基 础 研 究 食 品 科 学 21, Vol. 31, No (Hippophae rhamnoides L.) 草 莓 (Fragaria orientalis Los.), 于 成 熟 季 节 采 摘 于 大 兴 安 岭 加 格 达 奇, 冷 冻 保 存 (+)-Catechi
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1 148 21, Vol. 31, No. 17 食 品 科 学 基 础 研 究 5 樊 梓 鸾 1, 王 振 宇 1,2, *, 程 翠 林 1, 赵 海 田 1, 张 华 1 (1. 哈 尔 滨 工 业 大 学 食 品 科 学 与 工 程 学 院, 黑 龙 江 哈 尔 滨 159; 2. 东 北 林 业 大 学 林 学 院, 黑 龙 江 哈 尔 滨 154) 选 取 东 北 大 兴 安 岭 地 区 的 特 色 浆 果 花 楸 (Sorbus pohuashanensis H.) 蓝 莓 (Vaccinium uliginosum L.) 蓝 靛 果 (Lonicera caerulea L.) 沙 棘 (Hippophae rhamnoides L.) 草 莓 (Fragaria orientalis Los.) 的 成 熟 果 实, 采 用 8% 丙 酮 提 取, 分 别 测 定 多 酚 黄 酮 花 色 苷 含 量, 并 研 究 其 抗 氧 化 活 性 和 抗 细 胞 增 殖 活 性 结 果 表 明 : 花 楸 的 多 酚 和 黄 酮 含 量 最 高 ; 蓝 靛 果 的 花 色 苷 含 量 最 高, 为 (367.5 ± 8.7)g/g;5 种 浆 果 都 具 有 较 好 的 体 外 抗 氧 化 活 性, 花 楸 显 示 了 最 高 的 抑 制 癌 细 胞 增 殖 效 应 : 浆 果 ; 多 酚 ; 抗 氧 化 ; 抗 细 胞 增 殖 Antioxidant and Antiproliferative Activities of Five Wild Berries FAN Zi-luan 1,WANG Zhen-yu 1,2, *,CHENG Cui-lin 1,ZHAO Hai-tian 1,ZHANG Hua 1 (1. College of Food Science and Engineering, Harbin Institute of Technology, Harbin 159, China; 2. School of Forestry, Northeast Forestry University, Harbin 154, China) Abstract :Some wild berries have been shown to have the functions of protecting against cardiovascular diseases, diabetes, and cancers due to the existence of phenolics. In the present study, the ripe fruits of five wild berries, Sorbus pohuashanensis H. (rowanberry), Vaccinium uliginosum L. (blue honeysuckle), Lonicera caerulea L., Hippophae rhamnoides L., and Fragaria orientalis Los., selected from the Greater Higgnan Mountains area of Northeast China were extracted with 8% acetone and the extracts were measured for their contents of total phenolics, total flavonoids and anthocyanins, ABTS +, DPPH and total oxyradical scavenging capacities and anti-proliferative activities against HepG2 and HT29 cell (MTS assay). The results showed that rowanberry had the highest contents of total phenolics and total flavonoids among all the five berries, while blue honeysuckle had the highest anthocyanin content (367.5 ± 8.7) g/ g. All the five berry extracts could exert antioxidant activities in vitro, of which rowanberry showed the highest inhibition effects on the proliferation of HepG2 and HT29 cells. As a conclusion, rowanberry has a huge potential for being developed as effective cancer drugs. Key words:berries;phenolics;antioxidant activity;antiproliferative activity 中 图 分 类 号 :TS21.4;R151.3 文 献 标 识 码 :A 文 章 编 号 :2-663(21) 自 由 基 是 人 体 组 织 中 许 多 生 化 反 应 的 中 间 代 谢 产 物 正 常 情 况 下, 体 内 自 由 基 的 产 生 和 消 除 处 于 动 态 平 衡 中, 但 若 是 体 内 自 由 基 产 生 过 多 或 消 除 过 慢, 自 由 基 就 会 在 分 子 水 平 细 胞 水 平 以 及 器 官 水 平 产 生 毒 害 作 用, 损 伤 细 胞 成 分 破 坏 细 胞 的 结 构 和 功 能, 给 机 体 造 成 损 伤, 这 个 过 程 称 之 为 氧 化 应 激 或 氧 胁 迫 (oxidative stress) [1] 饮 食 多 酚 类 化 合 物 可 以 作 为 抗 氧 化 剂, 启 动 细 胞 的 天 然 防 御 机 制, 预 防 由 自 由 基 产 生 的 [2] 损 伤 和 阻 断 癌 症 的 发 生 野 生 浆 果 中 富 含 植 物 化 学 物, 其 提 取 物 具 有 很 强 的 [3] 抗 氧 化 活 性, 可 以 减 少 脂 质 过 氧 化, 降 低 胆 固 醇 以 及 抑 制 结 肠 癌 乳 腺 癌 等 肿 瘤 细 胞 的 生 长 浆 果 中 天 然 存 在 的 植 物 化 合 物 的 联 合 作 用 在 抗 氧 化 以 及 肿 瘤 预 防 方 [4] 面 至 关 重 要 通 过 浆 果 中 多 酚 类 黄 酮 以 及 花 色 苷 功 能 物 质 含 量 的 检 测 以 及 探 讨 浆 果 提 取 物 抗 氧 化 和 抗 肿 瘤 细 胞 增 殖, 对 于 揭 示 浆 果 提 取 物 预 防 肿 瘤 的 作 用 机 制 以 及 开 发 研 制 新 型 抗 癌 药 物 具 有 指 导 意 义 1 材 料 与 方 法 1.1 材 料 与 试 剂 花 楸 (Sorbus pohuashanensis H.) 蓝 莓 (Vaccinium uliginosum L.) 蓝 靛 果 (Lonicera caerulea L.) 沙 棘 收 稿 日 期 : 作 者 简 介 : 樊 梓 鸾 (1981 ), 女, 博 士 研 究 生, 研 究 方 向 为 天 然 产 物 分 离 纯 化 及 功 能 性 fzl_1122@163.com * 通 信 作 者 : 王 振 宇 (1957 ), 男, 教 授, 博 士, 研 究 方 向 为 活 性 成 分 分 离 合 成 与 调 控 新 资 源 开 发 与 利 用 wzy2191@yahoo.com.cn
2 基 础 研 究 食 品 科 学 21, Vol. 31, No (Hippophae rhamnoides L.) 草 莓 (Fragaria orientalis Los.), 于 成 熟 季 节 采 摘 于 大 兴 安 岭 加 格 达 奇, 冷 冻 保 存 (+)-Catechin Folin-Ciocalteu(FC) reagent DPPH ABTS 4- 甲 硫 基 -2- 丁 酮 酸 钠 盐 (KMBA) Trolox, Sigma 公 司 ;2,2 - 偶 氮 双 (2- 眯 基 丙 烷 ) 二 盐 酸 盐 (ABAP) 日 本 Wako Chemical 公 司 ; 硫 代 巴 比 妥 酸 (TBA) 三 氯 乙 酸 (TCA) 盐 酸 胎 牛 血 清 氯 化 铝 亚 硝 酸 钠 等 试 剂 均 为 国 产 分 析 纯 1.2 仪 器 与 设 备 气 相 色 谱 仪 1mL 硬 质 顶 空 瓶 美 国 Agilent 公 司 ; 恒 温 振 荡 水 浴 箱 上 海 科 器 公 司 ;JJ-2 型 组 织 粉 碎 机 常 州 国 华 公 司 ;FA25 型 高 速 均 质 机 上 海 弗 鲁 克 流 体 机 械 制 造 有 限 公 司 ;55 imark 酶 标 仪 美 国 伯 乐 公 司 1.3 方 法 活 性 成 分 的 提 取 用 电 子 天 平 精 确 称 取 冻 存 浆 果 g, 加 入 2mL 冷 冻 的 8% 丙 酮 在 组 织 捣 碎 机 中 匀 浆 5min, 从 捣 碎 机 中 取 出 匀 浆, 在 高 速 均 质 机 中 均 质 3min, 真 空 抽 滤 收 集 滤 液 置 于 旋 转 蒸 发 仪 中, 在 45 旋 转 蒸 发 至 约 1% 的 提 取 [5] 液, 将 其 转 移 至 容 量 瓶, 定 容 分 装, 于 - 8 储 存, 用 于 后 续 抗 氧 化 和 细 胞 实 验 抗 氧 化 物 质 的 测 定 总 酚 的 测 定 [6] 采 用 菲 林 酚 比 色 法 检 测 多 酚 含 量 精 密 吸 取 125μL 没 食 子 酸 标 准 溶 液 或 浆 果 提 取 物, 分 别 置 于 lml 试 管 中, 加 入.5mL 的 蒸 馏 水, 再 加 入 125μL 的 菲 林 酚 试 剂 (FCR), 样 品 混 合 充 分, 静 置 6min, 加 入 1.25mL 7g/mL Na2CO3 水 溶 液 用 水 补 足 终 体 积 到 3mL 9min 后 在 76nm 波 长 处 测 定 蓝 色 溶 液 的 吸 光 度 没 食 子 酸 作 标 品, 结 果 以 没 食 子 酸 等 同 量 (mg)/lg 鲜 质 量 表 示 黄 酮 的 测 定 [7] 采 用 AlCl3 比 色 法 检 测 总 黄 酮 含 量 儿 茶 素 为 标 准 品 进 行 测 定, 结 果 以 mg/lg 鲜 质 量 表 示 精 密 吸 取.25mL 儿 茶 素 标 准 溶 液 或 浆 果 提 取 物, 分 别 置 于 lml 试 管 中, 加 入.5mL 的 蒸 馏 水, 再 加 入 75μL 5g/mL NaNO3 溶 液, 混 合 均 匀,6min 后 加 入 15μL 1g/mL AlCl3 6H2O, 摇 匀 放 置 5min; 然 后 加 入.5mL lmol/l 的 NaOH 溶 液, 用 水 补 足 终 体 积 到 2.5mL, 混 匀, 于 波 长 51nm 条 件 下, 利 用 分 光 光 度 计 比 色, 以 试 剂 为 空 白 参 比, 测 定 不 同 溶 液 的 吸 光 度 花 色 苷 的 测 定 [8] 单 节 花 青 素 含 量 用 ph 示 差 分 光 光 度 法 提 取 物 用.25mol/L ph 1 的 氯 化 钾 缓 冲 液 及 ph 4.5 乙 酸 钠 缓 冲 液 按 比 例 混 合, 分 别 在 515nm 和 7nm 波 长 处 测 定 吸 光 度, 以 蒸 馏 水 为 空 白 比 色 花 青 素 的 含 量 用 式 (1) 计 算 总 单 花 青 素 /(mg/g 鲜 果 )= A MW E c (1) 式 中 :A 为 吸 光 率 (A515nm - A 7nm) ph1. -(A515nm - A 7nm) ph4.5;m W 为 花 色 苷 3- 糖 配 基 的 相 对 分 子 质 量 449.2;E 为 花 色 苷 3- 糖 配 基 的 摩 尔 吸 光 率 269;c 为 缓 冲 溶 液 的 ; 每 g 鲜 果 皮 中 花 色 苷 的 含 量 用 花 色 苷 3- 糖 配 基 的 毫 克 数 表 示 抗 氧 化 能 力 的 测 定 DPPH 法 测 定 抗 氧 化 能 力 参 照 文 献 [9], 将 样 品 稀 释 配 制 成 一 系 列 浓 度, 取.1mL 样 品 加 入 1.5mL DPPH 甲 醇 溶 液, 混 合 3min 后 测 定 515nm 波 长 处 吸 光 度 每 份 样 品 平 行 操 作 3 次, 按 照 公 式 (2) 计 算 清 除 率 清 除 率 /%=[(AContral - ASample)/AContral] (2) 式 中 :AContral 为 1.5mL DPPH 溶 液 与.1mL 甲 醇 混 合 后 的 吸 光 度 ;ASample 为 1.5mL DPPH 溶 液 与.1mL 样 品 混 合 后 的 吸 光 度 ABTS 法 测 定 抗 氧 化 能 力 按 照 文 献 [8] 配 制 ABTS 自 由 基 工 作 液 将 样 品 用 甲 醇 配 制 成 一 系 列 浓 度, 取.1mL 样 品 加 入 1.5mL ABTS 自 由 基 工 作 液, 混 合, 放 置 6min 后, 在 734nm 波 长 处 测 定 吸 光 度 每 份 样 品 平 行 操 作 3 次, 按 照 公 式 (3) 计 算 清 除 率 清 除 率 /%=[(AContral - ASample)/AContral] (3) 式 中 :AContral 为 1.5mL ABTS 溶 液 与.1mL 甲 醇 混 合 后 的 吸 光 度 ;ASample 为 1.5mL ABTS 溶 液 与.1mL 样 品 混 合 后 的 吸 光 度 TOSC 法 测 定 总 氧 自 由 基 清 除 能 力 以.1mol/L 磷 酸 盐 缓 冲 液 (PBS) 配 制.2mol/L ABAP.25mmol/L KMBA( 均 为 临 用 时 现 配,4 避 光 贮 存 ), 在 顶 空 瓶 中 加 入 KMBA.8mL 和 PBS.1mL 作 为 控 制 管, 加 人 KMBA.8mL 和 样 液.1mL (.4~4 mg/ml) 作 为 样 品 管, 分 别 加 盖 密 封 后 用 注 射 器 注 入.1mL ABAP, 使 溶 液 终 体 积 为 1mL 将 顶 空 瓶 放 入 35 水 浴 振 荡 反 应 6min, 立 即 抽 取 顶 空 气 体.6mL 按 节 [1] 条 件 进 样 按 照 公 式 (4) 计 算 总 氧 自 由 基 清 除 能 力 清 除 能 力 /%=-(AS/AC) (4) 式 中 :AS 和 AC 分 别 为 样 品 管 和 控 制 管 的 乙 烯 峰 面 积 气 相 色 谱 测 试 条 件 测 试 条 件 : 安 捷 伦 HP-PLOT Q 毛 细 管 柱 (15m.53mm,4μm); 进 样 器 色 谱 柱 检 测 器 温 度 分 别 为 4 3 ; 载 气 (N2): 氢 气 空 气 流 速 分 别 为 4 5 5mL/min; 检 测 器 为 火 焰 离 子 化 检 测 器 (FID)
3 15 21, Vol. 31, No. 17 食 品 科 学 基 础 研 究 统 计 分 析 用 Sigmaplot 1. 分 析 软 件 进 行 统 计 分 析, 数 值 计 算 采 用 平 均 值 ± 标 准 差 表 示 2 结 果 与 分 析 2.1 抗 氧 化 物 质 含 量 的 比 较 5 种 浆 果 提 取 物 的 多 酚 黄 酮 花 色 苷 含 量 如 图 1 所 示 经 统 计 分 析 可 知, 不 同 浆 果 中 多 酚 黄 酮 花 色 苷 含 量 差 异 性 显 著 (P <.1) 多 酚 和 黄 酮 在 花 楸 浆 果 中 含 量 最 高, 分 别 达 到 (625.3 ± 6.9)mg/g 和 (556.4 ± 15.7)mg/g; 在 草 莓 浆 果 中 含 量 只 有 (127 ± 31.6)mg/g 和 (94.2 ± 11.7)mg/g; 而 花 色 苷 在 蓝 靛 果 中 含 量 最 高, 为 (358.8 ± 16.4)mg/g 鲜 果, 其 次 为 蓝 莓 草 莓 花 楸 和 沙 棘 此 结 果 与 文 献 [11] 报 道 的 浆 果 提 取 物 相 比, 花 楸 的 多 酚 和 黄 酮 含 量 显 著 高 于 其 他 浆 果, 草 莓 含 量 相 比 低 于 文 献 报 道, 可 能 由 于 植 物 生 长 环 境 和 种 属 基 因 型 对 酚 类 化 合 物 的 积 累 起 主 要 因 素 含 量 /(mg/g 鲜 果 ) 图 1 5 种 浆 果 样 品 总 酚 含 量 Fig.1 Contents of total phenolics of five wild berries (mg/ g) 2.2 抗 氧 化 活 性 分 析 多 酚 黄 酮 花 色 苷 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 法 测 定 提 取 物 的 抗 氧 化 活 性 一 般 来 讲, 自 由 基 化 学 性 质 活 泼, 寿 命 极 短, 但 也 有 例 外,ABTS + 和 DPPH 自 由 基 是 国 内 外 公 认 的 性 [12-13] 质 稳 定 的 自 由 基, 常 用 于 抗 氧 化 活 性 的 筛 选 5 种 浆 果 对 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 的 清 除 能 力 见 图 2 由 图 2 可 知, 随 着 加 入 质 量 浓 度 的 增 大, 各 种 浆 果 清 除 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 的 能 力 也 依 次 增 强, 呈 良 好 的 剂 量 效 应 关 系 但 5 种 浆 果 的 清 除 活 性 存 在 一 定 差 异 多 酚 含 量 高 的 花 楸 和 蓝 靛 果 对 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 的 清 除 活 性 也 相 对 较 强 当 加 入 质 量 浓 度 为 4mg/mL 时, 花 楸 和 蓝 靛 果 提 取 物 对 ABTS + 的 清 除 率 分 别 达 到 96.12% 和 95.3%; 当 加 入 质 量 浓 度 为 15mg/mL 时, 对 DPPH 自 由 基 的 清 除 率 分 别 达 到 8.5% 和 8.23%, 而 多 酚 含 量 最 低 的 草 莓 在 以 上 两 种 质 量 浓 度 下, 对 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 的 清 除 率 仅 为 46.66% 和 25.82% 5 种 浆 果 自 由 基 清 除 活 性 的 EC5 值 显 示 其 清 除 活 性 的 大 小 顺 序 依 次 为 花 楸 > 蓝 靛 果 > 蓝 莓 > 沙 棘 > 草 莓 明 显 可 以 看 出,DPPH 法 评 价 出 的 抗 氧 化 能 力 比 ABTS 法 要 低 [14] 可 能 是 由 于 DPPH 对 亲 水 性 的 抗 氧 化 物 质 不 太 敏 感 所 以 在 评 价 抗 氧 化 能 力 时, 应 采 用 多 种 方 法 来 综 合 评 价 ABTS + 清 除 率 /% DPPH 自 由 基 清 除 率 /% A B 图 2 5 种 浆 果 提 取 物 清 除 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 的 剂 量 效 应 关 系 Fig.2 Dose-response curves of ABTS + and DPPH radical scavenging activity of five berry extracts TOSC 法 测 定 总 氧 自 由 基 清 除 能 力 [1] Winston 等 建 立 了 一 种 以 气 相 色 谱 为 检 测 手 段 测 定 机 体 的 总 氧 自 由 基 清 除 能 力 (total oxyradical scavenging capacity,tosc) 的 方 法, 该 方 法 和 其 他 同 类 测 定 抗 氧 化 能 力 的 方 法 相 比, 除 了 具 有 简 便 灵 敏 快 速 对 仪 器 设 备 无 特 殊 要 求 等 优 点 外, 它 最 大 的 优 越 性 是 任 何 可 与 氧 自 由 基 结 合 的 物 质 所 发 挥 的 作 用 都 被 考 虑, 因 而 反 映 的 是 机 体 所 具 有 的 总 抗 氧 化 能 力, 这 在 评 价 化 学 物 对 生 物 是 否 造 成 氧 化 损 伤 时 有 特 别 重 要 的 意 义, 这 是 单 项 抗 氧 化 剂 指 标 所 无 法 比 拟 的 此 外, 由 于 TOSC 的 计 算 是 将 加 入 样 品 所 得 乙 烯 的 峰 面 积 与 对 照 相 比, 因 而 所 得 的 TOSC 受 仪 器 灵 敏 度 的 变 化 及 其 他 分 析 状 态 的 影 响 较 小, 因 此, 其 可 行 性 和 重 现 性 也 较 好 5 种 浆 果 均 有 较 强 的 总 氧 自 由 基 清 除 能 力, 随 着 浆 果 提 取 液 加 入 浓 度 的 增 大, 乙 烯 峰 面 积 也 随 之 减 小, 并 呈 现 较 好 的 量 效 关 系 根 据 样 品 不 同 浓 度 的 TOSC 值 拟 合 方 程 可 求 出 抑 制 乙 烯 生 成 5% 时 各 种 样 品 的 浓 度 (EC5) 以 VC 为 对 照, 结 果 表 示 为 每 g 样 品 相 当 于 多
4 基 础 研 究 食 品 科 学 21, Vol. 31, No 少 VC 的 量 (μmol) 其 值 越 高 说 明 抗 氧 化 能 力 越 强 由 图 3 可 知,5 种 浆 果 总 抗 氧 化 活 性 有 所 不 同, 其 总 抗 氧 化 活 性 由 强 到 弱 的 顺 序 为 : 花 楸 > 蓝 靛 果 > 蓝 莓 > 沙 棘 > 草 莓 此 结 果 与 多 酚 含 量 及 对 ABTS + 和 DPPH 自 由 基 的 清 除 活 性 显 著 相 关 结 果 指 出, 样 品 的 植 物 化 学 提 取 物 发 挥 了 潜 在 的 抗 氧 化 活 性 不 同 的 浆 果, 处 理 方 法 不 同, 栽 培 条 件 或 是 储 存 条 件 都 会 显 著 影 响 总 抗 氧 [15] 化 物 含 量 抗 氧 化 活 性 / (μmol VC/g 样 品 ) 图 3 5 种 浆 果 提 取 物 的 总 抗 氧 化 活 性 Fig.3 Total oxyradical scavenging capacities of 5 berry extracts 2.3 抗 细 胞 增 殖 活 性 分 析 增 值 率 /% 增 值 率 /% 花 楸 空 白 对 照 蓝 莓 蓝 靛 果 8 A 花 楸 空 白 对 照 蓝 莓 蓝 靛 果 草 莓 沙 棘 草 莓 沙 棘 8 B A. HT29 细 胞 ;B. HepG2 细 胞 图 4 5 种 浆 果 提 取 物 抗 细 胞 增 殖 活 性 的 剂 量 效 应 关 系 Fig.4 Dose-response curves of antiproliferative activity of 5 berry extracts 癌 症 是 人 体 细 胞 失 去 正 常 调 控 机 制 而 失 控 性 生 长 的 一 种 疾 病 癌 症 可 发 生 于 任 何 器 官 中 的 任 何 组 织 从 基 因 的 角 度 来 讲, 就 是 各 种 原 因 导 致 癌 基 因 的 激 活 和 / 或 抑 癌 基 因 的 失 活, 使 基 因 突 变 的 细 胞 失 去 调 控 而 不 断 复 制, 由 此 对 人 体 组 织 器 官 产 生 损 害 当 前, 抗 癌 主 要 研 究 方 向 是 抑 制 肿 瘤 发 生 诱 导 肿 瘤 细 胞 的 分 化 或 凋 亡 凋 亡 是 细 胞 死 亡 的 一 种 方 式, 以 保 证 机 体 的 正 常 功 能 氧 化 应 激 (oxidative stress) 是 导 致 化 学 的 或 代 谢 来 源 的 ROS 产 生 的 一 种 细 胞 内 或 外 的 状 态 现 已 探 明 肿 瘤 细 胞 中 氧 自 由 基 及 其 代 谢 产 物 明 显 高 于 正 常 组 织, 这 些 自 由 基 是 癌 细 胞 内 某 些 基 因 ( 如 Ras 等 ) 生 长 信 号 传 导 途 径 的 重 要 环 节, 可 刺 激 肿 瘤 细 胞 分 [16] 裂 增 殖, 进 而 影 响 细 胞 凋 亡 等 代 谢 活 动 因 此, 开 发 天 然 来 源 的 新 抗 肿 瘤 药 物, 可 有 效 的 清 除 肿 瘤 细 胞 中 氧 自 由 基, 抑 制 癌 细 胞 的 增 殖, 诱 导 凋 亡, 对 癌 症 的 预 防 和 控 制 起 到 了 举 足 轻 重 的 作 用 从 图 4 可 以 看 出,5 种 浆 果 提 取 物 对 结 肠 癌 HT29 和 肝 癌 HepG2 细 胞 均 有 生 长 抑 制 效 应, 其 抑 制 作 用 成 质 量 浓 度 依 赖 性, 抑 制 率 随 提 取 物 质 量 浓 度 的 升 高 而 增 加 花 楸 提 取 物 对 两 种 细 胞 的 抑 制 作 用 随 质 量 浓 度 的 变 化 较 其 他 4 种 显 著 经 计 算 得 出, 花 楸 提 取 物 与 HT29 和 HepG2 细 胞 共 同 培 养 48h 后 测 得 EC5 分 别 为 38.1mg/mL 和 25.65mg/mL 抗 细 胞 增 殖 活 性 / (mg/ml) 图 5 5 种 浆 果 提 取 物 的 抗 细 胞 增 殖 活 性 Fig.5 Half-effective concentrations of 5 berry extracts against the proliferation of HT29 cells 由 图 5 可 知, 对 于 结 肠 癌 HT29 细 胞, 抑 制 细 胞 增 殖 活 性 依 次 为 花 楸 > 蓝 莓 > 沙 棘 > 草 莓 > 蓝 靛 果 ; 而 对 于 人 肝 癌 HepG2 细 胞, 抑 制 细 胞 增 殖 活 性 依 次 为 花 楸 > 沙 棘 > 蓝 莓 > 草 莓 > 蓝 靛 果 3 讨 论 HT29 HepG2 花 楸 蓝 莓 沙 棘 草 莓 蓝 靛 果 随 着 现 代 生 命 科 学 的 逐 步 发 展, 活 性 氧 和 自 由 基 研 究 已 成 为 近 2 年 来 该 领 域 的 前 沿 和 热 点 1956 年, 英 国 科 学 家 首 先 提 出 了 自 由 基 学 说, 认 为 自 由 基 攻 击 生 命 大 分 子 造 成 组 织 细 胞 损 坏, 是 引 起 机 体 病 变 的 重 要 原 因, 也 是 诱 发 肿 瘤 等 恶 性 疾 病 的 重 要 起 因 近 年 来, 关 于 天 然 产 物 抗 氧 化 活 性 的 研 究 十 分 引 人 注 目, 从 天 然 材 料 提 取 精 制 而 得 到 的 产 品 天 然 产
5 152 21, Vol. 31, No. 17 食 品 科 学 基 础 研 究 物 对 人 体 的 多 种 疾 病 往 往 具 有 很 好 的 治 疗 预 防 等 药 理 [17] 作 用 和 保 健 功 能 据 报 道, 自 然 界 中 的 蔬 菜 水 果 花 和 谷 物 中 存 在 具 有 多 种 生 物 活 性 的 天 然 产 物, 其 中 一 些 天 然 产 物 在 抗 氧 化 性 清 除 自 由 基 作 用 方 面 有 突 出 的 表 现, 这 对 于 抗 癌 防 癌 抗 衰 老 预 防 心 血 管 疾 病, 提 高 人 民 身 体 健 康 会 产 生 积 极 的 作 用 本 实 验 较 为 系 统 地 研 究 了 我 国 北 方 特 产 的 5 种 野 生 浆 果 的 酚 类 化 合 物 组 成 抗 氧 化 活 性 和 抗 细 胞 增 殖 活 性 在 3 种 抗 氧 化 体 系 中, 花 楸 蓝 靛 果 和 蓝 莓 表 现 出 较 高 的 抗 氧 化 活 性, 沙 棘 和 草 莓 次 之, 其 抗 氧 化 活 性 与 提 取 物 的 质 量 浓 度 呈 正 相 关 花 楸 对 两 种 癌 细 胞 的 抑 制 活 性 最 强, 蓝 靛 果 对 癌 细 胞 的 抑 制 活 性 较 弱, 与 其 多 酚 含 量 没 有 显 著 的 相 关 性 参 考 文 献 : [1] KOUAKOU-SIRANSY G, SAHPAZ S, IRIE-NGUESSAN G, et al. Oxygen species scavenger activities and phenolic contents of four West African plants[j]. Food Chemistry, 21, 118(2): [2] HOGAN S, CHUNG H, ZHANG L, et al. Antiproliferative and antioxidant properties of anthocyanin-rich extract from acai[j]. Food Chemistry, 21, 118(2): [3] ROUANET J, DECORDE K, DEL-RIO D, et al. Berry juices, teas, antioxidants and the prevention of atherosclerosis in hamsters[j]. Food Chemistry, 21, 118(2): [4] LIU Ruihai. Health benefits of fruit and vegetables are from additive and synergistic combinations of phytochemicals[j]. American Journal of Clinical Nutrition, 23, 78(3): 517S-52S. [5] LIU Ming, LIN Luoqiang, SONG Bingbing, et al. Cranberry phytochemical extract inhibits sgc-791 cell growth and human tumor xenografts in balb/c nu/nu mice[j]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 29, 57(2): [6] WANG Min, LIU Jiaren, GAO Jinming, et al. Antioxidant activity of tartary buckwheat bran extract and its effect on the lipid profile of hyperlipidemic rats[j]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 29, 57(11): [7] YANG Jun, LIU Ruihai, HALIM Linna. Antioxidant and antiproliferative activities of common edible nut seeds[j]. Lwt-Food Science and Technology, 29, 42(1): 1-8. [8] BAO Jinsong, CAI Yizhong, SUN Mei, et al. Anthocyanins, flavonols, and free radical scavenging activity of Chinese bayberry (Myrica rubra) extracts and their color properties and stability[j]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 25, 53(6): [9] LOIZZO M R, SAID A, TUNDIS R, et al. Antioxidant and antiproliferative activity of Diospyros lotus L. extract and isolated compounds[j]. Plant Foods for Human Nutrition, 29, 64(4): [1] WINSTON G W, REGOLI F, DUGAS A J, et al. A rapid gas chromatographic assay for determining oxyradical scavenging capacity of antioxidants and biological fluids[j]. Free Radical Biology and Medicine, 1998, 24(3): [11] SUN Jie, CHU Yifang, WU Xianzhong, et al. Antioxidant and anti proliferative activities of common fruits[j]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 22, 5(25): [12] TERPINC P, BEZJAK M, ABRAMOVIC H. A kinetic model for evaluation of the antioxidant activity of several rosemary extracts[j]. Food Chemistry, 29, 115(2): [13] 付 陈 梅, 焦 必 宁, 阚 建 全. 果 蔬 总 抗 氧 化 能 力 间 接 测 定 法 及 其 影 响 因 素 [J]. 食 品 科 学, 28, 29(4): [14] 但 俊 峰, 盛 雪 飞, 陈 健 初. 5 种 柚 汁 中 主 要 抗 氧 化 成 分 含 量 及 其 抗 氧 化 能 力 的 比 较 [J]. 食 品 科 学, 28, 29(7): [15] XU Changmou, ZHANG Yali, CAO Lei, et al. Phenolic compounds and antioxidant properties of different grape cultivars grown in China[J]. Food Chemistry, 21, 119(4): [16] MUSCHEL R J, BERNHARD E J, GARZA L, et al. Induction of apoptosis at different oxygen tensions: evidence that oxygen radicals do not mediate apoptosisi signaling[j]. Cancer Research, 1995, 55(5): [17] VISAVADIYA N P, SONI B, DALWADI N. Free radical scavenging and antiatherogenic activities of Sesamum indicum seed extracts in chemical and biological model systems[j]. Food and Chemical Toxicology, 29, 47(1):
2 期 王 华 等 : 猕 猴 桃 果 肉 提 取 物 抗 氧 化 活 性 研 究 145 2 1. 1 1. 4 1. 2 DPPH 1 1-mg 70% 50-2- TBA ml 70% 0. 52 K 2 S 2 O 8 TPTZ 2 4 6- Sigma Folin- 70% 3. 00 m
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