TSK-GEL 阳离子交换色谱柱柱性能表

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1 TSK-GEL 阳离子交换色谱柱 TSK-GEL 阳离子交换色谱柱特点 TSKgel BioAssist S 色谱柱具有独特的孔结构和结合特性, 对中到大分子量的蛋白质具有较高的结合容量 BioAssist 色谱柱有内径为 4.6mm 或者 10mm 的 PEEK 材质, 也有分析, 半制备和制备应用的玻璃柱和不锈钢柱 TSKgel CM-3SW 色谱柱具有小孔径和较大的表面积, 对小到中等分子量的蛋白质的结合量近似为 TSKgel CM-5PW 色谱柱的两倍 TSKgel SP-5PW 有内径为 2mm 的色谱柱, 可应用于 LC-MS 分析 TSK-GEL 阳离子交换色谱柱柱性能表 TSK-GEL 基体 粒径 孔尺 官能团 对抗 排除极值 容量 Mg 小阴离子容 pka 柱材料 um 寸 A 离子 PEG(Da) BSA/ml 量 Meg/ml BioAssitS PMA 7 ~1300 磺丙基 Na + ~4,000, PEEK SP-5PW PMA 10,13, 磺丙基 Na + 1,000, > S,G CM-5PW PMA 10, 羰甲基 Na + 1,000, > S,G SP-2SW Silica 磺丙基 Na + 10,000 ND S SP-NPR PMA 磺丙基 Na > S CM-2SW Silica 羰甲基 Na + 10, > S CM-3SW Silica 羰甲基 Na + 30,000 ND > S SCX PS-DVB 5 60 磺酸 Na +,H + ND >1.5 S OApak-A PMA 碳酸 Na + ND >1.5 S 注 :PMA = 聚甲基丙烯酸酯, PS-DVB = 聚苯乙烯 - 二乙烯苯, S = 不锈钢,G = 玻璃 文献应用 TSKgel BioAssist S 色谱柱适用于 HPLC, 实验室, 半制备应用分析 例 1:TSKgel BioAssist S 色谱柱对菠萝蛋白酶的分析 菠萝蛋白酶是作为营养供给的一种蛋白水解酶 Columns: TSKgel BioAssist S,4.6mm ID 5cm,PEEK Competitor S 5mmID 5cm Elution: 20min(TSKgel)or 30min (Competitor S)linear gradient of Nacl From 0 to 0.5mol/l in 20mmol/l sodium phosphate buffer,ph 7.0 Flow Rate: 0.8ml/min for TSKgel 1.0ml/min for Competitor S Detection: UV@280nm Temperature:25 Sample: crude bromelain (C4882,Sigma),1mg in 100ul

2 TSKgel BioAssist S 填料具有独特的大孔径键合相设计, 具有较高的动态容量 动态结合量的对比 结合量 (mg/ml) 蛋白 BioAssist S Conventional S type product γ- 球蛋白 溶菌酶 细胞色素 C α- 胰凝乳蛋白酶原 Columns : TSKgel BioAssist S conventional S-type product Flow rate: 0.38ml/min Temperature:25 Detection:UV(280nm) Size: 4.6mmID 5cm (lysozyme,cytochrome C,α-chymotrypsinogen A) 5.0mm ID 1cm(γ-globulin) Solvent: 20mmol/l sodium phosphate buffer,ph 6.5 (lysozyme,cytochrome C, α-chymotrypsinogen A)20mmol/l sodium phosphate buffer ph 5.0(γ-globulin) The capacity was determined at 10% height of the breakthrough curve at UV 280nm 例 2: 强阳离子 (TSKgel SP-5PW) 和弱阳离子 (TSKgel CM-5PW) 色谱柱分离球蛋白, 选择性有差异 Column: Sample: Elution: Flow Rate: Detection: TSKgel SP-5PW and TSKgel CM-5PW, 7.5mm ID 75cm 1. trypsinogen, 2.ribonuclease A, 3. α-chymotrypsinogen, 4.cytochrome C, 5.lysozyme 60min linear gradient from 0 mol/l to 0.5 mol/l Nacl in 0.02mol/l phosphate,ph 7 1.0ml/min UV@280nm 例 3: 内径为 21.5 的 TSKgel SP-5PW 色谱柱纯化 200mg 的粗脂氧化酶 规模放大仅是从内径 7.5mm 的 10um 填料转换为内径 21.5mm 的 13um 填料或内径 55mm 的 20um 填料 Column: TSKgel SP-5PW,21.5mmID 15cm Sample: crude lipoxidase,200mg Elution: 120min linear gradient from 0 mol/l to 0.5 mol/l Na 2 SO 4 in 0.02mol/l acetate,ph 4.5 Flow Rate: 4.0ml/min Detection:UV@280nm Recovery: Lipoxidase activity collected between the two vertical lines was 84%

3 例 4:TSKgel SP-NPR 色谱柱可以在 10 分钟内线性 PH 梯度从人类其他变种 Hb 中分离 Hb A 1C 片段 无孔填料 (NPR) 色谱柱装填有 2.5um 的球形颗粒 因此, 可以快速分析 例如 : 在人类血液血红蛋白分析 中常用来检测糖尿病患者的葡萄糖含量 Column: TSKgel SP-NPR,4.6mmID 3.5cm Sample: human hemoglobin standard Buffer A: 0.02mol/l MES,and 0.02mol/l HEPES-NaOH,Ph 6.0 Buffer B: 0.02mol/l MES,and 0.02mol/l HEPES-NaOH,Ph 8.0 Elution: 10min linear gradient from 32% to 75% buffer B (ph 6.66 to ph 7.43) Flow Rate: 1.5ml/min Detection : UV@415nm 例 5:TSKgel SP-NPR 色谱柱对腺相关病菌的纯化检验 这个 10 分钟的 HPLC 方法可以替换现在耗时 2 天的化验方法 Column:TSKgel SP-NPR,4.6mmID 3.5 cm Sample:purified adeno-associated virus Elution :A. 50mmol/l HEPES,1mmol/l EDTA, 5mmol/l Mgcl,ph 7.5 B. 50mmol/l HEPES,1mmol/l EDTA, 5mmol/l Mgcl,ph 7.5 with 0.5mol/l Nacl; linear gradient from 20% to 100%B in 10 column volumes Flow Rate:1ml/min Detection: UV@280nm 例 6:TSKgel SP-2SW 色谱柱分离核苷酸 硅胶基的阳离子交换色谱柱常用来分析小分子量的化合物, 如 : 药品, 核苷酸, 儿萘酚胺和小肽 Column: TSKgel SP-2SW 4.6mmID 25cm Sample: Nucleoside Standands1) Guanosine, 2) Cytidine,3) Adenosine Mobile Phase: A) 0.1mol/l sodium citrate-phosphoric acid buffer,ph 3.5 B) 0.1mol/l sodium citrate-acetic acid buffer,ph 4.25 Flow Rate:0.75ml/min Temperature :23 Detection:UVdetection@260nm

4 例 7:TSKgel SP-2SW 色谱柱快速分析尿样中的除草剂 ( 百草枯, 敌草快 ) Column : TSKgel SP-2SW,4.6mm ID 25cm Sample: 1.paraquat 5ug/ml 2. diquat, 5ug/ml Elution: 20%ACN in 0.2 mol/l phosphate,ph 3.0 Flow Rate : 1.0 ml /min Detection : 例 8: 离子排阻色谱柱是分离醇类化合物的有效方法 下图为串联两根 TSKgel SCX (H+) 型色谱柱分离糖, 有机酸和醇类化合物 Column: TSKgel SCX(H+), two 7.8 mm ID 30cm (in series) Sample : 1.maltose,2. glucose,3.fructose, 4.lactic acid,5. acetic acid,6. methanol, 7. ethanol,8. butyric acid Elution : 0.05mol/l HCLO 4 Flow Rate : 0.8ml/min Detection: UV@210nm,Refractive index 例 9:TSKgel OApak-A 色谱柱分离白酒和啤酒中的有机酸 Column: TSKgel OApak-A,7.8mmID 30cm Mobile phase:0.75mmol/l sulfuric acid Flow Rate : 0.8ml/min Temperature: 60 Detection: Coaductivity Injection: 20 ul Sample: 1.pyruvic(50ppm), 2.tartaric acid (500ppm), 3.citric acid (500ppm),4.malic acid(500ppm), 5.pyroglutamic acid (500ppm), 6.lactic acid (1000ppm),7. acetic acid (2000ppm), 8.succinic acid (1000ppm)

5 订购信息 货号 描述 粒径 (um) 内径 (mm) 长度 (cm) 聚合物基材玻璃柱 CM-5PW Glass,1000A CM-5PW Glass,1000A CM-5PW Glass,1000A SP-5PW Glass,1000A SP-5PW Glass,1000A SP-5PW Glass,1000A 聚合物基材 PEEK 柱 BioAssist S,1300A BioAssist S,1300A 聚合物基材不锈钢柱 CM-5PW,1000A CM-5PW,1000A SP-5PW,1000A SP-5PW,1000A SP-5PW,1000A SP-5PW,1000A SP-NPR,nonporous SCX(Na + ) SCX(H + ) OApak-A,1000A 硅胶基材不锈钢柱 SP-2SW,125A CM-2SW,125A CM-3SW,250A 问 : 如何清洗离子交换系列色谱柱? 学习园地 答 :SW 类离子交换系列色谱柱 : 1. 高盐极性缓冲液 ( 如 :0.5M-1.0M Na 2 SO 4 ); 2. 较低 PH 值 ( 如 :2-3) 的缓冲溶液 ; 3. 添加水溶性有机物 (MeOH, ACN, EtOH,10%-20%) 的极性缓冲液 ; 4. 添加尿素 (8M) 或非离子性表面活性剂的缓冲溶液 注意 : 这些试剂很难被去除 PW 类离子交换系列色谱柱 : 1. 使用 0.1M-0.2M 的 NaOH, 每次进液 250ul 直至 1 个柱体积 对于半制备柱, 则需要成比例增加进液

6 量 ; 2. 使用 20%-40% 的水溶性乙酸 ;( 由于酸可以使蛋白质沉淀, 因此在其它方法已试用后再使用本方法 ) 3. 添加水溶性有机物 (MeOH,ACN,EtOH,10%-20%) 的极性缓冲液 ; 4. 添加尿素 (8M) 或非离子性表面活性剂的缓冲溶液 注意 : 这些试剂很难被去除 注意 : 在使用上样缓冲液进行平衡前, 需使用 5 个柱体积的合适的溶液冲洗离子交换色谱柱, 以恢复其 正确的离子带电性 北京总公司 : 地址 : 北京回龙观西大街龙冠大厦 719 室邮编 : 热线 :(10) , , 传真 :(10) 上海办事处 : 地址 : 上海张江益丰路 55 弄春港丽园 67 号 201 室邮编 : 电话 : 传真 : 邮箱 :sales@prep-hplc.com 网站 : 更多产品信息欢迎来电咨询!!!

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