第 七 部 分 : 产 品 安 全 及 生 物 相 容 性 问 题
本 节 目 的 根 据 WHO 规 范, 理 解 资 格 预 审 对 安 全 和 生 物 相 容 性 的 要 求 确 定 所 需 的 证 明 文 件 讨 论 遵 从 ISO 10993 确 定 其 他 安 全 问 题
资 格 预 审 对 安 全 和 生 物 相 容 性 要 求 WHO 规 范 要 求 生 产 企 业 提 供 下 列 证 明 文 件 : 遵 从 ISO 10993 亚 硝 胺 蛋 白 质 过 敏 施 粉 气 味
简 介 确 定 是 否 符 合 这 些 要 求 是 文 件 评 估 工 作 的 一 部 分 也 可 随 机 检 查 或 有 投 诉 时 再 确 定
ISO 10993: 医 疗 器 械 的 生 物 评 定 与 安 全 套 生 产 企 业 相 关 部 分 : 第 一 部 分 : 选 择 与 评 估 试 验 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 第 十 部 分 : 刺 激 与 过 敏
ISO 10993 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 男 用 乳 胶 安 全 套 要 考 虑 的 生 物 学 评 价 问 题 : 加 工 材 料 混 料 构 成 生 产 过 程 污 染 及 废 渣 物 滤 取 物 质 润 滑 剂 和 其 它 敷 料 最 终 产 品 的 性 质 和 特 点
ISO 10993 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 ( 续 ) 有 以 下 任 何 变 化 就 需 要 重 做 生 物 学 评 估 : 制 造 产 品 的 材 料 来 源 或 规 格 有 所 改 变 配 方 加 工 过 程 和 初 步 包 装 有 所 改 变 成 品 在 仓 储 过 程 中 或 人 用 产 品 可 能 会 产 生 的 任 何 不 良 反 应 证 据
ISO 10993 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 ( 续 ) 男 用 橡 胶 安 全 套 的 归 类 : 与 身 体 接 触 的 特 性 : 表 面 接 触 器 械 -- 皮 肤 和 阴 道 黏 膜 接 触 时 间 : 有 限 的 接 触 (A): 单 次 使 用 或 持 续 接 触 至 24 小 时
ISO 10993 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 ( 续 ) 男 用 橡 胶 安 全 套 的 初 期 评 估 测 试 : 细 胞 毒 性 ( 描 述 见 ISO 10993: 第 五 部 分 ) 过 敏 性 ( 描 述 见 ISO 10993: 第 十 部 分 ) 刺 激 性 ( 描 述 见 ISO 10993: 第 十 部 分 )
ISO 10993 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 试 验 对 提 取 物 测 试 : 对 细 胞 毒 性 的 定 性 和 定 量 评 估 直 接 接 触 测 试 : 对 细 胞 毒 性 的 定 性 和 定 量 评 估 间 接 接 触 测 试 : 对 细 胞 毒 性 的 定 性 评 估
ISO 10993 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 试 验 ( 续 ) 定 性 评 估 : 用 显 微 镜 检 查 细 胞, 需 要 的 话, 可 用 细 胞 化 学 染 色 检 查 细 胞 毒 性 刻 度 : 0: 无 细 胞 毒 性 1: 轻 微 细 胞 毒 性 2: 中 毒 细 胞 毒 性 3: 重 度 细 胞 毒 性
ISO 10993 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 试 验 ( 续 ) 定 量 评 估 测 量 下 列 一 种 或 多 种 参 数 : 细 胞 死 亡 抑 制 细 胞 生 长 细 胞 增 殖 或 形 成 集 落
ISO 10993 第 十 部 分 : 刺 激 与 延 迟 型 过 敏 症 试 验 确 定 医 疗 器 械 及 其 组 成 材 料 的 过 程 重 点 关 注 潜 在 的 产 生 刺 激 和 延 迟 型 超 敏 反 应 的 可 能 性 包 括 测 试 前 要 考 虑 的 事 项 测 试 程 序 和 解 释 检 验 结 果 的 关 键 因 素
ISO 10993 第 十 部 分 : 刺 激 与 延 迟 型 过 敏 症 试 验 ( 续 ) 体 外 刺 激 性 试 验 : 经 皮 电 阻 (TER) 试 验 人 工 培 植 表 皮 皮 肤 试 验 两 者 在 国 际 上 已 被 确 认 为 用 以 评 估 皮 肤 化 学 品 腐 蚀 性 的 可 选 择 试 验 方 法 可 用 成 品 和 / 或 它 的 提 出 物 进 行 试 验 目 前 还 没 有 通 过 验 证 的 对 皮 肤 刺 激 性 评 估 的 方 法
ISO 10993 第 十 部 分 : 刺 激 与 延 迟 型 过 敏 症 试 验 ( 续 ) 影 响 刺 激 性 研 究 结 果 的 重 要 因 素 : 皮 肤 过 敏 试 验 设 备 装 置 的 种 类 试 验 材 料 的 剂 量 试 验 材 料 应 用 的 方 法 阻 塞 程 度 应 用 地 点 暴 露 的 时 间 和 次 数 评 估 测 试 采 用 的 技 术
小 组 练 习 给 小 组 一 系 列 假 定 工 厂 发 生 的 配 方 或 生 产 加 工 过 程 的 变 化 小 组 必 须 发 现 哪 些 变 化 需 要 重 新 做 生 物 相 容 性 试 验 和 采 取 哪 种 试 验 方 法
其 它 涉 及 安 全 问 题 亚 硝 胺 蛋 白 质 过 敏 施 粉 粉 末 气 味
小 组 讨 论 您 现 在 怎 样 监 测 这 些? 亚 硝 胺 蛋 白 质 过 敏 施 粉 粉 末 气 味
亚 硝 胺 问 题 : 一 些 是 致 癌 性 的 有 些 用 于 橡 胶 化 合 物 的 化 学 品 能 产 生 亚 硝 胺 对 安 全 套 没 有 限 度, 婴 儿 橡 皮 奶 嘴 的 亚 硝 胺 有 限 制
如 何 保 持 亚 硝 胺 处 于 较 低 水 平 亚 硝 胺 只 有 当 从 避 孕 套 析 出 才 是 个 问 题, 所 以 只 关 注 外 渗 的 亚 硝 胺 采 取 有 效 的 萃 取 尽 可 能 多 地 提 取 亚 硝 胺 使 用 促 进 剂, 最 大 限 度 地 减 少 亚 硝 胺
过 敏 问 题 : 橡 胶 中 的 蛋 白 质 能 引 起 严 重 的 过 敏 ( 对 安 全 套 过 敏 反 应 是 少 见 的 ( 除 了 过 敏 体 质 的 人 )) 由 促 进 剂 或 蛋 白 质 残 留 物 所 致 两 种 方 法 测 试 : Lowry 法 和 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 抑 制 乳 胶 抗 原 检 测 法 美 国 试 验 与 材 料 协 会 标 准
尽 量 减 少 可 浸 出 蛋 白 只 有 从 橡 胶 浸 出 的 蛋 白 才 有 害 增 加 生 产 过 程 中 沥 滤 时 间 和 提 高 温 度 会 更 多 的 减 少 蛋 白 使 用 脱 ( 去 ) 蛋 白 质 的 乳 胶?
施 粉 问 题 : 玉 米 淀 粉 会 促 使 蛋 白 转 移 到 使 用 者 二 氧 化 硅 可 能 导 致 矽 肺 ( 如 果 在 工 厂 吸 入 ) WHO 规 定 不 得 使 用 滑 石 粉 和 石 松 粉 每 只 避 孕 套 最 高 可 推 荐 的 粉 尘 量 是 50 毫 克 美 国 试 验 与 材 料 协 会 和 ISO 标 准 测 定 手 套 中 的 粉 尘 含 量
气 味 问 题 : 封 装 的 避 孕 套 中 可 会 有 化 学 品 气 味 打 开 避 孕 套 封 装 袋 后 会 有 更 强 的 气 味 不 好 的 气 味 是 安 全 套 使 用 的 主 要 障 碍 气 味 鉴 定 往 往 是 主 观 性 的
气 味 ( 续 ) 不 好 闻 的 气 味 往 往 是 由 加 速 剂 引 起 的 选 择 气 味 不 强 的 化 学 品 不 要 过 量 使 用 选 择 不 在 工 厂 工 作 的 一 组 人 来 鉴 定 气 味
问 题?
第 七 讲 分 发 材 料 产 品 安 全 / 生 物 相 容 性 小 组 练 习 提 示 : 讨 论 下 列 生 产 过 程 中 可 能 出 现 的 变 化 考 虑 这 种 变 化 是 否 需 要 做 生 物 相 容 性 试 验 1. 乳 胶 成 熟 条 件 从 24 小 时 50 C 到 48 小 时 45 C 的 变 化 ; 2. 抗 氧 化 剂 水 平 由 1.3% 至 1.0% 的 变 化 ; 3. 抗 氧 化 剂 水 平 由 0.7% 到 1.3%. 的 升 高 ; 4. 促 进 剂 从 对 二 甲 苯 到 二 丁 基 二 硫 代 氨 基 甲 酸 锌 的 改 变 ; 5. 硫 磺 水 平 从 1.2% 降 到 0.8%; 6. 为 复 合 乳 胶 添 加 稳 定 剂 ; 7. 生 产 加 工 后 施 粉 的 变 化 ; 8. 萃 取 液 的 变 化 ; 9. 由 热 萃 取 到 冷 萃 取 的 变 化 ; 10. 由 湿 电 检 到 干 电 检 的 变 化 上 述 任 一 变 化 是 否 需 要 重 复 进 行 储 存 期 研 究? WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班
第 七 讲 分 发 材 料 2 注 意 : 此 材 料 仅 为 标 准 概 要 ; 切 勿 替 代 完 整 的 官 方 标 准 文 件 ISO 10993 概 要 : 医 疗 器 械 的 生 物 学 评 价 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 第 二 部 分 : 动 物 保 护 要 求 第 三 部 分 : 遗 传 毒 性 致 癌 性 和 生 殖 毒 性 试 验 第 四 部 分 : 与 血 液 相 互 作 用 的 试 验 选 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 试 验 第 六 部 分 : 植 入 物 植 入 后 局 部 反 应 试 验 第 七 部 分 : 环 氧 乙 烷 灭 菌 残 留 量 第 八 部 分 : 生 物 试 验 用 参 考 材 料 的 选 择 与 合 格 证 明 第 九 部 分 : 潜 在 降 解 产 品 鉴 定 和 量 化 框 架 第 十 部 分 : 刺 激 与 延 迟 型 过 敏 症 试 验 第 十 一 部 分 : 系 统 毒 性 试 验 第 十 二 部 分 : 样 品 制 备 和 参 考 样 品 第 十 三 部 分 : 聚 合 医 疗 器 械 中 老 化 产 品 的 识 别 与 量 化 第 十 四 部 分 : 陶 瓷 降 解 产 品 的 识 别 与 合 格 鉴 定 第 十 五 部 分 : 对 从 金 属 和 合 金 中 降 解 的 产 品 的 识 别 和 合 格 检 验 第 十 六 部 分 : 降 解 产 品 和 可 滤 取 物 的 毒 理 动 力 学 研 究 设 计 方 法 第 十 七 部 分 : 可 滤 取 物 质 容 许 限 值 的 确 定 第 十 八 部 分 : 材 料 化 学 特 点 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 试 验 第 十 部 分 : 刺 激 与 延 迟 型 过 敏 症 试 验 第 十 二 部 分 : 样 品 制 备 和 参 考 样 品 第 十 三 部 分 : 聚 合 医 疗 器 械 中 老 化 产 品 的 识 别 与 量 化 第 一 部 分 : 评 价 与 试 验 背 景 : 医 疗 器 械 的 生 物 评 价 与 试 验 原 则 描 述 ; 基 于 器 械 与 身 体 接 触 特 点 与 期 限 分 类 的 类 别 描 述 ; 选 择 恰 当 的 试 验 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 1 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班
第 七 讲 分 发 材 料 2 注 意 : 此 材 料 仅 为 标 准 概 要 ; 切 勿 替 代 完 整 的 官 方 标 准 文 件 一 般 重 要 原 则 : 人 用 器 械 的 选 择 和 评 价 项 目, 包 括 生 物 学 评 估 ; 生 物 评 估 需 要 计 划 执 行 并 形 成 文 件, 这 些 都 应 由 有 相 关 知 识 和 经 验 并 能 基 于 各 种 材 料 的 性 质 和 已 有 的 测 试 程 序 做 出 决 定 的 人 员 来 执 行 男 用 乳 胶 安 全 套 生 物 学 评 估 应 考 虑 的 问 题 : 加 工 材 料 ; 混 料 构 成 生 产 过 程 的 污 染 及 废 渣 物 ; 滤 取 物 质 ; 润 滑 剂 和 其 它 敷 料 ; 最 终 产 品 的 性 质 与 特 点 若 有 以 下 任 何 变 化 则 需 要 重 做 生 物 学 评 估 : 制 造 产 品 的 材 料 来 源 或 规 格 有 所 改 变 ; 配 方 加 工 过 程 和 初 步 包 装 有 所 改 变 ; 成 品 在 仓 储 过 程 中, 或 人 用 产 品 可 能 会 产 生 的 任 何 不 良 反 应 证 据 男 用 乳 胶 安 全 套 根 据 下 列 特 点 分 类 : 根 据 与 身 体 接 触 的 特 性 : 表 面 接 触 器 械 : 皮 肤 和 阴 道 黏 膜 ; 接 触 时 间 : 有 限 的 接 触 (A): 单 次 使 用 或 持 续 接 触 至 24 小 时 男 用 乳 胶 安 全 套 的 初 始 评 估 测 试 : 细 胞 毒 性 ( 描 述 见 ISO 10993: 第 五 部 分 ) 过 敏 性 ( 描 述 见 ISO 10993: 第 十 部 分 ) 刺 激 性 ( 描 述 见 ISO 10993: 第 十 部 分 ) 第 五 部 分 : 细 胞 毒 性 试 验 背 景 : 描 述 医 疗 器 械 细 胞 毒 性 生 物 学 评 估 试 验 方 法 ; 这 些 方 法 确 定 以 直 接 或 渗 透 法 对 培 养 细 胞 的 孵 化 ; 测 试 样 品 和 控 制 品 最 少 应 有 三 个 复 制 品, 假 如 复 制 结 果 有 不 一 致 处, 应 进 行 重 复 试 验 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 2 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班
第 七 讲 分 发 材 料 2 注 意 : 此 材 料 仅 为 标 准 概 要 ; 切 勿 替 代 完 整 的 官 方 标 准 文 件 对 提 取 物 测 试 : 对 细 胞 毒 性 的 定 性 和 定 量 评 估 ; 直 接 接 触 测 试 : 对 细 胞 毒 性 的 定 性 和 定 量 评 估 ; 间 接 接 触 测 试 : 对 细 胞 毒 性 的 定 性 评 估 确 定 细 胞 毒 性 : 定 性 评 估 : 用 显 微 镜 检 查 细 胞, 需 要 的 话, 可 用 细 胞 化 学 染 色 检 查 细 胞 毒 性 刻 度 : 0: 无 细 胞 毒 素 1: 轻 微 细 胞 毒 素 2: 中 度 细 胞 毒 素 3: 重 度 细 胞 毒 素 定 量 评 估 : 测 量 下 列 一 种 或 多 种 参 数 : 细 胞 死 亡 抑 制 细 胞 生 长 细 胞 增 殖 集 落 形 成 第 十 部 分 : 刺 激 与 延 迟 型 过 敏 症 试 验 背 景 确 定 医 疗 器 械 及 其 造 成 产 品 存 在 潜 在 刺 激 与 持 续 型 过 敏 症 合 成 材 料 的 评 估 程 序, 包 括 检 测 前 要 考 虑 的 事 项 检 测 程 序 细 节 及 解 释 检 验 结 果 的 关 键 因 素 体 外 刺 激 性 试 验 两 种 体 外 试 验 方 法, 即 对 大 鼠 皮 肤 的 经 皮 电 阻 试 验 和 人 工 培 植 表 皮 皮 肤 试 验, 在 国 际 上 已 被 确 认 为 用 以 评 估 皮 肤 化 学 品 腐 蚀 性 的 可 选 择 试 验 方 法 然 而, 目 前 还 没 有 通 过 验 证 的 对 皮 肤 刺 激 性 评 估 的 方 法 可 用 成 品 和 / 或 它 的 提 取 物 进 行 试 验 影 响 刺 激 性 研 究 结 果 的 重 要 因 素 皮 肤 过 敏 试 验 设 备 装 置 的 种 类 ; 试 验 材 料 的 剂 量 ; 试 验 材 料 应 用 的 方 法 ; 阻 塞 程 度 ; 应 用 地 点 ; 暴 露 的 时 间 和 次 数 ; 评 估 测 试 采 用 的 技 术 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 3 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班
第 七 讲 分 发 材 料 2 注 意 : 此 材 料 仅 为 标 准 概 要 ; 切 勿 替 代 完 整 的 官 方 标 准 文 件 解 释 试 验 结 果 的 关 键 因 素 行 业 和 消 费 者 投 诉 数 据 ; 类 似 设 备 的 经 验 ; 在 皮 肤 科 诊 所 的 诊 断 测 试 结 果 ; 流 行 病 学 回 顾 性 调 查 资 料 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班 4
第 七 讲 分 发 材 料 3 更 多 安 全 问 题 : 亚 硝 胺 蛋 白 质 过 敏 和 施 粉 亚 硝 胺 亚 硝 胺 是 有 机 化 合 物, 其 结 构 为 R1N(-R2)-N=O; 亚 硝 胺 是 一 组 化 合 物, 由 二 级 胺 ( 往 往 在 蛋 白 质 中 ) 和 亚 硝 基 化 剂 反 应 生 成, 通 常 是 亚 硝 酸 盐 或 氧 化 氮 ; 硝 基 化 合 物 是 那 些 可 以 转 化 为 亚 硝 胺 ( 如, 二 级 胺 ) 的 化 合 物 ; 只 有 在 某 些 特 定 条 件 下, 才 能 形 成 亚 硝 胺 ; 一 些 用 于 橡 胶 化 合 物 的 化 学 品 能 产 生 亚 硝 胺 ; 硫 化 促 进 寄 剂 二 硫 化 四 甲 基 秋 兰 姆 许 多 二 硫 代 氨 基 甲 酸 盐 橡 胶 促 进 剂 NOBS-- N 氧 二 乙 撑 -2- 苯 骈 噻 唑 次 磺 酰 胺 ; 所 有 橡 胶 制 品 含 有 二 烃 基 胺 衍 生 物 都 产 生 相 当 量 的 亚 硝 胺 ; 亚 硝 胺 是 可 致 癌 的, 而 且 可 能 会 损 伤 肝, 肾, 肺, 皮 肤 及 眼 睛 的 健 康 N- 亚 硝 基 胺 N- 亚 硝 基 胺 是 二 级 胺 或 三 级 胺 有 直 线 型 分 子 链 接 ( 无 环 ); N 表 明 烃 基 前 缀 的 位 置 ; 目 前 已 检 测 的 大 约 300 种 氮 亚 硝 胺 化 合 物, 其 中 约 90% 是 致 癌 物 质 ; 首 要 关 注 的 是 亚 硝 胺 中 的 二 级 N- 亚 硝 胺 ; 已 有 法 规 限 制 在 一 些 橡 胶 制 品 中 的 亚 硝 胺 含 量 水 平 ( 如 婴 儿 橡 皮 奶 嘴 ); 产 品 中 亚 硝 胺 迁 移, 不 得 超 过 下 列 限 制 : 欧 盟 橡 胶 中 N- 亚 硝 胺 化 合 物 不 得 超 过 0.01 毫 克 / 每 公 斤 及 N- 可 亚 硝 化 物 化 合 物 不 超 过 0.1 毫 克 / 毫 克 美 国 亚 硝 胺 不 超 过 10 个 /10 亿 分 之 ppb 安 全 套 现 暂 无 限 制 水 平 ; 负 责 任 的 制 造 商 都 会 尽 量 保 持 亚 硝 胺 处 于 最 低 水 平 ; 目 标 水 平 大 约 是 20 微 克 / 每 克 ; 浓 度 低 越 好 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班 1
第 七 讲 分 发 材 料 3 如 何 保 持 亚 硝 胺 处 于 较 低 水 平 亚 硝 胺 只 有 当 从 安 全 套 析 出 才 是 个 问 题, 所 以 只 关 注 外 渗 的 亚 硝 胺 ; 采 取 有 效 的 萃 取 尽 可 能 多 地 提 取 亚 硝 胺 ; 使 用 促 进 剂, 最 大 限 度 地 减 少 亚 硝 胺 ------------------------------ 参 考 :Proksch E. 毒 理 学 评 价 避 孕 套 中 的 亚 硝 胺 国 际 卫 生 学 和 环 境 卫 生 期 刊 2001 年 204 204(2-3):103-110 摘 要 : 在 橡 胶 产 品, 包 括 手 套, 气 球, 玩 具, 婴 儿 奶 瓶 橡 皮 奶 嘴, 安 慰 品 橡 皮 奶 嘴 和 避 孕 套 中 已 研 究 发 现 有 挥 发 性 氮 亚 硝 胺 亚 硝 胺 是 烈 性 致 癌 物 质, 因 此, 欧 洲 的 法 律 规 定 在 橡 皮 奶 嘴 和 安 慰 品 橡 皮 奶 嘴 中, 每 公 斤 橡 胶 释 放 亚 硝 胺 和 N- 可 亚 硝 化 合 物 的 量 不 得 超 过 0.01-0.1 毫 克 此 前, 阴 道 内 源 性 亚 硝 胺 的 形 成, 被 认 为 是 导 致 宫 颈 癌 的 原 因 据 推 测, 来 自 安 全 套 的 外 源 性 亚 硝 胺 和 N - 可 亚 硝 化 合 物, 也 可 能 导 致 生 殖 器 官 癌 症 因 此, 我 们 浏 览 文 献 并 计 算 从 安 全 套 释 放 的 亚 硝 胺 诱 导 肿 瘤 的 风 险 比 奥 代 等 人 1997 年 在 体 外 实 验 中 发 现, 在 24 个 小 时 内, 从 安 全 套 中 高 达 88 毫 微 克 的 N- 可 亚 硝 化 合 物 转 移 到 子 宫 颈 黏 膜 在 性 交 过 程 中, 因 为 短 时 间 接 触 保 险 套, 如 10 分 钟 左 右, 在 女 性 生 殖 器 黏 膜 中 大 约 有 0.6 毫 微 克 的 迁 移 一 定 量 的 亚 硝 胺 也 可 向 阴 茎 皮 肤 中 转 移 估 计 在 有 生 之 年 有 1500 次 接 触 到 安 全 套 ( 50 只 套 / 年,30 年 ), 这 可 能 会 导 致 吸 收 总 计 0.9 微 克 的 亚 硝 胺 在 叙 利 亚 仓 鼠 身 上 的 动 物 研 究 显 示, 在 皮 肤 或 黏 膜 局 部 应 用 亚 硝 胺 总 量 约 1 g 时, 会 诱 导 局 部 和 / 或 全 身 性 肿 瘤, 尤 其 是 肝 脏 肿 瘤 这 个 剂 量 超 过 接 触 使 用 安 全 套 的 100 多 倍 此 外, 流 行 病 学 研 究 结 果 不 支 持 安 全 套 是 诱 导 癌 症 的 因 素 宫 颈 癌 和 肝 脏 肿 瘤 的 发 病 率 在 发 展 中 国 家 较 高, 可 是 发 展 中 国 家 的 安 全 套 使 用 量 却 相 对 较 少 此 外, 人 类 经 常 接 触 食 物 和 香 烟 烟 雾 中 的 亚 硝 胺, 剂 量 是 使 用 避 孕 套 的 1000 至 10000 倍 总 之, 安 全 套 中 的 亚 硝 胺 诱 导 肿 瘤 的 风 险 是 很 低 的 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班 2
第 七 讲 分 发 材 料 3 蛋 白 质 过 敏 橡 胶 过 敏, 主 要 与 使 用 医 用 手 套 有 关 ; 对 安 全 套 过 敏 反 应 是 罕 见 的 ( 除 过 敏 体 质 的 人 ); 只 有 持 续 接 触 后 才 可 能 会 发 生 过 敏 ; 有 两 种 类 型 的 过 敏 : 四 型 : 对 化 学 残 留 物 的 反 应, 通 常 都 较 为 温 和 ; 一 型 : 对 蛋 白 质 的 反 应, 可 以 很 严 重, 但 很 少 致 命 四 型 过 敏 对 化 学 残 留 物 的 反 应, 通 常 都 较 为 温 和 ; 通 常 仅 限 于 局 部 皮 肤 反 应 ; 通 常 都 是 由 促 进 剂 所 造 成 最 好 减 少 残 留 的 促 进 剂 ( 但 需 记 得 抗 氧 化 剂 性 能 ) 一 型 过 敏 对 蛋 白 质 的 反 应, 可 以 很 严 重, 但 很 少 致 命 ; 可 能 造 成 " 立 即 " 反 应 ( 接 触 五 分 钟 后 马 上 就 有 反 应 ); 只 有 约 10 % 的 蛋 白 质 是 过 敏 原, 但 没 有 特 异 性 专 门 的 检 测 ; 玉 米 淀 粉 可 加 速 蛋 白 质 转 移 ; 确 保 使 用 适 当 的 粉 末 不 良 反 应 类 型 反 应 类 型 症 状 产 生 原 因 四 型 : 化 学 过 敏 症 ( 细 胞 介 导 的 过 敏 ) 湿 疹 ; 在 皮 肤 暴 露 接 触 48由 于 加 工 残 留 的 化 学 物 至 96 小 时 后 发 生 质, 特 别 是 秋 兰 姆 和 氨 基 甲 酸 酯 一 型 : 乳 胶 蛋 白 质 过 敏 症 ( 免 疫 球 蛋 白 E 介 导 的 过 敏 ) 即 刻 局 部 发 痒, 烧 灼 感 或 在 天 然 橡 胶 乳 胶 制 品 中 可 不 适 ; 接 触 5 至 60 分 钟 后 发 现 蛋 白 质 风 疹 ( 荨 麻 疹 ); 鼻 炎, 哮 喘 ; 严 重 情 况 下, 有 过 敏 反 应 ( 少 见 ) WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班 3
第 七 讲 分 发 材 料 3 施 粉 在 生 产 过 程 中 用 来 防 止 安 全 套 粘 结, 并 使 他 们 容 易 展 开 ; 通 用 材 料 : o 玉 米 淀 粉 或 玉 米 面 o 碳 酸 镁 - MgCO 3 o 碳 酸 钙 - CaCO 3 o 二 氧 化 硅 - SiO 2 推 荐 的 最 大 量 是 每 只 安 全 50 毫 克 ; 不 得 使 用 滑 石 粉 和 石 松 粉 孢 子 ; 石 松 粉 可 引 起 软 组 织 肉 芽 瘤 滑 石 粉 可 能 与 肺 组 织 皮 肤 和 卵 巢 癌 有 关 如 果 在 工 厂 吸 入 硅 可 能 会 导 致 矽 肺 玉 米 淀 粉, 可 促 进 蛋 白 质 传 递 给 使 用 者 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班 4
第 七 讲 分 发 材 料 4 蛋 白 浓 度 测 定 :Lowry 法 LEAP 法 及 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 抑 制 乳 胶 抗 原 检 测 法 劳 瑞 Lowry 法 ( 美 国 试 验 与 材 料 协 会 ASTM D5712 [1999]) Lowry 法 测 定 蛋 白 质 的 浓 度 的 原 理 是 多 肽 氮 与 二 价 铜 离 子 在 碱 性 条 件 下 反 应, 然 后 由 铜 催 化 芳 香 酸 氧 化 福 林 酚 - 磷 钼 酸 - 磷 钨 酸 还 原 成 异 聚 钼 兰 [ 劳 瑞, 1951] Lowry 方 法 对 ph 值 的 变 化 灵 敏 度 高, 因 此,pH 值 的 测 定 溶 液 应 保 持 在 10-10.5 Lowry 方 法 对 低 浓 度 的 蛋 白 质 灵 敏 度 高 邓 恩 [ 1992 ] 建 议 浓 度 范 围 从 每 毫 升 0.10-2 毫 克 蛋 白 质, 而 普 瑞 斯 [1996] 建 议 每 毫 升 0.005-0.10 毫 克 蛋 白 质 Lowry 法 主 要 缺 点 是 准 确 值 的 ph 值 范 围 窄 不 过, 可 以 用 极 少 量 的 样 品, 这 样 对 反 应 混 合 物 的 ph 值 很 少 或 根 本 没 有 影 响 许 多 化 合 物 会 干 扰 Lowry 程 序 这 些 化 合 物 包 括 某 些 氨 基 酸 衍 生 物, 一 些 缓 冲 物, 药 物, 脂 质, 糖 类, 盐 类, 核 酸 和 巯 基 试 剂 [ 邓 恩,1992 ] 普 瑞 斯 [ 1996 ] 注 意 到, 铵 离 子, 两 性 离 子 缓 冲 液, 非 离 子 型 缓 冲 液, 巯 基 化 合 物 也 可 能 干 扰 Lowry 反 应 应 去 除 或 稀 释 这 些 物 质 后, 才 能 应 用 Lowry 化 验 法 Lowry 试 验 涉 及 乳 胶 蛋 白 与 碱 性 酒 石 酸 铜 的 化 合 物 的 反 应, 随 后 继 发 蛋 白 质 - 铜 酒 石 酸 合 成 物 与 福 林 试 剂 反 应, 导 致 在 分 光 光 度 计 1 可 探 测 的 蓝 色 液 体 就 像 应 用 于 检 测 乳 胶 蛋 白 质, 在 美 国 试 验 与 材 料 协 会 ASTM 修 改 的 Lowry 实 验 中, 首 先 沉 淀 这 些 蛋 白 质, 以 消 除 干 扰 的 水 溶 性 物 质 Lowry 试 验 只 是 在 蛋 白 质 沉 淀 和 还 原 步 骤 后 进 行 Lowry 试 验 方 法 检 测 乳 胶 蛋 白 精 度 在 微 克 范 围 美 国 试 验 与 材 料 协 会 限 定 的 定 量 测 试 极 限 为 70 μ 克 / 克 以 上 这 项 测 试 受 化 学 促 进 剂 的 影 响, 如 氨 基 甲 酸 酯, 秋 兰 姆, 苯 并 噻 唑, 胍 类 等 用 于 乳 胶 手 套 制 造 工 艺 和 乳 胶 本 身 可 自 然 发 现 的 酚 类 化 学 品 通 常 这 些 物 质 会 增 加 色 彩 的 程 度, 以 致 夸 大 或 出 现 假 阳 性 蛋 白 信 号 Lowry 试 验 方 法 得 到 进 一 步 规 范, 并 作 为 美 国 试 验 与 材 料 协 会 ASTM 的 测 试 方 法 d5712, 用 于 在 国 家 试 验 室 分 析 蛋 白 质, 也 是 美 国 FAD 认 可 的 检 测 医 用 手 套 中 的 蛋 白 质 水 平 基 于 这 种 度 量 方 法, 制 造 商 可 以 让 手 套 表 面 蛋 白 质 水 平 处 于 50 μ g/dm2 WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 1 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班
第 七 讲 分 发 材 料 4 LEAP 法 LEAP 或 乳 胶 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 测 定 抗 原 蛋 白 质, 是 用 兔 子 乳 胶 特 异 性 抗 体 测 定 乳 胶 蛋 白 含 量 把 手 套 萃 取 物 中 的 蛋 白 质 稀 释 成 不 同 浓 度, 并 吸 附 到 微 量 板 中 的 塑 料 管 中 然 后 加 入 已 知 数 量 的 抗 乳 胶 抗 体 结 合 蛋 白 抗 原 一 旦 这 个 抗 原 抗 体 复 合 物 形 成, 它 会 与 能 分 辨 抗 原 抗 体 复 合 物 的 第 二 种 抗 体 反 应 这 第 二 个 抗 体 带 有 颜 色 的 标 签, 当 活 化 启 动 显 现 颜 色 显 色 产 品 便 可 以 用 分 光 光 度 计 探 测 和 测 量, 颜 色 越 多 表 明 微 量 板 中 的 乳 胶 蛋 白 越 多 这 种 方 法 可 以 检 测 毫 微 克 数 量 级 的 胶 乳 蛋 白 但 是,LEAP 法 的 一 个 弊 端 就 是 受 乳 胶 手 套 产 品 表 面 活 性 剂 的 化 学 品 影 响, 使 其 中 手 套 蛋 白 结 合 量 呈 下 降 趋 势, 从 而 导 致 蛋 白 抗 原 检 测 偏 低 另 一 个 缺 点 是 多 肽 或 小 片 的 蛋 白 质 呈 减 少 的 趋 势, 附 着 在 微 孔 板 内, 因 此, 它 们 很 难 被 发 觉 洗 涤 剂 的 影 响 通 常 可 以 克 服, 将 蛋 白 质 样 品 稀 释 到 足 够 的 水 平, 则 仍 能 检 出 含 有 量 的 蛋 白 质, 但 不 适 用 太 多 洗 涤 剂 状 况 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 抑 制 乳 胶 抗 原 检 测 法 ( 酶 联 免 疫 吸 附 法 ) ( 美 国 试 验 与 材 料 协 会 ASTM D6499 [2003]) 酶 联 免 疫 抑 制 试 验 检 测 抗 原 蛋 白 质 是 用 兔 子 乳 胶 特 异 性 抗 体 测 量 乳 胶 抗 原 Yunginger [1994], Turjanmaa [1996] 酶 联 免 疫 吸 附 抑 制 试 验 和 LEAP 法 测 试 是 不 一 样 的 酶 联 免 疫 抑 制 法, 是 一 个 已 知 数 量 的 标 准 乳 胶 蛋 白 结 合 或 吸 附 到 固 体 支 持 物 上, 如 微 孔 板 中 的 塑 料 管 中 这 种 方 法 可 以 减 少 LEAP 方 法 中 常 见 的 结 果 变 化 和 表 面 活 性 剂 的 干 扰, 因 为 这 种 方 法 依 据 的 是 国 家 试 验 室 标 准 配 制 的 蛋 白 质 对 板 的 结 合, 而 不 是 与 未 知 的 手 套 提 取 物 结 合 将 一 个 已 知 稀 释 的 兔 子 抗 血 清 ( 乳 胶 特 异 性 抗 体 ) 加 到 板 上, 与 一 系 列 稀 释 待 测 验 的 手 套 提 取 物 混 合, 较 高 的 测 验 手 套 提 取 物 的 蛋 白 抗 原 水 平, 将 抑 制 已 知 数 量 的 IgG 抗 体 和 在 板 上 的 已 知 数 量 的 标 准 乳 胶 蛋 白 的 结 合, 因 此, 使 用 酶 联 免 疫 吸 附 抑 制 试 验 这 个 术 语 然 后 洗 板 以 清 洗 掉 没 有 结 合 的 手 套 提 取 物 和 抗 体 结 合 到 微 量 板 的 IgG 抗 体 用 能 与 它 结 合 并 发 出 颜 色 光 的 抗 IgG 抗 体 确 认 然 后 用 分 光 光 度 计 以 探 测 和 测 量 显 色 反 应 的 产 品 : 色 彩 度 越 低 ( 抑 制 结 合 越 大 ), 试 验 手 套 提 取 物 中 的 抗 原 蛋 白 水 平 更 高, 这 可 防 止 IgG 抗 体 结 合 到 用 标 准 乳 胶 蛋 白 质 涂 层 的 板 上 这 种 方 法 灵 敏 度 高 重 现 性 好 : 可 以 发 现 毫 微 克 数 量 级 的 乳 胶 抗 原 ( > 1 μ WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 2 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班
第 七 讲 分 发 材 料 4 g/dm2 ), 用 Lowry 法 只 能 检 出 微 克 级 数 量 酶 联 免 疫 抑 制 试 验 检 测 抗 原 蛋 白 含 量 依 赖 于 结 合 在 微 量 板 上 的 标 准 化 的 乳 胶 蛋 白 浓 度, 抗 乳 胶 抗 体 兔 子 抗 血 清 的 反 应 性 和 检 测 环 境 的 质 量 由 于 家 兔 的 免 疫 反 应 对 乳 胶 蛋 白 可 产 生 相 当 一 致 的 反 应, 因 此 认 为 酶 联 免 疫 抑 制 试 验 使 用 的 兔 子 抗 血 清, 会 被 待 测 手 套 提 取 物 中 的 蛋 白 质 抗 原 所 阻 断 由 于 从 一 些 乳 胶 免 疫 接 种 兔 种, 可 获 得 标 准 化 一 致 性 的 血 清 来 源, 因 此 乳 胶 抗 原 蛋 白 检 测 结 果 更 容 易 相 互 比 较 目 前, 酶 联 免 疫 吸 附 抑 制 试 验 检 测 乳 胶 抗 原 蛋 白 已 被 批 准 为 美 国 试 验 与 材 料 协 会 标 准 测 试 方 法 酶 联 免 疫 抑 制 试 验 测 定 手 套 中 乳 胶 抗 原 蛋 白 水 平 能 使 制 造 商 在 未 来 标 出 更 低 的 蛋 白 含 量, 或 标 出 特 定 蛋 白 质 抗 原, 因 为 这 种 方 法 增 加 了 测 试 的 特 异 性 和 灵 敏 度 由 于 Lowry 法 检 测 度 有 限, 美 国 FAD 目 前 没 有 允 许 让 制 造 商 标 明 蛋 白 质 水 平 低 于 50 微 克 /dm 2 的 手 套, 但 它 也 有 可 能 在 未 来 允 许 标 明 少 于 50 微 克 抗 原 胶 乳 蛋 白 /dm 2 Lowry, O. H., N. J. Rosebrough, A.L. Farr and R. J. Randall, 1951. Protein measurement with the Folin-Phenol reagents. J. Biol. Chem. 193: 265-275. Dunn, M. J., 1992. Protein determination of total protein concentration. Harris, E. L. V., Angal, S., [Eds], Protein Purification Methods, Oxford: IRL Press. Price, N. C., 1996. Proteins, Labfax, Oxford: Academic Press. ASTM Designation D5712-99: Standard Test Method for Analysis of Protein in Natural Rubber and its Products, September 1999 ASTM D6499-03 Standard Test Method for the Immunological Measurement of Antigenic Protein in Natural Rubber and its Products, ASTM, 2003. Yunginger J., Jones R., Fransway A., Kelso J., Warner M., Hunt L. and Reed C. (1994) Extractable latex allergens and proteins in disposable medical gloves and other rubber products. J. Allergy Clin. Immunol. 93, 836. Turjanmaa K., Mäkinen-Kiljunen S., Alenius H., Reunala T. and Palosuo T. (1996) In-vivo and in-vitro evaluations of allergenicity of natural rubber latex (NRL) gloves used in healthcare: A nation-wide study. (Abstract) J. Allergy Clin. Immunol. 97, 325. WHO 安 全 套 资 格 预 审 项 目 : 男 用 乳 胶 安 全 套 企 业 培 训 班 3