基于 UPLC 指纹图谱结合化学模式识别的芪参益气滴丸质量控制研究 李卓伦 1a,2, 周霖 1a,2, 王肖辉 1b, 孙志 1a,2, 左莉华 1a,2, 周珮珮 1a,2, 王旺 3, 曹辉 1c, 冯娟娟 1d, 章贤 朱君君 4, 张晓坚 1a,2, 1a,2* (1. 郑州大学第一附属医

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1 基于 UPLC 指纹图谱结合化学模式识别的芪参益气滴丸质量控制研究 李卓伦 1a,2, 周霖 1a,2, 王肖辉 1b, 孙志 1a,2, 左莉华 1a,2, 周珮珮 1a,2, 王旺 3, 曹辉 1c, 冯娟娟 1d, 章贤 朱君君 4, 张晓坚 1a,2, 1a,2* (1. 郑州大学第一附属医院,a. 药学部,b. 超声科,c. 腔内血管外科,d. 康复医学科, 郑州 ;2. 河南省精准临 床药学重点实验室, 郑州 ;3. 郑州大学生理学与神经生物学系, 郑州 ;4. 河南理工大学医学院, 河南焦作 ) 摘要 : 目的 学的质量评价 方法 采用超高效液相色谱法建立芪参益气滴丸的指纹图谱, 并结合化学模式识别技术对其进行系统 全面和科 采用 Waters 超高效液相色谱仪,ACQUITY UPLC HSS T3 色谱柱, 以乙腈 -0.1% 甲酸水为流动相 进行梯度洗脱, 检测波长为 256 nm, 建立 10 批次芪参益气滴丸的指纹图谱 通过相似度分析并结合聚类分析 (cluster analysis,ca) 主成分分析 (principal component analysis,pca) 及正交偏最小二乘法 - 判别分析 (orthogonal partial least squares discriminant analysis,opls-da) 模式识别技术对芪参益气滴丸的总体质量进行分析评价 结果 建立的指纹图谱共标定 53 个共有峰, 经对照品进行化学指认并鉴定了其中的 14 个色谱峰 10 批供试品的相似度均 >0.94, 表明该药物总体质量 较为稳定 ; 但通过 CA 及 PCA 均发现不同批次药物质量之间仍然存在有微小差异, 且主要分为 2 大类, 最后进一步采用 OPLS-DA 筛选出了导致批次药物质量差异的 3 个共有峰 结论本研究建立的分析方法科学 准确 可靠且简便易行, 指纹图谱结合化学模式识别技术可更加系统 全面地评价芪参益气滴丸的药物质量, 同时为今后中药及其制剂更进一步的质量控制研究奠定了坚实的理论基础 关键词 : 芪参益气滴丸 ; 指纹图谱 ; 化学模式识别 ; 质量控制中图分类号 :R284.1;R 文献标志码 :B 文章编号 : (2019) DOI: /j.cnki.issn 引用本文 : 李卓伦, 周霖, 王肖辉, 等. 基于 UPLC 指纹图谱结合化学模式识别的芪参益气滴丸质量控制研究 [J]. 中国现代应用药学, 2019, 36(14): Quality Control Research of Qishen Yiqi Dripping Pills Based on UPLC Fingerprint Combined with Chemical Pattern Recognition LI Zhuolun 1a,2, ZHOU Lin 1a,2, WANG Xiaohui 1b, SUN Zhi 1a,2, ZUO Lihua 1a,2, ZHOU Peipei 1a,2, WANG Wang 3, CAO Hui 1c, FENG Juanjuan 1d, ZHANG Xian 1a,2, Zhu Junjun 4, ZHANG Xiaojian 1a,2* (1.The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, a.department of Pharmacy, b.ultrasonic Department, c.department of Physiology and Neurobiology, d. Department of Rehabilitation Medicine, Zhengzhou , China; 2.Henan Key Laboratory of Precision Clinical Pharmacy, Zhengzhou , China; 3.Department of Physiology and Neurobiology, Zhengzhou University, Zhengzhou , China; 4.Medical College, Henan Polytechnic University, Jiaozuo , China) ABSTRACT: OBJECTIVE To establish the UPLC fingerprint of Qishen Yiqi Dripping pills and conduct a systemic, comprehensive quality evaluation of the drug using a chemical pattern recognition method. METHODS Ultra-high performance liquid chromatography instrument and ACQUITY UPLC HSS T3 chromatographic column was employed, the separation was performed with the mobile phase consisting of acetonitrile and 0.1% formic acid aqueous solution, and the detection wavelength was set at 256 nm to establish the UPLC fingerprint of Qishen Yiqi Dripping pills. Then, the further quality assessment of the drug was carried out by similarity evaluation, cluster analysis(ca), principal component analysis(pca) and orthogonal partial least squares discriminant analysis(opls-da). RESULTS Fifty-three peaks were recognised as common peaks in the fingerprint, 14 peaks were identified using standard references. The similarity value of the drugs were all >0.94, indicating a relatively stable quality of the quality. Little difference was then discovered between the batches of the drug by CA and PCA. Finally, 3 peaks were recognised as the quality makers using a OPLS-DA method. CONCLUSION The analysis method established in this study is scientific, accurate, reliable and simple; the drug quality of Qishen Yiqi Dripping pills can be evaluated systematically and comprehensively using a fingerprint combined with chemical pattern recognition technique; what s more, it will also lay a solid theoretical basis for the further quality control of traditional Chinese medicine and its preparations at the same time. KEYWORDS: Qishen Yiqi Dripping pills; fingerprint; chemical pattern recognition; quality control 基金项目 : 常州四药临床药学科研基金 (CZSYJJ16030); 河南省科技攻关项目 ( ); 河南省高等学校重点科研项目 (19A320070) * 作者简介 : 李卓伦, 男, 硕士 Tel: (0371) lzl @126.com 通信作者 : 张晓坚, 男, 教授 Tel: (0371) zhangxiaojian_yxb@163.com 1754 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No.14 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期

2 芪参益气滴丸是在传统医药理论的指导下, 经现代工艺提取黄芪 丹参 三七 降香中的有效成分精制而成的中药滴丸制剂 [1] 该药具有益气活血 通络止痛之功效, 临床主要用于气虚血瘀引起的冠心病心绞痛患者, 症如心悸 胸闷 胸痛 气短 面色紫黯等 [2] 芪参益气滴丸疗效确切, 临床应用广泛, 复方制剂中的各味药材按照 君 臣 佐 使 的传统理论进行配伍, 以起到增效减毒的作用 中药中所含的活性化学成分极其复杂, 药物中各有效成分之间发挥相互协同作用从而达到综合治疗的根本目的, 因此, 各化学成分和含量的稳定性对于中药及其制剂的药物质量起着至关重要的作用 查阅资料发现, 目前已有关于芪参益气滴丸中的多个成分的指纹图谱和定量研究, 但这些报道尚未充分利用指纹图谱中涵盖的大量化学信息对药物进行综合质量评价, 且没有筛选到对质量差异起主要作用的目标色谱峰, 因此, 难以达到对该药深入质量控制的目的 [3-6] 药物质量是临床安全 有效使用的重要前提和基本保障, 在临床治疗过程中起着不可忽视的作用 [7] 中药指纹图谱能够充分反映中药中复杂活性成分的化学组成 [8-10] ; 化学模式识别能够对指纹图谱的信息进行数字化处理 识别和综合评估, 从而更加科学 客观地反映中药质量 [11-13] 因此, 本研究拟建立科学的指纹图谱 - 模式识别研究策略, 利用不同的多元变量统计数据处理方法对芪参益气滴丸指纹图谱中涵盖的大量信息进行更加充分地提取 挖掘和分析, 从而实现综合评价药物质量并准确筛选药物质量差异色谱峰的目的 1 仪器与试剂 1.1 仪器 Waters 超高效液相色谱仪 ( 美国 Waters 公司 ); ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm 2.1 mm, 1.8 μm) 型色谱柱 ( 美国 Waters 公司 );MDS-6G 型多通量微波消解 / 萃取系统 ( 上海新仪微波化学科技有限公司 );New Classic MS 型十万分之一分析天平 ( 瑞士 Mettler Toledo 上海有限公司 ) 1.2 试剂对照品 : 琥珀酸 ( 批号 :MUST ) 原儿茶酸 ( 批号 :MUST ) 咖啡酸( 批号 : MUST ) 迷迭香酸( 批号 :MUST ) 黄芩苷( 批号 :MUST ) 丹 酚酸 A( 批号 :MUST ) 木犀草素( 批号 : MUST ) 丹参素( 批号 :MUST ) 芒柄花黄素( 批号 :MUST ) 汉黄芩素 ( 批号 :MUST ) 大黄素( 批号 : wkq ) 二氢丹参酮 I( 批号 :MUST ) 隐丹参酮( 批号 :MUST ) 丹参酮 IIA( 批号 :MUST ) 均购自成都曼斯特生物科技有限公司, 纯度均 >99% 甲醇 乙腈 甲酸为色谱纯, 均购于美国 Fisher 公司 ; 水为娃哈哈纯净水 ( 杭州娃哈哈永盛饮料有限公司 ) 芪参益气滴丸共 10 个批次, 编号 S1~S10, 批号分别为 ,150807,150411,160306,150910, ,151210,151222, 和 , 均购自天士力制药集团股份有限公司 2 方法 2.1 色谱条件 ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm 2.1 mm, 1.8 μm) 型色谱柱, 以乙腈为流动相 A, 以 0.1% 甲酸水溶液为流动相 B, 梯度洗脱, 洗脱程序为 0~1.0 min, 5%A ; 1.0~4.0 min, 5% 10%A ; 4.0~10.0 min,10% 20%A;10.0~20.0 min,20%a; 20.0~25.0 min,20% 30%A;25.0~30.0 min,30% 40%A ; 30.0~40.0 min, 40% 65% A ; 40.0~45.0 min,65% 100% A;45.0~50.0 min,100% A;50.0~50.1 min,100% 5% A;50.1~55.0 min, 95% A; 体积流量为 0.2 ml min 1 ; 进样量 10 μl; 柱温 40 ; 检测波长为 256 nm 2.2 供试品溶液和对照品溶液制备取本品约 1.0 g, 精密称定后, 置具塞锥形瓶中, 精密加入纯甲醇 20 ml, 密塞后称定质量, 微波萃取 15 min( 功率 600 W), 放至室温再次称定, 用纯甲醇补足减失的质量, 摇匀,0.22 μm 微孔滤膜滤过即得供试品溶液 取各对照品约 1.0 mg, 精密称定后, 分别置于 10 ml 量瓶中, 加入纯甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 制备成质量浓度为 0.1 mg ml 1 的单一对照品储备液 ; 分别精密量取单一对照品储备液适量, 将其混合后加入纯甲醇稀释, 最后使得混合对照品溶液中各对照品的浓度均为 1 μg ml UPLC 指纹图谱方法学考察 仪器精密度试验取同一批次芪参益气滴丸 ( 批号 :151007), 按 2.2 项下方法制备供试品溶液, 按 2.1 项下色谱条件进行测定, 连续进 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No

3 样 6 次后 以 24 号峰(丹酚酸 A)的峰面积和保留 间 实验结果显示 指纹图谱中相对峰面积和相 时间为参照 并计算同一批次图谱中各共有峰与 对保留时间的 RSD 均<3% 表明本实验方法重复 参照峰峰面积和保留时间的比值 即得各共有峰 性较好 的相对峰面积和相对保留时间 实验结果显示 2.4 指纹图谱中相对峰面积和相对保留时间的 RSD 均 <3% 表明仪器精密度良好 丸供试品 按 2.2 项下方法制备供试品溶液 按 2.1 项下色谱条件进样分析并记录色谱图 稳定性试验 取同一批次芪参益气滴丸(批 芪参益气滴丸 UPLC 指纹图谱的建立 共有峰的标定 取 10 个批次的芪参益气滴 号 ) 按 2.2 项下方法制备供试品溶液 最后将其导入 中药色谱指纹图谱相似度评价软 按 2.1 项下色谱条件分别于 和 件 (2012 版) 以样品 S1 采集得到的色谱图作为 24 h 进样测定 以 24 号峰(丹酚酸 A)的峰面积和 参照谱图 采用多点校正法建立指纹图谱 并选 保留时间为参照 计算出其他各共有峰的相对峰 择中位数法计算得出对照谱图 结果见图 1~2 根 面积和相对保留时间 实验结果显示 指纹图谱 据生成的芪参益气滴丸指纹图谱结果 选择图谱 中相对峰面积和相对保留时间的 RSD 均<3% 表 中含量较大且分离度较好的色谱峰作为共有特征 明供试品溶液在 24 h 内稳定性良好 峰 结果共标定出 53 个共有峰 重复性试验 取同一批次芪参益气滴丸(批 相对保留时间和相对峰面积 指纹图谱中 号 ) 按 2.2 项下方法平行制备 6 份供 24 号峰(丹酚酸 A)的峰面积较为稳定且分离度好 试品样本 按 2.1 项下色谱条件进行测定 以 因此本实验选择 24 号峰(丹酚酸 A)为参照峰(S 24 号峰(丹酚酸 A)的峰面积和保留时间为参照 计 峰) 记录 10 批芪参益气滴丸指纹图谱中各共有峰 算出其他各共有峰的相对峰面积和相对保留时 的峰面积和保留时间 并计算其相对保留时间和 图 1 10 批芪参益气滴丸的 UPLC 指纹图谱 Fig. 1 UPLC fingerprint of 10 batches of Qishen Yiqi Dripping pills 图 2 芪参益气滴丸的对照指纹图谱 Fig. 2 Reference fingerprint of Qishen Yiqi Dripping pills 1756 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No.14 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期

4 相对峰面积 实验数据显示,10 个批次中各共有峰相对保留时间的 RSD 均 <1.9%, 表明共有峰的出峰时间相对较为稳定, 但其相对峰面积的 RSD 相差较大, 表明不同批次芪参益气滴丸中各成分含量存在一定的差异 相似度计算将 10 批芪参益气滴丸的指纹图谱导入 中药色谱指纹图谱相似度评价系统 (2012 版 ), 生成对照指纹图谱并计算各批次样品与标准对照图谱之间的相似度, 结果分别为 0.947,0.981,0.979,0.986,0.980,0.982,0.984, 0.972,0.984,0.973, 结果表明这 10 批芪参益气滴丸的质量较为均一稳定 2.5 主要色谱峰的化学指认采用对照品对各共有色谱峰进行化学指认, 经保留时间和紫外光谱 2 项指标进行比对, 最终共确认了 14 个色谱峰, 分别为 1 号峰 ( 琥珀酸 ) 2 号峰 ( 原儿茶酸 ) 4 号峰 ( 原儿茶醛 ) 7 号峰 ( 咖啡酸 ) 18 号峰 ( 迷迭香酸 ) 19 号峰 ( 黄芩苷 ) 24 号参比峰 ( 丹酚酸 A) 25 号峰 ( 木犀草素 ) 28 号峰 ( 丹参素 ) 29 号峰 ( 芒柄花黄素 ) 33 号峰 ( 大黄素 ) 34 号峰 ( 二氢丹参酮 Ⅰ) 35 号峰 ( 隐丹参酮 ) 和 40 号峰 ( 丹参酮 ⅡA), 结果见图 化学模式识别 聚类分析 (cluster analysis,ca) CA 是按照 物以类聚 的基本原则, 依据客观事物中某些 指标的数量表现将其进行聚类, 并划分成各个相对同质群组的统计分析技术, 是目前常用的数据挖掘分析方法之一 本研究以 10 批次芪参益气滴丸指纹图谱中 53 个共有峰的相对峰面积为变量, 导入 SPSS 21.0 软件, 选用组间平均连接法, 利用欧氏距离作为度量标准对不同批次之间的样本进行聚类分析, 结果见图 4 结果显示, 从总体上看, 本研究选择的 10 批药物主要分为 2 大类,S3( 批号 :150411) S9( 批号 :150507) 为第一大类, 其余 8 个批次为第 2 大类 分析产生该现象的主要原因, 发现第一大类批次药物生产日期较早, 均在 2015 年的上半年生产, 而第二大类药物的生产日期则全部集中在 2015 年下半年及以后 在药物的生产过程中, 其质量稳定性会受到多种因素共同影响, 其中, 不同的生产时间是导致药物质量差异的重要因素之一 主要原因可能为, 不同时间 ( 年份 ) 的车间生产工艺 质量控制体系以及原药材采摘季节均会有所不同, 因此导致药物的批次质量之间会有所差异 主成分分析 (principal component analysis, PCA) 主成分分析可对复杂信息中的多变量进行快速提取 重新组合 数学降维, 生成新的综合变量即主成分, 经投影处理后, 样本最终落在主成分组成平面上的位置, 即可表征不同样本的总体信息 图 3 色谱峰指认 A 混合对照品 ;B 供试品 ;1 琥珀酸 ; 原儿茶酸 ; 原儿茶醛 ; 咖啡酸 ; 迷迭香酸 ; 黄芩苷 ; 丹酚酸 A(S 峰 ); 木犀草素 ; 丹参素 ; 芒柄花黄素 ; 大黄素 ; 二氢丹参酮 ; 隐丹参酮 ; 丹参酮 Fig. 3 Chromatographic peak identification A the mixed references; B sample; 1 succinic acid; 2 protocatechuic acid; 4 protocatechualdehyde; 7 caffeic acid; 18 rosmarinic acid; 19 baicalin; 24 salvianolic acid a (peak S); 25 luteolin; 28 danshensu; 29 neochanin; 33 emodin; 34 dihydrotanshinone ; 35 cryptotanshinone; 40 tanshinone IIA. 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No

5 寻 结果共找到 3 个有意义变量, 按照 VIP 值大小依次为 42 号峰 13 号峰和 4 号峰, 见图 8, 这些成分是上述 3 类批次之间产生差异的主要标志性成分, 该结果与 PCA 分析中载荷图寻找的重要性权重变量大体一致, 提示生产企业以后在药物生产中须重点关注以上成分的质量变化, 以更加科学 高效地控制药物批次质量 图 4 10 批芪参益气滴丸的聚类分析结果 Fig. 4 Cluster analysis results in 10 batches of Qishen Yiqi Dripping pills 本研究以指纹图谱中 53 个共有峰的相对峰面积为变量, 构建 的原始数据矩阵, 采用多元变量统计软件 SIMCA14.0 对 10 批芪参益气滴丸样本进行 PCA 分析,Scaling( 标度化 ) 方式选为 Ctr( 中心化 ) 分析结果显示, 贡献率最大的 2 个主成分累计贡献率为 99%, 表明前 2 个主成分能够充分体现出芪参益气滴丸的基本特征和主要信息 因此, 本研究以前 2 个主成分为坐标轴构建主成分平面, 在损失极少部分信息的前提下, 将样本的多元变量通过降维的方式投影在二维平面上, 以观察样本的整体分布情况和各变量对样本分布的贡献大小, 分别见图 5~6 图 5 显示, 样本 S3 S9 和 S6 S8 S10 以及 S4 S5 S1 S2 S7 在平面图上出现明显的分类, 共分为 3 个小类, 该现象与聚类分析结果一致 图 6( 载荷图 ) 表示每个色谱峰对主成分综合作用的贡献, 每一个点代表一个色谱峰, 距离载荷图原点 (0,0) 越远的变量, 权重越大, 代表该色谱峰对样本整体分布所起作用就越大 ; 图中 42 号 13 号 4 号和 53 号色谱峰在坐标系中的绝对值较大, 表明其对药物的整体质量起主要影响作用 正交偏最小二乘法 - 判别分析 (OPLS-DA) 为更好地分析上述不同类别样本之间的差异, 本研究采用有监督的 OPLS-DA 模型进行建模分析, 得分图见图 7 为进一步筛选出对上述样本分类贡献较大的成分, 采用变量重要性投影值 (variable importance in project,vip)>1.0( 即该变量对整体模型的贡献度高于平均水平 ) 为有意义变量进行搜 图 5 10 批芪参益气滴丸样品的 PCA 散点得分图 Fig. 5 PCA score plot in 10 batches of Qishen Yiqi Dripping pills 图 6 10 批芪参益气滴丸样品的主成分载荷图 Fig. 6 Loading plot in 10 batches of Qishen Yiqi Dripping pills 图 7 10 批芪参益气滴丸的 OPLS-DA 散点得分图 Fig. 7 OPLS-DA score plot in 10 batches of Qishen Yiqi Dripping pills 1758 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No.14 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期

6 图 8 10 批芪参益气滴丸样品各活性成分的 VIP 值图 Fig. 8 VIP values of different ingredients in 10 batches of Qishen Yiqi Dripping pills 3 讨论本实验选择 ACQUITY UPLC HSS T3 型色谱柱用于分离中药中的复杂成分, 主要考虑到中药中的主要活性成分大多数为水溶性化合物, 而该色谱柱的固定相为可与 100% 水溶液流动相兼容的 C 18 固定相, 特别适用于保留和分离中药中极性较大的水溶性有机化合物 结果表明, 与其他色谱柱相比,HSS T3 型色谱柱指纹图谱峰形较好, 出峰较多且分离度高, 因此, 将其作为本实验中中药复杂成分的理想分离柱 优化色谱条件时, 本实验考察了甲醇 - 水 乙腈 - 水和乙腈 -0.1% 甲酸水作为色谱流动相系统时, 各色谱峰的分离效果, 以选择最佳的流动相类型 实验结果显示, 当使用乙腈 -0.1% 甲酸水作为流动相进行梯度洗脱时, 各成分的溶剂效应最小, 峰形最好, 图谱效果最佳 此外, 本研究采用全波长 PDA 检测器通过比较不同波长下的图谱信息, 以选择最佳检测波长, 结果显示, 在 256 nm 时, 指纹图谱色谱峰信息最全面, 表明该条件下能够识别得到的化合物种类最丰富, 因此本实验选择 256 nm 作为检测波长 芪参益气滴丸是我国传统药物中治疗冠心病心绞痛的常用代表药, 临床效果显著, 应用极为广泛, 但对于其较为系统的质量控制研究, 目前鲜有相关报道 因此, 为进一 步提升和完善芪参益气滴丸的质量控制标准, 确保临床用药安有效, 本研究采用 UPLC 建立了芪参益气滴丸的指纹图谱, 共标定了 53 个共有峰, 并通过对照品对其中的 14 个成分进行了化学指认 指纹图谱的相似度结果表明,10 批次的样品质量总体上较为稳定 ; 为更好地辨识药物之间的质量差异, 本研究采用了 CA PCA 及 OPLS-DA 共 3 种模式识别方法, 将 10 批芪参益气滴丸的制剂样品分成了 3 类, 并筛选到了 3 种差异性质量标志共有峰分别为 42 号峰 13 号峰和 4 号峰 ( 原儿茶醛 ), 通过缺味药材的阴性对照实验, 最终确定 42 号峰和 13 号峰分别来自降香油和丹参, 提示厂家在药物生产中可重点关注以上 3 种峰的变化以及对应原味药材的质量, 以更加快速 科学地控制药物批次质量 本研究指纹图谱中各峰的峰面积相对大小与 [1] 相关研究中相应成分的绝对定量结果趋势一致, 表明了指纹图谱的科学性和准确性 ; 然而, 研究 [1] 中关注的药物成分有限, 不能较为全面地反映药物质量, 且其中采用的液质联用法相比指纹图谱法较为复杂 昂贵, 在实际质量评价应用过程中接受程度较低 ; 同时本研究分别从 CA PCA 及 OPLS-DA 3 个方面对药物进行质量评价, 更具科学性和系统性 因此, 指纹图谱结合化学模式识 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No

7 别分析的质控方法更适用于复杂的中药质量评价研究 随着科技的进步, 中药指纹图谱结合化学模式识别技术已经成为中药真伪鉴别 质量评价的重要有效手段 本研究首次采用该技术对芪参益气滴丸不同药物批次的质量进行了深入探索, 该分析思路及数据处理方法可以实现对中药复杂指纹图谱进行较为系统 整体和全面的分析和评价, 可快速筛选出不同质量批次药物及需要重点关注的质量标志成分 实验结果表明, 该方法科学 可靠, 为芪参益气滴丸中活性成分的鉴定和分析提供了准确 丰富的信息, 有力地补充了其质量评价方法中的不足, 同时可为今后中药全面质量评价研究提供一定的参考依据 REFERENCES [1] ZHOU L, JIANG X F, SUN Z, et al. Simultaneous determination of eleven constituents in Qishen Yiqi Dropping pills by UPLC-MS/MS combined with pattern recognition [J]. Chin Tradit Pat Med( 中成药 ), 2017, 39(10): [2] WEI C C, ZHU M D, DU W X, et al. Clinical application of Qishen Yiqi Diwan [J]. West J Tradit Chin Med( 西部中医药 ), 2011, 24(10): [3] PENG J J, LI X W, LI D X, et al. Quality identification of Qishen Yiqi Dropping pills by double wavelength ultra performance liquid chromatography fingerprints [J]. Cent South Pharm( 中南药学 ), 2016, 14(11): [4] LI M, LI R M, ZHANG Y Q, et al. GC fingerprint of volatile components in Qishen Yiqi Dropping pills [J]. Chin Tradit Herb Drugs( 中草药 ), 2016, 47(10): [5] WANG J, WEI N, ZHAO H Z, et al. Comparison of HPLC and UPLC determination of five active components of Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae in Qishenyiqi Dropping pills [J]. Chin J Pharm Anal( 药物分析杂志 ), 2011, 31(9): [6] FU J Z, SONG S Y, JIANG M, et al. Simultaneous determination of the contents of astragaloside IV, danshensu, protocatechualdehyde, ginsenosides Rg1 and Rb1 in Qishenyiqi Dropping pills by LC-MS [J]. Chin Pharm J( 中国药学杂志 ), 2012, 47(1): [7] ZHANG Y P, QIAN X, ZHANG L, et al. Simultaneous determination of five active components in Hechan Tablet by UPLC-MS/MS [J]. Pharm Today( 今日药学 ), 2017, 27(8): [8] SUN Z, ZHOU L, ZUO L H, et al. Digital fingerprint of Xuebijing injections by UPLC and content determination of four phenolic acids [J]. Chin J Hosp Pharm( 中国医院药学杂志 ), 2017, 37(11): [9] YAO L W, LIU Y, ZHENG X W, et al. Application of the fingerprint and characteristic fingerprint technology in traditional Chinese medicinal materials and Chinese patent medicine [J]. Chin J New Drugs( 中国新药杂志 ), 2018, 27(8): [10] DENG W, WANG H L, PENG L H, et al. Study on HPLC fingerprint chromatogram of ultrafine granular powder of Epimedii Folium [J]. Pharm Today( 今日药学 ), 2016, 26(5): [11] ZHOU L, JIANG X F, ZUO L H, et al. Quantitative and quality evaluation research of multiple principal active components in Guanxin Danshen capsules by MS-principal component analysis [J]. Chin J Pharm Anal( 药物分析杂志 ), 2017, 37(10): [12] DAI Y, YE Y Q, FENG W B, et al. Application of pattern recognition in quality control of the traditional Chinese medicine [J]. J Yunnan Nat Univ(Nat Sci Ed)( 云南民族大学学报 : 自然科学版 ), 2007(4): [13] WU Y. Research and application of pattern recognition method for holographic fingerprint of traditional Chinese medicine in quality control of traditional Chinese medicine [D]. Wuhan: Central South University for Nationalities( 中南民族大学 ), 收稿日期 : ( 本文责编 : 曹粤锋 ) 1760 Chin J Mod Appl Pharm, 2019 July, Vol.36 No.14 中国现代应用药学 2019 年 7 月第 36 卷第 14 期