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1 6 4 Vol. 6 No Journal of Food Safety and Quality Apr., 2015 赵 岩 1, 妙志岩 1, 牛淑静 2, 郜玉钢 1*, 蔡恩博 1, 杨鹤 1, 刘双利 1, 张连学 1* (1., ; 2., ) 摘要 : 目的 A 方法 (thin layer chromatography, TLC) ; (high performance liquid chromatography, HPLC) A 结果,, ; 0.5~50 µg, 98.53%~102.53%, (RSD) 0.84%~1.83% ; A ~0.06 mg/ml(r 2 =0.9998), 98.80%, RSD 0.89% 结论 A 关键词 : ; ; ; Study on quality control for Renshen Rongzhi capsules ZHAO Yan 1, MIAO Zhi-Yan 1, NIU Shu-Jing 2, GAO Yu-Gang 1*, CAI En-Bo 1, YANG He 1, LIU Shuang-Li 1, ZHANG Lian-Xue 1* (1. College of Chinese Medicine Material, Jilin Agriculture University, Changchun , China; 2. Jilin Food & Drug Estimate Center, Changchun , China) ABSTRACT: Objective To establish the methods to qualitatively identify the ginseng and Ganoderma lucidum spore powder, and determine the ginsenosides and ganoderic acid A in the Renshen Rongzhi capsules. Methods Qualitative identification of ginseng and ganoderma spore in Renshen Rongzhi capsules was carried out by thin layer chromatography (TLC). Ginsenosides and Ganoderma acid A were determined by high performance liquid chromatography (HPLC). Results The TLC spots were clear with high resolution, and the blank test showed no interference. The linear range of ginsenosides was 0.5~50 µg, the average recovery was between 98.53%~102.53%, and the relative standard deviation (RSD) was between 0.84%~1.83%. The linear range of ganoderma acid A was ~0.06 mg/ml (r 2 =0.9998), the average recovery was 98.80%, and the RSD was 0.89%. Conclusion The qualitative and quantitative analysis methods are applicable for the quality control of Renshen Rongzhi capsules. 基金项目 : (2011BAI03B01)( ) (2009GJB10031) ( , YY, YYZX201258, YY) Fund: Supported by the National Science and Technology Support Program (2011BAI03B01), the National Nonprofit Industry Research and Special ( ), the Ministry of Science and Technology Personnel Services Business Project (2009GJB10031) and the Jilin Province Science and Technology Development Programme ( , YY, YYZX201258, YY) * 通讯作者 :,,, gaoyugang_2006@163.com,,, zlx863@163.com *Corresponding author: GAO Yu-Gang, Professor, Chinese Medicine Material College of Jilin Agricultural University, No.2888, Xincheng Street, Nanguan District, Changchun , China. E-mial: gaoyugang_2006@163.com ZHANG Lian-Xue, Professor, Chinese Medicine Material College of Jilin Agricultural University, No.2888, Xincheng Street, Nanguan District, Changchun , China. E-mial: zlx863@163.com

2 KEY WORDS: Renshen Rongzhi capsules; thin layer chromatography; high performance liquid chromatography; quality control 1 引言 (Renshen Rongzhi capsules),, [1-6], [7-9], [10-12], [13], (thin layer chromatography, TLC) ; (high performance liquid chromatography, HPLC) A,,, 2 材料与方法 2.1 仪器与试剂 LC 3000 ( ); C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm)(); LA 114 ( ); KQ-250 B ( ); ( ); DHG-9246 A ( ); FW-200 (); DSY-2-4 ( ) (, -B&J); ( ); ; ( ); A ( ) 2.2 实验方法 [1] 人参的薄层鉴别 1.0 g, 40 ml, 1 h,,, 0.5 ml, 10 ml, 30 min,, 3,,,, 1 ml, 0.7 g 0.3 g, Re Rg 1, 1 ml 2 mg, ( 2010 Ⅵ B), 1~2 μl, G, -- - (15:40:22:10)10,,,, 10, 105 [14-17] 灵芝的薄层鉴别 2.0 g, 30 ml, 30 min,,, 1 ml, 0.1 g 1.9 g, ( 2010 Ⅵ B), 4 μl, G, (60~90 )-- (12:8:1),,,, 365 nm 人参单体皂苷的含量测定 (1) C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm); (A) (B), : 0 min(19.5% A), 24 min(21.5% A), 26 min(21.5%a), 30 min(29% A), 52 min(31.5% A), 55 min(38% A), 65 min(38% A); 1.0 ml/min; 35 ; 203 nm; : 20 µl (2) : Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc Rb2 Rb3 Rd 5 mg,

3 4, : ml,, 0.45 μm : 0.5 g, 3 h,,, 100 ml, 25 ml,,, 30 min,,, 5 ml,, 0.45 μm : 0.4 g,, : 0.1 g,, (3) (µg), (4), 6, Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc Rb2 Rb3 Rd RSD, (5), h, Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc Rb2 Rb3 Rd RSD, (6), 2.2.3(2) 6,,,, Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc Rb2 Rb3 Rd RSD, (7),, (8), 灵芝酸 A 的含量测定 (1) C 18 (4.6 mm 250 mm, 5 μm); (A) 0.1% (B), : 0 min(35% A), 18 min(35% A), min(100%a), 30 min(100% A), min(35%a), 40 min(35%a); 0.8 ml/min; 25 ; 254 nm; 20 µl (2) : A,, 1 ml 0.06 mg : 2.0 g,,, 150 ml, 1 h,,,, 10 ml,, 0.45 μm : 0.1 g,,, : 1.9 g,,, (3) A ml, 1 ml, 20 µl,,, (Y), (X), (4) A, 6,, RSD, (5), h, RSD, (6), 2.2.4(2) 6,,, A, RSD, (7),, (8), 3 A

4 结果与分析 3.1 人参的薄层鉴别,, 1 :,,,,, 2 :,,,, ; 4. ; 5. 2 TLC Fig. 2 The chromatogram of Ganoderma ; 4. ; 5. ; 6. 1 TLC Fig. 1 The chromatogram of Panax ginseng 3.2 灵芝的薄层鉴别, 3.3 人参单体皂苷的含量测定 色谱条件,, 3 9 Fig. 3 a. ; b. ; c. ; d. 3 HPLC The chromatogram of Renshen Rongzhi capsule and references

5 4, : 线性关系考察 Rg1 Re Rf Rb1 Rg2 Rc Rb2 Rb3 Rd 0.5~50 µg, 9 1 表 1 9 种人参皂苷的标准曲线及样品含量 Table 1 The standard curve and the content of 9 kinds of ginsenosides r 2 (mg/g) (n=3) Rg1 Y=136537X ± Re Y=342404X ± Rf Y=292369X ± Rb1 Y=180325X ± Rg2 Y=174011X ± Rc Y=97372X ± Rb2 Y=283962X ± Rb3 Y=243335X ± Rd Y=248888X ± 方法学考察, 2 2,, 24 h,, Table 2 表 2 方法学考察结果 The results of the studies on the method RSD(%) %~0.89% %~1.18% %~1.64% 98.53%~102.53% 0.84%~1.83% 样品含量的测定 灵芝酸 A 的含量测定 色谱条件,, 4 A a. b. c. d. 1. A 4 HPLC Fig. 4 The chromatogram Renshen Rongzhi Capsule and References

6 线性关系考察 A Y= X+7715, r 2 = A ~0.06 mg/ml 方法学考察, 3 3,, 24 h,, Table 3 表 3 方法学考察结果 The results of the studies on the method RSD(%) % % % 98.8% 0.89% 样品含量的测定 A mg/g, RSD =2.38% 4 结论与讨论 TLC,,,,,, 9,,, ;, A,,,,,, 参考文献 [1] [M]. :, Chinese pharmacopeia [M]. Beijing: Chemical Industry Press, [2],,,. [J]., 2012, 37(13): Wang LY, Tian YX, Li HT, et al. Study on quality evaluation of Panax ginseng based on effects for replenishing Qi and preventing exhaustion [J]. China J Chin Mater Med, 2012, 37(13): [3],,. [J]., 2010, 19(12): Wang ZQ, Gong CX, Li ZB. Advances in molecular mechanism of Tongxinluo capsule in the treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases [J]. J Emerg Trad Chin Med, 2010, 19(12): [4],. [J]., 2011, 31(11): Wang H, Li ZD. Ginseng nourishing innate strength theory [J]. Jilin J Trad Chin Med, 2011, 31(11): [5],,,. [J]., 2006, 28(2): Zhang XD, Zhang W, Zhang YM, et al. Study on ginseng Yangrong pills on puzzle soothe the nerves of mice [J]. Chin Trad Patent Med, 2006, 28(2): [6],,,. [J]., 2012, 23(31): Li Q, Qin J, Xiao MY, et al. Study on quality standard of Xiaoyu Anshen capsules [J]. China Pharm, 2012, 23(31): [7],,,. [J]., 2012, 32(12): Niu XH, Zong Y, Sun JM, et al. Mechanism of warming the kidney and strengthening yang action of pilose antler [J]. Jilin J Trad Chin Med, 2012, 32(12): [8],,,. [J]., 2009, 32(2): Meng HY, Qu XB, Li N, et al. Effects of pilose antier and antier glue on osteoporosis of ovariectomized rats [J]. J Chin Med Mater, 2009, 32(2): [9],,,. [J]., 2007, 18(4): Fu L, Sun YP, Zhao XY, et al. Progress on chemical constituents and pharmacological effects of pilose antler [J]. Lishizhen Med Mater Med Res, 2007, 18(4): [10],,,. [J]., 2008, 25(3): Liu SY, Wang Y, He RR, et al. Chemical constituents of

7 4, : 1375 Ganoderma lucidum (Leys. Ex Fr.) Karst [J]. J Shenyang Pharm Univ, 2008, 25(3): [11],. [J]., 2009, 6(5): Liu H, Tang Q. Study on the pharmacological effects of Ganoderma lucidum [J]. China Med Herald, 2009, 6(5): [12]. [J]., 2014, (10): Song BL. Progress in studies on pharmacological effect of Ganoderma lucidum [J]. Chin J Ethnomed Ethnopharm, 2014, (10): [13],. [J]., 2005, 16(Suppl): Hu HD, Pan J. Advances in clinical application of allicin [J]. Mod Diag Treat, 2005, 16(Suppl): [14]. TLC [J]., 2006, 10(2): Jin Y. Research on detection of TLC broken Ganoderma Lucidum Spore Powder Capsule. [J]. Anhui Med Pharm J, 2006, 10(2): [15],,,. [J]., 2005, 14(4): Zhao XL, Yan GH, Mao DC, et al. Identification of capsule of Ganoderma spore by TLC [J]. Fujian Anal Test, 2005, 14(4): [16],. [J]., 2004, 16(4): Guo DH, Lin X. Identification of Satvia Miltiorrhiza Bge. and Ganoderma Lucidum Karst in Huganning Pian by TLC[J]. Strait Pharm J, 2004, 16(4): [17],,. [J]., 2013, 19(9): Wang HY, Meng M, Ren Y. Molding process and quality control investigation compound Lingdan capsules [J]. Chin J Exp Trad Med Form, 2013, 19(9): 作者简介 ( 责任编辑 : 杨翠娜 ) 赵岩, 博士, 副教授, 主要研究方向为天然药物化学成分与生物活性 zhyjlu79@163.com 郜玉钢, 博士, 教授, 主要研究方向为药用植物栽培 ( 驯化 ) 与加工 gaoyugang_2006@163.com 张连学, 博士, 教授, 主要研究方向为药用植物栽培与加工 zlx863@163.com

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