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逐劣桑
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1 南京农业大学学报 2015ꎬ38(3): http: / / nauxb.njau.edu.cn Journal of Nanjing Agricultural University doi: / j.issn 鞠雪 ꎬ 王秋举 ꎬ 罗莎 ꎬ 等. 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响 [J]. 南京农业大学学报 ꎬ2015ꎬ38(3): 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响鞠雪 ꎬ 王秋举 ꎬ 罗莎 ꎬ 董晓庆 ꎬ 陈玉珂 ꎬ 杨翼羽 ꎬ 张东鸣 ( 吉林农业大学动物科学技术学院 ꎬ 吉林长春 ) 摘要 :[ 目的 ] 旨在研究氧化鱼油对草鱼 (Ctenopharyngodon idellus) 幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响 ꎮ [ 方法 ] 将 204 尾草鱼幼鱼随机分成 4 个组 ꎬ 每个 3 个重复 ꎬ 每个重复 17 尾鱼 ꎮ 分别以新鲜鱼油 [ 过氧化值 (POV):9.07 mmol kg -1 ] 与氧化鱼油 (POV: 和 mmol kg -1 ) 为脂肪源制成 4 种等氮 ( 粗蛋白含量 31%) 等能 (16 MJ kg -1 ) 的配合饲料 ꎬ 投喂平均体质量 (30.0±2.6)g 的草鱼幼鱼 8 周 ꎮ [ 结果 ] 与新鲜鱼油组相比 ꎬPOV 为 mmol kg -1 的氧化鱼油组试验鱼血清肝胰脏肾脏肠道组织丙二醛 (MDA) 含量显著升高 (P<0.05)ꎻ 血清肝胰脏肾脏肌肉肠道组织中总抗氧化能力 (T AOC) 显著下降 (P<0.05)ꎻ 血清肝胰脏肾脏肌肉超氧化物歧化酶 (SOD) 活性显著下降 (P<0.05)ꎻ 血清肝胰脏肌肉组织中过氧化氢酶 (CAT) 活性显著下降 (P<0.05)ꎻ 各组织中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX) 活性无显著变化 (P>0.05)ꎻ 草鱼幼鱼不同组织中各抗氧化酶活性从大到小分布 :SOD 活性 : 血清肝胰脏肾脏肌肉 ꎬCAT 活性 : 肝胰脏肾脏血清肠道肌肉 ꎬ GSH PX 活性 : 肝胰脏血清肾脏肠道 ꎻMDA 含量从高到低依次为 : 血清肠道肌肉肝胰脏肾脏 ꎻT AOC 含量从高到低依次为 : 肝胰脏血清肠道肾脏肌肉 ꎮ [ 结论 ] 氧化鱼油能引起草鱼幼鱼脂质过氧化 ꎬ 降低组织中主要抗氧化酶活性 ꎬ 诱导氧化应激 ꎻ 鱼类不同组织抗氧化酶活性和丙二醛含量存在一定差异性 ꎬ 肝胰脏中抗氧化酶活性较高且对氧化鱼油诱导的氧化应激比较敏感 ꎮ 关键词 : 氧化应激 ꎻ 氧化鱼油 ꎻ 草鱼幼鱼 ꎻ 抗氧化酶中图分类号 :S963 文献标志码 :A 文章编号 : (2015) Effects of oxidized fish oil on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in juvenile grass carp( Ctenopharyngodon idellus) JU XueꎬWANG QiujuꎬLUO ShaꎬDONG XiaoqingꎬCHEN YukeꎬYANG YiyuꎬZHANG Dongming ( College of Animal Science and TechnologyꎬJilin Agricultural UniversityꎬChangchun ꎬChina) Abstract:[ Objectives] The study was conducted to investigate the effects of oxidized fish oil on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities of juvenile grass carp( Ctenopharyngodon idellus). [ Methods] An 8 week feeding trial on juveniles( average weight of 30.0 g) was conducted in quadruplicate groupsꎬ3 replicates in per groupꎬand 17 juvenile grass carp in each replicate. Four isoni trogenous and isocaloric diets were formulated utilizing fresh fish oil[peroxide value( POV):9.07 mmol kg -1 ] and oxidized fish oil (POV:49.72ꎬ144.64ꎬ mmol kg -1 )as the lipid source respectivelyꎬand the diet prepared with fresh fish oil served as control. [ Results] Oxidized fish oil increased the content of MDA in the body tissuesꎬand decreased the activities of antioxidant enzymes. Compared to the controlꎬfish in P3 group(pov: mmol kg -1 )ꎬthe levels of MDA in serumꎬliverꎬkidneyꎬintestine increased significantly( P<0. 05) ꎬthe levels of T AOC in serumꎬliverꎬkidneyꎬmuscleꎬintestine decreased significantly ( P < 0.05) ꎬ and the activity of SOD in serumꎬliverꎬkidneyꎬmuscleꎬcat in serumꎬliverꎬmuscle decreased significantly( P<0.05). Howeverꎬthe activity of GSH PX showed no differences( P>0.05). The activity of main antioxidant enzymes was distributed as followsꎬsod:serumꎬliverꎬ kidneyꎬmuscleꎻ CAT: liverꎬ kidneyꎬ serumꎬ intestineꎬ muscleꎻ GSH PX: liverꎬ serumꎬ kidneyꎬ intestine. The content of MDA and T AOC distributed as followsꎬmda:serumꎬintestineꎬmuscleꎬliverꎬkidneyꎻt AOC:liverꎬserumꎬintestineꎬkidneyꎬmuscle. [ Conclu sions] Oxidized fish oil could increase the level of MDAꎬdecrease the ability of antioxidantꎬand induce oxidative stress of juvenile grass carp. There was a tissue specific of antioxidant enzyme activity and MDA content in different tissues of juvenile grass carp. The antioxidant enzymes in liver has higher activity and more sensitive to oxidative stress induced by oxidized fish oil than other tissues. Keywords:oxidative stressꎻoxidized fish oilꎻjuvenile grass carpꎻantioxidant enzyme 鱼油是一种重要的能源物质 ꎬ 还能为动物机体提供高度不饱和脂肪酸 (HUFA) [1-2] ꎬ 其富含的高度不饱和脂肪酸更是鱼虾 EPA DHA 的重要来源之一 ꎮ 另外 ꎬ 鱼油还能促进鱼类生长 ꎬ 利于鱼体脂质代谢 [3-4] ꎬ 提高饲料加工效率 ꎬ 在饲料生产中得到了广泛应用 [5] ꎮ 然而鱼油中的不饱和脂肪酸在存储加工的过程中极易被氧化 ꎬ 而氧化脂质能被肠道吸收而易造成机体氧化应激反应 [6] ꎬ 这一现象已引起动物营收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金项目 ( ꎬ ꎬ ) 作者简介 : 鞠雪 ꎬ 硕士研究生 ꎮ 通信作者 : 张东鸣 ꎬ 教授 ꎬ 主要从事水生生物营养与饲料科学研究 ꎬE mail:dongmingzhang0431@ aliyun.comꎮ

2 492 南京农业大学学报第 38 卷养学家的广泛关注 ꎮ 近年来 ꎬ 有关氧化鱼油对动物生产性能的研究多集中在鸡 [7] 猪 [8] [9-10] 鼠等动物上 ꎮ 氧化鱼油对鱼类生长及抗氧化能力的影响在鲶鱼 [11] 鲤鱼 [12] [13] 花鲈上也有报道 ꎮ 草鱼作为我国北方重要的淡水经济鱼类 ꎬ 相关研究却鲜有报道 ꎮ 为此 ꎬ 本试验以草鱼幼鱼为研究对象 ꎬ 用不同程度氧化鱼油进行饲养试验 ꎬ 测定草鱼幼鱼血清肝胰脏肠肌肉肾脏等组织中丙二醛 (MDA) 含量及抗氧化酶活性 ꎬ 以研究氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化能力的影响 ꎬ 为草鱼的健康养殖及水产饲料行业的发展提供基础资料 ꎬ 并为构建鱼类氧化应激模型提供参考依据 ꎮ 1 材料与方法 1.1 试验用鱼草鱼幼鱼购自长春市双阳水库渔场 ꎮ 暂养 1 周 ꎬ 选取体质健壮体质量相近的草鱼幼鱼 204 尾作为试验用鱼 ꎬ 平均体质量 (30.0±2.6) gꎬ 随机分为 4 个 ꎬ 每个 3 个重复 ꎬ 每个重复 17 尾鱼 ꎮ 1.2 氧化鱼油制作及试验饲料分组新鲜鱼油购自荣成海达鱼粉有限公司 ꎬ- 20 冰箱保存 ꎮ 鱼油氧化步骤如下 : 在新鲜鱼油中添加 150 mg kg -1 Cu 2+ ( 以 CuSO 4 5H 2 O 的形式 ) 300 mg kg -1 Fe 2+ ( 以 FeSO 4 7H 2 O 的形式 ) mg kg -1 H 2 (30% H 2 水溶液 ) 和 0.3%( 体积分数 ) 蒸馏水 ꎬ 充分混匀后于 37 水浴中搅拌进行氧化反应 ꎬ 在不同时间取样得到过氧化物值 (POV) 分别为和 mmol kg -1 的氧化鱼油 ꎬ 按 3% 的比例分别添加到半纯化基础饲料中 ( 饲料配方见表 1)ꎬ 形成 P1 P2 P3 试验组 ꎬ 以添加新鲜鱼油 ( POV:9. 07 mmol kg -1 ) 饲料为对照组 Fꎮ 对照组添加 Fe 2+ Cu 2+ 与组 Fe 2+ Cu 2+ 达到平衡 ꎮ 各氧化程度鱼油氧化指标的测定值见表 2ꎮ 表 1 试验饲料组成成分及营养水平 ( 风干基础 ) Table 1 Composition and nutrient levels of the diets( air dry basis) % 饲料组成 Diet composition 水平 Level 营养成分 Nutrients composition 水平 Level 鱼粉 Fish meal 水分 Moisture 3.65 去皮豆粕 Dehulled soybean 粗脂肪 Crude lipid 5.22 玉米蛋白粉 Corn protein powder 粗蛋白 Crude protein 鱼油 Fish oil 3.50 粗灰分 Crude ash 6.91 面粉 Flour 糊精 Dextrin 微晶纤维素 Microcrystalline 4.00 复合预混料 Compound premix 1.00 磷酸二氢钙 Monocalcium phosphate 2.00 氯化胆碱 Choline chloride 0.50 注 :1) 复合预混料向每 kg 饲料提供 : 维生素 A IUꎬ 维生素 D IUꎬ 维生素 E 100 mgꎬ 维生素 K 20 mgꎬ 维生素 B 1 10 mgꎬ 维生素 B 2 20 mgꎬ 烟酸 200 mgꎬ 泛酸钙 100 mgꎬ 维生素 B 6 20 mgꎬ 生物素 2 mgꎬ 叶酸 10 mgꎬ 维生素 B mgꎬ 肌醇 400 mgꎬ 维生素 C 500 mgꎬ Zn 50 mgꎬfe 220 mgꎬcu 4 mgꎬmn 20 mgꎬ 碘 1 mgꎬco 0.3 mgꎬse 0.1 mgꎬmg 300 mgꎻ2) 饲料中总能为 MJ kg -1 ꎮ Notes:1) Compound premix supplied the following per kilogram of diet:vitamin A IUꎬvitamin D IUꎬvitamin E 100 mgꎬvitamin K 20 mgꎬvitamin B 1 10 mgꎬvitamin B 2 20 mgꎬnicotinic acid 200 mgꎬcalcium pantothenate 100 mgꎬvitamin B 6 20 mgꎬbiotin 2 mgꎬfolic acid 10 mgꎬvitamin B l mgꎬinositol 400 mgꎬvitamin C 500 mgꎬzn 50 mgꎬfe 220 mgꎬcu 4 mgꎬmn 20 mgꎬi 1 mgꎬco 0.3 mgꎬse 0.1 mgꎬ Mg 300 mgꎻ2)the total energy of the diet is MJ kg -1. Table 2 表 2 不同组的氧化鱼油过氧化值碘价酸价氧化指标 Peroxide valueꎬiodine value and acid value of normal and oxidized fish oil 分组 group 过氧化值 / (mmol kg -1 ) Peroxide value 碘价 / (g 100 g -1 ) Iodine value 酸价 / (mg g -1 ) Acid value F 9.07± ± ±0.07 P ± ± ±0.49 P ± ± ±0.16 P ± ± ±0.20 以鱼粉为动物蛋白源 ꎬ 去皮豆粕和玉米蛋白粉为植物蛋白源 ꎬ 鱼油为脂肪源 ꎬ 面粉和糊精为能源 ꎬ 微晶纤维素为填充物 ꎬ 按表 1 配制试验饲料 ꎮ 饲料制好后于 -20 条件下贮存 ꎬ 投喂期间每周取料 1 次 ꎮ 1.3 饲养管理采用循环水养殖系统 ꎬ 试验用容器为 380( 型号 ) 白色养殖用桶 ꎬ 有效容积 100 Lꎮ 每桶加水 90 Lꎬ 流水饲养 ꎬ 水流速度为 0.20 ~ 0.25 L min -1 ꎬ 水源为曝气 24 h 的自来水 ꎮ 每天投喂饲料 2 次 (8:30 和 16:30)ꎬ 饱食投喂 ꎮ 养殖期间每周清洗养殖设施 1 次 ꎮ 整个试验期水温控制在 (26.5±1.0) ꎬpH 值 7.0 ~ 7.5ꎬ 溶氧

3 第 3 期鞠雪 ꎬ 等 : 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响 ~ 8 mg L -1 ꎬ 氨态氮含量小于 0.05 mg L -1 ꎮ 饲养试验期为 8 周 ꎮ 1.4 样品采集经 58 d 试验 ꎬ 对照组和试验组草鱼幼鱼均未出现死亡现象 ꎮ 试验结束后停食 24 hꎬ 从每个桶中随机取 5 尾鱼 ꎬ 用 200 mg L -1 的 MS-222 麻醉后称鱼体质量 ꎬ 尾静脉采血 ꎬ r min -1 离心 10 min 制备血清 ꎮ 取血后解剖分离出肝胰脏肾脏肠 ( 前中肠 ) 肌肉 ꎬ 并用冷的生理盐水冲洗 ꎬ 除去组织上的血液及肠道内容物 ꎮ 以上操作均在冰上进行 ꎬ 所有样品 -80 冰箱保存备用 ꎮ 1.5 指标测定方法饲料成分的测定水分测定采用恒温干燥法 (105 )ꎻ 粗蛋白测定采用凯氏定氮法 ꎻ 粗脂肪测定采用索氏抽提法 ꎻ 粗灰分测定采用马福炉灼烧法 (550 )ꎻ 能量采用氧弹热量计直接测得 ꎮ 抗氧化性能的测定组织样品在 4 条件下解冻 ꎬ 剪碎 ꎬ 加入预冷的 8.6 g L -1 生理盐水 ꎬ 冰浴匀浆 ꎮ 匀浆液经 r min -1 离心 15 minꎬ 取上清液 4 保存备用 ꎮ 血清及组织匀浆液中丙二醛 (MDA) 含量总抗氧化能力 (T AOC) 超氧化物歧化酶 (SOD) 活性过氧化氢酶 (CAT) 活性谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX) 活性及组织匀浆液总蛋白含量均采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定 ꎮ 每毫克组织蛋白每分钟使反应体系的吸光值每增加时为一个 T AOC 单位 ꎻ 每毫克组织蛋白每分钟扣除非酶反应的作用 ꎬ 使体系中谷胱甘肽浓度降低 1 μmol L -1 为一个 GSH PX 酶活性单位 ꎻ 组织匀浆中总蛋白含量用考马斯亮蓝法测定 ꎮ 1.6 数据分析重比较 ꎮ 试验数据用平均数 ± 标准误 ( x±se) 表示 (n = 3)ꎬSPSS 17.0 软件进行单因素方差分析和 Duncan s 多 2 结果与分析 2.1 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 MDA 含量的影响由表 3 可知 : 与对照 (F) 组相比 ꎬ 氧化鱼油各组草鱼幼鱼组织中 MDA 含量有不同程度的升高 ꎮ 血清和肠道中 MDA 在 P3 组较 F 组显著升高 (P<0.05)ꎮ 肾脏中的 MDA 含量在 P1 P2 P3 组均较对照组显著升高 (P<0.05)ꎬ 且 P3 组显著高于 P1 P2 组 (P<0.05)ꎮ 肝胰脏中的 MDA 含量在 P2 P3 组较对照组显著升高 (P<0.05)ꎮ 肌肉中 P1 P2 和 P3 组的 MDA 含量较对照组分别升高了 6.64% 6.76% 6.26%ꎬ 但差异不显著 (P>0.05)ꎬ 各组织中 MDA 含量均在 P3 组最高 ꎮ Table 3 表 3 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 MDA 含量的影响 Effects of oxidized fish oil on the content of MDA in different tissues of juvenile grass carp MDA 含量 / (nmol ml -1 ꎬnmol mg -1 ) MDA content 血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle 肠道 Intestine F 39.28±1.19 a 5.89±0.32 a 4.12±0.18 a 15.97± ±5.45 a P ±1.53 a 7.43±0.80 ab 6.98±0.18 b 17.03± ±1.32 ab P ±1.25 a 8.20±0.13 b 6.39±0.54 b 17.05± ±0.74 a P ±2.70 b 8.37±0.51 b 10.05±0.20 c 16.97± ±1.78 b 注 : 同一列数据中标有不同字母者表示差异显著 (P<0.05)ꎮ Note:In the same columnꎬvalues with the different letters mean significant difference at 0.05 level. The same as follows. 2.2 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 T AOC 含量的影响由表 4 可知 : 与 F 组相比 ꎬ 不同程度氧化鱼油均可导致草鱼幼鱼血清肝胰脏肾脏肌肉及肠道中的 T AOC 含量降低 ꎬ 且随鱼油氧化程度的提高 ꎬT AOC 呈现下降趋势 ꎮ 其中 ꎬ 肝胰脏和肠道中 P1 P2 P3 组 T AOC 含量均显著低于 F 组 (P<0.05)ꎬ 组间差异不显著 (P>0.05)ꎮ 血清肾脏和肌肉组织中 ꎬP3 组 T AOC 含量最低 ꎬ 与 F 组差异显著 (P<0.05)ꎮ Table 4 表 4 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 T AOC 含量的影响 Effects of oxidized fish oil on the content of T AOC in different tissues of juvenile grass carp T AOC 含量 / (U ml -1 ꎬU mg -1 ) T AOC content 血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle 肠道 Intestine F 8.51±0.21 ab 14.43±0.75 a 0.46±0.02 a 0.21±0.06 a 0.84±0.07 a P1 8.06±0.33 b 10.47±0.35 b 0.43±0.04 a 0.28±0.01 a 0.59±0.03 b P2 7.98±1.19 a 10.28±0.29 b 0.48±0.01 a 0.08±0.00 b 0.47±0.00 b P3 6.66±0.14 c 8.32±1.40 b 0.26±0.01 b 0.05±0.01 b 0.51±0.05 b

4 494 南京农业大学学报第 38 卷 2.3 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 SOD 活性的影响由表 5 可知 : 与对照 (F) 组相比 ꎬ3 种不同程度氧化鱼油组草鱼幼鱼各组织中 SOD 活性均有不同程度降低 ꎮ P1 P2 P3 组肝胰脏和肌肉中 SOD 活性均显著低于 F 组 (P<0.05)ꎬ 组间差异不显著 ꎮ 血清及肾脏的 SOD 活性在 P3 组显著低于对照组 (P<0.05)ꎮ Table 5 表 5 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 SOD 活性的影响 Effects of oxidized fish oil on the activity of SOD in different tissues of juvenile grass carp SOD 活性 / (U ml -1 ꎬU mg -1 ) SOD activity 血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle F 52.76±0.40 a 54.34±1.27 a 7.67±0.64 a 7.11±0.47 a P ±0.92 ab 38.65±2.02 b 8.52±0.65 a 5.56±0.19 b P ±0.54 a 41.19±1.42 b 8.02±0.59 a 5.31±0.50 b P ±1.92 b 41.96±3.48 b 4.16±0.70 b 5.71±0.39 b 2.4 氧化鱼油对草鱼不同组织中 CAT 活性的影响由表 6 可知 : 与对照 ( F) 组相比 ꎬ 氧化鱼油各组血清肝胰脏肌肉中 CAT 活性显著下降 ( P < 0.05)ꎮ 肾脏肠道组织中除 CAT 活性较对照组降低 ꎬ 但无显著差异 (P>0.05)ꎮ Table 6 表 6 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 CAT 活性的影响 Effects of oxidized fish oil on the activity of CAT in different tissues of juvenile grass carp CAT 活性 / (U ml -1 ꎬU mg -1 ) CAT activity 血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle 肠道 Intestine F 13.66±1.02 a 25.51±2.91 a 11.54± ±0.13 a 2.00±0.35 P1 9.88±0.10 b 16.76±1.07 b 10.98± ±0.03 b 1.37±0.24 P2 6.81±0.62 c 17.55±1.12 b 11.50± ±0.02 b 1.70±0.07 P3 7.06±0.23 c 18.01±0.38 b 11.75± ±0.02 b 1.37± 氧化鱼油对草鱼不同组织中 GSH PX 活性的影响由表 7 可知 : 与对照 ( F) 组相比 ꎬ3 种不同程度氧化鱼油组血清肝胰脏肾脏肠道组织中 GSH PX 活性有升高的现象 ꎬ 但均无显著差异 (P>0.05)ꎮ Table 7 表 7 氧化鱼油对草鱼幼鱼不同组织中 GSH PX 活性的影响 Effects of oxidized fish oil on the activity of GSH PX in different tissues of juvenile grass carp GSH PX 活性 / (U ml -1 ꎬU mg -1 ) GSH PX activity 血清 Serum 肝胰脏 Liver 肾脏 Kidney 肌肉 Muscle F ± ± ± ±5.15 P ± ± ± ±7.95 P ± ± ± ±19.02 P ± ± ± ± 讨论 3.1 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化的影响丙二醛 (MDA) 是脂质过氧化的终末代谢产物之一 ꎬ 其含量常用来反映机体脂质过氧化程度和细胞受损的程度 [14] [7] ꎮ 周建川等用含质量分数为 1.0% 氧化鱼油 (POV:1 200 mmol kg -1 ) 的饲料饲喂蛋鸡 ꎬ 显著 [15] 提高了蛋鸡血清丙二醛含量 ꎮ 袁施彬等在对断奶仔猪的研究表明 ꎬ 饲粮中添加质量分数为 5% 氧化鱼油 (POV: mmol kg -1 [16] ) 可诱导断奶仔猪氧化应激 ꎬ 提高肝胰脏中 MDA 含量 ꎮ 彭士明等在饲料中添加氧化酸败鱼油 (POV:45 mmol kg -1 ) 饲养黑鲷幼鱼 9 周 ꎬ 结果显示氧化鱼油组肝脏中 MDA 含量显著高于对照组 ꎮ 本研究中 ꎬ 氧化鱼油各组草鱼幼鱼组织中 MDA 含量有不同程度的提高 ꎬ 当鱼油 POV 为 mmol kg -1 时 ꎬ 血清肝胰脏肾脏肠道中 MDA 含量都较对照组显著提高 ꎬ 说明氧化程度高的鱼油 [15] 更容易造成组织脂质过氧化产物的积累 ꎬ 引起机体氧化应激 ꎮ 袁施彬等指出 MDA 含量的提高是因为活性氧的存在 ꎬ 引起机体脂质发生一系列连锁反应 ꎬ 导致生物膜损伤 ꎬ 脂质过氧化 ꎮ 3.2 氧化鱼油对草鱼幼鱼抗氧化酶活性的影响机体的抗氧化防御系统包括非酶系统和酶系统 ꎬ 抗氧化剂含量及抗氧化酶活性大小可以反映机体氧化 - 抗氧化状态 ꎬ 从侧面体现动物的健康状态 ꎮ 机体的抗氧化酶系统主要包括超氧化物歧化酶 (SOD) 过氧化氢酶 (CAT) 谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH PX) 等 ꎬ 它们是体内自生的抗氧化酶 ꎬ 构成机体抗氧化的第一道防线 [17] ꎮ

5 第 3 期鞠雪 ꎬ 等 : 氧化鱼油对草鱼幼鱼脂质过氧化及抗氧化酶活性的影响 495 T AOC 常用来衡量机体抗氧化酶系统和非酶系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢状态 ꎬ 是反映机体抗氧化机能的综合性指标 ꎮ 本试验中 ꎬ 随着鱼油氧化程度的提高 ꎬ 组织中 T AOC 含量表现出下降的趋势 ꎬ 特别是在 P3 组 (POV: mmol kg -1 )ꎬ 草鱼幼鱼血清肝胰脏肾脏肠道及肌肉组织中的 T AOC 含量都显著低于对照组 ꎮ 说明氧化程度高的鱼油会使草鱼幼鱼组织受到强烈刺激 ꎬ 打破机体自 [8] 身氧化 - 抗氧化系统的平衡状态 ꎬ 从而使鱼体抗氧化能力整体下降 ꎮ 黄琳等在饲粮中添加 5% 氧化鱼油显著降低了新生仔猪肠道 T AOC 含量 ꎬ 引发了新生仔猪肠道的炎症反应 ꎬ 与本试验结果一致 ꎮ SOD 是动物体内最先与 O - 2 作用清除活性氧的金属酶 [18] ꎮ CAT 是以过氧化氢为底物的末端氧化酶 ꎬ 能将 H 2 分解成水 ꎬ 从而保护细胞免受损伤 ꎮ GSH PX 是作为底物 GSH 的催化剂起解毒作用 ꎬ 且有 [19] 协助 CAT 清除 H 2 的作用 ꎮ 任泽林等的研究表明 ꎬ 氧化鱼油可以降低鲤鱼肝胰脏中 SOD 活性 ꎮ [20] Vázquez Añ n 等在研究中指出 ꎬ 试验动物摄食氧化鱼油后机体 ROS 大量产生 ꎬ 体内 SOD 活性降低 ꎮ 本研究中 ꎬ 用 3 种不同程度氧化鱼油饲料饲喂草鱼幼鱼后 ꎬ 组织中 SOD CAT 活性均较对照组下降 ꎮ P3 组 (POV: mmol kg -1 ) 血清肝胰脏肌肉中的 SOD CAT 活性与对照组相比都受到了显著抑制 ꎮ 说明较高程度的氧化鱼油使草鱼幼鱼组织中自由基的产生和清除之间的平衡被打破 ꎬ 细胞膜受损 ꎬ 抗氧化酶防 [19] 御系统受到损坏 ꎬ 导致组织中主要的抗氧化酶活性下降 ꎮ 任泽林等研究表明 ꎬ 氧化鱼油可以破坏鲤肝胰脏抗氧化机能使 GSH PX 活性下降 ꎬ 但没有显著变化 ꎮ 本研究中 ꎬ 氧化鱼油各组中 GSH PX 的活性与对照组相比 ꎬ 也没有表现出显著变化 ꎬ 推测原因可能是抗氧化防御系统其他成分如 CAT 等的介入降低了机体活性氧的浓度 ꎬ 使 GSH PX 还未受到明显的影响 ꎮ 另外 ꎬ 随着鱼油氧化程度的提高 ꎬ 草鱼幼鱼各组织 MDA 含量变化与 SOD CAT 活性变化呈相反的趋势 ꎬ 这与苏传福等 [21] [22] 谢巧雄等在草鱼抗氧化方面的研究结果一致 ꎮ 说明鱼体依赖 SOD CAT 的协同作用来抑制脂质过氧化进行 ꎮ 3.3 不同组织中抗氧化酶活性的比较 SOD CAT 和 GSH PX 是机体内主要的抗氧化酶 ꎬ 在清除活性氧自由基中发挥重要作用 ꎮ 本研究中 ꎬ 草鱼幼鱼各组织中 MDA T AOC 含量以及主要抗氧化酶活性表现出了组织器官差异性 ꎬ 其从大到小排列如下 :MDA 含量 : 血清肠道肌肉肝胰脏肾脏 ꎻT AOC 含量 : 肝胰脏血清肠道肾脏肌肉 ꎻSOD 活性 : 血清肝胰脏肾脏肌肉 ꎻCAT 活性 : 肝胰脏肾脏血清肠道肌肉 ꎻGSH PX 活性 : 肝胰脏血清肾脏肠 [23] 道 ꎮ 赵燕静等在研究中比较淇河鲫不同器官组织 SOD CAT GSH PX 活性时 ꎬ 结果显示活性从大到小 [24] 的组织为 : 肝胰脏肾脏肌肉 ꎻ 王妤等研究发现点篮子鱼不同组织中 SOD 和 CAT 活性在肝脏中最高 ꎬ 肾脏次之 ꎬ 肌肉中最低 ꎬ 与本试验结果一致 ꎮ 表明草鱼幼鱼抗氧化酶活性具有组织特异性 ꎬ 这与不同组织的生理功能差异有关 ꎮ 对本试验结果中氧化鱼油对草鱼幼鱼各组织中 MDA 含量 T AOC 含量 SOD 活性 CAT 活性等综合比较 ꎬ 发现草鱼幼鱼肝胰脏中多种抗氧化酶活性高于肾脏肌肉肠等组织 ꎬ 氧化鱼油 POV 为 mmol kg -1 时 T AOC SOD CAT 活性较对照组均显著下降 ꎬPOV 为 mmol kg -1 时 MDA 含量即显著提高 ꎬ 而其他组织多是在 POV 为 mmol kg -1 时有显著变化 ꎬ 可见低氧化程度的鱼油即对肝胰脏产生 [25] 较强烈的氧化损伤 ꎬ 说明肝胰脏对氧化鱼油诱导的氧化应激比较敏感 ꎬ 与 Gao 等研究结果一致 ꎮ 因此可以认为肝脏是发挥抗氧化防御作用的主要组织 ꎮ 原因是肝脏在机体内承担着代谢排泄和解毒等重要生理功能 ꎬ 最能反映机体的营养生理和病理状态 [26] ꎮ 参考文献 Reference: [1] Ji HꎬOm A DꎬYoshimatsu Tꎬet al. Effect of dietary docosahexaenoic acid on lipogenesis and lipolysis in black sea breamꎬacanthopagrus schlegeli[j]. Acta Oceanologica Sinicaꎬ2007ꎬ26(1): [2] Om A DꎬJi HꎬUmino Tꎬet al. Dietary effects of eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid on lipid metabolism in black sea bream[ J]. Fisheries Sciꎬ2003ꎬ69(6): [3] 周继术 ꎬ 吉红 ꎬ 王建华 ꎬ 等. 鱼油对鲤生长及脂质代谢的影响 [J]. 中国海洋大学学报 ꎬ2008ꎬ38(2): [Zhou J SꎬJi HꎬWang J Hꎬet al. Influence of fish oil on growth and lipid metabolism in common carp( Cyprinus carpio) [ J]. Periodical of Ocean University of Chinaꎬ2008ꎬ38(2): ( in Chinese with English abstract)] [4] 季文娟. 饲料中不同脂肪源对黑鲷幼鱼生长和鱼体脂肪酸组成的影响 [J]. 海洋水产研究 ꎬ1999ꎬ20(1):70-74 [Ji W J. The influence of different fat sources in feed on the growth rate of juvenile and fatty acid composition of body fat of black sea bream ( Sparus macrocephalus)[ J]. Marine Fisherries Reseachꎬ1999ꎬ20(1):70-74( in Chinese with English abstract)] [5] 周永奎 ꎬ 李二超 ꎬ 陈立侨. 鱼油在水产饲料中的应用 [J]. 饲料广角 ꎬ2005(13):38-41

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中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷第 9 期 2015 年 5 月 1339 非酒精性脂肪性肝病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是一种与胰岛素抵抗遗 1338 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷第 9 期 2015 年 5 月九味肝泰胶囊对高脂饮食诱导大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用陈菲 1 2,, 艾国 3, 盛柳青 1, 麻佳蕾 1, 黄正明 1. 金华职业技术学院医学院, 浙江金华