HPLC 法同时测定人参制剂中 2 种人参皂苷方法的建立 杨艳文, 孟凡双, 郜玉钢 * *, 张连学 ( 吉林农业大学中药材学院, 吉林长春 13118) 摘要 : 为了更加有效评价人参制剂生产质量, 建立了一种同时测定人参制剂中 2 种人参皂苷的 HPLC 方法 结果表明,2 种人参皂苷 Rg1 Re Rg2 Rg3 Rg5 Rf F1 F2 Rc Rd Rb1 Rb2 Rb3 Rh2 compound K 2(R)-Rh1 Rk3 Rh4 原人参二醇及原人参三醇均得到良好分离, 线性关系良好 (R.999 2) 加样回收率均在 97.13%~12.42% 之间,RSD<2% 该方法快捷简便 稳定可靠, 能够精确全面检测分析人参皂苷含量, 对于人参加工品及其制剂的质量控制更为全面准确可行 关键词 : 人参 ; 人参皂苷 ;HPLC; 含量测定 Simultaneous determination of twenty ginsenosides in ginseng preparations by HPLC YANG Yanwen, MENG Fanshuang, GAO Yugang *, ZHANG Lian-xue * (College of Chinese Medicinal Materials, Jilin Agricultural University, Changchun 13118, China) Abstract: In order to evaluate the quality of ginseng preparations, a simple and accurate HPLC method for determining the contents of twenty ginsenosides was established. The results suggested that twenty ginsenosides (ginsenoside Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 protopanaxatriol compound K Rg5 Rh2 protopanaxadiol) were separated at baseline with good linearity (R.9992). The recovery rates were 97.13%-12.42% (RSD < 2%). The method is simple, fast, accurate, and could be applied to the quality control of ginseng preparations. Key words: Panax ginseng; ginsenoside; HPLC; determination 中图分类号 :R917 文献标志码 :A 文章编号 : 人参皂苷是人参 西洋参及人参制剂中的主要活性成分 [1-8], 主要包括人参皂苷 Rg1 Re Rf [9-1] Rb1 Rb2 等, 对皂苷类成分的质量控制, 是人参质量标准的核心内容 针对人参皂苷含量测定 [11] [12] [13] [14] 方法的研究报道比较多, 如郜玉钢 胥秀英 刘志 郭冲 WANG [15] 等分别报道了用高效液相色谱法测定人参及其制剂中 9 种 12 种 14 种 16 种和 19 种人参皂苷含量方法, 但至今未见有用 HPLC 法同时测定人参制剂中 2 种人参皂苷的报道 人参样品在加工炮制过程中, 人参皂苷受温度 酸碱度的影响, 会发生转化, 形成稀有人参皂苷 [16] ; 对于人参制剂, 由于中药制剂处方复杂, 在 [17-18] 制剂制备过程中, 皂苷类物质则更容易发生结构转化形成次级皂苷 因此, 仅对人参炮制加工品 收稿日期 : 基金项目 : 国家科技重大专项子课题项目 (212ZX9346); 国家公益性行业科研专项项目 (2133111); 吉林省基础研究项目 (2131275JC) 作者简介 : 杨艳文 (1979 ), 男, 讲师, 博士, 研究方向为药用植物栽培与加工 E-mail:yanwen_79@163.com 1
及人参制剂所含的常见主要人参皂苷进行含量测定来控制产品质量显然是不够的 [19], 本试验建立了用 HPLC-UV 方法同时测定包括常见主要人参皂苷 稀有皂苷在内的 2 种人参皂苷 ( 苷元 ) 含量的方法, 以求对人参加工品及其制剂的质量控制提供强有力的理论支持 1 材料与方法 1.1 材料与试剂人参生晒参, 西洋参生晒参, 生脉饮 ( 吉林敖东延边药业股份有限公司, 生产批号 1471), 人参健脾丸 ( 北京同仁堂, 生产批号 415661), 购买于福百草大药房 人参皂苷对照品 Rg1 Re Rg2 Rg3 Rg5 Rf F1 F2 Rc Rd Rb1 Rb2 Rb3 Rh2 compound K 2(R)-Rh1 Rk3 Rh4 原人参二醇及原人参三醇质量分数均在 98% 以上, 批号分别为 (21511 21523 21545 2156 21524 21537 21549 21521 21536 21579 2151 21551 21518 21543 2152 21515 21562 21571 21519 21513), 均购自吉林大学天然药物化学实验室 甲醇 乙腈为色谱纯, 购自德国默克公司 ; 去离子水为娃哈哈纯净水 ( 杭州娃哈哈公司 ), 其余试剂为分析纯 1.2 仪器与设备 LC-21A 高效液相色谱仪 ( 日本岛津公司 ), 配有 LC-21A 型液相色谱泵 LC-21A 型自动进样器 BDS C 18 (25mm 4.6mm,,5μm) 色谱柱 CLASS-vP 色谱工作站 ;AUY22 电子分析天平 ( 日本岛津公司 );Anke TGL-16B 型台式离心机 ( 上海安亭科学仪器厂 );KQ 25DV 超声波清洗器 ( 昆山舒美超声仪器有限公司 ) 1.3 方法 1.3.1 溶液配制标准溶液 : 分别精密称取 2 种人参皂苷 Rg1 Re Rg2 Rg3 Rg5 Rf F1 F2 Rc Rd Rb1 Rb2 Rb3 Rh2 compound K 2(R)-Rh1 Rk3 Rh4 原人参二醇及原人参三醇对照品各 5 mg, 加色谱甲醇配制成上述 2 种人参皂苷的质量浓度分别为 1.4 1.2.98 1. 1. 1.2 1. 1. 1. 1.2 1. 1. 1.4 1. 1..98 1. 1. 1. 1.2 mg ml -1 的对照品溶液, 经.45 μm 滤膜滤过, 备用 样品溶液 : 精密称取人参生晒参粉末 1g, 加 5mL 色谱甲醇, 密封, 超声提取 45 min, 静置过夜, 再超声 45min, 离心, 取上清液, 用.45μm 滤膜滤过, 备用 精密称取西洋参生晒参粉末 1g, 加 5mL 色谱甲醇, 密封, 超声提取 45 min, 静置过夜, 再超声 45min, 离心, 取上清液, 用.45μm 滤膜滤过, 备用 取生脉饮口服液, 用.45μm 滤膜滤过, 备用 精密称取人参健脾丸大蜜丸 1 丸 (6g), 加 1mL 色谱甲醇, 超声提取 45min, 过夜, 再超声 45min, 补足体积, 混匀, 静置, 取上清液, 离心, 经.45μm 滤膜滤过, 备用 1.3.2 色谱条件色谱柱为 C 18 柱 (25mm 4.6mm,5μm); 柱温 35, 检测波长 23 nm, 流动相乙腈 (A)- 水 (B) 梯度洗脱 (~4 min,18%~21% A;4~42 min,21%~26% A;42~46 min,26%~32% A;46~ 66 min,32%~33.8% A;66~71 min,33.8%~38% A;71~77.7 min,38%~49.8 A;77.7~78 min, 49.8%~49.1% A;78~82 min,49.1% A;82~83 min,49.1%~5.6% A;83~88 min,5.6%~59.6% A;88~89.8min,59.6%~64.96% A;89.8~92min,64.96%~65% A;92~97min,65% A;97~12min, 65%~85% A;12~19min,85% A;19~111min,85%~18% A); 流速 1. ml min -1, 进样量为 2μL 2 结果与分析 2.1 色谱条件的优化本实验以甲醇为空白对照, 对照品进行全波长扫描 (19~4nm), 结果人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K 2
Rg5 Rh2 原人参二醇对照品在 23nm 处均有最大吸收, 故选择该波长为检测波长 比较了 2 种人参皂苷在不同色谱柱 [Nucleosil C 18 (4.6mm l5 mm, 5μm) Hypersil ODS2 (4.6 mm 25 mm, 5μm) BDS C 18 (4.6 mm l5 mm, 5μm)] 中的分离效果, 结果 BDS C 18 柱分离效果好, 保留时间适中 ; 在流动相的选择过程中, 分别考査了甲醇 - 水 乙腈 - 水梯度洗脱等不同洗脱系统, 结果乙腈 - 水梯度洗脱时 2 种人参皂苷分离度好, 故选择乙腈 - 水梯度洗脱为流动相 本文还考查了不同洗脱流速的影响, 结果当流速为 1 ml min -1 时分离效果最好 2.2 色谱峰归属按 1.3.2 项下色谱条件, 对照品与样品 HPLC 色谱图如图 1 15 mv 混标 12 18 1 5 75 5 25 mv 人参健脾丸 11 1-2- 人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇 1-2- ginsenoside Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 protopanaxatriol compound K Rg5 Rh2 protopanaxadiol. 1 2 3 4 图 1 混标和样品色谱图 Fig. 1 Chromatograms of mixed reference solution and samples 5 7 6 8 9 1 1 2 3 456789 1 11 13 14 1415 16 15 16 17 19 1718 19 2 2 3
75 mv 5 人参 25 5 1 2 3 4 6 8 9 11 14 19 2 mv 15 1 西洋参 5 12 4 56 8 9 11 14 18 19 2 mv 15 生脉饮 1 12 5 4 6 8 11 13 14 16 1-2- 人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇 1-2- ginsenoside Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 protopanaxatriol compound K Rg5 Rh2 protopanaxadiol. 续图 1 混标和样品色谱图 Fig. 1 Chromatograms of mixed reference solution and samples 2.3 线性关系考察由图 1 可知 2 种人参皂苷得到良好的分离, 按 1.3.1 项下制备对照品溶液, 分别精密吸取对照品溶液 2 4 8 12 16 18 2μL 进行进样, 以进样标准品溶液中人参皂苷的质量 (Y) 对峰面积积分值 (X) 作图, 绘制 2 个标准曲线, 计算出 2 个线性回归方程, 得到相关系数 r.9992, 且呈良好的线性关系, 见表 1 4
表 1 人参皂苷的回归方程 Tab.1 Regression equations with correlation coefficients of ginsenosides 人参皂苷 保留时间 回归方程 r 线性范围 (ginsenosides) (RT/min) (regression equation) (line range)/μg Rg1 31.83 Y=2.584242 1-6 X+5.272472 1-3.9999 2.8-2.8 Re 33.624 Y=3.45859 1-6 X-1.763971 1-2.9998 2.4-2.4 Rf 5.345 Y=2.57511 1-6 X-1.365498 1-1.9998 2.4-2.4 Rb1 53.156 Y=3.544513 1-6 X-1.45855 1-2.9999 2.-2. Rg2 53.976 Y=2.383191 1-6 X-5.158786 1-2.9999 1.96-19.6 Rc 55.16 Y=3.215851 1-6 X+6.72648 1-3.9999 2.-2. 2(R)-Rh1 55.762 Y=2.116331 1-6 X-8.732196 1-2.9999 1.96-19.6 Rb2 57.447 Y=3.388552 1-6 X+1.825798 1-2.9999 2.-2. Rb3 58.253 Y=3.283913 1-6 X-1.511758 1-2.9998 2.8-2.8 F1 59.53 Y=2.4556 1-6 X-9.38856 1-2.9998 2.-2. Rd 63.818 Y=3.2668 1-6 X+9.8352 1-3.9999 2.4-2.4 Rk3 77.859 Y=1.2616 1-6 X-3.4877 1-1.9992 2.-2. F2 78.3 Y=2.554881 1-6 X-1.686846 1-1.9997 2.-2. Rh4 78.91 Y=3.246799 1-6 X+9.459274 1-3.9999 2.-2. Rg3 81.59 Y=2.356921 1-6 X-1.2471 1-1.9998 2.-2. 原人参三醇 83.825 Y=1.52664 1-6 X-1.575577 1-1.9997 2.4-2.4 Compound K 89.684 Y=1.863712 1-6 X-1.68954 1-1.9998 2.-2. Rg5 9.21 Y=8.34956 1-7 X-1.477148 1-1.9997 2.-2. Rh2 91.354 Y=1.936456 1-6 X-2.28795 1-1.9997 2.-2. 原人参二醇 16.34 Y=1.798388 1-6 X-2.8944 1-1.9996 2.-2. 2.4 检测限与定量限在选定的色谱条件下, 当信噪比为 3 时, 测得人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇的检测限分别为.25.15.1.2.1.28.25.31.25.29.31.24.31.1.79.2.21.11.32.21μg; 当信噪比为 1 时, 测得人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇的定量限分别为.7.4.23.23.65.71.78.82.71.72.67.76.7.35.155.65.48.64.71.82 μg 2.5 精密度试验按照 2.1 项下色谱条件, 精密吸取对照品溶液 2 μl, 重复进样 6 次, 人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rk3 F2 Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇峰面积的 RSD 分别为 1.21% 1.13% 1.31%.63% 1.56% 1.25%.76% 1.5%.88%.98%.65% 1.16%.98% 1.26%.81%.69% 1.29% 1.58% 1.5%.86%, 结果表明仪器的精密度良好 2.6 稳定性试验精密吸取人参健脾丸样品溶液, 按 1.3.2 项下色谱条件, 在 2 4 8 16 24 h 进样 2 μl, 人参健脾丸中人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rh4 Rg3 5
原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇峰面积的 RSD 分别为 1.39% 1.72% 1.63% 1.76% 1.56% 1.98% 1.27% 1.79% 1.52% 1.48% 1.38% 1.87% 1.54% 2.1% 1.35% 1.67% 1.83% 1.41%, 说明人参健脾丸溶液在 24 h 内稳定 2.7 重复性试验精密称取 6 份同一厂家同一批号人参健脾丸, 按供试品溶液制备方法制得供试品溶液, 按 1.3.2 色谱条件, 分别进样 2μL, 进行重复性试验, 人参健脾丸中人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇质量分数的 RSD 分别为 1.88% 1.51% 1.35% 1.56% 1.75% 2.16% 2.39% 1.58% 1.83%.54% 1.26% 2.34%.31% 1.82%.18% 2.57% 1.7% 2.58% 2.8 加样回收率精密称取 3 份已知人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇含量(.5228.4724.1923.3284.321.213.3284.1643.2334 1.1346.1235.435.242 3.4278.4686.5423 1.4267 1.6738 %) 的同一厂家同一批号人参健脾丸一丸, 分别精确加入人参皂苷对照品 Rg1(.16,.3,.63mg) Re(.13,.25,.54mg) Rf(.7,.12,.25mg) Rb1(.1,.17,.45mg) Rg2(.8,.16,.34mg) Rc(.6,.11,.25mg) 2(R)-Rh1(.1,.18,.38mg) Rb2(.6,.1,.24mg) Rb3(.11,.19,.41mg) F1(.4,.68,1.32mg) Rd(.42,.7,.16mg) Rh4(.1,.2,.5mg) Rg3(.7,.15,.34mg) 原人参三醇(.96,1.73,3.45mg) compound K(.17,.3,.65mg) Rg5(.15,.28,.6mg) Rh2(.33,.79,1.51mg) 原人参二醇(.51,.89,1.73mg), 按供试品溶液的制备方法制备, 按 1.3.2 色谱条件测定, 进行加样回收率试验, 人参健脾丸中人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 F1 Rd Rh4 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇的平均回收率 (RSD) 分别为 1.6%(1.21%) 12.42%(.73%) 1.31%(1.52%) 99.47% (1.48%) 97.13%(1.59%) 12.3%(1.7%) 1.63%(.79%) 11.57%(1.22%) 98.97%(.92%) 1.79%(.95%) 11.%(1.49%) 97.33%(1.9%) 99.56%(.98%) 99.91%(.59%) 1.63% (.85%) 98.91%(1.22%) 99.3%(1.42%) 1.69%(.93%) 2.9 样品测定精密称取人参生晒参 西洋参生晒参 生脉饮 人参健脾丸按供试品溶液的制备方法制备出样品溶液, 按 1.3.2 所述色谱条件进样分析, 根据上述线性回归方程计算样品中 2 种人参皂苷的含量, 见表 2 6
表 2 人参及其制剂中 2 种人参皂苷含量 (%) Tab.2 The contents of 2 ginsenosides in ginseng and its preparation (%) 活性成分 人参生晒参 西洋参生晒参 生脉饮 (Shengmai 人参健脾丸 (Renshen Jianpi (ginsenosides) (P. ginseng) (P. quinquefolius L.) Yin) Wan) Rg1.712±.31 a.197±.16 b 5.4335±.45 d.518±.15 c Re.987±.2 b.491±.28 d.2±.1 a.4561±.173 c Rf.282±.3 c a a.193±.2 b Rb1.1398±.1 b.5592±.4 d.47±.3 a.3376±.12 c Rg2.124±.5 c.9±.8 b a.2884±.19 d Rc.1154±.1 b.1241±.7 b.9±.2 a.1839±.132 c 2(R)-Rh1 a a a.3153±.42 b Rb2.86±.13 c.173±.1 b.34±.19 a.1561±.296 d Rb3.116±.4 b.37±.2 b a.2296±.27 c F1 a a a 1.1299±.71 b Rd.429±.5 b.976±.11 c.5±.1 a.112±.131 c Rk3 a a a a F2 a a.566±.1 b a Rh4.266±.2 c.16±.1 a.52±.5 b.341±.52 c Rg3 a a a.182±.27 b 原人参三醇 a a.163±.1 b 3.3±.1 c compound K a a a.269±.4 b Rg5 a.31±.2 b a.3137±.188 c Rh2.12±.1 b.49±.2 c a 1.3279±.137 d 原人参二醇 a a a 1.5386±.84 b.6282 a 1.5727 b 5.5237 c 1.436 d 人参皂苷加和值注 : 各组之间两两相较, 字母相同的为差异不显著的, 字母不同的为差异显著,P<.5 表 2 试验结果表明, 人参生晒参中, 以人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc Rb2 Rb3 Rd Rh4 为主, 少量存在的稀有皂苷 Rh2 可能是生晒参加工过程中产生的, 未检测到人参皂苷 2(R)-Rh1 F1 Rk3 F2 Rg3 原人参三醇 compound K Rg5 和原人参二醇 西洋参中以人参皂苷 Rg1 Re Rb1 Rc Rb2 Rb3 Rd Rh2 为主, 还存在少量的 Rg2 Rh4 Rg5, 未检测到人参皂苷 Rf 2(R)-Rh1 F1 Rk3 F2 Rg3 原人参三醇 compound K 和原人参二醇 生脉饮中含有大量的人参皂苷 Rg1, 另外还含有少量的 Re Rb1 Rc Rb2 Rd F2 Rh4 原人参三醇, 未检测到人参皂苷 Rf Rg2 2(R)-Rh1 Rb3 F1 Rk3 Rg3 compound K Rg5 Rh2 原人参二醇 人参健脾丸中含有大量的原人参二醇 原人参三醇和人参皂苷 Rh2 F1, 还含有人参皂苷 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc 2(R)-Rh1 Rb2 Rb3 Rd Rh4 Rg3 compound K Rg5, 未检测到人参皂苷 Rk3 F2 由实验结果可见人参 7
生晒参 西洋参生晒参 生脉饮和人参归脾丸所含人参皂苷 ( 苷元 ) 无论是在组成, 还是在含量方面都有着很大的差别, 即使生脉饮和人参归脾丸是由人参生晒参入药制成, 但这两种制剂与人参生晒参及两种制剂之间在人参皂苷组成和含量方面都有着很大的差异, 这也说明人参中所含的人参皂苷类成分在人参制剂制备过程中受制备工艺及制剂处方中其它药材的影响, 皂苷的结构发生了转化, 致使人参皂苷的组成及含量发生了显著的变化 [2] 3 讨论人参 西洋参是大宗药材, 除了以简单加工形成生晒参 红参等加工品销售使用外, 更主要的是以原料的形式参与到中成药的制备中 人参的加工品在加工炮制过程中, 人参皂苷受温度 酸碱度的影响, 会发生转化, 形成稀有人参皂苷 [21], 不同的加工工艺, 皂苷转化程度和种类都会有很大差异 [22-24] ; 对于人参制剂, 由于中药制剂处方非常复杂, 在制剂制备过程中, 皂苷类物质则更容易受到其它中药材化学成分的影响而发生结构转化形成次级皂苷 在样品测定部分, 有的样品中未检测出该种人参皂苷, 是样品中该种人参皂苷含量过低, 低于定量限, 所以未检测到 本试验采用 HPLC-UV 检测器, 其具有造价低, 应用广泛等优点 ; 流动相仅为乙腈和水, 操作方便, 并且解决了磷酸盐对色谱柱损耗大, 系统清洗麻烦等问题 ; 所用 C 18 色谱柱 (15 mm 4.6 mm, 5μm) 为普通色谱柱, 便于购买 本实验采用梯度洗脱程序, 建立了一种同时测定人参制剂中 2 种人参皂苷含量的分析方法, 提高了效率 ; 方法学考察表明, 精密度 最低检测限 加样回收率的范围均符合相关标准,2 种人参皂苷分离完全, 线性关系良好, 所建立的方法快速简便, 准确性 重复性好, 稳定可靠 采用本实验方法检测的人参生晒参 西洋参生晒参 生脉饮 人参归脾丸人参皂苷组成及含量结果也充分说明了人参中所含的人参皂苷类成分在人参制剂制备过程中受制备工艺及制剂处方中其它药材的影响, 皂苷的结构发生了转化, 致使人参皂苷的组成及含量发生了显著的变化 [25] 因此, 本试验建立的采用 HPLC-UV 方法同时测定包括常见主要人参皂苷 稀有皂苷在内的 2 种人参皂苷 ( 苷元 ) 含量的方法, 本方法还检测到人参茎叶特有皂苷 F1 和 F2, 可鉴别人参产品中是否掺入人参茎叶, 这对于人参加工品及其制剂的质量控制相对于现有的人参皂苷含量测定法更为全面准确可行 参考文献 [1] 黎阳, 张铁军, 刘素香等. 人参化学成分和药理研究进展 [J]. 中草药,29, 4(1): 164-166.DOI: 1.3321/j.issn:253-267.29.1.49. [2] 张萍, 张南平, 肖新月等. 人参皂苷类成分的化学分析 [J]. 药物分析杂志,24,24(3): 229-237. DOI:1.16155/j.254-1793.24.3.3 [3] 徐静, 贾力, 赵余庆等. 人参的化学成分与人参产品的质量评价 [J]. 药学评价研究,211,34(3): 199-21. [4] KIM H J, KIM P, SHIN C Y. A comprehensive review of the therapeutic and pharmacological effects of ginseng and ginsenosides in central nervous system. Journal of ginseng research, 213, 37(1),8-29. http://dx.doi.org/ 1.5142/j.jgr.213.37.8. [5] SUN B.Repetitious steaming-induced chemical transformations and global quality of black ginseng derived from Panax ginseng by HPLC-ESI-MS/MSn based chemical profiling approach. Biotechnology and Bioprocess Engineering, 211,16(5),956-965. DOI: 1.17/s12257-11-79-6 [6] 郭秀丽, 高淑莲. 人参化学成分和药理研究进展 [J]. 中医临床研究,212,14:26-27.DOI: 1.3969/j.issn.1674-786.212.14.13 [7] 张前进. 人参的化学成分和药理活性 [J]. 光明中医,211,2:368-369. DOI: 1.3969/j.issn.13-8914.211.2.118 [8] 孙娜, 徐钢, 徐珊, 刘蓬蓬, 张凡, 贾天柱. 人参炮制对其化学成分和药理作用的影响 [J]. 中国药房,216,6:857-859. DOI: 1.639/j.issn.11-48.216.6.45 [9] 曹智, 张燕娣, 许永华等. 人参有效成分及其药理作用研究新进展 [J]. 人参研究, 212,24(2):39-43.doi:1.3969/j.issn.1671-1521.212.2.14. [1] ZHANG K,WANG X,DING L, et al. Determination of seven major ginsenosides in different parts of Panax quinquefolius L.(American Ginseng) with different ages[j]. Chemical Research China University, 28,24(6):77-711. 8
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