J Chin Med 12(2): , 2001

129 J Chin Med 12(2): 129-144, 2001 腦 部 微 透 析 動 物 模 式 應 用 在 穴 位 針 刺 研 究 蔡 東 湖 1,2 王 麗 惠 2 洪 菱 謙 1 鄭 婷 宜 2 陳 介 甫 1 1 國 立 中 國 醫 藥 研 究 所 2 國 立 陽 明 大 學 傳 統 醫 藥 學 研 究 所 台 北 (2001 年 3 月 27 日 受 理,2001 年 4 月 17 日 收 校 訂 稿,2001 年 4 月 18 日 接 受 刊 載 ) 針 灸 是 一 個 歷 史 悠 久 的 方 法, 可 用 來 治 療 疾 病 和 舒 解 疼 痛 在 東 方 國 家, 針 灸 使 用 在 治 療 心 血 管 呼 吸 內 分 泌 消 化 系 統 疾 病 已 有 好 幾 世 紀 的 時 間 相 似 地, 在 西 方 國 家 利 用 神 經 肌 肉 電 刺 激 來 緩 解 疼 痛 增 加 肌 力 提 高 週 邊 血 管 病 變 病 人 的 血 流 量 近 年 來 也 有 一 些 利 用 表 面 電 極 來 電 刺 激 穴 位 的 方 法, 此 方 法 也 可 以 產 生 和 針 刺 電 針 相 同 的 生 理 及 治 療 效 果, 尤 其 應 用 在 治 療 周 邊 血 管 病 變 目 前, 對 於 傳 統 針 刺 電 針 神 經 肌 肉 電 刺 激 應 用 在 治 療 腦 病 變 方 面 仍 頗 多 爭 議 為 了 瞭 解 針 刺 和 腦 中 神 經 傳 遞 物 質 釋 放 之 間 的 相 關 性, 本 篇 研 究 報 導 利 用 微 透 析 探 針 插 入 腦 中 的 某 些 特 定 區 來 偵 測 該 區 域 神 經 傳 遞 物 質 的 釋 放 在 這 個 新 的 研 究 領 域, 本 論 文 提 供 了 一 些 詳 細 的 微 透 析 研 究 步 驟 及 方 法 關 鍵 詞 : 針 灸, 電 針, 微 透 析, 神 經 傳 導 物 質, 高 效 液 相 層 析 儀 前 言 WHO 43 1 serotonin 5-HT) endorphine 2 聯 絡 人.. 蔡 東 湖, 國 立 中 國 醫 藥 研 究 所, 台 北 市 (112) 北 投 區 立 農 街 二 段 155-1 號, 電 話 :(02) 28201999 轉 8091, 傳 真 :(02) 28264276 E-mail: thtsai@cma23.nricm.edu.tw

130 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 5 1950 3,4 noradrenaline NA dopamine DA 1980 1970-1980 Ungerstedt 6 Inlet discrete (perfusate) dialysate outlet open-ended - push-pull amino acids acetylcholine purines neuropeptides high-performance liquid chromatography; HPLC electrochemical detection; ED) endogenous 一 針 灸 的 作 用 及 其 原 理 針 灸 的 原 理 與 微 透 析 應 用 1. 針 灸 的 作 用 主 要 是 雙 向 性 調 節 免 疫 調 整 防 禦 外 邪 對 抗 疾 病 及 止 痛 方 面 (1) 雙 向 調 節 作 用 : 即 能 治 療 完 全 不 同 性 質 的 疾 病 或 者 發 展 趨 勢 完 全 相 反 的 兩 類 病 症, 如 便 秘 和 泄 瀉, 這 種 調 節 作 用 遍 及 人 體 各 個 系 統, 可 以 使 用 相 同 穴 位, 不 同 的 手 法 來 治 療

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 131 (2) 防 禦 外 邪 及 免 疫 調 整 作 用 : 針 灸 不 只 可 治 療 慢 性 疾 病, 且 對 許 多 急 性 傳 染 病, 炎 症 性 的 疾 病 都 有 不 錯 的 療 效 針 灸 對 人 體 特 異 性 免 疫 功 能 或 非 特 異 性 免 疫 功 能 均 有 促 進 作 用, 因 而 可 防 止 炎 症 的 發 生 和 發 展, 可 控 制 炎 症 病 灶 處 血 管 過 度 的 通 透, 抑 制 白 血 球 過 多 的 游 出 和 浸 潤, 改 善 局 部 的 血 液 及 淋 巴 循 環, 有 助 於 肉 芽 組 織 的 形 成, 所 以 可 以 使 病 灶 的 癒 合 加 速 (3) 對 抗 疾 病 作 用 : 針 灸 可 以 提 高 生 物 體 的 防 衛 能 力, 增 強 體 質, 從 而 提 高 抗 病 能 力, 如 灸 足 三 里, 可 以 有 強 壯 保 健 及 預 防 疾 病 的 作 用 (4) 止 痛 作 用 : 研 究 指 出 針 刺 的 止 痛 作 用 是 來 自 腧 穴 部 位 與 來 自 疼 痛 區 的 傳 入 神 經 衝 動 在 中 樞 各 級 水 5,7 平 相 互 作 用 的 結 果 一 些 研 究 指 出 : 如 針 刺 足 三 里, 三 陰 交 等 穴 可 使 腦 內 血 清 素 含 量 增 加, 認 為 這 是 實 現 針 刺 止 痛 必 須 的 8 ; 內 源 性 鴉 片 樣 物 質 與 鴉 片 受 體, 在 針 刺 止 痛 中 也 很 重 要, 如 針 刺 足 三 里, 三 陰 交 等 穴 還 可 促 使 腦 內 嗎 啡 樣 物 質 釋 放 加 強 止 痛 作 用 9 ; 腦 內 乙 醯 膽 鹼 也 會 明 顯 增 多, 此 也 是 加 強 針 刺 止 痛 效 應 的 重 要 物 質 8 ; 還 有 P 物 質 (substance P), 組 織 胺 (histamine) 等 也 都 與 針 刺 止 痛 效 應 有 著 密 切 的 關 係 總 之 針 刺 止 痛 與 神 經 神 經 傳 導 物 質 及 其 代 謝 物 質 有 關 針 灸 可 引 10,11 起 痛 覺 中 樞 傳 導 物 質 的 變 化, 及 腦 內 物 質 代 謝 的 改 變, 所 以 有 良 好 的 止 痛 作 用 二 針 刺 的 止 痛 作 用 及 其 原 理 1. 針 刺 的 止 痛 作 用 : 12 2. 針 刺 止 痛 的 神 經 作 用 機 理 :,,, T 13,14 3. 中 樞 神 經 傳 導 物 質 與 針 刺 止 痛 : 2 三 經 由 表 面 電 極 電 刺 激 穴 位 的 作 用

132 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 15,16 1. 活 血 止 痛 : 可 用 於 各 種 頭 疼 腰 痛 腿 痛 腹 痛 等 ( 如 : 合 谷 勞 宮 阿 是 穴 ) 2. 平 衡 陰 陽 : 尤 宜 陽 虛 畏 寒 遺 尿 遺 精 早 泄 等 ( 如 : 雙 腎 俞 氣 海 關 元 ) 圖 1 大 鼠 的 骨 骼 及 針 灸 穴 位 圖 3. 調 經 安 神 : 適 宜 各 類 氣 血 紊 亂 心 神 不 寧 之 煩 燥 失 眠 健 忘 者 ( 如 : 內 關 外 關 勞 宮 大 陵 ) 4. 行 氣 榮 血 : 可 用 於 氣 血 偏 枯, 氣 滯 血 瘀 之 痿 症 偏 癱 ( 如 : 環 跳 足 三 里 曲 池 合 谷 ) 四 微 透 析 技 術 與 大 鼠 針 刺 研 究 1 HPLC-ED 17 微 透 析 探 針 18 2 一 材 料

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 133 1. 橡 膠 管 :(0.381 mm I.D.; 2.210 mm O.D.) 2. 矽 膠 管 (silica tubing) 粗 管 :(0.32 mm I.D.) 3. 矽 膠 管 (silica tubing) 細 管 :(0.04 mm I.D.; 0.14 mm O.D.) 4. 聚 乙 烯 管 PE-10 (polyethylene tubing):(0.28 mm I.D.; 0.61 mm O.D.) 5. 透 析 膜 (Dialysis membrane):(0.2 mm O.D.); Molecular weight cut-off 13,000 Da 6. 環 氧 乙 烷 (epoxy adhesive):(a:b=1:1 等 量 混 合 ) 7. 注 射 針 頭 :(0.45 mm I.D., 26 gauge 1/2") 圖 2 同 心 導 管 微 透 析 探 針 的 製 備 二 製 作 步 驟 1. 取 材 料 橡 膠 管 1.0 cm 當 作 探 針 的 基 座, 將 注 射 針 頭 由 橡 膠 管 管 口 伸 入, 在 管 壁 0.5 cm 處 45 穿 出 ; 待 針 尖 套 上 矽 膠 管 ( 細 管 )4 cm 後, 順 勢 再 將 針 拉 回, 便 可 將 矽 膠 管 ( 細 管 ) 放 入 橡 膠 管 中 2. 在 橡 膠 管 前 端 的 矽 膠 管 ( 細 管 ) 套 上 矽 膠 管 ( 粗 管 )1.5 cm, 且 調 整 前 端 的 矽 膠 管 ( 細 管 ) 使 露 出 0.3 cm; 側 端 的 矽 膠 管 ( 細 管 ) 套 上 PE-10 1.5 cm 3. 使 用 環 氧 乙 烷 與 硬 化 劑 (A:B=1:1) 等 量 混 合 後 黏 接 接 縫 處 4. 待 膠 乾 後, 再 將 矽 膠 管 ( 細 管 ) 露 出 0.3 cm 部 套 上 透 析 膜, 且 將 多 餘 透 析 膜 稍 推 入 矽 膠 管 ( 粗 管 ) 或 剪 除 5. 再 將 透 析 膜 兩 端 用 環 氧 乙 烷 黏 接 好 6. 作 好 的 成 品 再 放 到 顯 微 鏡 下 看 是 否 有 黏 接 好 1. 取 材 料 橡 膠 管 1.0 cm 當 作 探 針 的 基 座, 將 注 射 針 頭 由 橡 膠 管 管 口 伸 入, 在 管 壁 0.5 cm 處 45 穿 出 ; 待 針 尖 套 上 矽 膠 管 ( 細 管 )6 cm 後, 順 勢 再 將 針 拉 回, 便 可 將 矽 膠 管 ( 細 管 ) 放 入 橡 膠 管 中

134 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 2. 在 橡 膠 管 前 端 的 矽 膠 管 ( 細 管 ) 套 上 PE-10 3.0 cm, 且 調 整 前 端 的 矽 膠 管 ( 細 管 ) 使 露 出 1.0 cm; 側 端 的 矽 膠 管 ( 細 管 ) 套 上 PE-10 1.5 cm 3. 使 用 環 氧 乙 烷 與 硬 化 劑 (A:B=1:1) 等 量 混 合 後 黏 接 接 縫 處 4. 待 膠 乾 後, 再 將 矽 膠 管 ( 細 管 ) 露 出 1.0 cm 部 套 上 透 析 膜, 且 將 多 餘 透 析 膜 稍 推 入 矽 膠 管 ( 粗 管 ) 或 剪 除 5. 再 將 透 析 膜 兩 端 用 環 氧 乙 烷 黏 接 好 6. 作 好 的 成 品 再 放 到 顯 微 鏡 下 看 是 否 有 黏 接 好 acrylic copolymer recovery 17 一 透 析 幫 浦 透 析 相 關 儀 器 及 透 析 液 1-5 µl/min infusion pump peristaltic pump CMA/100 / microprocessor control option) Harvard Microliter syringe Sage Model 341A PE-20 1 ml liquid swivel 二 轉 換 透 析 液 Carnegie Medicine CMA/110 CMA/111 三 收 集 透 析 液 Eppendorf 1 cm

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 135 behavioural chamber HPLC 20 7-8 HPLC 3 CMA/140 refrigerated HPLC CMA/200 圖 3 麻 醉 狀 態 下 的 大 鼠 腦 部 微 透 析 實 驗 HPLC load-valve HPLC 3 19 四 灌 流 液 (perfusate) Ringer's solution ( 147 mm Na +, 4.0 mm K +, 2 mm Ca 2+ ) essential 20 140 mm NaCl 3 mm KCl 1.2-2.4 mm CaCl 2 1 mm MgCl 2 1.2 mm Na 2 HPO 4 0.27 mm NaH 2 PO 4 7.2 mm glucose

136 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 ph 7.4 (open-ended) Ringer's salt solution HPLC-ED 五 透 析 液 中 鈣 離 子 的 濃 度 1-3.4 mm 1-2 mm 3.4 mm 1.2 mm DA quantitative 一 透 析 探 針 的 植 入 微 透 析 的 步 驟 二 微 透 析 探 針 植 入 前 的 準 備 1. 手 術 前, 將 透 析 探 針 ( 儲 存 在 乾 的 狀 態 下 ) 連 上 透 析 系 統, 並 安 置 在 立 體 定 位 儀 的 把 手 2. 將 把 手 夾 在 一 個 小 蒸 餾 架 上, 將 探 針 浸 到 含 有 透 析 液 的 燒 杯 中, 使 透 析 膜 完 全 浸 濕 和 微 微 張 開 一 旦 透 析 膜 弄 濕 後, 就 不 可 將 透 析 膜 移 出 溶 液, 因 為 透 析 膜 乾 掉 後, 會 影 響 單 胺 的 回 收 率 3. 這 時, 小 心 檢 查 透 析 膜, 確 定 它 是 流 通 而 不 滲 漏 的 三 麻 醉 acute preparation chloral hydrate 400 mg/kg i.p. halothane (0.15% halothane/air mixture) halothane chronic preparation 95% O 2 5% CO 2 halothane

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 137 四 手 術 步 驟 微 透 析 探 針 植 入 腦 內 1. 將 已 麻 醉 的 動 物 固 定 在 立 體 定 位 儀 上, 頭 上 做 1 cm 切 口, 露 出 頭 骨 盡 可 能 保 持 乾 燥 及 清 潔, 將 頭 皮 用 止 血 鉗 夾 住, 拖 往 兩 邊 2. 鑽 幾 個 2 mm 的 洞, 小 心 硬 腦 膜 不 要 弄 破, 然 後 放 1 或 2 個 不 鏽 鋼 螺 絲 釘 在 多 餘 的 洞, 這 些 是 用 來 做 牙 粉 定 位 點 (anchor point) 的 3. 接 下 來, 將 微 透 析 探 針 放 到 立 體 定 位 儀 上, 調 整 前 後 左 右 的 刻 度 ( 根 據 前 囪 門 ), 往 下 降 接 觸 到 硬 腦 膜, 此 處 算 為 上 下 刻 度 的 零 點 然 後 暫 時 移 走 探 針, 用 皮 下 注 射 針 的 針 頭 戳 破 硬 腦 膜, 小 心 不 要 傷 到 大 腦 表 面 的 血 管 4. 植 入 探 針 前, 先 將 頭 骨 和 大 腦 表 面 弄 乾 淨, 因 為 牙 粉 不 能 黏 附 在 濕 面 上 更 有 甚 者, 有 時 整 個 實 驗 過 程 測 到 很 高 濃 度 的 血 清 素, 這 可 能 是 因 為 在 植 入 過 程 中, 半 透 膜 沾 到 血 液 的 緣 故 5. 為 避 免 折 到 探 針 尖 端 及 損 傷 腦 組 織, 植 入 探 針 時 儘 可 能 緩 慢 ( 速 度 小 於 1 mm/min) 植 入 速 度 太 快 將 造 成 透 析 液 中 的 catecholamine 代 謝 物 DOPAC 和 HVA 持 續 數 小 時 升 高, 而 多 巴 胺 則 進 行 性 (progressive) 下 降 植 入 速 度 太 快, 透 析 液 可 能 被 受 損 神 經 元 釋 出 的 傳 導 物 質 污 染 6. 一 旦 定 位 後, 在 倒 牙 粉 前, 小 心 地 將 顱 骨 儘 可 能 弄 乾 當 牙 粉 快 乾 之 前, 放 掉 止 血 鉗, 使 皮 膚 合 起 來 然 後 倒 上 更 多 牙 粉, 使 傷 口 封 住, 不 必 縫 合 7. 等 到 牙 粉 變 硬, 移 走 探 針 把 手, 並 用 更 多 牙 粉 加 強 固 定, 以 確 保 探 針 被 好 好 地 支 撐 著 8. 這 個 製 備 現 在 是 已 準 備 好 要 做 急 性 實 驗 慢 性 實 驗 則 需 特 別 注 意 牙 粉 的 黏 合 和 傷 口 的 密 封 是 完 全 的, 且 黏 合 的 高 度 和 探 針 露 出 的 長 度 愈 少 愈 好 最 後, 切 斷 連 在 探 針 出 口 和 進 口 端 的 聚 乙 烯 管, 封 上 骨 蠟, 等 動 物 從 麻 醉 醒 來 後, 就 放 回 原 來 的 籠 子 五 急 性 ( 麻 醉 的 ) 微 透 析 實 驗 pentobarbital halothane chloral hydrate Halothane 95% O 2 5% CO 2 halothane pentobarbital chloral hydrate 60 mg/kg/h chloral hydrate 8 37 C 30 min 2 baseline period 20 2 post-drug 2 18,19

138 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 六 慢 性 ( 自 由 活 動 ) 的 微 透 析 實 驗 ( 圖 4) Perspex photocell beams digital readout counter 17 圖 4 清 醒 的 大 鼠 腦 部 微 透 析 實 驗 一 組 織 傷 害 微 透 析 實 驗 的 注 意 事 項 5-HT 5-HT 2 5-HT 24 二 慢 性 實 驗 的 過 程 gliotic

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 139 barrier 4 DA 7 5-HT 三 麻 醉 藥 的 使 用 halothane DA antagonist 圖 5 HPLC-ED 分 析 單 胺 及 其 代 謝 物 實 驗 (A) 單 胺 及 其 代 謝 物 標 準 品 (B) 紋 狀 體 透 析 液 1. norepinephrine; 2. epinephrine; 3. dopamine; 4. DOPAC; 5. 5-HIAA; 6. HVA; 7. 3-MT(3-methoxytyramine); 8. 5-HT. 用 高 效 液 相 層 析 - 電 化 學 偵 測 儀 (HPLC-ED) 分 析 單 胺 及 其 代 謝 物 一 基 本 原 則 carbon-based catechol indole HPLC-ED radioenzymatic mass spectrometry HPLC

140 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 peak HPLC column mobile phase reversed-phase ion-pair sodium octanyl sulphonate 150-250 mm 4.6 mm 5 µm C 18 methanol acetonitrile tetrahydrofuran 二 HPLC 儀 器 HPLC HPLC BAS PM-80, Bioanalytical System, IN, USA Rheodyne 7125 10 µl BAS-4C, Bioanalytical System, IN, USA 分 離 單 胺 及 其 代 謝 物 的 層 析 條 件 : regional DA 5-HT 0.22 µm Millipore 1 移 動 相 (1 liter, ph 3.0) 2.2 mm 476 mg Sodium 1-octanesulfonate 216.3 g/mol, Sigma 14.7 mm 2.03 g Monosodium dihydrogen orthosphosphate 138 g/mol, Merck 30 mm 8.82 g Sodium citrate 294.1 g/mol, Merck 0.027 mm 10 mg EDTA 372.24 g/mol, Merck 1 ml Diethylamine Merck 120 ml Acetonitrile Merck 微 量 層 析 管 (microbore column) 15 1 mm 5 µm C 18 0.05 ml/min 偵 測 電 極 (Detector cell) BAS 4C glassy carbon working electrode +0.75 (Ag/AgCl referenced electrode) 20 三 標 準 品 和 樣 品 的 儲 存 (stock solution) 0.1 M perchloric acid 100 µg/ml DA; DOPAC: dihydroxyphenylacetic acid; HVA: homovanillic acid ; 5-HIAA: 5-hydroxyindole acetic acid; 5-

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 141 HT DA, DOPAC, HVA, 5-HIAA, 5-HT 1 µg/ml Eppendorf -70 C 3 DA, DOPAC, HVA, 5-HIAA, 5-HT HPLC 四 方 法 確 認 ( ) ( 一 ) 鈣 離 子 和 tetrodotoxin 的 敏 感 度 sodiumchannel tetrodotoxin DA NA 5-HT 17 A ( ) CaCl 2 2-3 60-80 detectable limit 50% B Tetrodotoxin 2-3 1 10 µm tetrodotoxin 60 tetrodotoxin ( 二 ) 生 理 性 的 刺 激 A - (50-100 mm) 20 B - NA DA 5-HT 17 ( 三 ) 神 經 元 的 損 傷

142 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 ( 四 ) 不 同 實 驗 條 件 的 有 效 性 ( ) DA 5-HT 5-HT baseline period 結 論 參 考 資 料 1. Gu JC, Zhang LM. Acupuncture and moxibustion in primary health care in rural China, World Health Organization Forum 13: 51, 1992. 2. 石 學 敏, 中 醫 綱 目 上 冊, 凱 銓 出 版 社, 台 北,pp. 287-305,1992 3. Meyer JS, Teraura T, Sakamoto K, Kondo A. Central neurogenic control of cerebral blood flow. Neurology 21:247-262, 1971. 4. Furshpan EJ, Potter DD. Mechanism of nerve-impulse transmission at a crayfish synapse. Nature 180:342-343, 1957. 5. 楊 楣 良, 實 用 針 灸 手 冊, 浙 江 科 學 技 術 出 版 社, 浙 江,pp. 4-8,1995 6. Zettesstrom T, Sharp T, Marsden CA, Ungerstedt U. In vivo measurement of dopamine and its metabolites by intracerebral dialysis: changes after d-amphetamine. J Neurochem 41: 1769-1773, 1983. 7. 朱 麗 霞, 徐 維, 陳 正 秋, 針 刺 鎮 痛 中 大 腦 皮 層 和 腦 幹 的 下 行 抑 制 及 脊 髓 水 平 的 作 用 機 理, 針 刺 研 究 16: 145-150, 1991 8. 湯 健 涂 宗 萍 任 民 峰 韓 濟 生, 中 樞 乙 醯 膽 鹹 和 5- 羥 色 胺 在 針 刺 鎮 痛 中 的 作 用, 針 刺 研 究 5: 143-146, 1980

腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 143 9. 謝 翠 微 張 萬 琴 洪 息 君 韓 濟 生, 大 鼠 中 樞 甲 硫 腦 啡 太 和 亮 腦 啡 太 含 量 與 電 針 鎮 痛 的 關 係, 生 理 學 報 36: 192-197, 1984 10. 韓 濟 生, 中 樞 神 經 介 質 與 針 刺 鎮 痛, 北 京 醫 學 院 學 報 12: 12-19, 1980 11. Han JS. The neurochemical basis of pain relief by acupuncture, 中 國 醫 藥 科 技 出 版 社, 北 京,pp. 152-155, 1987 12. 楊 兆 民, 鞠 傳 軍, 實 用 針 灸 選 穴 手 冊, 金 盾 出 版 社, 北 京,pp. 338-341, 1998 13. 黃 維 三, 針 灸 科 學, 正 中 書 局, 台 北,pp. 9-11, 1985 14. 林 昭 庚, 新 針 炙 大 成, 中 國 醫 藥 學 院 針 灸 研 究 中 心, 台 中,1996 15. 韓 濟 生,H.A.N.S. 韓 氏 穴 位 暨 神 經 刺 激 器, 使 用 手 冊, 北 京,1999 16. Kaplan EA. Percutaneous electrical nerve stimulation for treatment of low back pain. JAMA 282: 941-942, 1999. 17. Sharp T, Zetterstrom T. In vivo measurement of monoamine neurotransmitter release using brain microdialysis. Stamford JA. (Ed) Monitoring neuronal activity. Oxford University Press, Oxford, U.K. pp. 147-179, 1992. 18. Tsai TH, Chen YF, Chen IF, Chen CF. Measurement of unbound caffeic acid in rat blood by on-line microdialysis coupled with liquid chromatography and its application to pharmacokinetic studies. J Chromatogr B 729:119-125, 1999. 19. Huang CT, Chen CF, Tsai TH. Pharmacokinetic study of granisetron in rat blood and brain by microdialysis. Life Sci 64:1921-1931, 1999. 20. Tsai TH, Chen CF. Simultaneous measurement of acetylcholine and monoamines by two serial on-line microdialysis systems, effects of methamphetamine on neurotransmitters release from the striatum of freely moving rats. Neurosci Lett 166: 175-177, 1994.

144 腦 部 微 透 析 之 穴 位 針 刺 研 究 J Chin Med 12(2): 69-84, 2001 AN ANIMAL BRAIN MICRODIALYSIS MODEL FOR ACUPUNCTURE STUDY T. H. Tsai 1,2, L. H. Wang 2, L. C. Hung 1, T. Y. Tseng 2 and C. F. Chen 1 1 National Research Institute of Chinese Medicine Taipei, Taiwan 2 Institute of Traditional Medicine, National Yang-Ming University Taipei, Taiwan (Received 27 th March 2001, revised MS received 17 th April 2001, accepted 18 th April) Acupuncture has been used in the treatment of diseases and relief of pain for centuries in The Orient. Acupuncture may be effective in the management of patients with compromised cardiovascular, respiratory, endocrine and digestive function. Similarly, neuromuscular electrical stimulation has been commonly employed in Western countries to alleviate pain, augment muscle strength and enhance blood flow in clinic applications, particularly as adjunctive treatment for peripheral vascular diseases. In the same way, electrical stimulation of acupuncture points with skin plate electrodes can elicit the same physiological and therapeutic effects as those produced by acupuncture and electro-acupuncture techniques, most commonly in connection with treatment of with peripheral vascular disease. Recently, there are controversies in the literature as to the effects of traditional acupuncture, electro-acupuncture and neuromuscular electrical stimulation in the treatments on brain disease. In order to investigate the relationship between acupuncture and brain neurotransmitter disposition, the microdialysis technique, which involved the inserting into a specific brain region of an animal dialysis probe through which neurotransmitter levels could be continuously monitored, was employed. This paper provides the details of such an acupuncturemicrodialysis model, and discussion of the advantages and limitations of such approach. Key words: Acupuncture, Electro-acupuncture, Microdialysis, Neurotransmitter, High-performance liquid chromatography. Corresponding to: Dr. T.H. Tsai, National Research Institute of Chinese Medicine, 155-1, Li-Nong Street Section 2, Taipei 112, Taiwan. Tel: (02) 2820-1999 ext 8091. Fax: (02) 2826-4276. E-mail: thtsai@cma23.nricm.edu.tw