广州市科技计划项目申请书
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- 谟便 郭
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1 申 请 编 号 : 申 报 年 度 : 2013 天 河 区 科 技 计 划 项 目 申 报 书 项 目 名 称 : 白 兔 模 型 近 胆 囊 肝 脏 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 的 安 全 性 研 究 申 报 单 位 : 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 计 划 类 别 : 研 发 类 技 术 领 域 : 生 物 医 药 参 加 单 位 : 申 报 日 期 : 广 州 市 天 河 区 科 技 和 信 息 化 局 (2013 年 版 )
2 一 项 目 基 本 信 息 项 目 名 称 项 目 概 述 ( 包 括 项 目 主 要 研 究 内 容 主 要 创 新 点 完 成 后 的 主 要 成 果 主 要 用 途 和 使 用 范 围, 限 500 字 以 内 ) 白 兔 模 型 近 胆 囊 肝 脏 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 的 安 全 性 研 究 中 国 是 原 发 性 肝 癌 的 高 发 的 国 家, 肝 癌 病 死 率 占 恶 性 肿 瘤 的 第 二 位 80% 患 者 肿 瘤 发 现 时 已 经 不 能 进 行 手 术 切 除, 对 肿 瘤 消 融 技 术 是 目 前 不 可 切 除 肝 癌 的 一 种 可 选 择 的 治 疗 方 法 不 可 逆 电 穿 孔 是 最 近 刚 刚 开 始 在 临 床 应 用 的 肿 瘤 消 融 新 技 术, 该 技 术 利 用 高 压 直 流 电 发 出 的 强 大 电 场 的 作 用, 在 细 胞 膜 上 产 生 多 个 细 孔, 导 致 即 时 肿 瘤 细 胞 死 亡 目 前, 不 可 逆 电 穿 孔 主 要 应 用 在 肝 癌 和 胰 腺 癌 的 临 床 治 疗 当 中 由 于 不 可 逆 电 穿 孔 的 研 究 处 于 初 级 阶 段, 其 消 融 肝 脏 肿 瘤 的 适 应 症 和 禁 忌 症 也 没 有 人 进 行 深 入 研 究 而 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 肝 脏 也 不 是 完 全 安 全, 该 技 术 也 可 能 产 生 一 定 的 问 题 为 了 尽 量 完 全 消 融 肿 瘤, 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 范 围 需 要 超 过 肿 瘤 边 缘 厘 米, 这 种 过 大 的 消 融 范 围 就 可 能 对 周 边 脏 器 产 生 危 险, 尤 其 是 对 肿 瘤 位 置 解 剖 学 比 较 复 杂, 如 靠 近 胆 囊 的 位 置, 不 可 逆 电 穿 孔 存 在 产 生 胆 囊 损 伤 的 可 能 为 此, 本 研 究 利 用 新 西 兰 白 兔 模 型, 在 白 兔 肝 脏 靠 近 胆 囊 处 厘 米 处 进 行 不 可 逆 电 穿 孔 消 融, 观 察 消 融 7 天 后 肝 脏 的 消 融 情 况 和 胆 囊 的 病 理 损 伤, 以 探 讨 不 可 逆 电 穿 孔 对 于 靠 近 胆 囊 的 肝 脏 消 融 的 有 效 性 和 安 全 性 姓 名 性 别 年 龄 出 生 年 月 最 高 学 历 学 位 职 务 梁 冰 男 本 科 本 科 副 主 任 职 称 现 所 从 事 专 业 联 系 电 话 手 机 项 目 负 责 人 主 治 医 师 中 医 外 科 coolicelb@163.com 国 外 学 习 经 历 ( 填 报 一 年 以 上 学 习 经 历, 并 附 相 关 证 明 材 料 ) 起 止 年 月 国 家 及 单 位 专 业 学 科 项 目 所 属 技 术 领 域 4 1. 电 子 信 息 2. 软 件 与 信 息 服 务 3. 高 技 术 服 务 业 4. 生 物 医 药 5. 新 能 源 高 效 节 能 与 环 保 技 术 6. 新 材 料 7. 光 机 电 一 体 化 8. 高 新 农 业 9. 其 它 一 一 研 发 类 二 转 化 类 三 服 务 类 四 软 课 题 类 申 请 项 目 类 别 科 技 攻 关 项 目 2. 成 果 转 化 项 目 3. 产 学 研 合 作 项 目 4. 小 微 企 业 技 术 创 新 项 目 5. 孵 化 器 平 台 建 设 项 目 6. 新 一 代 信 息 技 术 公 共 管 理 服 务 平 台 7. 软 科 学 研 究 项 目 8. 信 息 化 专 项 9. 市 级 以 上 科 技 计 划 项 目 配 套 专 项 10. 医 疗 卫 生 专 项 申 请 资 助 经 费 5 万 元 申 请 资 助 方 式 1 1. 无 偿 资 助 2. 贷 款 贴 息 项 目 起 止 时 间 2014 年 1 月 1 日 至 2015 年 12 月 31 日 1
3 成 果 提 供 形 式 ( 可 多 选 ) 软 件 著 作 权 2. 新 产 品 3. 新 装 置 4. 新 材 料 5. 新 工 艺 方 法 新 模 式 6. 研 究 报 告 7. 论 文 论 著 9. 其 它 项 目 技 术 来 源 5 1. 自 有 技 术 2. 产 学 研 合 作 开 发 技 术 3. 国 内 技 术 4. 引 进 技 术 本 单 位 消 化 创 新 5. 国 外 技 术 9. 其 它 项 目 知 识 产 权 情 况 种 类 数 量 现 已 取 得 总 数 专 利 申 请 总 数 发 明 专 利 实 用 新 型 外 观 设 计 总 数 专 利 授 权 总 数 发 明 专 利 实 用 新 型 外 观 设 计 软 件 版 权 数 其 它 知 识 产 权 预 期 取 得 其 它 产 权 具 体 说 明 : 技 术 水 平 2 1. 国 际 领 先 2. 国 际 先 进 3. 国 内 领 先 4. 国 内 先 进 9. 其 它 项 目 现 处 阶 段 1 1. 研 发 阶 段 2. 小 试 阶 段 3. 中 试 阶 段 4. 批 量 ( 规 模 ) 生 产 项 目 主 要 优 势 ( 可 多 选 ) 填 补 国 内 空 白 2. 国 内 短 缺 产 品 3. 国 内 市 场 前 景 广 阔 4. 国 际 市 场 竞 争 力 强 5. 创 新 性 突 出 6. 经 济 效 益 显 著 7. 社 会 效 益 显 著 9. 其 它 效 益 阶 段 年 总 产 值 年 销 售 总 额 年 利 润 总 额 年 纳 税 总 额 项 目 经 济 规 模 ( 万 元 ) 现 已 形 成 项 目 完 成 时 预 期 项 目 立 项 基 本 信 息 ( 申 报 市 级 以 上 科 技 计 划 项 目 配 套 专 项 项 目 必 须 填 写 ) 原 立 项 编 号 立 项 级 别 ( 国 家 级 / 省 级 / 市 级 ) 立 项 时 间 已 获 资 助 金 额 ( 万 元 ) 项 目 类 别 项 目 名 称 2
4 二 申 请 单 位 基 本 信 息 单 位 名 称 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 网 址 成 立 时 间 2001 办 公 地 址 广 州 市 天 河 区 棠 德 西 路 2 号 邮 政 编 码 生 产 场 所 地 址 广 州 市 天 河 区 棠 德 西 路 2 号 邮 政 编 码 地 税 税 所 广 州 市 天 河 区 地 方 税 务 局 七 科 所 属 税 所 纳 税 代 码 纳 税 代 码 国 税 税 所 纯 地 税 户 纳 税 代 码 纳 税 代 码 法 定 代 表 人 联 系 人 姓 名 性 别 出 生 年 月 最 高 学 历 联 系 电 话 手 机 王 怀 东 男 研 究 生 姓 名 职 务 电 话 手 机 传 真 何 丽 华 科 教 部 副 主 任 quincyhe@163. com 年 度 年 末 从 业 人 员 数 技 术 人 员 研 发 人 员 硕 士 博 士 中 级 职 称 高 级 职 称 近 三 年 职 工 情 况 ( 人 数 ) 年 度 总 数 专 利 申 请 总 数 发 明 专 利 实 用 新 型 外 观 设 计 总 数 专 利 授 权 总 数 发 明 专 利 实 用 新 型 外 观 设 计 软 件 版 权 数 其 它 知 识 产 权 单 位 拥 有 知 识 产 权 情 况 ( 近 三 年 ) 其 它 知 识 产 权 需 具 体 说 明 : 3
5 单 位 性 质 与 运 行 状 况 单 位 注 册 登 记 类 型 政 府 部 门 02. 高 等 院 校 03. 科 研 机 构 04. 国 有 企 业 05. 集 体 企 业 06. 股 份 合 作 企 业 07. 联 营 企 业 08. 有 限 责 任 公 司 09. 股 份 有 限 公 司 10. 私 营 企 业 11. 港 澳 台 商 投 资 企 业 12. 外 商 投 资 企 业 99. 其 他 单 位 资 金 情 况 注 册 时 间 注 册 资 本 ( 万 元 ) 总 资 产 ( 万 元 ) 总 负 债 ( 万 元 ) 资 产 负 债 率 (%) % 单 位 特 性 9 1. 高 新 技 术 企 业 2. 省 市 软 件 企 业 3. 留 学 人 员 创 办 企 业 4. 园 区 企 业 5.ISO 9000 系 列 认 证 6.ISO14000 认 证 7.CMM 认 证 9. 其 它 产 品 1 年 销 售 额 万 元 毛 利 率 主 要 产 品 产 品 2 年 销 售 额 万 元 毛 利 率 产 品 3 年 销 售 额 万 元 毛 利 率 近 三 年 财 务 状 况 ( 万 元 ) 实 缴 税 销 售 收 年 利 研 发 经 占 销 售 收 年 度 营 业 收 入 增 长 率 增 长 率 增 长 率 收 入 税 费 投 入 入 比 例 % % % 21% % % % 2% % % % 项 目 完 成 时 单 位 发 展 情 况 ( 预 期 目 标 ) 营 业 收 入 ( 万 元 ) 增 长 率 120% 实 缴 税 收 ( 万 元 ) 868 增 长 率 120% 研 发 经 费 投 入 总 额 ( 万 元 ) 300 增 长 率 172% 从 业 人 员 数 ( 人 ) 250 增 长 率 128% 高 级 人 才 数 其 中, 博 士 人 数 其 中, 高 级 职 称 人 ( 人 ) ( 人 ) 数 ( 人 ) 26 知 识 产 权 情 况 总 数 专 利 申 请 总 数 发 明 实 用 专 利 新 型 外 观 设 计 总 数 专 利 授 权 总 数 发 明 实 用 专 利 新 型 外 观 设 计 软 件 版 权 数 其 它 知 识 产 权 4
6 三 参 加 单 位 基 本 信 息 参 加 单 位 1: 单 位 名 称 : 单 位 地 址 : 单 位 类 型 : 法 定 代 表 人 : 联 系 电 话 : 联 系 人 : 联 系 电 话 : 参 加 形 式 : 参 加 单 位 2: 单 位 名 称 : 单 位 地 址 : 单 位 类 型 : 法 定 代 表 人 : 联 系 电 话 : 联 系 人 : 联 系 电 话 : 参 加 形 式 : 参 加 单 位 3: 单 位 名 称 : 单 位 地 址 : 单 位 类 型 : 法 定 代 表 人 : 联 系 电 话 : 联 系 人 : 联 系 电 话 : 参 加 形 式 : 参 加 单 位 4: 单 位 名 称 : 单 位 地 址 : 单 位 类 型 : 法 定 代 表 人 : 联 系 电 话 : 联 系 人 : 联 系 电 话 : 参 加 形 式 : 5
7 四 立 项 依 据 着 重 说 明 立 项 的 目 的 意 义 ; 国 内 外 同 类 问 题 研 究 开 发 现 状 和 发 展 趋 势 ( 包 括 知 识 产 权 状 况 ) 市 场 需 求 和 成 果 应 用 与 产 业 化 前 景 等 我 国 是 原 发 性 肝 癌 的 高 发 的 国 家, 肝 癌 病 死 率 占 恶 性 肿 瘤 的 第 二 位 [1] 原 发 性 肝 癌 手 术 切 除 是 目 前 肝 癌 患 者 获 得 长 期 生 存 乃 至 根 治 的 主 要 方 法 之 一, 但 能 获 得 手 术 切 除 的 肝 癌 患 者 不 足 20% 对 于 不 可 切 除 的 原 发 性 肝 癌, 化 疗 成 为 最 主 要 的 治 疗 手 段, 但 由 于 其 可 能 的 副 作 用, 其 疗 效 仍 然 有 限 近 年 来, 微 创 外 科 和 肿 瘤 局 部 治 疗 的 兴 起 为 肝 癌 的 治 疗 开 辟 了 新 的 方 向 目 前, 射 频 消 融 [2], 微 波 消 融 [3] [4] [5], 冷 冻 消 融 和 不 可 逆 电 穿 孔 都 成 功 在 肝 癌 临 床 上 成 功 应 用 由 于 上 述 经 皮 消 融 技 术 并 发 症 较 少, 肿 瘤 消 融 明 确, 患 者 生 存 时 间 可 显 著 延 长, 上 述 技 术 的 开 展 可 能 为 不 可 切 除 原 发 性 肝 癌 治 疗 提 供 了 的 新 的 方 向 和 希 望 不 可 逆 电 穿 孔 是 最 近 刚 刚 开 始 在 临 床 应 用 的 肿 瘤 消 融 新 技 术, 该 技 术 利 用 高 压 直 流 电 发 出 的 强 大 电 场 的 作 用, 在 细 胞 膜 上 产 生 多 个 细 孔 从 而 不 可 逆 转 地 破 坏 细 胞, 导 致 即 时 肿 瘤 细 胞 死 亡 [6; 7] 由 于 消 融 产 生 在 细 胞 膜 上 的 细 孔 为 纳 米 级 别 的 空 洞, 该 技 术 又 被 称 为 纳 米 刀 (AngioDynamics) 不 可 逆 电 穿 孔 有 以 下 几 个 特 点 :1, 不 可 逆 电 穿 孔 可 通 过 诱 导 细 胞 凋 亡, 而 引 发 肿 瘤 组 织 坏 死 [8; 9; 10] 2, 不 像 已 有 的 热 消 融 技 术, 如 射 频 消 融, 微 波 消 融 和 冷 冻 消 融, 不 可 逆 电 穿 孔 无 须 热 能, 即 通 过 改 变 细 胞 膜 通 透 性 导 致 组 织 死 亡 因 此, 其 不 会 受 到 热 沉 效 应 的 影 响,3, 不 可 逆 电 穿 孔 可 在 消 融 区 和 非 消 融 区 产 生 明 显 的 边 界, 这 将 最 大 可 能 的 减 少 对 肿 瘤 组 织 的 损 伤, 减 少 并 发 症 的 发 生 4, 消 融 时 间 短 与 传 统 消 融 技 术 ( 至 少 需 要 30 分 钟 到 几 小 时 ) 相 比, 不 可 逆 电 穿 孔 可 在 微 秒 到 毫 秒 治 疗 时 间 内 有 效 导 致 组 织 死 亡 非 热 细 胞 死 亡 及 治 疗 时 间 显 著 减 少 5, 对 神 经 和 大 血 管 的 保 护 作 用 [11; 12; 13; 14] 6, 使 得 不 可 逆 电 穿 孔 可 以 在 富 含 大 血 管 或 者 神 经 的 部 位 消 融 肿 瘤, 而 不 用 担 心 并 发 症 的 发 生 因 此, 由 于 不 可 逆 电 [15; 16] 穿 孔 的 优 势, 该 技 术 在 肝 癌 消 融 方 面 的 临 床 应 用, 具 有 非 常 广 阔 的 前 景 由 于 肝 脏 组 织 因 其 血 供 较 为 丰 富, 局 部 微 环 境 差 异 较 大, 不 同 的 消 融 程 序 对 于 消 融 效 果 影 响 较 大 由 于 不 可 逆 电 穿 孔 没 有 热 沉 效 应, 该 技 术 在 治 疗 肝 脏 中 接 近 血 管 的 肿 瘤 上 独 具 优 势 [17] 但 是, 由 于 不 可 逆 电 穿 孔 的 研 究 处 于 初 级 阶 段, 其 消 融 肝 脏 肿 瘤 的 适 应 症 和 禁 忌 症 也 没 有 人 进 行 深 入 研 究 而 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 肝 脏 也 不 是 完 全 安 全, 该 技 术 也 可 能 产 生 一 定 的 问 题 消 融 探 针 插 入 肝 脏 内 时, 任 何 时 间 内 都 可 能 出 现 出 血 瘘 管 形 成 或 感 染 的 风 险, 特 别 是 在 同 时 使 用 两 或 三 根 探 针 的 时 候 同 时, 为 了 尽 量 完 全 消 融 肿 瘤, 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 范 围 需 要 超 过 肿 瘤 边 缘 厘 米, 这 种 过 大 的 消 融 范 围 就 可 能 对 周 边 脏 器 产 生 危 险, 尤 其 是 对 肿 瘤 位 置 解 剖 学 比 较 复 杂, 如 靠 近 胆 囊 的 位 置, 不 可 逆 电 穿 孔 存 在 产 生 胆 囊 损 伤 的 可 能 为 此, 本 研 究 利 用 新 西 兰 白 兔 模 型, 分 别 在 白 兔 肝 脏 靠 近 胆 囊 处 和 1.5 厘 米 处 进 行 6
8 不 可 逆 电 穿 孔 消 融, 观 察 消 融 7 天 后 肝 脏 的 消 融 情 况 和 胆 囊 的 病 理 损 伤, 以 探 讨 不 可 逆 电 穿 孔 对 于 靠 近 胆 囊 的 肝 脏 消 融 的 有 效 性 和 安 全 性 参 考 文 献 [1]A. Jemal, T. Murray, E. Ward, A. Samuels, R.C. Tiwari, A. Ghafoor, E.J. Feuer, M.J. Thun, Cancer statistics, CA: a cancer journal for clinicians 55 (2005) [2]A. Cucchetti, F. Piscaglia, M. Cescon, G. Ercolani, A.D. Pinna, Systematic review of surgical resection vs radiofrequency ablation for hepatocellular carcinoma. World journal of gastroenterology : WJG 19 (2013) [3]S. Itoh, Y. Ikeda, H. Kawanaka, T. Okuyama, K. Kawasaki, D. Eguchi, D. Korenaga, K. Takenaka, Efficacy of surgical microwave therapy in patients with unresectable hepatocellular carcinoma. Annals of surgical oncology 18 (2011) [4]F. Mu, L. Niu, H. Li, M. Liao, L. Li, C. Liu, J. Chen, J. Li, J. Zuo, K. Xu, Percutaneous comprehensive cryoablation for metastatic hepatocellular cancer. Cryobiology 66 (2013) [5]W. Cheung, H. Kavnoudias, S. Roberts, B. Szkandera, W. Kemp, K.R. Thomson, Irreversible electroporation for unresectable hepatocellular carcinoma: initial experience and review of safety and outcomes. Technology in cancer research & treatment 12 (2013) [6]G. Long, G. Bakos, P.K. Shires, L. Gritter, J.W. Crissman, J.L. Harris, J.W. Clymer, Histological and Finite Element Analysis of Cell Death due to Irreversible Electroporation. Technology in cancer research & treatment (2013). [7]E.W. Lee, C.T. Loh, S.T. Kee, Imaging guided percutaneous irreversible electroporation: ultrasound and immunohistological correlation. Technology in cancer research & treatment 6 (2007) [8]D. Xiao, C. Yao, H. Liu, C. Li, J. Cheng, F. Guo, L. Tang, Irreversible electroporation and apoptosis in human liver cancer cells induced by nanosecond electric pulses. Bioelectromagnetics (2013). [9]Y.J. Lee, D.S. Lu, F. Osuagwu, C. Lassman, Irreversible electroporation in porcine liver: acute computed tomography appearance of ablation zone with histopathologic correlation. Journal of computer assisted tomography 37 (2013) [10]C.R. Schmidt, P. Shires, M. Mootoo, Real-time ultrasound imaging of irreversible electroporation in a porcine liver model adequately characterizes the zone of cellular necrosis. HPB : the official journal of the International Hepato Pancreato Biliary Association 14 (2012) [11]W. Li, Q. Fan, Z. Ji, X. Qiu, Z. Li, The effects of irreversible electroporation (IRE) on nerves. PloS one 6 (2011) e [12]E. Maor, A. Ivorra, J. Leor, B. Rubinsky, The effect of irreversible electroporation on blood vessels. Technology in cancer research & treatment 6 (2007) [13]Y.J. Lee, D.S. Lu, F. Osuagwu, C. Lassman, Irreversible electroporation in porcine liver: short- and long-term effect on the hepatic veins and adjacent tissue by CT with pathological correlation. Investigative radiology 47 (2012) [14]T.P. Kingham, A.M. Karkar, M.I. D'Angelica, P.J. Allen, R.P. Dematteo, G.I. Getrajdman, C.T. Sofocleous, S.B. Solomon, W.R. Jarnagin, Y. Fong, Ablation of perivascular hepatic malignant tumors with irreversible electroporation. Journal of the American College of Surgeons 215 (2012) [15]K.P. Charpentier, Irreversible electroporation for the ablation of liver tumors: are we there yet? Arch Surg 147 (2012) [16]G. Narayanan, Irreversible electroporation for treatment of liver cancer. Gastroenterology & hepatology 7 (2011) [17]R. Cannon, S. Ellis, D. Hayes, G. Narayanan, R.C. Martin, 2nd, Safety and early efficacy of irreversible electroporation for hepatic tumors in proximity to vital structures. Journal of surgical oncology 107 (2013)
9 五 项 目 内 容 描 述 项 目 研 究 内 容 和 范 围 ; 研 究 方 法 技 术 路 线 工 艺 流 程 和 实 施 方 案 ; 拟 解 决 的 关 键 问 题 ; 主 要 创 新 点 和 特 色 1 研 究 内 容 和 范 围 原 发 性 肝 癌 是 世 界 范 围 内 对 人 类 生 存 威 胁 较 大 的 致 死 性 疾 病, 而 不 可 切 除 的 肝 癌 占 肝 癌 里 面 很 大 的 80% 由 于 不 能 通 过 手 术 治 疗, 其 治 疗 手 段 有 限, 治 疗 效 果 相 当 较 长, 病 人 病 死 率 较 高 不 可 逆 电 穿 孔 是 最 近 刚 刚 开 始 在 临 床 应 用 的 肿 瘤 消 融 新 技 术, 该 技 术 利 用 高 压 直 流 电 发 出 的 强 大 电 场 的 作 用, 在 细 胞 膜 上 产 生 多 个 细 孔, 导 致 即 时 肿 瘤 细 胞 死 亡 目 前, 不 可 逆 电 穿 孔 主 要 应 用 在 肝 癌 和 胰 腺 癌 的 临 床 治 疗 当 中 由 于 不 可 逆 电 穿 孔 的 研 究 处 于 初 级 阶 段, 其 消 融 肝 脏 肿 瘤 的 适 应 症 和 禁 忌 症 也 没 有 人 进 行 深 入 研 究 而 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 肝 脏 也 不 是 完 全 安 全, 该 技 术 也 可 能 产 生 一 定 的 问 题 为 了 尽 量 完 全 消 融 肿 瘤, 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 范 围 需 要 超 过 肿 瘤 边 缘 厘 米, 这 种 过 大 的 消 融 范 围 就 可 能 对 周 边 脏 器 产 生 危 险, 尤 其 是 对 肿 瘤 位 置 解 剖 学 比 较 复 杂, 如 靠 近 胆 囊 的 位 置, 不 可 逆 电 穿 孔 存 在 产 生 胆 囊 损 伤 的 可 能 为 此, 本 研 究 利 用 新 西 兰 白 兔 模 型, 在 白 兔 肝 脏 靠 近 胆 囊 处 和 1.5 厘 米 处 进 行 不 可 逆 电 穿 孔 消 融, 观 察 消 融 7 天 后 肝 脏 的 消 融 情 况 和 胆 囊 的 病 理 损 伤, 以 探 讨 不 可 逆 电 穿 孔 对 于 靠 近 胆 囊 的 肝 脏 消 融 的 有 效 性 和 安 全 性 2 研 究 方 法 2.1 实 验 动 物 动 物 选 择 : 实 验 用 新 西 兰 大 白 兔 15 只 体 重 kg, 雌 雄 不 限 所 有 动 物 进 行 标 准 兔 舍 圈 养 卫 生 水 及 标 准 兔 饲 料 喂 养 动 物 分 组 :10 只 实 验 兔, 随 机 分 为 A B C D 组, 每 组 5 只,A 实 验 兔 为 对 照 B C D 为 实 验 组 对 照 组 正 常 进 行 开 腹 手 术, 暴 露 肝 脏, 插 针 但 不 进 行 不 可 逆 电 穿 孔,B C D 为 实 验 组 进 行 不 可 逆 电 穿 孔, 插 针 部 位 靠 近 胆 囊 分 别 距 离 为 0.5 厘 米,1.0 厘 米,1.5 厘 米 2.2 动 物 麻 醉 实 验 兔 术 前 禁 食 8~12h, 禁 水 2~4h 术 前 以 盐 酸 氯 胺 酮 2ml 和 长 托 宁 0.2mg 肌 肉 注 射 诱 导 麻 醉, 当 实 验 兔 出 现 角 膜 反 射 迟 钝 及 肌 张 力 减 低 时, 将 实 验 兔 固 定 于 动 物 手 术 台 上, 行 气 管 插 管 (3mm), 听 诊 双 肺 呼 吸 音 清 晰 对 称 后 固 定 导 管, 接 小 动 物 麻 醉 呼 吸 机 控 制 通 气, 潮 气 量 20ml/ 次, 频 率 50 次 / 分, 给 予 以 1.0%~2.0% 浓 度 异 氟 醚 术 中 维 持 麻 醉, 肌 注 万 可 松 0.2mg 使 术 中 肌 肉 松 弛 术 部 备 皮, 心 电 监 护, 常 规 开 腹, 行 不 可 逆 电 穿 孔 术, 术 程 30min, 术 后 肌 注 1ml 阿 托 品 和 1ml 新 斯 的 明, 待 实 验 兔 可 自 主 呼 吸 后 拔 气 管 插 管, 完 成 麻 醉 8
10 2.3 肝 不 可 逆 电 穿 孔 术 实 验 兔 麻 醉 成 功 后 固 定 于 实 验 手 术 台 上, 常 规 消 毒, 铺 无 菌 洞 巾, 从 胸 骨 剑 突 下 沿 腹 白 线 纵 行 切 口 依 次 切 开 皮 肤 皮 下 组 织 和 腹 肌, 开 口 约 10cm 找 出 肝 脏 后, 将 纳 米 刀 正 负 极 电 针 与 胆 囊 纵 切 面 方 向 平 行 垂 直 插 入 肝 右 叶 腹 侧 面, 插 针 深 度 为 0.5cm 根 据 实 验 B C D 组 分 组 插 针 部 位 靠 近 胆 囊 距 离 分 别 为 0.5cm,1.0cm 和 1.5cm, 两 根 正 负 极 电 针 之 间 距 离 为 1.5cm (1500V/cm), 设 定 起 始 电 压 为 2250V 脉 冲 长 度 70ms 数 字 脉 冲 90Hz 启 动 纳 米 刀 消 融 系 统 ( 美 国 AngioDynamics 公 司 ) 不 可 逆 电 穿 孔 术 程 约 1min, 电 击 结 束 后, 拔 出 纳 米 刀, 完 成 不 可 逆 电 穿 孔 术 2.4 灶 区 的 影 像 学 观 察 将 实 验 兔 麻 醉 后 固 定 在 机 内,CT 平 扫 定 位 后, 耳 缘 静 脉 注 射 泛 影 葡 胺 6ml,CT 扫 描 显 示 肝 电 穿 孔 术 后 灶 区 影 像 学 改 变, 选 取 灶 区 最 大 层 面, 测 定 最 大 径 和 最 小 径 2.5 灶 区 观 察 与 病 理 取 材 电 穿 孔 术 后 7 天 对 实 验 兔 行 安 乐 死 后 开 腹 腔, 肉 眼 观 察 胆 囊 损 伤 情 况 及 肝 脏 灶 区 表 面 变 化 情 况 如 有 发 生 术 部 粘 连, 小 心 去 除 灶 区 周 围 粘 连 组 织, 尽 量 避 免 牵 拉, 以 减 少 机 械 性 损 伤 然 后 沿 原 针 道 垂 直 切 开 灶 区, 测 量 灶 区 表 面 最 大 径, 垂 直 径, 小 心 取 灶 区 部 分 肝 脏 胆 囊 主 胆 管 及 粘 连 组 织 于 中 性 甲 醛 中 固 定, 做 石 蜡 切 片 厚 度 为 5 mm, 苏 木 精 - 伊 红 溶 液 染 色 后 在 光 镜 下 观 察 组 织 学 改 变 2.6 实 验 室 检 测 分 别 在 电 穿 孔 术 前 术 后 第 3d 5d 和 7d 经 实 验 兔 心 脏 采 非 抗 凝 血 2ml,3000rpm 离 心 10min, 取 血 清 测 定 血 清 淀 粉 酶 谷 丙 转 氨 酶 (ALT) 谷 草 转 氨 酶 (AST) 术 前 术 后 改 变 2.7 统 计 分 析 实 验 数 据 以 美 国 GraphPad 公 司 Graphpad Prism 5 软 件 进 行 分 析 结 果 表 示 为 平 均 值 ± 标 准 偏 差 (±s) P<0.05 或 P<0.01 被 认 为 差 异 有 统 计 学 意 义 3 技 术 路 线 9
11 4 拟 解 决 的 关 键 问 题 在 白 兔 肝 脏 靠 近 胆 囊 处 0.5cm 1.0cm 1.5cm 处 进 行 不 可 逆 电 穿 孔 消 融, 观 察 消 融 7 天 后 肝 脏 的 消 融 情 况 和 胆 囊 的 病 理 损 伤, 以 探 讨 不 可 逆 电 穿 孔 对 于 靠 近 胆 囊 的 肝 脏 消 融 的 有 效 性 和 安 全 性, 并 寻 找 到 保 证 胆 囊 安 全 的 最 佳 消 融 范 围 5 主 要 创 新 点 和 特 色 利 用 美 国 刚 刚 研 发 成 功 的 纳 米 刀 进 行 白 兔 模 型 的 动 物 实 验, 以 探 讨 不 可 逆 电 穿 孔 治 疗 靠 近 胆 囊 处 肝 癌 的 安 全 性 和 有 效 性, 为 不 可 逆 电 穿 孔 治 疗 肝 细 胞 肝 癌 的 临 床 应 用 提 供 数 据 基 础 以 减 少 不 可 逆 电 穿 孔 治 疗 肝 癌 患 者 的 并 发 症 的 发 生 10
12 六 工 作 基 础 和 条 件 申 请 单 位 人 员 业 务 资 产 管 理 及 近 期 发 展 计 划 对 项 目 的 支 撑 能 力 ; 项 目 负 责 人 的 技 术 水 平 组 织 能 力 相 关 工 作 经 验 和 研 发 队 伍 情 况 ; 现 有 工 作 基 础 ( 如 已 取 得 的 阶 段 性 成 果 和 知 识 产 权 技 术 装 备 条 件 配 套 资 金 落 实 情 况 等 ); 其 它 优 势 ( 如 具 备 完 成 项 目 的 独 特 优 势 或 具 备 预 期 成 果 商 品 化 产 业 化 的 基 础 与 条 件 ) 主 要 研 究 平 台 : 临 床 研 究 平 台 : 广 州 复 大 肿 瘤 医 院 是 专 业 的 肿 瘤 医 疗 机 构,2010 年 12 月 刚 刚 被 评 为 国 家 重 点 肿 瘤 临 床 专 科 广 州 复 大 医 院 是 国 内 最 早 开 展 肿 瘤 冷 冻 治 疗 的 医 院 之 一, 广 州 复 大 医 院 已 完 成 冷 冻 治 疗 近 6000 例 次, 以 冷 冻 为 中 心 的 综 合 治 疗 模 式 已 成 为 广 州 复 大 医 院 治 疗 中 晚 期 肿 瘤 患 者 的 主 要 手 段, 其 微 创 性 安 全 性 和 有 效 性, 产 生 了 良 好 的 社 会 影 响 经 皮 介 入 冷 冻 治 疗 胰 腺 癌 技 术, 也 在 广 州 复 大 医 院 进 行 了 初 步 开 展, 效 果 显 著 同 时, 广 州 复 大 医 院 已 经 系 统 整 理 保 存 临 床 信 息, 建 立 了 临 床 样 本 库 在 肺 癌 和 肝 癌 冷 冻 治 疗 领 域 也 进 行 了 临 床 观 察, 相 关 工 作 经 验 丰 富 实 验 室 平 台 : 广 州 复 大 医 院 在 卫 生 部 重 点 专 科 的 支 持 下, 建 立 了 中 心 实 验 室 中 心 实 验 室 建 筑 面 积 300 平 方 米, 拥 有 进 行 整 套 分 子 生 物 学 实 验 室 常 用 检 测 仪 器 和 相 关 技 术 (PCR,RT PCR,Western Blot 等 ) 本 次 实 验 的 分 子 生 物 学 部 分, 主 要 在 此 完 成 同 时 广 州 复 大 医 院 与 北 京 大 学 肿 瘤 医 院 肿 瘤 分 子 生 物 学 实 验 室 吕 有 勇 教 授 建 立 长 期 合 作 关 系, 将 保 障 生 物 学 作 用 机 制 与 临 床 评 价 研 究 工 作 的 实 施 11
13 七 预 期 目 标 与 风 险 预 测 成 果 形 式 数 量 及 验 收 指 标 ( 包 括 技 术 指 标 经 济 指 标 及 预 期 社 会 效 益 ), 跨 年 度 项 目 应 增 加 阶 段 验 收 指 标 (1) 成 果 形 式 : 根 据 众 多 国 内 外 文 献 记 载, 我 们 有 充 分 理 由 认 为 本 项 研 究 可 获 成 果, 并 能 直 接 应 用 于 临 床, 并 对 肝 癌 癌 临 床 治 疗 有 重 大 意 义 并 在 国 内 外 相 关 核 心 杂 志 上 发 表 论 文 1-2 篇 (2) 科 学 价 值 分 析 : 利 用 美 国 刚 刚 研 发 成 功 的 纳 米 刀 进 行 白 兔 模 型 的 动 物 实 验, 以 探 讨 不 可 逆 电 穿 孔 治 疗 靠 近 胆 囊 处 肝 癌 的 安 全 性 和 有 效 性, 为 不 可 逆 电 穿 孔 治 疗 肝 细 胞 肝 癌 的 临 床 应 用 提 供 数 据 基 础 以 减 少 不 可 逆 电 穿 孔 治 疗 肝 癌 患 者 的 并 发 症 的 发 生 (3) 社 会 效 益 分 析 : 肝 细 胞 肝 癌 的 治 疗 是 世 界 性 难 题 之 一 本 研 究 结 果 将 使 胰 腺 癌 患 者 受 益, 并 可 延 伸 到 其 他 癌 症 的 治 疗, 将 产 生 良 好 的 社 会 影 响 (4) 经 济 效 益 分 析 : 本 研 究 结 果 将 对 改 善 肝 癌 病 人 的 疗 效 作 出 贡 献, 将 在 扩 大 医 院 影 响 力 的 同 时 产 生 良 好 的 经 济 效 益, 同 时 为 国 家 创 造 更 多 外 汇 ( 我 院 病 人 构 成 约 70% 来 自 国 外 ) 技 术 风 险 市 场 风 险 管 理 风 险 分 析 12
14 八 项 目 计 划 进 度 及 阶 段 成 果 时 间 进 度 主 要 实 施 内 容 阶 段 成 果 及 形 式 2014 年 01 月 至 2014 年 12 月 白 兔 模 型 近 胆 囊 肝 脏 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 成 功 进 行 试 验, 寻 找 到 相 对 安 全 的 不 可 逆 电 穿 孔 消 融 方 式 2015 年 01 月 至 2015 年 12 月 分 析 实 验 结 果, 发 表 文 章 1-2 篇 核 心 期 刊 文 章 年 月 日 至 年 月 日 年 月 日 至 年 月 日 九 项 目 组 人 员 情 况 项 目 负 责 人 序 号 姓 名 年 龄 职 务 职 称 分 工 身 份 证 所 在 单 位 签 名 1 梁 冰 37 主 持 工 作 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 主 要 参 加 人 员 序 号 姓 名 年 龄 职 务 职 称 分 工 身 份 证 所 在 单 位 签 名 2 孔 小 锋 34 主 治 医 师 手 术 操 作 李 书 英 35 主 管 护 师 手 术 护 理 X 李 家 亮 38 中 心 实 验 室 主 任 技 术 支 持 牛 立 志 47 院 长 纳 米 刀 手 术 曾 健 滢 30 技 术 员 动 物 实 验 麻 醉 科 主 方 刚 38 麻 醉 任 36 7 邓 春 娟 34 手 术 室 护 长 手 术 护 理 姚 飞 29 技 术 员 统 计 分 析 汪 媛 29 技 术 员 资 料 收 集 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 13
15 十 项 目 资 金 情 况 ( 一 ) 项 目 总 投 资 单 位 : 万 元 自 筹 资 金 资 金 来 源 合 计 区 科 信 局 小 计 国 家 科 技 部 省 科 技 厅 市 科 信 局 自 有 资 金 银 行 贷 款 其 他 已 投 入 资 金 小 计 计 划 新 增 投 资 其 它 资 金 投 入 情 况 说 明 : ( 二 ) 计 划 新 增 投 资 预 算 单 位 : 万 元 开 支 类 别 新 增 总 经 费 其 中,1. 新 增 自 筹 经 费 2. 区 科 信 局 经 费 经 费 额 用 途 说 明 经 费 额 用 途 说 明 一 基 建 费 二 人 员 费 课 题 负 责 人 主 要 研 究 开 发 推 广 人 员 三 设 备 费 1 购 置 费 2 试 制 费 四 能 源 材 料 费 1 材 料 易 耗 品 费 5 3 购 买 免 疫 组 化 抗 体 不 可 逆 2 电 穿 孔 实 验 用 探 针 等 购 买 免 疫 组 化 抗 体 不 可 逆 电 穿 孔 实 验 用 探 针 等 2 燃 料 及 动 力 费 五 试 验 外 协 费 动 物 饲 养 1.25 动 物 饲 养 六 会 议 差 旅 费 参 加 国 内 会 议 14
16 七 项 目 管 理 费 按 照 5% 支 付 八 其 它 费 用 1 1 购 买 实 验 用 白 兔 合 计 10 5 ( 三 ) 计 划 新 增 主 要 仪 器 设 备 计 划 新 增 主 要 仪 器 设 备 名 称 规 格 型 号 单 位 数 量 国 产 / 进 口 单 价 ( 万 元 ) 合 计 ( 万 元 ) 15
17 十 一 项 目 申 报 单 位 与 参 加 单 位 合 作 内 容 项 目 申 报 单 位 : 申 报 单 位 名 称 ( 公 章 ): 广 州 复 大 医 疗 股 份 有 限 公 司 复 大 肿 瘤 医 院 任 务 分 工 : 课 题 整 体 设 计 和 实 施 知 识 产 权 分 配 : 100% 科 信 局 经 费 分 配 额 度 : 100% 自 筹 经 费 出 资 额 度 和 到 位 时 间 : 5 万 2014 年 1 月 其 他 主 要 内 容 : 无 参 加 单 位 (1): 联 系 电 话 : 申 报 单 位 名 称 ( 公 章 ): 任 务 分 工 : 知 识 产 权 分 配 : 科 信 局 经 费 分 配 额 度 : 自 筹 经 费 出 资 额 度 和 到 位 时 间 : 其 他 主 要 内 容 : 参 加 单 位 (2): 联 系 电 话 : 申 报 单 位 名 称 ( 公 章 ): 任 务 分 工 : 知 识 产 权 分 配 : 科 信 局 经 费 分 配 额 度 : 自 筹 经 费 出 资 额 度 和 到 位 时 间 : 其 他 主 要 内 容 : 联 系 电 话 : 16
18 十 二 申 请 单 位 意 见 法 人 代 表 ( 或 委 托 代 理 人 ): ( 单 位 盖 章 ) 年 月 日 十 三 主 管 ( 推 荐 ) 部 门 意 见 负 责 人 ( 签 章 ): ( 单 位 盖 章 ) 年 月 日 17
19 所 附 的 附 件 清 单 : 序 号 附 件 名 称 数 量 ( 份 ) 页 码 1 查 新 报 告 1 附 1 2 发 表 论 文 1 附 2 18
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