20 卷黄琴等 439 源于植物多酚及黄酮化合物. 石斛是常用名贵中药材, 为兰科 (Orchidaeae) 石斛属 (Dendlvbium) 多种植物的新鲜或干燥茎的统称. 传统中医 常将其用于滋阴清热 生津益胃 止咳润肺, 现代药理研究 表明石斛具有多种医药功效, 可预防和治疗白内障 [4] 增

2014-06-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.04028 应用与环境生物学报 Chin J Appl Environ Biol 2014,20 ( 3 ) : 438-442 铁皮石斛多酚和黄酮含量及与抗氧化活性的相关性 * 黄琴沈杨霞张成静罗傲雪范益军 ** 四川农业大学园林植物系成都 611130 摘要通过测试 ABTS DPPH 和羟自由基的清除活性和还原能力, 研究铁皮石斛不同极性提取物的体外抗氧化活性及其与多酚和黄酮含量的相关性. 采用溶剂提取法制备 4 个不同极性铁皮石斛提取物 (EE CE EAE NBE), 以 Vc 为阳性对照. 结果显示, 样品 CE 中总酚含量为 40.96 mg/g, 黄酮含量为 104.48 mg/g, 在各样品中含量最高. 体外抗氧化实验显示, 样品 CE 浓度为 375 μg/ml 时对 ABTS 自由基的清除率达到 100%, 其 IC 50 为 88.82 μg/ml;ce 浓度为 1 500 μg/ml 时对 DPPH 自由基的清除率达到 78.45%,IC 50 为 394.62 μg/ml;ce 浓度为 1 500 μg/ml 时还原能力为 62.29%, 随浓度增大到 3 000 μg/ml 时还原能力达 100%, 其 IC 50 为 905.06 μg/ml. 相关性研究显示各提取物对 ABTS DPPH 清除能力以及还原性与黄酮含量相关性较强, 相关系数分别为 0.845 0.902 和 0.994. 而各提取物的还原能力及对羟自由基的清除能力与样品中的多酚含量明显相关, 其相关系数为 0.521. 研究表明, 铁皮石斛 4 个不同极性提取物均具有较强的体外抗氧化活性, 且各提取物抗氧化活性与总酚含量和总黄酮含量之间有明显的相关性, 表明铁皮石斛抗氧化活性的物质基础可能就是酚类或黄酮类成分. 图 2 表 3 参 26 关键词铁皮石斛 ; 多酚 ; 黄酮 ; 抗氧化 CLC Q949.71 + 8.430.6 Correlation of the antioxidant property with the total phenolic content and total flavonoids of different Dendrobium officinale extracts * HUANG Qin, SHEN Yangxia, ZHANG Chengjing, LUO Aoxue & FAN Yijun ** Department of Landscape Plants, Sichuan Agriculture University, Chengdu 611130, China Abstract This study aimed to understand the correlation of the antioxidant activity with the content of phenolics compounds and flavonoids compounds in Dendrobium officinale in vitro. Four different polarity extracts (EE, CE, EAE and NBE) were prepared with different solvents. Antioxidant activity of the 4 samples was studied by reducing power assay, DPPH radical scavenging assay, ABTS radical scavenging assay and Hydroxyl radical scavenging assay with Vc as the positive control. The results indicated that CE had the highest content of phenolics compounds (40.96 mg/g) and flavonoids compounds (104.48 mg/ g). The antioxidant assays showed that CE had strong antioxidant ability on DPPH, ABTS and Hydroxyl radical. At 375 μg/ml, the scavenging rate of CE on ABTS got to 100% ( IC 50 = 88.82 μg/ml). At 1 500 μg/ml, the scavenging effect on DPPH was 78.45% (IC 50 = 394.62 μg/ml). The reducing power of CE was also strong, 62.29% at 1 500 μg/ml, and 100% (IC 50 = 905.06 μg/ml) at 3 000 μg/ml. The results of correlation study showed that compared with the content of phenolics, the content of flavonoids had a stronger relationship with the ABTS (r = 0.845), DPPH radical (r = 0.902) scavenging activity and the reducing power (r = 0.994), whereas the content of phenolics had a stronger relationship with Hydroxyl radical (r = 0.521) scavenging activity than the content of flavonoids. This research indicated that there is a close relationship between the content of phenolics and flavonoids and the antioxidant activity of all extracts, and the material basis of antioxidant activity of Dendrobium officinale may be phenolics and flavonoids. Keywords Dendrobium officinale; polyphenol; flavonoid; antioxidant 自由基学说认为生物体的衰老 癌变 炎症以及免疫性疾病等都与自由基代谢失衡有关 [1-2]. 因此, 只要保持体内自 收稿日期 Received: 2014-04-12 接受日期 Accepted: 2014-05-06 * 大学生创新实验计划项目 (121062655) 和四川省教育厅重点项目 (12ZA274) 资助 Supported by the National Innovation Experiment Program for University Students (121062655) and the Education Department Foundation of Sichuan Province ( 12ZA274) ** 通讯作者 Corresponding author (E-mail: yijfan@126.com) 由基处于生成与清除的动态平衡状态, 就可以对抗由活性氧及其引发的脂质过氧化产生的疾病. 而抗氧化剂可以直接清除过剩自由基, 有效地防止或减轻体内自由基所导致的氧化损伤, 从而起到治疗与活性氧毒性有关的疾病 [3]. 在众多抗氧化剂中, 来自植物的天然抗氧化剂因高效无毒而备受人们欢迎. 因此多年来, 从具有抗氧化活性的植物中寻找其抗氧化的物质基础, 进而找到具有抗氧化活性的天然化合物一直是药学工作者们的研究热点. 研究表明, 天然抗氧化剂主要来

20 卷黄琴等 439 源于植物多酚及黄酮化合物. 石斛是常用名贵中药材, 为兰科 (Orchidaeae) 石斛属 (Dendlvbium) 多种植物的新鲜或干燥茎的统称. 传统中医 常将其用于滋阴清热 生津益胃 止咳润肺, 现代药理研究 表明石斛具有多种医药功效, 可预防和治疗白内障 [4] 增强 免疫功能 [5,6] 治疗肿瘤 [7,8] 降血糖 [9] [10-11] 抗氧化等, 在临床 中应用相当广泛. 目前我国 76 种石斛属植物中, 有近 40 种被作 为药用. 其中铁皮石斛 (Dendrobium officinale) 是药典明确收 载的药用石斛之一, 主要分布于我国西南和江南各省, 是珍 稀名贵药用石斛. 研究表明, 铁皮石斛主要含石斛多糖 生物 碱 氨基酸 微量元素和菲类化合物等有效成分 [12]. 有文献 报道铁皮石斛中存在黄酮及多酚类化合物 [13-14], 但目前还未 见其黄酮及多酚化合物的制备及相关生物活性的报道. 因此 我们拟在前人对铁皮石斛药用价值研究的基础上考察铁皮 石斛不同极性提取物的抗氧化活性, 并探讨其与多酚及黄酮含量的相关性, 以期寻找铁皮石斛抗氧化活性的物质基础. 1 材料与方法 1.1 材料与试剂 1.1.1 实验材料铁皮石斛购自云南普洱, 于 60 下烘干备用. 1.1.2 药品与仪器 DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 自 由基 (Sigma-Aldrich 公司 );ABTS 自由基 (Merck 公司 ); 羟自 由基试剂盒 ( 南京建成生物工程研究所 ); 福林酚试剂 (FC) ( 上海研域生物科技有限公司 ), 没食子酸 芦丁 乙醇 三氯甲烷 乙酸乙酯及其他试剂均为瑞进特 AR 级. 紫外可见分光光度计 ( 上海美谱达仪器有限公司 ), 旋 转蒸发仪 ( 上海亚荣生化仪器 ), 高速粉碎机 ( 永康市久品工 贸有限公司 ), 电子分析天平 ( 奥斯豪仪器有限公司 ), 电热 恒温水浴锅 ( 上海越磁电子科技有限公司 ), 台式高速冷冻离心机 ( 科大创新股份有限公司 ). 1.2 实验方法 1.2.1 样品的制备新鲜铁皮石斛茎清洗 烘干 粉碎成粉 末备用. 取铁皮石斛茎粉末于 400 ml 的烧杯中, 加 75% 乙醇室温提取 (3 200 ml, 每次 6 h). 残渣加 95% 乙醇室温提取 (3 400 ml, 每次 6 h). 合并上述提取液, 减压浓缩至浸膏状. 标明 EE. 取部分样品 ( 约总量的 3/4) 用 85% 乙醇溶解, 氯仿萃 取 (3 100 ml), 氯仿层减压浓缩至少量, 烘干, 标明 CE. 将 上述步骤中的残留液用乙酸乙酯萃取 (3 100 ml), 乙酸乙酯 层减压浓缩至少量, 烘干, 标明 EAE. 残留液继续加入正丁醇萃取 (3 100 ml), 正丁醇层浓缩至少量, 烘干, 标明 NBE. 1.2.2 样品中多酚含量的测定没食子酸标准储备液 : 准确 称取 0.250 0 g 没食子酸标准品, 用少量蒸馏水溶解, 定容于 250 ml 容量瓶中, 摇匀, 其质量浓度为 1.00 mg/ml. 没食子酸标准使用液 : 精密量取没食子酸标准储备液 5.00 ml 于 100 ml 容量瓶中, 加水至标线, 摇匀, 其质量浓度为 0.050 mg/ml. 精密量取没食子酸标准储备液 1.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 ml 于 100 ml 容量瓶中, 用蒸馏水定容, 配成标准系列. 分别吸取标准系列溶液 1.00 ml 于比色管中, 加入 0.3 ml FC 试剂, 混匀, 再加入 1.5 ml 7% 碳酸钠溶液, 加水定容 至 10 ml, 充分振摇, 室温下静置 20 min. 以试剂空白作参比, 用 1 cm 比色皿测定波长 760 nm 处的吸光度. 以测得的吸光度为纵坐标 (y) 没食子酸溶液的质量浓度为横坐标 (x,μg/ ml) 绘制标准曲线, 得到线性回归方程 [15-16]. 将样品配置成 1.00 mg/ml, 吸取试样溶液 1.00 ml 于比色管中, 加入 0.3 ml FC 试剂, 混匀, 再加入 1.5 ml 饱和碳酸钠溶液, 加水定容至 10 ml, 充分振摇, 室温下静置 20 min. 以试剂空白作参比, 用 1 cm 比色皿测定波长 760 nm 处的吸光度. 根据测得的吸光度和标准曲线回归方程, 计算样品中的多酚含量 ( 以没食子酸计 ). 1.2.3 样品中黄酮含量的测定精密称取芦丁对照品 20 mg, 置 100 ml 容量瓶中, 加 95% 乙醇 50 ml 使溶解, 然后加 50% 乙醇稀释至刻度, 即得 0.2 mg/ml 的对照品溶液. 精密量取对照品溶液 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 ml, 分别置于 10 ml 容量瓶中, 各加 50% 乙醇溶液使成 5 ml, 精密加入 5% 亚硝酸钠溶液 0.3 ml, 摇匀, 放置 6 min, 加入 10% 硝酸铝溶液 0.3 ml, 摇匀, 再放置 6 min, 加入 1 mol/l 氢氧化钠溶液 4 ml, 分别用 50% 乙醇稀释至刻度, 摇匀, 放置 15 min. 以第一瓶作空白, 用可见分光光度计在 510 nm 处测其吸收度, 作 A-C 标准曲线 ( 或计算其回归方程 ) [17]. 精密量取提取液 1 ml, 按上述标准曲线制备方法进行测定, 并由标准曲线或回归方程计算样品中总黄酮的含量. 1.2.4 ABTS 自由基清除活性将各样品及 Vc 标准品配制成浓度为 3 000 μg/ml 1 500 μg/ml 750 μg/ml 375 μg/ml 187.5 μg/ml 93.75 μg/ml 46.875 μg/ml 的样品液. 分别取 Vc 及各样品液 0.1 ml, 加入 1 ml 的 ABTS 溶液 (A 734 nm = 0.70 ± 0.02), 充分混合, 室温避光放置 20 min, 用紫外分光光度计 734 nm 处测定吸光度. 空白对照用超纯水代替样品液, 重复 3 次 [18-19]. 按下式计算清除率 : 清除率 =(A 空白对照 -A 样品 )/A 空白对照 100%. 其中,A 为吸光度. 1.2.5 DPPH 自由基清除活性将各样品及 Vc 标准品配制成浓度为 3 000 μg/ml 1 500 μg/ml 750 μg/ml 375 μg/ml 187.5 μg/ml 93.75 μg/ml 46.875 μg/ml 的样品液. 分别取 Vc 及各样品液 0.3 ml, 加入 0.9 ml 的 DPPH 甲醇溶液 (0.1 mmol/ L), 室温暗反应 30 min, 紫外分光光度计 517 nm 处测定吸光度 [20-21]. 空白对照用超纯水代替样品液, 重复 3 次. 按下式计算清除率 : 清除率 =(A 空白对照 -A 样品 )/ A 空白对照 100%. 其中,A 为吸光度. 1.2.6 清除羟自由基活性将各样品及 Vc 标准品配制成浓度为 3 000 μg/ml 1 500 μg/ml 750 μg/ml 375 μg/ml 187.5 μg/ml 93.75 μg/ml 46.875 μg/ml 的样品液. 采用羟自由基试剂盒检测, 紫外分光光度计 550 nm 处测定吸光度. 空白对照用超纯水代替样品液, 重复 3 次. 计算清除率. 1.2.7 还原性测定将各样品及 Vc 标准品配制成浓度为 3 000 μg/ml 1 500 μg/ml 750 μg/ml 375 μg/ml 187.5 μg/ ml 93.75 μg/ml 46.875 μg/ml 的样品液. 分别移取 Vc 标准品及各样品液 0.5 ml, 加入磷酸盐 PBS(pH 6.6 0.2 mol/l) 2.5 ml 和 30 mmol/l 铁氰化钾溶液 2.5 ml 充分混合,50 水浴 20 min. 分别向各反应液加入 2.5 ml 三氯乙酸 (0.6 mol/l) 混合均匀. 分别取上清液 2.5 ml, 各加入 2.5 ml 超纯水和 0.5 ml 三氯化铁 (6 mmol/l), 摇匀, 紫外分光光度计 700 nm 处测定其吸光度 [22-23]. 空白对照用蒸馏水代替样品液, 重复 3 次求平 Chin J Appl Environ Biol 应用与环境生物学报

440 铁皮石斛多酚和黄酮含量及与抗氧化活性的相关性 3 期 均值. 2 结果与分析 c 2.1 多酚和黄酮的含量以没食子酸为标准对照, 福林酚法测总多酚含量得标 准曲线为 y = 9.2519x + 0.0201(R 2 = 0.9998). 以芦丁为标准对照, 测总黄酮含量得标准曲线 y = 1.0787x + 0.0003(R 2 = 0.9996). 铁皮石斛各样品中总多酚和总黄酮含量结果见表 1. 从表 1 可知各样品总多酚含量规律为 CE > EAE > NBE > EE, 且 CE 的总黄酮含量最高,NBE 最低. 表 1 铁皮石斛不同样品中的总酚和总黄酮效价 Table 1 Contents of total phenolic and total flavonoids in extract (fractions) of Dendrobium officinale 样品 Sample EE CE EAE NBE 总酚类效价 Total phenolic content (w/mg g -1 ) 总黄酮类效价 Total flavonoid content (w/mg g - 1) - 40.96 35.02 20.79 33.40 104.48 26.61 5.59 EE: 乙醇提取部分 ;CE: 氯仿萃取部分 ;EAE: 乙酸乙酯萃取部分 ;NBE: 正丁醇萃取部分. - : 未检出. EE: ethanol extracts; CE: chloroform extracts: EAE: ethyl acetate extracts: NBE: n-butanol extracts. - : not determined. 2.2 样品对 ABTS 自由基的清除能力样品和 Vc 对 ABTS 自由基的清除能力 ( 图 1A) 呈现一定 的浓度依赖性. 其中样品 CE 浓度为 375 μg/ml, 样品 EE 浓度 为 750 μg/ml, 样品 EAE 和样品 NBE 浓度均为 1 500 μg/ml 时, 对 ABTS 自由基的清除率均能达到 100%. 样品清除 ABTS 的半 抑制率从大到小为 EAE > NBE > EE > CE. 结果表明所有样品 均对 ABTS 自由基有良好的清除能力, 样品 CE 效果最佳, 其 IC 50 为 88.82 μg/ml( 表 2). 2.3 样品对 DPPH 自由基的清除能力样品和 Vc 对 DPPH 自由基的清除能力 ( 图 1B) 呈现一定 的浓度依赖性, 且各样品对 DPPH 自由基的清除能力大小为 CE > EE > NBE > EAE, 样品清除 DPPH 的半抑制率从大到小 为 CE > EE > NBE > EAE. 其中 CE 的 IC 50 最小为 394.62 μg/ml, EAE 的 IC 50 最大为 1833.15 μg/ml( 表 2). 2.4 样品对羟自由基的清除能力样品对羟自由基的清除能力呈现一定的浓度依赖性 ( 图 1C). 在低浓度时, 样品 EAE 对羟自由基的清除能力最强, 超过阳性对照. 随浓度增加, 各样品的清除能力趋于平稳, 而样品 EAE 的活性明显高于其他提取物, 其 IC 50 为 714.19 μg/ ml, 样品 NBE 的 IC 50 最大为 2102.91 μg/ml( 表 2). 2.5 样品的还原能力各样品的还原结果 ( 图 2) 显示, 样品对羟自由基的清除 能力呈现一定的浓度依赖性, 而不同的样品对羟自由基的清 除能力也不同, 阳性对照 Vc 的还原能力明显大于各样品. 各 样品中 CE 的还原能力最强, 在高浓度时, 接近阳性对照,IC 50 为 905.06 μg/ml( 表 2). 样品 EE 和 NBE 也表现出较强的还原 力, 其 IC 50 分别为 1498.07 μg/ml 和 2567.17 μg/ml( 表 2). 而样品 EAE 还原力最弱. 图 1 各样品对 ABTS(A) DPPH(B) 以及羟自由基 (C) 的清除能力. Fig. 1 Scavenging effects on ABTS (A), DPPH (B) and OH radicals (C). 表 2 不同样品的抗氧化活性 IC 50 Table 2 IC 50 of different extracts for various antioxidant systems 样品 Sample ABTS DPPH OH 还原性 Reducing power EE 135.63 777.76-1498.07 CE 88.82 394.62 1589.03 905.06 EAE 403.75 1833.15 714.19 - NBE 201.73 981.96 2102.91 2567.17 - : 未检出. - : not determined. 图 2 各样品的还原能力. Fig. 2 Reducing power of the samples. 2.6 样品中总多酚 总黄酮与抗氧化性的相关性 4 种提取物抗氧化活性与总酚含量和总黄酮含量之间的 c 应用与环境生物学报 Chin J Appl Environ Biol

20 卷黄琴等 441 相关性 ( 表 3) 显示, 各提取物对 ABTS DPPH 清除能力以及还原性与黄酮含量相关性较强, 相关系数分别为 0.845 0.902 和 0.994. 羟自由基的清除能力与样品中的多酚含量明显相 关, 其相关系数为 0.521, 而与黄酮含量相关性较弱 ( 相关系 数为 -0.156). 各提取物的还原能力与其多酚含量也有一定相 关性, 其相关系数为 0.600. 而 ABTS 和 DPPH 自由基的清除与多酚含量相关性较弱. 表 3 黄酮和多酚含量与抗氧化活性的相关性 Table 3 Correlations between the 1/IC 50 values of antioxidant activities and phenolics and flavonoids content of Dendrobium officinale 抗氧化实验 相关系数 Correlations Antioxidant assay 黄酮 Flavonoids 多酚 Phenolics ABTS + 0.845 0.038 DPPH 0.902 0.237 OH -0.156 0.521 还原力 Reducing power 0.994 0.600 3 讨论与结论 资料显示, 植物中酚类化合物是一种天然抗氧化剂, 其中多酚和黄酮中酚羟基结构中的邻位酚羟基很容易被氧 化成醌类结构, 同时对活性氧等自由基具有很强的捕捉能 力, 这使得多酚和黄酮具有较强的抗氧化性以及清除自由基 的能力, 且抗氧化活性的强弱与其所含多酚和黄酮类成分 含量的高低具有较高的相关性. 我们的实验结果表明, 铁皮 石斛各极性提取物均有一定的抗氧化活性, 其中样品 CE 对 ABTS DPPH 自由基清除效果最好, 还原性最强, 其 IC 50 分别 为 88.82 μg/ml 394.62 μg/ml 和 905.06 μg/ ml. 而样品 EAE 对 羟自由基清除效果最好, 其 IC 50 为 714.19 μg/ml, 其次是样品 CE(IC 50 为 1 589.03 μg/ml). 通过相关性研究发现, 各提取物 抗氧化活性与总酚含量和总黄酮含量之间有明显的相关性, 对 ABTS DPPH 清除能力以及还原性与黄酮含量相关性较 强, 羟自由基的清除能力与样品中的多酚含量明显相关. 即 实验样品的抗氧化活性与多酚和黄酮含量均密切相关. 这也 充分证明了铁皮石斛抗氧化活性的物质基础可能就是多酚 或黄酮, 因此我们寻找铁皮石斛的抗氧化活性成分应从多酚 或黄酮类成分着手. 同时研究还发现不同的抗氧化体系与铁 皮石斛中的多酚和黄酮相关性表现各异, 这可能是由于铁皮石斛中多酚和黄酮的种类及结构不同所引起的. 研究表明, 植物酚类含量及种类与抗氧化活性强弱有 关 [24]. 如在多酚抗油脂氧化性实验中, 有研究者发现表棓儿 茶素棓酸酯 > 棓酸 > 表棓儿茶素 > 咖啡酸 > 表儿茶素 > 阿 魏酸 > 鞣花酸 [25]. 而在黄酮类化合物抗氧化活性强弱的研究中, 有人发现黄酮结构中具有 B-4 -OH 时其抗氧化活性强于 B 环其他羟基基团, 而 C-3-OH 基则无抗氧化性表现, 同时 C-2 3 双键和 A 环 OH 基对黄酮的抗氧化活性也有较强的影响 [26]. 而一些黄酮化合物如黄酮醇 黄酮 黄烷醇 异黄酮等, 因 其常常与糖类结合, 以糖苷形式存在, 从而大大减少了其与 自由基的反应. 可见多酚和黄酮的抗氧化活性与其结构有着 非常密切的关系. 因此, 铁皮石斛中多酚和黄酮的种类 结构以及与抗氧化活性的关系尚有待进一步阐释. 参考文献 [References] 1 Babbs CF. Free radicals and the etiology of colon cancer[j]. Free Radical Biol Med, 1990, 8 ( 2): 191-200 2 Olas B, Wachowicz B, Mielicki WP, Buczn A. Free radicals are involved in cancer procoagulant-induced platelet activation [J]. Thromb Res, 2000, 97 (3): 169-175 3 Dreher D, Junod AF. Role of oxygen free radicals in cancer development [J]. Eur J Cancer, 1996, 32 (1): 30-38 4 魏小勇, 龙艳, 詹宇坚, 李熙灿, 徐勤, 徐传磊. 金钗石斛提取物抗白内障的体外实验研究 [J]. 现代中药研究与实践, 2008, 22 (2): 27-31 [Wei XY, Long Y, Zhan YJ, Li XS, Xu Q, Xu CL. Study on the prevention of cataract in rat lens from Dendrobium nobile Lindl.extractives in vitro [J]. Res Practice Chin Med, 2008, 22 (2): 27-31] 5 范益军, 罗傲雪, 罗傲霜, 何涛, 刘静, 淳泽, 何兴金. 迭鞘石斛中性多糖 DDP1-1 体内免疫活性研究 [J]. 应用与环境生物学报, 2010, 16 (3): 376-379 [Fan YJ, Luo AX, Luo AS, He T, Liu J, Chun Z, He XJ. In vivo immunomodulatory activities of neutral polysaccharide (DDP1-1) from Dendrobium denneanum [J]. Chin J Appl Environ Biol, 2010, 16 (3): 376-379 6 Zha XQ, Luo JP, Luo SZ, Jiang ST. Structure identification of a new immunostimulating polysaccharide from the stems of Dendrobium huoshanense [J]. Carbohyd Res, 2007, 69 (1): 86-93 7 Wang JH, Luo JP, Zha XQ, Feng BJ. Comparison of antitumor activities of different polysaccharide fractions from the stems of Dendrobium nobile Lindl [J]. Carbohyd Polym, 2010, 79 (1): 114-118 8 罗傲雪, 宋关斌, 淳泽. 迭鞘石斛抗肿瘤作用研究 [J]. 应用与环境生物学报, 2007, 13 (2): 184-187 [Luo AX, Song GB, Chun Z. Inhibiting effect of tumor by Dendrobium denneanum [J]. J Appl Environ Biol, 2007, 13 (2): 184-187] 9 罗傲霜, 淳泽, 葛绍荣, 罗傲雪, 范益军, 刘鹏, 彭文景. 迭鞘石斛多糖降血糖作用研究 [J]. 应用与环境生物学报, 2006, 12 (3): 334-337 [Luo AS, Chun Z, Ge SR, Luo AX, Fan YJ, Liu P, Peng WJ. Effect of Dendrobium denneanum polysaccharide reducing blood glucose [J]. Chin J Appl Environ Biol, 2006, 12 (3): 334-337] 10 Fan YJ, He XJ, Zhou SD, Luo AX, Chun Z. Composition analysis and antioxidant activity of polysaccharide from Dendrobium denneanum [J]. Int J Biol Macromol, 2009, 45: 169-173 11 鲍素华, 查学强, 郝杰, 罗建平. 不同分子量铁皮石斛多糖体外抗氧化活性研究 [J]. 食品科学, 2009, 30 (21): 123-127 [Bao SH, Zha XQ, Hao J, Luo JP. In vitro antioxidant activity of polysaccharides with different molecular weights from Dendrobium candidum [J]. Food Sci, 2009, 30 (21): 123-127] 12 李玲, 邓晓兰, 赵兴兵, 曾勇, 欧阳冬生. 铁皮石斛化学成分及药理作用研究进展 [J]. 肿瘤药学, 2011, 1 (2): 25-45 [Li L, Deng XL, Zhao XB, Zeng Y, Ouyang DS. Progress in chemical constituents and pharmacological effects of Dendrobium officinale [J]. Oncol Pharm, 2011, 1 (2): 25-45] 13 Li Y, Wang CL, Wang YJ, Guo SX, Yang JS, Chen XM, Xiao PG. Three new bibenzyl derivatives from Dendrobium candidum [J]. Chem Pharm Bull, 2009, 57 (2): 218-219 Chin J Appl Environ Biol 应用与环境生物学报

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