精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 改 善 弱 精 子 症 患 者 精 子 DNA 完 整 率 的 临 床 研 究 王 英 俊, 等 1229 significantly improved (P<0.05), but no significant difference was found betwe
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- 婵哉 单
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1 1228 中 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) J Cent South Univ (Med Sci) 2012, 37(12) 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 改 善 弱 精 子 症 患 者 精 子 DNA 完 整 率 的 临 床 研 究 王 英 俊 1, 张 唯 力 1 2, 李 大 文 (1. 重 庆 医 科 大 学 附 属 第 二 医 院 泌 尿 外 科, 重 庆 ;2. 广 西 壮 族 自 治 区 人 民 医 院 遗 传 与 生 殖 中 心, 南 宁 ) [ 摘 要 ] 目 的 : 观 察 精 索 静 脉 曲 张 高 位 结 扎 术 对 弱 精 子 症 患 者 精 子 DNA 完 整 率 的 影 响 方 法 : 取 配 偶 怀 孕 后 半 年 内 正 常 精 液 标 本 30 例 测 定 精 液 常 规 及 精 子 DNA 完 整 率 做 预 试 验, 其 数 值 拟 做 对 照 参 考 指 标 收 集 2009 年 4 月 至 2011 年 4 月 在 重 庆 医 科 大 学 附 属 第 二 医 院 泌 尿 外 科 就 诊 的 弱 精 子 症 伴 精 索 静 脉 曲 张 患 者 56 例 术 前 1 周 和 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 后 3 个 月 的 精 液 标 本, 比 较 术 前 和 术 后 3 个 月 精 液 常 规 和 精 子 DNA 完 整 率 的 变 化 结 果 : 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 后 3 个 月, 与 术 前 比 较 患 者 精 子 DNA 完 整 率 和 精 液 常 规 指 数 有 明 显 改 善 (P<0.05) 开 放 手 术 与 腹 腔 镜 手 术 比 较, 单 侧 精 索 静 脉 曲 张 组 与 双 侧 精 索 静 脉 曲 张 组 比 较,Ⅰ 度 Ⅱ 度 Ⅲ 度 精 索 静 脉 曲 张 患 者 之 间 比 较 术 后 精 子 DNA 完 整 率 差 异 均 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 术 后 半 年 内 53 例 手 术 患 者 中 配 偶 怀 孕 27 人 (50.9%) 怀 孕 组 与 未 怀 孕 组 男 子 精 子 DNA 断 裂 指 数 分 别 为 (13.90±9.70)%,(20.10±10.27)%, 两 者 比 较 差 异 具 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 结 论 : 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 能 有 效 地 改 善 弱 精 子 症 伴 精 索 静 脉 曲 张 患 者 精 子 DNA 完 整 率, 与 手 术 方 式 精 索 静 脉 曲 张 单 侧 还 是 双 侧 及 精 索 静 脉 曲 张 严 重 程 度 无 明 显 关 系 [ 关 键 词 ] 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 ; 弱 精 子 症 ; 精 子 DNA 完 整 率 DOI: /j.issn High ligation of varicocele improves sperm DNA integrity in patients with asthenospermia WANG Yingjun 1, ZHANG Weili 1, LI Dawen 2 (1. Department of Urology, The Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing ; 2. Genetic and Reproductive Center, Hospital of Guangxi Zhuang Autonomous Region, Nanning , China) ABSTRACT Objective: To assess how high ligation of varicocele improves sperm DNA integrity in patients with asthenospermia. Methods: The DNA fragmentation index (DFI) and semen analysis were conducted in 30 subjects with normal sperm samples, and the parameters were used as references. Fifty-six patients from the Department of Urology of the Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University from April 2009 to April 2011 all signed the informed consent. Semen was collected 1 week before the high ligation of varicocele and 3 months after the surgery. We compared the change of the integrity of sperm DNA and semen. Results: Three months after the high ligation of varicocele, DFI and semen indexes 收 稿 日 期 (Date of reception): 作 者 简 介 (Biography): 王 英 俊, 博 士, 住 院 医 师, 主 要 从 事 男 性 生 殖 学 研 究 通 信 作 者 (Corresponding author): 张 唯 力, 66zwl@sina.com
2 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 改 善 弱 精 子 症 患 者 精 子 DNA 完 整 率 的 临 床 研 究 王 英 俊, 等 1229 significantly improved (P<0.05), but no significant difference was found between open surgery and laparoscopic surgery, unilateral varicocele and bilateral varicocele and Grade Ⅰ, Grade Ⅱ, Grade Ⅲ varicocele (P>0.05). Six months later, 27 spouses were pregnant out of the 53 surgical patients (50.9%). DFI of the pregnancy group and the non-pregnancy group was (13.90±9.70)% and (20.10±10.27)%, with significant different (P<0.05). Conclusion: Varicocelectomy can improve the sperm DNA integrity in patients with asthenospermia, whose effect is not related to surgical approach, unilateral or bilateral varicocele or varicocele grade. KEY WORDS varicocelectomy; asthenospermia; sperm DNA integrity 精 索 静 脉 曲 张 (varicocele,vc) 是 男 性 泌 尿 生 殖 系 统 常 见 疾 病, 在 成 年 男 性 中 的 发 病 率 为 15%~25%, VC 在 原 发 性 和 继 发 性 不 育 症 患 者 中 的 发 病 率 分 别 高 达 35%~40% 和 75%~80% [1] 世 界 卫 生 组 织 (WHO) 将 VC 作 为 男 性 不 育 的 一 个 重 要 原 因, 但 VC 影 响 精 子 质 量 的 确 切 机 制 现 在 尚 不 清 楚 国 外 有 报 道 称 VC 会 对 精 子 DNA 完 整 率 产 生 影 响, 而 在 国 内 这 方 面 的 报 道 较 少 本 研 究 选 择 2009 年 4 月 至 2011 年 4 月 在 重 庆 医 科 大 学 附 属 第 二 医 院 泌 尿 外 科 就 诊 的 弱 精 子 症 伴 VC 患 者 56 例, 比 较 VC 患 者 术 前 术 后 精 子 DNA 完 整 率 1 对 象 与 方 法 1.1 对 象 回 顾 性 分 析 2009 年 4 月 至 2011 年 4 月 在 重 庆 医 科 大 学 附 属 第 二 医 院 泌 尿 外 科 就 诊 的 弱 精 子 症 伴 VC 患 者 56 例, 年 龄 21.0~46.0(30.2±5.6) 岁, 不 育 史 1.0~8.9(3.6±1.4) 年, 其 中 VC Ⅰ 度 6 例 Ⅱ 度 21 例 Ⅲ 度 29 例 单 侧 32 例, 双 侧 26 例 腹 腔 镜 手 术 38 例, 开 放 手 术 18 例 分 别 收 集 VC 术 前 1 周 和 术 后 3 个 月 的 精 液 标 本 1.2 诊 断 标 准 弱 精 子 症 诊 断 标 准 患 者 禁 欲 2~7 d 后 取 精, 射 精 后 60 min 内, 检 查 精 子 密 度 正 常,A 级 精 子 活 力 低 于 25% 或 A+B 级 精 子 活 力 低 于 50%, 且 不 符 合 不 育 症 其 他 类 型 诊 断 WHO 推 荐 的 精 子 活 动 力 检 查 分 级 :A 级 快 速 前 向 运 动 ;B 级 慢 速 或 呆 滞 的 前 向 运 动 ;C 级 非 前 向 运 动 ; D 级 不 动 VC 的 彩 色 多 普 勒 超 声 诊 断 条 件 患 者 站 立 位 时,Valsalva 试 验 蔓 状 静 脉 出 现 血 液 反 流 阳 性 ( 反 流 持 续 时 间 1 s) 精 索 静 脉 曲 张 反 流 彩 色 多 普 勒 超 声 的 分 级 方 法 [2] :Ⅰ 度 为 患 者 仅 在 Valsalva 试 验 时, 蔓 状 静 脉 出 现 反 流 阳 性 ;Ⅱ 度 为 患 者 深 呼 吸 时 蔓 状 静 脉 出 现 反 流,Valsalva 试 验 反 流 加 重 ;Ⅲ 度 为 患 者 平 静 呼 吸 时 蔓 状 静 脉 即 出 现 反 流 观 察 病 例 纳 入 标 准 1) 符 合 上 述 诊 断 标 准 的 VC 患 者 ;2) 年 龄 20~50 岁 的 男 性 ;3) 符 合 弱 精 子 症 诊 断 标 准 者 ;4) 抗 精 子 抗 体 阴 性 者 观 察 病 例 排 除 标 准 1) 逆 行 射 精 或 不 射 精 者 ;2) 服 用 抗 癫 痫 病 抗 肿 瘤 等 有 碍 生 精 及 精 子 活 力 的 药 物 者 ;3) 先 天 性 畸 形 输 精 道 路 梗 阻 睾 丸 萎 缩 ( 包 括 附 睾 ) 染 色 体 异 常 ;4) 性 激 素 分 泌 异 常 者 ;5) 合 并 心 血 管 肝 肾 和 造 血 系 统 等 严 重 原 发 性 疾 病, 精 神 病 患 者 ;6) 不 符 合 纳 入 标 准 资 料 不 全 者 ;7) 患 者 不 同 意 参 加 临 床 试 验 者 1.3 方 法 研 究 方 案 设 计 1) 实 验 前 取 配 偶 怀 孕 后 半 年 内 正 常 精 液 标 本 30 例 测 定 精 液 常 规 及 精 子 DNA 完 整 率 做 预 试 验, 其 数 值 拟 做 对 照 参 考 指 标 ;2) 所 有 患 者 签 订 知 情 同 意 书 ;3) 分 别 收 集 所 有 患 者 术 前 1 周 和 术 后 3 个 月 的 精 液 标 本, 比 较 术 前 1 周 和 术 后 3 个 月 精 液 常 规 和 精 子 DNA 完 整 率 的 变 化 精 子 标 本 采 集 禁 欲 2~7 d, 手 淫 取 精, 于 早 晨 8:00 10:00 通 过 手 淫 取 出 精 液, 用 干 燥 消 毒 量 杯 接 盛, 立 即 送 检, 置 37 恒 温 箱 内 液 化 检 测 方 法 受 试 者 均 采 用 计 算 机 精 子 质 量 检 测 系 统, 检 测 精 液 质 量 ( 包 括 精 液 量 精 子 活 力 密 度 精 子 DNA 完 整 性 等 参 数 指 标 )
3 1230 中 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ), 2012, 37(12) 精 子 DNA 完 整 性 的 检 测 方 法 精 子 DNA 的 检 测 采 用 精 子 染 色 质 扩 散 试 验 (SCD) 该 方 法 由 Fernandez 等 [3] 首 先 提 出, 具 体 操 作 为 : 精 液 标 本 用 磷 酸 盐 缓 冲 液 (ph 6.8) 调 至 /ml,1000 r/min 离 心 10 min, 弃 精 浆, 精 子 沉 渣 用 磷 酸 盐 缓 冲 液 (ph6.8) 调 至 ~ / ml, 取 0.3 ml 处 理 好 的 精 液 与 0.7 ml 低 熔 点 琼 脂 凝 胶 (1%) 混 匀,37 孵 育 ; 吸 取 50 µl 上 述 精 子 混 合 液 滴 在 经 过 0.65% 正 常 熔 点 琼 脂 预 处 理 过 的 载 玻 片 上, 盖 上 22 mm 22 mm 盖 玻 片 4 放 置 5 min 精 子 变 性 及 裂 解 : 小 心 去 除 盖 玻 片, 室 温 (22 左 右 ) 将 标 本 载 玻 片 浸 入 0.08 mol/l 的 盐 酸 内 变 性 7 min; 然 后 浸 入 精 子 裂 解 液 内 (ph7.3)20 min; 再 移 入 缓 冲 液 中 3 min, 脱 水 将 标 本 载 玻 片 依 次 放 入 70%,90% 和 100% 的 乙 醇 中 脱 水 所 有 操 作 过 程 均 要 求 载 玻 片 ( 标 本 ) 处 于 水 平 状 态 空 气 自 然 干 燥 后 加 入 4,6- 二 脒 基 吲 哚 (DAPI) 染 色, 荧 光 显 微 镜 下 观 察 结 果 精 子 核 DNA 碎 片 的 判 断 标 准 计 数 500 个 精 子, 观 察 精 子 光 晕 大 小 根 据 光 晕 与 精 子 头 部 横 径 的 比 例, 粗 分 为 大 中 小 和 无 光 晕 4 个 等 级, 大 和 中 光 晕 表 示 精 子 DNA 完 整 无 碎 片, 小 和 无 光 晕 表 示 精 子 DNA 断 裂 为 碎 片 小 光 晕 以 精 子 头 直 径 1/4 为 判 断 标 准 ; 中 光 晕 精 子 头 直 径 >1/4, 而 精 子 头 直 径 2/3; 大 光 晕 精 子 头 直 径 >2/3( 图 1) 2 cm, 切 开 皮 肤, 钝 性 分 离 皮 下 组 织 至 腹 外 斜 肌 腱 膜, 顺 着 纤 维 方 向, 剪 开 腹 外 斜 肌 腱 膜, 钝 性 分 开 腹 内 斜 肌 腹 横 肌 和 腹 横 筋 膜, 进 入 腹 膜 外 间 隙, 将 腹 膜 外 脂 肪 推 向 内 侧, 在 腹 膜 表 面 寻 找 并 显 露 精 索 血 管 打 开 精 索 鞘 膜, 剥 离 鞘 膜 内 脂 肪 组 织, 游 离 并 分 开 精 索 内 动 静 脉, 将 精 索 内 静 脉 束 双 重 结 扎 后 切 断 静 脉 束 远 睾 端, 挤 压 左 侧 阴 囊 及 腹 股 沟 管, 将 静 脉 束 近 睾 段 内 残 留 血 液 排 出 后 并 双 重 结 扎 该 断 端, 再 将 两 断 端 结 扎 使 其 连 接 在 一 起, 保 持 静 脉 束 的 连 续 性 检 查 无 损 伤 输 精 管 精 索 动 脉, 无 活 动 性 出 血 后 逐 层 缝 合, 关 闭 切 口 腹 腔 镜 手 术 腹 腔 镜 精 索 静 脉 结 扎 术 : 术 前 排 尿 或 留 置 尿 管, 连 续 硬 膜 外 或 者 气 管 插 管 麻 醉 后, 取 20 头 低 足 高 仰 卧 位, 先 在 脐 下 弧 形 切 开 皮 肤 约 10 mm, 穿 入 气 腹 针,CO 2 气 腹, 压 力 12~14 mmhg 拔 出 气 腹 针, 穿 入 10 mm 套 管, 置 入 观 察 镜, 直 视 下 于 左 右 两 侧 麦 氏 点 分 别 置 入 5 mm 和 10 mm 套 管 用 于 器 械 操 作 于 一 侧 内 环 上 方 找 到 呈 蓝 黑 色 的 精 索 静 脉, 距 内 环 口 2~3 cm 处, 沿 精 索 血 管 表 面 剪 开 侧 腹 膜 2~4 cm, 分 离 出 精 索 血 管, 尽 量 辨 认 分 离 睾 丸 动 脉, 将 精 索 血 管 用 2 个 钛 夹 夹 闭, 两 钛 夹 间 距 2 cm, 并 在 其 间 距 内 电 灼 无 出 血 后 复 位, 将 剪 开 的 腹 膜 拉 拢 覆 盖 精 索 血 管 和 钛 夹, 无 需 缝 合 如 为 双 侧, 同 法 处 理 对 侧 1.4 统 计 学 处 理 数 据 采 用 PEMS3.0 统 计 分 析 软 件 处 理 计 量 资 料 所 有 数 据 均 采 用 均 数 ± 标 准 差 (x±s) 表 示, 符 合 正 态 分 布 的 数 据, 组 间 两 两 比 较 采 用 方 差 分 析, 组 内 比 较 采 用 配 对 T 检 验 (Paired-Samples T Test); 不 符 合 正 态 分 布 的 数 据 以 及 计 数 资 料 采 用 非 参 数 检 验 (χ 2 检 验 秩 和 检 验 等 ) 组 间 等 级 资 料 采 用 Wilcoxon 秩 和 检 验 检 验 水 准 为 双 侧 α=0.05,p<0.05 为 差 异 有 统 计 学 意 义 2 结 果 图 1 SCD 实 验 检 测 精 子 DNA 完 整 性 1: 大 光 晕 ;2: 中 光 晕 ;3: 小 光 晕 ;4: 无 光 晕 Figure 手 术 方 法 Sperm DNA activity tested by sperm chromatin dispersion (SCD). 1: Big halo; 2: Medium halo; 3: Small halo; 4: Without halo 开 放 手 术 患 者 仰 卧 位, 在 局 部 浸 润 麻 醉 下, 于 左 髂 前 上 棘 与 耻 骨 联 合 连 线 中 点 处 行 一 水 平 横 行 切 口 约 2.1 VC 患 者 术 前 及 术 后 3 个 月 精 液 情 况 VC 患 者 术 前 的 精 子 密 度 精 子 存 活 率 A+B 级 精 子 活 力 明 显 低 于 正 常 组, 精 子 DNA 断 裂 指 数 (DNA fragmentation index,dfi) 明 显 高 于 正 常 组 (P<0.05, 表 1) VC 患 者 术 后 3 个 月 的 精 子 密 度 精 子 存 活 率 A+B 级 精 子 活 力 和 DFI 较 术 前 有 很 大 程 度 的 改 善 (P<0.05, 表 1) 其 中 2 例 患 者 ( 均 为 单 侧 VC) 术 后 未 能 及 时 到 医 院 复 查 精 液 结 果, 为 脱 落 病 例
4 精 索 静 脉 高 位 结 扎 术 改 善 弱 精 子 症 患 者 精 子 DNA 完 整 率 的 临 床 研 究 王 英 俊, 等 1231 表 1 VC 患 者 术 前 和 术 后 3 个 月 精 液 情 况 的 比 较 (x±s) Table 1 Comparison of semen parameters of VC patients before and after varicocelectomy (x±s) 组 别 n 精 子 密 度 /( 10 6 /ml) 精 子 存 活 率 /% A+B 级 精 子 /% DFI/% 正 常 组 ± ± ± ±8.30 手 术 前 ±3.84* 33.77±16.51* 16.73±5.66* 23.4±12.13* 术 后 3 个 月 ±7.64 # 53.84±14.72 # 26.83±5.39 # 15.5±10.41 # 与 正 常 组 比 较,*P<0.05; 与 术 前 比 较, # P< 开 放 手 术 组 与 腹 腔 镜 手 术 组 术 前 与 术 后 3 个 月 腹 腔 镜 手 术 38 例 术 前 DFI 值 为 (22.91±11.50)%, 开 放 手 术 18 例 术 前 DFI 值 为 (23.22±11.23)% 手 术 后 3 个 月, 复 查 DFI, 腹 腔 镜 手 术 组 36 例 ( 脱 落 2 例 )DFI 值 为 (15.45±10.22)%, 开 放 手 术 18 例 DFI 值 为 (15.91±11.42)% 开 放 手 术 组 术 前 与 术 后 3 个 月 比 较, 腹 腔 镜 手 术 组 术 前 与 术 后 3 个 月 比 较,DFI 差 异 均 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 手 术 后 3 个 月, 开 放 手 术 与 腹 腔 镜 手 术 比 较 DFI 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 2.3 单 侧 VC 组 与 双 侧 VC 组 术 前 与 术 后 3 个 月 单 侧 VC 组 32 例 术 前 DFI 值 为 (19.95±9.67)%, 双 侧 VC 组 24 例 术 前 DFI 值 为 (21.76±11.28)% 手 术 后 3 个 月, 复 查 DFI, 单 侧 VC 组 30 例 ( 脱 落 2 例 )DFI 值 为 (14.69±9.96)%, 双 侧 VC 组 24 例 DFI 值 为 (15.78±10.05)% 单 侧 VC 组 术 前 与 术 后 3 个 月 比 较, 双 侧 VC 组 术 前 与 术 后 3 个 月 比 较,DFI 差 异 均 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 手 术 后 3 个 月, 单 侧 VC 组 与 双 侧 VC 组 比 较 DFI 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 2.4 Ⅰ 度 Ⅱ 度 Ⅲ 度 VC 患 者 术 前 与 术 后 3 个 月 术 前 Ⅰ 度 6 例, Ⅱ 度 21 例, Ⅲ 度 29 例, DFI 值 分 别 为 (18.97±10.21)%,(19.88±11.45)%, (21.65±12.22)% 手 术 后 3 个 月, 复 查 DFI,Ⅰ 度 5 例 ( 脱 落 1 例 ),Ⅱ 度 20 例 ( 脱 落 1 例 ),Ⅲ 度 29 例,DFI 值 分 别 为 (14.67±9.58)%,(15.22±11.29)%, (15.58±12.27)% 手 术 前 Ⅰ 度 Ⅱ 度 Ⅲ 度 VC 患 者 分 别 与 术 后 3 个 月 比 较,DFI 差 异 具 有 统 计 学 意 义 (P<0.05), 术 后 3 个 月 Ⅰ 度 Ⅱ 度 Ⅲ 度 VC 患 者 之 间 比 较 DFI 差 异 无 统 计 学 意 义 (P>0.05) 2.5 术 后 随 访 结 果 术 后 对 53 例 手 术 患 者 (3 人 失 访 ) 进 行 术 后 半 年 随 访, 随 访 期 间, 配 偶 怀 孕 27 人, 怀 孕 率 为 50.9% 怀 孕 组 (n=27) 与 未 怀 孕 组 (n=26) 男 子 精 子 DFI 值 分 别 为 (13.90±9.70)%,(20.10±10.27)%, 两 者 比 较 差 异 具 有 统 计 学 意 义 (P<0.05) 3 讨 论 VC 是 导 致 男 性 不 育 的 重 要 因 素, 但 遗 憾 的 是 它 对 精 子 质 量 产 生 负 面 影 响 的 机 制 现 在 尚 不 清 楚 但 并 不 是 所 有 的 VC 患 者 都 需 要 手 术 治 疗 [4], 现 在 VC 手 术 的 指 导 方 针 是 有 证 据 表 明 睾 丸 体 积 下 降 或 精 子 质 量 下 降 [5 6] 研 究 [7] 表 明 :VC 手 术 能 改 善 精 液 常 规 这 与 本 研 究 结 果 一 致,VC 术 后 3 个 月, 患 者 的 精 子 密 度 精 子 存 活 率 A+B 级 精 子 活 力 与 术 前 比 较 都 有 显 著 改 善 目 前 的 精 液 常 规 检 查 主 要 包 括 精 液 量 ph 值 精 子 密 度 精 子 活 力 和 形 态 但 大 约 15% 的 男 性 不 育 患 者 精 液 常 规 检 查 是 正 常 的 [8] 因 此, 仅 仅 进 行 [9] 精 液 常 规 检 查 还 是 不 够 的 1980 年 Evenson 等 指 出, 精 子 DNA 完 整 性 可 能 是 男 性 不 育 中 一 个 潜 在 的 有 用 指 标, 这 具 有 里 程 碑 意 义 在 过 去 的 10 年 中, 人 们 越 来 越 重 视 精 子 DNA 完 整 性 在 男 性 不 育 [10 11] 中 的 作 用 国 内 外 研 究 有 充 分 的 证 据 表 明, 精 子 DNA 和 染 色 质 的 损 伤 与 男 性 不 育 和 女 性 自 然 受 孕 率 降 低 有 明 显 的 关 联 有 人 指 出,8% 精 液 常 规 检 查 正 常 的 患 者 中, 精 子 DNA 是 有 损 伤 的 [12 13] 以 后 人 们 陆 续 发 现, 精 子 DNA 的 完 整 性 会 对 体 外 受 精 (IVF) 和 卵 胞 浆 内 单 精 子 注 射 (ICSI) 技 术 产 生 影 响 [14] 在 本 研 究 随 访 过 程 中 也 发 现, 怀 孕 配 偶 精 子 DNA 完 整 率 高 于 未 怀 孕 组 在 国 外,Nasr-Esfahani 等 [15] [16] 和 Zini 等 都 发 [17] 现 VC 会 引 起 精 子 染 色 质 和 DNA 的 损 伤 Zini 等 的 一 项 最 新 研 究 表 明 VC 术 后 可 以 改 善 精 子 DNA 完 整 率 本 研 究 结 果 也 发 现,VC 术 后 3 个 月 DFI 与 术 前 比 较 都 有 明 显 的 改 善 本 研 究 还 进 一 步 详 细 比 较 了 不 同 的 手 术 方 式, 单 侧 VC 与 双 侧 VC 以 及 VC 的 严 重 程 度 对 术 后 DFI 恢 复 的 影 响 术 后 3 个 月, 开 放 手 术 与 腹 腔 镜 手 术 比 较, 单 侧 VC 组 与 双 侧 VC 组 比 较,Ⅰ 度 Ⅱ 度 Ⅲ 度 VC 患 者 之 间 比 较 DFI 无 明 显 差 异 由 此 可 见, 不 同 的 手 术 方 式, 单 侧 VC 与 双 侧 VC 以 及 VC 的 严 重 程 度 对 术 后 DFI 恢 复 的 影 响 不 大, 但 有 一 点 是 可 以 肯 定 的,3 组 比 较 都 提 示 术 后 3 个 月 与 术 前 比 较,DFI 有 较 明 显 的 改 善 现 在 VC 导 致 DFI 损 伤 的 机 制 现 在 尚 不 清 楚, Fujisawa 等 [18] 发 现,VC 患 者 DNA 聚 合 酶 严 重 减
5 1232 中 南 大 学 学 报 ( 医 学 版 ), 2012, 37(12) 少, 并 认 为 DNA 聚 合 酶 的 减 少 最 终 导 致 DFI 的 损 伤 VC 导 致 DFI 损 伤 的 另 一 个 机 制 是 氧 化 应 激 [19] [20] De Luliis 等 和 Chen 等 认 为 VC 人 群 中 氧 自 由 基 含 量 高, 可 能 导 致 精 子 染 色 质 和 DFI 的 损 伤 总 之, 本 研 究 表 明 VC 手 术 有 助 于 改 善 VC 患 者 DFI 的 损 伤 不 同 的 手 术 方 式, 单 侧 VC 与 双 侧 VC 以 及 VC 的 严 重 程 度 对 术 后 DFI 恢 复 的 影 响 不 大 虽 然 现 在 VC 导 致 DFI 损 伤 的 机 制 现 在 尚 不 清 楚, 但 依 据 笔 者 的 临 床 经 验,VC 不 育 患 者 在 一 定 条 件 下 行 手 术 治 疗 还 是 有 必 要 的 9. Evenson DP, Darzynkiewicz Z, Melamed MR. Relation of mammalian sperm chromatin heterogeneity to fertility[ J]. Science, 1980, 210(4474): Stocks SJ, Agius RM, Cooley N, et al. Alkylation of sperm DNA is associated with male factor infertility and a reduction in the proportion of oocytes fertilised during assisted reproduction[ J]. Mutat Res, 2010, 698(1/2): Varshini J, Srinag BS, Kalthur G, et al. Poor sperm quality and advancing age are associated with increased sperm DNA damage in infertile men[ J]. Andrologia, 2012, 44(Suppl 1): Zini A, Bielecki R, Phang D, et al. Correlations between two markers of 参 考 文 献 1. Hauser R, Paz G, Botchan A, et al. Varicocele: effect on sperm functions[ J]. Hum Reprod Update, 2001, 7(5): 薛 恩 生, 林 礼 务, 李 启 镛, 等. 精 索 静 脉 反 流 的 彩 色 多 普 勒 超 声 检 测 [ J]. 中 华 超 声 影 像 学 杂 志, 2000, 9(2): XUE Ensheng, LIN Liwu, LI Qiyong, et al. Detection of reflux in internal spermatic vein by color Doppler ultrasound and its clinical significance[ J]. Chinese Journal of Ultrasonography, 2000, 9(2): Fernández JL, Muriel L, Rivero MT, et al. The sperm chroma dispersion test: a simple method for the determination sperm DNA fragmentation[ J]. J Androl, 2003, 24(1): Smith R, Kaune H, Parodi D, et al. Increased sperm DNA damage in patients with varicocele: relationship with seminal oxidative stress[ J]. Hum Reprod, 2006, 21(4): Male Infertility Best Practice Policy Committee of the American Urological Association; Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. Report on varicocele and infertility[ J]. Fertil Steril, 2004, 82(Suppl 1): S142 S The Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. Report on varicocele and infertility[ J]. Fertil Steril, 2006, 86(5 Suppl 1): S93 S Agarwal A, Deepinder F, Cocuzza M, et al. Efficacy of varicocelectomy in improving semen parameters: new meta-analytic approach[ J]. Urology, 2007,70(3): sperm DNA integrity, DNA denaturation and DNA fragmentation, in fertile and infertile men[ J]. Fertil Steril, 2001,75(4): Zini A, Kamal K, Phang D, et al. Biologic variability of sperm DNA denaturation in infertile men[ J]. Urology, 2001, 58(2): Seli E, Sakkas D. Spermatozoal nuclear determinants of reproductive outcome: implications for ART[ J]. Hum Reprod Update, 2005, 11(4): Nasr-Esfahani MH, Abasi H, Razavi S, et al. Varicocelectomy: semen parameters and protamine deficiency[ J]. Int J Androl, 2009, 32(2): Zini A, Blumenfeld A, Libman J, et al. Beneficial effect of microsurgical varicocelectomy on human sperm DNA integrity[ J]. Hum Reprod, 2005, 20(4): Zini A, A zhar R, Baazeem A, et al. Effect of microsurgical varicocelectomy on human sperm chromatin and DNA integrity: a prospective trial[ J]. Int J Androl, 2011, 34(1): Fujisawa M, Yoshida S, Matsumoto O, et al. Deoxyribonucleic acid polymerase activity in the testes of infertile men with varicocele[ J]. Fertil Steril,1988, 50(5): De Iuliis GN, Thomson LK, Mitchell LA, et al. DNA damage in human spermatozoa is highly correlated with the efficiency of chromatin remodeling and the formation of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine, a marker of oxidative stress[ J]. Biol Reprod, 2009, 81(3): Chen SS, Huang WJ, Chang LS, et al. Attenuation of oxidative stress after varicocelectomy in subfertile patients with varicocele[ J]. J Urol, 2008, 179(2): Agarwal A, Allamaneni SS. Sperm DNA damage assessment: a test whose time has come[ J]. Fertil Steril, 2005, 84(4): ( 本 文 编 辑 郭 征 )
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