予 8% 果 糖 + 1% 甘 氨 酸 水 喂 养 每 月 测 量 大 鼠 体 重 和 收 缩 压, 分 别 于 4 月 8 月 处 死 动 物, 检 测 血 糖 血 浆 胰 岛 素 内 毒 素 肿 瘤 坏 死 因 子 琢 (TNF 鄄 琢 ) 白 细 胞 介 素 6(IL 鄄 6) 一 氧 化 氮 (NO) 及 内 皮 素 1(ET 鄄 1) 变 化, 计 算 胰 岛 素 抵 抗 指 数 (HOMA 鄄 IR) 免 疫 组 织 化 学 检 测 血 管 内 皮 型 一 氧 化 氮 合 酶 ( enos) 表 达, 实 时 荧 光 定 量 PCR 分 析 内 皮 素 A 受 体 (ETA 鄄 R) mrna 表 达 结 果 摇 模 型 组 大 鼠 3 月 ~ 6 月 体 重 明 显 增 加,3 月 后 收 缩 压 升 高,4 月 和 8 月 血 糖 血 浆 胰 岛 素 HOMA 鄄 IR 内 毒 素 TNF 鄄 琢 IL 鄄 6 ET 鄄 1 水 平 及 ETA 鄄 R mrna 表 达 均 升 高, 血 浆 NO 水 平 及 enos 表 达 下 降, 但 各 阶 段 之 间 上 述 指 标 无 明 显 差 异 甘 氨 酸 + 果 糖 组 4 月 和 6 月 体 重 收 缩 压 显 著 降 低,4 月 和 8 月 血 浆 胰 岛 素 HOMA 鄄 IR 内 毒 素 TNF 鄄 琢 IL 鄄 6 ET 鄄 1 水 平 及 ETA 鄄 R mrna 表 达 明 显 降 低,4 月 血 浆 NO 水 平 及 enos 表 达 显 著 提 高 结 论 摇 甘 氨 酸 对 高 果 糖 饮 食 诱 导 的 早 期 高 血 压 具 有 明 显 降 低 作 用, 其 机 制 与 甘 氨 酸 减 轻 内 毒 素 血 症 改 善 胰 岛 素 抵 抗 及 内 皮 功 能 紊 乱 有 关 [ 中 图 分 类 号 ] 摇 R363 [ 文 献 标 识 码 ] 摇 A Effects of Glycine on Vascular Endothelial Function in Rats with A High 鄄 fructose Di 鄄 et Induced Hypertension WU Hui 鄄 Wen 1, 2, HAN De 鄄 Wu 1, XU Rui 鄄 Ling 1, ZHOU Xing 1, and ZHAO Yuan 鄄 Chang 1 (1. Institute of Hepatology and Department of Pathophysiology, Shanxi Medical University, Taiyuan, Shanxi 030001, Chi 鄄 na; 2. Science & Technology Center of Fenyang College, Shanxi Medical University, Fenyang, Shanxi 032200, China) [KEY WORDS] 摇 Glycine; 摇 Hypertension; 摇 Endothelial Dysfunction; 摇 Insulin Resistance; 摇 Endotoxemia [ABSTRACT] 摇 摇 Aim 摇 To investigate the effects of glycine on endothelial function in rats with a high 鄄 fructose diet in 鄄 duced hypertension and the mechanisms of glycine on lowering hypertension. 摇 摇 Methods 摇 Model group rats were fed with 8% fructose water, and glycine intervention group rats were fed with water containing 8% fructose and 1% glycine. 摇 The body weight and systolic blood pressure were measured monthly, and the animals were killed in 4 th month and 8 th month respectively. 摇 The levels of plasma glucose, insulin, endotoxin, TNF 鄄 琢, IL 鄄 6, NO and endothelin 鄄 1 (ET 鄄 1) were detected, and HOMA 鄄 IR was calculated. 摇 The expression of endothelial nitric oxide synthase (enos) was determined by immunohistochemistry, and the expression of endothelin A receptor (ETA 鄄 R) mrna was analyzed by RT 鄄 PCR. 摇 摇 Re 鄄 sults 摇 The body weight and systolic blood pressure were increased in model group after 3 months. 摇 The levels of plasma glucose, insulin, HOMA 鄄 IR, endotoxin, pro 鄄 inflammatory cytokines, ET 鄄 1 and the expression of ETA 鄄 R mrna were in 鄄 creased in model group, but the levels of plasma NO and the expression of enos were decreased in 4 th and 8 th month. 摇 However, there was no significance of the parameters at different stages. 摇 Glycine significantly reduced the weight gain at 4 th month and 6 th month, and reduced the elevated systolic blood pressure in 4 th month to 6 th month, and significantly decreased the levels of plasma insulin, HOMA 鄄 IR, endotoxin, pro 鄄 inflammatory cytokine, ET 鄄 1 and the expression of ETA 鄄 R mrna in 4 th and 8 th month, and significantly increased the levels of plasma NO and the expression of enos in 4 th month. 摇 摇 Conclusions 摇 Glycine can ameliorate early hypertension induced by a high 鄄 fructose diet, which may be related [ 收 稿 日 期 ] 摇 2011 鄄 10 鄄 09 [ 基 金 项 目 ] 摇 山 西 省 研 究 生 ( 博 士 ) 优 秀 创 新 项 目 (20103052) [ 作 者 简 介 ] 摇 吴 惠 文, 副 教 授, 博 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 内 毒 素 与 代 谢 性 疾 病,E 鄄 mail 为 wuhuiwen@ yeah 郾 net 通 讯 作 者 韩 德 五, 教 授, 博 士 研 究 生 导 师, 研 究 方 向 为 肝 脏 病 学,E 鄄 mail 为 sxmusci@ yeah 郾 net 许 瑞 龄, 教 授, 研 究 方 向 为 肝 脏 病 学
584 ISSN 1007 鄄 3949 Chin J Arterioscler,Vol 20,No 7,2012 to glycine lowering endotoxemia, insulin resistance and ameliorating the endothelial dysfunction. 摇 摇 血 管 内 皮 细 胞 通 过 释 放 多 种 生 物 活 性 物 质 在 维 持 正 常 心 血 管 功 能 活 动 中 起 着 重 要 作 用 近 年 来 研 究 表 明, 血 管 内 皮 功 能 紊 乱 启 动 了 高 果 糖 饮 食 诱 导 高 血 压 的 发 病 [1] 内 皮 功 能 紊 乱 主 要 表 现 为 内 皮 素 (ET) 及 其 受 体 和 一 氧 化 氮 (NO) 水 平 失 调 尽 管 高 果 糖 饮 食 引 起 内 皮 功 能 紊 乱 机 制 尚 未 完 明 了, 但 普 遍 认 为 胰 岛 素 抵 抗 ( IR) / 高 胰 岛 素 血 症 发 挥 着 重 要 作 用 [2] 内 毒 素 是 调 节 炎 症 级 联 反 应 最 重 要 的 因 素 研 究 认 为, 内 毒 素 血 症 可 启 动 高 脂 及 高 果 糖 饮 食 诱 导 IR / 高 胰 岛 素 血 症 的 形 成 [3,4] 我 室 长 期 致 力 于 研 究 内 毒 素 血 症 在 疾 病 损 伤 中 的 作 用, 并 发 现 甘 氨 酸 可 降 低 多 种 肝 损 伤 伴 有 的 内 毒 素 血 症 [5,6] 为 此, 本 研 究 探 讨 甘 氨 酸 在 高 果 糖 饮 食 诱 导 大 鼠 高 血 压 发 病 中 对 内 皮 功 能 的 影 响 1 摇 材 料 和 方 法 1 郾 1 摇 主 要 试 剂 摇 摇 果 糖 甘 氨 酸 购 自 郑 州 所 以 化 工 有 限 公 司 ; 胰 岛 素 肿 瘤 坏 死 因 子 琢 ( TNF 鄄 琢 ) 白 细 胞 介 素 6( IL 鄄 6) 内 皮 素 ELISA 试 剂 盒 购 自 R&D 公 司 ; 内 毒 素 试 剂 盒 购 自 厦 门 鲎 试 剂 实 验 厂 ;NO 试 剂 盒 购 自 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所 ; 内 皮 型 一 氧 化 氮 合 酶 (en0s) 抗 体 购 自 迈 新 生 物 公 司 ;Trizol 购 自 美 国 Invitrogen 公 司 ; 逆 转 录 试 剂 盒 购 自 美 国 Promega 公 司 ;SYBR Green Master 试 剂 盒 购 自 罗 氏 公 司 1 郾 2 摇 动 物 分 组 及 处 理 清 洁 级 雄 性 SD 大 鼠 48 只, 体 重 230 ~ 240 g, 购 自 山 西 医 科 大 学 动 物 中 心 大 鼠 随 机 分 为 4 组, 每 组 6 只 : 对 照 组 饮 用 自 来 水 ; 模 型 组 饮 用 含 8% 果 糖 的 自 来 水 [7] ; 甘 氨 酸 + 果 糖 组 饮 用 含 8% 果 糖 + 1% 甘 氨 酸 的 自 来 水 [7,8] ; 甘 氨 酸 组 饮 用 含 1% 甘 氨 酸 的 自 来 水 [8] 大 鼠 自 由 饮 水 进 食 ( 标 准 大 鼠 饲 料 ), 每 月 检 测 大 鼠 体 重 及 血 压 分 别 于 4 月 8 月 末 处 死 动 物,1% 戊 巴 比 妥 钠 腹 腔 麻 醉, 腹 主 动 脉 取 血 并 分 离 血 浆 ; 迅 速 分 离 长 约 4 cm 的 胸 主 动 脉, 部 分 置 于 10% 中 性 福 尔 马 林, 其 余 样 本 - 80 益 冷 冻 保 存 1 郾 3 摇 体 重 及 动 脉 收 缩 压 测 量 每 月 末 测 量 大 鼠 体 重, 并 计 算 每 月 大 鼠 体 重 增 长 采 用 BP 鄄 6 无 创 动 物 血 压 测 量 系 统 ( 泰 盟, 成 都 ) 于 上 午 检 测 大 鼠 尾 动 脉 收 缩 压, 测 量 3 次, 取 平 均 值 即 为 大 鼠 的 收 缩 压 1 郾 4 摇 血 浆 指 标 检 测 酶 法 检 测 血 糖 血 浆 NO;ELISA 检 测 血 浆 胰 岛 素 TNF 鄄 琢 IL 鄄 6 ET 鄄 1; 计 算 胰 岛 素 抵 抗 指 数 ( HO 鄄 MA 鄄 IR); 鲎 试 剂 显 色 法 检 测 血 浆 内 毒 素, 并 分 析 其 与 HOMA 鄄 IR 的 相 关 性 1 郾 5 摇 血 管 enos 和 内 皮 素 A 受 体 mrna 检 测 血 管 enos 检 测 采 用 免 疫 组 织 化 学 法, 常 规 组 织 处 理, 制 成 4 滋 m 石 蜡 切 片, 按 照 二 步 法 免 疫 组 织 化 学 程 序 进 行 enos 活 化 表 现 为 棕 色 颗 粒, 每 张 切 片 随 机 采 取 5 个 不 重 叠 视 野 在 200 倍 光 镜 下 观 测, 运 用 IPP6 郾 0 软 件 分 析 enos 免 疫 反 应 阳 性 产 物 平 均 光 密 度 值 ETA 鄄 R mrna 表 达 采 用 荧 光 定 量 RT 鄄 PCR 分 析, 取 50 mg 动 脉 组 织, 按 Trizol 试 剂 盒 说 明 书 提 取 总 RNA,Eppendorf 核 酸 蛋 白 测 定 仪 检 测 其 纯 度 和 浓 度 按 逆 转 录 试 剂 盒 说 明 书 合 成 cd 鄄 NA 茁 鄄 actin 上 游 引 物 5 忆 鄄 GAT CCA CAT TTG CTG GAA 鄄 3 忆, 下 游 引 物 5 忆 鄄 GAC TAC CTC ATG AAG ATC 鄄 3 忆,ETA 鄄 R 上 游 引 物 5 忆 鄄 AAC CTG GCA ACC ATG AAC TC 鄄 3 忆, 下 游 引 物 5 忆 鄄 GCA ACA GAG GCA TGA CTG AA 鄄 3 忆 取 PCR buffer SYBR Green Master 上 下 游 引 物 加 入 上 述 反 应 好 的 cdna, 然 后 放 置 在 BIO 鄄 RAD iq5 RT 鄄 PCR 仪 上 进 行 反 应 94 益 预 变 性 10 min, 活 化 Tag 酶 ;94 益 15 s,60 益 60 s,45 个 循 环 结 束 采 用 2 - 吟 吟 Ct 法 得 到 标 准 曲 线 溶 解 曲 线 和 样 本 的 相 对 定 量 每 个 样 本 内 参 基 因 茁 鄄 actin 以 相 同 条 件 扩 增 1 郾 6 摇 统 计 学 方 法 数 据 用 x 依 s 表 示 体 重 增 长 及 动 脉 收 缩 压 数 据 采 用 重 复 测 量 法 分 析, 血 浆 内 毒 素 水 平 与 HOMA 鄄 IR 相 关 性 采 用 Spearman 法 分 析, 其 他 数 据 采 用 单 因 素 方 差 分 析 (ANOVA) 2 摇 结 摇 果 2 郾 1 摇 体 重 增 长 及 收 缩 压 变 化 摇 摇 实 验 期 间, 所 有 大 鼠 状 况 良 好 模 型 组 大 鼠 体 重 增 长 在 3 月 ~ 6 月 明 显 高 于 对 照 组, 甘 氨 酸 + 果 糖 组 在 4 月 6 月 大 鼠 体 重 显 著 降 低 (P < 0 郾 05 或 P < 0 郾 01; 图 1A) 与 对 照 组 比 较, 模 型 组 收 缩 压 3 月 后 明 显 升 高, 甘 氨 酸 + 果 糖 组 在 4 月 ~ 6 月 收 缩 压 显 著 降 低 (P < 0 郾 05 或 P < 0 郾 01; 图 1B) 对 照 组 与 甘 氨 酸 组 收 缩 压 变 化 无 显 著 性 差 异
585 图 1. 甘 氨 酸 对 高 果 糖 饮 食 大 鼠 体 重 增 长 及 收 缩 压 的 影 响 摇 摇 A 为 体 重 增 长 变 化,B 为 收 缩 压 变 化 a 为 P < 0 郾 05,b 为 P < 0 郾 01, 与 对 照 组 比 较 ;c 为 P < 0 郾 05,d 为 P < 0 郾 01, 与 模 型 组 比 较 Figure 1 郾 Effects of glycine on monthly body weight gain and systolic blood pressure of each group 2 郾 2 摇 血 浆 指 标 变 化 与 对 照 组 比 较, 模 型 组 4 月 和 8 月 血 糖 胰 岛 素 TNF 鄄 琢 IL 鄄 6 ET 鄄 1 HOMA 鄄 IR 及 内 毒 素 水 平 显 著 升 高, 血 浆 NO 水 平 显 著 降 低 ( P < 0 郾 05 或 P < 0 郾 01), 但 各 阶 段 之 间 上 述 指 标 未 见 明 显 差 异 ( 表 1) 甘 氨 酸 + 果 糖 组 4 月 和 8 月 血 浆 胰 岛 素 TNF 鄄 琢 IL 鄄 6 ET 鄄 1 HOMA 鄄 IR 及 内 毒 素 水 平 显 著 降 低 ( P < 0 郾 05 或 P < 0 郾 01), 但 血 糖 变 化 无 显 著 性 差 异 ;4 月 血 浆 NO 水 平 明 显 提 高 (P < 0 郾 01; 表 1) 血 浆 内 毒 素 水 平 与 HOMA 鄄 IR 正 相 关 (4 月 时 r = 0 郾 75,P < 0 郾 01;8 月 时 r = 0 郾 76,P < 0 郾 05) 表 1. 甘 氨 酸 对 高 果 糖 饮 食 大 鼠 血 浆 指 标 的 影 响 Table 1. Effects of glycine on plasma parameters in high 鄄 fructose diet rats 指 标 4 月 对 照 组 模 型 组 甘 氨 酸 + 果 糖 组 甘 氨 酸 组 8 月 对 照 组 模 型 组 甘 氨 酸 + 果 糖 组 甘 氨 酸 组 血 糖 (mmol / L) 4 郾 50 依 0 郾 20 5 郾 89 依 0 郾 20 b 5 郾 76 依 0 郾 15 4 郾 37 依 0 郾 19 4 郾 58 依 0 郾 24 8 郾 84 依 0 郾 52 b 7 郾 60 依 0 郾 34 4 郾 51 依 0 郾 20 胰 岛 素 (kiu / L) 23 郾 17 依 1 郾 85 59 郾 80 依 8 郾 15 b 46 郾 98 依 1 郾 58 c 26 郾 70 依 3 郾 65 23 郾 67 依 1 郾 04 43 郾 99 依 1 郾 33 b 37 郾 70 依 1 郾 65 d 22 郾 66 依 0 郾 89 HOMA 鄄 IR 4 郾 65 依 0 郾 5 15 郾 69 依 2 郾 32 b 12 郾 06 依 0 郾 66 c 4 郾 95 依 0 郾 64 4 郾 79 依 0 郾 26 16 郾 74 依 1 郾 07 b 13 郾 37 依 0 郾 57 d 4 郾 56 依 0 郾 31 内 毒 素 (keu / L) 0 郾 07 依 0 郾 02 0 郾 17 依 0 郾 02 b 0 郾 08 依 0 郾 01 d 0 郾 08 依 0 郾 01 0 郾 07 依 0 郾 01 0 郾 17 依 0 郾 02 b 0 郾 11 依 0 郾 01 d 0 郾 07 依 0 郾 01 TNF 鄄 琢 ( 滋 g / L) 1 郾 09 依 0 郾 05 1 郾 47 依 0 郾 04 b 1 郾 34 依 0 郾 04 c 1 郾 17 依 0 郾 0 6 1 郾 17 依 0 郾 06 1 郾 74 依 0 郾 06 b 1 郾 46 依 0 郾 05 d 1 郾 11 依 0 郾 05 IL 鄄 6(ng / L) 31 郾 90 依 2 郾 72 46 郾 24 依 1 郾 61 b 39 郾 30 依 1 郾 26 c 29 郾 29 依 0 郾 88 30 郾 97 依 1 郾 93 50 郾 64 依 0 郾 04 b 43 郾 04 依 1 郾 45 c 30 郾 26 依 0 郾 76 NO( 滋 mol / L) 30 郾 36 依 1 郾 83 19 郾 41 依 1 郾 80 b 24 郾 29 依 1 郾 28 d 32 郾 86 依 3 郾 14 29 郾 41 依 0 郾 62 17 郾 74 依 1 郾 37 b 21 郾 19 依 2 郾 33 29 郾 17 依 1 郾 33 ET 鄄 1(ng / L) 19 郾 35 依 2 郾 01 25 郾 76 依 1 郾 46 a 20 郾 27 依 0 郾 76 c 18 郾 71 依 2 郾 56 18 郾 62 依 2 郾 46 31 郾 91 依 2 郾 26 b 22 郾 45 依 0 郾 82 d 18 郾 71 依 2 郾 56 a 为 P < 0 郾 05,b 为 P < 0 郾 01, 与 对 照 组 比 较 ;c 为 P < 0 郾 05,d 为 P < 0 郾 01, 与 模 型 组 比 较 2 郾 3 摇 血 管 enos 及 ETA 鄄 R mrna 表 达 变 化 胸 主 动 脉 enos 阳 性 表 达 主 要 在 血 管 内 膜 区 模 型 组 enos 阳 性 着 色 明 显 少 于 对 照 组 (P < 0 郾 01), 且 8 月 更 加 明 显 ; 甘 氨 酸 + 果 糖 组 4 月 enos 阳 性 表 达 明 显 提 高 (P < 0 郾 05; 图 2) 模 型 组 ETA 鄄 R mr 鄄 NA 在 4 月 8 月 表 达 明 显 高 于 对 照 组 ( P < 0 郾 01), 甘 氨 酸 + 果 糖 组 4 月 8 月 ETA 鄄 R mrna 表 达 显 著 降 低 (P < 0 郾 01; 图 3) 3 摇 讨 摇 论 血 管 内 皮 细 胞 是 机 体 重 要 的 内 分 泌 细 胞, 其 通 过 分 泌 多 种 活 性 物 质 在 维 持 血 管 功 能 稳 定 中 发 挥 着 重 要 作 用 研 究 表 明, 内 皮 功 能 紊 乱 启 动 了 高 果 糖 饮 食 诱 导 高 血 压 的 发 病 [1] 内 皮 功 能 紊 乱 主 要 表 现 为 NO 与 ET 鄄 1 及 其 受 体 异 常 研 究 证 实, 内 皮 功 能 紊 乱 介 导 着 IR / 高 胰 岛 素 血 症 与 高 血 压 之 间 的
ISSN 1007鄄3949 Chin J Arterioscler,Vol 20,No 7,2012 586 发病 [9] 高果糖饮食可诱发高血压及 IR / 高胰岛素 血症,故采用该模型研究 IR / 高胰岛素血症与高血 压之间关系较为理想 为此,本研究通过高果糖饮 食喂养大鼠,3 月后诱导大鼠发生体重增加与收缩 压升高, 且 伴 有 IR / 高 胰 岛 素 血 症, 这 与 Bocarsly 等 [7] 的研究结果十分相似 同时研究结果显示,模 型组 4 月 8 月均发生血管内皮功能紊乱( 血浆 NO 水平及 enos 表达降低,血浆 ET鄄1 及 ETA鄄R mrna 表达升高) 由此相信,IR / 高胰岛素血症及内皮功 能紊乱参与了高果糖饮食诱导高血压的发病 内毒素是体内促发炎症级联反应最重要的因 素,其可通过 IKK / NF鄄资B 通路激活单核巨噬细胞释 放促炎因子( TNF鄄琢 IL鄄6 等),进而引起胰岛素受体 底物 酪 氨 酸 磷 酸 化 诱 发 IR [10] Cani 等 [3] 研 究 证 实,高脂饮食诱导大鼠发生代谢性内毒素血症,启 动了大鼠肥胖及 IR 的发生 本研究结果显示,高果 糖饮食诱导大鼠发生高血压时,伴有肥胖 内毒素 血症及轻度炎症 肥胖不仅是高血压发病的危险 因素,也是诱发代谢性疾病及 IR 的危险因素 甘氨 酸是机体一种非必需氨基酸,可降低多种肝损伤所 伴的内毒素血症 [4,5] 本研究通过甘氨酸干预,发 现其在 4 月 6 月明显降低模型组大鼠体重增加,4 月 ~ 6 月降低模型组收缩压升高,在各阶段(4 月 8 月) 改善内毒素血症 炎症及 IR / 高胰岛素血症,且 血浆内毒素水平与 HOMA鄄IR 正相关 由此推测, 图 2. 不同组大鼠胸主动脉 enos 的表达( 伊 200) 摇 摇 A B C D 分别为 4 月时对照组 模型组 甘氨酸 + 果糖组 甘氨酸组 a 为 P < 0郾 01,与对照组比较;b 为 P < 0郾 05,与模型组比较 Figure 2. Expression of enos in thoracic aorta of each group 内毒素血症在模型组大鼠高血压发病中发挥着一 定的作用 这些结果也说明甘氨酸通过减轻内毒 素血症 炎症 胰岛素抵抗( IR) 从而发挥保护作用 由 enos 催化生成的 NO 是调节血管平滑肌舒 张重要因子 胰岛素通过磷酸肌醇 3鄄激酶( PI3鄄K) 可活化 enos 促进 NO 的生成,故发生 IR 时 NO 生 成减少 [11] 本研究发现,甘氨酸虽然在各阶段都降 低模型组 IR / 高胰岛素血症,但仅在早期(4 月) 对 模型组血浆 NO 及血管 enos 表达降低具有改善作 用 以上结果说明在高血压发病后期有更多因素 参 与 内 皮 功 能 紊 乱 发 生, 且 发 挥 着 重 要 作 用 Mazzali 等 [12] 发现,在高血压发病中由于肾功能损 害引起高尿酸血症可抑制 NO 生成 ET鄄1 是内皮 细胞分泌的最强的缩血管物质之一,其与 ETA鄄R 结 合可引起血管平滑肌强烈收缩,血压上升 有研究 甚至认为,ET 可通过活化肾素鄄血管紧张素系统发 图 3. 不同组大鼠胸主动脉 ETA鄄R mrna 的表达摇 摇 a 为 P 挥升压效应 [13] Katakam 等 [14] 通过动态研究高果 Figure 3. Expression of ETA鄄R mrna in thoracic aorta of 内皮功能紊乱介导了 IR 和高血压之间的发病,且 < 0郾 01,与对照组比较;b 为 P < 0郾 01,与模型组比较 each group 糖饮食大鼠血浆胰岛素水平及内皮功能变化,证实 IR 发生早于内皮功能紊乱 相反,替米沙坦改善代
587 谢 综 合 征 患 者 IR 的 同 时 也 改 善 了 血 管 内 皮 功 能 [15] 本 研 究 结 果 与 以 上 研 究 结 论 十 分 吻 合 尽 管 甘 氨 酸 在 各 阶 段 (4 月 8 月 ) 对 模 型 组 内 皮 功 能 紊 乱 都 有 一 定 的 改 善 作 用, 但 仅 在 早 期 (4 月 ~ 6 月 ) 改 善 了 模 型 组 升 高 的 血 压 由 此 推 测, 在 高 果 糖 饮 食 诱 导 高 血 压 发 病 中, 内 皮 功 能 紊 乱 对 早 期 血 压 升 高 发 挥 的 作 用 可 能 更 为 重 要 综 上 所 述, 甘 氨 酸 对 高 果 糖 饮 食 诱 导 的 早 期 高 血 压 具 有 明 显 降 低 作 用, 其 机 制 与 甘 氨 酸 减 轻 内 毒 素 血 症 改 善 IR 及 内 皮 功 能 紊 乱 有 关 [ 参 考 文 献 ] [1] 赵 春 霞, 王 家 宁, 赵 荫 涛, 等. 果 糖 诱 导 高 血 压 大 鼠 血 管 内 皮 素 鄄 1 内 皮 素 受 体 鄄 A 和 内 皮 源 性 一 氧 化 氮 合 酶 表 达 的 变 化 [ J ]. 高 血 压 杂 志, 2005, 13 ( 12 ): 788 鄄 792. [2] Miller AW, Hoenig ME, Ujhelyi MR. Mechanisms of im 鄄 paired endothelial function associated with insulin resist 鄄 ance[ J]. Cardiovasc Pharmacol Ther, 1998, 16 ( 3 ): 125 鄄 134. [3] Cani PD, Amar J, Iglesias, MA, et al. Metabolic endotox 鄄 emia initiates obesity and insulin resistance[ J]. Diabetes, 2007, 56 (7): 1 761 鄄 772. [4] Carranza MC, LitterioPD, Prince MA, et al. Lipopolysac 鄄 charide (LPS) induction of nitric oxide synthase 鄄 2 and cy 鄄 clooxygenase 鄄 2 is impaired in fructose overloaded rats[ J]. Life Sci, 2010, 88 (3): 307 鄄 313. [5] 张 巍, 员 克 明, 韩 德 五. 甘 氨 酸 防 治 大 鼠 肠 源 性 内 毒 素 血 症 机 制 研 究 [ J]. 山 西 医 科 大 学 学 报, 2003, 34 (2): 97 鄄 98. [6] 李 夏, 韩 德 五, 赵 龙 凤. 甘 氨 酸 对 非 乙 醇 性 脂 肪 性 肝 病 大 鼠 肝 组 织 PPAR 琢 表 达 的 影 响 [ J]. 中 国 病 理 生 理 杂 志, 2006, 22 (9): 1 829 鄄 832. [7] Bocarsly ME, Powell ES, Avena NM, et al. High 鄄 fructose corn syrup causes characteristics of obesity in rats: in 鄄 creased body weight, body fat and triglyceride levels[ J]. Pharmacol Biochem Behav, 2010, 97 (1): 101 鄄 106. [8] El Hafidi M, Perez I, Zamora J, et al. Glycine intake de 鄄 creases plasma free fatty acids, adipose cell size, and blood pressure in sucrose 鄄 fed rats[j]. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol, 2004, 287 (6): 1 387 鄄 393. [9] Vasudevan H, Nagareddy PR, McNeill JH, et al. Gona 鄄 dectomy prevents endothelial dysfunction in fructose 鄄 fed male rats, a factor contributing to the development of hy 鄄 pertension[ J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2006, 291 (7): 3 058 鄄 064. [10] Hotamisligil GS, Peraldi P, Budavari A, et al. IRS 鄄 1 me 鄄 diated inhibition of insulin receptor tyrosine kinase activity in TNF alpha and obesity 鄄 induced insulin resistance [J]. Science, 1996, 271 (2): 665 鄄 668. [11] Kim J, Montagnani M, Koh KK, et al. Reciprocal rela 鄄 tionships between insulin resistance and endothelial dys 鄄 function[j]. Circulation, 2006, 113 (28): 1 888 鄄 904. [12] Mazzali M, Hughes J, Kim YG, et al. Elevated uric acid increases blood pressure in the rat by a novel crystal 鄄 inde 鄄 pendent mechanism[ J]. Hypertension, 2001, 38 (5): 1 101 鄄 106. [13] Tran LT, MacLeod KM, McNeill JH. Endothelin 鄄 1 modu 鄄 lates angiotensin II in the development of hypertension in fructose 鄄 fed rats[j]. Mol Cell Biochem, 2009, 325 (1): 89 鄄 97. [14] Katakam PV, Ujhelyi MR, Hoenig ME, et al. Endothelial dysfunction precedes hypertension in diet 鄄 induced insulin resistance[j]. Am J Physiol, 1998, 275 (3): 788 鄄 792. [15] 龚 丽 娅, 蓝 光 明, 黄 秋 霞. 替 米 沙 坦 改 善 代 谢 综 合 征 患 者 血 管 内 皮 功 能 [ J]. 中 国 动 脉 硬 化 杂 志, 2011, 19 (5): 431 鄄 434. ( 此 文 编 辑 摇 文 玉 珊 )