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沙史
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1 1014 doi /j.issn J South Med Univ, 2017, 37(8): 基础研究王静 1, 谭伟江 1 1,2, 李想, 张贵平 3, 黄家园 4, 陈小红 1, 雷迁 5, 杨丰华 1 1,2, 黄韧 1 广东省实验动物监测所 // 广东省实验动物重点实验室, 广东广州 ; 2 广东药科大学, 广东广州 ; 3 广州医科大学, 广东广州 ; 4 复旦大学附属中山医院, 上海 ; 5 四川省医学科学院四川省人民医院麻醉科, 四川成都摘要 : 目的通过建立小鼠心梗模型, 探讨应用超高分辨率超声系统评价心梗小鼠心脏结构及心功能方面的应用价值方法 25 只雄性 C57L/6 小鼠随机分为 2 组, 即开胸结扎左冠状动脉前降支建立心梗模型组 (n=15) 和仅在相同结扎位置穿针, 不结扎的方法建立假手术组 (n=10) 术前 3 d 和术后 1 周采用二维 M 型脉冲多普勒 (PWD) 组织多普勒 (TDI) 和 EKV TM 超声技术对心梗小鼠心脏形态结构室壁运动以及心功能进行评价术后 1 周, 取小鼠心脏进行 HE 染色并观察心肌组织结构结果二维超声与 HE 色染均显示, 心梗模型组心肌有明显的梗死区 ; 心梗模型组与假手术组比较, 心室明显扩大, 室壁明显变薄, 心室收缩功能与舒张功能均显著下降 (P<0.05); 局部室壁运动受阻严重, 心室发生重构结论采用 2D 超声心动图联合 M 型 PWD TDI 以及 EKV TM 超声心动图观察小鼠心梗模型能够更精准敏感地判断心肌梗死位置和梗死程度, 为临床心肌梗死诊断治疗和预后评估提供了参考价值关键词 : 高频超声心动图 ; 心梗模型 ; 左室收缩功能 ; 左室舒张功能 ; 局部室壁运动指数 High-frequency echocardiography for assessment of regional wall motion abnormality and cardiac function in mice with myocardial infarction WNG Jing 1, TN Weijiang 1, LI Xiang 1, 2, ZHNG Guiping 3, HUNG Jiayuan 4, CHEN Xiaohong 1, LEI Qian 5, YNG Fenghua 1, HUNG Ren 1, 2 1 Guangdong Key Laboratory for Laboratory nimals, Guangdong Laboratory nimals Monitoring Institute, Guangzhou , China; 2 Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou , China; 3 Guangzhou Medical University, Guangzhou , China; 4 Zhongshan Hospital ffiliated to Fudan University, Shanghai , China; 5 Sichuan cademy of Medical Sciences & Sichuan Provincial People's Hospital, Department of nesthesiology, Chengdu , China bstract: Objective To evaluate the value of high-frequency echocardiography in assessing cardiac structure and function in a mouse model of myocardial infarction. Methods Twenty-five C57L/6 mice were randomly divided into sham-operated group (n=10) and myocardial infarction model group (n=15) established by ligation of the left anterior descending artery. The cardiac structure, regional wall motion and cardiac function of mice were examined with pulsed wave Doppler (PWD), tissue Doppler imaging (TDI), EKV and M-mode echocardiography 3 days before and at 1 week after the operation. The histological changes and myocardial structure of the heart were observed at 1 week after the operation. Results High-frequency echocardiography and HE staining detected obvious myocardial infarction in the mice in the model group. Compared with the sham-operated mice, the mice with myocardial infarction showed significant left ventricular expansion, obvious thinning of the ventricular wall, and significantly decreased ventricular systolic 收稿日期 : 基金项目 : 国家自然科学基金 ( ); 广东省科技专项 function and diastolic function with regional wall motion abnormality and ventricular remodeling. Conclusions ( ); 国家自然科学基金 - 青年科学基金 ( ); 广东 2D-type echocardiography combined with M-mode, 省实验动物重点实验 ( ) Supported by National Natural Science Foundation of China ( ). 作者简介 : 王静, 硕士, 助理研究员, wjscau1987@163.com; 谭伟江, 学士, 实习研究员, 电话 : , @qq.com; PWD, TDI and EKVTM for allows accurate and sensitive detection of the loci and severity of myocardial infarction to provide important evidence for clinical diagnosis and treatment of myocardial infarction. 李想, 硕士, 电话 : , @qq.com 王静 Keywords: high-frequency echocardiography; 谭伟江李想共同为第一作者 myocardial infarction; ventricular systolic function; 通信作者 : 杨丰华, 副研究员, 电话 : , fenghua. yang@gdlami.com; 黄韧, 研究员, 电话 : , ventricular diastolic function; regional ventricular wall motion index labking@sohu.com

的射血分数正常, 却预后不良, 即使收缩功能异常, 心衰进程也取决于舒张功能 [5] 异常的程度小鼠心梗模型是阐明发病机制确定药 [6-8] 物治疗靶点以及药效评价的基本前提, 应用超高分辨率小动物超声心动图是评价小鼠心梗模型无创的最有 [9-10] 效与常用的方法, 在国内外文献报道中主要采用 M 型超声心动图来评价心梗模型小鼠心室收缩功能, 而联合脉冲多普勒 (PWD) 组织多普勒

2 试剂与仪器异氟烷 ( 深圳市瑞沃德生物生物科技有限公司 ), 眼科手术显微镜 ( 上海铁德医疗设备有限公司, SM-2000L), 小动物呼吸麻醉机 (Matrx, 美国 ),MP 生物信号采集分析系统 ( 上海奥尔科特生物科技有限公司 ), 显微外科手术器械 ( 苏州医疗器械厂 ), 超高分辨率小动物超声系统 (Vevo2100,Canada), 显微镜 ( 德国 Leica) 1.

2 J South Med Univ, 2017, 37(8): 由冠状动脉血管栓塞或粥样硬化导致的心梗及随后发展的心衰是严重危险人类健康的心血管疾病, 有极高的发病率和死亡率, 预后不良, 呈逐年持续增长, 且至 [1-4] 今尚未完全阐明其疾病机制临床研究表明, 大多数心脏病患者左室舒张功能异常发生在左室收缩功能异常之前, 在心衰患者中近 50% 的射血分数正常, 却预后不良, 即使收缩功能异常, 心衰进程也取决于舒张功能 [5] 异常的程度小鼠心梗模型是阐明发病机制确定药 [6-8] 物治疗靶点以及药效评价的基本前提, 应用超高分辨率小动物超声心动图是评价小鼠心梗模型无创的最有 [9-10] 效与常用的方法, 在国内外文献报道中主要采用 M 型超声心动图来评价心梗模型小鼠心室收缩功能, 而联合脉冲多普勒 (PWD) 组织多普勒 (TDI) 及 EKV TM 超声心动图综合评价心梗模型小鼠心功能与室壁运动异常情况报道罕见这种情况致使实验研究不能紧密契合临床诊治指标, 不能及时准确评估心肌梗死进程及预后因此, 本研究拟联合采用 2D M-mode 多普勒与 EKV TM 超声技术探讨心梗模型小鼠心脏形态结构, 心功能以及局部室壁运动的改变, 准确灵敏地确定心梗区域以及心梗程度, 为临床心肌梗死诊断治疗和预后评估提供了可靠的参考价值 1 材料和方法 1.1 实验动物 12 周 SPF 级雄性 C57L/6 小鼠 25 只, 体质量 26± 2 g, 由广东省医学实验动物中心提供 [SCXK( 粤 ) ], 无菌手术组织取材以及无创超声在广东省实验动物监测所屏障动物实验设施内进行 [SYXK ( 粤 ) ], 并以实验动物使用的 3R 原则给予人道的关怀 1.2 试剂与仪器异氟烷 ( 深圳市瑞沃德生物生物科技有限公司 ), 眼科手术显微镜 ( 上海铁德医疗设备有限公司, SM-2000L), 小动物呼吸麻醉机 (Matrx, 美国 ),MP 生物信号采集分析系统 ( 上海奥尔科特生物科技有限公司 ), 显微外科手术器械 ( 苏州医疗器械厂 ), 超高分辨率小动物超声系统 (Vevo2100,Canada), 显微镜 ( 德国 Leica) 1.3 实验方法动物分组及心梗模型建立按小鼠开胸后是否结扎冠状动脉左前降支将小鼠分为 2 组, 即心梗模型组 (MI)15 只和假手术对照组 (SH)10 只小鼠在 3.0% 异氟烷吸入麻醉后取仰卧位, 头部和四肢固定于手术台上, 且四肢涂上导电胶并固定在电极, 采用 MP 生物信号采集分析系统实时监测小鼠生理指标变化使用 20 号套管穿刺针针鞘从口腔进入进行气管插管, 插管成功后, 连接呼吸麻醉机维持麻醉待插管与麻醉成功后, 左胸部脱毛, 沿左胸第 2 3 肋间切开皮肤肋间肌肉, 打开胸腔, 剪开心包膜并充分暴露心脏以左心耳下缘为标志, 左心耳根部下 2~3 mm 用 6-0 无创缝线穿过冠状动脉左前降支, 进针深度 0.8 mm, 缓慢结扎冠脉以防撕裂心肌结扎后观察局部心肌变化 (1 min 左右左室外膜呈苍白 ) 以及动态心电图监测 ST 段抬高或压低, 初步认为建模成功然后, 常规关闭胸腔且在最后关闭时挤压小鼠胸腔, 避免形成气胸, 待心跳恢复正常后拔掉气管插管小鼠术后注意保温及预防感染假手术对照组开胸后,6-0 无创缝线穿过冠状动脉左前降支, 但不结扎, 其它操作与心梗手术一致 ( 图 1) C D 图 1 小鼠心梗手术过程 Fig.1 Operation of the mice for inducing myocardial infarction. : Thoracotomy; : The left anterior descending coronary artery; C: Position of the mice on the ultrasound fixation table; D: Papillary muscle transverse position showing the right ventricle, gray for the myocardial infarction area 心脏超声心动图评价术前 3 d 与术后 1 周, 对所有实验小鼠进行心脏超声检查小鼠在 2.0% 异氟烷吸入麻醉下仰卧位固定于 37 恒温加热板上, 胸部及上腹部脱毛, 充分暴露皮肤后, 应用 Vevo2100 小动物超声机, 采用 MS-550D 探头进行超声检测取胸骨长轴切面, 在左室长轴切面基础上, 探头顺

1016 J South Med Univ, 2017, 37(8): 1014-1021 http://www.j-smu.

3 1016 J South Med Univ, 2017, 37(8): 时针旋转 90, 即左室短轴切面, 应用 M 型记录左室运动情况, 测量左室舒张末期前壁厚度 (LVW;d) 左室收缩末期前壁厚度 (LVW;s), 左室舒张末期后壁厚度 (LVPW;d) 左室收缩末期后壁厚度 (LVPW;s), 左室舒张末期内径 (LVED;d) 左室收缩末期内径 (LVED;s), 计算左室射血分数 (LVEF) 和左室短轴缩短率 (LVFS) 此外, 取胸骨长轴切面, 将取样容积置于主动脉瓣上, 调整角度, 使取样尽可能与升主动脉血流方向一致, 获得主动脉瓣口血流频谱图像, 测量升主动脉血流峰值 (V) 随后将探头角度稍微转向小鼠左肩, 充分显示肺动脉, 将取样容积置于肺动脉瓣上, 获得肺动脉瓣口血流频谱, 测量肺动脉血流峰值 (PV) 取心尖四腔切面, 采用 PWD 测定二尖瓣口血流频谱, 记录舒张早期血流峰值速度 (E) 舒张晚期血流峰值速度 (); 采用 TDI 测定二尖瓣瓣环运动速度, 记录二尖瓣环舒张早期峰值速度 (E') 二尖瓣环舒张晚期峰值速度 (') 和收缩期峰值速度 (S'), 计算 E'/' 和 E/E'; 在彩色多普勒血流显像下, 记录二尖瓣口 M 型彩色多普勒图像, 获得舒张早期左心室血流传播速度 ; 在取得满意胸骨旁长轴后, 彩色血流定位肺静脉左房入口处获得肺静脉频谱, 记录肺静脉收缩期峰值速度 (PVS), 肺静脉舒张期正向峰值速度 (PVD), 房缩期肺静脉负向峰值速度 (PV pk) 取心尖五腔切面, 将取样容积置于主动脉瓣下, 同时显示出左室流出道及流入道的血流频谱, 在同一心动周期内采用 PWD 测量 : 流出道主动脉血流频谱结束至二尖瓣血流频开始时间作为等容舒张期 (IRT), 心电图 R 波顶点至左室流出道收缩期血流频谱起点的时间即等容收缩时间 (ICT), 左室流出道射血时间 (ET), 计算 Tei Index=(ICT+IRT)/ ET 取乳头肌水平左室短轴切面, 在确认获得一致清晰的 ECG 信号后, 获取型图, 选用 EKV TM 模式进行测量节段性室壁运动情况计算室壁运动分数参照采用美国心脏病协会划分 17 节段 ( 图 2) 室壁运动指数的计算 : 正常 =1 分, 低活动性 =2 分, 无活动性 =3 分, 反向运动 =4 分, 室壁瘤样运动 =5 分通过观察测量心梗小鼠的室壁心内膜心脏运动幅度评分, 判断心梗小鼠室壁节段性运动异常 (RWM) 情况 asilar part Midial part Near apex cordis part pex cordis part 图 2 不同位置的短轴切面 () 和心壁运动的阶段划分 () Fig.2 Ventricular short axis view () and phases of ventricular wall motion (). 1: nterior ventricular septum basal segment; 2: nterior ventricular septum middle segment; 3: Posterior wall basal segment; 4: Posterior wall middle segment; 5: Posterior ventricular septum basal segment; 6: Posterior ventricular septum middle segment; 7: Posterior ventricular septum apical segments; 8: Lateral wall apical segments; 9: Lateral wall middle segment; 10: Lateral wall basal segment; 11: Inferior wall basal segment; 12: Inferior wall middle segment; 13: Inferior wall apical segments; 14: nterior wall apical segments; 15: nterior wall middle segments; 16: nterior wall basal segments; 17: Crdiac apex. 以上所有超声测量值均取 3 个连续心动周期以上的平均值心肌组织病理学观察术后 1 周, 超声检测完后麻醉处死小鼠, 取出心脏, 用 10% 福尔马林固定, 石蜡包埋切片, 进行 HE 染色观察心肌组织病理学变化 1.4 数据统计分析实验结果采用 SPSS 13.0 软件进行统计分析, 所有数据均以均数 ± 标准差表示, 组间比较采用 t 检验, 当 P< 0.05 认为差异具有统计学意义 2 结果 2.1 心梗小鼠左室形态结构的改变术后 1 周, 与假手术对照组比较, 心梗模型组型超声显示心脏有明显心梗区域,M 超声心动图显示左心

4 J South Med Univ, 2017, 37(8): 室前壁变薄 ( 图 3) 与假手术组比较, 心梗模型组小鼠的 LVED;d LVED;s LVEV;d LVEV;d 以及 od 均明显增加 (P<0.05),LVW;d 和 LVW;s 均显著变薄 (P<0.05), LVPW;d LVPW;s LV Mass 未见明显改变 (P>0.05) 且在整个超声检测过程中实验小鼠的心率无明显差异 (P>0.05, 表 1) 表 1 心梗小鼠左室形态结构与收缩功能的超声参数 Tab.1 Echocardiographic parameters of the left ventricular structure and systolic function in mice with MI (Mean±SD) Echocardiography parameters LVW; d (mm) LVW; s (mm) LVID; d (mm) LVID; s (mm) LVPW; d (mm) LVPW; s (mm) LVEV; d (ml) LVEV; s (ml) EF (%) FS (%) LV Mass (mg) od (mm) scending aorta peak (mm/s) Pulmonary artery peak (mm/s) HR Sham group (n=10) 0.73± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± 心梗小鼠左室收缩功能的改变 LVEF 和 LVFS 是评价左室收缩功能的主要指标, 其中,LVEF 是反应左心室心肌纤维缩短功能,LVFS 是反应应力 - 缩短的关系结果显示, 与假手术组比较, 心梗模型组的 LVEF 和 LVFS 显著下降 (P<0.05, 表 1) 此外, 升主动脉血流峰值也是反映心室收缩功能的重要指标之一结果显示, 与假手术对照组比较, 心梗小鼠升主动脉血流峰值显著下降 (P<0.05), 但肺动脉血流峰值未见明显改变 (P>0.05, 表 1, 图 3) 2.3 心梗小鼠的左室舒张功能的改变 MI group (n=15) 0.23±0.02* 0.25±0.05* 4.94±0.21* 4.28±0.19* 0.79± ± ±8.30* 80.39±7.62* 33.71±7.18* 18.66±4.35* 71.38± ±0.22* ±12.09* ± ±13 LVW; d: Left ventricular end-diastolicanterior wall thickness; LVW; s: Left ventricular end-systolic anterior wall thickness; LVID; d: Left ventricular end -diastolic dimension; LVID; s: Left ventricular end-systolic dimension; LVPW; d: Left ventricular end-diastolic posterior wall thickness; LVPW; s: Left ventricular end-systolic posterior wall thickness; LVEV; d: Left ventricle end diastolic volume; LVEV; s: Left ventricle end systolic volume; EF: Ejection fraction; FS: Fractional shortening; LV: Left ventricular; od: orta of dimension; HR: Heart rate. *P<0.05 vs sham group. 结合二尖瓣环 TDI 频谱和二尖瓣 PWD 频谱综合评价左室舒张功能与假手术组比较, 心梗模型组 E' 峰显著下降 (P<0.05),E'/' 显著下降 (P<0.05),IRT IVT Tei 以及 E/E'(18.79±5.36 vs 22.91±6.29) 增大 (P<0.05), 而 ET 下降 (P>0.05), 但无统计学意义此外, 应用 PWD 测定 [11] 肺静脉血流也可评价心脏舒张功能与假手术组比较,PV D PV 分别降低了 33% 和 15%, 且反应左室舒张特性 PV S/PV D 值亦显著增大 (0.4±0.06 vs 0.79± 0.32,P<0.05), 但代表心室收缩期的 PV S 无明显改变 (P>0.05, 表 2, 图 4) 2.4 心梗小鼠局部室壁运动异常指数与假手术对照组比较, 心梗模型组小鼠在心脏不同位置 ( 基底部中部近心尖部以及心尖部 ) 进行评分, 均显示室壁运动具有显著性差异 (P<0.05, 图 5) 2.5 心梗小鼠心肌组织 HE 染色常规 HE 染色后, 与假手术对照组比较, 心梗模型组小鼠心肌可见明显的梗死区, 在梗死及梗死边缘区肌纤维排列絮乱, 肌丝断裂, 甚至溶解, 心肌细胞坏死, 纤维结缔组织增生, 以及大量炎性细胞浸润 ( 图 6) 3 讨论随着生活方式的改变和生活水平的提高, 心血管疾病已严重威胁着人类健康和生命, 尤其是心肌梗死被人类视为健康第一杀手在研究心血管疾病发展过程中观察心脏形态结构心功能以及室壁运动异常的改变, 对于探索疾病发展治疗及预后具有极其重要意 [11] 义而高分辨率小动物超声仪以无创快速高效及高分辨率等优势, 已成为应用最为广泛的评价小动物心肌梗死后心脏形态结构及功能改变的手段之一国内外文献对心功能的评价多集中于心脏形态结构和收缩功能的研究 ( 以 M 型获得基本参数为代表 ), 而结合心脏舒张功能与局部室壁运动指数来综合评价心脏结构和心功能报道极少见因此, 在该研究中, 我们应用超声常规技术和 EKV TM 技术评价了小鼠心肌梗死后舒张功能改变和节段性室壁运动异常结果提示, 超声常规技术分析可明确心梗后心室形态结构与心功能是否改变, 常规技术分析可确定心梗发生位置, 心功能减弱程度 ;EKV TM 分析可明确心肌梗死后是否出现室壁运动减弱, 节段性分析则可最终确定发生室壁运动异常的具体部位, 并对心肌异常运动的严重程度进行量化临床流行病学研究表明 : 在普通人群中左室舒张功能不全发生率为 27.3% [12] ; 在国内心力衰竭住院患者中约 33.3% 仅见左室舒张功能不全, 而收缩功能无异 [13] 常 ; 在国外文献报道其发病率为 56% [14], 高于国内, 此类患者与收缩功能降低心力衰竭的治疗差异较大, 与若 [15] 以心室收缩功能异常治疗常有害无益因此, 及时准确地检测左室舒张功能有无异常对临床治疗及预后评

1018 J South Med Univ, 2017, 37(8): 1014-1021 http://www.j-smu.

3 Ultrasonic evaluation of the left ventricular structure and systolic function in mice with MI.

of the heart in the MI group( short axis) ; E, I: Typical - and PWD of the aorta in the sham group( long axis);

aorta in the MI group( long axis); H, L: Typical - and PWD of the pulmonary artery in the MI group( long axis);

估有极其重要意义而二尖瓣血流脉冲多普勒频谱 (PWD) 是目前基础科研评价左室舒张功能异常的常用手段, 但临床研究发现 : 二尖瓣血流脉冲多普勒频谱不能单纯反应心室的舒张特性, 常表现假性正常化, 而

与左室舒张压有极强的相关性, 是评价心室舒张功能的有效指标因此, 采用二尖瓣口 PWD 与二尖瓣环 TDI 结合, 可以更准确全面地评价心室舒张功能, 为临床诊断提供可靠价值本研究显示,

5 1018 J South Med Univ, 2017, 37(8): Sham group MI group C D g g E F G H I J K L 图 3 超声评价小鼠左室形态结构和收缩功能 Fig.3 Ultrasonic evaluation of the left ventricular structure and systolic function in mice with MI., C: Typical - and M-mode images of the heart in the sham group( short axis);, D: Typical - and M-mode images of the heart in the MI group( short axis) ; E, I: Typical - and PWD of the aorta in the sham group( long axis); F, J: Typical - and PWD of the pulmonary artery in the sham group( long axis); G, K: Typical - and PWD of the aorta in the MI group( long axis); H, L: Typical - and PWD of the pulmonary artery in the MI group( long axis); g: Outflow tract of the left ventricle. The yellow arrow indicates the infarct area. 估有极其重要意义而二尖瓣血流脉冲多普勒频谱 (PWD) 是目前基础科研评价左室舒张功能异常的常用手段, 但临床研究发现 : 二尖瓣血流脉冲多普勒频谱不能单纯反应心室的舒张特性, 常表现假性正常化, 而二尖瓣环组织多普勒频谱 (TDI) 能区别假性正常化, 能更早期诊断左室舒张功能下降 [16-17] 此外,Nagueh [18] 等报道, 二尖瓣口血流速度 E 和二尖瓣环运动速度 E' 比值, 与左室舒张压有极强的相关性, 是评价心室舒张功能的有效指标因此, 采用二尖瓣口 PWD 与二尖瓣环 TDI 结合, 可以更准确全面地评价心室舒张功能, 为临床诊断提供可靠价值本研究显示, 心梗模型与假手术组比较,IVRT 明显延长,E' 显著下降,E/E' 比值显著上升, 与文献报道一致, 表明小鼠心梗后心室舒张功能下降此外,Tei 指数是综合评价心脏收缩与舒张功能的 [19-20] 重要指标研究发现随着心肌梗死的发生,Tei 与 [21] LVEF 呈负相关, 且相关性良好通过 Tei 指数不仅可以评价心肌梗死后的心脏的整体功能变化情况, 根据其计算公式 Tei 指数 =(ICT+IRT)/ET 还可以了解心功能障碍的时相, 从而更加准确深入地分析心肌梗死早期 [22] 的心功能变化情况本研究显示, 心梗模型组小鼠

http://www.j-smu.com J South Med Univ, 2017, 37(8): 1014-1021 1019 表 2 心梗小鼠左室舒张功能的超声心动图参数 Tab.

6 J South Med Univ, 2017, 37(8): 表 2 心梗小鼠左室舒张功能的超声心动图参数 Tab.2 Echocardiographic parameters of the left ventricular diastolic function in mice with MI (Mean±SD) Category Mitral valve PWD E peak rate (mm/s) peak rate (mm/s) IVR/ms IVC/ms ET/ms Tei Pulmonary venous PWD PVS (mm/s) PVD (mm/s) PV (mm/s) PVS/PVD ratios Mitral annulus TDI E' peak rate (mm/s) ' peak rate (mm/s) S peak rate (mm/s) E'/' ratios *P<0.05 vs sham group. Sham group (n=10) ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ± ±0.08 MI group (n=15) ±51.22* ±53.09* 18.53±1.45* 14.83±2.71* 49.78± ±0.06* ± ±68.85* 94.29±8.56* 0.79±0.32* 27.87±1.37* 28.58± ±1.35* 0.97±0.12* Sham group MI group S S E' ' E' ' C D E F 图 4 二尖瓣多普勒超声心动图 Fig.4 Doppler echocardiography of the mitral valve., : The location of the collection mitral valve orifice and mitral annulus spectrum; C, D: The TDI of the mitral annulus; E, F: The PWD of themitral valveorifice; a: IVCT; b: IVRT; c: ortic ejection time.

1020 J South Med Univ, 2017, 37(8): 1014-1021 http://www.j-smu.com Regional wall motion 14 12 10 8 6 4 2 0 * * Sham group MI group asilar Medial Near apex pex cordis cordis 图 5 心梗小鼠心室壁运动指数的改变 Fig.

* * Tei 指数较假手术组显著升高,LVEF 显著下降, 进一步表明小鼠心梗后心功能减退局部室壁运动异常是心肌缺血的早期特征性改变, 也是超声心动图诊断心肌梗死的基础, 对临床心肌梗死及时发现准确诊断以及治疗和预后具有重大意义 [23-24] 早在 1935 年 Tennt [25] 研究证实, 阻断冠状动脉血流数秒后立即出现供血区室壁运动异常 ; 结扎冠状动脉后, 超声心动图在

7 1020 J South Med Univ, 2017, 37(8): Regional wall motion * * Sham group MI group asilar Medial Near apex pex cordis cordis 图 5 心梗小鼠心室壁运动指数的改变 Fig.5 Changes of the ventricular wall motion index in mice with myocardial infarction. *P<0.05 vs sham group. * * Tei 指数较假手术组显著升高,LVEF 显著下降, 进一步表明小鼠心梗后心功能减退局部室壁运动异常是心肌缺血的早期特征性改变, 也是超声心动图诊断心肌梗死的基础, 对临床心肌梗死及时发现准确诊断以及治疗和预后具有重大意义 [23-24] 早在 1935 年 Tennt [25] 研究证实, 阻断冠状动脉血流数秒后立即出现供血区室壁运动异常 ; 结扎冠状动脉后, 超声心动图在 5~10 次心搏内检测到室壁运动异常, 且早于心电图 ST 段 -T 波改变传统的 2D 或 M 型超声技术对局部室壁运动异常评价还有所欠缺, 无法精准定位和 [26] 定性, 主观依赖性强, 而 EKV TM 超声技术可以将小鼠心脏等高速运动的慢动作回放解剖 M 型 TDI 及左图 6 心梗小鼠心肌组织 HE 染色 Fig.6 Myocardial HE staining in mice with MI. : Infarction border region; : Infarction region with lymphocyte infiltration (yellow arrows), neutrophil infiltration (blue arrows) and fibroustissue hyperplasia (black arrows). 室功能自动测量等, 其中 TDI 联合解剖 M 型心动图能够弥补传统超声心动图的不足, 能够更全面快速准确地评价局部室壁运动异常情况以及较准确判定室壁运动 [27-29] 异常节段的解剖位置本研究采用 EKV TM 超声心动图测定局部室壁运动指数, 结果显示心梗小鼠心脏的不同部位 ( 基底部中部近心尖部及心尖部 ) 评分均表现室壁运动显著降低, 其判断的敏感度特异度与文献 [30] 报道相似综上所述, 本研究通过 2D M-mode 多普勒以及 EKV TM 等超声技术, 从不同角度观察心脏形态结构和心功能变化, 将各指标有机结合, 能够更全面敏感地评价小鼠心梗后节段性室壁运动异常和整体心功能的改变, 准确评估心肌梗死程度, 为临床心肌梗死的诊断治疗及预后评估提供重要参考价值

8 J South Med Univ, 2017, 37(8): 参考文献 : [1] Writing Group Members, Mozaffarian D, enjamin EJ, et al. Executive summary: heart disease and stroke statistics update: a report from the merican heart association [J]. Circulation, 2016, 133(4): [2] Edlinger C, Schreiber C, Wernly, et al. Stem cell therapy for myocardial infarction revisited[j]. Stem Cell Rev, 2015, 11(5): [3] Zaman S, Kovoor P. Sudden cardiac death early after myocardial infarction: pathogenesis, risk stratification, and primary prevention [J]. Circulation, 2014, 129(23): [4] Khan R, inabdulhak, lastal Y, et al. Cardioprotective role of ischemic postconditioning in acute myocardial infarction: a systematic review and meta-analysis[j]. m Heart J, 2014, 168(4): e4. [5] 罗莲, 汪汉, 蔡琳. 左室舒张功能不全性心力衰竭的最新进展 [J]. 心血管病学进展, 2015, 17(4): [6] Zaragoza C, Gomez-Guerrero C, Luis Martin-Ventura J, et al. nimal models of cardiovascular diseases[j]. J iomed iotechnol, 2011(1): 131. [7] 王鑫, 宋佳格, 穆成吉, 等. 冠状动脉结扎法制作大鼠心梗模型研究进展 [J]. 广州医药, 2016, 47(6): 93-5, 96. [8] 李峰杰, 李贻奎. 心肌梗死动物模型研究进展 [J]. 中国药理学通报, 2013, 29(1): [9] 刘建, 范慧敏, 汪进益, 等. 小鼠心梗模型的建立与无创评价 [J]. 中国实验动物学报, 2010, 18(3): 196-8, 后插 3. [10]Kandalam V, asu R, braham T, et al. TIMP2 deficiency accelerates adverse post-myocardial infarction remodeling because of enhanced MT1-MMP activity despite lack of MMP2 activation [J]. Circ Res, 2010, 106(4): [11] 赵静, 曾智, 颜亮, 等. 小动物超声仪与临床用超声仪评价小鼠心脏重构的对比分析 [J]. 南方医科大学学报, 2011, 31(3): [12]Kloch-adelek M, Kuznetsova T, Sakiewicz W, et al. Prevalence of left ventricular diastolic dysfunction in European populations based on cross-validated diagnostic thresholds[j]. Cardiovasc Ultrasound, 2012, 10(1): 18. [13] 胡晓贞, 董耀荣. 舒张性心力衰竭的研究进展 [J]. 中西医结合心脑血管病杂志, 2014, 12(5): [14]ytyçi I, Haliti E, erisha G, et al. Left ventricular longitudinal systolic dysfunction is associated with right atrial dyssynchrony in heart failure with preserved ejection fraction[j]. Revista Portuguesa de Cardiologia, 2016, 35(4): [15] 宾利沙. 彩色多普勒超声心动图评价冠心病左室舒张功能的临床价值 [J]. 中华现代影像学杂志, 2011, 9(30): [16] 汪晶晶, 陈韵岱, 王晶, 等. 双脉冲多普勒超声心动图技术测量 TE-e' 评估冠心病患者左心室舒张功能 [J]. 南方医科大学学报, 2014, 94 (3): [17] 王晶明, 闫自强, 白新艳, 等. 组织多普勒显像评价冠心病患者左心室舒张功能的价值 [J]. 中华超声影像学杂志, 2008, 17(9): [18]Nagueh SF, Middleton KJ, Kopelen H, et al. Doppler tissue imaging: a noninvasive technique for evaluation of left ventricular relaxation and estimation of filling pressures[j]. J m Coll Cardiol, 1997, 30(6): [19]Goroshi M, Chand D. Myocardial performance index (Tei index): a simple tool to identify cardiac dysfunction in patients with diabetes mellitus[j]. Indian Heart J, 2016, 68(1): [20]Mahajan, Henry, Meriki N, et al. The (Pulsed-Wave) doppler fetal myocardial performance index: technical challenges, clinical applications and future research[j]. Fetal Diagn Ther, 2015, 38(1): [21] 潘永寿, 庾红玉, 阮坚, 等. 实时三维超声心动图联合 Tei 指数评价心力衰竭患者心功能的研究 [J]. 广西医学, 2014, 43(5): [22] 胡珍, 陈景瑞, 魏静, 等. 冠状动脉结扎制备大鼠心肌梗死模型及评价实验研究 [J]. 天津中医药, 2016, 33(2): [23]Wild S, Roglic G, Green, et al. Global prevalence of diabetes: estimates for the year 2000 and projections for 2030[J]. Diabetes Care, 2004, 27(5): [24] 孙月, 杨道玲, 王禹雪. 超声心动图常规及新技术评价兔心肌梗死模型 [J]. 中国超声医学杂志, 2016, 32(7): [25]Tennt RJ. The effects of occhission on myocardial contraction[j]. m J Physiol, 1935(112): 351. [26]Peteiro J, Monserrat L, Fabregas R, et al. Comparison of twodimensional echocardiography and pulsed Doppler tissue imaging during dobutamine-atropine stress testing to detect coronary artery disease[j]. Echocardiography, 2001, 18(4): [27] 陈薇, 林萃灵, 段玲. 解剖 M 型超声心动图在冠心病节段性室壁运动异常检测中的应用 [J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2016, 37(23): [28] 张荣利, 朱天刚. 超声技术在心血管疾病诊治及研究中的应用 [J]. 现代仪器, 2008, 14(5): [29] 王军里, 付良轩. 解剖 M 型超声心动图和组织多普勒对冠心病室壁运动异常的诊断价值 [J]. 现代中西医结合杂志, 2013, 22(6): [30] 李昊, 张幼怡, 沈蔷, 等. 超声二维斑点追踪技术评价小鼠心肌梗死后节段性室壁运动异常 [J]. 中国分子心脏病学杂志, 2015(3): ( 编辑 : 吴锦雅 )

TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C

TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C 2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~