2016 Vol.18 No.1 2 方 法 与 结 果 2.1 色 谱 条 件 与 系 统 适 应 性 试 验 Kromasil C 18 (4.6 mm 250 mm 5 μm) A -0.1% B 0-35 min 10%-40%A 1.0 ml min nm 306 nm B
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- 毛 胥
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1 HPLC 测 定 FK Ⅳ 号 颗 粒 中 芍 药 苷 绿 原 酸 * 虎 杖 苷 及 丹 酚 酸 B 的 含 量 1,3 2,3 2,3 1,3 2,3 2,3 2,3 1, 2, 3 (1. 南 京 中 医 药 大 学 药 学 院 南 京 ;2. 江 苏 康 缘 药 业 股 份 有 限 公 司 连 云 港 ; 3. 中 药 制 药 过 程 新 技 术 国 家 重 点 实 验 室 连 云 港 ) 摘 要 FK B HPLC HPLC Kromasil C18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm) -0.1% 230 nm B µl µg ml -1 r= % µg ml -1 r= % µg ml -1 r= % B µg ml % r= FK B 关 键 词 FK HPLC B doi /wst R284 A FK 1 仪 器 与 试 剂 Agilent 1200 Agilent BP211D Metter Tole 10 Centrifuge 5415D eppendorf DAD Agilent Mettler AE % % B [1-10] B : FK HPLC 4 FK ZX FK World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica 125
2 2016 Vol.18 No.1 2 方 法 与 结 果 2.1 色 谱 条 件 与 系 统 适 应 性 试 验 Kromasil C 18 (4.6 mm 250 mm 5 μm) A -0.1% B 0-35 min 10%-40%A 1.0 ml min nm 306 nm B 10 µl khz 30 min 70% 0.45 µm 2.4 阴 性 供 试 品 制 备 3 B FK 对 照 品 溶 液 的 制 备 B ml 70% 2.5 方 法 学 考 察 µg ml µg ml 专 属 性 考 察 µg ml -1 B µg ml 供 试 品 溶 液 的 制 备 0.5 g 100 ml 线 性 关 系 考 察 50 ml 70% W B 图 1 混 合 对 照 品 溶 液 (A) 和 FK Ⅳ 号 颗 粒 (B) 的 HPLC 图 (230 nm) B 图 2 混 合 对 照 品 溶 液 (C) 和 FK Ⅳ 号 颗 粒 (D) 的 HPLC 图 (306 nm) B 126 World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
3 图 3 供 试 品 溶 液 (E) 和 赤 芍 阴 性 (F) 的 HPLC 图 (230 nm) B 图 4 供 试 品 溶 液 (G) 和 各 阴 性 制 剂 (H,I,J,K,L,M) 的 HPLC 图 (306 nm) B H I. J. K. L. M. 3 70% 表 1 各 成 分 回 归 方 程 与 线 性 范 围 µg ml µg ml µg ml -1 B r /µg ml -1 Y= X µg ml -1 70% Y=16 710X Y=26 186X X Y B Y= X World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica 127
4 2016 Vol.18 No 精 密 度 试 验 mg ml mg ml B mg ml -1 B mg ml ml 1.0 ml 1.2 ml B RSD % 0.35% 1.17% 1.05% 样 品 的 测 定 3 FK 稳 定 性 试 验 3 FK g 3 讨 论 h Diode Array RSD 0.32% Detector DAD 0.70% 0.20% B 0.89% B 24 h 230 nm 306 nm 重 复 性 试 验 B 4 FK g B 5.37 mg g mg g mg g mg g -1 RSD 0.79% 0.59% 0.64% 1.05% 50 ml 70% 30 min 加 样 回 收 试 验 -0.1% FK g -0.4% - 50 ml % 4 表 2 各 成 分 平 均 回 收 率 与 RSD /% RSD/% B 表 3 样 品 含 量 测 定 结 果 (n=2) /mg g -1 B 参 考 文 献 -0.1% [11-15] ml min ml min -1 [16] 4 FK 1 国 家 药 典 委 员 会, 中 国 人 民 共 和 国 药 典 ( 一 部 ). 北 京 : 中 国 医 药 科 , 社 技 出 版 2 陈 智 仙, 高 文 远, 刘 岱 琳, 等. 大 血 藤 的 化 学 成 分 研 究 ( Ⅱ ). 中 草 药, ( 41(6 2010, 3 苗 抗 立, 张 建 中, 王 飞 音, 等. 红 藤 化 学 成 分 的 研 究. 中 草 药, , ( 26(4 1995, 128 World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica
5 4 毛 水 春, 顾 谦 群, 崔 承 彬, 等. 中 药 大 血 藤 中 酚 类 化 学 成 分 及 其 抗 ( 14(6, 2004, 志 肿 瘤 活 性. 中 国 药 物 化 学 杂 5 吴 晓 春, 杜 胜 利, 陈 海 生. 蒲 公 英 的 研 究 与 应 用. 药 学 实 践 杂 志, ( 20(4 2002, 6 吴 卫 华, 康 桢, 欧 阳 冬 生, 等. 绿 原 酸 的 药 理 学 研 究 进 展. 天 然 产 , 2006, 发 物 研 究 与 开 7 汪 天 明, 王 晓 梅. 虎 杖 苷 药 理 作 用 研 究 的 新 进 展. 宿 州 学 院 学 报, ( 22(2 2007, 8 阮 金 兰, 赵 钟 祥, 曾 庆 忠, 等. 赤 芍 化 学 成 分 和 药 理 作 用 的 研 究 进 ( 19(9, 2003, 报 展. 中 国 药 理 学 通 9 王 文 萍, 王 垂 杰, 谷 松, 等. 芍 药 甘 草 汤 配 伍 意 义 的 药 动 学 研 究. 世 ( 11(3, 2009, 化 界 科 学 技 术 - 中 医 药 现 代 10 徐 丽 君, 黄 光 英. 丹 参 的 化 学 成 分 及 其 药 理 作 用 研 究 概 述. 中 西 医 ( 1(1, 2009, 究 结 合 研 11 钱 俊, 林 夏, 王 星 星, 等. 双 波 长 HPLC 法 同 时 测 定 FK Ⅳ 颗 粒 剂 219- ( 22(3, 2014, 究 中 芍 药 苷 和 虎 杖 苷 的 含 量. 药 学 与 临 床 研 覃 珊, 温 学 森. HPLC 同 时 测 定 菊 花 中 6 种 活 性 成 分 含 量. 中 国 中 ( 36(11, 2011, 志 药 杂 13 王 瑞, 展 晓 日, 刘 厚 世. 小 建 中 汤 及 其 拆 方 对 芍 药 苷 提 取 率 的 影 响 ( 15(6, 2013, 化 研 究. 世 界 科 学 技 术 - 中 医 药 现 代 14 廖 国 平, 贺 帅, 张 忠 义. 均 匀 设 计 法 优 化 超 高 压 提 取 虎 杖 中 虎 杖 苷 ( 35(24, 2010, 志 和 白 藜 芦 醇. 中 国 中 药 杂 15 何 昱, 成 金 乐, 徐 吉 银, 等. HPLC-DAD 同 时 测 定 丹 参 中 原 儿 茶 醛 丹 酚 酸 B 隐 丹 参 酮 丹 参 酮 IIA 四 种 成 分 的 含 量. 世 界 科 学 技 术 ( 13(4, 2011, 化 中 医 药 现 代 16 胡 彬. 果 德 安 : 中 药 有 效 成 分 的 探 秘 者. 中 国 中 医 药 报, (003). Content Determination of Paeoniflorin, Chlorogenic Acid, Polydatin and Salvianolic Acid B in FK Granules by HPLC Sun Xianling 1,3, Qin Jianping 2,3, Wang Xianping 2,3, Shi Wei 1,3, Qian Jun 2,3, Wu Yun 2,3, Wang Zhenzhong 2,3, Xiao Wei 1,2,3 (1. College of Pharmacy, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing , China; 2. Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd., Lianyungang , China; 3. State Key Laboratory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process, Lianyungang , China) Abstract: This study was aimed to establish the simultaneous content determination of paeoniflorin, chlorogenic acid, polydatin and salvianolic acid B in FK granules by HPLC. The Kromasil C18 column (4.6 mm 250 mm, 5 µm) was used as chromatographic column. The acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution was used as mobile phase with gradient elution. The detection wavelength of paeoniflorin was 230 nm. And the detection wavelength of chlorogenic acid, polydatin and salvianolic acid B was 306 nm. The column temperature was 30. The sample injection volume was 10 μl. The results showed that paeoniflorin had a good linear relationship in the range of µg ml -1 (r = 1.000) with the average recovery rate of %. Chlorogenic acid showed a good linear relationship in the range of µg ml -1 (r = 1.000) with the average recovery rate of %. Polydatin showed a good linear relationship in the range of µg ml -1 (r = 1.000) with the average recovery rate of %. Salvianolic acid B showed a good linear relationship in the range of µg ml -1 (r = ) with the average recovery rate of 99.91%. It was concluded that the method was simple and reliable with good reproducibility. It can be used as a method for the content determination of paeoniflorin, chlorogenic acid, polydatin and salvianolic acid B in FK granules. Keywords: FK granules, HPLC, paeoniflorin, chlorogenic acid, polydatin, salvianolic acid B World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica 129
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