目 录 序 号 第 一 作 者 题 目 1 江 晓 全 省 疾 病 预 防 控 制 系 统 传 染 病 防 治 技 能 竞 赛 盲 样 检 测 考 核 结 果 分 析 2 董 非 医 院 消 毒 质 量 监 测 结 果 分 析 3 唐 秀 娟 深 圳 市 医 院 信 息 化 及 人 力 因 素 对

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1 第 七 届 传 染 病 防 控 基 础 研 究 与 应 用 技 术 论 坛

2 目 录 序 号 第 一 作 者 题 目 1 江 晓 全 省 疾 病 预 防 控 制 系 统 传 染 病 防 治 技 能 竞 赛 盲 样 检 测 考 核 结 果 分 析 2 董 非 医 院 消 毒 质 量 监 测 结 果 分 析 3 唐 秀 娟 深 圳 市 医 院 信 息 化 及 人 力 因 素 对 传 染 病 报 告 卡 漏 报 的 影 响 分 析 4 杨 永 亮 年 隆 林 各 族 自 治 县 法 定 报 告 传 染 病 流 行 病 学 特 征 分 析 5 杜 燕 华 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 间 接 ELISA 检 测 方 法 的 建 立 6 何 义 林 泰 州 市 恙 虫 病 疫 源 地 的 研 究 7 高 蒙 布 鲁 菌 病 患 者 血 液 分 析 及 治 疗 效 果 评 价 8 陈 艳 伟 年 北 京 市 布 鲁 氏 菌 病 流 行 情 况 分 析 及 发 病 预 测 9 胡 艺 1 例 输 入 性 类 鼻 疽 病 例 的 溯 源 分 析 10 胡 治 强 类 鼻 疽 的 实 验 室 诊 断 方 法 及 评 价 11 石 磊 年 北 京 市 房 山 区 流 感 相 关 住 院 病 例 的 临 床 特 征 与 病 原 学 分 析 12 王 昕 年 深 圳 市 流 感 流 行 病 学 分 析 13 何 敏 一 起 流 感 暴 发 疫 情 中 B 型 Yamagata 系 流 感 病 毒 HA1 基 因 特 性 分 析 14 王 玲 淄 博 市 年 流 感 样 病 例 暴 发 疫 情 分 析 15 张 文 增 北 京 市 顺 义 区 年 流 行 性 感 冒 相 关 超 额 死 亡 估 计

3 序 号 第 一 作 者 题 目 16 潘 阳 32 例 甲 型 H3N2 流 感 病 毒 感 染 严 重 急 性 呼 吸 道 感 染 病 例 病 毒 全 基 因 组 分 析 17 姚 立 农 间 日 疟 原 虫 微 卫 星 位 点 的 遗 传 多 态 性 分 析 18 朱 函 坪 H5N1 亚 型 禽 流 感 病 毒 NS1 基 因 在 大 肠 杆 菌 中 的 表 达 19 何 林 深 圳 市 龙 华 新 区 年 人 感 染 H7N9 禽 流 感 发 病 及 监 测 情 况 分 析 20 姜 法 春 青 岛 市 黄 岛 区 城 市 化 进 程 对 肾 综 合 征 出 血 热 的 影 响 21 傅 桂 明 浙 江 省 2015 年 肾 综 合 征 出 血 热 监 测 分 析 22 冼 慧 霞 116 例 人 腺 病 毒 感 染 的 分 子 流 行 病 学 初 步 研 究 23 崔 兰 梅 北 京 市 房 山 区 某 高 中 诺 如 病 毒 暴 发 疫 情 的 调 查 分 析 24 陈 强 北 京 市 年 新 报 告 HIV 病 例 新 发 感 染 状 况 分 析 25 赵 嘉 咏 河 南 省 年 A 组 轮 状 病 毒 基 因 型 别 变 迁 26 王 雨 潇 埃 博 拉 疫 苗 的 临 床 进 展 27 王 敬 忠 深 圳 市 登 革 热 传 播 风 险 ARIMA 模 型 预 测 分 析 28 李 幸 乐 一 起 一 犬 伤 13 人 狂 犬 病 暴 露 事 件 的 综 合 处 置 及 效 果 评 价 29 邵 荣 标 人 类 狂 犬 病 毒 隐 性 感 染 状 况 研 究 30 孙 建 伟 不 同 暴 露 因 素 下 狂 犬 病 平 均 潜 伏 期 及 影 响 因 素 分 析 31 姚 苹 苹 汉 坦 病 毒 核 蛋 白 的 重 组 表 达 及 其 免 疫 印 迹 法 在 肾 综 合 征 出 血 热 血 清 抗 体 检 测 中 的 应 用

4 序 号 第 一 作 者 题 目 32 杨 鹏 诸 城 市 年 肾 综 合 征 出 血 热 流 行 病 学 分 析 及 干 预 措 施 评 价 33 武 晶 两 起 CoxA10 引 起 的 幼 儿 园 疱 疹 性 咽 峡 炎 暴 发 疫 情 调 查 34 李 若 曦 北 京 市 丰 台 区 某 托 幼 机 构 一 起 由 CoxA6 引 起 的 手 足 口 病 暴 发 疫 情 的 流 行 病 学 调 查 35 徐 国 锋 河 南 省 濮 阳 市 7 株 肠 道 病 毒 71 型 全 基 因 组 序 列 分 析 36 李 国 伟 郑 州 市 2015 年 健 康 人 群 肠 道 病 毒 动 态 变 化 与 手 足 口 病 发 病 研 究 37 魏 明 伟 微 谷 肠 道 病 毒 71 型 疫 苗 2 年 保 护 效 力 和 免 疫 原 性 评 估 38 孙 一 晟 EV71 对 沙 鼠 肌 肉 细 胞 的 杀 伤 机 理 39 田 丽 君 赤 峰 市 年 手 足 口 病 流 行 趋 势 及 病 原 学 分 析 40 常 彩 云 济 南 市 年 手 足 口 病 流 行 特 征 及 时 空 聚 集 性 分 析 41 马 智 龙 泰 州 地 区 手 足 口 病 肠 道 病 毒 柯 萨 奇 A16 的 VP1 基 因 特 征 分 析 42 王 万 民 郑 州 市 年 手 足 口 病 流 行 特 征 分 析 43 阳 帆 深 圳 市 2014 年 登 革 热 流 行 病 学 和 病 原 学 特 征 研 究 44 董 梅 我 国 首 例 脑 膜 炎 球 菌 肺 炎 的 病 原 学 研 究 45 田 竞 运 用 集 中 度 和 圆 形 分 布 法 分 析 年 北 京 市 房 山 区 麻 疹 季 节 性 特 征 46 任 先 云 呼 和 浩 特 市 年 麻 疹 流 行 病 学 分 析 47 修 仕 信 2015 年 无 锡 市 麻 疹 流 行 病 学 特 征 分 析

5 序 号 第 一 作 者 题 目 48 孙 小 宇 北 京 市 西 城 区 呼 吸 道 感 染 病 例 病 毒 感 染 状 况 分 析 49 刘 元 东 部 队 新 兵 接 种 乙 肝 疫 苗 免 疫 效 果 观 察 50 缪 梓 萍 关 于 戊 型 病 毒 性 肝 炎 诊 断 标 准 (WS ) 有 关 问 题 的 商 榷 51 夏 依 旦 2006 年 2015 年 新 疆 菌 痢 监 测 地 区 志 贺 菌 菌 型 分 布 及 耐 药 性 性 分 析 52 移 钱 华 泰 州 市 儿 童 猩 红 热 流 行 病 学 调 查 分 析 53 王 小 光 金 黄 色 葡 萄 球 菌 在 综 合 医 院 的 流 行 特 征 和 耐 药 性 分 析 54 倪 华 2 型 猪 链 球 菌 DivIVA 蛋 白 调 控 细 胞 分 裂 及 致 病 作 用 研 究 55 黄 磊 LPS 和 R848 对 Tfh 细 胞 表 达 Ki67 BcL6 和 CXCR5 的 影 响 56 胡 彬 2015 年 山 东 省 腹 泻 症 候 群 细 菌 性 病 原 谱 特 征 及 耐 药 性 分 析 57 杨 洋 一 起 副 溶 血 性 弧 菌 引 起 的 疫 情 的 实 验 室 检 测 分 析 58 王 虹 玲 Characterization of Vibrio parahaemolyticus isolated from Patients in Zhoushan of China 59 邵 纯 纯 微 山 地 区 动 物 粪 便 中 产 志 贺 毒 素 大 肠 杆 菌 分 子 分 型 及 耐 药 性 研 究

6 全 省 疾 病 预 防 控 制 系 统 传 染 病 防 治 技 能 竞 赛 盲 样 检 测 考 核 结 果 分 析 江 晓 程 婷 婷 叶 艳 华 史 小 超 金 萍 王 炜 丁 洁 南 京 市 疾 病 预 防 控 制 中 心 南 京 摘 要 目 的 通 过 采 用 实 时 荧 光 PCR 法 和 培 养 法 对 竞 赛 盲 样 样 品 中 食 源 性 致 病 菌 的 分 离 鉴 定, 建 立 了 针 对 多 项 目 质 控 样 品 检 测 的 快 速 准 确 方 法 方 法 2014 年 江 苏 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 组 织 的 传 染 病 防 治 技 能 竞 赛 中 给 出 的 盲 样 考 核 样 品, 依 据 提 供 的 案 例 A 和 B 传 染 病 发 病 临 床 表 现, 锁 定 检 测 范 围, 先 运 用 实 时 荧 光 PCR 法 进 行 致 病 菌 初 筛, 再 以 荧 光 PCR 结 果 为 指 导, 用 培 养 法 进 行 进 一 步 分 离 鉴 定, 最 终 得 到 正 确 的 检 测 结 果 结 果 项 目 A 的 检 测 结 果 为 A-049 和 A-086 检 出 福 氏 2b 型 志 贺 氏 菌,A-093 未 检 出 致 病 菌 项 目 B 检 测 结 果 为 B-056 检 出 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌 O157:H7,B-022 和 B-086 未 检 出 病 原 菌 结 论 荧 光 PCR 对 传 染 病 突 发 事 件 中 致 病 菌 的 快 速 初 筛 具 有 重 要 意 义, 与 培 养 法 结 合 应 用 于 多 项 目 质 控 样 本 检 测 可 减 少 传 统 培 养 方 法 漏 检 的 可 能 性, 提 高 检 测 效 率 和 正 确 率 关 键 词 盲 样 考 核 ; 实 时 荧 光 PCR; 传 统 培 养 法 Analysis Results on blind quality control for JiangShu Competition on the prevention and treatment of infectious disease JiangXiao ChengTingTing YeYanHua ShiXiaoChao Jin Ping WangWei DingJie GuoBaoFu (Nanjing Center for Disease Control and Prevention Nanjing China) Abstract Objective To set up rapid detection methods on many blind quality control samples, Real-time PCR and tradtional culture methods were used to separate and identify foodborn pathogen.methods Blind quality control samples(samplea and sample B )were given by Jiangshu province center for disease control and prevention According to clinical manifestation,real-time PCR was used to preliminary screening first,then tradtional culture methods were used,at last bacteria in the blind quality control samples were isolated and identified. Results A-049 和 A-086 were identified Shigella positive DNA, B -056 were identified Escherichia coil O157positive DNA,then Shigella and Escherichia coil O157 strains were seperated with culture methods. Conclusion It is important to combine two mehods tohether for blind qulaity control projects to separate many items in the meantime It is not only raise detection efficiency but also reduce traditional methods undected items. Key words Blind quality control; Real-time PCR: Tradtional culture methods 2000 年 我 国 建 立 全 国 食 源 性 致 病 菌 监 测 网 开 始 至 今, 江 苏 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 每 年 对 承

7 担 食 源 性 致 病 菌 监 测 任 务 机 构 进 行 能 力 验 证, 以 提 高 监 测 工 作 质 量, 现 将 2014 年 我 中 心 参 加 传 染 病 防 治 竞 赛 盲 样 考 核 样 检 测 结 果 报 告 如 下 材 料 与 方 法 1.1 样 本 来 源 及 使 用 说 明 6 瓶 样 本 盲 样 均 来 自 于 江 苏 省 疾 病 预 防 控 制 中 心, 编 号 分 别 为 A-049,A-086,A-093;B-022,B-056,B-086. 无 菌 打 开 西 林 瓶,30s 内 立 即 加 入 3ml 稀 释 液 进 行 溶 解, 待 溶 解 后, 吸 出 放 入 无 菌 瓶 中, 反 复 用 余 下 的 稀 释 液 清 洗 西 林 瓶 内 壁, 回 收 清 洗 液 放 入 无 菌 瓶 中, 稀 释 液 合 计 25 ml, 此 溶 液 是 待 检 样 品, 全 程 用 时 15 分 钟 1.2 盲 样 样 品 说 明 及 检 测 要 求 项 目 A 某 年 夏 季, 某 学 校 发 生 数 例 腹 泻 病 例, 起 病 急, 主 要 症 状 和 体 征 是 畏 寒, 发 热, 腹 泻, 腹 痛, 里 急 后 重, 果 酱 样 粘 液 血 便, 左 下 腹 压 痛 项 目 B 某 年 春 季 某 地 陆 续 出 现 一 批 症 状 相 似 的 腹 泻 患 者, 初 为 水 样 便, 继 之 转 为 鲜 血 性 粪 便 多 急 性 起 病, 以 胃 肠 道 症 状 最 突 出, 恶 心, 呕 吐, 腹 胀, 痉 挛 性 腹 痛, 部 分 出 现 低 热 部 分 病 例 出 现 少 尿, 无 尿 等 急 性 肾 功 能 表 现, 后 发 生 多 器 官 受 损 死 亡 项 目 A 和 项 目 B 来 自 部 分 病 例 粪 便 标 本, 未 经 分 离 纯 化 检 测 要 求 : 病 原 菌 分 离, 血 清 型 分 型 1.3 培 养 基 和 试 剂 3% 氯 化 钠 碱 性 蛋 白 胨 水,mEC 肉 汤,MM 增 菌 液,HE 琼 脂 平 板, 改 良 CCD 琼 脂 平 板 购 于 北 京 路 桥, 志 贺 氏 菌 显 色 平 板, 科 玛 嘉 沙 门 氏 菌 显 色 平 板, 科 玛 嘉 副 溶 血 弧 菌 显 色 平 板, 科 玛 嘉 O157 显 色 平 板, 大 肠 杆 菌 显 色 培 养 基 ( 郑 州 博 赛 ), ATB ID32 E 鉴 定 条 购 于 法 国 科 马 嘉 大 肠 埃 希 氏 菌 诊 断 血 清 O157, 志 贺 氏 菌 诊 断 血 清, 肠 侵 袭 性 大 肠 埃 希 氏 菌 诊 断 血 清, 大 肠 埃 希 氏 菌 诊 断 血 清 H7 购 于 宁 波 天 润, 均 在 有 效 期 内 使 用 1.4 荧 光 PCR 试 剂 肠 出 血 性 大 肠 核 酸 检 测 试 剂 盒, 肠 侵 袭 性 大 肠 核 酸 检 测 试 剂 盒, 大 肠 杆 菌 O157 核 酸 检 测 试 剂 盒, 沙 门 氏 菌 / 志 贺 氏 菌 核 酸 检 测 试 剂 盒, 副 溶 血 性 弧 菌 核 酸 检 测 试 剂 盒, 空 肠 弯 曲 菌 核 酸 检 测 试 剂 盒 均 购 于 硕 世 生 物 科 技 公 司 1.5 培 养 方 法 细 菌 性 和 阿 米 巴 性 痢 疾 诊 断 标 准 (WS ), 全 国 细 菌 性 痢 疾 监 测 方 案 ( 试 行 ), 感 染 性 腹 泻 诊 断 标 准 (WS ),2014 年 江 苏 省 食 源 性 疾 病 监 测 工 作 手 1,2,3 册 1.6 核 酸 提 取 及 荧 光 PCR 检 测 核 酸 提 取 待 检 样 品 静 置 30 分 钟 取 1 ml 于 1.5ml 无 菌 离 心 管 中,12000r/min 离 心 5 分 钟 后 弃 掉 上 清, 留 沉 淀 每 管 沉 淀 溶 于 50 ul DNA 提 取 液, 将 沉 淀 悬 浮 后 于 100 煮 沸 5 分 钟,12000r/min 离 心 5 分 钟, 取 上 清 液 用 于 PCR 反 应 加 样 : 依 据 荧 光 PCR 试 剂 盒 说 明 书 (EIEC,EHEC, 出 血 大 肠 杆 菌 O157, 沙 门 / 志 贺 菌, 副 溶 菌, 空 弯 菌 ) 分 别 配 制 反 应 液 分 装 于 反 应 管 (20ul/ 管 ), 再 分 别 加 入 处 理 好 的 待 测 样 本 (A-049,A-086,

8 A-093, B-022,B-056,B-086) 核 酸, 空 白 对 照, 阳 性 对 照 各 5ul, 终 体 积 25ul/ 管. PCR 扩 增 检 测 : 将 反 应 管 放 入 API7500 荧 光 定 量 PCR 扩 增 仪 进 行 扩 增 检 测 ( 循 环 参 数 设 定 依 据 说 明 书 进 行 设 置 ); 依 据 试 剂 盒 说 明 书 判 定 结 果 : 阳 性 : 待 测 标 本 检 测 结 果 Ct 35 曲 线 呈 S 型 且 有 明 显 指 数 增 长 期 判 为 阳 性 ; 阴 性 : 待 测 标 本 检 测 结 果 Ct>38 或 未 检 出 判 为 阴 性 ; 可 疑 : 待 测 标 本 检 测 结 果 35<Ct 38, 应 复 检, 复 检 结 果 仍 为 之 间 曲 线 呈 S 型 且 有 明 显 指 数 增 长 期 判 为 阳 性, 否 则 为 阴 性 阴 性 对 照 : 无 典 型 S 型 扩 增 曲 线 ; 阳 性 对 照 : 呈 典 型 S 型 扩 增 曲 线 且 Ct 30 : 结 果 2.1 经 检 测,A 样 品 盲 样 中 有 2 管 同 时 为 志 贺 和 侵 袭 性 大 肠 核 酸 阳 性, 分 别 为 A-049, A-086,B 样 品 盲 样 中 仅 B-056 肠 出 血 性 大 肠 杆 菌 和 大 肠 杆 菌 O157 核 酸 阳 性 具 体 结 果 Ct 分 别 见 表 1, 表 2 表 1 A 样 品 (A-049,A-086,A-093) 荧 光 PCR 核 酸 检 测 结 果 (Ct) 样 品 号 EHEC EIEC 沙 门 / 志 贺 菌 副 溶 弧 菌 空 弯 菌 (Ct) (Ct) (Ct) (Ct) A049 Undet 17.3( 阳 性 ) 志 贺 16.2 ( 阳 Undet Undet 性 ) 沙 门 Undet A086 undet 22.4( 阳 性 ) 志 贺 16.6 ( 阳 Undet Undet 性 ) 沙 门 Undet A093 Undet Undet Undet Undet Undet 阳 参 Stx Stx Eae 沙 门 18.4 志 贺 阴 参 undet undet Undet Undet Undet 依 据 相 应 试 剂 盒 判 定 标 准,A049 检 出 志 贺 氏 菌 和 EIEC 核 酸 阳 性 A086 检 出 志 贺 氏 菌 和 EIEC 核 酸 阳 性, A093 未 检 出 致 病 菌 核 酸 表 2 B 样 品 (B-022,B-056,B-086) 荧 光 PCR 核 酸 检 测 结 果 (Ct) 样 品 号 EHEC EIEC 沙 门 / 志 贺 副 溶 弧 菌 大 肠 杆 菌 空 肠 弯 (Ct) (Ct) (Ct) (Ct) O157(Ct) 曲 菌 B-022 Undet undet Undet Undet Undet Undet B-056 Stx ( 阳 性 ) Stx ( 阳 性 ) Eae 19.31( 阳 性 ) undet Undet Undet 20.5( 阳 性 ) Undet

9 B-086 Undet Undet Undet Undet Undet Undet 阳 参 Stx 沙 门 Stx 志 贺 18.2 Eae 阴 参 undet undet Undet Undet Undet Undet 依 据 相 应 试 剂 盒 判 定 标 准,B-056 检 出 大 肠 杆 菌 O157 和 EHEC( 出 血 性 大 肠 杆 菌 ) 核 酸 阳 性 B-022 和 B-086 未 检 出 致 病 菌 核 酸 2.2 菌 株 分 离 和 鉴 定 : 以 PCR 检 测 结 果 做 指 导, 选 择 相 应 的 增 菌 液, 显 色 平 板 和 选 择 性 平 板 进 行 划 线 分 离 培 养, 培 养 后 挑 取 可 疑 菌 落 做 生 化 鉴 定, 见 表 2,3 表 2 可 疑 菌 落 在 相 应 平 板 上 特 征 及 生 化 鉴 定 结 果 编 号 可 疑 菌 落 特 征 生 化 鉴 定 (ID32 E) A-049 志 贺 氏 显 色 平 板 上. 淡 粉 色 圆 形 光 滑 半 透 明 可 疑 菌 落 志 贺 氏 菌 属 3( 福 氏 志 贺 氏 菌 ) HE 选 择 性 平 板 上 无 色 湿 润 光 滑 针 尖 或 1-2mm 大 小 可 疑 菌 落 A086 志 贺 氏 显 色 平 板 上 淡 粉 色 圆 形 光 滑 半 透 明 可 疑 菌 落 志 贺 氏 菌 属 3( 福 氏 志 贺 氏 菌 ). HE 选 择 性 平 板 上 无 色 透 明 针 尖 或 1-2mm 大 小 湿 润 光 滑 可 疑 菌 落 B-056 O157 显 色 平 板 上 淡 粉 色 可 疑 菌 落 大 肠 埃 希 氏 菌 2.3 血 清 学 试 验 : 用 志 贺 菌 属 诊 断 血 清 对 检 出 的 结 果 均 为 志 贺 菌 (A-049,A-086) 进 行 血 清 凝 集, 结 果 志 贺 四 种 多 价 ++++ 福 氏 多 价 ++++ 福 氏 2 型 ++++ 群 因 子 7(8)++++, 群 因 子 3 4 群 因 子 6, 但 与 EIEC 血 清 K 多 价 1 K 多 价 2 均 不 凝 集, 查 表 为 福 氏 2b 型 志 贺 氏 菌 用 大 肠 埃 希 氏 菌 诊 断 血 清 O157 和 诊 断 血 清 H7 对 检 出 的 结 果 均 为 出 血 大 肠 埃 希 氏 菌 (B-056) 进 行 血 清 凝 集, 结 果 O157+++,H7+++ 讨 论 室 间 质 量 控 制 是 WHO 推 荐 的 一 种 评 价 实 验 室 工 作 质 量 的 方 法, 而 盲 样 菌 株 鉴 定 是 质 量 管 理 部 门 对 微 生 物 实 验 室 开 展 能 力 验 证 和 室 间 质 量 控 制 活 动 时 常 用 的 方 法, 它 既 是 对 实 验 室 能 力 的 考 查, 又 是 实 验 室 提 高 自 身 检 验 水 平 一 种 途 径 本 次 竞 赛 考 核 盲 样 模 拟 粪 便 标 本 采 样, 进 行 现 场 流 调 同 时 给 出 流 行 病 学 调 查 结 果, 这 就 要 求 我 们 学 会 全 面 分 析, 了 解 不 同 致 病 菌 流 行 病 学 基 本 特 征, 从 而 锁 定 一 定 范 围 在 本 次 考 核 中, 我 们 运 用 荧 光 定 量 PCR 法 进 行 致 病 菌 初 筛, 再 采 用 培 养 法 进 行 分 离 鉴 定, 得 到 目 标 菌 株, 比 单 纯 使 用 培 养 法 不 仅 缩 短 检 测 时 间, 结 果 也 更 可 靠 因 此 在 细 菌 性 食 物 中 毒 等 突 发 事 件 检 测 中, 我 们 不 妨 采 用 PCR 法 和 培 养 法 相 结 合 的 综

10 合 手 段 急 性 细 菌 性 痢 疾 诊 断 为 起 病 急, 有 发 热 腹 痛 腹 泻 里 急 后 重 左 下 腹 压 痛 粘 液 脓 血 便 者, 即 可 拟 诊 为 急 性 典 型 细 菌 性 痢 疾 ( 简 称 菌 痢 ); 大 便 培 养 阳 性 或 能 排 除 类 似 疾 病, 则 可 确 诊 本 病 应 与 鼠 伤 寒 沙 门 氏 菌 感 染 副 溶 血 弧 菌 肠 炎 弯 曲 菌 肠 炎, 侵 袭 性 大 肠 杆 菌 肠 炎 耶 氏 菌 肠 炎 等 鉴 别, 而 侵 袭 性 大 肠 杆 菌 肠 炎 其 发 病 季 节 及 临 床 特 征 酷 似 细 菌 性 痢 疾, 二 者 临 床 很 难 鉴 别 4 E I E C 随 水 和 食 物 经 口 进 入 肠 道 引 起 与 志 贺 氏 菌 属 所 致 的 痢 疾 相 似 的 临 床 症 状 如 高 热, 腹 痛, 里 急 后 重 粘 液 脓 血 便 等, 已 证 明 E IE C 带 有 与 志 贺 氏 菌 属 相 同 的 控 制 侵 袭 力 的 质 粒 本 次 盲 样 A-049 和 A086 经 荧 光 定 量 PCR 检 测 志 贺 菌 核 酸 和 肠 侵 袭 性 大 肠 核 酸 均 为 阳 性, 经 进 一 步 相 应 平 板 分 离, 生 化 鉴 定 和 血 清 凝 集, 排 除 了 肠 侵 袭 性 大 肠 杆 菌, 最 终 确 认 为 福 氏 2b 型 志 贺 氏 菌 ;B-056 经 荧 光 定 量 PCR 检 测 肠 出 血 性 大 肠 核 酸 和 大 肠 杆 菌 O157 核 酸 均 为 阳 性, 进 一 步 相 应 平 板 分 离, 生 化 鉴 定 和 血 清 凝 集 最 终 确 认 为 大 肠 杆 菌 O157 核 酸 检 测 法 的 突 出 特 点 是 快 速 灵 敏 度 高, 其 主 要 包 括 普 通 PCR 实 时 荧 光 定 量 PCR 基 因 芯 片 核 酸 测 序 等 普 通 PCR 方 法 一 般 需 要 对 扩 增 产 物 进 行 凝 胶 电 泳, 检 测 步 骤 多, 时 间 长, 且 只 能 从 定 性 的 角 度 进 行 分 析, 灵 敏 度 也 不 够 基 因 芯 片 的 方 法 基 于 核 酸 杂 交 的 原 理, 通 量 高 分 析 速 度 快, 但 芯 片 制 作 以 及 后 续 杂 交 检 测 都 有 较 高 的 仪 器 设 备 要 求, 且 对 样 本 的 浓 度 要 求 比 较 高, 一 般 也 很 难 达 到 比 较 高 的 灵 敏 度 核 酸 测 序 的 方 法 是 物 种 定 位 最 为 精 确 的 方 法, 但 对 仪 器 和 人 员 的 要 求 都 很 高, 需 要 在 专 业 实 验 室 进 行 相 比 之 下, 实 时 荧 光 定 量 PCR (real-time quantitative PCR 或 FQ-PCR) 技 术 具 有 明 显 的 优 势 该 技 术 在 常 规 PCR 基 础 上 加 入 荧 光 标 记 探 针 来 实 现 其 定 量 功 能, 为 样 品 中 靶 标 序 列 或 基 因 片 段 的 精 确 定 量 提 供 了 一 种 简 单 而 又 方 便 的 方 法, 是 目 前 国 际 公 认 的 病 原 微 生 物 诊 断 最 有 效 技 术 之 一 目 前 我 室 已 采 用 Real-time PCR 技 术 应 用 于 食 源 性 致 病 菌 初 筛 和 食 物 中 毒 检 测 5,6 本 次 竞 赛 中, 我 们 对 考 核 样 品 采 用 荧 光 PCR 和 传 统 分 离 培 养 方 法 进 行 检 测, 检 测 结 果 一 致 应 用 荧 光 PCR 对 7 种 可 疑 致 病 菌 检 测, 在 数 小 时 内 就 得 出 初 筛 结 果, 为 培 养 结 果 指 明 方 向 PCR 快 速 诊 断 对 大 型 活 动 安 全 保 障 食 品 安 全 传 染 病 突 发 事 件 的 初 筛 具 有 重 要 意 义, 将 其 应 用 于 多 项 目 质 控 样 本 的 检 测 中, 可 以 减 少 传 统 培 养 方 法 漏 检 的 可 能 性, 提 高 检 测 效 率 1 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部 WS 感 染 性 腹 泻 诊 断 标 准 [S] 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社, WS 细 菌 性 和 阿 米 巴 性 痢 疾 诊 断 标 准 [S] 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社, 年 江 苏 省 食 源 性 疾 病 监 测 工 作 手 册 [S] 中 国 CDC 营 养 与 食 品 安 全 所

11 4 朱 惠 芳, 黄 巧 萍 1 株 与 志 贺 氏 菌 生 化 相 似 抗 原 相 同 的 大 肠 埃 希 氏 菌 [J]. 实 用 检 验 医 师 杂 志,2014,6(4): 江 晓, 叶 艳 华, 王 玮 等 实 时 荧 光 法 PCR 法 快 速 分 离 食 源 性 致 病 菌 [J]. 预 防 医 学 情 报 杂 志,2012,4( 28) : 江 晓, 叶 艳 华, 丁 洁 等 Real-time PCR 技 术 在 快 速 检 测 一 起 食 物 中 毒 中 的 应 用 研 究 [J]. 中 国 卫 生 检 验 杂 志,2013,23(2): 基 金 项 目 : 江 苏 省 卫 生 厅 预 防 医 学 基 金 科 研 课 题 (Y ) 作 者 简 介 : 江 晓 (1968-), 女, 硕 士 研 究 生, 主 任 技 师, 主 要 从 事 食 源 性 致 病 菌 和 微 生 物 检 验 工 作 通 信 作 者 : 郭 宝 福,baofuguo@163.com

12 医 院 消 毒 质 量 监 测 结 果 分 析 董 非 温 宪 芹 苏 冠 民 ( 山 东 省 疾 病 预 防 控 制 中 心 消 毒 与 感 染 控 制 所, 济 南,250014) 摘 要 目 的 了 解 医 院 消 毒 与 灭 菌 工 作 质 量, 发 现 并 探 讨 消 毒 与 灭 菌 工 作 中 存 在 的 问 题, 为 控 制 医 院 感 染 提 供 依 据 方 法 年 间 对 山 东 省 6 所 医 院 消 毒 质 量 调 查 监 测, 所 检 测 医 疗 用 水 中 以 口 腔 科 合 格 率 最 低, 手 机 喷 水 和 冲 洗 水 的 平 均 合 格 率 分 别 为 27.27% 和 80%, 手 术 室 空 气 沉 降 菌 浮 游 菌 平 均 合 格 率 分 别 为 90.32% 和 90.32%, 外 科 术 前 手 消 毒 医 务 人 员 手 表 面 平 均 合 格 率 分 别 为 91.25% 75.39%, 物 体 表 面 内 镜 监 测 平 均 合 格 率 分 别 为 79.21% 和 83.78%, 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 生 物 监 测 合 格 率 97.77% 结 论 医 院 消 毒 质 量 合 格 率 偏 低, 提 示 医 院 各 方 应 予 以 重 视, 采 取 有 效 措 施, 保 证 消 毒 质 量, 降 低 医 院 感 染 发 生 的 危 险 做 好 医 院 消 毒 工 作 是 预 防 院 内 感 染 和 提 高 医 院 医 疗 护 理 质 量 的 重 要 环 节, 为 了 解 消 毒 灭 菌 现 状, 发 现 并 探 讨 消 毒 与 灭 菌 工 作 中 存 在 的 问 题, 对 山 东 省 6 所 医 院 进 行 了 监 测 现 对 年 的 监 测 数 据 进 行 总 结 分 析 方 法 监 测 对 象 包 括 三 所 三 级 医 院, 三 所 二 级 医 院, 监 测 内 容 包 括 手 术 室 空 气 空 气 沉 降 菌 和 浮 游 菌, 重 点 科 室 一 般 物 体 表 面 医 务 人 员 手 表 面 内 镜 重 点 科 室 医 疗 用 水 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 灭 菌 效 果 等 采 样 和 检 测 方 法, 依 据 2002 年 版 消 毒 技 术 规 范 GB 医 院 消 毒 卫 生 标 准 规 定 的 方 法 进 行 手 术 室 空 气 沉 降 菌 采 样 采 用 平 板 暴 露 法 和 采 样 器 法, 平 板 暴 露 法 根 据 手 术 室 的 级 别 选 择 暴 露 时 间, 用 采 样 器 法 采 集 浮 游 菌, 采 样 量 为 1m 3 重 点 科 室 一 般 物 体 表 面 和 医 务 人 员 手 表 面 采 用 棉 拭 子 涂 抹 法 采 样, 内 镜 的 内 腔 采 样 方 法 参 照 2004 年 版 内 镜 清 洗 消 毒 技 术 操 作 规 范 的 方 法, 冲 洗 内 腔 采 样 然 后 对 所 有 采 集 样 本 进 行 活 菌 培 养 计 数 结 果 判 定, 分 别 依 据 GB 医 院 消 毒 卫 生 标 准 WST 医 务 人 员 手 卫 生 规 范 和 2004 年 版 内 镜 清 洗 消 毒 技 术 操 作 规 范 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 灭 菌 过 程 采 用 温 度 压 力 监 测 设 备 进 行 检 测, 灭 菌 温 度 以 实 测 值 与 设 定 值 差 值 在 0 ~2 为 判 定 为 合 格, 灭 菌 时 间 以 实 测 值 与 设 定 值 差 值 不 超 过 ±2min, 且 实 测 值 不 低 于 最 低 灭 菌 时 间 判 定 为 合 格 生 物 监 测 采 用 自 含 式 生 物 指 示 剂, 根 据 实 际 情 况 采 用 放 置 于 标 准 包 内 和 裸 消, 灭 菌 后 培 养 结 果 判 定, 依 据 2002 年 版 消 毒 技 术 规 范 WS 医 院 消 毒 供 应 中 心 第 3 部 分 : 清 洗 消 毒 及 灭 菌 效 果 监 测 标 准

13 对 重 点 科 室 使 用 医 疗 用 水 的 采 样 培 养 及 结 果 判 定 参 照 2002 年 版 消 毒 技 术 规 范 GB/T 生 活 饮 用 水 标 准 检 验 方 法 - 微 生 物 指 标 血 液 净 化 标 准 操 作 规 程 (2010 版 ) 结 果 2.1 医 院 环 境 消 毒 质 量 监 测 结 果 : 医 院 手 术 室 ( 包 括 普 通 手 术 室 和 洁 净 手 术 室 ) 空 气 中 细 菌 总 数 平 板 暴 露 法 平 均 合 格 率 为 91.93%, 采 样 器 法 ( 限 洁 净 手 术 室 ) 平 均 合 格 率 90.32% 一 般 物 体 表 面 ( 选 择 重 症 监 护 室 血 透 室 感 染 性 疾 病 科 等 场 所 内 的 床 头 柜 治 疗 车 监 护 仪 面 板 工 作 台 门 把 手 等 为 采 样 对 象 ) 细 菌 总 数 平 均 合 格 率 为 79.21% ( 表 1) 2.2 手 卫 生 监 测 结 果 : 手 术 室 医 务 人 员 术 前 消 毒 效 果 平 均 合 格 率 为 91.25%, 部 分 重 点 科 室 医 务 人 员 手 卫 生 消 毒 效 果 平 均 合 格 率 为 75.39%( 表 2) 2.3 内 镜 监 测 结 果 : 内 镜 清 洗 消 毒 效 果 胃 镜 平 均 合 格 率 为 83.33%, 肠 镜 平 均 合 格 率 为 82.75%, 支 气 管 镜 平 均 合 格 率 为 90.90% ( 表 3) 2.4 部 分 医 疗 用 水 监 测 结 果 : 口 腔 科 手 机 喷 水 中 细 菌 总 数 合 格 率 27.27%, 口 腔 冲 洗 水 中 细 菌 总 数 平 均 合 格 率 为 80.00% 血 透 室 透 析 用 水 平 均 合 格 率 75.00% ( 表 4) 2.5 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 监 测 结 果 : 此 监 测 区 间 所 涉 及 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 有 3 种, 分 别 为 下 排 气 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 和 预 真 空 蒸 汽 灭 菌 器 正 压 脉 动 排 气 式 ( 卡 式 ) 灭 菌 器, 以 及 复 合 型 ( 含 下 排 气 和 预 排 气 程 序 ) 灭 菌 器 其 中 物 理 指 标 ( 温 度 时 间 ) 监 测 平 均 合 格 率 为 71.85%, 生 物 监 测 平 均 合 格 率 为 97.77% ( 表 5) 表 1 医 院 环 境 消 毒 质 量 监 测 结 果 年 份 手 术 室 空 气 ( 沉 降 菌 ) 手 术 室 空 气 ( 浮 游 菌 ) 物 体 表 面 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 合 计 表 2 医 务 人 员 手 卫 生 检 测 结 果 年 份 外 科 手 卫 生 手 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%)

14 合 计 年 份 内 镜 种 类 表 3 内 镜 清 洗 消 毒 监 测 结 果 胃 镜 肠 镜 支 气 管 镜 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 合 计 年 份 表 4 部 分 重 点 科 室 医 疗 用 水 卫 生 质 量 监 测 结 果 手 机 喷 水 口 腔 冲 洗 水 透 析 用 水 样 本 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 合 计 表 5 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 监 测 结 果 年 份 物 理 指 标 生 物 指 标 样 本 数 合 格 率 (%) 样 本 数 合 格 率 (%) 合 计 讨 论 近 年 来, 有 关 医 院 感 染 的 问 题 越 来 越 受 到 关 注 而 医 院 消 毒 与 灭 菌 质 量 又 因 同 医 院 感 染 密 切 相 关 而 备 受 重 视 有 关 的 消 毒 灭 菌 质 量 调 查 也 很 多 通 过 对 山 东 6 所 医 院 连 续 两 年 的 调 查 数 据 显 示, 口 腔 科 医 疗 用 水 卫 生 质 量 较 差, 尤 其 手 机 喷 水, 符 合 生 活 饮 用 水 卫 生 标 准 的 不 足 30%, 部 分 口 腔 用 水 检 测 值 细 菌 总 数 超 过 10 5 cfu/ml 就 检 测 结 果 看, 口 腔 科 医 疗 用 水 并 没 有 [1] 实 质 性 的 改 善, 口 腔 用 水 仍 存 在 很 大 隐 患 对 医 务 人 员 手 卫 生 情 况 监 测 显 示, 手 术 室 手 卫 生 平 均 合 格 率 91.25%, 明 显 高 于 其 他 重 点 科 室 的 75.39%, 究 其 原 因, 首 先 是 意 识, 其 次 是 配 置

15 现 在 多 数 医 院 都 使 用 洁 净 手 术 室, 空 气 质 量 监 测 结 果 表 明, 尚 有 部 分 医 院 在 洁 净 手 术 室 的 使 用 管 理 上 还 需 改 进 内 镜 的 清 洗 消 毒 物 体 表 面 消 毒 中 也 存 在 问 题, 需 明 晰 程 序, 加 强 管 理 和 监 督 对 医 院 使 用 的 各 类 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 物 理 指 标 监 测 中 发 现, 尽 管 当 次 生 物 监 测 合 格, 其 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 内 部 参 数 的 不 确 定 性 也 会 增 加 灭 菌 失 败 的 可 能 性 通 过 调 查, 显 示 出 医 疗 机 构 在 医 院 消 毒 灭 菌 工 作 中 的 问 题, 通 过 不 断 地 解 决 问 题, 有 效 预 防 和 控 制 院 内 感 染 的 发 生 参 考 文 献 [1] 班 海 群, 李 新 武, 张 流 波. 全 国 医 院 消 毒 质 量 监 测 结 果 [J]. 中 国 消 毒 学 杂 志,2011,28,(2): 193

16 Key words Infectious disease cards Hospital information technology level manpower Cluster analysis Logistic regression 传 染 病 报 告 是 一 项 传 染 病 防 控 的 基 础 工 作, 日 常 工 作 量 较 大, 医 疗 机 构 负 责 疫 情 报 告 的 医 生 经 常 反 映 人 手 紧, 任 务 重 传 染 病 报 告 的 质 量 与 医 院 信 息 化 程 度, 人 力 因 素 等 密 切 相 关 深 圳 市 在 医 院 信 息 化 建 设 方 面, 各 级 医 疗 单 位 的 信 息 化 步 伐 不 一, 开 发 程 度 也 不 尽 相 同 各 医 院 为 传 染 病 报 告 工 作 配 置 的 工 作 人 员 数 量 差 别 较 大 基 于 深 圳 市 传 染 病 报 告 的 现 状, 我 们 开 展 了 本 次 研 究, 希 望 了 解 我 市 医 院 人 力 资 源 以 及 信 息 化 建 设 对 传 染 病 漏 报 的 影 响 资 料 和 方 法 1 资 料 来 源 数 据 来 源 于 深 圳 市 2012 年 漏 报 调 查 ( 含 人 力 信 息 化 调 查 ) 数 据 2 方 法 采 用 分 层 随 机 抽 样 的 办 法, 随 机 抽 取 市 级 医 院 2 家, 区 级 医 院 10 家, 街 道 级 医 院 4 家, 进 行 传 染 病 漏 报 调 查 以 及 医 院 信 息 化 建 设 和 疫 情 报 告 人 员 人 力 情 况 调 查 其 中, 传 染 病 漏 报 调 查 主 要 针 对 于 门 诊 住 院 检 验 科 影 像 科 等 科 室 进 行 调 查 ; 疫 情 报 告 人 力 调 查 主 要 询 问 防 保 科 专 职 以 及 兼 职 从 事 疫 情 报 告 工 作 的 人 数, 全 职 人 员 计 1 人, 兼 职 人 员 计 0.5 人 ; 医 院 信 息 化 建 设 情 况 主 要 调 查 门 诊 住 院 检 验 放 射 等 部 门 有 无 电 子 信 息 管 理 系 统, 此 外 有 无 专 门 的 电 子 报 卡 系 统, 有 一 项 计 1 分, 最 高 分 为 5 分 除 此 以 外, 根 据 深 圳 市 漏 报 调 查 的 以 往 经 验, 检 验 科 这 个 环 节 容 易 发 生 漏 报, 因 此 本 次 调 查 还 了 解 了 检 验 科 的 检 验 结 果 反 馈 机 制 3 统 计 分 析 对 人 力 信 息 化 得 分 进 行 聚 类 分 析 (K-Means Cluster Analysis) 得 到 新 的 变 量 : 人 均 报 卡 量 程 度 和 信 息 化 程 度 对 不 同 人 均 报 卡 量 程 度 和 信 息 化 程 度 下 传 染 病 报 卡 漏 报 情 况 的 构 成 进 行 卡 方 分 析, 对 传 染 病 报 卡 漏 报 的 影 响 因 素 采 用 Logistic 回 归 分 析 结 果 2.1 各 医 院 报 卡 人 力 及 卡 片 漏 报 情 况 : 调 查 发 现,16 家 医 院 中, 有 5 家 医 院 的 漏 报 率 结 果 不 合 格 为 了 反 映 各 医 院 的 报 卡 人 力 情 况, 用 人 均 报 卡 量 来 衡 量 人 力 充 足 与 否 人 均 报 卡 量 = 医 院 总 报 卡 量 /( 全 职 人 员 数 量 + 兼 职 人 员 数 量 *0.5) 各 医 院 的 漏 报 情 况 也 不 尽 相 同, 某 大 医 院 的 人 均 报 卡 量 达 到 7916 张, 漏 报 率 则 为 0.0%; 而 另 外 一 家 医 院, 虽 然 人 均 报 卡 量 只 有 208 张, 漏 报 率 却 高 达 5% 由 于 人 均 报 卡 量 的 数 据 不 符 合 正 态 分 布 以 及 方 差 齐, 为 了 对 其 进 行 比 较 以 及 后 文 的 Logistic 回 归 分 析, 因 此 采 用 聚 类 分 析 (K-Means Cluster Analysis) 的 办 法 对 人 均 报 卡 量 和 信 息 化 得 分 进 行 等 级 分 类, 结 果 请 见 表 1 表 1. 深 圳 市 2012 年 医 院 传 染 病 人 均 报 卡 量 信 息 化 得 分 以 及 漏 报 率 情 况 2

17 医 院 医 院 总 报 卡 量 人 均 报 卡 量 漏 报 率 (%) 漏 报 率 结 果 判 定 人 均 报 卡 量 程 度 ( 聚 类 分 析 结 果 ) 不 合 格 不 合 格 不 合 格 不 合 格 不 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 0 对 医 院 进 行 漏 报 结 果 比 较 发 现, 人 均 报 卡 量 程 度 不 同 的 医 院, 其 漏 报 合 格 的 构 成 情 况 未 发 现 不 同,X 2 =0.377,P= 各 医 院 报 卡 信 息 化 程 度 及 卡 片 漏 报 情 况 : 由 于 各 医 院 报 卡 信 息 化 程 度 数 据 比 较 离 散, 为 了 对 其 进 行 比 较 以 及 后 文 的 Logistic 回 归 分 析, 因 此 采 用 聚 类 分 析 (K-Means Cluster Analysis) 的 办 法 对 信 息 化 得 分 进 行 等 级 分 类, 结 果 请 见 表 2 表 2. 深 圳 市 2012 年 医 院 传 染 病 人 均 报 卡 量 信 息 化 得 分 以 及 漏 报 率 情 况 医 院 人 均 报 卡 量 程 度 ( 聚 类 分 析 结 果 ) 信 息 化 程 度 ( 聚 类 分 析 结 果 ) 漏 报 率 (%) 漏 报 率 结 果 判 定 不 合 格 不 合 格 3

18 不 合 格 不 合 格 不 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 合 格 对 医 院 进 行 漏 报 合 格 情 况 比 较 发 现, 信 息 化 水 平 不 同 的 医 院, 其 漏 报 合 格 的 构 成 情 况 不 同, X 2 =6.495,P= 检 验 科 反 馈 机 制 : 对 各 医 院 门 诊 部 住 院 部 检 验 科 上 报 的 传 染 病 报 告 卡 分 别 进 行 抽 查 发 现, 全 市 16 家 医 院 传 染 病 报 告 卡 漏 报 率 为 1.3%, 门 诊 部 漏 报 率 为 0.9%, 住 院 部 为 1.0%, 检 验 科 为 2.3% 同 时 对 防 保 科 工 作 人 员 的 访 谈 中 也 发 现 检 验 科 是 容 易 出 现 漏 报 的 关 键 环 节 因 此 对 检 验 科 的 传 染 病 报 告 卡 反 馈 机 制 进 行 调 查, 结 果 发 现 检 验 科 和 防 保 科 之 间 的 反 馈 机 制 主 要 有 以 下 4 种 : 检 验 科 主 动 告 知 防 保 科 ; 防 保 科 定 期 前 往 检 验 科 誊 抄 记 录 ; 防 保 科 通 过 电 子 信 息 系 统 进 行 查 询 ; 病 人 拿 到 单 据 后 找 医 生 报 卡 具 体 情 况 如 表 3: 4

19 * 第 号 没 有 得 到 相 关 数 据 2.4 传 染 病 报 告 卡 漏 报 率 影 响 因 素 分 析 : 以 人 均 报 卡 量 程 度 信 息 化 程 度 检 验 科 反 馈 机 制 反 馈 途 径 数 量 为 X 变 量, 以 是 否 有 漏 报 卡 为 Y 变 量, 进 行 Logistics 回 归 分 析 ( 请 见 表 4) 结 果 发 现, 信 息 化 程 度 和 医 院 的 漏 报 结 果 呈 负 相 关, 说 明 信 息 化 得 分 高 的 医 院 不 容 易 发 生 传 染 病 漏 报 而 人 均 报 卡 量 分 级 未 能 进 入 模 型, 提 示 在 有 医 院 信 息 化 的 影 响 下, 尚 不 能 发 现 人 均 报 卡 量 分 级 对 漏 报 的 影 响 表 4. 深 圳 市 2012 年 传 染 病 漏 报 的 影 响 因 素 logistic 分 析 影 响 因 素 B S.E. Wald df P 值 OR 值 95% CI 信 息 化 程 度 讨 论 本 研 究 中 对 深 圳 各 医 院 的 传 染 病 报 告 卡 漏 报 调 查 发 现, 检 验 科 的 漏 报 率 是 最 高 的 调 查 中 发 现, 检 验 科 和 防 保 科 的 沟 通 有 的 医 院 还 处 于 比 较 原 始 的 誊 抄 的 阶 段, 这 对 医 生 的 工 作 量 是 一 个 严 峻 的 考 验 有 的 检 验 科 虽 然 有 信 息 系 统, 但 是 防 保 科 医 生 却 没 有 权 限 查 看, 这 给 传 染 病 卡 的 报 告 工 作 也 提 出 了 严 峻 的 考 验 所 以 希 望 各 医 院 在 开 发 各 部 门 信 息 系 统 的 同 时, 也 要 考 虑 相 [1-2] 关 科 室 的 权 限 分 配 问 题, 让 信 息 系 统 最 大 化 的 发 挥 作 用 各 医 院 参 与 传 染 病 报 告 管 理 的 全 职 人 员 和 兼 职 人 员 数 量 不 同, 各 医 院 传 染 病 报 告 卡 数 量 也 不 同, 因 此 用 人 均 报 卡 量 来 对 各 医 院 的 工 作 压 力 进 行 统 一, 以 便 于 比 较 从 结 果 来 看, 人 均 报 告 量 不 同 的 医 院 在 传 染 病 报 告 卡 的 漏 报 构 成 上 没 有 发 现 差 异 而 在 信 息 化 程 度 上, 信 息 化 程 度 不 同 的 医 院 漏 报 构 成 则 有 差 异 在 Logistic 回 归 分 析 中, 信 息 化 程 度 是 唯 一 能 够 进 入 模 型 的 指 标, 与 卡 方 结 果 一 致, 说 明 信 息 化 程 度 对 防 止 传 染 病 卡 的 漏 报 有 很 大 帮 助 因 此 建 议 医 院 的 信 息 化 工 作 要 在 门 诊 住 院 检 验 放 射 等 核 心 部 门 全 面 开 展, 若 能 采 用 专 门 的 电 子 报 卡 系 统 则 更 好, 这 样 能 一 定 程 度 上 排 除 人 力 因 素 对 传 染 病 卡 漏 报 的 影 响, 避 免 发 生 传 染 病 卡 漏 报 现 象 [3-7] 参 考 文 献 : [1] 陈 振 明, 曹 晓 鸥, 梁 子 良 等. 广 东 省 佛 山 市 南 海 区 传 染 病 自 动 识 别 和 报 告 系 统 的 建 立 和 评 估 [J]. 疾 病 监 测,2012,27(11) [2] 余 佳 薇, 潘 新 宇, 张 艺 等. 余 姚 市 人 民 医 院 传 染 病 网 络 报 告 系 统 应 用 评 价 [J]. 上 海 预 防 医 学,2012,24(4)

20 [3] 景 莉, 李 莉 莉, 韩 雪 玲 等. 信 息 化 在 医 院 传 染 病 疫 情 监 控 管 理 中 的 应 用 [J]. 当 代 护 士,2014, 7(2) [4] 刘 新 凤, 李 秀 萍, 魏 孔 福 等. 甘 肃 省 2009 年 传 染 病 信 息 网 络 直 报 情 况 分 析 [J]. 中 国 公 共 卫 生 管 理,2011,27(1)79-80 [5] 刘 伦 皓, 罗 湘 蜀, 杨 长 虹 等 年 四 川 省 法 定 传 染 病 网 络 直 报 质 量 评 价 [J]. 预 防 医 学 情 报 杂 志,2011,27(3) [6] 杨 长 贵, 欧 秀 莲, 郑 晓 全. 医 院 信 息 化 系 统 在 医 院 公 共 卫 生 监 测 信 息 化 管 理 中 的 应 用 [J].2012,10(21)14-16 [7] 李 硕, 郭 晓 东, 吕 宏 宇 等. 医 院 信 息 系 统 在 传 染 病 医 院 管 理 中 的 应 用 [J]. 现 在 生 物 医 学 进 展,2013,13(21) 6

21 further strengthen infectious disease's monitoring and the prevention. Keywords] infectious diseases; epidemic situation; prevalence; incidence. 广 西 百 色 隆 林 各 族 自 治 县 地 处 云 贵 高 原 东 南 部, 毗 邻 贵 州 的 兴 义 安 龙 和 册 亨 等 县, 是 个 少 数 民 族 聚 居 地, 主 要 居 住 着 壮 汉 苗 彝 仡 佬 等 5 种 民 族, 少 数 民 族 占 总 人 口 79.41% 总 面 积 3543 km 2, 辖 16 个 乡 ( 镇 ),179 个 行 政 村,2619 个 自 然 村 屯, 目 前 全 县 总 人 口 39 万 多 该 县 的 经 济 基 础 薄 弱, 属 于 国 家 级 贫 困 县,2000 年 该 县 曾 发 生 一 起 动 物 鼠 疫 暴 发 流 行 并 波 及 人 间 的 重 大 疫 情 1 为 探 讨 该 县 法 定 传 染 病 的 流 行 情 况 及 为 当 地 政 府 制 定 相 关 控 制 措 施 提 供 依 据, 现 将 该 县 年 法 定 乙 丙 类 传 染 病 疫 情 资 料 分 析 如 下 材 料 和 方 法 1. 资 料 来 源 疫 情 资 料 来 源 于 中 国 疾 病 预 防 控 制 信 息 系 统 的 子 系 统 疾 病 监 测 信 息 报 告 管 理 系 统, 每 年 人 口 资 料 来 源 隆 林 各 族 自 治 县 统 计 局 2. 方 法 用 Excel 软 件 对 国 家 疾 病 监 测 信 息 报 告 管 理 系 统 疫 情 数 据 进 行 整 理, 采 用 描 述 流 行 病 学 方 法 对 隆 林 年 法 定 传 染 病 乙 丙 类 报 告 发 病 情 况 做 出 分 析 结 果 1. 传 染 病 发 病 及 死 亡 概 况 : 年 该 县 发 现 法 定 报 告 乙 类 和 丙 类 传 染 病 共 例, 其 中 乙 类 为 4193 例, 丙 类 例, 人 群 发 病 率 为 /10 万 传 染 病 死 亡 人 数 共 44 例, 人 群 死 亡 率 为 1.87/10 万, 其 中 艾 滋 病 患 者 死 亡 人 数 占 总 死 亡 人 数 的 47.73%, 病 死 率 为 36.21, 狂 犬 病 死 亡 人 数 占 总 死 亡 人 数 的 34.1%, 而 病 死 率 为 100%, 结 核 死 亡 人 数 占 总 死 亡 人 数 的 9.09%, 手 足 口 病 新 生 儿 破 伤 风 均 有 死 亡 病 例 乙 丙 类 传 染 病 呈 现 逐 年 增 加 的 趋 势 ( 表 1 表 2 图 1) 2. 传 染 病 病 种 构 成 : 年 无 甲 类 传 染 病 报 告, 报 告 乙 类 和 丙 类 传 染 病 共 22 种 例 患 者, 年 平 均 发 病 率 为 万, 其 中 乙 类 传 染 病 14 种 4193 例 患 者, 年 平 均 发 病 率 为 /10 万, 丙 类 传 染 病 7 种 例 患 者, 年 平 均 发 病 率 为 /10 万 3. 传 染 病 发 病 位 次 乙 类 传 染 病 总 发 病 数 位 于 前 5 位 的 依 次 为 肺 结 核 2388 例 病 毒 性 肝 炎 766 例 梅 毒 525 例 痢 疾 214 例 淋 病 115 例, 占 乙 类 传 染 病 总 病 例 数 的 95.59%(4008/4193) 丙 类 传 染 病 总 发 病 数 位 于 前 5 位 的 依 次 为 手 足 口 病 例, 急 性 出 血 性 结 膜 炎 603 例, 流 行 性 腮 腺 炎 581 例, 其 他 感 染 性 腹 泻 208 例, 风 疹 98 例, 占 丙 类 传 染 病 总 病 例 数 的 99.44% (13707/13784) 4. 流 行 特 征 : 乙 类 传 染 病 肺 结 核 病 例 是 每 年 发 现 较 多 的 传 染 病 艾 滋 病 结 核 等 重 点 传 染 病 发 病 率 无 明 显 波 动, 病 毒 性 肝 炎 梅 毒 淋 病 狂 犬 病 新 生 儿 破 伤 风 伤 寒 和 副 伤 寒 等 患

22 者 为 逐 年 递 减, 麻 疹 连 续 5 年 无 病 例 出 现, 但 2013 年 后 每 年 均 有 病 例 出 现, 分 别 为 2013 年 45 例 2014 年 14 例 2015 年 2 例 丙 类 传 染 病 每 年 以 手 足 口 病 病 例 最 多, 呈 明 显 的 双 年 份 高 发 趋 势, 双 年 份 2010 年 为 500 例 2012 年 为 3025 例 2014 年 为 3255 例, 单 年 份 2011 年 为 61 例 2013 年 为 1947 例 2015 年 为 3249 例, 其 次 为 急 性 出 血 性 结 膜 炎 患 者 4.1 年 龄 和 性 别 分 布 : 年 各 年 龄 组 均 有 传 染 病 患 者, 高 发 年 龄 从 0 岁 到 64 岁, 占 总 病 例 数 的 %, 但 以 0-4 岁 年 龄 组 患 病 率 为 最 高, 占 总 病 例 数 的 64.94% 在 所 发 现 的 传 染 病 患 者 中 男 性 为 61.56% 高 于 女 性 的 38.44% 丙 类 传 染 病 在 0-4 岁 为 发 病 高 峰 期,15 岁 以 后 的 年 龄 组 患 者 出 现 较 少 ( 表 1) 4.2 职 业 分 布 : 年 乙 丙 类 传 染 病 患 者 包 括 了 16 种 职 业, 但 以 散 居 儿 童 患 病 率 最 高 占 总 病 例 的 58.46%(10509/17977), 其 次 为 农 民 占 20.93%(3763/17977), 托 幼 儿 童 占 11.10% (1995/17977) 排 在 第 三 位, 学 生 占 5.96%(1072/17977), 其 他 职 业 人 员 发 病 人 数 所 占 比 例 均 在 1% 以 下 4.3 地 区 分 布 : 该 县 16 个 乡 镇 均 存 在 乙 丙 类 传 染 病 患 者, 以 新 州 镇 人 群 患 病 率 最 高, 总 发 病 人 数 为 3999 例, 人 群 年 平 均 发 病 率 为 / 万 ; 其 次 为 者 浪 乡 总 发 病 数 为 1066 例, 人 群 年 平 均 发 病 率 为 94.98/ 万 ; 桠 杈 镇 总 发 病 数 为 736 例, 人 群 年 平 均 发 病 率 为 93.27/ 万 ; 而 金 钟 山 乡 患 病 率 最 低, 总 发 病 人 数 为 375 例, 人 群 年 平 均 发 病 率 为 41.54/ 万 4.4 时 间 分 布 : 年 该 县 乙 丙 类 传 染 病 每 年 平 均 为 2996 例, 病 例 数 呈 明 显 的 逐 年 上 升 趋 势 该 县 全 年 均 有 传 染 病 病 例 出 现, 每 年 病 例 出 现 的 高 峰 期 在 4-6 月 份, 其 中 乙 类 传 染 病 在 5 月 份, 丙 类 传 染 病 在 4 月 份 表 年 隆 林 各 族 自 治 县 人 群 法 定 报 告 传 染 病 ( 乙 丙 类 ) 发 病 与 死 亡 情 况 总 计 乙 类 丙 类 死 亡 人 数 年 份 人 口 总 数 总 发 病 数 男 女 发 病 率 (1/10 万 ) 发 病 率 发 病 (1/10 数 万 ) 发 病 数 发 病 率 (1/10 万 ) 死 亡 人 数 男 女 死 亡 率 (1/10 万 ) 病 死 率 %

23 合 计 讨 论 年 隆 林 各 族 自 治 县 乙 丙 类 传 染 病 总 体 发 病 率 波 动 在 /10 万 之 间, 年 平 均 为 /10 万, 最 高 为 2015 年 达 /10 万, 病 例 呈 现 明 显 的 双 年 份 逐 年 增 多 的 趋 势, 其 首 要 原 因 与 2008 年 手 足 口 病 开 始 纳 入 法 定 传 染 病 管 理 有 关, 另 一 方 面 是 由 于 中 华 人 民 共 和 国 传 染 病 防 治 法 的 进 一 步 贯 彻 落 实, 各 级 医 疗 部 门 传 染 病 网 络 直 报 系 统 不 断 的 完 善 所 致 年 隆 林 各 族 自 治 县 乙 类 传 染 病 人 群 年 均 发 病 率 为 /10 万, 结 核 病 仍 然 是 当 地 人 群 中 发 病 最 多 的 乙 类 传 染 病, 人 群 年 均 发 病 率 为 /10 万, 这 与 近 几 年 全 国 乙 类 传 染 病 发 病 人 数 为 第 一 的 病 毒 性 肝 炎 有 所 不 同 2, 但 与 广 西 全 区 近 几 年 结 核 病 发 病 排 名 第 一 是 相 3 一 致 的 年 的 乙 类 传 染 病 及 结 核 病 的 人 群 年 均 发 病 率 分 别 为 /10 万 /10 万, 均 有 明 显 的 下 降 该 县 乙 类 传 染 病 病 例 其 次 为 病 毒 性 肝 炎, 人 群 年 均 发 病 率 为 32.52/10 万, 人 群 中 主 要 以 乙 型 肝 炎 患 者 为 主, 人 群 年 均 发 病 率 为 28.02/10 万 从 疫 情 统 计 数 据 分 析, 该 县 淋 病 梅 毒 患 者 有 逐 年 下 降 的 趋 势, 但 艾 滋 病 患 者 却 有 逐 年 增 多 的 现 象 该 县 6 七 十 年 代 以 前 疟 疾 是 当 地 的 主 要 传 染 病 之 一, 经 过 多 年 的 防 治 已 于 2015 年 8 月 通 过 了 市 级 消 除 疟 疾 考 核, 达 到 了 消 除 疟 疾 的 标 准, 但 随 着 流 动 人 口 的 增 加, 不 断 有 从 东 南 亚 国 家 感 染 疟 疾 回 归 患 者, 并 有 死 亡 病 例 出 现 年 隆 林 各 族 自 治 县 丙 类 传 染 病 人 群 年 均 发 病 率 为 /10 万, 手 足 口 病 是 当 地 人 群 中 丙 类 传 染 病 发 病 最 多 的 疾 病, 人 群 年 均 发 病 率 达 /10 万 近 年 来 该 县 手 足 口 病 疫 情 呈 明 显 上 升 态 势, 高 居 乙 丙 类 传 染 病 发 病 之 首, 与 近 几 年 来 全 国 各 地 手 足 口 病 疫 情 流 行 态 势 一 致 8-10, 手 足 口 病 给 该 县 公 共 卫 生 工 作 及 患 儿 家 庭 造 成 很 大 压 力, 防 控 形 势 严 峻 年 隆 林 各 族 自 治 县 由 传 染 病 引 起 的 死 亡 病 例 人 群 死 亡 率 波 动 在 /10 万 之 间, 年 平 均 为 1.87/10 万, 主 要 以 艾 滋 病 引 起 的 死 亡 病 例 为 主, 死 亡 的 44 例 患 者 中 有 21 例 为 艾 滋 病 占 死 亡 人 数 的 47.73%, 病 死 率 为 36.21%; 其 次 为 为 狂 犬 病, 共 死 亡 15 例, 占 死 亡 人 数 的 34.09%, 病 死 率 为 100% 其 他 导 致 死 亡 的 传 染 病 分 别 为 结 核 4 例 新 生 儿 破 伤 风 2

24 例 手 足 口 病 2 例, 值 得 注 意 的 是 手 足 口 病 是 唯 一 导 致 死 亡 的 丙 类 传 染 病 该 县 传 染 病 防 控 工 作 取 得 了 一 定 的 成 效, 乙 类 传 染 病 总 的 发 病 率 有 下 降 的 趋 势, 但 是 肺 结 核 艾 滋 病 乙 肝 等 慢 性 传 染 病 依 然 是 导 致 人 群 死 亡 的 主 要 病 种, 而 丙 类 传 染 病 中 手 足 口 病 逐 年 上 升 的 趋 势 明 显 因 而 传 染 病 防 控 工 作 仍 然 面 临 着 巨 大 的 挑 战, 是 一 项 长 期 而 艰 巨 的 任 务, 需 进 一 步 加 强 对 传 染 病 的 监 测 与 防 控 工 作, 乙 类 传 染 病 中 的 艾 滋 病 结 核 病 病 毒 性 肝 炎, 以 及 丙 类 传 染 病 中 的 手 足 口 病 是 重 点 防 控 病 种 参 考 文 献 [1] 梁 江 明, 曾 竣, 周 树 武, 等. 隆 林 县 鼠 疫 指 示 动 物 调 查 [J]. 中 国 地 方 病 防 治 杂 志,2008,23(3): [2] 高 风 华, 冯 谦 谨, 江 丽 凤, 等. 中 国 大 陆 年 法 定 传 染 病 疫 情 分 析 [J]. 现 代 预 防 医 学, 2013,40(4): [3] 杨 永 亮, 黄 亚 铭, 刘 贵 学, 等 年 隆 林 各 民 族 自 治 县 结 核 病 例 调 查 分 析 [J]. 疾 病 监 测 与 控 制 2010,4(12): [4] 吴 秀 玲 年 广 西 甲 乙 类 传 染 病 疫 情 分 析 [J]. 现 代 预 防 医 学,2009,36(9): [5] 吴 声 荣, 黄 亚 铭, 杨 永 亮, 等 年 隆 林 各 族 自 治 县 法 定 报 告 乙 丙 类 传 染 病 疫 情 分 析 [J]. 中 国 卫 生 统 计,2012,29(1): [6] 吴 声 荣, 黄 亚 铭, 陆 玉 虎, 等 年 隆 林 县 疟 疾 流 行 状 况 分 析 [J]. 海 峡 预 防 医 学 杂 志 2010,16(4): [7] 曹 品 光, 黄 亚 铭, 吴 声 荣, 等 年 黔 桂 两 省 24 县 疟 疾 流 行 状 况 分 析 [J]. 热 带 病 与 寄 生 虫 学,2010,8(1):4-6. [8] 马 芳, 杜 建 才, 马 江 涛, 等. 宁 夏 年 手 足 口 病 流 行 病 学 特 征 分 析 [J]. 现 代 预 防 医 学, 2012,39(3): [9] 王 小 军, 蔡 玉 成, 刘 海 军, 等 年 甘 肃 省 陇 南 市 手 足 口 病 流 行 特 征 分 析 [J]. 疾 病 预 防 控 制 通 报,DOI: /j.cnki.jbyfkztb [10] 黄 淑 琼, 陈 红 缨, 蔡 晶, 等 年 湖 北 省 法 定 传 染 病 流 行 特 征 分 析 [J]. 公 共 卫 生 与 预 防 医 学,2015,26(6): [11] 罗 官 生, 吴 声 荣, 刘 贵 学 年 广 西 隆 林 县 手 足 口 病 流 行 与 病 原 学 特 征 分 析 [J]. 职 业 与 健 康,2015,31(15):

25 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 间 接 ELISA 检 测 方 法 的 建 立 杜 燕 华 1, 李 懿 1, 程 宁 宁 2, 许 汴 利 1 1, 黄 学 勇 (1. 河 南 省 疾 病 预 防 控 制 中 心, 河 南 省 医 学 病 原 生 物 学 重 点 实 验 室, 郑 州 ; 2. 郑 州 大 学 公 共 卫 生 学 院 流 行 病 学 教 研 室 郑 州 ) 通 信 作 者 : 黄 学 勇, huangxy@hncdc.com.cn 摘 要 目 的 建 立 基 于 间 接 ELISA 法 检 测 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 的 血 清 学 检 测 方 法 方 法 应 用 基 因 工 程 原 核 表 达 的 新 布 尼 亚 病 毒 核 蛋 白 (N 蛋 白 ), 初 步 建 立 用 于 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 的 定 性 检 测 试 验, 应 用 建 立 的 间 接 ELISA 法 方 法 对 140 例 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 患 者 急 性 期 和 恢 复 期 双 份 血 清 标 本 进 行 检 测, 并 与 间 接 免 法 的 实 验 室 诊 断 结 果 进 行 了 对 比 结 果 所 建 立 的 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 间 接 ELISA 检 测 方 法 重 复 性 好, 与 其 他 病 毒 无 交 叉 反 应, 与 间 接 免 疫 法 对 140 例 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 症 疑 似 病 例 的 实 验 室 诊 断 阳 性 率 差 异 无 统 计 学 意 义, 有 较 好 的 一 致 性 结 论 建 立 了 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 间 接 ELISA 检 测 方 法, 该 方 法 适 用 于 新 布 尼 亚 病 毒 感 染 的 实 验 室 诊 断 及 流 行 病 学 调 查 关 键 词 新 布 尼 亚 病 毒 ; 间 接 ELISA 法 ; 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 ( ), 河 南 省 医 学 科 技 攻 关 计 划 项 目 ( ) Establishment of indirect ELISA of IgG antibody against new bunyavirus DU Yan-hua, LI Yi, CHENG Ningning,XU Bian-li, HUANG Xue-yong. (1. Henan Provincial Center for Disease Control and Prevention, Zhengzhou , China;2. Department of Epidemiology,College of Public Health,Zhengzhou University,Zhengzhou ) Abstract Objective To establish an indirect ELISA method for detecting IgG antibody against new bunyavirus. Methods Based on nucleoprotein gene of new bunyavirus using prokaryotic expression, a qualitative indirect ELISA method for detecting IgG antibody was set up. Using established method,serum samples from both acute and recovery phases were tested for 140 cases with fever thrombocytopenia and leukopenia syndrome.the results were compared with detections by IFA.Results The established indirect ELISA method has better repeatability, no cross reaction with other virus. There was no significant difierence in results between IFA and indirect ELISA in 140 cases with fever thrombocytopenia and leukopenia syndrome. Conclusion An indirect ELISA method for detecting IgG antibody against new bunyavirus was established successfully, which is suitable for laboratory diagnosis and epidemiological investigation with fever thrombocytopenia and

26 leukopenia syndrome. Key Words New bunyavirus; Fever thrombocytopenia and leukopenia syndrome; Indirect ELISA. 新 布 尼 亚 病 毒 是 新 发 传 染 病 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 的 主 要 病 原 体,2010 年 在 我 国 首 次 [1,2] 发 现 年 全 国 23 个 省 份 共 报 告 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 5352 例, 河 南 省 报 告 病 [3] 例 2143 例, 是 目 前 发 病 最 多 的 省 份, 也 是 最 早 监 测 该 疾 病 的 省 份, 随 着 病 例 发 现 能 力 的 增 加, 病 例 报 告 人 数 和 检 测 人 数 也 逐 年 增 加, 监 测 病 例 的 实 验 室 诊 断 仅 靠 新 布 尼 亚 病 毒 核 酸 检 测 的 单 一 方 法 己 经 不 能 满 足 实 际 的 需 要, 因 而 本 文 建 立 了 一 种 基 于 间 接 ELISA 法 检 测 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 的 血 清 学 检 测 方 法 材 料 与 方 法 1. 抗 原 制 备 :PCR 扩 增 新 布 尼 亚 病 毒 核 蛋 白 (NP) 基 因, 连 接 至 原 核 表 达 载 体 pmalc2x 中, 转 化 大 肠 杆 菌 JM109,IPTG 诱 导 表 达 纯 化 获 得 MAB-NP 融 合 蛋 白, 经 纯 化 和 鉴 定 后 的 NP [4] 抗 原 由 本 实 验 室 制 备 和 保 存 2. 标 本 来 源 : 收 集 70 例 2012 年 信 阳 市 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 症 疑 似 病 例 血 清 标 本, 每 例 病 例 均 采 集 急 性 期 ( 发 病 2 周 内 ) 和 恢 复 期 ( 发 病 4 周 左 右 ) 非 抗 凝 血 各 5ml, 共 140 份 血 清 标 本, 保 存 于 河 南 省 疾 控 中 心 实 验 室 -70 冰 箱 出 血 热 病 毒 乙 脑 病 毒 登 革 热 病 毒 IgG 抗 体 阳 性 的 血 清 各 10 份, 由 河 南 省 疾 控 中 心 实 验 室 进 行 实 验 室 确 诊 并 保 存 3. 间 接 ELISA 检 测 方 法 的 建 立 : 用 新 布 尼 亚 病 毒 N 抗 原 包 被 微 孔 板,4 过 夜 洗 板 后, 加 入 稀 释 的 血 清 标 本,37 温 箱 孵 育 1 小 时 洗 板 后, 加 入 HRP-goat-anti-human IgG (American Qualex, Califonia, USA),37 温 箱 再 孵 育 1 小 时 洗 板 后, 加 入 ABTS (Kirkegaatrd & Perry, Gaithersburg, MD),37 显 色 30min 用 酶 标 仪 测 定 波 长 405 的 读 数 结 果 判 定 : 临 界 值 (cut-off 值 )= 阴 性 对 照 平 均 值 2.1, 血 清 样 本 OD 值 临 界 值 的 样 品 判 为 阳 性, 反 之 为 阴 性 4. 间 接 ELISA 法 工 作 条 件 的 优 化 : 新 布 尼 亚 病 毒 N 抗 原 ( 浓 度 1ug/uL) 依 次 做 1:1000 1:2000 1:4000 1:8000 稀 释, 阳 性 血 清 依 次 做 1:100 1:200 1:400 1:800 稀 释, HRP-anti-human IgG 依 次 做 1: : : :40000 稀 释, 通 过 正 交 实 验 确 定 最 佳 反 应 条 件 5. 特 异 性 试 验 : 用 已 知 出 血 热 病 毒 乙 脑 病 毒 登 革 热 病 毒 IgG 抗 体 阳 性 血 清 及 健 康 人 血 清, 对 本 研 究 所 建 立 的 新 布 尼 亚 病 毒 间 接 ELISA 检 测 方 法 进 行 交 叉 实 验, 确 定 该 方 法 的 特 异 性 ;

27 6. 可 重 复 性 研 究 : 选 择 2012 年 信 阳 市 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 症 疑 似 病 例 血 清 标 本 30 份, 经 二 次 检 测, 每 次 同 一 样 本 设 3 个 复 孔, 确 定 检 测 符 合 率 并 计 算 变 异 系 数 7. 临 床 标 本 的 检 测 : 将 140 例 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 症 疑 似 病 例 急 性 期 和 恢 复 期 双 份 血 清 合 计 280 份, 分 别 用 间 接 ELISA 法 与 间 接 免 疫 荧 光 法 (IFA) 检 测, 间 接 免 疫 荧 光 法 (IFA) [5] 操 作 方 法 详 见 参 考 文 献, 阳 性 病 例 的 判 别 标 准 : 患 者 标 本 检 测 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 阳 转 或 恢 复 期 滴 度 较 急 性 期 4 倍 以 上 增 高 8. 统 计 学 方 法 : 所 有 的 实 验 结 果 分 析 采 用 统 计 学 软 件 SPSS16.0, 间 接 ELISA 法 与 间 接 免 疫 荧 光 法 (IFA)2 种 方 法 作 kappa 一 致 性 检 验 结 果 1. 间 接 ELISA 法 工 作 条 件 的 确 定 : 新 布 尼 亚 病 毒 N 抗 原 1:2000, 即 每 孔 50ug, 阳 性 血 清 做 1:400 稀 释,HRP-anti-human IgG 做 1:30000 为 最 适 工 作 条 件 2. 特 异 性 试 验 结 果 : 将 出 血 热 病 毒 乙 脑 病 毒 登 革 热 病 毒 IgG 抗 体 阳 性 血 清 各 10 份 及 健 康 人 血 清 20 份, 用 本 研 究 所 建 立 的 新 布 尼 亚 病 毒 间 接 ELISA 检 测 方 法 检 测, 结 果 均 为 阴 性, 无 交 叉 反 应 3. 可 重 复 性 研 究 结 果 :30 份 血 清 标 本 重 复 检 测, 诊 断 符 合 率 为 100%, 两 次 检 出 率 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05), 每 份 样 本 的 A 值 变 异 系 数 约 为 6% 4. 间 接 ELISA 法 与 间 接 免 疫 荧 光 法 (IFA) 诊 断 结 果 的 比 较 :140 例 病 例 的 急 性 期 和 恢 复 期 双 份 血 清 标 本 用 2 种 方 法 检 测, 新 布 尼 亚 病 毒 IgG 抗 体 阳 转 或 恢 复 期 滴 度 较 急 性 期 4 倍 以 上 增 高 为 阳 性, 结 果 详 见 表 1 相 对 于 IFA 方 法, 间 接 ELISA 法 的 灵 敏 度 为 87.23%, 特 异 度 为 97.84% ELISA 检 测 阳 性 率 30.71%(95%CI:22.98%~38.45%),IFA 检 测 阳 性 率 33.57%(95%CI: 25.65%~41.49%) 经 卡 方 检 验,χ2=2.00,p=0.16, 因 而 两 种 检 测 法 检 测 的 阳 性 结 果 差 异 无 统 计 学 意 义,Kappa=0.87(95%CI:0.78~0.96), 两 种 方 法 检 测 结 果 一 致 性 较 好 表 1 间 接 ELISA 法 与 间 接 免 疫 荧 光 法 (IFA) 检 测 结 果 的 相 互 比 较 阳 性 间 接 免 疫 荧 光 法 (IFA) 阴 性 合 计 间 接 ELISA 法 阳 性 阴 性 合 计

28 讨 论 本 研 究 选 取 新 布 尼 亚 病 毒 核 衣 壳 蛋 白 作 为 诊 断 分 子, 主 要 考 虑 在 其 在 病 毒 颗 粒 内 通 过 与 病 毒 基 因 组 RNA 和 RNA [6] 聚 合 酶 结 合 形 成 核 蛋 白 体, 在 病 毒 颗 粒 内 丰 度 很 高, SARS Nipah 等 很 多 病 毒 的 血 清 学 诊 断 方 法 都 选 择 核 蛋 白 作 为 诊 断 分 子, 且 核 蛋 白 在 整 个 布 尼 亚 病 毒 科 内 具 [7] 有 较 强 的 序 列 保 守 性 和 稳 定 性, 同 时 又 具 有 种 的 序 列 特 异 性 对 流 行 于 非 洲 与 新 布 尼 亚 病 毒 同 属 于 白 蛉 病 毒 属 的 裂 谷 热 病 毒 (Rift Valley FeverVirus, RVFV) 的 研 究 表 明,RVFV 的 核 衣 壳 蛋 白 分 子 比 构 成 病 毒 颗 粒 的 其 它 分 子, 如 Gn Gc 和 病 毒 基 因 组 RNA, 能 更 早 地 被 宿 主 细 [8] 胞 释 放, 因 此 也 就 更 容 易 被 检 测 出 来, 起 到 早 期 诊 断 的 作 用 本 研 究 所 建 立 的 间 接 ELISA 方 法 通 过 与 已 知 出 血 热 病 毒 乙 脑 病 毒 登 革 热 病 毒 的 特 异 性 实 验 检 验, 无 交 叉 反 应, 且 重 复 性 好, 适 用 于 病 例 标 本 的 实 验 室 检 测 2010 年 9 月 原 卫 生 部 印 发 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 防 治 指 南 (2010 版 ) [9], 初 步 认 定 检 测 发 现 一 种 新 型 布 尼 亚 病 毒, 暂 以 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 命 名 此 病 毒 感 染 所 致 疾 病, 要 求 各 地 参 照 乙 类 传 染 病 的 要 求 报 告 病 例, 并 明 确 了 确 诊 病 例 的 诊 断 标 准, 病 例 标 本 新 型 布 尼 亚 病 毒 核 酸 检 测 阳 性 ; 病 例 标 本 检 测 新 型 布 尼 亚 病 毒 lgg 抗 体 阳 转 或 恢 复 期 滴 度 较 急 性 期 4 倍 以 上 增 高 者 ; 病 例 标 本 分 离 到 新 型 布 尼 亚 病 毒 疑 似 病 例 具 备 以 上 三 项 之 一 者 即 为 确 诊 病 例 三 种 实 验 室 确 诊 方 法 中, 病 毒 分 离 虽 然 是 一 种 最 可 靠 的 诊 断 方 法, 但 耗 时 长, 操 作 复 杂, 生 物 安 全 要 求 高, 不 能 满 足 临 床 诊 断 的 需 要 核 酸 检 测 的 方 法 虽 然 适 合 于 病 例 的 快 速 诊 断, 但 对 病 例 标 本 采 集 时 限 有 要 求, 只 有 在 病 毒 血 症 期 采 集 的 标 本 才 能 保 证 诊 断 的 准 确 性, 而 病 毒 抗 体 存 在 的 时 间 较 长, 虽 然 对 于 发 病 早 期 的 病 例 检 测 敏 感 性 不 如 实 时 荧 光 PCR 方 法, 但 对 于 采 样 距 发 病 时 间 较 长 的 病 例 或 是 隐 性 感 染 病 例 的 病 例, 血 清 学 诊 断 方 法 有 重 要 意 义 间 接 免 疫 荧 光 法 和 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 (ELISA) 均 可 用 于 新 布 尼 亚 病 毒 的 IgG 抗 体, 本 研 究 将 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 症 疑 似 病 例 血 清 用 两 种 方 法 同 时 诊 断, 检 测 的 阳 性 结 果 差 异 无 统 计 学 意 义, 有 较 好 的 一 致 性 在 实 际 工 作 中, 间 接 免 疫 荧 光 法 需 要 培 养 病 毒, 生 物 安 全 要 求 高, 荧 光 值 得 判 别 有 一 定 的 主 观 因 素, 而 本 研 究 所 建 立 的 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 (ELISA) 容 易 商 品 化 和 标 准 化, 操 作 简 便, 对 实 验 仪 器 要 求 不 高, 因 而 特 别 适 合 基 层 大 批 标 本 的 实 验 室 诊 断 和 人 群 血 清 流 行 病 学 调 查 参 考 文 献 [1] 许 汴 利. 新 布 尼 亚 病 毒 感 染 致 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 的 发 现 认 识 与 启 示 [J]. 中 华 预 防 医 学 杂 志, 2012, 46(2): [2] Xu BL, Liu LC, Huang XY, et al. Metagenomic analysis of fever, thrombocytopenia and leukopenia syndrome (FTLS) in Henan province, China: discovery of a novel bunyavirus[j].

29 PLOS Pathogens, 2011, 7: DOI: /journal.ppat [3] 李 昱, 周 航, 牟 笛, 等. 中 国 年 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 流 行 特 征 分 析 [J]. 中 华 预 防 医 学 杂 志, 2015, 36(6): [4] 胡 小 宁, 黄 学 勇, 杜 燕 华, 等. 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 布 尼 亚 病 毒 核 蛋 白 的 原 核 表 达 与 鉴 定 [J]. 郑 州 大 学 学 报 ( 医 学 版 ),2014, 49(5): [5] 黄 学 勇, 杜 燕 华, 李 幸 乐, 马 宏, 满 瑞 琴, 康 锴, 唐 晓 燕, 陈 豪 敏, 刘 国 华, 许 汴 利. 新 布 尼 亚 病 毒 间 接 免 疫 荧 光 (IFA) 检 测 方 法 的 建 立. 中 华 预 防 医 学 杂 志,2012,46(2): [6] Le MayN, Gauliard N, Billecocq A, et al. The Nterminus ofrift Valleyfever virus nucleoprotein is essential for dimerization [J].Virol, 2005, 79(18): [7] Swanepoel R, Struthers JK, Erasmus MJ, et al. Comparison of techniques for demonstrating antibodies to Rift Valley fever virus[j]hyg(lond)1986, 97(2) [8] Liu L, Celma CC, Roy P. Rift Valley fever virus structural proteins: expression, characterization and assembly of recombinant proteins[j]virol J, 2008, 5: 82. [9] 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部. 发 热 伴 血 小 板 减 少 综 合 征 防 治 指 南 [M].2010 版. 北 京 : 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部,2010.

30 泰 州 市 恙 虫 病 疫 源 地 的 研 究 何 义 林 1, 杨 海 玉 1, 于 春 霞 1, 张 翔 1, 移 钱 华 1, 马 智 龙 1, 查 杰 1, 徐 小 兵 1, 张 琪 1, 戴 文 军 1, 钱 卫 娟 2, 尹 骏 2, 朱 赛 进 2 2, 徐 贞 1 江 苏 省 泰 州 市 疾 病 预 防 控 制 中 心,225300, 中 国 泰 州 2 江 苏 省 泰 州 市 疾 病 预 防 控 制 中 心, , 中 国 靖 江 摘 要 目 的 了 解 泰 州 市 是 否 存 在 恙 虫 病 疫 源 地 方 法 采 用 PCR 法 和 细 胞 及 组 织 培 养 法 对 恙 虫 病 急 性 期 患 者 宿 主 动 物 和 媒 介 恙 螨 进 行 恙 虫 病 东 方 体 核 酸 检 测 和 分 离 培 养 结 果 29 份 急 性 期 恙 虫 病 患 者 全 血 标 本 中, 恙 虫 病 东 方 体 核 酸 阳 性 率 59% 我 市 的 鼠 种 分 别 为 小 家 鼠 黄 胸 鼠 和 臭 鼩,1 只 臭 鼩 组 织 标 本 恙 虫 病 经 检 测, 东 方 体 核 酸 呈 阳 性 我 市 恙 螨 的 螨 种 为 小 盾 纤 恙 螨,1 组 恙 螨 标 本 的 核 酸 检 测 结 果 呈 阳 性 结 论 从 临 床 病 人 宿 主 动 物 和 媒 介 恙 螨 中 证 实 我 市 存 在 恙 虫 病 自 然 疫 源 地 关 键 词 恙 虫 病 ; 疫 源 地 ; 巢 氏 PCR Study on Tsutsugamushi Disease in Taizhou city He Yilin 1, Yang Haiyu 1,Yu Chunxia 1, Zhang Xiang 1, Yi Qianhua 1, Ma Zhilong 1, Cha Jie 1, Xu Xiaobing 1, Zhang Qi 1, Dai Wenjun 1, Qian Weijuan 2, Yin Jun 2, Zhu Saijin 2, Xu Zhen Taizhou Center for Disease Prevention and Control, Taizhou , China; 2. Jingjiang Center for Disease Prevention and Control, Jingjiang , China Abstract Objective To explore the existence of Orientia tsutsugamushi (Ot) disease in Taizhou city. Methods Nested-polymerase chain reaction (npcr) and cell and tissue culture techniques were used to test the specimen from the probable patients, host animals and chigger mites. Results Of 29 probable patients specimen, 17 were positive for Ot nucleic acid determined by npcr. The species of mice included Mus Rattus, Rattus flavipectus and Suncus murinus in the epidemic area, of which one Suncus murinus was tested positive for Ot nucleic acid. The captured Chigger mites were identified as Leptotrombidium scutellare and 1 groups of specimens of Chigger mites was tested positive for Ot nucleic acid. Conclusions It has been proved that epidemic area of tsutsugamushi disease did exist in Taizhou city confirmed on patients, host animals and transmission vectors. Key words Tsutsugamushi disease; Epidemic area; Nested-polymerase chain reaction 恙 虫 病 是 由 恙 虫 病 东 方 体 (Orientia tsutsugamushi,ot) 感 染 所 致 的 一 种 自 然 疫 源 性 疾 病, 鼠 类 为 其 主 要 贮 存 宿 主, 恙 螨 为 传 播 媒 介, 临 床 表 现 以 突 发 高 热 淋 巴 结 肿 大 溃 疡 皮 疹 肺 炎

31 脑 膜 炎 等 为 特 征 自 2011 年 始, 我 市 的 靖 江 市 出 现 恙 虫 病 疫 情 并 呈 现 出 高 发 现 象, 为 了 解 我 市 是 否 存 在 恙 虫 病 疫 源 地, 我 市 于 年 在 恙 虫 病 流 行 区 靖 江 市 连 续 开 展 了 恙 虫 病 疫 源 地 的 专 项 调 查, 现 将 调 查 结 果 报 告 如 下 资 料 与 方 法 1.1 发 病 资 料 : 按 现 住 址 统 计, 从 国 家 疾 病 报 告 管 理 系 统 导 出 2014 恙 虫 病 的 疾 病 信 息 及 汇 总 疫 情 分 析 结 果 1.2 病 原 学 检 测 : 采 用 巢 氏 PCR 法 对 急 性 期 患 者 血 液 标 本 鼠 解 剖 标 本 和 媒 介 恙 螨 标 本 检 测 Ot 核 酸, 对 Ot 核 酸 检 测 阳 性 的 急 性 期 患 者 血 液 标 本, 分 别 接 种 Vero 细 胞 和 7-9 日 龄 鸡 胚 分 离 培 养 Ot Ot 核 酸 检 测 试 剂 Vero 细 胞 和 7-9 日 龄 鸡 胚 由 江 苏 省 疾 控 中 心 提 供 标 本 采 集 和 核 酸 检 测 : 采 集 急 性 期 病 人 血 液 标 本 3-5ml 送 泰 州 市 PCR 实 验 室 ; 采 用 无 菌 方 法 解 剖 鼠, 取 动 物 的 脾 肝 肾 标 本, 置 入 相 应 编 号 的 无 菌 冻 存 管, 送 实 验 室 研 磨 制 成 悬 液 ; 以 50 只 同 种 恙 螨 为 1 组, 分 别 用 含 青 霉 素 和 链 霉 素 的 生 理 盐 水 洗 涤 数 次 后, 研 磨 制 成 悬 液 标 本 制 备 后, 采 用 QIAamp DNA MinKit 试 剂 盒 提 取 核 酸, 核 酸 提 取 严 格 按 照 试 剂 盒 说 明 书 进 行 操 作, 采 用 荧 光 定 量 PCR 检 测 核 酸 细 胞 和 组 织 培 养 : 取 急 性 期 患 者 血 液 标 本, 分 别 接 种 Vero 细 胞 和 7-9 日 龄 鸡 胚, 通 过 观 察 细 胞 病 变 感 染 细 胞 姬 姆 萨 染 色 镜 检 微 量 免 疫 荧 光 鉴 定 和 Ot 核 酸 检 测 进 行 鉴 定 1.3 储 存 宿 主 和 传 播 媒 介 调 查 : 采 用 笼 夜 法 于 5~11 月 期 间 在 流 行 区 开 展 野 外 鼠 类 储 存 宿 主 的 调 查, 分 别 在 居 民 区 和 野 外 捕 鼠, 对 捕 获 的 鼠 种 进 行 分 类 和 鉴 定, 采 用 无 菌 方 法 解 剖 鼠 获 取 动 物 的 脾 肝 肾 标 本 采 用 小 黑 板 法 和 从 鼠 耳 中 捕 获 恙 螨, 开 展 螨 密 度 的 调 查 并 进 行 螨 种 鉴 定 小 黑 板 在 疫 区 放 置 于 草 丛 等 场 所, 每 点 放 1~2 块 10min 后 取 出 小 黑 板, 用 湿 毛 笔 沾 取 恙 螨, 带 回 实 验 室 鉴 定 和 计 数 根 据 调 查 结 果 计 算 鼠 带 恙 螨 密 度 和 小 黑 板 带 恙 螨 密 度, 鼠 带 恙 螨 密 度 = 鼠 体 恙 螨 总 数 / 捕 鼠 总 数, 小 黑 板 带 恙 螨 密 度 = 采 集 恙 螨 总 数 / 放 小 黑 板 总 数 结 果 2.1 恙 虫 病 报 告 发 病 情 况 : 靖 江 市 2013 年 恙 虫 病 报 告 发 病 率 为 39.6/10 万,2014 年 为 28.8/10 万,2014 年 度 发 病 率 较 上 年 度 下 降 了 27.3% 疫 情 为 秋 冬 型,10 月 上 旬 病 例 开 始 出 现,10 月 下 旬 至 11 月 中 旬 为 病 例 发 病 的 高 峰,12 月 中 旬 疫 情 急 剧 下 降, 直 至 消 失 2.2 急 性 期 病 人 病 原 学 检 测 : 采 集 经 临 床 诊 断 的 急 性 期 恙 虫 病 患 者 全 血 标 本 29 份, 经 巢 式 PCR 法 检 测,17 份 样 本 恙 虫 病 东 方 体 核 酸 呈 阳 性, 阳 性 率 59% 将 其 中 的 8 份 标 本 接 种 到 Vero 细 胞, 5 份 标 本 接 种 鸡 胚 组 织,1 份 鸡 胚 组 织 出 现 增 殖 ( 图 1), 经 荧 光 PCR 检 测, 恙 虫 病 东 方 体 核 酸 呈

32 阳 性 增 殖 处 图 年 靖 江 市 1 例 急 性 期 恙 虫 病 病 例 全 血 标 本 接 种 鸡 胚 后 的 增 殖 结 果 2.3 储 存 宿 主 调 查 : 为 阐 明 恙 虫 病 储 存 宿 主 的 类 别 密 度 及 其 恙 虫 病 东 方 体 的 感 染 状 况, 分 别 于 2013 年 至 2014 年 持 续 在 靖 江 市 开 展 储 存 宿 主 的 调 查, 主 要 采 用 笼 夜 法 捕 获 鼠 类 分 别 于 靖 江 市 的 新 桥 镇 东 兴 镇 的 居 民 区 和 野 外 投 放 鼠 笼, 共 捕 鼠 10 次, 两 个 年 度 共 捕 获 鼠 类 60 只, 鼠 种 分 别 为 小 家 鼠 黄 胸 鼠 和 臭 鼩, 小 家 鼠 的 鼠 密 度 为 4.1%, 黄 胸 鼠 鼠 密 度 为 2.8%, 臭 鼩 密 度 为 2.5% 1 只 臭 鼩 标 本 经 检 测, 恙 虫 病 东 方 体 核 酸 呈 阳 性, 动 物 标 本 细 胞 培 养 结 果 均 为 阴 性 2.4 储 媒 介 恙 螨 调 查 : 分 别 采 用 小 黑 板 法 和 从 鼠 耳 中 捕 获 媒 介 恙 螨, 小 黑 板 布 放 的 季 节 为 10 月 下 旬 至 11 月 上 旬, 鼠 耳 中 捕 获 法 与 储 存 宿 主 调 查 同 时 开 展 在 小 黑 板 法 捕 获 中, 共 布 放 小 黑 板 226 板 块, 捕 获 螨 27 只, 其 中 幼 虫 3 只, 大 部 分 为 若 虫, 其 中 饱 血 14 只, 小 黑 板 阳 性 率 7.08% (16/226), 螨 密 度 为 0.12 只 / 板, 稻 田 地 恙 螨 密 度 高 于 病 家 住 宅 和 病 人 住 宅 周 围 草 地 ( 表 1) 共 从 3 只 臭 鼩 中 捕 获 恙 螨 33 只, 其 中 9 月 份 一 只 臭 鼩 中 捕 获 33 只,11 月 份 2 只 臭 鼩 中 分 别 捕 获 8 只 和 10 只, 螨 密 度 为 11 只 / 鼠 经 鉴 别, 螨 种 为 小 盾 纤 恙 螨,1 组 恙 螨 标 本 的 核 酸 检 测 结 果 呈 阳 性 表 1 泰 州 市 2013 年 恙 虫 病 传 播 媒 介 小 黑 板 法 调 查 结 果 地 点 布 板 数 阳 性 板 数 恙 螨 数 阳 性 率 (%) 恙 螨 密 度 ( 只 / 板 )

33 病 家 住 宅 病 人 住 宅 周 围 草 地 稻 田 地 合 计 讨 论 恙 虫 病 是 我 市 近 年 来 新 流 行 的 一 种 自 然 疫 源 性 传 染 病, 阐 明 疾 病 疫 源 地 的 构 成 对 该 病 的 预 防 控 制 极 为 重 要 本 次 调 查 发 现, 在 恙 虫 病 流 行 季 节, 我 市 从 恙 虫 病 急 性 患 者 血 液 标 本 宿 主 动 物 解 剖 标 本 和 媒 介 恙 螨 标 本 中 均 检 出 Ot 核 酸, 同 时 鸡 胚 组 织 接 种 患 者 的 血 液 标 本 后 出 现 Ot 增 殖, 上 述 结 果 表 明, 我 市 具 备 了 成 为 恙 虫 病 疫 源 地 的 基 本 条 件, 而 近 年 来, 恙 虫 病 在 我 市 的 持 续 流 行 [1] 也 进 一 步 表 明, 恙 虫 病 东 方 体 在 我 市 恙 虫 病 的 储 存 宿 主 和 传 播 媒 介 中 循 环 存 在, 当 气 候 因 素 有 利 于 恙 螨 幼 虫 活 动 时, 人 群 因 农 业 生 产 等 原 因 一 旦 进 入 其 孳 生 地, 便 有 可 能 造 成 感 染 而 发 病 [2-3] 我 国 以 往 曾 报 道 用 Vero 细 胞 和 L929 细 胞 分 离 出 恙 虫 病 东 方 体, 本 次 研 究 发 现, 采 用 7-9 日 龄 鸡 胚 可 以 直 接 从 恙 虫 病 患 者 血 液 中 分 离 出 恙 虫 病 东 方 体, 从 而 进 一 步 丰 富 了 恙 虫 病 病 原 体 分 离 的 检 出 方 法 储 存 宿 主 监 测 表 明, 我 市 的 鼠 形 动 物 种 类 主 要 为 小 家 鼠 黄 胸 鼠 和 臭 鼩, 野 外 捕 获 的 鼠 型 动 [4] 物 主 要 为 黄 胸 鼠 和 臭 鼩, 而 以 往 研 究 表 明, 野 外 鼠 型 动 物 是 恙 虫 病 东 方 体 的 主 要 储 存 宿 主, 因 此, 在 恙 虫 病 储 存 宿 主 的 综 合 干 预 中, 可 针 对 小 家 鼠 黄 胸 鼠 和 臭 鼩 的 活 动 规 律 和 生 活 习 性 采 取 适 宜 的 干 预 措 施 传 播 媒 介 调 查 发 现, 我 市 的 传 播 媒 介 均 为 小 盾 纤 恙 螨, 调 查 结 果 与 我 省 其 它 地 区 的 调 查 基 本 [5] [6] 一 致 以 往 研 究 表 明, 小 盾 纤 恙 螨 的 出 现 季 节 为 月, 而 本 次 调 查 发 现,9 月 份 即 可 从 鼠 [1 耳 中 捕 获 小 盾 纤 恙 螨, 而 我 市 近 年 来 的 流 行 季 节 也 表 明,10 月 上 旬 我 市 即 出 现 疫 情, 7], 因 此,9 月 份 就 可 以 成 为 我 市 恙 虫 病 的 感 染 季 节 稻 田 地 的 恙 螨 密 度 明 显 高 于 病 家 住 宅 和 病 人 住 宅 周 围 草 地, 说 明 我 市 稻 田 地 环 境 有 利 于 恙 螨 的 孳 生 连 续 两 年 的 监 测 发 现,2014 年 我 市 流 行 区 恙 虫 病 发 病 率 显 著 低 于 2013 年 度, 而 同 期 的 监 测 [8] 发 现, 有 研 究 显 示, 气 候 因 素 如 温 度 湿 度 等 可 对 媒 介 恙 螨 的 生 态 产 生 一 定 的 影 响, 我 市 气 候 因 素 对 恙 虫 病 储 存 宿 主 媒 介 恙 螨 的 影 响 进 而 对 恙 虫 病 发 病 的 影 响 有 待 于 进 一 步 观 察 参 考 文 献 [1] 钱 卫 娟, 何 义 林, 尹 骏, 等 年 靖 江 市 恙 虫 病 流 行 特 征 分 析 [J]. 江 苏 预 防 医 学,

34 2013, 24(2): [2] 林 碧 瑚, 孙 晓 娟, 李 文 广, 等. 应 用 L929 细 胞 从 患 者 血 液 中 分 离 立 克 次 体 [J]. 海 南 医 学 院 学 报, 2003, 9(5): [3] 张 志 强, 胡 玲 美, 杨 青, 等. 用 Vero-E6 细 胞 大 量 增 殖 恙 虫 病 立 克 次 体 的 研 究 [J]. 中 国 人 兽 共 患 病 杂 志, 1999, 15(5): [4] 张 萌, 王 显 军, 赵 仲 堂. 中 国 恙 虫 病 流 行 态 势 及 预 防 控 制 [J]. 中 华 流 行 病 学 杂 志,2011, 32(4): [5] 姜 志 宽, 吴 光 华, 李 丙 军, 等. 我 国 秋 冬 型 恙 虫 病 媒 介 恙 螨 的 研 究 概 况 [J]. 中 华 卫 生 杀 虫 药 械,2013,19(6): [6] 钱 万 红, 王 忠 灿, 吴 光 华. 消 毒 杀 虫 灭 鼠 技 术 [M]. 北 京 : 人 民 卫 生 出 版 社, 2008: [7] 何 义 林, 张 翔, 移 钱 华, 等. 泰 州 市 93 例 恙 虫 病 临 床 和 流 行 病 学 特 征 分 析 [J]. 江 苏 预 防 医 学, 2013, 24(5): [8] 黎 家 灿, 郑 小 英, 奚 志 勇, 等. 45 年 恙 螨 与 媒 介 恙 螨 传 播 恙 虫 病 的 基 础 研 究 [J]. 中 山 医 科 大 学 学 报,2002, 23(1): 1-9.

35 布 鲁 菌 病 患 者 血 液 指 标 分 析 及 治 疗 效 果 评 价 高 蒙, 林 亮, 艾 文 莉, 段 向 阳, 彭 景 贤, 康 耀 霞, 贾 恩 厚 作 者 单 位 : 包 头 市 疾 病 预 防 控 制 中 心 ( 高 蒙, 林 亮, 艾 文 莉, 段 向 阳, 康 耀 霞, 彭 景 贤, 贾 恩 厚 ); 包 头 市 第 六 中 学 ( 艾 文 莉 ) 通 信 作 者 : 贾 恩 厚, enhoujia@163.com 摘 要 目 的 评 价 布 鲁 菌 病 患 者 用 药 过 程 对 血 液 各 项 临 床 指 标 的 影 响 及 布 鲁 菌 病 患 者 的 治 疗 效 果 方 法 采 用 流 行 病 学 回 顾 性 调 查 和 统 计 学 方 法 评 估 布 病 治 疗 过 程 中 血 液 各 项 临 床 指 标 的 变 化 比 较 不 同 治 疗 方 法 不 同 用 药 时 间 和 布 鲁 菌 病 患 者 的 转 归, 分 析 布 鲁 菌 病 治 疗 效 果 的 影 响 因 素 结 果 Mann-Whitney U 检 验 结 果 显 示 布 鲁 菌 病 病 例 组 中 性 粒 细 胞 数 明 显 低 于 对 照 组 (Z=-2.271, P=0.023); 急 性 期 患 者 的 中 性 粒 细 胞 比 慢 性 期 患 者 的 中 性 粒 细 胞 显 著 低 (Z=-2.54, P=0.011) 卡 方 检 验 结 果 显 示 治 疗 时 间 >3 个 月 的 患 者 有 效 率 显 著 高 于 治 疗 时 间 3 个 月 的 患 者 (χ 2 =3.95,P=0.047) 结 论 与 正 常 人 相 比 布 病 患 者 中 性 粒 细 胞 显 著 减 少,3 个 月 以 上 的 治 疗 时 间 可 以 有 效 控 制 疾 病 发 展 关 键 词 布 鲁 菌 病 ; 血 常 规 ; 治 疗 效 果 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 资 助 : 项 目 编 号 ; 内 蒙 古 自 然 科 学 基 金 资 助 : 项 目 编 号 2013MS1105 Blood Index and Treatment Efficacy of Brucellosis Patient Gao meng*, Lin liang, Ai wenli, Duan xiangyang, Kang yaoxia, Peng jingxian, Jia enhou *BaoTou Center for Disease Control and Prevention, Baotou ,China Corresponding author:jia enhou, enhoujia@163.com Abstract Objective To evaluation the effect of the blood routine index in the treatment process and the treatment efficacy of brucellosis.methods An evaluated of the effect of the blood routine index in the treatment process was performed by an epidemic retrospective and the statistics. The factors of the treatment efficacy was analysed by compared the different of treatment methods, administration time and the whether it is improved.results Mann-Whitney U test revealed that the number of neutrophil in brucellosis patients were significantly lower than the control group (Z=-2.271, P=0.023). The number of neutrophil in the acute brucellosis were significantly lower than those of chronic brucellosis(z=-2.54,p=0.011). Chi-square test showed the brucellosis effective rate of the patients treated more than 3 months was higher than these treated less than 3 1

36 months(χ 2 =3.95,P=0.047).Conclusion the number of neutrophil in brucellosis patients were significantly lower than the control group, and the brucella patients treatment for more than 3 months was effective to control the development of disease. Key words brucellosis; blood routine; treatment efficacy Found program:national Natural Science Foundation of China( );Natural Science Fundation Committee of Inner Mongolia(2013MS1105) 布 鲁 菌 病 ( 简 称 布 病 ) 是 布 鲁 菌 侵 入 机 体 后 引 起 的 一 种 以 传 染 变 态 反 应 为 特 征 的 人 畜 共 患 [1] 疾 病 在 世 界 范 围 内 广 泛 流 行, 每 年 有 超 过 50 万 例 的 新 增 病 例 报 告 我 国 波 及 范 围 很 广, 截 止 2013 年 除 台 湾 澳 门 以 外 的 31 [2] 个 省 份 均 有 病 例 报 告 内 蒙 古 作 为 我 国 疫 情 的 主 要 流 行 区, [3] 人 间 布 病 在 部 分 地 区 已 成 为 当 地 严 重 的 公 共 卫 生 问 题 之 一 布 鲁 菌 可 侵 犯 全 身 各 个 器 官 和 组 织, 出 现 多 系 统 的 损 害 和 不 同 的 临 床 表 现, 主 要 表 现 为 发 热 多 汗 乏 力 骨 关 节 和 肌 肉 疼 痛 等 机 体 感 染 布 病 早 期, 布 鲁 菌 侵 入 单 核 巨 噬 细 胞 并 在 其 [4] 内 部 存 活 和 繁 殖, 可 以 有 效 地 逃 避 宿 主 的 免 疫 应 答, 一 些 常 规 药 物 很 难 进 入 宿 主 细 胞 对 布 鲁 [5] 菌 产 生 药 效 布 病 患 者 经 过 抗 生 素 治 疗 仍 然 有 大 量 病 例 存 在 局 部 症 状 甚 至 复 发 不 彻 底 的 治 疗 及 反 复 感 染 导 致 慢 性 病 人 的 增 加 治 疗 急 慢 性 期 布 病 需 要 更 加 合 理 的 方 法 及 用 药 另 外, 由 于 布 病 患 者 早 期 症 状 多 样, 尤 其 是 血 液 各 项 临 床 指 标 的 变 化, 易 于 多 种 疾 病 混 淆, 极 易 造 成 [6-7] 误 诊 因 此 了 解 布 病 患 者 血 液 各 项 指 标 变 化, 有 助 于 布 病 的 早 期 诊 断 与 治 疗 本 研 究 对 包 头 市 5 个 布 病 高 发 地 区 确 诊 的 247 例 布 病 患 者 进 行 回 顾 性 流 行 病 学 调 查, 通 过 分 析 布 病 患 者 的 用 药 情 况 与 转 归, 评 价 布 病 患 者 用 药 过 程 对 血 常 规 及 肝 功 能 各 项 指 标 的 影 响, 了 解 布 病 患 者 的 治 疗 效 果 从 而 为 以 后 布 病 的 规 范 治 疗, 血 液 临 床 指 标 检 测 对 布 病 患 者 的 诊 断 具 有 一 定 的 参 考 价 值 对 象 与 方 法 1. 对 象 : 于 2014 年 9 月 -11 月, 随 机 抽 取 包 头 市 所 属 农 区 五 个 村 并 对 该 地 区 的 布 病 现 患 者 采 用 问 卷 方 法 进 行 流 行 病 学 调 查 调 查 对 象 纳 入 标 准 : 布 病 病 例 需 符 合 WS 布 鲁 氏 菌 病 诊 断 标 准 [8], 随 机 选 择 同 期 本 地 区 的 非 布 病 感 染 者 需 不 满 足 上 述 标 准 的 任 意 一 项 被 纳 入 调 查 的 布 病 患 者 247 例, 其 中 男 性 183 例, 女 性 64 例, 年 龄 中 位 数 为 53 岁 ; 从 事 牛 羊 放 牧 饲 养 工 作 的 人 员 233 例, 收 购 兽 医 及 屠 宰 的 人 员 11 例, 儿 童 及 学 生 3 例 ; 正 常 对 照 150 例, 其 中 男 性 103 例, 女 性 47 例, 年 龄 中 位 数 为 45.5 岁, 农 民 137 例, 家 务 及 待 业 13 例 本 研 究 所 有 研 究 对 象 均 签 署 了 知 情 同 意 书 2