增刊陈静廷等 : 不同乳源牛乳中免疫球蛋白和乳铁蛋白的比较研究 299 Catalog NO. E ph % mol /L - ph TMB 1. 2 mg TMB 1. 2 ml DMSO ml μl 30 % H 2 O

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1 华北农学报 2013,28 ( 增刊 ) : ELISA IgA IgG IgM Lf R IgA IgG IgM Lf P < IgA IgG IgM Lf IgA IgM IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf S823 A Comparative Analysis of Immunoglobulin and Lactoferrin in Different Bovine Milk CHEN Jing-ting 1 2 BU Deng-pan 1 MA Lu 1 YANG Jin-hui 1 LI Fa-di 2 1. State Key Laboratory of Animal Nutrition Institute of Animal Sciences of Chinese Academy of Agricultural Sciences Beijing China 2. College of Animal Science and Technology Gansu Agricultural University Lanzhou China Abstract The objective of the current study was to characterize the concentrations of immunoglobulins IgA IgG IgM and lactoferrin in different bovine milk. Sandwich enzyme-linked immunosorbent assay ELISA was used to quantify the immunoglobulins and lactoferrin Lf contents in and samples and correlation analysis was completed. The results showed that immunoglobulins and lactoferrin in and samples had a good linear relationsship between concentration and absorbance values and the standard curve equation R was greater than There were significant differences of IgA IgG IgM and Lf in different milk P < The contents of IgA IgG IgM and Lf of species showed remarkable individual differences. IgA and IgM in showed a negative correlation while the others species had a positive correlation. The results indicated that the content of immunoglobulins and lactoferrin in the milk were influenced by genetic factors and had each characteristic. According to the correlation of immunoglobulins and lactoferrin forecasting the content of immunoglobulins and lactoferrin within species may be possible. Key words Species Bovine milk Immunoglobulin Lactoferrin ELISA Concentration Correlation BAD12B DA125184G

2 增刊陈静廷等 : 不同乳源牛乳中免疫球蛋白和乳铁蛋白的比较研究 299 Catalog NO. E ph % mol /L - ph TMB 1. 2 mg TMB 1. 2 ml DMSO ml μl 30 % H 2 O 2 2 mol /L H 2 SO IgA IgG IgM Lf 3 5 min 2 ml r /min 15 min IgA IgG IgM Lf ELISA Microsoft Office 20 Excel 2007 SAS ANOVA-Duncan Pearson Tecan Infinite F200 Switzerland 2. 1 Sorvall. legend. mach 1. 6R Germany ph ELISA Bethyl Bovine IgA ELISA Quantitation Kit Catalog NO. E Bethyl Bovine IgG ELISA Quantitation Kit Catalog NO. E Bovine IgM ELISA Quantitation Kit Catalog NO. E Bovine Lactoferrin ELISA Quantitation Kit Tab PBST ph IgA IgG IgM Lf 1 ELISA The final working concentrations of different Bovine milk Optimal dilution IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf Y X

3 300 华北农学报 28 卷 R ELISA SAS IgA IgG IgM Lf 2 Tab. 2 2 n = 20 IgA IgG IgM Lf The content of IgA IgG IgM and Lf in different Bovine milk n = 20 n = 27 IgA ± 0. 34Aa ± 0. 05Bc ± 0. 15Bb IgG ± 0. 12A ± 0. 11B ± 0. 23A IgM ± 0. 03B ± 0. 03B ± 0. 05A Lf ± 0. 00Bc ± 0. 01Bb ± 0. 08Aa P < P < P >0. Note In the same row Lowercase letter and capital letter indicates significant difference at and level respectively. 2 IgA IgG IgM Lf IgA P < IgA P < IgG P < IgG IgM IgM P < Lf 1 IgA IgG IgM Lf P < Lf Fig. 1 Distributionof IgA IgG IgM and Lf in bovine milk P < IgA IgG IgM IgA IgG IgM Lf 3 1 IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf IgG 3 60 % IgA IgM Lf Lf IgG > IgA > Lf > IgM Tab. 3 3 IgA IgG IgM Lf The variation range of IgA IgG IgM and Lf content in different Bovine milk IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf / mg /ml Minimum value / mg /ml Maxmum value CV Variable coefficient IgA IgG IgM Lf P < IgA IgG IgM Lf IgG IgA P < 4 IgA IgG IgM Lf IgM IgA mg /ml IgA IgG IgM Lf IgM IgG Lf IgM IgG IgG IgM P < Lf IgA IgG

4 增刊陈静廷等 : 不同乳源牛乳中免疫球蛋白和乳铁蛋白的比较研究 301 P < Tab. 4 4 IgA IgG IgM Lf Pearson correlation coefficient matrix of IgA IgG IgM and Lf content in different bovine milk IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf IgA IgG IgM Lf IgA ** ** IgG ** ** ** IgM Lf *. P < **. P < Note *. Significant correlation P < **. Significant correlation P < mg /ml 14 Lf 3. 1 ~ ~ 3. 2 mg /ml 15 Lf 20 ~ 200 μg /ml Lf SPR HPLC 55 ~ 659 μg /ml Ig Lf Lf 17 IgA IgM 37 ~ 957 μg /ml n = ~ 195 μg /ml n = IgG 3 Lf IgG IgA IgM mg /ml IgG IgA IgM ELISA IgA IgG IgM 3 Lf ELISA IgG IgG Lf IgG ELISA 19 IgA IgM SCS 18 Lf SCS R SCS Lf Lf 20 IgG B Ig Lf IgA B B Ig Lf IgA

5 302 华北农学报 28 卷 8. ELISA 5 21 J Lopez-Calleja I M Gonzalez I Fajardo V et al. Application of an indirect ELISA and a PCR technique for detec- IgM IgA tion of cows'milk in sheep's and goats' milk cheeses J. International Dairy Journal IgG IgM IgG IgA 10. IgM IgG Lf IgG J IgG J García-Montoya I A Cendón T S Arévalo-Gallegos S et al. Lactoferrin a multiple bioactive protein An overview J. Biochimica et Biophysica Acta ELISA 13 Yamauchi K Wakabayashi H Shin K et al. Bovine lactoferrin benefits and mechanism of action against infec- tions J. Biochem Cell Biol Fox P F McSweeney H. Advanced dairy chemistry 1- Proteins M. 3rd edition. New York Kluwer Academic / Plenum Adlerova L Bartoskova A Faldyna M. Lactoferrin a review J. Veterinarni Medicina Konuspayeva G Loiseau G Levieux D. Lactoferrin and 1 Mazri C Sánchez L Ramos S J et al. Effect of high-pressure treatment on denaturation of bovine lactoferrin and lactoperoxidase J. J Dairy Sci Stelwagen K Carpenter E Haigh B et al. Immune components of bovine colostrum and milk J. Journal of Animal Science J. 19 Konuspayeva G Faye B Loiseau G et al. Lactoferrin and immunoglobulin contents in camel's Milk Camelus bac- 4. trianus camelus dromedarius and hybrids from kazakh- J Cheng J B Wang J Q Bu D P et al. Factors affecting the J Dairy Science D. 21. IgA Song H X Xue H Y Han Y. Detection of cow' s milk in Shaanxi goat's milk with an ELISA assay J. Food Control immunoglobulin content in camel milk from bactrian dromedary and hybrids in kazakhstan J. Journal of Camelid Sciences Hagiwara S Kawai K Anri A et al. Lactoferrin concentrations in milk from normal and subclinical mastitic cows J IgA IgM D stan J. Journal of Dairy Science iactoferrin concentration in bovine milk J. Journal of J

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