第十章 B淋巴细胞与特异性体液免疫

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1 第九章 B 淋巴细胞 南华大学微生物学与免疫学教研室

2 概 述 特异性免疫 概念 : 指抗原进入机体后激发抗原特异性 (T/B) 淋巴细胞活化 / 增殖 / 分化, 并表现出免 疫效应过程 主要参与细胞 :T 细胞 /B 细胞 / 专职 APC

3 B 细胞发源地和分化成熟场所 鸟类 法氏囊 人类 骨髓 故称为骨髓依赖淋巴细胞 (Bone marrow dependent lymphocyte), 简称 B 淋巴细胞

4 中枢 外周 分布 骨髓 占淋巴细胞数 主要 血液 10%-20% 淋巴结 25% 脾脏 40%

5 B 细胞的的主要作用 产生 Ab 提呈 Ag 免疫调节

6 第一节 部位 条件 结局 B 细胞的分化发育 骨髓 CKs 及 AM 表达功能性 BCR 形成自身免疫耐受

7 ( 一 )BCR 基因结构及其重排 BCR 概述 本质 : 膜型免疫球蛋白 (mig) 功能 : 识别抗原, 启动体液免疫应答 编码基因特征 : 胚系阶段以分割的 数量众多的基因片段形式存在 发育过程中, 基因片段发生重排和组合, 产生不同的识别特异性抗原的 BCR

8 1. BCR 的胚系基因结构 Ig 轻链和重链基因位于不同染色体上 重链基因 (14 号染色体长臂 ) V 区 :V-D-J 基因片段 C 区 :C 基因片段 (40) (25)

9 轻链基因 κ 轻链 (2 号染色体 ) λ 轻链 (22 号染色体 ) V 区 :V-J 基因片段 C 区 :C 基因片段 V 区 :V-J 基因片段 C 区 :C 基因片段

10 (40) (25) Fig. 人 BCR 重链和轻链的胚系基因结构示意图

11 40 25 人 BCR 基因所在染色体及基因数

12 BCR 基因重排过程 1) 先 V 区重排成 V(D)J 基因片段 ( 重组 酶作用 ), 再与 C 区基因片段连接 2) 先重链重排再轻链重排

13 VDJ 或 VJ 基因重排连接 锚定在细胞膜 V 区基因 V 区与 C 区基因连接 转录 初级 RNA 转录体 成熟 mrna 翻译肽链 剪切加工 胞质 内质网 运送细胞膜高尔基体完整的 BCR 重链 轻链组装

14 3. 等位基因排斥和同种型排斥 结果 : 保证 1 个 B 细胞克隆只表达 1 种 BCR, 只分泌一种 Ab 等位基因排斥 :B 细胞中位于一对染色体上 的轻链或重链基因, 其中只有一条染色体上的基因得到表达, 先重排成功的基因抑制了同源染色体另一等位基因的重排 同种型排斥 : 两种轻链之间的排斥,κ 或 λ

15 B 细胞中位于一对染色体上的轻链或重链基因, 其中只有一条染色体上的基因得到表达 D H -J H 连接 V H -D H -J H 连接 Vκ-Jκ 连接 Vλ -Jλ 连接 等位基因排斥 同种型排斥 两种轻链之间的排斥,κ 或 λ 与 C 区基因构成功能性基因

16 ( 二 ) BCR 多样性产生的机制 1. 组合造成的多样性 o V-D-J/V-J 间基因片段组合 如人 : VH= =6000 Vκ =40 5=200; Vλ= 30 4=120 o 轻重链间基因片段组合 共计 = =

17 2. 连接造成的多样性 N 核苷酸 N 核苷酸 V 片段 D 片段 J 片段 ---3

18 3. 体细胞高频突变造成的多样性 成熟 B 细胞 ( 基因已重排 ) Ag/Th/CKs 活化 / 增殖 / 分化 ( 外周淋巴器官生发中心 ) 编码 V 区 CDR 的 DNA 点突变 Ab 多样性各种亲和力 BCR 高亲和力 BCR

19 ( 三 )B 细胞在骨髓中的发育 Igα/Igβ B

20 祖 B 细胞 :Igα/Igβ( 无重链 ) 前 B 细胞 :Pre-BCR 未成熟 B 细胞 : migm 成熟 ( 初始 )B 细胞 : migm 和 migd

21 替代性 BCR 复合物 (pre( pre-bcr) 表达 : Pre-B 细胞 结构 :μ 链 +λ5/vpreb( 假轻链 ) +CD79a/CD79b 功能 : 促进 B 细胞分化与成熟

22 替代性 BCR 复合物 (pre( pre-bcr) ) 模式图

23 B 细胞的发育阶段

24 ( 四 )B 细胞中枢免疫耐受形成机制 克隆清除 : 凋亡未成熟 B 细胞骨髓内结合自身 Ag 细胞凋亡 受体编辑不成功 : 凋亡 无能 (anergy): 未成熟 B 细胞结合自身 Ag migm 对 Ag 刺激不应答

25 第二节 B 淋巴细胞表面的分子表面的分子及作用

26 B 细胞的表面标志

27 ( 一 ) BCR 复合物 组成 : BCR-Igα/Igβ 1 BCR( mig) B 细胞特有 结构 类型及分布 migm 单体,4 条肽链组成 migd 未成熟和成熟 B 细胞 成熟 B 细胞 功能 : 直接结合特异性 ( 游离可溶性 )Ag

28 BCR 复合物模式图

29 BCR 与 TCR 的比较 BCR 复合物 TCR 复合物 组成 BCR-Igα/Igβ TCR-CD3 复合物 结合 Ag 游离可溶性蛋白 Ag MHC 分子 : 抗原肽 识别表位构象 / 线性表位线性表位

30 2 Igα(CD79a)/Ig (CD79a)/Igβ (CD79b) 结构 : 异二聚体 胞质区含有免疫受体酪氨酸活化基序 (ITAM) 作用 : 转导抗原与 BCR 结合产生的信号 参与 Ig 链从胞内向胞膜的转运

31 BCR 复合体

32 ( 二 )B 细胞共受体 ( 辅助受体 ) 组成 :CD19/CD21/CD81 功能 : 增加 B 细胞对抗原刺激敏感性

33 B 细胞的表面标志

34

35 ( 三 ) 协同刺激分子 作用 : Th 细胞可为成熟 B 细胞的活化提供第 二信号 ( 协同刺激信号 ) B 细胞为 APC 时, 可为 Th 细胞活化提供第二信号

36

37 协同刺激分子 B 细胞 T 细胞 对 B 细胞主要效应 CD40 CD40L B 最重要第二活化信号 CD27 CD70 促进 B 分化为浆细胞 CD70 CD27 诱导 Tr 生成 抑制 Ab 产生 CD80/86CD28 促进 B 细胞的活化 ICAM-1 LFA-1 促 B 与 Th 接触 LFA-1 ICAM-1 促 B 与 Th 接触

38 M:mitogen

39 ( 四 ) 其他膜分子 CD20: 特异性表达于 B 细胞 ; 调节跨膜钙离子流动 ; B 细胞的特异性标志 CD22: 特异性表达于 B 细胞 ; 胞内段含 ITIM 模体, 抑制性受体 ; 对 CD19/CD21/CD81 起抑制作用 CD32(FcγRⅡ): 抑制 B 细胞增殖

40 B 细胞与 T 细胞的主要区别 T 细胞 B 细胞 占外周血中淋巴细胞数 65%-80% 10%-20% 抗原受体 TCR-CD3 复合物 BCR-Igα/Igβ 复合物 协同信号 CD28 B7 CD40 CD40L 补体受体 - + CD2(SRBC-R) + - 丝裂原受体 PHA-R, ConA-R, LPS-R,SPA-R PWM-R PWM-R 功 能 细胞免疫 体液免疫 体液免疫 提呈抗原 免疫调节 免疫调节

41 第三节 B 细胞亚群 根据来源 免疫功能状态 表面标志 等不同, 可将 B 细胞分为不同的亚群或不 同的分化发育阶段

42 一 按是否表达 CD5 分亚群 根据 CD5 的表达与否, 可将 B 细胞分为 B-1 细胞和 B-2 细胞

43 B-1 细胞 发生 : 个体发育早期 ( 胎儿期 ) 分布 : 腹膜腔 胸膜腔和肠粘膜固有层 表面标志 :CD5 + migm + CD23 - 抗原识别谱窄 TI 抗原 ( 细菌多糖等 ) 自身抗原 ( 变性 IgG ssdna 等 )

44 B-1 细胞 应答特点 ⑴ BCR 直接结合多糖抗原 (TI-Ag) ⑵ 不需 Th APC 参与 ⑶ 分泌低亲和力 / 低特异性 ( 多反应性 ) 的 IgM ⑷ 无 Ab 类别转换 免疫记忆及再次 IR

45 B-1 细胞 功能 : 参与非特异性 IR ⑴ 产生抗细菌抗体抗细菌抗体而局部抗微生物感染 ⑵ 产生多反应性自身抗体自身抗体而清除变性的 自身抗原或诱导自身免疫病

46 B-2 细胞 发生 : 个体出生后 分布 : 外周淋巴组织 外周血 表面标志 : CD5 - migm + 和 migd + 抗原识别谱 : 广泛, 为 TD-Ag

47 B-2 细胞 应答特点 ⑴ 识别的抗原为 TD-Ag Ag, 活化需双信号 ⑵ 需 Th APC 的参与 ⑶ 产生亲和力高, 特异性强的 IgG 为主, ⑷ 有 Ab 类别转换 免疫记忆及再次 IR 功能 : 参与特异性免疫应答

48 B-1 细胞和 B-2 细胞的异同 性质 B-1 B-2 产生时间更新方式 自发性 Ig 产生 特异性 分泌的 Ig 类别体细胞突变频率对 TI 抗原的应答对 TD 抗原的应答 胎儿期自我更新高低 IgM 为主低 / 无是可能 出生后骨髓产生低高 IgG 为主高可能是

49 二 按不同免疫状态分 静息 B 细胞 ( 初始 B 细胞 ) 活化 B 细胞 浆细胞 ( 抗体分泌细胞 ) 记忆 B 细胞

50 第四节 B 细胞的功能 一 产生抗体, 介导特异性体液免疫 1 抗体的中和中和作用 阻止胞内胞内微生物的感染感染和中和毒素 2 调理调理作用 : 促吞噬细胞吞噬胞外吞噬胞外细菌抗体 : 病原体 -Ab 复合物与吞噬细胞 表面的 Fc 受体结合 补体 :Ag-Ab-C 复合物与吞噬细胞 表面的补体受体结合

51

52 抗体的作用

53 3 激活补体 :IgG/M 4 ADCC 增强 NK 细胞细胞毒作用

54 2-4-2.swf

55 二 提呈可溶性 Ag,, 活化 T 细胞 活化后或记忆记忆性 B 细胞表达 B7 增加, 才能 提呈可溶性 Ag 可溶性 Ag+BCR- B 吞饮加工处理 TCR 识别 Ag 肽 -MHC-II 类分子复合物 供

56 三 免疫调节 IL-7 刺激早期 B 增殖 IL-4 13 TNF 抑制早期 B 增殖 IFN-γ IL-6 TNF 激活巨噬细胞 DC IFN-γ IL-2 12 激活 NK 细胞 IL-1 TNF 刺激 T 增殖

57 一 名词 复习思考题 BCR BCR 复合物 二 B 细胞表面有哪些主要分子? 三 B1 和 B-2 细胞有哪些主要区别? 四 简述 B 细胞的主要功能

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