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1 饲养试验 016 年第 37 卷第 1 期 饲料中不同水平维生素 A 对加州鲈生长 和血清生化指标的影响 1, 蓝汉冰 1, 陈翠英 1, 黄永政 叶观林 陈玉敏 廖 健 谭秀花 1, 朱旺明 (1. 佛山市信豚生物科技有限公司, 广东佛山 5811;. 广州市信豚水产技术有限公司, 广东广州 51064) 摘要 : 通过对平均初重为 (38.31±0.6) g 的加州鲈 (Micropterus salmoides) 投喂 5 组不同维生素 A 水平的饲料 [ 维生素 A 含量分别为 ( 对照组 ) mg/kg 和 mg/kg], 每组 3 个重复, 每个重复 50 尾鱼, 进行 8 周的饲养试验, 研究饲料中不同水平维生素 A 对加州鲈幼鱼生长和血清生化指标的影响 结果表明, 与对照组相比, 饲料中添加 mg/kg 维生素 A 可显著提高加州鲈的增重率和特定生长率 (P<0.05), 而对蛋白质效率 饲料系数 成活率和体成分影响不显著 (P> 0.05) 但超过一定量的维生素 A( mg/kg), 反而不利于加州鲈的生长和骨骼发育 当饲料中维生素 A 添加水平为 mg/kg 时, 显著降低了血清总胆固醇和肝脏脂肪含量 (P<0.05), 当饲料中维生素 A 添加水平为 mg/kg 时, 显著提高了血清谷草转氨酶的活性 (P<0.05), 而对血清碱性磷酸酶和谷丙转氨酶没有显著性影响 (P>0.05) 此外, 肝脏维生素 A 含量随着饲料维生素 A 水平的增加而呈线性增加 由此可见, 在需要量基础上适当提高维生素 A 水平可促进加州鲈的生长, 建议加州鲈饲料维生素 A 的添加量不能高于 mg/kg 关键词 : 加州鲈 ; 维生素 A; 生长 ; 血清生化指标 doi:1330/j.cnki.fi 中图分类号 :S 文献标识码 :A 文章编号 : X(016) Effects of different dietary levels of vitamin A on growth performance and serum biochemical parameters of Micropterus salmoides Lan Hanbing, Chen Cuiying, Huang Yongzheng, Ye Guanlin, Chen Yumin, Liao Jian, Tan Xiuhua, Zhu Wangming Abstract:To investigate the effects of dietary vitamin A on growth performance and serum biochemical parameters of Micropterus salmoides, five diets supplemented with graded levels of vitamin A ((con trol),,, and mg/kg dry weight, respectively) were fed to triplicate treatments of 50 juveniles each with the initial weight of (38.31±0.6) g for 8 weeks. The results showed that the weight gain (WG) and special growth rate (SGR) of fish fed the diet with mg/kg vitamin A were significantly higher than those of control group (P<0.05). No significant differences were observed in protein efficiency ratio (PER), feed conversion ratio (FCR), survival rate (SR) and proximate composi tion of whole body fish among all the treatments (P>0.05). While high concentration of dietary vitamin A ( mg/kg) caused slight depression in growth and bone development of juvenile fish. Serum cho lesterol and liver lipid contents were significantly decreased with increasing dietary vitamin A level up to ~ mg/kg, but the reverse trend was obtained for serum aspartate aminotransferase (GOT) activity (P<0.05). No significant differences were observed on alkaline phosphatase (ALP) activity 作者简介 : 蓝汉冰, 硕士, 研究方向为水产动物营养与免疫 and glutamic pyruvic transaminase (GTP) activity 通讯作者 : 朱旺明, 硕士, 硕士生导师 in serum (P>0.05). The liver vitamin A contents 收稿日期 : showed a strong positive linear relationship with 来源 : 科技型中小企业创新资金 [14C ] dietary vitamin A levels (P<0.05). The results of 34

2 016 年第 37 卷第 1 期 SILIAO GONGYE the present study indicated that certain high levels of dietary vitamin A could improve growth for juve nile Micropterus salmoides, and the level of dietary vitamin A should not exceed mg/kg. Key words Micropterus salmoides vitamin A growth performance serum biochemical parameters 维生素A具有促进生长 维持繁殖性能和视觉功能 正常及提高疾病抵抗力等重要生理功能 是鱼类维持正 常生理功能不可缺少的营养物质之一 研究发现大多 水产动物体内不能合成维生素A 食物缺乏维生素 A 时 均会出现明显的症状 如生长缓慢 厌食 贫血 夜盲症 及骨骼畸形等 但食物中过量的维生素 A 对鱼类具有 一定的毒性 如死亡率增加 生长下降 脊椎生长异常 肝脏脂肪含量和肝脏指数降低等症状 加州鲈 Mi cropterus salmoides 又名大口黑鲈 为肉食性温水鱼 类 具有生长快 肉质鲜美 抗病力强等优点 是我国养 殖的主要淡水鱼品种之一 当前加州鲈养殖以投喂冰 鲜杂鱼为主 或采用冰鲜杂鱼与饲料混合投喂的方式 由于其营养需求 消化吸收和代谢机制的研究相对缺 乏 人工配合饲料的研制一直未能取得重大突破 目 前 有关加州鲈蛋白质 脂肪和个别维生素的营养需求 研究已有报道 但对维生素 A 的营养生理作用研究不 多 未见有报道关于在配合饲料中添加维生素A对加州 鲈的生长 饲料利用率 肝脏维生素 A 含量及血清生化 指标的影响 因此 研究配合饲料中不同水平维生素 A 对加州鲈生长 饲料利用率 肝脏维生素 A 含量及血清 生化指标的影响 为确定加州鲈饲料中维生素A适宜供 给量和进一步指导生产提供参考 1 材料与方法 1.1 试验饲料 饲料以维生素 A 醋酸酯作为添加源 分别按照维 生素 A 含量为 0 对照组 和 10 mg/kg 添 加 以微晶纤维素为填充剂 使各试验组饲料其它营 养水平保持一致 维生素 A 醋酸酯 维生素 A 含量为 50 万 IU/g 购自浙江新和成股份有限公司 采用反相 高效液相色谱法测得上述5组饲料中维生素A的实际添 加量分别为 和 mg/kg 所有饲料原料经 80 目过筛 充分混匀后制成粒径为 3 mm 的膨化饲料 烘干后置于 4 冰箱保存备用 试验饲料组成及营养成分见表 1 1. 试验鱼与饲养管理 试验于 015 年 7~9 月在佛山市信豚生物科技有 限公司南沙中试实验中心进行 加州鲈购于南海优鲈 一号加州鲈鱼苗厂 先放入暂养箱中用基础饲料 见 表 1 驯养 周至其完全适应池塘网箱试验环境 驯养 结束后 选取平均体重为(38.31±0.6) g 的健康加州鲈 幼鱼 750 尾 随机分在 15 个网箱.5 m 1.5 m m 中 每个网箱 50 尾 分别投喂 5 组饲料 每组饲料 3 个 重复 饲养周期为 8 周 每天投喂两次 8:00 和 17:00 投喂率为体重的 %~4% 同时根据水温 天气和鱼的 摄食情况调整投喂量 每天记录投喂量和试验鱼 的死亡数据 并定期检查水体的氨氮 亚硝酸盐 溶解 氧等理化因子 试验期间水温为 8.0~3 左右 露天养殖 自然光照 ph 值为 7.~7.8 水中氨氮含 量 ~0. mg/l 亚 硝 酸 盐 小 于 0.05 mg/l 溶 氧 大 于 5.0 mg/l 表1 加州鲈试验饲料配方及营养成分 维生素 A 添加水平(mg/kg 干重) 饲料组成(g/100 g 干重) 鱼粉 豆粕 面粉 鱼油 磷酸二氢钙 复合维生素 复合矿物元素 维生素 A 预混剂 其它物质 营养成分(g/100 g 干重) 水分 粗蛋白 粗脂肪 粗灰分 饲料 VA 含量实测值(mg/kg) 注 1. 复合维生素为不添加 VA 的维生素预混料 由佛山市信豚生 物科技有限公司提供 其中每千克干饲料中含有 VE 160 mg VD IU VK3 5 mg VC 50 mg VB mg VB 5.13 mg VB mg VB1 0. mg 烟酰胺 55.4 mg 叶酸.91 mg D-泛酸钙84.10 mg D-生物素 mg 肌醇80 mg 氯化胆碱 mg. 复合矿物元素由佛山市信豚生物科技有限公司提供 其中每 千 克 干 饲 料 中 含 有 镁 MgSO4 HO 5.71 mg 铁 FeSO mg 铜 CuSO4.61 mg 锌 ZnSO mg 锰 MnSO4 6.1 mg 硒 NaSeO3 8 mg 碘 Ca(IO3) 1.96 mg 钴 CoCl 0.36 mg 3. 维生素 A 预混剂 根据不同添加量配制 5 组预混剂 载体为 微晶纤维素 4. 其它物质包括载体 抗氧化剂等 35

3 饲 养 试 验 016 年第 37 卷第 1 期 1.3 样品采集 肝体比(HSI %)=试验鱼肝脏重/试验鱼体重 100 养殖试验结束前 停食 4 h 然后对每个网箱中 脂体比(IPF %)=试验鱼腹腔脂肪重/试验鱼体 的所有加州鲈进行计数 称重 记录生长情况 从每 重 100 个网箱随机捞取 5 尾鱼 测定体重 体长等相关指标 鱼体肥满度 CF g/cm3 =试验鱼体重/试验鱼体 长 同时进行血液和肝脏样品的采集 用 1 ml 无菌注射 器尾静脉采血 置于无菌离心管中 4 静置 1 h 后 1.4. 常规营养成分分析 饲料 全鱼和肝脏的粗蛋白 粗脂肪 粗灰分和水分 g 离心 10 min 制备血清 -80 保存备用 取 按照国标 GB/T GB/T GB/T 肝脏组织 剔除其表面的结缔组织附着物 并按重量 和 GB/T 方法测定的 饲料 1 10 加入 PBS ph 值 7.4 缓冲液 均浆机高速均浆 和肝脏维生素 A 的含量按照国标 GB/T 后 g 低温离心 0 min 取上清液 置于-80 保存 备用 另每箱随机取 4 尾鱼 擦干体表水分 中的皂化提取法进行提取 然后采用反相高效液相色 谱法分析 经液氮速冻后保存于-0 用于全鱼常规营养成分 血清生化指标的分析 的分析 血清碱性磷酸酶 ALP 谷丙转氨酶 GTP 谷草 1.4 指标测定与分析 转 氨 酶 GOT 活 性 及 甘 油 三 酯 TG 和 总 胆 固 醇 生长性能指标的测定 成活率 SR % =试验结束时鱼尾数/试验开始时 TCHO 的含量均采用南京建成生物工程研究所试剂 盒测定 具体测定参照试剂盒说明书进行 尾数 统计分析 增重率 WG % = 终末体重-初始体重 /初始体 采用 SPSS16.0 对所得数据进行统计分析 在单 重 100 因素方差分析 One-Way ANOVA 达到显著水平时 特定生长率 SGR %/d = ln 试验鱼末重/试验鱼 P<0.05 采用 Turkey s 检验进行多重比较 数据表 初重 /饲养时间 100 示为 平均值±标准误 X±SE 饲料系数 FCR =饲料摄食量/试验鱼增重 结果与分析 蛋白质效率 PER =试验鱼增重/ 试验鱼饲料摄.1 饲料维生素 A 水平对加州鲈生长和饲料利用率 食量 饲料蛋白含量 脏体比(VSI %)=试验鱼内脏重/试验鱼体重 100 的影响 见表 表 初始重(g) 终末重(g) 增重率(%) 特定生长率(%/d) 饲料系数 蛋白质效率 存活率(%) 饲喂不同维生素 A 含量对加州鲈生长性能和饲料利用率的影响 38.83± ± ±6b 1.13±0.01b 8± ± ±.40 维生素 A 添加水平(mg/kg 干重) 38.50± ± ± ± ± ± ±1.8ab 98.59±1.13ab ±1.83a 1.15±0.01ab 1.15±0.01ab 1.0±0.0a 5±0.01 7±0.0 1± ±0.0 7± ± ± ± ±4.16 注 同行数据肩标字母不同表示数据之间有显著性差异 P<0.05 下表同 由表 可知 饲料中高水平的维生素 A 对加州鲈 的增重率和特定生长率有影响 而对饲料系数和蛋白 质效率的影响不显著 P>0.05 当饲料维生素 A 添 加量为 mg/kg 时 试验鱼的增重率和特定生长 率显著高于对照组 P<0.05 其余各组间差异不显著 P>0.05 对照组试验鱼的成活率稍低于各维生素 A 添加组 但各组间差异不显著 P>0.05. 饲料维生素 A 水平对加州鲈形体指标和体成分 ± ± ±.38ab 1.14±0.0ab 6±0.03 8± ±4.37 的影响 见表 3 及表 4 由表 3 可知 饲料中维生素 A 的添加水平影响 了加州鲈的脏体比和肥满度 但对肝体比和脂体比 的影响不显著 P>0.05 随着饲料维生素 A 添加水 平 的 增 加 加 州 鲈 的 脏 体 比 升 高 且 添 加 量 高 达 mg/kg 和 mg/kg 试验鱼的脏体比显著高 于其余各组 P<0.05 而加州鲈的肥满度随着饲料 维 生 素 A 添 加 水 平 的 增 加 而 下 降 且 添 加 量 为

4 016 年第 37 卷第 1 期 SILIAO GONGYE mg/kg 和 mg/kg 组的肥满度显著低于对 照 组 和 mg/kg 维 生 素 A 添 加 组 P<0.05 此 外 添加量高达 mg/kg 组的试验鱼出现轻微 表3 饲喂不同维生素 A 含量对加州鲈形体指标的影响 1.47± ± ± ±0.09b 6.95±0.06b 7.14±0.04a 1.47± ± ±0.01 8±0.00a 7±0.00ab 5±0.00b 1.51± ±0.06b 1.51±0.05 8±0.01a 肝体比(%) 脏体比(%) 脂体比(%) 肥满度(g/cm3) 表 ± ± ± ± ± ± ± ±7 5.8±9 3.81± ± ±0.4.3 饲料维生素 A 水平对加州鲈肝脏脂肪和肝脏维 生素 A 含量的影响 见表 5 及图 1 由表5可知 加州鲈肝脏的脂肪含量随着饲料中维 生素A添加水平的增加而降低 且添加量为 mg/kg 组试验鱼的肝脏脂肪含量显著低于对照组 P<0.05 表5 肝脏维生素 A 含量(μg/g 湿重) Y=89 9X R= 图 肝脏维生素 A 含量与饲料维生素 A 添加水平显著正相 见图 1 关 Y=89 9X-0.339, R= P<0.01 且饲料维生素 A 添加量较高的两组 mg/kg 和 mg/kg 肝脏维生素 A 含量显著高于维生素 A 含 量较低组 和 mg/kg P< ±0.06ab.31±0ab 1.95±0.ab 6.19±0c 15.98±.15c 33.10±5.89b.98±a 1.59±0.3c 肝脏脂肪(%) 肝脏维生素 A(μg/g) ± ±5 4.80±9 3.50±0.1 饲喂不同维生素 A 含量对加州鲈肝脏脂肪和维生素 A 含量的影响 ± ±0.01a 1.56±0.01 5±0.00b 饲喂不同维生素 A 含量对加州鲈鱼体成分的影响(%) 76.4± 13.8±7 4.73± ±0 水分 粗蛋白 粗脂肪 粗灰分 的骨骼畸形症状 由表 4 可知 饲料中高水平维生 素 A 对加州鲈鱼体常规营养成分的影响不显著 P> 加州鲈肝脏维生素 A 含量与饲料维生素 A 添加水平的关系.4 饲料维生素 A 水平对加州鲈血清生化指标的 影响 由表 6 可知 饲料中添加高水平的维生素 A 显著 1.70±0.7b 55.68±4.87a 降低了加州鲈血清中的总胆固醇 TCHO 含量 P< 0.05 但对血清甘油三酯 TG 含量的影响不显著 P> 0.05 各维生素 A 添加组的血清碱性磷酸酶 ALP 活性低于对照组 但组间差异不显著 P>0.05 饲料 中添加高水平的维生素 A 提高了加州鲈血清中谷丙 转氨酶 GTP 和谷草转氨酶 GOT 的活性 且添加量 为 mg/kg 组的血清 GOT 活性显著高于对照组 P< 讨论 维生素 A 是鱼类生长发育必需的营养素 但饲料 中维生素 A 水平过高也会抑制鱼类的生长 研究发 现 日本比目鱼 Paralichthys olivaceus 幼鱼摄食过量 的维生素 A IU/kg 会出现生长受阻 骨骼畸 形及体长变短等症状 摄食饲料维生素 A 含量为 938 mg/kg 后 大西洋鲑 Salmo salar 出现死亡率增 加 生长下降及脊椎生长异常等中毒症状 高水平维 37

5 饲 养 试 验 016 年第 37 卷第 1 期 表6 总胆固醇(mmol/l) 甘油三酯(mmol/l) 碱性磷酸酶(金氏单位/100 ml) 谷丙转氨酶(U/l) 谷草转氨酶(U/l) 饲喂不同维生素 A 含量对加州鲈血清生化指标的影响 1.11±0.95a.54±7 1.81± ± ±16.03b 16.47±0.3b 17.97±3b 17.61±3b 3.6±8.46±0.31 3± 1.55±7 1.3± ±6 13.4±3.1 10± ± ±3.94ab ±19.01ab 13.3±7.97a 生素 A IU/kg 也会导致尼罗罗非鱼 Oreochro mis niloticus 出现生长受阻 厌食 死亡率增加 尾鳍 坏死 体表出血及骨骼畸形等相似的中毒症状 在本 试验条件下 当饲料维生素 A 为 ~ mg/kg 时 加州鲈的增重率和特定生长率随着维生素 A 水平的增 加而升高 但当饲料维生素 A 水平高达 mg/kg 时 加州鲈的增重率和特定生长率却出现下降的趋 势 同时出现轻微的骨骼畸形症状 这与杨奇慧等 (007)在幼建鲤 Cyprinus carpio var. jian 上的研究结 果相似 已有研究表明 杂交条纹鲈 Morone chrys ops female Morone saxatilis 饲料维生素 A 的需要量 在 1~4 mg/kg 而 Brecka 等(1996)也建议加州鲈 饲料中维生素 A 的适宜添加量为 0 mg/kg 本试验 研究结果表明 在需要量基础上适当提高维生素 A 水 平可以促进加州鲈的生长 但超过一定量的维生素 A mg/kg 反而不利于加州鲈的生长和骨骼发育 饲料中维生素 A 水平过高除了表现出明显的外 观症状 还会引起内脏器官和体成分发生变化 摄 食维生素 A 含量高达 750 mg/kg 的饲料可导致溪红 点鲑 Salvelinus fontinalis 的体脂含量和肝脏指数降 低 杨奇慧等(007)也发现 摄食维生素 A 含量在 mg/kg 以上的饲料可导致幼建鲤的肝体指数 脾 体指数和后肾体指数下降 而高水平维生素 A IU/kg 会导致尼罗罗非鱼肝脾肿大 本试验发 现 摄食高水平维生素A mg/kg以上 的饲料显著 提高了加州鲈的脏体比 降低了肝脏脂肪含量 但对肝 体指数和体成分含量没有明显的影响 关于维生素 A 对鱼类机体组织器官的影响机制目前还不清楚 需要进 一步的深入研究 此外 饲料中维生素A水平还会显著 影响鱼类肝脏维生素A的含量 本试验发现 加州鲈肝 脏的维生素 A 含量随着饲料维生素 A 含量的增加而呈 显著线性增加 这与杨奇慧等(007)在幼建鲤上的研究 结果一致 说明肝脏是机体贮存维生素A的主要器官 其维生素 A 含量的变化直接反映机体维生素 A 的摄入 情况 同时具有调节外周维生素A含量的能力 由于血清中大部分 ALP 来源于肝脏与骨骼 因此 血清 ALP 活性常作为检测肝脏和骨骼代谢状况的指 ±1.0b 1.99± ±0 13.8± ±5ab 标之一 通常认为 当血清 ALP 活性异常升高有 种 情况 一是生理性升高 二是病理性偏高 但本研究 发现 高水平维生素 A 降低了血清 ALP 的活性 这与 阎佩佩等在肉鸡和 Liu 等在武昌鱼 Megalobrama am blycephala 上的研究结果一致 可能是过量维生素 A 抑制了加州鲈成骨细胞活性 对骨骼发育造成不利影 响 致使血清 ALP 活性下降 Moren 等认为过高或过 低的维生素 A 水平都会降低大西洋比目鱼 Hippo glossus hippoglossus 小肠刷状缘膜的 ALP 活性 此 外 血清 ALP 活性还受其它多种因素的影响 如饲料 中锌和维生素 D3 的水平 因此 关于维生素 A 对加州 鲈血清 ALP 的影响机制还需进一步的深入研究 在正常的新陈代谢过程中 动物血清中会维持一 定水平的转氨酶活性 但当肝脏组织发生病变时 细胞 内的转氨酶大量地释放到血清中 从而引起血清中的 GOT 和 GTP 活性超过正常水平 因此 血清转氨酶活性 大小可反映肝脏受损的程度 本试验中 摄食高水平维 生素 A 的加州鲈血清 GOT 和 GTP 活性都高于维生素 A 低水平组 对照组 尤其是 mg/kg 添加组 GOT 的 活性显著高于对照组的 说明过量添加维生素A对加州 鲈肝脏造成了一定的毒害作用 饲料中添加过量维生 素 A 也会引起日本比目鱼和武昌鱼血清GOT 和 GTP 水 平的升高 而肝脏又是合成胆固醇和甘油三酯的主要器 官 当肝脏严重损伤时 胆固醇和甘油三酯合成减少 血 清中胆固醇和甘油三酯的含量也就随之下降 本试验 中 血清总胆固醇的含量随着饲料维生素A水平的增加 而显著降低 说明尽管高水平 ~ mg/kg 维 生素A对加州鲈生长的抑制作用不是很明显 但对加州 鲈肝脏还是会产生一定的毒害作用 这也可能是加州鲈 肝脏脂肪含量降低的其中一个原因 4 结论 在本试验条件下 饲料中添加适宜含量的维生素 A 可以促进加州鲈的生长 过量的维生素 A 会抑制加 州鲈的生长 建议加州鲈饲料维生素A的添加量不能高 于 mg/kg 更为确切的添加量有待进一步的研究 参考文献 7 篇 刊略 需者可函索 编辑 沈桂宇 guiyush@16.com

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