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1 6 8 Vol. 6 No Journal of Food Safety and Quality Aug., 2015 王德伟 *, 叶礼红, 杨祖伟 (, ) 摘要 : 目的 方法, C 18, 0.68% : (V:V=82:18), 1.0 ml/min, 340 nm 结果 D mg/ml, 97.5%, RSD%=1.2(n=9) 结论, 关键词 : ; ; ; Determination of N-Sulfo-glucosamine potassium salt by reversed-phase high performance liquid chromatography with online pre-column derivation WANG De-Wei *, YE Li-Hong, YANG Zu-Wei (By-Health Co., Ltd., Zhuhai , China) ABSTRACT: Objective To establish a method for the determination of N-Sulfo-glucosamine potassium salt by reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC) with online pre-column derivation in health food. Methods Online pre-column derivation were reacted by using phthalic dicarboxaldehyde (OPA) derived reagents and amino of N-Sulfo-glucosamine potassium salt. The products were separated by C 18 column with 0.68% acetic acid buffer: methanol (V:V=82:18) as mobile phase, the flow rate of 1.0 ml/min, and detection wavelength of 340 nm. Results D-glucosamine hydrochloride concentration had a good linearity in the range of 0.052~1.045 mg/ml. The average recovery rate was 97.5%, RSD%=1.2 (n=9). Conclusion The method is high, simple and accurate, and can be used to determine the content of N-Sulfo-glucosamine potassium salt in pharmaceutics and health food. KEY WORDS: N-Sulfo-glucosamine potassium salt; online pre-column derivatization; phthalic dicarboxaldehyde derived reagents; reversed-phase high performance liquid chromatography 1 引言 D-,,,, ;, * 通讯作者 :,, @qq.com *Corresponding author: WANG De-Wei, Licensed Pharmacist, By-Health Co., Ltd., Zhuhai , China @qq.com

2 8, : 3071, [1,2],,, [3-7] [8] [9] [10] [11-15],, reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC), OPA,, 2 材料与方法 2.1 仪器与试剂 Agilent 1260 ( ); KQ-500E ( ); XW-80A ( ); XP-205 (Mettler Toledo ) OPA ( :, : BCBF1444); D- ( ); (, ); (, ); ( ) 2.2 色谱条件 : ZORBAX SB-C 18 5 μm, 4.6 mm 250 mm (Agilent); : 0.68% : =82:18 (V:V); : 1.0 ml/min; : 35 ; : 2 μl; : ; : 340 nm; : : OPA ( )2 μl; : 2 μl; : 6 ; : 1 min; : 2.3 溶液的制备 标准储备液 D-,, 1.0 mg/ml, 标准工作液 ml 10 ml,, 样品处理 0.2 g,, 50 ml, 3 min,,,, 2.4 线性试验 2.3.2,, (X), a β (Y),, 2.5 精密度试验 6, 2.3.3,, RSD(%) 2.6 加标回收率试验 0.1 g,, 3, 3, 3 D mg, 50 ml, 3 min,,,, 3 结果与讨论 3.1 GB/T 硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的测定液相色谱法 分析 GB/T nm,,,,, 340 nm,,, 3.2 标准曲线验证结果 D , mg/ml

3 表 1 标准曲线方程的结果 Table 1 The results of standard curve equation (r) D- Y=1868.9X 精密度实验 D- 2, 6 (RSD) 1.0%, 表 2 精密度的实验 (n=6) Table 2 The precision of the experiment (n=6) (%) (%) RSD(%) D 回收率实验 D- 3 3, 3 D- : 97.5%, (RSD) 2.0%,, D- D- D- D- 3.5 实际样品的测定 2.3.3, D-, a β, 1,, 4 结论 RP-HPLC, OPA, GB/T nm,,,,,,,, Table 3 表 3 加标回收率实验结果 (n=9) Standard addition recovery of experimental results (n=9) (mg) (mg) (%) (%) RSD(%) D

4 8, : Fig. 1 Chromatogram of sample 参考文献 [1],,. D- [J]., 2008, (1): Cao XM, Zhang ZZ, Liu WS. D-glucosamine hydrochloride in vitro anti-tumor and immune regulation [J]. Chin J Biochem Pharm, 2008, (1): [2],,. D- [J]., 2006, (2): Zhang L, Liu WS, Han BQ. Study on antitumor activity of D-amino glucose and its derivatives [J]. Chin J Mar Drugs, 2006, (2): [3],. [J]., 2003, (12): 36. Hu DY, Li JH. The clinical efficacy of glucosamine sulfate treatment of knee osteoarthritis [J]. Clin Meta, 2003, (12): 36. [4]. [J]., 2012, (9): Chen Y. Progress in clinical application of glucosamine sulfate [J]. Chin Pharm, 2012, (9): [5]. [J]., 2006, (8): 47. Wang HL. Treatment of osteoarthritis by amino acid sulfate [J]. J Med Forum, 2006, (8): 47. [6],. D- [J]., 2007, (1): Zhao YD, Wang XH. Research progress of D-amino glucose derivatives [J]. Chem Res, 2007, (1): [7],,,. D- [J]., 2007, (4): Zhang LJ, Hou DY, Xin G, et al. Preparation and antioxidant properties of D-glucosamine hydrochloride [J]. Food Sci. 2007, (4): [8],,,. [J]., 2001, (3): Ran L, Zhang R, Wen X, et al. Colorimetric determination of glucosamine hydrochloride tablets [J]. West Chin J Pharm Sci, 2001, (3): [9],. D- [J]., 2002, (2): Chen JD, Li W. Study on the titration and determination in health food D-glucosamine hydrochloride by Spectrophotometry [J]. Chin J Health Lab Technol, 2002, (2): [10],. [J]., 2009, (3): Li J, Wang YY. Determination of contents of amino glucose by derivatization gas chromatography [J]. Her Med, 2009, (3): [11],,,. HPLC [J]., 2009, (9): Zheng JG, Wang F, Nong YJ, et al. Determination of glucosamine

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