大环内脂类, 林可霉素及多肽类抗生素 macrolides, lincomycins and polypeptide antibiotics

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1 抗病毒药物

2 教学内容 一 抗病毒药物概述病毒简介抗病毒药的作用机制及分类 二 抗流感病毒 ( 禽流感 ) 药 三 抗 HIV 病毒药 四 抗乙肝病毒药

3 第一节抗病毒药物概述 病毒感染, 特别是 非典 的肆虐, 已成为现代社会人们关注的一个沉重话题 有数据显示, 人类传染病约 75% 是由病毒引起的, 其中严重危害人类健康者有流感 艾滋病 病毒性脊髓灰质炎 乙型脑炎 肝炎 麻疹 非典型肺炎 天花 狂犬病等 抗病毒药物的研究与开发, 自然成了医药界投资的热点 乙肝免疫球蛋白 齐多夫定 拉米夫定 单克隆抗体 干扰素等一系列抗病毒药品已成新宠

4 单纯疱疹 带状疱疹

5 一 病毒简介 病毒的物质构成 : 病毒无完整细胞结构, 属于非细胞型微生物, 仅由单链或双链核酸 (RNA 或 DNA) 的核心和外面的蛋白外壳 ( 衣壳,capsid) 组成, 有些病毒具有脂蛋白包膜 (envelope) 病毒体微小, 体积 20 30nm, 可通过滤菌器 人类目前发现的病毒有 4000 多种, 使人致病的有 150 种以上

6 病毒的复制 : 病毒没有自己的代谢系统, 只能寄生于其它细胞内, 利用宿主细胞的酶进行代谢 复制 病毒的增殖不是二分裂, 而是以其基因组 (DNA 或 RNA) 为模板, 通过转录和 / 或逆转录 翻译等复杂的生化过程, 复制 DNA 或 RNA, 合成蛋白质, 通过组装产生更多的病毒颗粒

7 病毒体从吸附穿透侵入宿主细胞内到最后从宿主细胞释放出更多的病毒体主要经历以下过程 : 1 吸附 (adsorption) 穿透(penetration) 侵入易感细胞, 2 脱壳 (uncoating), 3 合成核酸多聚酶, 4 合成核酸 (nucleic acid synthesis), 5 合成蛋白质 (protein synthesis) 及翻译后修饰 (posttranslational processing), 6 各部分组装 (packaging and assembly) 成病毒颗粒, 7 从宿主细胞释放出更多的病毒体

8 禽流感病毒的复制

9 二 抗病毒药的作用机制和分类

10 1. 作用机制 病毒只能寄生在细胞内, 利用宿主细胞的酶进行代谢 复制 因此, 干扰病毒复制, 抑制或杀伤病毒的药物常影响人体细胞的复制机制, 或通过其它机制损伤人体细胞而产生毒性 研究选择性抗病毒药仍是目前人类所面临的一大挑战 理论上讲病毒复制周期中的每个环节都可以成为药物作用的靶点

11 抗病毒药在某种意义上说只是病毒抑制剂 (virustatic agentis), 不能直接杀灭病毒和破坏病毒体, 否则也会损伤宿主细胞 抗病毒药的作用在于抑制病毒的繁殖, 使宿主免疫系统抵御病毒侵袭, 修复被破坏的组织, 或者缓解病情使之不出现临床症状 至今, 某些病毒性疾病如脊髓灰质炎和狂犬病还没有抗病毒治疗药, 只能靠疫苗预防, 一旦错过防疫期, 后果十分严重

12 对病毒性疾病的治疗至今仍缺乏专属性强的药物 临床上常用的药物主要有如下几类 : 抑制病毒复制的抗病毒药 增强机体免疫功能的免疫调节剂 针对临床症状的止咳 镇痛 解热和消炎等治疗药 防止继发感染的抗感染药 预防病毒感染的疫苗及阻断病毒传播的消毒药等

13 抗病毒药的分类有多种 2. 抗病毒药的分类 : 1 按病毒种类分类 : 广谱抗病毒药 抗 RNA 病毒药 抗 DNA 病毒药 2 按病毒所致疾病分类 : 抗疱疹病毒药 抗艾滋病病毒药 抗流感病毒药 抗肝炎病毒药等 3 按药物来源和化学结构与性质分类 : 化学合成药物 生物制剂

14 4 按作用机制或靶点分类 : 阻止吸附穿透药 ( 抗体 antibody) 干扰脱壳药 ( 金刚烷胺 ) 抑制核酸合成药 ( 嘌呤或嘧啶核苷类似药 逆转录酶抑制药 ) 抑制蛋白质合成药 ( 干扰素 ) 干扰蛋白质合成后修饰药 ( 蛋白酶抑制药 ) 干扰组装药 ( 干扰素 金刚烷胺 ) 抑制病毒释放药 ( 神经氨酸酶抑制药 ) 等

15 5. 阻断或抑制病毒繁殖的不同阶段而发挥作用与病毒竞争细胞表面受体, 阻止病毒的吸附如肝素或带阴电荷的多糖抑制病毒穿入或脱壳如金刚烷胺 金刚乙胺抑制病毒反转录如齐多夫定 拉米夫定 去羟肌苷 奈韦拉平 依法韦仑抑制病毒核酸合成如利巴韦林 阿昔洛韦 阿糖腺苷 碘苷抑制病毒蛋白质合成如干扰素 沙奎那韦 利托那韦 印地那韦 奈非地韦

16 3. 常用抗病毒药的抗病毒谱 金刚烷胺 金刚乙胺 : 仅对甲型流感有效 ; 利巴韦林 : 属单磷酸次黄嘌呤核苷酸脱氢酶抑制剂, 能有效阻碍病毒核酸的合成, 是广谱的抗病毒药物, 对 DNA RNA 病毒均有效 如 RSV 流感 付流感病毒 单纯疱疹病毒等 ; 阿糖腺苷 : 在体内迅速去氨使其成为阿拉伯糖次黄嘌呤, 达到广谱抗疱疹病毒 痘疹病毒 单纯疱疹病毒 1 2 型, 带状疱病毒的作用, 但对 CMV 疗效不好

17 环胞苷 : 外用药, 治疗各种疱疹病毒 ; 阿昔洛韦 伐昔洛韦 ( 阿昔洛韦的前体 ) 泛昔洛韦 ( 转化为贲昔洛韦 ) 贲昔洛韦等: 在体内转化为三磷酸化合物, 干扰病毒 DNA 聚合酶, 抑制病毒 DNA 复制 对疱疹类 DNA 病毒 ( 如单纯疱疹 1 2 型, 水痘带状病毒 CMV) 有效 ; 更昔洛韦 : 与阿昔洛韦机理相似, 但其三磷酸化合物在 CMV 感染细胞内的浓度比非感染细胞高 10 倍 对单纯疱疹病毒 2 型 CMV 的作用强于阿昔洛韦, 因其半衰期比阿昔劣韦长, 不需一日多次用药

18 膦甲酸钠 : 抑制病毒 DNA 聚合酶 对疱疹病毒 1 2 型, CMV, 乙肝病毒 EB 病毒有效 ; 责纳米韦 奥司他韦 帕拉米韦 : 抗神经氨酸酶, 对甲 乙两型流感有效 ; 拉米夫定 齐多夫定 司他夫定 去羟肌苷 瑞妥拉韦 依非韦伦 ( 抗 HIV 逆转录酶 ) 沙奎那韦 茚地那韦 奈非那韦 ( 抗 HIV 蛋白酶 ): 都可以与病毒的 DNA 聚合酶结合, 中止 DNA 链的延长 主要抗 HIV; 重组 α-2b 干扰素 : 主要用于治疗丙型肝炎病毒

19 第二节流感 禽流感及抗流感病毒药

20 近年来世界上许多国家和地区的 H5N1 亚型禽流感病毒给人类带来一连串疑问与争议 为何这种病毒能变异成不同的株系? 为何有些毒株具有感染人类和其他物种的能力? 为何禽流感疫情传播具有跨国性并几乎同时在许多国家出现? 人流感和禽流感有什么关系? 人类如何与流感病毒抗争?

21 教学内容 一 人流感及禽流感的流行与危害 二 流感病毒简介 三 抗流感病毒药物简介

22 一 人流感 禽流感的流行与危害 流行性感冒简称流感, 是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病, 能引起心肌炎 肺炎 支气管炎等多种并发症 由于病毒具有高度传染性, 所以易发生流行甚至世界范围大流行

23 近 100 年流感突发事件及其首发地 名称 首发时间 ( 年 ) 首发地点 西班牙流感 (H 1 N 1 亚型 ) 1918/1919 美国堪萨斯州 / 法国 亚洲流感 (H 2 N 2 亚型 ) 1957 中国贵州西部 香港流感 (H 3 N 2 亚型 ) 1968 中国香港特区 猪型流感 ( H 1 N 1 亚型 ) 1976 美国新泽西州 俄罗斯流感 ( H 1 N 1 亚型 ) 1977 中国辽宁 H 1 N 2 亚型流感 1988 中国黑龙江 禽 H 5 N 1 流感 1997 中国香港特区 禽 H 9 N 2 流感 1998 中国广东 禽 H 7 N 7 流感 禽 H 5 N 1 流感 荷兰 越南 泰国

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25 世纪噩梦 :1918 西班牙流感 西班牙流感 最早于 1918 年 3 月 11 日出现在美国堪萨斯州的军营中, 当时正值第一次世界大战, 随着部队的频繁调动, 病毒随即传遍欧洲和世界 与以往流感的不同之处在于, 它 袭击 的人群不是老弱病残, 而恰恰是通常抵抗力最强的 20 岁 50 岁之间的青壮年 其主要症状表现为咳嗽 气喘, 最终导致患者因呼吸困难窒息而死

26 在法国, 不到一年时间里, 约有 40 万人死于这一流感 有关资料引述巴黎拉雪兹公墓一位掘墓人的话说, 当时人们埋葬死人时, 甚至根本不知道死者的姓氏, 因为很多死者是一大家人或整村人一起死去的, 根本无法分辨他们姓甚名谁 美军官兵的折损, 十之有四是染上 1918 西班牙流感病毒而致死的 估计全世界患病人数在 6 亿以上, 死亡人数 4-5 千万, 比第一次世界大战战亡总人数高出 10 多倍 这次全球性大流行的结果, 约有 30% 的人口因此陨灭 可怕的是, 在 岁的青壮族群中, 发生史所未见的高致死率, 这样的流行规模, 是后来 1957 及 1968 年的流感病毒疫情所望尘莫及的

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28 World War I

29 Images from the 1918 Influenza Epidemic National Museum of Heath and Medicine

30 侏罗纪公园 病毒版 1918 西班牙流感病毒再现 美国马里兰州陆军传染病研究所, 为了解决上一世纪的世纪病毒之谜, 将一名再 1918 年 11 月不幸染上流感病毒死亡的士兵从阿拉斯加冰层中掘出, 解剖遗体并从其肺部组织中提取出当年的病毒 RNA, 利用反向遗传操作技术复活出 1918 年流感病毒 结果发现 1918 流感病毒果然拥有惊人的致病力

31 以 1918 流感病毒感染人类肺脏细胞, 一天后的病毒即增量到野生株 Tx/91 的 50 倍 ; 感染 1918 流感病毒的小鼠, 第二天即有 13% 的体重减轻 ; 感染四天之后的小鼠肺部的病毒量,1918 流感病毒可大量增殖到野生株 Tx/91 的 39,000 倍 ; 感染 1918 流感病毒的小鼠, 全数在六天之内死亡

32 原因 : 导致西班牙流感的 H1 亚型病毒, 其 HA 蛋白质有可能在保持 226 氨基酸 化学特性不变的情况下, 仅通过其位置的细微变化, 就实现了从鸟类到人类的跨物种传播, 变得易于和人体细胞受体结合 这一变异不仅使得病毒能够在人群中传播, 而且由于病毒保留了禽流感病毒氨基酸特征, 与人体免疫系统所熟悉的其它流感病毒不同, 结果人体免疫系统无法对其进行有效识别和抵御, 最终造成疾病大流行

33 2003 年底至今, 造成 411 人确定感染,256 人死亡的 H5N1 禽流感病毒, 是否会造成第二个世纪疫病? 答案有待病毒学者解出更多的基因密码

34 禽流感的发生与流行 禽流感 (Avian Influenza), 是由 A 型流感病毒引起的一种禽类的烈性传染性疾病或疾病综合征 1878 年, 首次在意大利发现了禽流感的流行 高致病性禽流感是由 A 型流感病毒中 H5 H7 亚型流感病毒引起, 目前已经呈世界性分布, 全世界 50 多个国家和地区 (OIE 数据 ) 报道了高致病性禽流感的发生和流行

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36 国家 世界上高致病性禽流感感染人的发病与死亡情况 ( 截至 ) 病例数 总计 死亡数 病例数 死亡数 病例数 阿塞拜疆 柬埔寨 死亡数 中国 吉布提 埃及 印尼 伊拉克 老挝 尼日利亚 泰国 土耳其 越南 总计 病例数 死亡数 病例数 死亡数 病例数 死亡数

37 圖為 2004 年在泰國的一家醫院中, 醫生向一名感染 H5N1 禽流感病毒的病患詢問病情

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39 候鸟移动与 H5N1 病毒散播

40 (B) A sick bar-headed goose showing typical opisthotonus before dying. (C) Bar-headed goose pancreas with pin-point necrotic lesions (arrow). Fig. 1. (A) The reported H5N1 AIV prevalence sites during the 2004 outbreak in China are highlighted in yellow (8). Arrows indicate the migratory routes of the bar-headed goose (A. indicus) to Lake Qinghaihu. (D) Microscopic lesions in bar-headed goose brain, showing congestion in the blood vessels (white arrows) and glial cell infiltration (black arrow). Hematoxylin and eosin 25 (scale bar, 50 mm).

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42 感染禽流感的鸭场 : 鸭突然死亡, 精神沉郁

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44 二 流感病毒简介 正粘病毒科, 流感病毒属成员

45 照片中的蓝色部分就是 H5N1 禽流感病毒, 下面的红色部分则是健康人体细胞, 照片显示 H5N1 正在攻击健康的细胞

46 病毒粒子的形态及结构观察 100nm 100nm 100nm * 病毒粒子直径 nm, 为负股单链 RNA, 由 8 个片断组成, 共编码 8 种结构蛋白和 2 种非结构蛋白 其表面有一层由双层脂质构成的囊膜, 镶嵌着 HA NA 二种重要的纤突

47 (HA) (NA) 流感病毒分类 基质蛋白 (M) 10 个神经氨酸酶 (NA) 亚型 (N1-N10) 核蛋白 (NP) 16 个血凝素 (HA) 亚型 (H1-H16) A 型 ( 人流感 哺乳动物流感和禽流感 ) ( 致病力强, 变异快, 感染范围广, 全球流行 ) 流感病毒 核蛋白 (NP) 和基质蛋白 (M) B 型 ( 人流感, 较少变异, 局部流行 ) C 型 ( 人流感, 很少变异, 散发流行 )

48 流感病毒可以从人和多种动物如猪 马 海生哺乳动物和各种鸟类等体内分离到 水禽的流感病毒是其它物种流感病毒的来源 流感病毒在进化中虽然保持了一定的种属特异性, 但有时却可以跨越种间屏障

49 猪在人流感病毒产生中的作用 一直以来, 人们认为猪是人流感和禽流感的 混合器 人流感病毒的受体多为唾液酸 α2,6 半乳糖的唾液寡糖 禽流感病毒的受体几乎都是唾液酸 α2,3 半乳糖的唾液寡糖 而猪的呼吸到上皮细胞上具有两种类型寡糖的受体, 所以, 人和禽流感病毒都可以感染猪

50 人流感流行毒株产生的可能机制 猪作为中间宿主 从禽直接传播给人

51 禽流感对人类健康意味着什么? 两种危险 第一种 : 导致人类直接感染, 出现非常严重的疾病 禽类流感病毒突破种类, 变异成能感染人类的病毒很罕见, 而 H5N1 型病毒已经引起很多人发生严重疾病, 导致死亡 正常的季节性流感发生时, 大多数人仅出现轻微的呼吸道症状,H5N1 型病毒引发不象正常季节的流感, 出现严重的临床症状, 恶化迅速, 死亡率高, 主要引发肺炎和多器官衰竭 暴发引起一半以上患者死亡 多数病例是健康儿童和年轻成年人 第二种危险是病毒本身, 更需要引起重视 只要条件充分, 就会变异成人传人的高传染性病毒 这种改变标志着全球性大流行的开始

52 吃禽类和禽产品安全吗? 安全! 在没有出现禽流感的地区, 禽类和禽产品可以像平常那样准备和食用 ( 注意要在良好的卫生习惯和正确的烹饪方法下 ), 不用担心感染 H5N1 病毒 在正在经历暴发的地区, 倘若这些禽类和禽产品是完全煮熟的并且在食物准备过程中正确地操作, 禽类和禽产品也可以安全地食用 H5N1 病毒对热敏感, 正常用于烹饪的温度都达到 70 摄氏度, 可以杀灭病毒 食用都需要确定禽类的所有部分是熟透的 ( 没有 粉红色 部分 ) 鸡蛋也是完全煮熟 ( 没有 流动的 蛋黄 )

53 病毒很容易从禽类传到人吗? 不容易! 虽然最近的暴发中有 100 多例人感染病例, 但与禽类大量感染和人类接触禽类的很多机会 ( 比如农家院里养家禽 ) 相比较, 人类感染者还是很少的 现在还不清楚为什么一些人轻微的接触禽类就会感染, 而其它人情况则不同

54 大流行的条件是什么? 流感病毒满足三个条件时, 会形成一次大流行 : 一种新亚型流感病毒出现 ; 能感染人, 引起严重的疾病 ; 能再人与人之间传播 H5N1 型病毒能满足前两个条件 : 对人类是一种新病毒 (H5N1 型病毒从来没有在人类中广泛传播 ), 已经感染过 100 多人, 死亡一半多 如果像 H5N1 型病毒出现, 人不具有免疫力 因此, 所有大流行的先决条件是 : 病毒具有人与人之间持续传播的能力 H5N1 型病毒只要发生了人类感染的机会, 那么它获得这种在人间传播的能力的危险性将持续存在, 同样, 只要该病毒长期地在禽类流行, 那么它发生人类感染的机会也将持续存在

55 在 H5N1 禽流感病毒的部分样本中, 科学家已发现有一个 PB2 氨基酸和 西班牙流感 病毒的一致, 这预示着 H5N1 正在逐渐适应人类, 但病毒还要有一些关键的变异才能获得人际间传染能力 如果 H5N1 病毒的 PA PB1 和 PB2 基因与人类流感病毒类似, 那可能是 危险的信号

56 禽流感会人传人吗?

57 2004 年 9 月 7 日, 一名 11 岁的泰国小女孩因严重肺炎住院, 小女孩与其姑姑同住, 住院四天前病患曾接触过死鸡 在尚未证实是禽流感前, 其妈妈 (26 岁 ) 自其他省份赶來照顾她 个小时, 妈妈并无任何禽类接触史 三天后开始发病,10 天后死亡, 並证实为禽流感, 病毒基因系列完全相同 病患的 32 岁姑姑亦于病患发病之初给予贴身照顾 小時,9 天后发病, 並产生肺炎, 住院第一天即给予达菲 (oseltamivir) 治疗, 而后即渐渐康复出院

58 有限的几例人传人的病例能说明什么?

59 三 抗流感病毒药物 离子通道阻断剂 神经氨酸酶 (NA) 抑制剂 RNA 干扰 抗体及干扰素

60 1. 离子通道阻断剂 金刚烷胺 金刚乙胺 三环 [ ,7] 癸烷 -1- 胺盐酸盐 (Tricyclo[ ,7]decan-1-amine hydrochloride) NH 2.HCl

61 作用机理 此类药物以流感病毒基质蛋白 M2 为作用靶点, 通过阻断 H+ 通道来抑制流感病毒复制, 所以被称为离子通道阻断剂 基质蛋白是流感病毒包膜上的一个跨膜蛋白, 具有 H+ 通道活性 流感病毒进入细胞后基质蛋白被激活并打开,H+ 进入病毒使 PH 降低, 核内体的酸化引起 HA 构象变化, 为病毒基因组进入感染细胞核提供必要条件 在病毒感染细胞晚期, 基质蛋白的 H+ 通道活性可以升高高尔基复合体内的 H+ 浓度, 使流感病毒膜蛋白 HA 形成高 ph 构象, 从而使新生的病毒具有感染性 离子通道阻断剂金刚烷胺能与基质蛋白 M2 结合, 从而影响基质蛋白的活性, 阻断 H+ 通道, 抑制流感病毒的复制, 发挥预防和治疗作用

62 抗病毒谱 有效预防和治疗所有 A 型流感毒株 对德国水瘟病毒 B 型流感病毒 一般流感病毒 呼吸合胞体病毒和某些 RNA 病毒具有一定的活性 在体外和动物模型中, 对人体不同亚型的原型 A 流感病毒也有抑制作用

63 临床应用 在 48 小时内对由 A 型流感病毒引起的呼吸道感染疾病有效 而对 B 型流感病毒引起的呼吸道感染则无效

64 不良反应及防治 视网膜炎 周围水肿 直立性低血压 充血性心力衰竭和尿潴留等 停药后上述症状可迅速消失 严重的神经系统反应用毒扁豆素可暂时逆转

65 2. 神经氨酸酶 (NA) 抑制剂

66 作用机理 神经氨酸酶是流感病毒包膜上重要的糖蛋白, 由 4 个亚基组成四聚体 其作用是切除病毒表面和感染细胞表面的唾液酸, 一方面破坏了细胞膜上的病毒特异性受体, 使病毒从感染细胞膜上释放 ; 另一方面可以防止新生病毒的自身凝集, 容许病毒扩散并增强其感染能力 此外, 神经氨酸酶还可以促进病毒从呼吸道粘液向周围组织扩散 鉴于神经氨酸酶在流感病毒复制和传播中发挥重要作用, 并且其活性中心的氨基酸组成高度保守, 因此, 以神经氨酸酶为靶点开发选择性抑制剂具有非常重要的意义

67 神经氨酸酶抑制剂对甲型和乙型流感病毒均有抑制作用 它能够与病毒的神经氨酸酶特异性结合, 阻断该酶的活性, 使病毒不能轻易地从感染细胞表面释放, 促进病毒凝集, 阻止病毒进一步扩散, 从而发挥抗流感的作用

68 目前, 在美国获批准上市的神经氨酸酶抑制剂仅有扎那米韦和奥塞米韦 ( 达菲 ) 最初设计的前体药物是神经氨酸的脱水衍生物, 它从分子构象上模拟了 NA 催化反应过程中的作用物过渡态, 因此, 可以与神经氨酸酶结合并抑制其酶活性 后来, 为了增强药物和酶活性中心的相互作用, 研究人员对其结构进行了改造 : 首先以胍基取代 4 位碳原子上的羟基, 得到扎那米韦 (Zanamivir, GG167,Relenza); 然后应用一个环己烷及用亲脂性侧链取代极性丙三醇, 得到奥塞米韦 (Oseltamivir, GS4104,Tamiflu)

69 Oseltamivir 用于治疗成人流感的效果 降低 50% 流感相关并发症 降低 60% 住院率 降低 40% 抗生素使用率

70 Oseltamivir 用于治疗儿童流感的效果 降低 40% 流感相关并发症 对照组 28% (65/235) 对实验组 17% (36/217) (P=0.005)* 降低 40% 中耳炎发生率 对照组 27% (53/200) 对实验组 16% (29/183) 降低 24% 抗生素使用率 对照组 41% (97/235) 对实验组 31% (68/217) (P=0.03)*

71 用于预防流感 适应症 : 成人及 13 岁的青少年 Oseltamivir 建议剂量 : 接触到已知确定感染流感个人后的情況, 提供事后的预防效果 75 mg 每日一次, 至少 7 天 在整个流感季节提供完整的预防效果 75 mg 每日一次 在服药期间內都会有保护效果 老年病人并不需要改变剂量 Oseltamivir 并不能取代年度流感疫苗施打

72 用于预防流感的效果及安全性 降低流感发生率 未使用流感疫苗的人, 流感发生率由对照组的 4.8% 降低至治疗组的 1.2% ( 降低 76%) 对老年等须要特殊照护族群, 流感发生率由对照组的 4.4% 降低至治疗组的 0.4% ( 降低 92%) 对家庭接触族群, 流感发生率由对照组的 12% 降低至治疗组的 1% ( 降低 92%) 副作用包括恶心 呕吐 及头痛 Oseltamivir 的安全性至少可达到连续使用 42 天

73 3. RNA 干扰 (RNA interference,rnai) RNA 干扰是一种由双链 RNA(dsRNA) 介导的序列特异性转录后基因沉默现象

74 作为抑制流感病毒感染的理想方法主要有以下几个原因 : 首先流感病毒为 RNA 病毒, 在病毒的整个生命周期中除 mrna 外, 病毒颗粒 RNA(Virion RNA) 和互补 RNA (Complementary RNA) 均可以作为小干扰 RNA (small interfering RNA,siRNA ) 作用的靶点 ;

75 其次由于流感病毒基因组分片段编码不同的病毒蛋白, 每一种蛋白在病毒的生命周期中都发挥重要作用, 因此, 可以同时抑制一个或多个病毒基因片段, 从而更好地防止耐药性病毒的产生 ;

76 再次 sirna 可以通过吸入的方式给药, 不仅使用方便, 而且可以增加其在感染部位的药物浓度 并且, 由于感染早期病毒数量小, 充足的 sirna 可以更有效地抑制病毒的复制, 从而起预防和治疗的效果 ; 最后 RNAi 与流感疫苗不同, 不需要使用者具有健全的免疫系统, 基于上述认识,Ge 等针对流感病毒的不同基因设计了 20 个 sirna, 结果提示, 以 NP 和 PA 基因为靶点的 sirna 对流感病毒有抑制作用

77 sirna 对 A 型流感病毒在 MDCK 细胞中复制的抑制作用

78 结果与分析 sirna 对 H5N1 亚型禽流感病毒在小鼠肺中复制的抑制作用 sirna 的瞬时表达特异性抑制 H5N1 亚型禽流感病毒在小鼠肺脏中的复制

79 结果与分析 sirna 对 H1N1 亚型流感病毒攻击小鼠的保护作用 H1N1 亚型流感病毒攻击后小鼠体重的变化 *, Groups differ for weight loss, p<0.05 (Student s test) H1N1 亚型流感病毒攻击后 小鼠的存活率

80 结果与分析 sirna 对 H5N1 亚型禽流感病毒攻击小鼠的保护作用 H5N1 亚型流感病毒攻击后小鼠体重的变化 *, Groups differ for weight loss, p<0.05 (Student s test) H5N1 亚型流感病毒攻击后 小鼠的存活率

81 谢谢!

82 第二节抗 RNA 病毒药 一 抗 HIV 病毒药 ( 一 ) 核苷类反转录酶抑制药 (NRTIs) 药物 : 为嘧啶或嘌呤衍生物包括 : 作用机制 : 齐多夫定 司他夫定 去羟肌苷 药物被宿主细胞磷酸化生成三磷酸核苷类似物, 作为酶 的底物, 竞争性抑制病毒反转录酶, 并被插入病毒 DNA, 导致其合成终止

83 嘧啶 嘌呤 去羟肌苷 齐多夫定 司他夫定

84 齐多夫定 (zidovudine,zdv) 1. 抑制 HIV-1, HIV-2 2. 治疗 AIDS 首选药 3. 常与拉米夫定或去羟肌苷合用 4. 骨髓抑制 贫血 恶心 头痛 发热等肝功不良易发生毒性 去羟肌苷 : 1. 联合应用于严重 HIV 首选 2. 去羟肌苷 + 齐多夫定 + 蛋白酶抑制剂 / 非核苷类反转 录酶抑制剂 效果好

85 ( 二 ) 非核苷反转录酶抑制药 NNRTI 药物 : 奈韦拉平依法韦仑地拉韦啶 (delavirdine) 作用机制 : 不需细胞内磷酸化代谢激活, 可直接改变反转录酶的构象 而抑制反转录酶活性 作用特点 : 1. 不需磷酸化 2.HIV-1 有效,HIV-2 无效 3.P450 代谢, 对肝药酶有抑制作用, 易引起药物相互作用 4. 易耐药

86 奈韦拉平和依法韦仑 1. 特异性抑制 HIV-1 反转录酶, 对 HIV-2 反转录酶和动物细胞 DNA 聚合酶无抑制作用 2. 不需细胞内磷酸化代谢激活, 可直接与反转录酶结合, 并破坏其催化部位, 抑制反转录酶 3. 可抑制 RNA 或 DNA 依赖性 DNA 多聚酶活性, 但不插入到病毒 RNA 4. 与其它抗逆转录病毒药物合用治疗 HIV-1 感染 5. 可预防 HIV-1 的母婴传播 6. 单用此药会很快产生同样的耐药病毒 ( 至少两种以上的其它抗逆转录病毒药物同用 )

87 地拉韦定 (delavirdine) 作用机制 : 不需细胞内磷酸化代谢激活, 可直接结合并抑制反转录酶活性临床应用 : 与 NRTI 有不同的结合位点, 故与 NRTI 和 PI 合用可协同抑制 HIV 复制

88 ( 三 ) 反转录病毒蛋白酶抑制剂 (PIs) 药物 : 沙奎那韦 利托那韦 印地那韦 那非那韦特点 : 1. 选择性抑制 HIV 蛋白酶 ( 对人蛋白酶亲和力弱 ) 2. 干扰病毒复制的晚期, 与 NRTIs 合用有协同作用 3. 病毒易产生耐药性 4. 均被 CYP3A4 代谢, 易引起药物相互作用

89 临床应用 : 1. 单一疗法 : 齐多夫定 ( 先用 )+ PIs( 后用 ) 优点 : 降低 HIV 病毒水平 升高 CD4+ 细胞计数 改善临床症状 缺点 : 耐药 2. 联合疗法 : 沙奎那韦 + 叠氮胸苷类 / 扎西他宾优点 : 疗效好 3. 目前建议 :PI+ 两种反转录酶抑制剂 不良反应 : 1. 胃肠道反应 糖尿病恶化 2. 印地那韦能增加尿中结石

90 ( 四 ) 抗艾滋病药物的治疗原则 1. 早期治疗的原则 有症状 无症状 2. 治疗方案的确定 三种药物联合应用药物的有效性 耐受性 方便性 药物相互作用 3. 治疗方案的调整 4. 艾滋病的预防

91 二 抗流感病毒药金刚烷胺 (amantadine) 和金刚乙胺 1. 干扰病毒进入宿主细胞后的脱壳和早期的转录阶段, 从而抑制其复制 2. 用于甲型流感病毒感染的防治 3. 金刚烷胺抗震颤麻痹作用 4. 金刚乙胺 > 金刚烷胺 ( 甲型流感 抗病毒谱 )

92 第三节 抗 DNA 病毒药 一 抗疱疹病毒药阿昔洛韦 (acyclovir,acv, 无环鸟苷 ) 1. 广谱高效抗病毒药 2. 对 I II 型单纯疱疹病毒 (HSV) 作用最强 3. 对乙肝病毒 (HBV) 水痘带状疱疹病毒(VZV) 和 EB 病毒有效 4. 选择性抑制病毒 DNA 多聚酶, 使其合成受阻 5. 治疗 HSV 感染的首选药, 局部应用疱疹性角膜炎 单纯疱疹, 带状疱疹

93 碘苷 (idoxuridine, 疱疹净 ) 1. 脱氧碘化胸苷嘧啶衍生物 2. 竞争性抑制 DNA 合成酶, 阻止 DNA 合成 3. 仅局部用 (HSV) 如 : 角膜炎 结膜炎 阿糖腺苷 (vidarabine) 1. 嘌呤核苷衍生物 - 广谱抗真菌药 2. 强大抗疱疹病毒 水痘病毒 HBV 3. 治疗 HSV 脑炎 角膜炎

94 二 抗乙型肝炎病毒药肝炎病毒 : 甲型 (HAV) 乙型 (HBV) 危害大丙型 (HCV) 抗乙型肝炎病毒药物有 : 干扰素拉米夫定泛昔洛韦和喷昔洛韦

95 拉米夫定 拉米夫定 HBV 感染细胞 正常细胞内 既是 HBV 聚合酶的抑制剂, 亦是此聚合酶的底物, 不干扰正常细胞脱氧核苷的代谢, 它对哺乳动物 DNA 聚合酶 a 和 b 的抑制作用微弱, 对哺乳动物细胞 DNA 含量几乎无影响 代谢成三磷酸盐 ( 活性形式 ) 渗入病毒 DNA 链阻断病毒 DNA 的合成 1. 用于慢性 HBV 感染 ( 最有效药物之一 ) 2. 常与齐多夫定合用治疗 HIV 感染

96 第四节 广谱抗病毒药 一 嘌呤或嘧啶核苷类似药利巴韦林 (ribavirin, 病毒唑 ) 1. 嘌呤三氮唑化合物 2. 抑制 RNA 和 DNA 病毒 广谱抗病毒药 3.A B 型流感病毒 腺病毒肺炎 甲 丙肝炎 疱疹 麻疹等 4. 治疗呼吸道合胞病毒肺炎和支气管炎效果最佳

97 二 生物制剂干扰素 : 1. 广谱抗病毒活性 2. 能激活宿主 C 酶, 降解病毒 mrna 3. 用于各种急 慢性病毒感染

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