血是生命之源! 2

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1 造血细胞的发育和调控 郑俊克

2 血是生命之源! 2

3 肿瘤免疫治疗 -CAR-T therapy (Science, 2013) (CAR: chimeric antigen receptors ) 3

4 Leiping Chen wins William B. Coley Award 科学 杂志曾赞誉他的工作并确其为 2013 年的 年度突破 陈博士对 B7-H1 / PD-1 途径研究的创新性突破及其在癌症治疗中的应用, 将使癌症治疗更为简便有效 Coley 奖是癌症研究所年度研讨会议的最高奖项 4

5 5

6 主要内容 一 造血的发生和场所 二 造血微环境结构和功能 三 造血发生与调控 四 造血干细胞的归巢和动员 五 骨髓移植和细胞治疗 6

7 一 造血的发生和场所 造血细胞 (hematopoietic cells): --- 红细胞 粒细胞 巨核细胞 淋巴细胞及单核细胞等 造血发生 (hematopoiesis): --- 各种谱系造血细胞形成的过程 造血场所 (hematopoietic organs): --- 能产生和支持造血细胞增殖 分化和成熟的组织和器官 : 如骨髓 肝脏 脾脏 胸腺和淋巴结等 7

8 造血细胞 8

9 造血发生过程 定向造血 (definitive) 原始造血 (primitive) 9

10 胚胎期造血 中胚叶造血期 : 受孕 2 周 ~6 周 --- 卵黄囊 : 仅原始红细胞, 即第 1 代巨幼红细胞 --- 主动脉 - 性腺 - 中肾区 (AGM): 造血干细胞的出现 --- 胎盘的尿囊部 肝脏造血 ( 主要造血场所 ):6 周 ~7 个月 --- 胎肝 : 红细胞为主, 即第 2 代巨幼红细胞, 胚胎 4 个月 后产生粒细胞和少量巨核细胞,5 个月后逐渐减少 --- 脾脏 : 红细胞 (3 个月 ) 粒细胞及单核细胞 (5 个月后 ) 骨髓造血 :6 个月后 --- 产生红细胞 粒细胞 巨核细胞 淋巴细胞及单核细胞 --- 除血红蛋白 F(HbF), 可合成少量的 HbA 和 HbA2 --- 血细胞形成的顺序 : 细胞 粒细胞 巨核细胞 淋巴细胞及单核细胞 10

11 造血部位 卵黄囊 肝脏 骨髓 脾 淋巴结 月 11

12 出生后造血 5 岁以下 : 所有骨骼的骨髓 18 岁以后 : 椎骨 胸骨 肋骨 骨骼干骺端等 淋巴器官造血 --- 骨髓 :B 细胞发育成熟的场所, 中枢淋巴器官 --- 胸腺 :T 细胞发育成熟的场所 --- 脾脏 : 大量 T B 细胞构成,B 细胞成熟和免疫应答 --- 淋巴结 : 促进 T B 记忆细胞和抗原递呈细胞接触, 免疫应答 髓外造血 (extramedullary hematopoiesis): 在某些疾病状态下 ( 骨髓纤维化 ), 肝 脾 淋巴结 等组织重新恢复胎儿期的造血功能 12

13 造血场所 骨髓 (bone marrow) 血细胞的主要产生场所 :60 亿细胞 / 天 / 公斤体重 海绵状 胶状或脂肪性组织 组成 : 由结缔组织 神经 血管 基质细胞 细胞外基质以及造血细胞组成, 约占体重的 3.4%-5.9% 1) 红骨髓 : 造血活跃, 造血细胞岛, 按区域造血 2) 黄骨髓 : 脂肪组织替代, 潜在性造血组织 13

14 骨髓示意图 红骨髓 黄骨髓 14

15 骨髓 (HE 染色 ) 15

16 骨髓 (HE 染色 ) 16

17 淋巴器官 可分为一级和二级淋巴器官 一级淋巴器官 : 祖细胞定居和最初分化的场所 --- 骨髓 --- 胸腺 二级淋巴器官 : 对抗原产生免疫应答的场所 --- 脾脏 --- 淋巴结 --- 粘膜相关淋巴组织 : 扁桃体 17

18 胸腺 :T 细胞发育的场所 18

19 19

20 脾脏 对血源性抗原免疫反应的主要产所 : 脾脏的结构 : 白髓 边缘带 红髓 脾脏功能 : 红细胞清除 血容量的调节 免疫功能 20

21 脾脏结构 21

22 22

23 淋巴结 : 对组织抗原产生免疫应答的主要产所 23

24 24

25 二 造血微环境结构和功能 定义 : 对造血细胞发育起关键支持作用的局部微环境 (microenviroment), 又称龛 (niche) 组成 : 由血管系统 神经成分 各种类型非造血 / 造血细胞 细胞外基质以及其他结缔组织 造血干细胞 (hematopoietic stem cell, HSC) 及其微环境 25

26 The Nobel Prize, 1990 E. Donnall Thomas first succsessful HSCT in treatment of acute leukemias Thomas ED, Lochte HL, Lu WC, Ferrebee JW. Intravenous infusion of bone marrow in patients receiving radiation and chemotherapy. N. Engl. J. Med. 1957; 257: 491.

27 造血微环境 27

28 血管系统 血窦 (sinusoid): 骨 髓 - 血屏障, 造血索 营养能量等物质交换 调控血细胞的释放 调节组织内酸碱度 PO2 PCO2 28

29 血窦的形态 MECA32 血窦 小动脉 29

30 骨髓神经 来自脊神经, 分布于骨髓动脉 骨内膜或造血细胞 作用 : 影响血管扩张和收缩, 调节血细胞的功能 ( 神经纤维 ) ( 神经纤维 ) 30

31 细胞组成 (niche cell) 1) 成骨细胞 2) 内皮细胞 3) 网状细胞 4) 间充质干细胞 5) 成纤维样细胞 6) 脂肪细胞 7) 巨核细胞 8) 巨噬细胞 淋巴细胞 浆细胞 9) 破骨细胞 10) 其他类型细胞 ( 脂肪细胞 ) ( 间充质干细胞 ) ( 巨噬细胞 ) 成骨细胞 ) ( 内皮细胞 ) 血窦 ( 破骨细胞 ) ( 网状细胞 ) 31

32 成骨细胞的功能 与造血干细胞直接接触并 维持其功能 ( 成骨细细胞 ) 形成低氧微环境 分泌 CXCL12 TGF-b 维持干细胞增殖和分化 可能主要是祖细胞微环境? 32

33 体外培养 内皮细胞 免疫组化 免疫组化 肝脏 33

34 内皮细胞的功能 与造血干细胞直接接触并维持其功能 分泌 Notch 配体 TGF-b 维持干祖细胞增殖和分化 分泌 E- 选择素调节造血细 ( 内皮细胞 ) 胞的粘附功能 34

35 外膜网状细胞的功能 ( 网状细胞 ) 支持作用 : 合成网状纤维并交织成网 分泌 CXCL12 调控造血干细胞的自我更新和分化, 是分泌 CXCL12 最丰富的细胞, 又称 CAR 细胞 表达 SCF TPO 促进造血干细胞的发育和分化 35

36 间充质干细胞的功能 ( 交感神经 ) ( 间充质干细胞 ) 分泌 CXCL12 调控造血干细胞的自我更新和分化 调控造血干细胞生物钟 36

37 Niche cell 功能小结 细胞直接接触作用 分泌细胞因子 通过中间细胞的间接作用 表达促进归巢相关分子 产生胞外基质 37

38 胞外基质 基质类型 : 糖蛋白 蛋白多糖 胶原 1) 蛋白聚糖 2) 纤连蛋白 3) 胶原蛋白 4) 腱生蛋白 5) 成粘连蛋白 6) 玻连蛋白 7) 血小板反应素 8) 整合素 9) 其他基质蛋白 38

39 主要功能 与造血细胞的粘附有关 调控造血干祖细胞和骨髓基质细胞间的重要桥梁 细胞间信息传递的基础 调控干祖细胞的增殖和分化 ( 层粘连蛋白 ) ( 整合素 b1) ( 腱生蛋白 ) 39

40 造血干细胞骨髓微环境的类型 骨内膜微环境 血管周围环境 40

41

42 Angplts 通过 LILRB2 促进造血干细胞的扩增 Angptls LILRB2 LILRB2 属于一类 免疫抑制性受体 维持造血干细胞和白血病干细胞自我更新 HSC 郑俊克等,Nature (2012)

43 三 造血发生与调控 43

44 定义 : 造血干细胞 (HSC) 1) 能进行自我更新并分化成所有造血细胞的一群原始造血细胞, 占有核细胞的 0.1%-0.5%, 大部分处于 G0 期 2) 两大特性 ( 干性或多能性,stemness): --- 自我更新 (self-renewal ) --- 分化 (differentiation) ( 不对称分裂 ) ( 对称分裂 ) 44

45 造血干细胞 其他特点 --- 异质性 --- 类似于小淋巴细胞, 无法从形态上区分 --- 免疫表型 :Lin - CD34 + CD38 - CD90 + Thy

46 造血干细胞的分离和纯化 1. 免疫表型 (immunophenotype) CD34 + CD38 - Lin - CD90 + HSC Lineage (CD3, CD4, CD8, B220, Mac-1, Gr-1) Thy 流式细胞技术 (fluorescence-activated cell sorting,facs) Calibur 46

47 造血干细胞的研究技术 体外分析 1) 免疫表型分析 : 频率 周期 凋亡 2) 卵石区形成细胞分析 (cobblestone area forming assay, CFAC): 以基质细胞作为支持细胞用来培养 HSC 接种后的 1-5 周内, 在该培养体系中, 干细胞和祖细胞以一种称为鹅卵石区的特殊方式生长, 表现为一个平的 密集的 与基质细胞紧密相连的细胞群 3) 长期培养起始细胞培养分析 (long-term culture-initiating cell assay, LTC-IC): 预先将培养物在基质细胞层上培育 5-8 周, 然后再在半固体培养体系中培养, 能够形成混合细胞集落 47

48 体外培养 CFAC LTC-IC 48

49 造血干细胞的研究技术 体内分析 1) 骨髓重建分析 (SCID repopulating cells, SRC): 反映 HSC 干性的金标准 Donor Recipient 250cGy CD months later HSC NOD-SCID mice CD34 49

50 再生障碍性贫血 正常细胞的骨髓活检组织 ( 低倍镜 ) 重度增生低下的骨髓活检组织 50

51 造血祖细胞 ( progenitor cells) 定义 : 由 HSC 分化而来, 丧失了自我更新能力, 但具有分化成不同谱系细胞能力的过渡性 增殖性细胞群 多能祖细胞 (multipotent progenitor cells): 缺乏自我更新能力, 但能分化成所有谱系的造血细胞 定向祖细胞 (committed progenitor cells): 缺乏自我更新能力, 仅能定向分化成某一谱系细胞 体外分析手段 : 1) 流式分析技术 2) 克隆形成实验 (colony-forming units,cfu) 51

52 造血祖细胞的来源

53 克隆形成实验 1) 红细胞爆式集落形成单位 :(BFU-E ) 2) 红细胞集落形成单位 :(CFU-E) 3) 粒细胞 / 红细胞 / 单核细胞 / 巨核细胞集落形成单位 (CFU-GEMM) 4) 粒细胞集落形成单位 (CFU-G) 5) 单核细胞集落形成单位 (CFU-M) 6) 粒细胞 / 单核细胞集落形成单位 (CFU-GM) 7) 巨核细胞集落形成单位 (CFU-M) 8) 嗜酸性细胞集落形成单位 (CFU-Eo) 9) 嗜碱性细胞集落形成单位 (CFU-Bas) 10)T 淋巴细胞集落形成单位 (CFU-TL) 11)B 淋巴细胞集落形成单位 (CFU-BL) 53

54 54

55 造血细胞的增殖 分化和成熟 增殖 (proliferation): 通过有丝分裂进行复制的过程 分化 (differentiation): 基因调控下的一般向特殊的 演变, 新功能的获得 成熟 (maturation): 由原始幼稚细胞到终末细胞分 化, 形态特征逐渐明确的过程 释放 (release): 终末细胞通过骨髓 - 血屏障进入血液 循环的过程 55

56 1 造血细胞的增殖 有丝分裂 ( 对称性增殖 ) 具有分裂能力的细胞阶段 长期干细胞 短期干细胞 多能性祖细胞 定向祖细胞 前体细胞 成熟细胞 56

57 造血细胞成熟的阶段 3 个阶段 : 原始幼稚成熟 红系和粒系幼稚阶段 : 早幼中幼晚幼 五大系统 : 红细胞系 粒细胞系 淋巴细胞系 单核细胞系 巨核细胞系 57

58 造血细胞成熟的一般过程 58

59 细胞大小 : 逐渐降低, 但巨核细胞例外 核质比 : 逐渐降低 核 : 逐渐变小 ( 红细胞 : 缺乏 ; 巨核细胞 : 逐近增加 ) 核形状 : 圆形 凹形 分节状 染色质 : 细致 粗糙 ; 疏松 致密 核仁 : 数量和大小逐渐降低 消失 核染色 : 淡紫色 深紫色 胞浆 : 逐渐增加 胞质染色 : 蓝色 其他颜色 着色颗粒 : 粒细胞中逐渐增加 血红蛋白 : 红细胞中逐渐增加 分化成熟过程的一般规律 有丝分裂能力 : 逐渐降低 ( 淋巴细胞除外 ) 59

60 红细胞发育过程 造血干细胞原红细胞早幼红中幼红晚幼红网织红成熟红细胞 血红蛋白 RNA 含量 细胞大小 60

61 巨核细胞发育过程 61

62 粒细胞发育过程 原粒细胞 ( 成髓细胞 ):15-20mM, 核细致疏松, 含 2-5 个核仁, 胞浆少无颗粒 早幼粒细胞 ( 前髓细胞 ): 体积略大, 核偏离, 开始出现原始嗜苯胺蓝的颗粒 中幼粒细胞 ( 髓细胞 ): 体 12-18mM, 核致密, 核仁消失, 开始出现不同特殊颗粒 晚幼粒细胞 ( 后髓细胞 ): 核呈肾型 杆状核细胞 : 核呈带状, 直径均一 分叶核细胞 : 核呈 3 叶, 含特殊颗粒 62

63 小结 不同阶段的造血细胞 造血干细胞造血祖细胞成熟的细胞 约占骨髓细胞的 0.05% 能进行自我更新 能分化成所有谱系细胞 处于静息状态 比较稳定细胞群 无法从形态上区分 可通过体内功能实验衡量其干性 ( 自我更新和分化 ) 约占骨髓细胞的 3% 不能进行自我更新 能定向分化为谱系细胞 处于过度阶段的细胞群 处于增殖期的细胞群 无法从形态上区分 可通过体外克隆形成实验衡量 约占骨髓细胞的 95% 以上 终末分化的细胞群 有比较确定的寿命时间 可通过形态辨认 63

64 造血细胞的凋亡 (apoptosis) 定义 : 是在基因调控下细胞主动死亡过程, 是生理性过程, 即程序性死亡 (programmed cell death) 形态上改变 : 1) 细胞膜 : 胞体变小 胞膜出现不规则突起 2) 细胞核 : 固缩并破裂为片段 3) 细胞质 : 线粒体空泡状 内质网扩大 4) 凋亡小体形成 生化特征 : 核酸内切酶激活 DNA 降解 细胞色素 c 释放等 64

65 细胞凋亡相关信号通路 65

66 凋亡和坏死 66

67 细胞凋亡和细胞坏死的区别 特征 细胞凋亡 细胞坏死 诱发因素 特定的或生理性 各种病理性 细胞数量 单个细胞丢失 成群细胞死亡 细胞膜 完整保持 肿胀溶解破坏 线粒体 肿胀 细胞色素 c 释放 肿胀 破裂 细胞器 完整 损伤 细胞核 固缩破裂为片段 溶解 破碎 染色质 凝集呈半月状 模糊 疏松 核 DNA 降解为完整倍数大小的片段 随机不规则断裂 凝胶电泳 梯状条带形 分散形态 内容物释放 无 有 炎症反应 无 有 67

68 细胞凋亡的检测和意义 常用检测方法 : 1) 电子显微镜检查 2) 流式细胞分析检测 : 磷脂酰丝氨酸外翻 3) 线粒体膜电位 : 线粒体荧光探针 4)DNA 片段化检测 :TUNEL 生物学意义 : 1) 清除了无用 多余 发育异常的细胞 2) 保持造血细胞数量和功能的恒定 68

69 电镜和流式图片 Annexin V PI 69

70 内在因素 : 造血发生的调控 1) 重要的信号通路 :Wnt Notch 2) 表观遗传 : 甲基化 乙酰化 羟基化等 3) 原癌基因和抑癌基因 :Ras p53 Rb 等 4) 转录因子 : --- 自我更新 :HoxB4 Bim1 Meis1 等 --- 分化 :GATA1 ( 红系 ) C/EBPa( 粒系 ) Pax5(B 细胞 ) GATA3(T 细胞 ) 等 70

71 造血发生的基因调控 71

72 Osteoblast niche 造血发生的基因调控 Hum. Mol. Genet ,

73 造血发生的调控 外在因素 ( 骨髓微环境 ): 1) 细胞因子 : SCF TPO IL-3 IL6 等 2)Niche 细胞分泌成分 :CXCL12 ANG1 ANGPTLs 等 3) 胞外基质 : 蛋白聚糖 成粘连蛋白 整合素等 4) 配体 - 受体的介导的信号通路 73

74 细胞因子的定义和特性 定义 : 由基因编码的细胞外信号分子, 由多种骨髓细胞和内分泌器官产生并调控细胞增殖和分化 特性 : 1) 低浓度即可发挥作用 功能多样 2) 不同细胞因子针对不同阶段发育阶段的细胞 3) 通常可在不同谱系细胞中发挥作用 4) 不同的因子间具有协同效应 74

75 常见的细胞因子 1) 干细胞因子 (SCF) 2) fam 样酪氨酸激酶受体 3(Flt 3-L,FL) 3) 集落刺激因子 (CSF) 4) 白细胞介素 (IL) 5) 红细胞生成素 (EPO) 6) 血小板生成素 (TPO) 7) 转化生长因子 -β(tgf-β) 8) 肿瘤坏死因子 -α β(tnf-α β) 9) 白血病抑制因子 (LIF) 10) 干扰素 α β γ(ifn-α β γ) 11) 趋化因子 (CK) 75

76 根据来源分类 分类和作用细胞 1) 近程因子 : 有骨髓基质细胞分泌 :CSF IL-3 2) 远程因子 :EPO( 肾皮质 ) TPO( 肝脏 ) 根据作用时间分类 1) 早期作用细胞因子 :SCF Flt3-L IL-3 IL-6 2) 晚期作用细胞因子 :G-CSF M-CSF EPO TPO 根据作用方式分类 : 正向或负向调控因子 76

77 正向调节因子 细胞因子 SCF Flt3-L GM-CSF G-CSF M-CSF Meg-CSF IL-3 IL-6 IL-1 IL-5 EPO TPO IL-11 作用细胞 HSC CFU-GM CFU-G CFU-M CFU-Meg CFU-GEMM B cell progenitor cells T cell progenitor cells CFU-Eos CFU-E CFU-Meg and platelate 77

78 负向调节因子 细胞因子 TGF-β TNF-a,b IFN-a,b,g LIF PF4 MIP-1α 作用细胞抑制干祖细胞的增殖抑制各种祖细胞的增殖调节免疫 抗病毒 抗肿瘤 抗增殖抑制胚胎干细胞和造血干细胞的分化抑制巨核细胞增殖抑制祖细胞集落形成 78

79 细胞因子调控网络之小结 79

80 临床价值 促进肾源性贫血病人红细胞生成 促进由于治疗导致的骨髓抑制病人的恢复 增强杀伤肿瘤细胞 促进恶性细胞的分化 增强免疫系统功能 治疗骨髓衰竭病人 80

81 四 造血干细胞的归巢和动员 归巢 (homing): --- 造血干细胞从外周血定位到骨髓 Niche 的过程 --- 有助于造血干细胞干性维持和血液系统的稳态 动员 (mobilization): --- 造血干细胞从骨髓 Niche 迁徙到外周血的过程 --- 有助于维持急性状态下机体造血细胞的补充 --- 骨髓移植的应用 81

82 造血干细胞的归巢和动员模式图 82

83 五 骨髓移植和细胞治疗 (bone marrow transplantation and cell therapy) 造血干细胞的应用 : --- 血液性疾病治疗 : 白血病等 --- 基因治疗 : 遗传性疾病 异体骨髓移植面临的严峻挑战 : --- 造血干细胞来源的缺乏 --- 主要组织相容性复合物 (MHC) 配型的低成功率 --- 其他来源造血干细胞数量有限 --- 移植物抗宿主疾病 (GVHD) 的高发生率 83

84 造血干细胞的干性维持 : --- 自我更新和分化 --- 以正常造血干细胞代替异常造血干细胞 --- 重建造血和免疫功能 骨髓移植分类 骨髓移植的原理和分类 1) 按供者细胞来源 --- 自体骨髓移植 : 造血干细胞来源于病人本身 --- 同基因异体移植 : 造血干细胞来源于同卵双生的双胞胎 --- 异基因异体移植 : 造血干细胞来源于 MHC 配体的供着 2) 按细胞类型 : 骨髓移植 外周血干细胞移植 脐血干细胞移植 84

85 造血干细胞的动员和收集 造血干细胞移植 85

86 骨髓移植的未来方向 体外扩增后的造血干细胞? 86

87

88 无关供者骨髓移植? 骨髓移植的未来方向 2008 年开始, 他们对 300 余例三类不同类型移植者对比分析发现, 患者 5 年的生存率在亲缘全相合供者组为 77.2%, 半相合供者和无关供者也分别达到了 60.8% 和 63.5%, 生存率居国际领先水平 黄河教授 88

89 细胞治疗 造血干细胞 细胞成分治疗 --- 免疫细胞 :CAR-T --- 血小板 --- 其他细胞成分 --- 抗体 :PD-1 89

90 参考书 独家秘笈之大话干细胞 90

91 案例分析 患者, 秦某, 男,19 岁,2014 年 1 月 25 日以 口腔溃疡两月余, 头晕 乏力一月余 为主诉入院 患者 2 个月前开始出现无明显诱因口腔溃疡, 创面约 1.5x0.8cm, 伴头痛饮食差, 一月余前出现头晕 乏力, 伴眩晕, 恶心, 结膜苍白, 全身皮肤苍白, 贫血貌, 全身散在出血点, 无发热, 腹泻胸闷等不适, 至当地医院就诊诊断为 肺热 为进一步治疗至我院 既往史 : 无 高血压 糖尿病 心脏病史 无家族遗传病史 无药物过敏史 辅助检查 : 血常规 : 白细胞数 0.20x10*9/L; 红细胞 2.04x10*12/L; 血红蛋白 64.0g/L; 血小板总数 6x10*9/L; 骨髓象 : 骨髓增生低下, 粒细增生低下, 红细增生低下, 淋巴细胞比值增高, 浆细胞比值相对增高 骨髓活检显示 : 造血组织 6%, 脂肪组织 94%, 骨髓组织增生低下, 脂肪组织明显增多, 粒细胞系增生低下, 红细胞缺如, 淋巴细胞 浆细胞比值相对增高, 巨核细胞未见 入院查体 : T:36.4 P:90 次 / 分 R:22 次 / 分 BP:126/85mmHg, 自发病以来患者神志清, 精神一般差, 大小便正常, 无药物过敏史 91

92 92

93 思考题 1 胚胎和成体造血器官有何差别? 2 造血微环境的定义 组成和功能? 3 造血干细胞的定义 特征和常用研究技术? 4 造血祖细胞的定义和特征? 5 骨髓如何产生特定类型的血细胞? 6 造血细胞分化的一般规律? 7 细胞因子的定义 特性, 请举例说明细胞因子对造血发生的作用? 8 归巢和动员的定义和意义? 9 细胞凋亡和坏死的定义和区别? 10 骨髓移植的原理和分类? 93

94 联系方式 办公室 : 西 2 号楼 806 室 办公电话 : 手机 : zhengjunke@sjtu.edu.cn 网站 : 94

95 Thank you! 95

96

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转移潜力 本文将关注从原发肿瘤生长一直到进展为远处转移的各个阶段中 的作用 转变为肿瘤相关成纤维细胞 改造肿瘤微环境 肿瘤的演进依赖于癌细胞和周围微环境以及机体内环境之间的相互作用 肿瘤生长发展的关键步骤是肿瘤间质微环境的激活 活化的间质细胞产生大量的生长因子和基质重构蛋白及细胞外基质成分 继而形成 间充质干细胞在肿瘤演进中的作用 褚玉新 胡钦勇 宋启斌 武汉大学人民医院肿瘤中心 湖北武汉 摘要 肿瘤细胞与肿瘤微环境之间相互作用持续存在于肿瘤演进的过程中 间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的异质型细胞 可向肿瘤局部迁移 是构成肿瘤微环境的重要成分 间充质干细胞通过改造肿瘤微环境 促进肿瘤血管形成 抑制肿瘤局部免疫应答 转变为肿瘤相关成纤维细胞 促进肿瘤上皮间质转化等机制来促进肿瘤的生长和转移 研究间充质干细胞在肿瘤演进中的作用有助于深入了解肿瘤及其微环境的复杂性

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318 研究论文 上 8:00 将雌雄小鼠以 1:1 的比例合笼, 次日晨以发现阴栓为妊娠, 以中午 12 时定为妊娠第 0.5 d 主要试剂 4% 多聚甲醛 (Sigma 公司 ), 胎牛血清 (HyClone 公司 ), IMDM 培养基 (Gibco 公司 ), 联苯胺 ( 中国远 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2012, 34(4): 317 324 http://www.cjcb.org 研究论文 小鼠胎肝红系细胞在分化过程中形态学观察及时序性表达分析 郑雅娟陈涛杨祖立曹玲玲毛群铨薛建有吴业卿张世馥 * ( 浙江理工大学生命科学学院蛋白质组学与分子酶学实验室, 杭州 310018) 摘要小鼠胎肝是小鼠发育早期主要的造血器官,

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