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1 中国癌症杂志 2014 年第 24 卷第 10 期 CHINA ONCOLOGY 2014 Vol.24 No 郭晔, 副主任医师, 硕士生导师, 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科副主任, 中国抗癌协会肿瘤化疗专业委员会青委会副主任委员, 中国抗癌协会临床肿瘤学协会青委会副主任委员, 中国抗癌协会临床肿瘤学协会甲状腺癌专委会副主任委员, 中国抗癌协会头颈肿瘤专业委员会委员, 中国抗癌协会淋巴瘤专业委员会青委会委员, 上海市抗癌协会头颈肿瘤专业委员会副主任委员, 上海市抗癌协会淋巴瘤专业委员会秘书长 擅长头颈部肿瘤 淋巴瘤以及软组织肉瘤的内科治疗 迄今已在 中华肿瘤杂志 Oral Oncology American Journal of Hematology 以及 Radiation Oncology 等国内外杂志发表多篇中 英文论文, 参编书籍数部 双打击 B 细胞淋巴瘤的研究进展 郭晔 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科, 复旦大学上海医学院肿瘤学系, 上海 [ 摘要 ] 双打击 B 细胞淋巴瘤 (double-hit lymphoma,dhl) 是一种近年来被确认的 B 细胞淋巴瘤分子分型, 主要涉及 MYC 和 Bcl-2 基因的重排 荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization,fish) 是诊断 DHL 的金标准, 而通过免疫组化检测 MYC 和 Bcl-2 蛋白的表达仍存在一定的争议 大量的回顾性分析表明,DHL 是一种预后很差的独特类型, 主要发生于弥漫大 B 细胞淋巴瘤或灰区淋巴瘤, 且目前缺乏标准的治疗方案 无论是利妥昔单抗的联合抑或干细胞移植似乎均不能显著逆转 DHL 的不良预后, 其治疗的改善应依赖于探索特异性的分子靶向药物 [ 关键词 ] 双打击 B 细胞淋巴瘤 ; 诊断 ; 治疗 ; 预后 DOI: /j.issn 中图分类号 :R733 文献标志码 :A 文章编号 : (2014) The research progress on double-hit lymphoma GUO Ye (Department of Medical Oncology, Fudan University Shanghai Cancer Center, Department of Oncology, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai , China) Correspondence to: GUO Ye pattrick_guo@msn.com [Abstract] Recently, double-hit lymphoma (DHL) was clarified to be a molecular category of B-cell lymphoma, which was mainly related to MYC and Bcl-2 genes translocation. Fluorescence in situ hybridization (FISH) is the gold standard of diagnosis and it is controversial to detect the expression of MYC and Bcl-2 protein by immunohistochemistry. DHL, which was found to be aggressive according to many retrospective analyses, mainly develops in patients with diffuse large B-cell lymphoma and grey zone lymphoma. Both rituximab combination and transplant consolidation were not able to significantly overcome the poor prognosis of DHL. Novel and specific molecular targeted agents need to be explored and investigated in order to improve the treatment outcome. [Key words] Double-hit lymphoma; Diagnosis; Treatment; Prognosis 约 40% 的 B 细胞淋巴瘤存在染色体易位, 其中最常见的涉及免疫球蛋白 (immunoglobulin, IG) 基因 根据 2008 年的淋巴瘤 WHO 分类, 成 通信作者 : 郭晔 pattrick_guo@msn.com 熟 B 细胞淋巴瘤的主要类型包括弥漫大 B 细胞淋巴瘤 (diffuse large B-cell lymphoma,dlbcl) 和 Burkitt 淋巴瘤, 而以前所谓的灰区淋巴瘤 (grey zone lymphoma) 被定义为 B 细胞淋巴瘤, 无法

2 746 郭晔. 双打击 B 细胞淋巴瘤的研究进展 分类, 特性介于 DLBCL 和 Burkitt 淋巴瘤 (B-cell lymphoma, unclassifiable, with features intermediate between DLBCL and Burkitt lymphoma, BCLU) [1] MYC 基因重排是 Burkitt 淋巴瘤特征性的基因改变,80% 涉及 IGH 基因导致易位 [t(8;14)(q24;q32)] 同时,6%~14% 的 DLBCL 也可存在 MYC 基因重排, 而在 BCLU 中的发生率高达 33%~49% [2] 研究发现,Burkitt 淋巴瘤往往具有单独的 MYC 基因重排, 而 DLBCL 和 BCLC 还可发生 Bcl-2 Bcl-6 CCND1 等基因的易位, 称为所谓的 双打击 B 细胞淋巴瘤 (double-hit lymphoma,dhl) 甚至是 三打击 B 细胞淋巴瘤 (triple-hit lymphoma,thl) 其中 MYC/Bcl-2 DHL 是最为常见的类型, 因此本研究主要针对这一类型进行介绍 1 DHL 发生率近年来的研究表明,DHL 的发生率或检出 [3] 率有所上升 Barrans 等采用 FISH 的方法检测了 303 例初治的 DLBCL, 发现 MYC 基因重排的发生率为 14%, 其中 11% 为 MYC/Bcl-2 DHL, 还有 3% 为 THL 同样在另一项前瞻性研究中, [4] Foot 等分析了 162 例非 Burkitt 淋巴瘤的高级别 B 细胞非霍奇金淋巴瘤,DHL 的检出率为 [5] 11%, 主要为 MYC/Bcl-2 Perry 等分析了 39 例 BCLU 患者, 发现 DHL 的发生率高达 32% (MYC/Bcl-2 为 23%,MYC/Bcl-6 为 9%), 而单独 MYC 基因重排的发生率为 17%, 提示与 DLBCL 相比,BCLU 更容易发生 DHL 2 DHL 特征及表现在临床表现方面,MYC/Bcl-2 DHL 的发病年龄通常较大, 男性多见, 少数患者既往有滤泡性淋巴瘤的病史, 提示 Bcl-2 在疾病转化方面的作用 多数患者表现为病期晚 (Ann Arbor Ⅲ/Ⅳ 期 ) 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) 升高, 结外累及常见, 特别是骨髓和中枢神经系统 [6] 因此,DHL 的国际预后指数 (international prognostic index,ipi) 通常较高 ( 高中 [7] 危和高危 ) Snuderl 等根据 IPI 配对进行了 1 项 DHL 和 DLBCL 的病例 - 对照研究, 结果显示 DHL 在 LDH 水平 (727 U/L vs 366 U/L) 和骨髓侵犯比 例 (59% vs 23%) 方面显著高于普通的 DLBCL DHL 在肿瘤形态方面缺乏特征, 但往往具有生发中心来源 B 细胞淋巴瘤的免疫表型 肿瘤细胞可以表达 CD19 和 CD20, 但表达强度往往低于普通的 DLBCL 通常情况下,CD10 Bcl-2 和 Bcl-6 的表达比例较高,MUM1 较低 以往的研究认为,DHL 具有很高的肿瘤细胞增殖指数 (ki-67), 往往 >80%, 但近期的研究并没 [8] 有完全证明这一点 Li 等分析了 52 例 DHL 患者, 结果显示,ki-67 的表达范围为 40%~99% 近期 1 项来自新加坡的研究证明, 使用 ki-67 来预测 DHL 的灵敏度和特异度无法达到双赢, 因此目前 DHL 的诊断仍然依赖于荧光原位杂交 (fluorescence in situ hybridization,fish), 并且没有可靠的预测因素 [9] 3 治疗和预后研究表明,DHL 的预后极差, 中位生存期 [10] 介于 0.2~1.5 年 Green 等分析了 193 例接受 R-CHOP 方案 ( 利妥昔单抗 环磷酰胺 多柔比星 长春新碱和泼尼松 ) 治疗的 DLBCL 患者, MYC 和 Bcl-2 基因重排的发生率分别为 11% 和 25%, 其中 11 例 (6%) 被确诊为 DHL 治疗结果显示,DHL 的中位生存期仅为 13 个月, 显著低于非 DHL 的 DLBCL(95 个月 ) 有趣的是, 虽然具有 MYC 基因重排患者 (11%) 的 3 年总生存同样较差 (52% vs 75%,P=0.009), 但一旦去除了其中 52% 的 DHL 患者,MYC 基因重排对生存就不 [7] 具有不良影响 在另一项研究中,Snuderl 等比较了 DHL Burkitt 淋巴瘤以及经与 DHL 的 IPI 配对的 DLBCL, 结果显示 DHL 的预后最差, 中位生存期仅为 4.5 个月 迄今为止, 对于 DHL 预后不佳的合理解释尚不明确, 但似乎不仅仅是由于 MYC 基因发生了重排, 因为同样具有这一特征性基因改变的 Burkitt 淋巴瘤预后相对较好 目前的观点认为可能是 MYC 和 Bcl-2 基因改变的协同机制所致, 使得 DHL 的侵袭性较强, 对于免疫化疗的敏感性欠佳 一项来自日本的研究发现,DHL 的预后显著差于仅有 MYC 或 Bcl-2 基因重排的 DLBCL, 从而间接证明了上述观点 [11]

3 中国癌症杂志 2014 年第 24 卷第 10 期 747 虽然目前并没有针对 DHL 的标准治疗方案, 但由于这些患者很多是 BCLU 且多具有高危 IPI 的临床特征, 临床医师往往采用某些治疗 Burkitt 淋巴瘤的方案如 Hyper-CVAD,CO- DOX-M/IVAC 以及 EPOCH, 并且愿意尝试采用自体干细胞移植作为巩固治疗 在 1 项来自于美国安德森肿瘤中心的回顾性分析中,129 例 DHL 患者接受了多种方案的治疗 [12], 结果显示, R-EPOCH 方案获得了最高的 2 年无事件生存率 (event-free survival,efs), 而经典的 R-CHOP 方案的完全缓解率是最低的 (40%) 在诱导治疗后获得完全缓解的 71 例患者中,23 例接受了自体或异体的干细胞移植 ( 前者占绝大部分 ), 而其余 48 例接受常规的定期随访 虽然接受移植巩固患者的 2 年 EFS(68%) 在数值上高于仅接受随访的患者 (53%), 但差异无统计学意义 (P=0.155) 在另一项来自北美多中心的回顾性分析中,311 例初治的 DHL 患者入组, 中位无进展生存期 (progression-free survival,pfs) 和总生存期 (overall survival,os) 分别为 10.9 和 21.9 个月 [13] 在针对不同方案的疗效分析中, 接受强烈方案的患者在中位 PFS 上显著优于接受 R-CHOP 方案的患者 (21.6 vs 7.8 个月,P=0.001), 但 2 组患者的 OS 没有差异 同样, 该研究并没有发现移植巩固治疗的益处 通过单因素和多因素分析, 该研究发现了 4 个独立的高危因素, 分别是白细胞升高 LDH 超过正常值上限 3 倍 Ⅲ/Ⅳ 期和中枢神经系统受累 根据这 4 个因素的评分, 低危 (0 分 ) 中危(1 分 ) 和高危 ( 2 分 ) 患者的 2 年 OS 分别为 91% 59% 和 41%(P< ) 上述这 2 项回顾性分析虽然具有一定的偏倚, 但充分说明了传统的 R-CHOP 方案在治疗 DHL 方面的局限性, 无论是强烈方案还是移植巩固均没有获得总生存上的获益 因此, 我们仍然需要探索新的治疗药物, 特别是分子靶向药物, 比如 Bcl-2 的特异性抑制剂 近期, 一种新的针对 MYC 蛋白的抗体问世, 使得在免疫组化水平研究 MYC 或 Bcl-2 基因成为可能 [14] 理论上,MYC 和 Bcl-2 基因的重排并非是 MYC 和 Bcl-2 蛋白表达的唯一条件, 其 他染色体的异常也有可能, 这使得 DHL 的定义变得混淆 目前采用免疫组化方法检测 MYC 和 Bcl-2 蛋白表达阳性被称为 MYC/Bcl-2 蛋白共表达 (MYC/Bcl-2 protein coexpression), 其发生率远远高于根据分子遗传学定义的 DHL, 甚至可以发生在非生发中心来源的 DLBCL 中, 这与传统意义上的 DHL 存在本质的区别 对于 MYC/Bcl-2 蛋白共表达的 DLBCL, 目前的共识是其预后显著差于无共表达的 DLBCL 在迄今为止样本量最大的 1 项研究 [15] 中,Hu 等分析了 466 例接受 R-CHOP 方案治疗的 DLBCL, 发现 MYC/Bcl-2 共表达的发生率为 34%, 并且具有多项预后不良因素, 包括高龄 分期晚 PS 评分差以及多个结外病变 因此,49% 的患者的 IPI 为中高危或高危 (IPI:3~5) 这一亚组的 5 年生存率显著低于没有 MYC/Bcl-2 共表达的 DLBCL(30% vs 75%, P< ) 有意思的是, 虽然总体上单独的 MYC 或 Bcl-2 高表达的患者同样预后不佳, 但如果分别在 Bcl-2 或 MYC 阴性亚组中进行分析, 这种不良预后因素则不复存在 此外, 另外 2 项研究均显示,MYC/Bcl-2 共表达的 DLBCL 预后最差, 具有 MYC 或 Bcl-2 单个蛋白高表达的预后居中,MYC 或 Bcl-2 蛋白均不表达的预后最佳 [16-17] 目前的争议在于, 无论对于 MYC 还是 Bcl-2, 确定免疫组化表达阳性的界值 (cutoff) 仍不明确, 是定义 MYC/Bcl-2 共表达这一独特亚型的最大障碍 虽然之前所述的研究均采用相同的 MYC 抗体 (clone Y69,Epitomics, USA), 但所采用的 MYC 阳性表达界值介于 10%~50%, 由此导致 MYC/Bcl-2 共表达的阳性率不尽相同 因此, 为了今后有效地针对这一预后不良的独特亚型进行研究, 需要在大样本 前瞻性的研究中进一步确定 MYC/Bcl-2 共表达的阳性界值 MYC/Bcl-2 蛋白共表达 DLBCL 的另一个争议是与细胞起源 (cell of origin,cco) 的关 [15] 系 在 Hu 等的研究中,46% 的活化 B 细胞 (activated B-cell,ABC) 来源亚型具有 MYC/ Bcl-2 共表达, 这一比例显著高于生发中心

4 748 郭晔. 双打击 B 细胞淋巴瘤的研究进展 (germinal center B-cell,GCB) 来源亚型 (22%, P< ), 而没有 MYC/Bcl-2 共表达的比例在 2 组则正好相反 结果发现, 无论对于 GCB 还是 ABC 来源,MYC/Bcl-2 共表达均是独立的预后 不良因素 有趣的是, 如果去除这部分 MYC/ Bcl-2 共表达的患者,GCB 和 ABC 来源的 DLBCL 预后没有差别 因此作者预测 MYC/Bcl-2 共表 达是影响 GCB 和 ABC 来源 DLBCL 不同预后的 [10] 重要因素之一 Green 等的研究发现了类 似的结果,MYC/Bcl-2 共表达的比例在 ABC 和 GCB 来源亚型中分别为 41% 和 19% 与此相反, [5] Perry 等的研究却发现 MYC/Bcl-2 共表达的比 例在 2 种亚型中较为接近 (GCB 型为 46%,ABC 型为 42%), 而且 MYC/Bcl-2 共表达只有在 GCB 亚型中成为独立的不良预后因素 值得注意的是, 上述 3 项研究均采用 Choi 标准作为判断细胞起源的方法 毫无疑问,MYC/Bcl-2 共表达与细胞起源的关系值得进一步研究, 因为这涉及到未来前瞻性研究预后分层因素的选择 4 总结与展望综上所述,DHL 是一种预后极差的独特 B 细胞类型, 其最佳的治疗手段急需前瞻性临床研究的探索 虽然根据细胞遗传学的方法已经赋予了 DHL 的明确定义, 但鉴于其发生率相对较低 (<10%), 近年来的研究着重于采用免疫组化方法分析 MYC/Bcl-2 蛋白共表达的诊断标准 临床表现和预后价值 目前, 对于 MYC/Bcl-2 共表达的判定及其与细胞起源的关系仍然存在争议, 需要在大样本前瞻性研究中进行验证, 从而为今后针对这一类型的个体化临床研究奠定基础 [ 参考文献 ] [1] KLUIN P M, HARRIS N L, STEIN H, et al. B-cell lymphoma, unclassifiable, with features intermediate between diffuse large B-cell lymphoma and Burkitt lymphoma//. SWERDLOW S H, CAMPO E, HARRIS N L, et al. World health organization classification of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues[m]. 4th ed. Lyon, France: IARC, 2008: [2] OTT G, ROSENWALD A, CAMPO E. Understanding MYCdriven aggressive B-cell lymphomas: pathogenesis and classification[j]. Blood, 2013, 122: [3] BARRANS S, CROUCH S, SMITH A, et al. Rearrangement of MYC is associated with poor prognosis in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated in the era of rituximab[j]. J Clin Oncol, 2010, 28: [4] FOOT N J, DUNN R G, GEOGHEGAN H, et al. Fluorescence in situ hybridisation analysis of formalin-fixed paraffinembedded tissue sections in the diagnostic work-up of non- Burkitt high grade B-cell non-hodgkin s lymphoma: a single centre s experience[j]. J Clin Pathol, 2011, 64: [5] PERRY A M, CROCKETT D, DAVE B J, et al. B-cell lymphoma, unclassifiable, with features intermediate between diffuse large B-cell lymphoma and burkitt lymphoma: study of 39 cases[j]. Br J Haematol, 2013, 162: [6] AUKEMA S M, SIEBERT R, SCHUURING E, et al. Doublehit B-cell lymphomas[j]. Blood, 2011, 117: [7] SNUDERL M, KOLMAN O K, CHEN Y B, et al. B-cell lymphomas with concurrent IGH-Bcl-2 and MYC rearrangements are aggressive neoplasms with clinical and pathologic features distinct from Burkitt lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma[j]. Am J Surg Pathol, 2010, 34: [8] LI S, LIN P, FAYAD L E, et al. B-cell lymphomas with MYC/8q24 rearrangements and IGH@Bcl-2/t(14;18) (q32;q21): an aggressive disease with heterogeneous histology, germinal center B-cell immunophenotype and poor outcome [J]. Mod Pathol, 2012, 25: [9] MATIONG-KALAW E, TAN L H, TAY K, et al. Does the proliferation fraction help identify mature B cell lymphomas with double- and triple-hit translocations? [J]. Histopathology, 2012, 61: [10] GREEN T M, YOUNG K H, VISCO C, et al. Immunohistochemical double-hit score is a strong predictor of outcome in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with rituximab plus cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine, and prednisone[j]. J Clin Oncol, 2012, 30: [11] NIITSU N, OKAMOTO M, MIURA I, et al. Clinical features and prognosis of de novo diffuse large B-cell lymphoma with t(14;18) and 8q24/c-MYC translocations[j]. Leukemia, 2009, 23: [12] OKI Y, NOORANI M, LIN P, et al. Double hit lymphoma: the MD Anderson Cancer Center clinical experience[j]. Br J Haematol, 2014, 166: [13] PETRICH A M, GANDHI M, JOVANOVIC B, et al. Impact of induction regimen and stem cell transplantation on outcomes in patients with double hit lymphoma: a large multicenter retrospective analysis[j]. Blood, 2014,[Epub ahead of print]. [14] GREEN T M, NIELSEN O, DE STRICKER K, et al. High levels of nuclear MYC protein predict the presence of MYC rearrangement in diffuse large B-cell lymphoma[j]. Am J Surg Pathol, 2012, 36:

5 中国癌症杂志 2014 年第 24 卷第 10 期 749 [15] HU S, XU-MONETTE Z Y, TZANKOV A, et al. MYC/Bcl- 2 protein coexpression contributes to the inferior survival of activated B-cell subtype of diffuse large B-cell lymphoma and demonstrates high-risk gene expression signatures: a report from The International DLBCL Rituximab-CHOP Consortium Program[J]. Blood, 2013, 121: [16] JOHNSON N A, SLACK G W, SAVAGE K J, et al. Concurrent expression of MYC and Bcl-2 in diffuse large B-cell lymphoma treated with rituximab plus cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine, and prednisone[j]. J Clin Oncol, 2012, 30: [17] VALERA A, LÓPEZ-GUILLERMO A, CARDESA- SALZMANN T, et al. MYC protein expression and genetic alterations have prognostic impact in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with immunochemotherapy [J]. Haematologica, 2013, 98: ( 收稿日期 : ) 肿瘤影像学 杂志 2015 年征订启事 肿瘤影像学 杂志自 1992 年创刊以来深受医学界赞颂,1998 年经国家科委 中央新闻出版总署批准为国内外公开发行正式期刊, 刊号 :ISSN X,CN /R 杂志由优质铜版纸印制, 大 16 开,80 页, 暂定为季刊 被中国学术期刊综合评价数据库 中国核心期刊 ( 遴选 ) 数据库 中国期刊全文数据库等收录 主要报道医学影像领域中科研成果 临床应用 综述 病例报告 讲座及与理工结合的有关论文等 肿瘤影像学 坚持学术性与科学性, 信息量大具有临床实用价值 是医院图书馆 影像科室及高等院校的学术刊物, 是临床医学影像医务人员晋升中 高级职称的重要论文发表园地 欢迎各医学院校 医学图书馆 影像科室及个人向当地邮局订阅 本刊季末出版, 邮发代号 4-653, 暂定价每期 10 元, 每年共 40 元整 单位全称 : 肿瘤影像学 杂志编辑部通讯地址 : 上海市东安路 270 号复旦大学附属肿瘤医院邮编 : 电话 :(021) (021) 传真 :(021) imaging109@163.com

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