口腔2018-8

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祉忧逄
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1 96 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第 8 期 [DOI]1.1216/j.issn 基础研究 Miller Ⅲ 度牙龈退缩比格犬实验性动物模型的构建庞罡, 徐燕, 王莹, 叶兴如, 何家林, 谢贤哲, 蒋鹏, 辛保见安徽医科大学附属口腔医院牙周黏膜科, 安徽合肥 (2332) 摘要目的构建 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型, 为探索 Miller Ⅲ 度牙龈退缩的治疗奠定基础方法选择 2 只成年雄性比格犬, 每只犬选择颗犬齿采取去除颊侧软硬组织显露牙根表面的方法来建立 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型, 通过检测造模术后周的垂直向牙龈退缩量 (vertical gingival retraction, VGR) 水平向牙龈退缩量 (horizontal retraction, HGR) 角化龈宽度 (keratosis tissue width, KTW) 牙龈组织厚度 (gingi val tissue thickness, GTT) 探诊深度 (probing depth, PD) 评估动物模型是否建立成功结果经过临床指标的观察,PD 后均小于 3 mm, 无深牙周袋形成 ; VGR 为 mm, 造模后 VGR 的范围为 5~6.38 mm, VGR 后对比差异有统计学意义 (P<.5), 术后 VGR 结果按时间点分组进行对比, 术后周各组之间差异均无统计意义 (P >.5); HGR 为 mm, 造模后 HGR 在 1.5 mm 上下波动,HGR 后对比差异有统计学意义 (P<.5), 对术后 HGR 结果按时间点分组进行单因素方差分析, 组间对比结果差异无统计学意义 (F =.952,P =.5); KTW 范围为 6~9 mm, 造模后 KTW 在 2 mm 上下波动,KTW 后对比差异有统计意义 (P<.5), 术后 KTW 结果按时间点分组进行对比, 术后各组之间差异均无统计学意义 (P >.5) GTT 为 1.5 mm, 造模后 GTT 的范围为 1.5~2 mm, 术前及术后 GTT 结果按时间点分组对比, 结果显示术后 1 周与术后 2 周对比差异无统计学意义 (P >.5), 术后 1 周与其他各组对比差异有统计学意义 (P<.5) 结论本实验所采用的方法成功构建出 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型, 并在创口愈合后能够保持稳定关键词牙龈退缩 ; 上皮下结缔组织移植术 ; 动物模型 ; 角化龈宽度 ; 根面覆盖中图分类号 R781. 文献标识码 A 文章编号 (218) 引用著录格式庞罡, 徐燕, 王莹, 等. Miller Ⅲ 度牙龈退缩比格犬实验性动物模型的构建 [J]. 口腔疾病防治,218,26(8): Construction of an experimental millerⅢ gingival retraction animal model in beagle dogs PANG Gang, XU Yan, WANG Ying, YE Xingru, HE Jialin, XIE Xianzhe, JIANG Peng, XIN Baojian. Department of Periodontology, Affil iated Stomatology Hospital of Anhui Medical University, Hefei, 2332, China. Corresponding author: XU Yan, @qq.com, Tel: Abstract Objective To construct a Miller class Ⅲ gingival recession animal model and to lay the foundation for exploring the treatment of Miller class Ⅲ gingival recession. Methods Two adult male beagle dogs were selected, and four teeth from each beagle dog were selected to establish an experimental Miller class Ⅲ gingival recession model. The root surface was revealed by removing the soft and hard tissues of the buccal side. The success of the model was deter mined by measuring the vertical gingival retraction (VGR), horizontal retraction (HGR), keratosis tissue width (KTW), gingival tissue thickness (GTT), and probing depth (PD) at 1, 2,, 6, and 8 weeks after modeling. Results After ob serving the clinical indexes, the PDs before and after the modeling were all smaller than 3 mm and no deep period pock 收稿日期 ; 修回日期基金项目安徽省教育厅自然科学重大项目 (KJ217ZD17); 安徽医科大学安科生物校企合作项目 (K21511) 作者简介庞罡, 医师, 硕士研究生在读, @qq.com 通信作者徐燕, 主任医师, 博士, @qq.com

2 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第 8 期 97 ets were formed. The VGR before modeling was mm, and the VGR range after modeling was mm. A compari son of the before and after modeling results showed that this difference was statistically significant (P <.5). The post operative VGR results were grouped according to timepoint. A comparison between the two groups showed that the dif ferences at 2,, 6 and 8 weeks postoperatively were not statistically significant (P >.5). The HGR before the model ing was mm, and the HGR fluctuated around 1.5 mm after the modeling, and this difference was statistically signifi cant (P <.5). The HGR results were grouped by timepoint after surgery, and a one way analysis of showed that the differences between the two groups were not statistically significant (P >.5). The KTW range before modeling was 6~ 9 mm, and it fluctuated around 2 mm after modeling, and this difference was statistically significant (P <.5). The KTW results were grouped by timepoint after surgery, and they indicated that significant differences did not occur be tween the groups postoperatively (P >.5). The pre modeling GTT was 1.5 mm, and the GTT range after modeling was mm. The preoperative and postoperative GTT results were grouped by timepoint, and the results showed that sig nificant differences did not occur between 1 week and 2 weeks after surgery (P =.123), although a statistically signifi cant difference was observed at 1 week postoperatively between this group and the other groups (P <.5). Conclu sion The method used in this experiment can successfully build a Miller class III gingival recession animal model, and the model remains stable after wound healing. Key words Gingival recession; Subepithelial connective tissue graft; Animal model; Keratinized tissue width; Root coverage 牙龈退缩 (gingival recession,gr) 由于其病因的复杂性及治疗的困难性, 一直以来都是口腔科临床面临的难题目前临床上针对不同程度的牙龈退缩, 常采取膜龈手术 (mucogingival surgery, MS) 来恢复根面覆盖, 国内外的学者对膜龈手术术式的治疗效果进行比较, 并逐渐达成共识, 冠向复位瓣 (coronally advanced flap,caf)+ 上皮下结缔组织移植术 (subepithelial connective tissue graft, SCTG) 对牙龈退缩的治疗效果最为理想, 且疗效稳定, 被认为是牙龈退缩治疗的金标准 [1 2] [3] SCTG 是在上个世纪 8 年代由 Langer 等首次公开发表的, 该技术的优势在于 SCTG 可从骨膜和黏膜瓣获得双重血供, 从而提高了瓣膜的成活率, 并且结缔组织能够促进角化龈的形成 Maha [] jan 等研究表明, 对于 Miller Ⅰ/Ⅱ 度牙龈退缩 2 mm 的病例, 使用 SCTG, 可获得 9.95% 的牙根覆盖 [5] 及角化龈宽度增加然而,Cairo 等研究指出, 当 CAF+SCTG 应用于有邻面骨丧失的牙龈退缩病例时, 仅能获得 57% 的根面覆盖, 学者们推测, 对于 Miller Ⅲ 度牙龈退缩的病例, 难以达到完全根面覆盖的原因是其邻面骨组织的丧失, 限制了软组 [6] 织的生长 Cario 等研究发现,SCTG 用于治疗达到 Miller Ⅲ 度的牙龈退缩时, 虽然不能获得完全的根面覆盖, 但同样可取得优于其他手术术式的治疗效果 SCTG 需要开辟第二术区, 从腭部获取结缔组织, 这无疑会增加患者的创伤和术后反应, 是治疗时遇到的一个大问题, 而且 SCTG 组织量有限, 对于多颗牙牙龈退缩的患者, 不能满足 [7] 需求学者们希望能够找到一种材料, 可以替代 SCTG 用于 Miller Ⅲ 度牙龈退缩的治疗本研究尝试构建 Miller Ⅲ 度牙龈退缩比格犬实验性动物模型, 为探索 Miller Ⅲ 度牙龈退缩的治疗奠定基础 1 材料和方法 1.1 实验材料药物及试剂戊巴比妥钠 ( 上海榕柏, 中国 ); 青链霉素 ( 哈药集团有限公司, 中国 ); 安漱净 ( 安徽安科生物工程股份有限公司, 中国 ) 器械及设备手术器械 ( 安徽医科大学口腔医学实验中心, 中国 ); 微距单反相机 ( 佳能, 日本 ); 超纯水系统 ( 四川优普超纯科技有限公司, 中国 );CBCT( 美亚光电技术股份有限公司, 中国 ) 1.2 实验动物 1 岁龄比格犬 2 只, 雄性, 体格健康, 平均体质量约 1 kg, 由安徽医科大学实验动物中心提供和饲喂 1.3 制备 3% 戊巴比妥钠溶液 ( 麻醉剂 ) 称取 3 g 戊巴比妥钠粉末, 置于无菌烧杯中, 加入 95 ml 无菌.9%NaCl 溶液, 搅拌使粉末完全溶解, 将溶液定容至 1 ml, 分装于 5 ml 无菌 EP 管中, 于低温避光保存

98 1. 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第8期比格犬 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型

.1 手术过程选择两只雄性健康比格犬用于远中面约 mm 并由此向根方做垂直切口翻瓣暴建立建立 Miller

牙龈炎症等牙周问题术前测量体质量禁食水齿颊侧面进行雕刻画线并以此作为牙槽骨高度量为 1 ml/kg 术中补药.

后拍摄 CBCT 选择上下颌四颗犬齿作为建模对象局部注射复方阿替卡因进行局部麻醉检查并记录探诊深度 probing

1a 用手术刀片在犬齿的颊侧面沿牙龈边缘弧线进行雕刻画线以此作为后期测量牙龈退缩程度的原始位置标记图 1b c

记线冠方的牙龈牙龈瓣无张力缝合可吸收缝线间断缝合擦干术区牙面加热牙胶粘固于术区牙颊侧龈缘的冠方图 1g i

e f g h i a 术前 b 沟内切口 c 翻瓣 d 去骨 e 颊面去骨 5 mm f 邻面去骨 2 mm g 缝合 h

.2 图1 比格犬 Miller Ⅲ度牙龈退缩动物模型的建立 Establishment of Miller class III

水平向牙龈退缩术后 1 2 6 8 周以术前在牙齿颊面沿原牙龈缘中向牙龈缺损的宽度 PD 术后 1 2 周因切口未完

3 98 1. 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第8期比格犬 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型的的基线从牙龈缘往根方 5 mm 的位置使用美兰 1..1 手术过程选择两只雄性健康比格犬用于远中面约 mm 并由此向根方做垂直切口翻瓣暴建立建立 Miller Ⅲ度牙龈退缩动物模型术前检查未见画标记线做龈沟内切口切口延伸至距犬齿近露牙槽骨和牙根使用手术刀片沿牙槽嵴顶在犬牙龈炎症等牙周问题术前测量体质量禁食水齿颊侧面进行雕刻画线并以此作为牙槽骨高度量为 1 ml/kg 术中补药.5 ml/次理盐水冷却下自牙槽嵴顶向牙根方逐渐磨除牙槽 12 h 使用 3 戊巴比妥钠进行全身麻醉麻醉剂待麻醉显效 8 后拍摄 CBCT 选择上下颌四颗犬齿作为建模对象局部注射复方阿替卡因进行局部麻醉检查并记录探诊深度 probing depth PD 和角化龈宽度 keratosis tissue width KTW 并拍摄照片记录牙龈色形质图 1a 用手术刀片在犬齿的颊侧面沿牙龈边缘弧线进行雕刻画线以此作为后期测量牙龈退缩程度的原始位置标记图 1b c 使用低速涡轮机生骨颊侧面 5 mm 近远中面 2 mm 刮除暴露根面的牙周膜和部分牙骨质图 1d f 切除美兰标记线冠方的牙龈牙龈瓣无张力缝合可吸收缝线间断缝合擦干术区牙面加热牙胶粘固于术区牙颊侧龈缘的冠方图 1g i 通过静脉注射补液 1% 葡萄糖注射液 5 ml 生理盐水 1 ml 观察生命体征平稳回笼 a b c d e f g h i a 术前 b 沟内切口 c 翻瓣 d 去骨 e 颊面去骨 5 mm f 邻面去骨 2 mm g 缝合 h 覆盖牙胶 i 切下的牙龈组织 Figure 图1 比格犬 Miller Ⅲ度牙龈退缩动物模型的建立 Establishment of Miller class III gingival recession in the beagles 术后第天肌肉注自基线的颊侧中央至牙龈边缘水平向牙龈退缩术后周以术前在牙齿颊面沿原牙龈缘中向牙龈缺损的宽度 PD 术后 1 2 周因切口未完术后护理与观察射 8 单位青霉素 1 次/d 饲喂高热量软食所做的刻画线为基线测量并记录造模牙位的垂直向牙龈退缩量 vertical gingival retraction VGR 量 horizontal retraction HGR 基线最凹点处近远全愈合未进行测量颊舌侧及近远中共 6 个位点 KTW 自基线最凹点处根方的牙龈边缘至膜龈

口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第8期 99 联合线处牙龈组织厚度 gingival tissue thickness 面骨缺损量自邻面釉牙骨质界至牙槽嵴顶术数据均重复测量 3 次并取平均值图 2 术后蘸取安漱净抗 Pg IgY 口腔冲洗液和生理盐水擦 GTT 自基线最凹点处根方牙龈的唇面至牙面各 8 周拍摄 CBCT 观察其邻面牙槽骨情况

软件对实验数据进行整理分析实验数据采用 x ± s 表示采用单因素方差分析进行统计分析两两比较采用 LSD t 检验方差齐和 Tamhane s T2 检验方差不齐 n 值相等检验水准 α.5 2 2.1 结比格犬的一般情况在整个实验期间比格犬一般状况良好进食正常皮毛呈正常形态与光泽两只比格犬体质量均呈下降趋势 1 号犬体质量下降.

3 果表1 色箭头标记为测量范围下颌的测量范围与上颌实验动物体质量变化 Weight of the experimental animal kg 2 2.2 13.

验期间 PD 平均值为 2 mm 左右无深牙周袋形成表 2 表2 CBCT 观察邻面骨组织情况本研究在造模后 1 2 个月分别对比格比格犬上下颌犬齿探诊深度变化 Table 2 Changes in the probing depth at the fangs of the beagles 动物序号 1 2.96 ±.3 2 13.1 13.

4 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第8期 99 联合线处牙龈组织厚度 gingival tissue thickness 面骨缺损量自邻面釉牙骨质界至牙槽嵴顶术数据均重复测量 3 次并取平均值图 2 术后蘸取安漱净抗 Pg IgY 口腔冲洗液和生理盐水擦 GTT 自基线最凹点处根方牙龈的唇面至牙面各 8 周拍摄 CBCT 观察其邻面牙槽骨情况测量其邻 a 后 1 周去除牙面残余牙胶并每日使用无菌纱布拭牙面进行简单口腔清洁护理 b c d a 垂直向牙龈退缩量 VGR b 水平向牙龈退缩量 HGR c 角化龈宽度 KTW d 牙龈组织厚度 GTT Figure 图2 临床指标测量 Measures of the clinical indicators 统计分析采用 SPSS 22. 软件对实验数据进行整理分析实验数据采用 x ± s 表示采用单因素方差分析进行统计分析两两比较采用 LSD t 检验方差齐和 Tamhane s T2 检验方差不齐 n 值相等检验水准 α 结比格犬的一般情况在整个实验期间比格犬一般状况良好进食正常皮毛呈正常形态与光泽两只比格犬体质量均呈下降趋势 1 号犬体质量下降.7 kg 2 号犬体质量下降.8 kg 两者体质量变化趋势基本一致表 1 Table 1 一致与造模后 1 个月的 CBCT 对比结果显示上下颌犬齿的近远中牙槽骨高度在造模后有较为明显的降低约 2 mm 造模后 1 个月及造模后 2 个月的 CBCT 对比结果显示上下颌犬齿的近远中牙槽骨高度未见明显变化 2.3 果表1 色箭头标记为测量范围下颌的测量范围与上颌实验动物体质量变化 Weight of the experimental animal kg 验期间 PD 平均值为 2 mm 左右无深牙周袋形成表 2 表2 CBCT 观察邻面骨组织情况本研究在造模后 1 2 个月分别对比格比格犬上下颌犬齿探诊深度变化 Table 2 Changes in the probing depth at the fangs of the beagles 动物序号 ± 在两只比格犬的 PD 值分别为 2.96 ±.3 和 2.63 ±.3 均小于 3 mm 造模后的整个实动物序号造模 1 周造模 2 周造模周 1 比格犬上下颌犬齿 PD 变化 ±.3 造模周 2.17 ± ± ± ±.51 x ± s mm 2.17 ± ±.51 后各项临床指标检查结果后垂直向牙龈退缩 VGR 测量结果造模前比格犬实验牙的 VGR 为 mm 造模之犬进行了 CBCT 检查观察其上下颌犬齿邻面牙槽后 VGR 的范围为 mm 后对比差异牙骨质界至牙槽嵴顶由于比格犬上下颌牙长轴上升趋势其中术后前 2 周上升较为明显 2 8 周嵴顶的变化情况测量其邻面骨缺损量自邻面釉差异较大无法在同一张截图中很好的同时显示邻面骨的情况图 3 中显示的为上颌的情况黄有统计学意义 P.5 表 3 在造模后 VGR 呈期间其 VGR 基本保持稳定对术后 VGR 结果按时间点分组进行单因素方差分析方差同质性检

28 ±.291 2 3 6. ±.351 2 3 6. ±.21 2 3 动物 2 注 5.

5 5 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷 a b c d e f 第8期 a 左侧犬齿 b 造模 1 个月左侧犬齿 c 造模 2 个月左侧犬齿 d 右侧犬齿 e 造模 1 个月右侧犬齿 f 造模 2 个月右侧犬齿 Figure 3 图3 1 号比格犬 CBCT 观察邻面骨量变化 Changes in the bone of the adjacent surface by CBCT for beagle 1 a b c d e f a 左侧犬齿 b 造模 1 个月左侧犬齿 c 造模 2 个月左侧犬齿 d 右侧犬齿 e 造模 1 个月右侧犬齿 f 造模 2 个月右侧犬齿 Figure Table 3 图 2 号比格犬 CBCT 观察邻面骨量变化表3 后垂直向牙龈退缩测量结果 Changes in the bone of the adjacent surface by CBCT for beagle 2 Vertical gingival retraction measurements before and after the animal model establishment 造模 1 周造模 2 周造模周 x ± s mm 犬齿数颗造模即刻动物 1 5. ± ± ± ± ±.26 合计 8 5. ± ± ± ± ± ± 动物 2 注 5. ±. 5.5 ± ±.2 1 P <.5 vs 2 P <.5 vs 造模即刻 3 P <.5 vs 造模 1 周 6.35 ± ± ± ±.8

6 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第 8 期 51 测结论为方差不齐性 (P=.1), 故采用 Tam hane s T2 检验, 术后周各组之间差异均无统计意义 (P >.5) 2..2 后水平向牙龈退缩 (HGR) 测量结果比格犬实验牙的 HGR 为 mm, 造模之后,HGR 在 1.5 mm 上下波动, 基本保持恒定, 后对比差异有统计学意义 (P<.5, 表 ) 对术后 HGR 结果按时间点分组进行单因素方差分析, 方差同质性检测结论为方差齐 (P=.13), 组间对比差异无统计学意义 (F=.952,P=.5) 2..3 后角化龈宽度 (KTW) 测量结果比格犬实验牙的 KTW 范围为 6~9 mm, 造模之后,KTW 在 2 mm 左右上下波动, 后对比差异有统计意义 (P<.5, 表 5) 术后 KTW 结果按时间点分组进行单因素方差分析, 方差同质性检测结论为方差不齐 (P <.1), 故采用 Tam hane s T2 检验, 结果如表 5 所示, 术后各组之间差异均无统计学意义 (P >.5) 2.. 后牙龈组织厚度 (GTT) 测量结果比格犬实验牙的 GTT 为 1.5 mm, 造模之后, GTT 的范围为 1.5~2 mm( 表 6) 在造模后 GTT 先呈上升趋势, 术后 1 周后逐渐下降, 至术后 6 周后基本保持恒定对术前及术后 GTT 结果按时间点分组, 进行单因素方差分析, 方差同质性检测结论为方差不齐 (P=.3), 故采用 Tamhane s T2 检验, 结果如表 6 所示, 术后 1 周与术后 2 周对比, 差异无统计学意义 (P=.123), 术后 1 周与其他各组对比差异均有统计学意义 (P<.5) 表后水平向牙龈退缩测量结果 Table Horizontal retraction measurements before and after the animal model establishment n =,x ± s,mm 犬齿数 ( 颗 ) 造模即刻造模 1 周造模 2 周造模周动物 ± ± ± ± ± ±.98 动物 ± ± ± ± ± ±.7 合计 ±.95 1) 1.37 ±.93 1)2) 1.52 ±.92 1)2)3) 1.6 ±.88 1)2)3) 1.88 ±.81 1)2)3) 11.6 ±.82 1)2)3) 注 1):P <.5 vs ;2):P <.5 vs 造模即刻 ;3):P <.5 vs 造模 1 周表 5 后角化龈宽度测量结果 Table 5 Keratosis tissue width measurements before and after the animal model establishment n =,x ± s,mm 犬齿数 ( 颗 ) 造模即刻造模 1 周造模 2 周造模周动物 1 7. ± ± ± ± ± ± ±.29 动物 ± ± ± ± ± ±. 2.2 ±.22 合计 ± ± ) 2.15 ±.88 1)2) 2.9 ±.65 1)2)3) 2.11 ±.7 1)2)3) 2.6 ±.38 1)2)3) 2.6 ±.28 1)2)3) 注 1):P <.5 vs ;2):P <.5 vs 造模即刻 ;3):P <.5 vs 造模 1 周表 6 后牙龈组织厚度测量结果 Table 6 Gingival tissue thickness measurements before and after the animal model establishment n =,x ± s,mm 犬齿数 ( 颗 ) 造模即刻造模 1 周造模 2 周造模周动物 ±. 1.5 ± ± ± ± ± ±.6 动物 ±. 1.5 ± ± ± ± ± ±.5 合计 ±. 1.5 ±. 1.9 ±.11 1)2) 1.71 ±.12 1)2) 1.6 ±.12 3) 1.6 ±.5 3)) 1.6 ±.5 3)) 注 1):P <.5 vs ;2):P <.5 vs 造模即刻 ;3):P <.5 vs 造模 1 周 ;):P <.5 vs 造模 2 周 3 讨论选择合适的实验动物对于深入研究牙龈退缩的治疗至关重要目前常用于口腔研究的有鼠兔猪羊犬及各种灵长类动物等, 鼠类和兔类价格相对便宜而且容易饲养, 但是其口腔较小不利手术操作 ; 猪类和羊类由于体积过大不易操作较 [9] 易发生感染, 不宜进行大规模实验 ; 犬和灵长类动物是比较常用的牙周组织缺损模型动物, 其中灵长类牙周组织缺损发生机制和临床表现与人类都非常相似, 但由于价格昂贵而且受医学伦理限制, 难以普遍应用 ; 犬类颌骨软硬组织结构与人类基本接近, 并且来源充分容易饲养, 其中比格犬

7 52 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第 8 期 [1] 由于性情温顺最适用于实验研究, 所以口腔动 [11] 物实验一般使用雄性成年比格犬为了避免实验动物自然形成牙周组织炎症或其他系统性疾病, 对后续研究造成影响, 本研究选用 1 岁龄雄性比格犬作为研究对象, 以降低其自然患病的几率关于牙龈退缩动物模型建立的研究相对较少, 多以牙周炎动物模型的建立方法为参考常 [12] 用的牙周炎动物模型建造方法主要有 7 种, 单纯丝线结扎法和接种特异致病菌法, 操作方法简单易行, 在 1~ 周内出现牙龈红肿溢脓探诊出血 [13 1] 牙槽骨吸收牙齿松动等, 但其不能短期内形成牙龈组织的退缩 ; 高糖低蛋白饲养和注射脂多糖, 操作简单, 但单一使用效果一般 ; 化学诱导炎 [15 16] 症和尼古丁影响法, 技术敏感性较高且无法精准控制造模范围, 目前应用较少 ; 手术建模法, 采用手术方法去除牙周骨组织从而建立牙周组织缺损模型, 并以此为基础建立根分叉病变模型, 有着广泛的研究前景本研究仿照牙周炎动物模型手术建模方法, 应用去骨和切龈相结合的方式进行 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型的构建, 获得了成功选择上下颌犬齿作为研究对象, 是因为单根牙可以排除根分叉等对手术的影响, 较大的尺寸方便手术时进行操作以及临床指标的测量, 犬齿与近远中邻牙相距较远, 方便在术中磨除邻面的牙槽骨术中使用低速手机磨除牙槽骨, 避免了使用高速手机 [17] 所造成的牙体组织损伤和骨组织坏死, 相较于采用丝线结扎的方法, 可以更快的达到预期的牙槽骨缺损 ; 手术切除了 5 mm 的牙龈, 相较于其他方法可以更快速的获得准确的牙龈退缩量在实验动物后, 均拍摄了 CBCT, 其结果从影像学上证明了本研究所构建的动物模型为 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型本研究中, 造模手术完成后, 进行了为期 8 周的观察, 以确定动物模型建造是否成功, 在前人的 [18 19] 研究中, 造模后的观察期往往少于周甚至没有观察期, 就直接进行后续的实验, 这种造模方式显然与天然牙龈退缩的形成过程不符对于牙周 [2] 软硬组织再生的观察期一般至少要有 3 个月, 而本研究的观察对象是造模方法, 而并不是为了观察牙周组织再生的情况, 结合动物手术创口的恢复情况及前期预实验结果, 选择了 8 周的时间作为观察期观察期间, 造模区存在轻微的炎症, 且在观察期的后半段, 各项测量指标均能保持稳定, 相较与其他学者所描述的造模之后直接进行膜龈手术, 更能模拟天然牙龈退缩的形成过程, 也更符合临床上膜龈手术前术区的天然状态本实验中, 在后对实验牙的临床指标进行跟踪测量, 发现在造模后 VGR 呈上升趋势, 其中术后前 2 周上升较为明显, 这可能与手术的刺激有关, 术中的翻瓣导致了牙龈的进一步退缩,2~8 周期间,VGR 基本保持稳定, 术后周各组之间对比差异无统计学意义造模之后 HGR 基本保持恒定, 各组之间无统计学差异以上这些结果表明, 造模手术所构建的牙龈退缩在创口愈合期间仍不稳定, 会有少量的波动, 但是在度过手术的愈合期 (2 周 ) 之后, 手术所构建的牙龈退缩能够保持稳定由于造模手术中切除了 5 mm 的牙龈, 且全部为角化龈, 这导致比格犬实验牙的 KTW 由术前的 6~9 mm, 减少为术后的 2 mm 左右, 但是在整个造模后的观察期,KTW 基本保持恒定, 按时间点分组进行组间对比发现, 术后各组之间差异均无统计学意义 GTT 为 1.5 mm, 造模之后,GTT 的范围在 1.5~2 mm 之间上下波动, 在造模后 GTT 先呈上升趋势, 术后 1 周后逐渐下降, 至术后 6 周后基本保持恒定, 这种现象, 可能与造模手术术中翻瓣和切龈所导致的组织水肿有关以上结果显示, 本实验所采用的造模方法, 能够成功构建出 Miller Ⅲ 度牙龈退缩动物模型所构建的牙龈退缩, 在创口愈合后能够保持稳定, 并未随时间而出现变浅或加深, 而 GTT 在组织愈合后, 相较于并未有显著改变, 为后续的实验奠定了良好的基础参考文献 [1] Aroca S, Keglevich T, Barbieri B, et al. Clinical evaluation of a modified coronally advanced flap alone or in combination with a platelet rich fibrin membrane for the treatment of adjacent multi ple gingival recessions: a 6 month study[j]. J Periodontol, 29, 8 (2): [2] Roccuzzo M, Bunino M, Needleman I, et al. Periodontal plastic surgery for treatment of localized gingival recessions: a systematic review[j]. J Clin Periodontol, 22, 29(s3): [3] Langer B, Langer L. Subepithelial connective tissue graft tech nique for root coverage[j]. J Periodontol, 1985, 56(12): [] Mahajan A. Treatment of multiple gingival recession defects using periosteal pedicle graft: a case series[j]. J Periodontol, 21, 81 (1): [5] Cairo F, Cortellini P, Tonetti M, et al. Coronally advanced flap

8 口腔疾病防治 218 年 8 月第 26 卷第 8 期 53 with and without connective tissue graft for the treatment of single maxillary gingival recession with loss of inter dental attachment. A randomized controlled clinical trial[j]. J Clin Periodontol, 212, 39(8): [6] Cairo F, Cortellini P, Tonetti M, et al. Stability of root coverage outcomes at single maxillary gingival recession with loss of inter dental attachment: 3 year extension results from a randomized, controlled, clinical trial[j]. J Clinl Periodontol, 215, 2(6): [7] Erpenstein H, Borchard R. Criteria for the selection of root cover age procedures. Part 2: patient factors, defect Factors, predictabili ty of coverage, nature of post operative attachment[j]. Perio, 26, 3(3): [8] 李欣, 金作林, 吴琼, 等. 应用牙周膜干细胞牙囊干细胞复合细胞膜片同种异体移植修复比格犬牙周组织缺损的研究 [J]. 口腔疾病防治, 216, 2(): [9] Mai R, Reinstorf A, Pilling E, et al. Histologic study of incorpora tion and resorption of a bone cement collagen composite: an in vi vo study in the minipig[j]. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod, 28, 15(3): e9 e1. [1] 尹伟, 刘向辉, 孙卫革, 等. 比格犬种植体周围炎骨缺损模型的建立 [J]. 医学研究生学报, 216, 29(1): [11] Levin L, Samorodnitzkynaveh GR, Machtei EE. The association of orthodontic treatment and fixed retainers with gingival health[j]. J Periodontol, 28, 79(11): [12] 张璇, 王凯. 实验性牙周炎动物模型的研究进展 [J]. 中国医药指南, 216, 1(11): 39. [13] Tamaki N, Cristina OR, Inagaki Y, et al. Resveratrol improves oxi dative stress and prevents the progression of periodontitis via the activation of the Sirt1/AMPK and the Nrf2/antioxidant defense pathways in a rat periodontitis model[j]. Free Radic Biol Med, 21, 75: [1] Nassar PO, Felipetti FA, Nassar CA, et al. Evaluation of effect of cyclosporine a on the bone tissue with induced periodontal disease to ligature in rats[j]. Transplant Proc, 213, 5(2): [15] Fiorucci S, Mencarelli A, Palazzetti B, et al. Importance of innate immunity and collagen binding integrin alpha1beta1 in TNBS in duced colitis[j]. Immunity, 22, 17(6): [16] Semenoff SA, Semenoff TA, Borges AH, et al. Methodological mod el of chronic stress associated with ligature induced periodontitis in rats: a radiographic study[j]. Braz Oral Res, 21, 2(): [17] Shirakata Y, Eliezer M, Nemcovsky CE, et al. Periodontal healing after application of enamel matrix derivative in surgical supra/in frabony periodontal defects in rats with streptozotocin induced dia betes[j]. J Periodontal Res, 21, 9(1): [18] Alhezaimi K, Rudek I, Alhamdan KS, et al. Efficacy of acellular dermal matrix and coronally advanced flaps for the treatment of in duced gingival recession defects: a histomorphometric study in dogs[j]. J Periodontol, 213, 8(8): [19] Ishii Y, Fujita T, Okubo N, et al. Effect of basic fibroblast growth factor (FGF 2) in combination with beta tricalcium phosphate on root coverage in dog[j]. Acta Odontol Scand, 213, 71(2): 325. [2] Jagannathachary S, Prakash S. Coronally positioned flap with or without acellular dermal matrix graft in the treatment of class II gingival recession defects: a randomized controlled clinical study [J]. Contemporary Clin Dent, 21, 1(2):73. ( 编辑罗燕鸿, 徐琛蓉 ) 欢迎投稿欢迎订阅

864 现代药物与临床 Drugs & Clinic 第 31 卷第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great

864 现代药物与临床 Drugs & Clinic 第 31 卷第 6 期 2016 年 6 月 of apoptosis related factors, decrease the incidence of adverse reactions, which is of great 现代药物与临床 Drugs & Clinic 第 31 卷第 6 期 2016 年 6 月 863 曲妥珠单抗联合多西紫杉醇治疗 Her-2 阳性乳腺癌的临床研究 * 周永安, 刘训碧黄石市中心医院 ( 普爱院区 ) 乳腺肿瘤外科, 湖北黄石 435000 摘要 : 目的探析注射用曲