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1 动物营养学报 2016,28(1): Chinese Journal of Animal Nutrition doi: / j.issn x 大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量 吴金平刘伟蒋明文华 吴凡田娟杨长庚 ( 中国水产科学研究院, 长江水产研究所, 武汉 ) 摘要 : 本试验通过研究饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼生长性能 体成分 肝胰脏胆碱蓄积量及血清生化指标的影响, 以确定大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量 配制胆碱水平分别为 和 mg / kg 的 6 种试验饲料, 饲喂初始体重为 (57.4±2.5) g 的大规格吉富罗非鱼幼鱼 10 周 每种试验饲料随机饲喂 4 个网箱, 每个网箱放养 20 尾鱼 结果显示 : 饲料胆碱水平 mg / kg 时, 试验鱼的增重率 饲料效率和蛋白质效率均显著高于饲料胆碱水平为 45.1 mg / kg 时 ( P<0.05) ; mg / kg 组试验鱼的肝体比和肥满度最大, 显著大于 45.1 mg / kg 组 ( P<0.05) mg / kg 组试验鱼的脏体比最小, 显著小于除 mg / kg 组外的其他各组 ( P<0.05) mg / kg 组全鱼粗脂肪含量显著低于 mg / kg 组 ( P<0.05) 随饲料胆碱水平的增加, 肝胰脏粗脂肪含量呈现先下降后稳定的趋势, 而肌肉粗脂肪和粗蛋白质含量则呈现先上升后稳定的趋势 饲料胆碱水平 mg / kg 时, 试验鱼血清甘油三酯与总胆固醇含量显著高于 45.1 mg / kg 组 ( P<0.05) ; 血清谷草转氨酶与谷丙转氨酶活力随饲料胆碱水平的增加呈现先下降后稳定的趋势, 且均在 mg / kg 组最低 ; 饲料胆碱水平对试验鱼血清总蛋白与葡萄糖含量无显著影响 ( P>0.05) 肝胰脏胆碱蓄积量随饲料胆碱水平的增加呈现先上升后稳定的趋势 通过折线回归分析, 以增重率为评价指标, 大规格吉富罗非鱼幼鱼获得最佳生长时对饲料中胆碱的需要量为 mg / kg; 以肝胰脏胆碱蓄积量为评价指标, 大规格吉富罗非鱼幼鱼获得最大肝胰脏胆碱蓄积量时对饲料中胆碱的需要量为 mg / kg 关键词 : 大规格 ; 吉富罗非鱼幼鱼 ; 胆碱 ; 生长性能 ; 需要量中图分类号 :S963 文献标识码 :A 文章编号 : X(2016) 胆碱是维持水生动物正常生长所必需的一种维生素, 它不仅是机体的组成成分, 而且还参与到某些物质的代谢过程中 胆碱作为甲基供体, 影响甜菜碱与蛋氨酸的代谢 ; 作为卵磷脂的主要成分, 促进肝脏中脂肪的转运与利用 [1] 研究表明, 鱼类摄食缺乏胆碱的饲料会产生缺乏症状, 例如 : 杂交鲈 ( Monrone saxatilis M. chrysops) [2] 和斑点叉尾 ( Ictalurus punctatus) [3] 肝脏脂肪过度沉积 ; 鲤 ( Cyprinus carpio ) [4] 和金鲈 ( Perca flaves cens) [5] 幼鱼生长受到抑制 ; 湖鳟 ( Salvelinus nama ycush) 饲料效率降低 生长受阻 肝脏脂肪沉 积等 [6] 罗非鱼因其具有生长速度快 食性杂与抗病 力强等优点, 已成为我国南方地区养殖的一种主 要淡水鱼品种 [7] 目前有关罗非鱼胆碱需要量的 [8] 研究主要集中在 1 ~ 50 g 的小规格幼鱼或成鱼 阶段, 且结果差异较大 研究发现,0. 56 ~ g 罗非鱼幼鱼的胆碱需要量为 ~ mg / kg [9-11],220 g 罗非鱼成鱼的胆碱需要 量为 ~ mg / kg [12] 体重 > 50 g 的大 收稿日期 : 基金项目 : 现代农业产业技术体系专项资金资助项目 ( CARS 49) ;2010 年公益性行业 ( 农业 ) 科研专项经费 ( ) 作者简介 : 吴金平 (1989 ), 男, 湖北武汉人, 硕士研究生, 从事水产动物营养与饲料 E mail: @ qq.com 通信作者 : 文华, 研究员, 硕士生导师,E mail: wenhua.hb@163.com

2 1 期吴金平等 : 大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量 257 规格罗非鱼幼鱼, 生长速度快, 饲料消耗多, 对营养素的需要量大, 因而对胆碱的需要量可能已经发生了变化 吉富罗非鱼 ( GIFT, Oreochromis niloticus) 是通过对 4 个非洲原种品系尼罗罗非鱼和 4 个亚洲品系尼罗罗非鱼进行种内杂交选育而成的 [13], 经过多年选育, 其生长速度较其他品系的尼罗罗非鱼可提高 5% ~ 30% [14], 是目前我国罗非鱼养殖中最主要的品系 因此, 本试验通过在饲料中梯度添加胆碱, 研究胆碱对初始体重为 ( 57.4 ±2.5) g 的吉富罗非鱼幼鱼生长性能 体成分和血清生化指标的影响, 来确定大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量, 旨在为罗非鱼饲料的配制提供理论依据, 从而节约饲料生产成本 1 材料与方法 1.1 试验饲料以酪蛋白 明胶为蛋白质源, 混合油脂 [ m( 豆油 ) m( 玉米油 )= 1 1] 为脂肪源, 糊精为糖源配制基础饲料, 其组成及营养水平见表 1 以氯化胆碱为胆碱源, 在基础饲料的基础上分别添加 mg / kg 的氯化胆碱, 配制 6 种试验饲料 6 种试验饲料胆碱水平实测值分别为 mg / kg 所有原料经粉碎后过 60 目分级筛, 然后混匀 最后加豆油 玉米油和 20% 的水混匀, 用绞肉机将饲料原料挤压呈条状, 常温条件下避光风干, 破碎成直径为 2 mm 的颗粒饲料 1.2 试验用鱼与饲养管理试验所用吉富罗非鱼鱼苗购自广西省罗非鱼国家级育种试验场, 鱼苗购回后放入网箱中暂养至试验所需规格, 在正式试验开始前, 用不含胆碱的基础饲料喂养 2 周 试验鱼分组前, 鱼体饥饿 24 h, 然后挑选体格健壮且规格大小一致的 480 尾吉富罗非鱼, 平均体重为 (57.4±2.5) g, 养殖于 24 个 1.0 m 1.0 m 1.5 m 的网箱中, 每个网箱放养 20 尾鱼 将 24 个网箱随机分为 6 组, 每种试验饲料投喂 4 个网箱 饲养期为 10 周, 时间为 2014 年 7 月至 2014 年 10 月 养殖期间水温为 ~ 30.9,pH 为 7.2 ~ 8.0, 溶氧浓度 > 5 mg / L, 氨氮浓度 <1 mg / L, 亚硝酸盐浓度 <0.1 mg / L 每天投食 2 次 (06:00 18:00), 表观饱食投喂, 并根据鱼体生长 摄食情况和水温等环境条件及时调整投喂量, 且每天记录鱼摄食及死亡情况 表 1 基础饲料组成及营养水平 ( 干物质基础 ) Table 1 项目 Items 原料 Ingredients Composition and nutrient levels of the basal diet ( DM basis) % 含量 Content 酪蛋白 Casein 明胶 Gelatin 7.50 糊精 Dextrin 玉米油 Corn oil 4.00 豆油 Soybean oil 4.00 维生素预混料 Vitamin premix 1) 1.00 矿物盐预混料 Mineral premix 2) 2.00 磷酸二氢钙 Ca( H 2 PO 4 ) 丙酸钠 Sodium propionate 0.10 抗氧化剂 Antioxidant 0.01 微晶纤维素 Microcrystalline cellulose 合计 Total 营养水平 Nutrient levels 3) 粗蛋白质 Crude protein 粗脂肪 Crude lipid 6.33 水分 Moisture 9.77 粗灰分 Ash ) 每千克维生素预混料含有 Contained the following per kg of vitamin premix: VB 1 5 g,vb 2 10 g, 泛酸钙 calci um pantothenate 10 g,d- 生物素 D biotin 0.6 g,vb 6 4 g, 叶 酸 folic acid 1.5 g, 肌醇 inositol 200 g,l- 抗坏血酸 -2- 磷酸 镁 magnesium L ascorbic acid 2 monophosphate 60 g, 烟酸 niacin 6.05 g,α- 生育酚醋酸酯 α tocopheryl acetate 50 g, VK 4 g,va IU,VD IU 2) 每千克矿物盐预混料含有 Contained the following per kg of mineral premix: Ca( CH 3 CHOHCOO) 2 5H 2 O 327 g, FeSO 4 6H 2 O g, MgSO 4 7H 2 O 137 g, NaH 2 PO g, NaCl 43.5 g, AlCl 3 6H 2 O g, KI 0.15 g, KCl 75 g, CuCl 2 2H 2 O 0. 1 g, MnSO 4 H 2 O 0.80 g,cocl 2 6H 2 O 1 g,znso 4 7H 2 O 3 g values. 3) 营养水平为测定值 Nutrient levels were measured 1.3 样品采集 养殖试验结束后, 禁食 24 h, 以网箱为单位进 行称重, 计算增重率 ( weight gain rate,wgr) 和成 活率 ( survival rate,sr) 从每个网箱中随机取 3 尾鱼, 用于全鱼常规营养成分的测定 另外, 随机 从每个网箱取 2 尾鱼用 MS-222 麻醉后测定体长 和体重, 然后尾静脉采血 血液静置 3 h 后,4 离心 (3 000 r / min,10 min), 取上清于 -40 冰箱 保存 采血后分离肝胰脏 内脏, 并分别对肝胰

3 258 动物营养学报 28 卷 脏 内脏称重, 接着取背肌 采完样后, 所有样品 存储在 -40 冰箱以备后续分析 1.4 指标测定 根据以下公式, 计算试验鱼的增重率 成活 率 饲料效率 ( feed efficiency,fe) 脏体比 ( viscer osomatic index,vsi) 肝体比 ( hepatosomatic index, HSI) 肥满度 ( condition factor,cf) 增重率 ( %)= [ ( W 1 -W 0 ) / W 0 ] 100; 成活率 ( %)= ( S 1 / S 0 ) 100; 饲料效率 = W z / F z ; 蛋白质效率 ( %)= [ W z / ( F z P) ] 100; 脏体比 ( %)= ( W V / W) 100; 肝体比 ( %)= ( W H / W) 100; 肥满度 ( g / cm 3 )= ( W / L 3 ) 100 式中 :W 1 为每个网箱试验鱼终末体重 ( g) ;W 0 为每个网箱试验鱼初始体重 ( g) ;S 1 为终末尾数 ; S 0 为初始尾数 ;W z 为每个网箱最终所增加的鱼体 总重 ( g) ;F z 为每个网箱在整个养殖期间所投喂 饲料的总重 ( g) ;P 为饲料蛋白质水平 ( %) ;W V 为 采样鱼的内脏重 ( g) ;W 为采样鱼的体重 ( g) ;W H 为采样鱼的肝胰脏重 ( g) ; L 为采样鱼的体长 ( cm) 饲料 全鱼 肌肉及肝胰脏的粗蛋白质 粗脂 肪与粗灰分含量分别采用凯氏定氮法 索氏抽提 法和马福炉灰化法测定 全鱼和饲料水分含量采 用 103 恒温干燥失重法测定 ; 肌肉和肝胰脏水 分含量采用冷冻干燥法测定 饲料胆碱水平与肝 胰脏胆碱蓄积量的测定参照文献 [15] 血清甘油 三酯 ( triglyceride, TG) 总胆固醇 ( total cholester ol,t CHO) 葡萄糖 ( glucose,glu) 总蛋白 ( total protein,tp) 含量及谷草转氨酶 ( aspartate transami nase,ast) 谷丙转氨酶 ( alanine aminotransferase, ALT) 活力均采用希森美康全自动生化分析仪进 行测定 ( CHEMIX-800) 1.5 数据处理 试验数据采用统计软件 SPSS 18.0 中的单因 素方差分析 ( one way ANOVA) 和 Duncan 氏均值 多重比较法进行差异显著性分析, 所有数据均以 平均值 ± 标准误 ( mean±se) 表示,P < 0.05 为差异 显著 采用折线分析法, 确定大规格吉富罗非鱼 幼鱼对饲料中胆碱的需要量 2 结果 2.1 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼生长性能的影响由表 2 可知, 饲料胆碱水平对试验鱼的成活率无显著影响 ( P>0.05), 各组成活率均为 100% 随饲料胆碱水平的提高, 试验鱼的增重率呈先上升后保持稳定的趋势, 饲料中胆碱水平 mg / kg 时, 试验鱼的增重率显著高于 45.1 mg / kg 组 ( P < ), 饲料中胆碱水平为 和 mg / kg 时, 试验鱼的增重率各组之间差异不显著 ( P > ) mg / kg 组饲料效率最高, 显著高于 45.1 mg / kg 组 ( P<0.05), 但与 和 mg / kg 组差异不显著 ( P > ) mg / kg 组试验鱼肥满度显著大于 和 mg / kg 组 ( P < 0. 05), 但与 mg / kg 组差异不显著 ( P > ), mg / kg 组之间差异也不显著 ( P>0.05) 45.1 mg / kg 组脏体比显著大于 mg / kg 组 ( P<0.05), 而与 和 mg / kg 组差异不显著 ( P > ) ; mg / kg 组脏体比显著大于 mg / kg 组 ( P<0.05), 与其余各组差异不显著 ( P>0.05) 经折线模型回归分析, 饲料胆碱水平 ( x) 与大规格吉富罗非鱼幼鱼增重率 ( y) 的关系为 y = x ( R 2 = 0.96), 得出大规格吉富罗非鱼幼鱼获得最佳生长时对饲料胆碱的需要量为 mg / kg( 图 1) 2.2 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼全鱼 肌肉与肝胰脏常规营养成分的影响饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼全鱼 肌肉与肝胰脏常规营养成分的影响见表 3 全鱼粗蛋白质 粗灰分含量各组间无显著差异 ( P > 0.05) ; mg / kg 组全鱼粗脂肪含量显著低于 mg / kg 组 ( P < ), 而与 mg / kg 组差异不显著 ( P > 0. 05) ; mg / kg 组全鱼水分含量显著低于 45.1 mg / kg 组 ( P < ), 而与 mg / kg 组无显著差异 ( P>0.05) 肝胰脏水分 粗蛋白质含量各组间差异不显著 ( P> 0.05) ; 肝胰脏粗脂肪含量随饲料胆碱水平的增加呈现先下降后稳定的趋势,45.1 mg / kg 组粗脂肪

4 1 期吴金平等 : 大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量 259 含量显著高于 mg / kg 组 ( P<0.05), 而与 mg / kg 组无显著差异 ( P>0.05) 肌肉水分含量各组之间差异不显著 ( P>0.05) ; 肌肉粗脂肪含量随饲料胆碱水平的增加呈现先上升后保持稳定的趋势, mg / kg 组显著高于 mg / kg 组 ( P<0.05), 而与 mg / kg 组差异不显著 ( P>0.05) ; 肌肉粗蛋白质含量随饲料中胆碱水平的增加与肌肉粗脂肪含量呈现出相同的变化趋势, 以 mg / kg 组粗蛋白质含量最高, 显著高于 45.1 mg / kg 组 ( P<0.05), 与其余各组无显著差异 ( P>0.05) Table 2 表 2 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼生长性能的影响 Effects of dietary choline level on growth performance of large size juvenile GIFT ( Oreochromis niloticus) 项目 饲料胆碱水平 Dietary choline level / ( mg / kg) Items 初始体重 IBW / g 58.25± ± ± ± ± ±1.47 终末体重 FBW / g ±3.67 a ±6.52 ab ±7.79 c ±4.56 b ±5.53 b ±6.86 ab 增重率 WGR / % ±6.75 a ±7.29 b ±8.33 c ±9.04 c ±6.55 c ±7.88 c 饲料效率 FE 0.86±0.06 a 1.08±0.06 b 1.09±0.03 b 1.00±0.06 b 1.08±0.07 b 1.12±0.03 b 蛋白质效率 PER / % 2.21±0.07 a 2.43±0.02 b 2.45±0.06 b 2.48±0.10 b 2.51±0.20 b 2.41±0.11 b 脏体比 VSI / % 9.40±0.23 a 9.01±0.65 ab 8.25±0.31 c 8.98±0.62 ab 9.01±0.50 ab 8.68±0.21 bc 肝体比 HSI / % 1.92±0.15 a 2.59±0.21 c 2.06±0.13 a 2.12±0.16 ab 2.35±0.19 bc 1.92±0.16 a 肥满度 CF / ( g / cm 3 ) 3.80±0.28 ab 3.74±0.41 ab 3.65±0.26 a 3.65±0.23 a 4.42±0.28 c 4.18±0.33 bc 成活率 SR / % 同行数据肩标不同小写字母代表有显著性差异 ( P<0.05) 下表同 In the same row, values with different small letter superscripts mean significantly different ( P<0.05). The same as below. 图 1 饲料胆碱水平与大规格吉富罗非鱼幼鱼增重率的关系 Fig.1 Relationship between dietary choline level and WGR of large size juvenile GIFT ( Oreochromis niloticus) 2.3 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼血清生化指标及肝胰脏胆碱蓄积量的影响饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼血清生化指标的影响见表 4 饲料胆碱水平对罗非鱼血清 TP GLU 含量无显著影响 ( P > ) 血清 AST ALT 活力随饲料胆碱水平的增加呈现先下降后保持稳定的趋势, 其中 mg / kg 组血清 AST ALT 活力均显著高于 mg / kg 组 ( P < ), mg / kg 组之间血清 AST ALT 活力差异不显著 ( P>0.05) mg / kg 组血清 T CHO 含量显著高于 mg / kg 组 ( P<0. 05), 与 mg / kg 组无显著差异 ( P > 0.05), mg / kg 组之间差异不显著 ( P>0.05) 血清 TG 含量以 mg / kg 组最高, 显著高于 mg / kg 组 ( P < ), mg / kg 组之间无显著差异 ( P>0.05) 如图 2 所示, 大规格吉富罗非鱼幼鱼肝胰脏胆碱蓄积量随饲料胆碱水平的增加呈现先上升后稳定的趋势,45.1 mg / kg 组肝胰脏胆碱蓄积量低于其他各组 以肝胰脏胆碱蓄积量为评价指标时, 满足大规格吉富罗非鱼幼鱼需要的饲料胆碱水平为 mg / kg

5 260 动物营养学报 28 卷 表 3 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼全鱼 肝胰脏和肌肉常规成分的影响 Table 3 Effects of dietary choline level on proximate composition in whole body, hepatopancreas and muscle of large size juvenile GIFT ( Oreochromis niloticus) % 项目 饲料胆碱水平 Dietary choline level / ( mg / kg) Items 全鱼 Whole body 水分 Moisture 70.78±0.72 b 69.12±0.61 ab 68.93±0.06 ab 67.92±1.84 a 68.79±0.64 ab 68.89±1.60 ab 粗脂肪 Crude lipid 10.80±0.18 ab 10.03±0.67 ab 10.38±0.24 ab 11.27±1.87 b 10.31±0.36 ab 9.87±1.02 a 粗蛋白质 Crude protein 15.17± ± ± ± ± ±1.56 粗灰分 Ash 3.72± ± ± ± ± ±0.39 肝胰脏 Hepatopancreas 水分 Moisture 63.96± ± ± ± ± ±4.81 粗脂肪 Crude lipid 9.71±0.12 a 9.05±0.35 ab 8.66±0.40 b 8.48±0.49 b 8.24±0.49 b 8.34±0.03 b 粗蛋白质 Crude protein 10.98± ± ± ± ± ±0.06 肌肉 Muscle 水分 Moisture 75.34± ± ± ± ± ±0.33 粗脂肪 Crude lipid 1.39±0.22 a 1.66±0.32 ab 1.75±0.16 bc 2.04±0.08 c 1.99±0.33 bc 2.04±0.22 c 粗蛋白质 Crude protein 18.88±0.96 a 19.69±0.27 ab 20.21±0.25 b 19.18±0.36 ab 19.58±0.30 ab 19.55±0.76 b 项目 Items Table 4 表 4 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼血清生化指标的影响 Effects of dietary choline level on serum biochemical indexes of large size juvenile GIFT( Oreochromis niloticus) 饲料胆碱水平 Dietary choline level / ( mg / kg) 总胆固醇 T CHO / ( mmol / L) 3.37±0.06 a 3.82±0.26 b 3.99±0.11 b 4.05±0.29 b 4.70±0.13 c 4.46±0.22 c 甘油三酯 TG / ( mmol / L) 3.00±0.16 a 3.04±0.09 a 3.28±0.28 ab 3.37±0.18 b 4.60±0.17 d 3.84±0.10 c 总蛋白 TP / ( g / L) 29.50± ± ± ± ± ±4.44 葡萄糖 GLU / ( mmol / L) 5.26± ± ± ± ± ±0.24 谷草转氨酶 AST / ( U / L) 70.13±2.10 a 65.63±5.07 ab 60.38±5.04 bc 54.88±3.87 cd 55.00±3.38 cd 53.50±3.59 d 谷丙转氨酶 ALT / ( U / L) 23.75±2.43 a 20.63±2.07 b 18.50±1.60 bc 18.38±1.60 bc 15.75±2.05 c 12.50±1.07 d 图 2 饲料胆碱水平对吉富罗非鱼肝胰脏胆碱蓄积量的影响 Fig.2 Effects of dietary choline level on hepatopancreas choline accumulation of GIFT ( Oreochromis niloticus) 3 讨论 3.1 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼生长 性能的影响 本试验中, 投喂添加适量胆碱饲料的试验鱼, 其增重率 饲料效率与肥满度均有不同程度提高, 表明饲料添加适量的胆碱对罗非鱼的生长是有利 [16] 的, 这一结果与帅继祥等在星斑川鲽 ( Platich [17] thys stellatus) 陈芳等在黄鳝 ( Monopterus al [18] bus) 王道尊等在草鱼 ( Ctenopharyngodon idel [19] lus) 和 Jiang 等在团头鲂 ( Megalobrama am [9] blycephala) 上的研究结果相似 而 Shiau 等发 现, 当饲料胆碱添加量超过 800 mg / kg 时, 奥尼罗 [20] 非鱼幼鱼增重率出现下降的趋势 ;Duan 等发 现, 当饲料胆碱添加量超过 mg / kg 时, 异

6 1 期吴金平等 : 大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量 261 育银鲫 ( Carassius auratus gibelio) 的特定生长率也 [16] 有下降趋势 但帅继祥等发现, 当饲料胆碱添 加量低于 mg / kg 时, 星斑川鲽幼鱼的增 [12] 重率显著低于其余各组 ; 邵辉等发现, 当饲料胆 碱添加量低于 mg / kg 时, 吉富罗非鱼成鱼 [5] 的增重率显著低于其余各组 ;Twibell 等也发现, 当饲料胆碱添加量低于 230 mg / kg 时, 黄金鲈幼 鱼的增重率显著低于其余各组 这进一步表明饲 料中适量添加胆碱有利于鱼体生长, 而当饲料胆 碱添加不足或添加过量则会影响其他物质的代谢 而不利于鱼类正常生长 [10] 本试验以增重率为评价指标, 得出初始体重 为 (57.4±2.5) g 的吉富罗非鱼幼鱼获得最佳生长 时, 对饲料胆碱的需要量为 mg / kg 同样 [10] 地, 都是以罗非鱼为试验对象, 黄凯等以生长性 能和血液指标为评价指标, 得出初始体重为 (0.56±0.04) g 的奥尼罗非鱼对饲料胆碱的需要 [9] 量为 ~ mg / kg;shiau 等以增重率为 评价指标, 得出初始体重为 (0.62±0.01) g 的奥尼 罗非鱼对饲料胆碱的需要量为 mg / kg; 邵辉 [12] 等以特定生长率为评价指标, 得出初始体重为 (220.00±8.34) g 的吉富罗非鱼对饲料胆碱的需 要量为 mg / kg 以上结果与本试验结果不 一致, 其原因可能与试验用鱼的规格 生长阶段不 同有关 鱼的生长阶段不同, 对胆碱的需要量也 不同 ; 幼鱼期由于代谢快 生长快, 因而对维生素 的需要量高于成鱼 [21] 此外, 造成结果差异的原 因也可能与饲料含硫氨基酸 甲基供体物质 甜菜 碱与胆碱代谢存在着交互作用, 导致鱼类胆碱需 要量相异有关 [9] 3.2 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼 全鱼 肝胰脏和肌肉常规成分的影响 本试验中, 随饲料胆碱水平的增加, 全鱼粗蛋 白质与粗灰分含量差异不显著, 水分与粗脂肪含 量则差异显著, 这与星斑川鲽 [16] 异育银鲫 [20] 军 曹鱼 ( Rachycentron canadum) [22] [12] 和吉富罗非鱼 等的研究结果不一致 但有研究表明, 饲料添加 mg / kg 胆碱显著提高黄金鲈鱼全鱼脂肪含 量 [5], 而添加 mg / kg 氯化胆碱则显著降低草 鱼全鱼脂肪含量 [18] 肌肉是鱼体重要的脂肪沉积 部位 [23], 研究发现, 胆碱能够降低黄鳝 [24] 草 [25] 鱼肌肉中脂肪含量 而本试验中, 肌肉粗脂肪 含量随饲料胆碱水平的增加而增加, 这与星斑川 鲽 [16] [22] 军曹鱼和中华鲟 [26] ( Acipenser sinensis) 等的研究结果较为一致 肝脏脂肪含量通常被看作评价鱼类胆碱营养 的指标 [16] 有关草鱼 [25] 黄鳝 [24] 斑点叉尾 [3] [10] 与奥尼罗非鱼等的研究表明, 肝脏脂肪含量随 饲料胆碱水平的增加而呈现下降的趋势 本试验 中, 试验鱼肝胰脏粗脂肪含量随饲料胆碱水平的 增加呈现下降的趋势, 说明饲料中添加适量的胆 碱可以有效降低肝胰脏脂肪含量, 防止脂肪在肝 胰脏中的过度蓄积, 避免脂肪肝的形成 [10] 但在 [5] 黄金鲈鱼与虹鳟 ( Oncorhynchus mykiss) [27] 上的 研究发现肝脏脂肪含量则不受饲料胆碱添加量的 影响, 而在美国红鱼 ( Sciaaenops ocellatus) [28] 与中 [26] 华鲟等上研究则发现肝脏脂肪含量与饲料胆碱 水平呈正相关 3.3 饲料胆碱水平对大规格吉富罗非鱼幼鱼血清 生化指标及肝胰脏胆碱蓄积量的影响 血液中的脂类 ( 血脂 ) 包括 TG T CHO 和游 离脂肪酸等, 虽然血脂只占全身脂类总量相当少 的一部分, 但血脂可以转运于机体各组织之间, 从 而反映出机体内脂类代谢状况 [29] 饲料胆碱水平 不足时会使合成脂蛋白的原料 磷脂酰胆碱合 成量不足, 进而引起肝脏脂蛋白合成减少, 从而影 响脂肪向血液中转运, 最终导致脂肪积累和向血 液运输的脂肪减少 [18] 本试验结果显示, 随饲料 胆碱水平的增加, 肝胰脏粗脂肪含量下降, 而血清 TG 与 T CHO 含量升高, 这与吉富罗非鱼 [12] 草 鱼 [18] [9] [16] 奥尼罗非鱼及星斑川鲽等研究结果一 致, 说明饲料中胆碱降低肝脏脂肪含量是通过直 接或间接参与肝脏脂肪运输来实现的 [10] AST 和 ALT 是广泛存在于动物组织细胞线 粒体内的重要转氨酶, 其血清中活力是反映肝细 胞受损伤的主要依据之一 [30] 正常情况下的动物 体, 血清中这 2 种酶的活力往往较低 ; 当组织异常 时会引起细胞膜通透性增加, 或当损伤组织部位 较大时会引起细胞主动转运体系发生障碍, 或细 胞解体时, 细胞内大量 AST 和 ALT 渗入血液, 从 而使肝脏等组织中转氨酶活力降低, 而血液中转 氨酶活力则相应升高 [31-32] 本试验中, 随饲料胆 碱水平的增加, 试验鱼血清 AST 和 ALT 活力均持 续下降, 与星斑川鲽 [16] 中华绒螯蟹 ( Eriocheir sinensis) [33] 等的研究结果一致, 表明饲料中胆碱 的适量增加能够减轻肝细胞损伤 [10]

7 262 动物营养学报 28 卷 鱼类对胆碱需要量的确定, 一般以肝脏胆碱 蓄积量 肝脏脂肪含量以及生长性能等指标作为 评定标准 [25] 在本试验中, 试验鱼肝胰脏胆碱蓄 积量随饲料胆碱水平的增加而增加, 但当试验鱼 摄食饲料胆碱水平超过 mg / kg 时, 肝胰 脏胆碱蓄积量则趋于稳定, 这与斑点叉尾 [33] 和 [21] 军曹鱼等的研究结果类似 根据饲料胆碱水平 与肝胰脏胆碱蓄积量的关系, 经回归分析得出大 规格吉富罗非鱼幼鱼肝胰脏胆碱蓄积量最大时, 其对饲料胆碱的需要量为 mg / kg, 以增重 率为评价指标时的需要量为 mg / kg 由此 可知, 与生长相比较, 大规格吉富罗非鱼需要更多 的胆碱来维持机体的特定生理功能, 该结果与在 团头鲂 [19] [20] [22] 异育银鲫和军曹鱼上的研究发 现相一致 4 结论 在本试验条件下, 饲料中添加胆碱可以提高 大规格吉富罗非鱼幼鱼的生长性能, 改善饲料利 用效率, 其获得最佳生长时对饲料中胆碱的需要 量为 mg / kg; 而以肝胰脏胆碱蓄积量为评 价指标时, 其对饲料中胆碱的需要量为 mg / kg 参考文献 : [ 1 ] NRC. Nutrient requirements of fish and shrimp [ S]. Washington,D.C.:National Academics Press,2011. [ 2 ] GRIFFIN M E,WILSO K A,WHITE M R,et al.diet ary choline requirement of juvenile hybrid striped bass [J].The Journal of Nutrition,1994,124 ( 9) : [ 3 ] WILSON R P,POE W E. Choline nutrition of finger ling channel catfish [ J]. Aquaculture, 1988, 68 ( 1) : [ 4 ] OGINO C B. Vitamin requirement of carp 4:require ment for choline[ J]. Bulletin of the Japanese Society of Scientific Fisheries,1970,36: [ 5 ] TWIBELL R G, BROWN P B. Dietary choline re quirement of juvenile yellow perch ( Perca flaves cens) [ J]. The Journal of Nutrition, 2000, 130 ( 1) : [ 6 ] KETOLA H G.Choline metabolism and nutritional re quirement of lake trout ( Salvelinus namaycush) [ J]. Journal of Animal Science,1976,43( 2) : [ 7 ] 强俊, 杨弘, 王辉, 等. 饲料蛋白水平对低温应激下吉 富罗非鱼血清生化指标和 HSP70 mrna 表达的影响 [ J]. 水生生物学报,2013,37(3) : [ 8 ] 冷向军. 浅谈我国的水产饲料行业标准 [ J]. 饲料工业,2009,30(10) : [ 9 ] SHIAU S Y,LO P S. Dietary choline requirements of juvenile hybrid tilapia, Oreochromis niloticus O. au reus[ J ]. The Journal of Nutrition, 2000, 130 ( 1 ) : [10] 黄凯, 杨鸿昆, 甘晖, 等. 饲料中添加胆碱预防罗非鱼脂肪肝病变的作用 [ J]. 中国水产科学, 2007, 14 (2) : [11] KASPER C S,WHITE M R,BROWN P B.Choline is required by tilapia when methionine is not in excess [ J]. The Journal of Nutrition, 2000, 130 ( 2): [12] 邵辉, 文华, 刘伟, 等. 吉富罗非鱼成鱼胆碱的最适需要量 [ J]. 中国水产科学,2013,20(5) : [13] TENDENCIA E A, FERMIN A C, DELA PEÑA M R,et al. Effect of Epinephelus coioides, Chanos cha nos, and GIFT tilapia in polyculture with Penaeus monodon on the growth of the luminous bacteria Vib rio harveyi [ J]. Aquaculture, 2006, 253 ( 1 / 2 / 3 / 4 ) : [14] 蒋明, 姚鹰飞, 文华, 等. 吉富罗非鱼成鱼对饲料中有效磷的需要量 [ J]. 水产学报,2013,37( 11) : [ 15] VENUGOPAL P B. Choline [ M ] / / AUGUSTIN J, KLEIN B P,BECKER D,et al.methods of vitamin as say.newyork,ny:john Wiley and Sons Inc.,1985. [16] 帅继祥, 张利民, 王际英, 等. 星斑川鲽幼鱼胆碱需求量的研究 [ J]. 水生生物学报,2011, 35 ( 2) : [17] 陈芳, 杨代勤, 阮国良, 等. 黄鳝对饲料中胆碱的需要量 [ J]. 大连水产学院学报,2004,19(4) : [18] 王道尊, 赵亮, 谭玉钧. 草鱼鱼种对胆碱需要量的研究 [ J]. 水产学报,1995,19(2) : [19] JIANG G Z,WANG M,LIU W B,et al.dietary cho line requirement for juvenile blunt snout bream,mega lobrama amblycephala [ J ]. Aquaculture Nutrition, 2013,19( 4) : [ 20] DUAN Y H,ZHU X M,HAN D,et al.dietary choline requirement in slight methionine deficient diet for ju venile gibel carp ( Carassius auratus gibelio) [ J].Aq uaculture Nutrition,2012,18( 6) : [21] 麦康森. 水产动物营养与饲料学 [ M]. 北京 : 中国农业出版社,2011: [22] MAI K S,XIAO L D,AI Q H,et al.dietarycholine re

8 1 期吴金平等 : 大规格吉富罗非鱼幼鱼对饲料中胆碱的需要量 263 quirement for juvenile cobia, Rachycentron canadum [ J].Aquaculture,2009,289( 1 / 2) : [23] DING L Y,ZHANG L M,WANG J Y,et al.effect of dietary lipid level on the growth performance,feeduti lization,body composition and blood chemistry of ju venile starry flounder ( Platichys stellatus) [ J]. Aqua culture Research,2010,41( 10) : [24] 杨代勤, 陈芳, 阮国良. 饲料中添加胆碱对黄鳝生长 组织脂肪含量及消化酶活性的影响 [ J]. 水产学报, 2006,30( 5) : [25] 朱瑞俊, 李小勤, 谢骏, 等. 饲料中添加氯化胆碱对草鱼成鱼生长 脂肪沉积和脂肪代谢酶活性的影响 [ J]. 中国水产科学,2010,17(3) : [26] 刘伟, 文华, 周俊, 等. 氯化胆碱对中华鲟幼鱼生长和生理指标的影响 [ J]. 水利渔业,2007,27 ( 3) : [ 27] RUMSEY G L. Choline betaine requirements of rain bow trout ( Oncorhynchus mykiss) [ J]. Aquaculture, 1991,95( 1 / 2) : [ 28] CRAIG S R, GATLIN D M Ⅲ. Dietary choline re quirement of juvenile red drum ( Sciaaenops ocel latus) [ J]. The Journal of Nutrition, 1996, 126 ( 6) : [ 29] HIRAOKA Y,NAKAGAWA H,MURACHI S. Blood properties of rainbow trout in acute hepatotoxity by carbontetrachloride[ J].Bulletin of the Japanese socie ty of Fisheries Oceanography,1979,45( 4) : [30] 康格菲. 临床生物化学 [ M]. 北京 : 人民卫生出版社, 1989: [31] 高露姣, 施兆鸿, 艾春香. 不同脂肪源对施氏鲟幼鱼血清生化指标的影响 [ J]. 海洋渔业,2005,27( 4) : [32] 惠天朝, 施明华, 朱荫湄. 硒对罗非鱼慢性镉中毒肝抗氧化酶及转氨酶的影响 [ J]. 中国兽医学报, 2000,20( 3) : [33] 齐霁, 陈立侨, 孙盛明, 等. 不同磷脂水平下中华绒螯蟹幼蟹的胆碱需要量 [ J]. 中国水产科学,2013,20 (2) : [ 34] ZHANG Z,WILSON R P.Reevaluation of the choline requirement of fingerling channel catfish ( Ictalurus punctatus) and determination of the availability of choline in common feed ingredients[ J]. Aquaculture, 1999,180(1 / 2) :89-98.

9 264 动物营养学报 28 卷 Dietary Choline Requirement of Large Size Juvenile Genetically Improved Farmed Tilapia ( Oreochromis niloticus) WU Jinping LIU Wei JIANG Ming WEN Hua WU Fan TIAN Juan YANG Changgeng ( Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan , China) Abstract: The present study was conducted to determine the effects of dietary choline level on the growth per formance, body composition, hepatopancreas choline accumulation and serum biochemical indexes of large size juvenile genetically improved farmed tilapia ( GIFT, Oreochromis niloticus), in order to determine the di etary choline requirement of large size juvenile GIFT. Six experimental diets were prepared with different cho line levels (45.1, 308.9, 540.5, 946.0, and mg / kg, respectively), and large size juvenile GIFT with the average body weight of (57.4±2.5) g were fed the 6 kinds of diets for 10 weeks. Each diet was randomly fed four pond cages, and each pond cage had 20 fish. The results showed that weight gain rate ( WGR) and feed efficiency ( FE) in the groups of dietary choline level was equal or more than mg / kg were significantly higher than those in 45.1 mg / kg group ( P<0.05). Hepatosomatic index ( HSI) and condi tion factor ( CF) in mg / kg group seemed to be the highest, and were significantly higher than those in 45.1 mg / kg group ( P<0.05). Viscerosomatic index ( VSI) in mg / kg group seemed to be the lowest, and was significantly lower than that in other groups except mg / kg group ( P < 0. 05). Whole body crude lipid content in mg / kg group was significantly lower than that in mg / kg group ( P<0.05). With the increase of dietary choline level, the hepatopancreas crude lipid content showed a trend of decreasing firstly and then stabilized, while the contents of crude lipid and crude protein in muscle showed a trend of in creasing firstly and then stabilized. Serum total cholesterol ( T CHO) and triglyceride ( TG) contents showed a rising tendency with increasing dietary choline level, and which in the groups of dietary choline level was equal or more than mg / kg were significantly higher than those in 45.1 mg / kg group ( P<0.05). Serum alanine aminotransferase ( ALT) and aspartate transaminase ( AST) activities showed a descending trend firstly and then stabilized with increasing dietary choline level, and seemed to be the lowest in mg / kg group. No significant differences in serum total protein ( TP) and glucose ( GLU) contents were found among the groups ( P>0.05). Hepatopancreas choline accumulation showed a trend of increasing firstly and then stabilized with increasing dietary choline level. Base on the WGR as the evaluation index, large size juvenile GIFT demand for mg / kg dietary choline to obtain the best growth, and demand for mg / kg dietary choline to obtain the highest hepatopancreas choline accumulation base on the hepatopancreas choline accumulation as the evaluation index.[ Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016, 28( 1) : ] Key words: large size; juvenile GIFT; choline; growth performance; requirement Corresponding author, professor, E mail: wenhua.hb@163.com ( 责任编辑菅景颖 )

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