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1 6 8 Vol. 6 No Journal of Food Safety and Quality Aug., 2015 蔡 伟 江 *, 邓 鹏 飞, 刘 光 兰, 李 丹 (, ) 摘 要 : 目 的, 方 法 (4.6 mm 250 mm, 5.0 μm) ; : : : =70: 16: 14(V:V:V),, : 1.0 ml/min; : 40 ; : 10 µl; : 205 nm;, 结 果, 0.1~0.8 mg/ml(r=0.9999), 0.04 μg/ml, 20 μg/g, μg/g, (RSD) 0.6%, 99.37%(n=9) 结 论,,, 关 键 词 : ; ; Determination of phosphatidylcholine from soybean phospholipids by normal phase chromatography CAI Wei-Jiang *, DENG Peng-Fei, LIU Guang-Lan, LI Dan (By-Health Co., Ltd., Zhuhai , China) ABSTRACT: Objective To establish a method for the determination and quality control of phosphatidylcholine from soybean phospholipids in health food by normal-phase chromatography. Methods Chromatographic conditions for determination phosphatidylcholine were silica gel column (4.6 mm 250 mm, 5 μm), isocratic elution with isopropanol: n-hexane: water =70:16:14 (V:V:V) as mobile phase, the flow rate of 1.0 ml/min, the column temperature of 40, the sample volume of 10 μl and the detection wavelength of 205 nm. The methodology validation was used to investigate method detection limit, precision, recovery, etc. Results The results showed that phosphatidylcholine had a good linear relationship at the range of 0.1~0.8 mg/ml between peak area and concentration (r=0.9999). The detection concentration was 0.04 µg/ml, the LOQ was 20 µg/g, the DOQ was µg/g, the RSD was 0.6% and the average recovery rate was % (n=9). Conclusion The method is simple, accurate, sensitive and with good reproducibility by the method validation. It can be used for the determination of phosphatidylcholine from soybean phospholipids. KEY WORDS: soybean phospholipids; normal phase chromatography; phosphatidyl choline 1 引 言,,,,,,, ; * 通 讯 作 者 :,, @qq.com *Corresponding author: CAI Wei-Jiang, By-Health Co., Ltd., Zhuhai , China @qq.com

2 8, : 3099,,,, [1-5] [6] [7] [8-12] [13] [14],, 2 材 料 与 方 法 2.1 材 料 与 仪 器 ( Sigma ; : SLBB9069V; : 99.0%); (, ); (, ); ; ( ) (EQ-500, ); (15C, ( ) ); (, 4.6 mm 250 mm, 5.0 μm, ( ) ) 2.2 实 验 方 法 色 谱 条 件 (, 4.6 mm 250 mm, 5.0 μm, ); : : : =70:16:14(V:V:V); : 1.0 ml/min; : 40 ; : 10 µl; : 205 nm; 20 min 标 准 品 溶 液 的 配 制 mg 50 ml,,, mg/ml, ml 50 ml,,, mg/ml 供 试 品 溶 液 的 配 制 0.05 g, 25 ml,, 20 min,,,,, 0.45 μm, 标 准 曲 线 的 绘 制 mg/ml HPLC,,,,, 检 出 限 实 验 mg/ml 1 ml 50 ml,, mg/ml, 1 ml 50 ml,, μg/ml, HPLC 精 密 度 实 验 6, 2.2.3,, RSD(%) 回 收 率 实 验 0.05 g 9, 25 ml, 3, 3, ( 2.00 mg/ml)4 5 6 ml,, 20 min,, 0.45 μm, 3 结 果 与 讨 论 3.1 标 准 曲 线 确 证 结 果 1, A= C (r=0.9999), 0.1~0.8 mg/ml 1 Fig. 1 Standard curve of phosphatidyl choline

3 检 出 限 和 定 量 限 DL QL (S/N) DL S/N=3, QL S/N= 检 出 限 mg/ml 1 ml 50 ml,, mg/ml, 1 ml 50 ml,, μg/ml, 3.57, (3:1) : DL( )=0.040 μg/ml,, : μg/ml 25 ml/0.05 g =20 μg/g 定 量 限 S/N=10 : QL μg/ml/3 10=0.133 μg/ml,, : 20 μg/g 10/3= μg/g 3.3 精 密 度 1, ~ mg/g, mg/g, (RSD) 0.6%, 3.4 回 收 率 3 2, %~100.72%, : 99.37%, (RSD) 0.9% Table 1 表 1 精 密 度 的 实 验 结 果 (n=6) The precision of the experiment (n=6) (g) (mg/ml) (mg/g) (mg/g) RSD(%) % Table 2 表 2 加 标 回 收 率 实 验 (n=9) Standard addition recovery of the experiment (n=9) (mg) (mg) (%) (%) RSD(%)

4 8, : 实 际 样 品 的 测 定, 205 nm, 205 nm, 205 nm,,,, : : =70:16:14(V:V:V),, 2 [J]., 2011, 32(8): Ge QL, Wu M, Zhang XY, et al. Microwave digestion - visible spectrophotometry lecithin content in eggs [J]. Food Sci, 2011, 32(8): [4],,. [J]., 2008, 23(12): Guan M, Li Y, Zhao SX. Ultraviolet spectrophotometric method determination of phosphatidyl choline in lecithin capsule [J]. China Brew, 2008, 23(12): [5],,. Fig. 2 4 结 论 2 Chromatogram of phosphatidyl choline [J]., 2003, 26(6): Wang Y, Guan M, Chen J. Double wavelength scanning method for determining the content of lecithin in acetylcholine [J]. Xinjiang Med Univ J, 2003, 26(6): [6],,. [J]., 2008, 29(12): Shao R, Wu LQ, Yun Z. Thin layer scanning determination of the content of phosphatidyl choline in soy lecithin [J]. Food Sci, 2008, 29(12): [7]. [J]., 2003, 28(1): Xin FX. Rapid determination of phospholipids [J]. China Oil, 2003, 28(1): , : : =70:16:14(V:V:V), (4.6 mm 250 mm, 5.0 μm),,,, 参 考 文 献 [1],,. [J]., 2007, 10(28): Gan BB, Cai Z, Li SH. The ultraviolet spectrophotometric method determination of phosphatidyl choline in lecithin health foods [J]. Food Ind Sci Technol, 2007, 10(28): [2],,,. [J]., 2013, 4(2): Liu PL, Zhang SL, Wei YL, et al. Spectrophotometric method determination of phosphatidyl choline content in soybean lecithin [J]. J Food Saf Qual, 2013, 4(2): [3],,,. - [8],,,. [J]. -, 2013, 49(6): Na HQ, Dong Y, Zhou ZH, et al. High performance liquid chromatography determination of soybean phospholipid class phosphatidyl choline in health food [J]. Phy Chem Inspect Chem Vol, 2013, 49(6): [9],,,. [J]., 2013, 34(18): Guan M, Hou JF, Gu Zlne Aek, et al. High performance liquid chromatographic separation and analysis of til phosphatidyl choline in lecithin [J]. Food Sci, 2013, 34(18): [10],,,. HPLC-RI [J]., 2004, 23(5): Yang YW, Li Y, Wu CJ, et al. HPLC-RI a fast accurate method to determine the content of soybean phosphatidylcholine [J]. J Instrum Anal, 2004, 23(5): [11],,. [J]., 2002, 20(3): Wang ZH, Lu XQ, Hong XK. Reversed phase ion pair high

5 performance liquid chromatography separation of different kinds of phosphatidyl choline [J]. Chin J Chromatogr, 2002, 20(3): [12]. HPLC-ESLD [J]., 2005, 30(12): Cao D. HPLC-ESLD separation method to determine the soybean phosphatidyl choline [J]. China Oil, 2005, 30(12): [13],,,. [J]., 2006, 24(1): Xiao YX, Mei J, He XF, et al. The separation and purification of phospholipid and high performance capillary electrophoresis analysis [J]. Chin J Chromatogr, 2006, 24(1): [14],,. HLB [J]., 2007(7): Zheng WQ, Shen Y, Lu WD. Nuclear magnetic resonance (NMR) method determination of high purity soya lecithin HLB value [J]. Grain Oil, 2007, (7): 作 者 简 介 ( 责 任 编 辑 : 白 洪 健 ) 蔡 伟 江, 中 药 师, 主 要 研 究 方 向 为 保 健 食 品 的 质 量 检 测 @qq.com

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