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2015 版 中国药典 农残检测的解决方案以及方法包介绍 赛默飞世尔科技三重四极杆串接气质

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目录 一. 方法包简介 4 二. 仪器简介 5 三. 化合物简介 6 四. 相关政策及法规 8 五. 仪器和设备 9 六. 样品前处理方法 10 七. 方法包使用简介 11 八. 应用文章 15 3

一. 方法包简介 方法包是赛默飞世尔科技色谱质谱部应用部门针对客户需求提出的简易仪器使用流程, 方法包内所涉及的化合物均为常见的 能在 GC/MS 上检测的化合物, 如农药残留 多环芳烃 多氯联苯 多溴联苯和多溴联苯醚 邻苯二甲酸酯等 方法包的作用就 是能使客户更快更简便得使用仪器, 尽快上手 方法包包括进样方法 数据处理方法 (TraceFinder 方法文件夹 ) 相关应用文章 相关标准 色谱柱信息 前处理方法 数 据文件等, 客户可以直接调用进样方法和数据处理方法完成化合物的定性定量分析 由于 Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 采用 T-SRM 进样方法而不是分时间段的扫描方法, 原来的进样的方法可以直接调用, 即使保留时间会有微小的偏差, 也不会影响最终的结果 另外,TraceFinder 软件自带的数据库可以直接编辑数据处理方法, 数据库里包括化合物的名称 离子对 碰撞能量 定量离子 定性离子 CAS 号等信息 同时,TraceFinder 软件可以根据数据处理方法自动关联生成 TSQ 8000 Evo 的方法文件 这样应用 TraceFinder 就可以直接生成数据处理方法和进样方法 整个过程都是自动化的, 几乎不需要操作者手动输入任何操作信息 方法包 (Method Kit) 对于常用分析化合物, 我们可以提供方法包 包括 : 邻苯二甲酸酯 PCB PAH PBDE 农残筛查 GB2763 药典中农残检测 烟草中农残 PM2.5 香港规管方案 亚硝胺 二恶英等 目的 : 上手方便, 直接使用 方法包 仪器方法 数据处理方法 色谱图 RT 色谱柱信息 前处理方法 相关文献 C10 保留时间 RT: 3.98-17.44 SM: 7G 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 10.06 10.97 9.08 8.05 7.19 12.78 12.79 12.96 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 307.000@cid6.00 [140.995-141.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 163.000@cid26.00 [76.995-77.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 149.000@cid34.00 [64.995-65.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 149.000@cid32.00 [64.995-65.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 149.000@cid30.00 [64.995-65.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 279.000@cid22.00 [148.995-149.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 225.000@cid34.00 [76.995-77.005] MS 5ppb-1 NL: 4.05E5 TIC F: + c EI SRM ms2 293.000@cid8.00 [126.995-127.005] MS 5ppb-1 0 4 6 8 10 12 14 16 Time (min) 4

二. 仪器简介 TSQ 8000 Evo 三重四极杆串接气质联用仪 秉承着在气相色谱三重四极杆质谱中技术的一贯领先优势,Thermo Fisher Scientific 在推出 TSQ 8000 之后再次创新, 推出了更新的一款气相串接质谱仪 TSQ 8000 Evo, 该款高效的 GC/MS/MS 提供了永不停机的生产率, 其出色的灵敏度, 超快的扫描速度, 简便的 MSMS 功能, 满足最苛刻的定量定性分析要求, 为食品安全 环境分析 法医和制药应用分析提供基础 TSQ 8000 Evo 主要特点 : AutoSRM 功能自动优化二级离子对信息 ; 定时保留时间 SRM 功能 (T-SRM) 和定时保留时间 SIM 功能 (T-SIM) 使高通量检测成为可能, 并且优化方法设置参数, 无需分配时间段 ; 最新的 TraceFinder 软件, 提供最新的技术平台, 界面友好的色谱分析软件, 可以直接调用数据库信息自动建立数据处理方法及进样方法 ; 高达 800 MRM/s 的扫描速度, 即使在极限高速扫描条件下仍不会过多损失灵敏度 在质谱不泄真空的情况下, 更换整个离子源, 节省常规系统维护时间, 简化操作 ; 双灯丝设计, 并且灯丝在同一侧 ; 离子源上具有双加热区, 有效去除基质对离子源的污染, 节省维护时间 ; 弯曲的预四极杆, 有效去除中性噪音, 减少背景并提高灵敏度 方法桥, 可以读取 Thermo Scientific TM ISQ 单四极杆气质联用仪的方法或者其他公司的 SRM 方法 5

三. 化合物简介 新药典共需要检测 76 种农药 ( 包含 2 种内标化合物 ) 表 1. 药典 GCMSMS 方法检测的 76 种化合物列表 (* 为内标 ) 编号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 1 Acrinathrin 氟丙菊酯 101007-06-1 C 12 H 8 Cl 6 2 Aldrin 艾氏剂 309-00-2 C 8 H 9 ClD 5 N 5 3 Atrazine-d5(ethyl-d5)* 氘代莠去津 163165-75-1 C 6 H 6 Cl 6 4 BHC-alpha alpha- 六六六 319-84-6 C 6 H 6 Cl 6 5 BHC-beta beta- 六六六 319-85-7 C 6 H 6 Cl 6 6 BHC-delta delta- 六六六 58-89-9 C 6 H 6 Cl 6 7 BHC-gamma (Lindane) gamma- 六六六 319-86-8 C 23 H 22 ClF 3 O 2 8 Bifenthrin 联苯菊酯 82657-04-3 C 10 H 12 BrCl 2 O 3 PS 9 Bromophos-ethyl 乙基溴硫磷 4824-78-6 C 8 H 8 BrCl 2 O 3 PS 10 Bromophos-methyl 溴硫磷 2104-96-3 C 17 H 16 Br 2 O 3 11 Bromopropylate 溴螨酯 18181-80-1 C 14 H 21 N 3 O 4 12 Butralin 仲丁灵 33629-47-9 C 10 H 6 Cl 8 13 Chlordane-cis 顺式氯丹 5103-71-9 C 10 H 4 Cl 8 O 14 Chlordane-oxy 氧化氯丹 27304-13-8 C 10 H 6 Cl 8 15 Chlordane-trans 反式氯丹 5103-74-2 C 10 H 13 ClN 2 16 Chlordimeform 杀虫脒 6164-98-3 C 15 H 11 BrClF 3 N 2 O 17 Chlorfenapyr 溴虫腈 122453-73-0 C 8 Cl 4 N 2 18 Chlorothalonil 百菌清 1897-45-6 C 9 H 11 Cl 3 NO 3 PS 19 Chlorpyrifos 毒死蜱 2921-88-2 C 7 H7Cl 3 NO 3 PS 20 Chlorpyrifos-methyl 甲基毒死蜱 5598-13-0 C 10 H 6 Cl 4 O 4 21 Chlorthal-dimethyl 氯酞酸二甲酯 1861-32-1 C 22 H 18 Cl 2 FNO 3 22 Cyfluthrin 氟氯氰菊酯 68359-37-5 C 23 H 19 ClF 3 NO 3 23 Cyhalothrin 氯氟氰菊酯 76703-62-3 C 22 H 19 Cl 2 NO 3 24 Cypermethrin 氯氰菊酯 52315-07-8 C 14 H 10 Cl 4 25 DDD-o,p' o, p'- 滴滴滴 53-19-0 C 14 H 10 Cl 4 26 DDD-p,p' p, p'- 滴滴滴 72-54-8 C 14 H 8 Cl 4 27 DDE-o,p' o, p'- 滴滴伊 3424-82-6 C 14 H 8 Cl 4 28 DDE-p,p' p, p'- 滴滴伊 72-55-9 C 14 H 9 Cl 5 29 DDT-o,p' o, p'- 滴滴涕 789-02-6 C 14 H 9 Cl 5 30 DDT-p,p' p, p'- 滴滴涕 50-29-3 C 22 H 19 Br 2 NO 3 31 Deltamethrin 溴氰菊酯 52918-63-5 C 9 H 11 Cl 2 FN 2 O 2 S 2 32 Dichlofluanid 苯氟磺胺 1085-98-9 C 4 H 7 Cl 2 O 4 P 33 Dichlorvos 敌敌畏 62-73-7 C 6 H 4 Cl 2 N 2 O 2 34 Dicloran 氯硝胺 99-30-9 C 14 H 9 Cl 5 O 35 Dicofol 三氯杀螨醇 115-32-2 C 12 H 8 Cl 6 O 36 Dieldrin 狄氏剂 60-57-1 C 15 H 21 NOS 6

编号 英文名 中文名 CAS 号 分子式 37 Dimepiperate 哌草丹 61432-55-1 C 12 H 11 N 38 Diphenylamine 二苯胺 122-39-4 C 9 H 6 Cl 6 O 3 S 39 Endosulfan I (alpha isomer) α- 硫丹 115-29-7 C 9 H 6 Cl 6 O 3 S 40 Endosulfan II (beta isomer) β- 硫丹 33213-65-9 C 9 H 6 Cl 6 O 4 S 41 Endosulfan sulfate 硫丹硫酸盐 1031-07-8 C 12 H 8 Cl 6 O 42 Endrin 异狄氏剂 72-20-8 C 8 H 8 Cl 3 O 3 PS 43 Fenchlorphos 皮蝇磷 299-84-3 C 9 H 12 NO 5 PS 44 Fenitrothion 杀螟硫磷 122-14-5 C 22 H 23 NO 3 45 Fenpropathrin 甲氰菊酯 39515-41-8 C 10 H 15 O 6 PS 46 Fenthion-d6 (o,o-dimethyl--d6)* 氘代倍硫磷 1189662-83-6 C 25 H 22 ClNO 3 47 Fenvalerate 氰戊菊酯 51630-58-1 C 12 H 4 Cl 2 F 6 N 4 OS 48 Fipronil 氟虫氰 120068-37-3 C 16 H 8 Cl 2 F 6 N 2 O 3 49 Flucythrinate 氟氰戊菊酯 70124-77-5 C 16 H 12 ClF 4 N 3 O 4 50 Flumetralin 氟节胺 62924-70-3 C 10 H 5 Cl 7 O 51 Heptachlor endo-epoxide 顺式环氧七氯 1024-57-3 C 10 H 5 Cl 7 O 52 Heptachlor exo-epoxide 反式环氧七氯 28044-83-9 C 10 H 5 Cl 7 53 Heptachlor 七氯 76-44-8 C 6 Cl 6 54 Hexachlorobenzene 六氯苯 118-74-1 C 16 H 15 Cl 3 O 2 55 Methoxychlor 甲氧滴滴涕 72-43-5 C 7 H 3 Cl 5 S 56 Methyl-pentachlorophenyl sulfide 甲基五氯苯基硫 1825-19-0 C 10 Cl 12 57 Mirex 灭蚁灵 2385-85-5 C 12 H 7 Cl 2 NO 3 58 Nitrofen 除草醚 1836-75-5 C 6 H 6 Cl 8 O 59 Octachlorodipropyl ether 八氯二丙醚 127-90-2 C 10 H 14 NO 5 PS 60 Parathion-ethyl 对硫磷 56-38-2 C 8 H 10 NO 5 PS 61 Parathion-methyl 甲基对硫磷 298-00-0 C 13 H 19 N 3 O 4 62 Pendimethalin 二甲戊乐灵 40487-42-1 C 6 H 2 Cl 5 N 63 Pentachloraniline 五氯苯胺 527-20-8 C 7 H 3 Cl 5 O 64 Pentachloranisole 五氯甲氧基苯 1825-21-4 C 21 H 20 Cl 2 O 3 65 Permethrin 氯菊酯 61949-76-6 C 23 H 26 O 3 66 Phenothrin 苯醚菊酯 26002-80-2 C 13 H 11 Cl 2 NO 2 67 Procymidone 腐霉利 32809-16-8 C 6 Cl 5 NO 2 68 Quintozene 五氯硝基苯 82-68-8 C 19 H 17 ClN 2 O 4 69 Quizalofop-ethyl 喹禾灵 76578-14-8 C 6 HCl 4 NO 70 Tecnazene (TCNB) 四氯硝基苯 117-18-0 C 17 H 14 ClF 7 O 2 71 Tefluthrin 七氟菊酯 79538-32 - 2 C 9 H 21 O 2 PS 3 72 Terbufos 特丁硫磷 13071-79-9 C 14 H 16 ClN 3 O 2 73 Triadimefon 三唑酮 43121-43-3 C 14 H 18 ClN 3 O 2 74 Triadimenol 三唑醇 55219-65-3 C 13 H 16 F 3 N 3 O 4 75 Trifluralin 氟乐灵 1582-09-8 C 12 H 9 Cl 2 NO 3 76 Vinclozolin 乙烯菌核利 50471-44-8 C 12 H 9 Cl 2 NO 3 7

四. 相关法规及政策 2014 年 3 月, 国家药典委员会官网发布关于 中国药典 2015 年版通则 ( 草案 ) 公开征求意见的通知, 并指明国家药典委组织相关专业委员会已完成了通则 ( 附录 ) 编制及编码的研究工作 2015 年, 国家食品药品监督管理总局发布关于 中华人民共和国药典 (2015 年版 ) 的公告, 新版药典将于 2015 年 12 月 1 日起正式实施 2015 年版本 中国药典 收载药品数量达到 5608 个, 比 2010 年的药典增加了 20%, 不但药品质量检测与控制方法及中药 化学药和生物药标准将得到广泛性修订 完善及提升, 而且在中药标准方面, 基本建立了适合中药特色与特性的整体控制质量的新体系和新模式 新版药典更加注重体现中药特色, 表达中药特点, 并致力于中药质量整体控制水平的进一步提高, 筹建中国药品标准物质谱图库, 引领中药标准国际化进程 中国药典 2015 年版通则增订了中药材农药残留量测定法, 其中包括用气相色谱串联质谱测定 74 种农残, 液相色谱串联质谱测定 153 种农残, 为中药材农残测定确定了分析方法, 具有更好的特异性和灵敏性 8 8

五. 仪器和设备 仪器 :Thermo Scientific TM TSQ 8000 Evo 气相色谱三重四极杆串接质谱仪 设备 : 涡旋混合器 离心机 氮吹仪 水浴锅等 色谱柱 :TR-Pesticide II(30 m*0.25 mm*0.25 µm, 带毛细管色谱柱 5 m 预柱 ) 毛细管色谱柱 (Thermo Fisher Scientific) 9

六. 样品前处理 按照 2015 版 中国药典 的方法进行前处理 : 1. 提取 药材或饮片, 粉碎后 ( 过三号筛 ) 取 3 g 置 50 ml 聚苯乙烯具塞离心管中 加入 15 ml 1 % 冰乙酸, 涡旋放置 30 min 加入 15 ml 乙腈与 0.1 ml 内标, 涡旋混匀, 置振荡器上剧烈震荡 (500 次 /min)5 min 加入无水硫酸镁和无水乙酸钠的混合粉末 (4:1)7.5 g, 立即摇散, 震荡 3 min 冰浴 10 min, 离心 (4000 转 /min)5 min 2. 净化 取上清液 9 ml, 放入分散固相萃取柱 * 中, 涡旋混合, 震荡 5 min 4000 转 /min 离心 5 min, 取上清液 5mL 氮吹水浴浓缩至 0.4 ml, 加入乙腈至 1 ml 用微孔滤膜 (0.22 µm) 滤过, 取滤液分析 * 无水硫酸镁 900 mg,n- 丙基乙二胺 (PSA)300 mg, 十八烷基硅烷键合硅胶 300 mg, 石墨化炭黑 90 mg, 硅胶 300 mg 10

七. 方法包的使用 1. 进样方法使用 : 直接使用方法包中 meth 结尾的文件, 进行进样分析 不同仪器配置可能稍有不同, 可以参考以下方法截图 11

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2. 数据处理方法建立 : 直接拷贝方法包中的文件夹到 C:\TraceFinderData\32\ Methods 中, 方法就可以直接在 TraceFinder 软件中打开, 这个方法包括数据处理方法和进样方法 3. 将步骤 1 中的进样方法拷贝粘贴到 C:\TraceFinderData\InstrumentMethods 中, 在 Instrument Methods 中选择这个文件, 然后保存这个 TraceFinder 的 Master Method 13

4. 将按照步骤 1 进样完成的数据文件与 TraceFinder 方法相关联, 得到完整的数据处理方法 按需要更改保留时间 等参数进一步对数据处理方法进行优化, 得到准确的数据处理方法 整个过程无需输入化合物信息, 离子对信息, 挑选离子对信息找到化合物, 所有的步骤均是自动完成, 一点即可, 极大得提高分析效率, 简化方法流程 最终只需要再输入定量的标准曲线各浓度点和具体浓度即可完成数据处理方法的建立 14

八. 应用文章 15

气相色谱串接质谱联用法用于药材中多农残测定 邓武剑朱曼洁赛默飞世尔科技 ( 中国 ) 有限公司 AN_C_GCMSMS_17_201510Y 关键词 药材 ; 农药残留 ;TSQ 8000 Evo 三重四极杆气质联用 摘要 为了应对 中国药典 2015 版的实施, 根据 中国药典 2015 版 2341 款第四法的要求, 本文建立了一种运用三重四极杆气质联用仪 (GC-MS/MS) 来检测药材 饮片及制剂中部分农药残留量的分析方法 试样加无水硫酸镁 无水乙酸钠后, 用乙腈提取, 提取液经净化后, 氮吹仪浓缩, 用乙腈定容 在毛细管气 相色谱柱上分离, 采用 GC-MS/MS 测定, 用外标法定量计算 各化合物按照浓度 5.0 10.0 25.0 50.0 100.0 µg/l 建立标准曲线,74 种农药组分在 5.0~100.0 µg/l 浓度范围内线性关系良好, 线性相关系数均大于 0.99 按照 IUPAC( 国际理论 ( 化学 ) 与应用化学联合会 ) 方法规定计算各组分检出限, 各组分检出限在 0.01 2.15 µg/l 之间 结果表明, 应用赛默飞世尔科技 TSQ 8000 Evo 完全可以应对 2015 版 中国药典 关于 GC-MS/MS 检测药材 饮片及制剂中部分农药残留量的要求 前言 随着对药材农药残留的报道日益增多, 人们对农药残留危害的认识也越来越深入, 药典对其制定检测方法也越来越全面, 越来越科学 中国药典 2000 年版首次规定了 9 种有机氯农药残留的检测方法, 之后在 2005 年版的药典中, 除甘草 黄 检测进一步作出了详细规定, 并首次规定了用 GC-MS/MS 和 LC-MS/MS 等技术用于药材中农残检测 历版 中国药典 对药材农药残留量部分主要变化如表 1 所示 : 表 1. 历版 中国药典 对药材农药残留量部分主要变化 出版年份 限定与变化 2000 提出了 9 种有机氯农药残留的检测方法 2005 没变化 9 种有机氯农药残留的检测方法 2010 12 种有机磷农药残留的检测方法 3 种拟除虫菊酯的检测方法 2015 第一法有机氯类农药残留量测定法 - 色谱法第二法有机磷类农药残留量测定法 - 色谱法第三法拟除虫菊酯类农药残留量测定法 - 色谱法第四法农药多残留量测定法 - 质谱法 芪等药材外, 对其余药材均未提出限量要求 2010 版 中国药典 中不仅规定了 9 种有机氯农药残留的检测方法, 而且规定了 12 种有机磷类的检测方法, 还规定了 3 种拟除虫菊酯农药残留量的检测方法, 然而在限量标准方面仅规定了甘草和黄芪两种药物的六六六 滴滴涕 五氯硝基苯的限量标准, 其它中药材尚未涉及 最新的 2015 版 中国药典 对农残

1. 实验部分 1.1 仪器和试剂质谱仪器 :TSQ 8000 Evo 质谱仪 ( 赛默飞世尔科技, 美国 ); 气相色谱仪 :Trace1310 GC 配 AI l310 自动进样器 ( 赛默飞世尔科技, 美国 ); 色谱柱 :TR-Pesticide II 30 m*0.25 mm*0.25 µm 毛细管色谱柱 ( 赛默飞世尔科技, 美国 ); 试剂 : 甲苯 丙酮 乙腈, 均为色谱纯 ; 1.2 仪器方法气相方法 : 柱温箱 :60 ºC 保持 1 min, 以 30 ºC/min 升至 180 ºC, 再以 10 ºC/min 升至 300 ºC, 保持 5 min 进样口 : 不分流进样, 不分流时间 :1.5 min; 进样口温度 :270 ºC; 载气 : 恒流,1.2 ml/min; 传输线 :280 ºC 质谱方法 : 离子源温度为 300 ºC, 采用 T-SRM 方法, 具体检 测离子对如表 2 所示 : 表 2. 76 种农药对照品 监测离子对 碰撞电压 (CE) 序号 中文名 英文名 保留时间 (min) 母离子 子离子 CE(eV) 109 79 6 1 敌敌畏 Dichlorvos 5.52 185 93 12 186.9 93 12 214.8 143.6 20 2 四氯硝基苯 Tecnazene(TCNB) 7.75 214.8 178.7 10 214.8 179.9 15 167.1 139.4 26 3 二苯胺 Diphenylamine 7.95 167.1 140.1 18 167.1 166.1 16 306.1 159.7 20 4 氟乐灵 Trifluralin 8.07 306.1 206 10 306.1 264.1 8 117.1 89.8 18 5 杀虫脒 Chlordimeform 8.16 181.1 140 16 196 181.1 8 182.8 146.7 12 6 α- 六六六 BHC, Alpha 8.56 218.8 146.6 20 218.8 183 8 248.8 213.9 14 7 六氯苯 Hexachlorobenzene 8.66 283.8 213.8 28 283.8 248.8 18 175.9 148 10 8 氯硝胺 Dicloran 8.73 205.9 147.9 20 205.9 176 10 9 五氯甲氧基苯 Pentachloranisole 8.7 280 265 12 280 237 22 10 氘代莠去津 Atrazine-d5 8.8 205 127 10 205 105 15 180.9 145 14 11 β- 六六六 BHC, Beta 8.9 218.7 146.6 18 218.7 183 8 17

序号 中文名 英文名 保留时间 (min) 母离子 子离子 CE(eV) 213.8 141.9 28 12 五氯硝基苯 Quintozene 9.01 213.8 178.9 14 294.8 236.9 14 230.9 128.9 22 13 特丁硫磷 Terbufos 9.03 230.9 174.9 12 230.9 203 8 180.9 109 26 14 γ- 六六六 BHC, gamma 9.06 180.9 145 14 218.7 183 8 177 127 14 15 七氟菊酯 Tefluthrin 9.23 177 137 16 197 141.1 10 228.8 168 8 16 百菌清 Chlorothalonil 9 265.8 133 36 265.8 170 24 182.8 146.7 14 17 δ- 六六六 BHC, delta 9.44 218.8 146.5 20 218.8 182.9 8 264.8 193.6 18 18 五氯苯胺 Pentachloroaniline 9.78 264.8 202.8 20 264.8 229.3 12 125 47 12 19 甲基毒死蜱 Chlorpyrifos-methyl 9.9 125 79 6 285.9 93 20 124.9 47 12 20 甲基对硫磷 Parathion-methyl 9.99 124.9 79 6 263 109 12 21 甲基五氯苯硫磷 Methyl-pentachlorophenyl sulfide 10.08 296 281 20 296 263 15 124.9 47 12 22 皮蝇磷 Fenchlorfos 10.18 124.9 79 6 169 110.4 6 99.8 39 26 23 七氯 Heptachlor 10.24 99.8 65 12 271.8 236.9 12 123 51 32 24 苯氟磺胺 Dichlofluanid 10.54 123 77 18 223.9 123 10 196.7 107 36 25 毒死蜱 Chlorpyrifos-ethyl 10.66 196.7 168.9 12 313.9 257.9 12 109 81 10 26 对硫磷 Parathion (ethyl) 10.78 124.9 97 6 291 109 12 330 298.9 10 27 艾氏剂 Aldrin 10.85 262.7 191 30 262.7 192.9 32 18

序号 中文名 英文名 保留时间 (min) 母离子 子离子 CE(eV) 222.7 166.9 20 28 氯酞酸二甲酯 Chlorthal-dimethyl 10.77 300.7 222.9 22 300.7 272.9 12 208 111 20 29 三唑酮 Triadimefon 10.83 208 126.7 12 208 180.8 8 30 氘代倍硫磷 Fenthion-d6 10.9 284 169 15 284 115 20 111 74.9 12 31 三氯杀螨醇 Dicofol 10.96 139 111 12 250.9 139 12 266.1 174.3 22 32 仲丁灵 Butralin 10.94 266.1 190.1 10 266.1 219.9 10 125 79 6 33 溴硫磷 Bromophos-methyl (Bromophos) 11.06 328.9 313.8 14 330.8 315.8 14 34 顺式环氧七氯 Heptachlor exo-epoxide 11.1 354.8 264.9 15 352.8 262.9 15 35 氧化氯丹 Chlordane-oxy 11.1 386.7 262.7 15 184.9 85 30 36 反式环氧七氯 Heptachlor endo-epoxide 11.3 354.8 264.9 15 352.8 262.9 15 252.1 161 14 37 二甲戊灵 Pendimethalin 11.22 252.1 162 8 252.1 191.3 8 125 79 8 38 杀螟硫磷 Fenitrothion 11 277 109 16 277 260 6 366.9 212.9 28 39 氟虫腈 Fipronil 11.25 366.9 244.9 20 368.8 214.9 30 235 165.1 20 40 o,p'- 滴滴滴 DDD, o, p 11.08 235 199 14 236.8 165 20 95.9 53 16 41 腐霉利 Procymidone 11.58 95.9 67.1 8 283 96.1 8 119 65 26 42 哌草丹 Dimepiperate 11.6 119 91.1 10 145 112.1 8 186.8 124 18 43 乙烯菌核利 Vinclozolin 11.58 198 145 14 212 172 14 112 57.6 8 44 三唑醇 Triadimenol 11.57 128 65 18 168.2 70 10 19

序号 中文名 英文名 保留时间 (min) 母离子 子离子 CE(eV) 45 乙基溴硫磷 Bromophos-ethyl 11.6 358.7 302.8 15 302.8 284.7 15 372.8 265.8 20 46 顺式氯丹 Chlordane -cis 11.89 374.7 265.8 20 376.6 268 20 143 57 34 47 氟节胺 Flumetralin 11.87 143 107 18 143 108.1 18 194.7 125 22 48 硫丹 -1 Endosulfan peak 1 12.14 194.7 159.4 8 240.6 205.9 14 271.7 236.8 12 49 反式氯丹 Chlordane -trans 12.13 372.7 263.7 20 374.7 265.9 22 246 176.1 28 50 p,p'- 滴滴伊 DDE p, p 12.43 317.8 246 20 317.8 248 18 262.8 190.9 30 51 狄氏剂 Dieldrin 12.61 262.8 192.9 30 262.8 227.8 16 136.9 102 12 52 溴虫腈 Chlorfenapyr 12.66 248.9 112 24 248.9 137.1 18 246 176.1 28 53 o,p'- 滴滴伊 DDE o,p 12.65 317.8 246 20 317.8 248 18 54 除草醚 Nitrofen 12.78 202 139.1 20 282.9 253 10 245 173 22 55 异狄氏剂 Endrin 12.99 262.8 192.9 30 280.8 245.3 8 158.9 123 12 56 硫丹 -2 Endosulfan peak 2 13.15 194.7 159 8 240.6 205.8 12 57 硫丹硫酸盐 Endosulfan sulfate 13.2 271.9 237 15 387 289 5 235 165.1 20 58 p,p'- 滴滴滴 DDD p,p 13.17 235 199 14 236.8 165 20 235 165.1 22 59 o,p'- 滴滴涕 DDT o,p 13.24 235 199.5 10 236.8 165 22 235 165.1 22 60 p,p'- 滴滴涕 DDT p,p 13.85 235 199.5 10 236.8 165 22 165.1 163.6 24 61 联苯菊酯 Bifenthrin 14.61 181 165.9 10 181 179 12 20

序号中文名英文名保留时间 (min) 母离子子离子 CE(eV) 62 溴螨酯 Bromopropylate 14.73 63 甲氰菊酯 Fenpropathrin 14.8 64 甲氧滴滴涕 Methoxychlor 14.8 65 灭蚁灵 Mirex 14.96 66 苯醚菊酯 Phenothrin 15.05,15.16 67 氯菊酯 Permethrin 16.38,16.5 68 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin 16.89,16.98 17.05,17.09 69 八氯二丙醚 Octachlorodipropyl ether (S421) 10.21 70 氟丙菊酯 Acrinathrin 17.19 71 氯氟氰菊酯 Cyhalothrin I &II 17.22,17.32 72 氯氰菊酯 Cypermethrin 17.22,17.31 17.39,17.43 73 氟氰戊菊酯 Flucythrinate 17.38,17.58 74 氰戊菊酯 Fenvalerate 18.22,18.46 75 喹禾灵 Quizalofop-ethyl 17.44 76 溴氰菊酯 Deltamethrin 18.9,19.17 注 : 化合物 10 和 30 为内标, 其余 74 项为目标化合物 184.9 75.5 30 184.9 156.9 12 340.8 185 14 97.1 55.1 6 181 126.8 28 181 151.9 22 227.1 141.1 32 227.1 169.1 22 227.1 212.1 12 273.8 238.8 15 271.8 236.8 15 123.1 41.1 24 123.1 79.1 14 123.1 81.1 8 163 91.1 12 183.1 153 12 183.1 168 12 163 65.1 26 163 91.1 12 163 127.1 6 129.9 95 20 129.9 60 38 131.9 97 20 207.8 181.1 10 181 152 30 180.9 152 22 197.1 141.1 10 207.9 180.9 8 163 91.1 12 163 127.1 6 180.9 152.1 20 157 107.1 12 199.1 107.1 22 199.1 157.1 8 125 89 18 167 89 32 167 125 10 163 99.9 20 163 136 10 372.1 299 10 181 152.1 22 252.8 92.9 16 252.8 172 8 21

1.3 样品前处理 1) 样品提取 : 取供试样品 ( 药材或饮片 ) 粉碎成粉末, 称取 3 g 样品到 50 ml 离心管中, 加入 5 ml 1% 乙酸溶液, 涡旋使样品充分浸润 静置 再加入 10 ml 乙腈震荡混匀, 加入 4 g MgSO4 1 g CH 3 COONa, 在涡旋振荡器上振荡 2 min, 冰浴中放置冷却 5 min, 然后在 5000 rpm 转速下离心 5 min 2) 样品净化 : 取上清液 8 ml, 转移到 15 ml 净化管, 净化管中包括 900 mg MgSO 4 300 mg PSA 300 mg C18 石墨化炭黑 90 mg 旋涡震荡样品 1 min, 然后在 5000 rpm 转速下离心 5 min 准确取上清液 5 ml,n2 吹仪上于 40 水浴吹干, 乙腈定容至 1 ml, 直接 GC-MS/MS 分析 1.4 样品基质溶液按照 1.3 的程序处理药材样品, 得到空白样品的基质溶液 1.5 标准溶液的配置 1) 标准储备液 : 在十万分之一分析天平上称取每种农药单标化合物 10 mg, 加入 10 ml 相应的溶剂 ( 根据不同的化合物加入丙酮 甲苯或者乙腈 ) 溶解, 配制成浓度为约 1000 mg/l 的溶液 每种单个标准储备液的浓度根据称样量和加入溶剂的体积计算得到 所有单标储备液在 -20 冰箱中冷冻保存 单标储备液的有效期为 6 个月 2) 混合标准中间液 : 移取适量的单标储备液, 用乙腈稀释 中间标准储备液的浓度为 10.0 mg/ml 中间标准储备液在 2.2. 实验结果分析 2.1 色谱分离结果 每个化合物 SRM 质谱条件 ( 母离子 - 子离子 - 碰撞能量 ) 从 TraceFinder 的 CDB 中导出 ( 见表 2), 在该条件下运行样品 可得到目标物的 SRM 总离子流图见图 1 RT: 0.00-21.90 100 Relative Abundance 90 80 70 60 50 40 30 13.24 12.43 15.16 13.85 20 8.55 8.07 10.23 10 17.36 5.51 16.50 17.58 7.96 16.38 4.73 7.29 19.02 19.17 20.67 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Time (min) 2.2 标准曲线线性 检出限及精密度 配置混合标准溶液, 各浓度分别为 :5.0 10.0 25.0 50.0 100.0 µg/l 采用上述方法分别进样分析, 考察各组分的线性 实验结果表明 74 种农药组分在 5.0~100.0 µg/l 线性关系良好, 线性相关系数均大于 0.99, 对同一样品连续进样 6 针,RSD 在 0.37% 4.91% 之间, 重复性良好 按照 IUPAC 方法规定计算各 组分检出限, 各组分检出限在 0.01 2.15 µg/l 之间, 根据本应 用方法的前处理, 其检出限都满足最新药典对于农残分析检出 限的要求 ( 见表 3) 11.60 9.03 9.23 13.17 14.61 图 1. 标准溶液总离子流色谱图 (100 µg/l) NL: 8.87E6 TIC MS 100ppb -20 冰箱中冷冻保存 中间储备液的有效期为 3 个月 3) 工作标准溶液 : 取适量的混合标准中间液, 以空白样品基质 液 (1.4) 依次稀释成浓度为 5.0 10.0 25.0 50.0 100.0 工作标准溶液 序号中文名 英文名 表 3. 药材中 74 种农残的线性方程及检出限 线性范围 (µg/l) 线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 1 敌敌畏 Dichlorvos 5~100 Y=7.091e3X+6.716e3 0.9912 0.28 1.27 2 四氯硝基苯 Tecnazene (TCNB) 5~100 Y=1.251e3X+6.306e2 0.9931 0.15 1.85 3 二苯胺 Diphenylamine 5~100 Y=1.683e3X-2.532e3 0.9961 0.45 4.27 4 氟乐灵 Trifluralin 5~100 Y=9.74e2X+1.969e3 0.9946 0.61 0.65 5 杀虫脒 Chlordimeform 5~100 Y=5.698e3X-6.473e3 0.9946 0.36 3.41 6 α- 六六六 BHC, Alpha 5~100 Y=7.51e3X-2.535e3 0.9927 0.12 2.46 7 六氯苯 Hexachlorobenzene 5~100 Y=9.797e3X+1.787e4 0.9976 0.6 0.46 8 氯硝胺 Dicloran 5~100 Y=3.187e3X+5.58e3 0.9969 0.54 2.25 9 五氯甲氧基苯 Pentachloranisole 5~100 Y=1.361e4X-5.994e4 0.9912 0.14 4.12 10 氘代莠去津 Atrazine-d5 22

序号中文名 英文名 线性范围 (µg/l) 线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 11 β- 六六六 BHC, Beta 5~100 Y=1.304e4X+1.367e4 0.9935 0.31 4.01 12 五氯硝基苯 Quintozene 5~100 Y=2.224e3X+3.148e3 0.9924 0.45 2.06 13 特丁硫磷 Terbufos 5~100 Y=3.801e4X+9.538e3 0.9913 0.08 3.75 14 γ- 六六六 BHC, gamma 5~100 Y=5.493e3X-1.551e3 0.9933 0.09 1.06 15 七氟菊酯 Tefluthrin 5~100 Y=3.627e4X+4.424e4 0.9928 0.36 4.91 16 百菌清 Chlorothalonil 5~100 Y=1.361e4X-5.994e4 0.9912 1.22 3.08 17 δ- 六六六 BHC, delta 5~100 Y=2.444e3X-4.532e3 0.9939 0.6 2.94 18 五氯苯胺 Pentachloroaniline 5~100 Y=3.121e3X+9.83e3 0.9912 0.96 1.41 19 甲基毒死蜱 Chlorpyrifos-methyl 5~100 Y=4.679e3X-8.117e3 0.9931 0.58 3.94 20 甲基对硫磷 Parathion-methyl 5~100 Y=3.71e3X-6.599e3 0.9927 0.52 2.88 21 甲基五氯苯硫磷 Methyl-pentachlorophenyl sulfide 5~100 Y=1.361e4X-5.994e4 0.9912 1.42 4.56 22 皮蝇磷 Fenchlorfos 5~100 Y=3.545e3X+1.035e4 0.9923 1.02 1.74 23 七氯 Heptachlor 5~100 Y=2.125e3X-9.388e3 0.9973 1.18 2.08 24 苯氟磺胺 Dichlofluanid 5~100 Y=3.76e3X+1.91e3 0.9973 0.21 1.44 25 毒死蜱 Chlorpyrifos-ethyl 5~100 Y=2.647e3X+5387e3 0.9948 0.61 3.98 26 对硫磷 Parathion (ethyl) 5~100 Y=1.215e4X+2.156e2 0.995 0.02 0.69 27 艾氏剂 Aldrin 5~100 Y=2.731e3X+1.456e3 0.9901 0.21 4.91 28 氯酞酸二甲酯 Chlorthal-dimethyl (Dacthal) 5~100 Y=3.153e3X+7.979e3 0.9911 0.66 0.37 29 三唑酮 Triadimefon 5~100 Y=5.534e3X+6.714e3 0.9938 0.36 1.91 30 氘代倍硫磷 Fenthion-d6 31 三氯杀螨醇 Dicofol 5~100 Y=7.487e3X+2.138e4 0.9981 1.02 2.52 32 仲丁灵 Butralin 5~100 Y=2.66e3X-4.438e3 0.993 0.62 3.01 33 溴硫磷 Bromophos-methyl (Bromophos) 5~100 Y=4.018e3X-2.248e3 0.9908 0.16 1.08 34 顺式环氧七氯 Heptachlor exo-epoxide 5~100 Y=4.652e3X-3.673e3 0.9948 0.26 2.65 35 氧化氯丹 Chlordane-oxy 5~100 Y=2.652e3X+5.994e3 0.9932 0.61 1.59 36 反式环氧七氯 Heptachlor endo-epoxide 5~100 Y=3.368e3X-3.136e3 0.9957 0.28 1.16 37 二甲戊灵 Pendimethalin 5~100 Y=2.849e3X-4.971e3 0.991 0.42 3.75 38 杀螟硫磷 Fenitrothion 5~100 Y=3.776e3X-5.799e3 0.994 0.45 4.42 39 氟虫腈 Fipronil 5~100 Y=4.649e3X-8.489e2 0.9959 0.07 4.07 40 o,p'- 滴滴滴 DDD, o, p 5~100 Y=3.623e4X-1.61e5 0.9915 1.52 4.76 41 腐霉利 Procymidone 5~100 Y=7.713e3X=5.609e4 0.9951 2.15 3.76 42 哌草丹 Dimepiperate 5~100 Y=5.594e3X+2.734e4 0.9904 1.48 3.58 43 乙烯菌核利 Vinclozolin 5~100 Y=4.424e2X-1.555e3 0.9947 1.02 2.62 44 三唑醇 Triadimenol 5~100 Y=9.763e2X+7.111e2 0.9946 0.24 4.68 45 乙基溴硫磷 Bromophos-ethyl 5~100 Y=1.361e4X-5.994e4 0.9912 1.28 2.25 46 顺式氯丹 Chlordane alpha-cis 5~100 Y=7.385e2X-1.014e3 0.9955 0.43 3.59 47 氟节胺 Flumetralin 5~100 Y=1.787e3X+4.259e3 0.9945 0.75 4.51 48 硫丹 -1 Endosulfan peak 1 5~100 Y=3.261e2X+8.445e2 0.9939 0.82 3.42 49 反式氯丹 Chlordane gamma-trans 5~100 Y=1.929e3X-1.881e3 0.992 0.28 3.82 50 p,p'- 滴滴伊 DDE p, p 5~100 Y=2.867e4X+4.025e4 0.991 0.47 1.58 51 狄氏剂 Dieldrin 5~100 Y=1.159e3X+1.997e3 0.9936 0.56 1.81 52 溴虫腈 Chlorfenapyr 5~100 Y=9.684e2X+9.121e3 0.9955 1.02 4.22 53 o,p'- 滴滴伊 DDE o,p 5~100 Y=2.361e4X+5.994e4 0.9936 0.52 0.82 54 除草醚 Nitrofen 5~100 Y=3.636e4X-5.994e4 0.9986 0.52 4.27 55 异狄氏剂 Endrin 5~100 Y=8.199e2X-1.842e3 0.9919 0.72 2.15 56 硫丹 -2 Endosulfan peak 2 5~100 Y=1.002e3X+1.198e3 0.9906 0.32 2.69 57 硫丹硫酸盐 Endosulfan sulfate 5~100 Y=2.361e3X+3.994e3 0.9918 0.48 2.81 58 p,p'- 滴滴滴 DDD p,p 5~100 Y=4.247e4X+1.213e5 0.9936 0.88 1.38 23

序号中文名 英文名 线性范围 (µg/l) 线性方程 相关系数 (R 2 ) 检出限 (µg/l) RSD(%) (n=6) 59 o,p'- 滴滴涕 DDT o,p 5~100 Y=3.623e4X-1.61e5 0.9915 1.18 1.82 60 p,p'- 滴滴涕 DDT p,p 5~100 Y=2.403e4X-1.207e5 0.9906 1.46 2.41 61 联苯菊酯 Bifenthrin 5~100 Y=2.568e3X-4.309e2 0.9907 0.07 4.31 62 溴螨酯 Bromopropylate 5~100 Y=7.567e2X+5.064e2 0.9922 0.22 4.15 63 甲氰菊酯 Fenpropathrin 5~100 Y=1.765e4X+6.596e4 0.9928 1.22 1.86 64 甲氧滴滴涕 Methoxychlor 5~100 Y=1.125e4X-2.95e4 0.9966 0.81 3.97 65 灭蚁灵 Mirex 5~100 Y=3.361e4X-4.128e4 0.9946 0.41 3.52 66 苯醚菊酯 Phenothrin 5~100 Y=5.019e3X+7.745e3 0.9927 0.48 2.15 67 氯菊酯 Permethrin 5~100 Y=7.858e3X+9.276e3 0.9954 0.37 4.11 68 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin 5~100 Y=5.773e3X-1.271e4 0.9973 0.62 3.91 69 八氯二丙醚 Octachlorodipropyl ether (S421) 5~100 Y=2.586e4X-3.614e4 0.9962 0.43 3.95 70 氟丙菊酯 Acrinathrin 5~100 Y=6.561e3X-1.562e4 0.9937 0.73 1.97 71 氯氟氰菊酯 Cyhalothrin I &II 5~100 Y=8.808e2X+2.793e3 0.9926 0.96 3.36 72 氯氰菊酯 Cypermethrin 5~100 Y=4.254e3X-5.352e3 0.9942 1.02 3.83 73 氟氰戊菊酯 Flucythrinate 5~100 Y=7.809e3X-1.916e4 0.9914 0.75 2.78 74 氰戊菊酯 Fenvalerate 5~100 Y=2.157e3X-4.221e3 0.9962 0.61 1.88 75 喹禾灵 Quizalofop-ethyl 5~100 Y=2.012e3X-7.978e3 0.9936 1.18 4.79 76 溴氰菊酯 Deltamethrin 5~100 Y=1.678e3X-4.144e3 0.9922 0.82 1.69 3. 结论 本文参考药典前处理方法, 建立了气相串联质谱法 (GC-MS/MS) 测定药材中的 74 项农残, 样品前处理只需要 45 min 即可完 成, 经快速前处理后, 在 TSQ 8000 Evo 三重四极杆仪器上, 通过一针分析, 在 25 min 内完成分离和检测 以快速的前处理结合 赛默飞的 TSQ 8000 Evo 高通量 高灵敏度的三重四极杆仪器, 为药材的农残分析带来高效 准确 方便易用的解决方案 24

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