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- 刀阀 缪
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1 HPLC HPLC UHPLC Poroshell 12 The Mea sure of Confidence
2 Poroshell 12 (LC) (LC/MS) Poroshell 12 HPLC 6 12 UHPLC Poroshell 3 Poroshell 12 2 µm % HPLC UHPLC ph 6-7 Poroshell 12 2 µm Poroshell 12 Poroshell 12 2
3 Poroshell 12 4 Poroshell 12 9 HPLC HPLC 2 µm 13 UHPLC 16 µm Poroshell Poroshell Poroshell LC 26 Poroshell
4 Poroshell µm Poroshell µm. µm Poroshell µm 12 Å 1.8 µm 2.7 µm Poroshell µm. µm 2 µm 3 µm 2 µm Van Deemter 2.7 µm Poroshell µm Poroshell 12 EC-C18 3. x 1 mm 2.7 µm (USCFX19) PN ZORBAX Eclipse Plus C18 3. x 1 mm 1.8 µm (USUYB14) PN ZORBAX Eclipse Plus C18 3. x 1 mm 3. µm (USUXV143) PN µ (mm/s)
5 Poroshell 12 1 Poroshell µm Poroshell 12 Poroshell 12 Poroshell µm RX SIL 3. µm RX SIL. µm RX SIL 9/1 1. ZORBAX (1.8 µm 3. µm µm) Poroshell 12 2% Poroshell 12 (2.7 µm) LN B16 ZORBAX 1.8 µm ZORBAX 3. µm ZORBAX. µm 1% 2.4 µm 1.67 µm 3.7 µm 4.9 µm 9% 2.8 µm 2.4 µm 4.44 µm 6.21 µm 9%/1%
6 2 ZORBAX Poroshell 12 EC-C x 1 mm 2.7 μm PN B114 B B B
7 3 C18/C8 Poroshell 12 EC-C18(endcapped) (LC/MS) Poroshell 12 SB-C18 ph 1-2 ph Poroshell 12 EC-C8 EC-C Poroshell 12 EC-C18 Poroshell 12 SB-C18 Poroshell 12 SB-C18 3. x 1 mm 2.7 µm PN % H 2 O:6% CH 3 CN 1 ml 3 ºC 2 3 (MRM) (%) vs. anandamide (AEA) palmitoylethanolamide (PEA) arachidonoylglycerol (2-AG) oleoylethanolamide (OEA) Poroshell 12 EC-C18 3. x 1 mm 2.7 µm PN = = = = 3 ºC 12 L 4 psi 4 V 1. Anandamide (AEA) 2. 2-arachidonoylglycerol palmitoylethanolamide (PEA). oleoylethanolamide (OEA) (%) vs
8 Poroshell 12 EC-C8 Poroshell 12 EC-C18, 3 x mm, 2.7 µm PN % CH 3 CN, 4% H 2 O.8 ml ºC 24 nm µl RRLC (PN ) (alkylphenone) Poroshell 12 EC-C8, 3 x mm, 2.7 µm PN Poroshell
9 HPLC UHPLC Poroshell 12 Poroshell % 2 µm UHPLC 4% HPLC 6 Bar 2 µm Poroshell 12 2 µm Poroshell µm 2 µm 4% Van Deemters6/4 CH 3 CN/H 2 O RRLC heptanophenone H u (mm/s) Poroshell 12 EC-C18, 4.6 x mm, 2.7 µm (CFU-1161) PN ZORBAX Eclipse Plus C18, 4.6 x mm, 1.8 µm (USUXG447) PN ZORBAX Eclipse Plus C18, 4.6 x mm, 3. µm (USBH634) PN ZORBAX Eclipse Plus C18, 4.6 x mm,. µm (USFA292) PN
10 HPLC UHPLC Poroshell 12 EC-C18, 3. x 1 mm, 2.7 µm PN Poroshell µm >9% Poroshell µm % N = 23, = 182 bar ml 6% (Acetonitrile) 4% 4 µl TCC 26 ºC DAD = 24,4 nm = 36,1 nm RRLC (PN ) µl (6:3) 2 mg/ml (Thiourea) µm >9% Eclipse Plus C18, 3. x 1 mm, 1.8 µm PN N = 2729, = 386 bar Poroshell 12 HPLC Poroshell 12 2 µm >9% 3. µm 2 Poroshell 12 4 bar 2 µm 4 bar mau mau Poroshell 12 EC-C18, 3. x 1 mm, 2.7 µm; PN N = 23,283, = 314 bar >9% 2 µm 3. µm 2 HPLC (< 4 bar) RRHT Eclipse Plus C18, 3. x 1 mm, 1.8 µm; PN N = 2,364, = 46 bar x 1 mm 6% A.2% 3% B. ml 1 µl 26 ºC = 22 4 nm = mau Eclipse Plus C18, 3. x 1 mm 3. µm; PN N = 11,896, = 13 bar (Saccharin) 2. (Caffeine) 3. (P-hydroxybenzoic acid) 4. (Aspartame). (Dehydroacetic acid) 6. (Benzoic acid) 1
11 Poroshell 12 EC-C18 4 bar HPLC ml 1 ml Poroshell 12 EC-C x mm 2.7µm PN A.1% B %B.8 % 6.8 6% 12 SL 2 ºC 2 mm 274 bar 2. ml 1. Hydroquinone 2. Resourcinol 3. Catechol 4. Phenol. 4-Nitrophenol 6. p-cresol 7. o-cresol 8. 2-Nitrophenol 9. 3,4 di methyl phenol 1. 2,3 di methyl phenol 11. 2, di methyl phenol napthol Poroshell 12 HPLC (4.6 x 1 mm) Poroshell 12 EC-C18 2. ml 394 bar 1. Hydroquinone 2. Resourcinol 3. Catechol 4. Phenol. 4-Nitrophenol 6. p-cresol 7. o-cresol 8. 2-Nitrophenol 9. 3,4 di methyl phenol 1. 2,3 di methyl phenol 11. 2, di methyl phenol napthol 12 mau 2. ml 1 4 bar 8 HPLC 6 UPLC 4 Poroshell 12 EC-C x 1 mm 2.7 µm PN A.1% B %B 2. % 17 6% 12 RRLC SL 2 ºC 2 mm 11
12 LC LC/MS Poroshell 12 MS Poroshell 12 x1 4 + TIC MRM (** -> **) 2147_.1mg-mL_antibiotics_43.D Poroshell 12 EC-C x mm 2.7 µm PN x1 4 + TIC MRM (** -> **) 2147_.1mg-mL_antibiotics_2.D Poroshell 12 EC-C x 1 mm 2.7 µm PN vs. Poroshell 12 LC/MS A 1 mm (Ammonium Formate) ph 3.8 B t 1% B 12 4% B x.8 ml 2.1 x 1.42 ml 3 x. µl 2.1 x 1 2. µl 1 mg/ml TCC 26 ºC DAD = 27 8 nm = 1. Sulfamerazine 2. Thiamphenicol 3. Sulfadimidine 4. Furazolidone. Sulfamonomethoxine 6. Pyrimethamine 7. Oxolinic acid 8. Sulfadimethoxine 9. Sulfaquinoxaline 1. Difurazone Poroshell
13 Poroshell 12 HPLC Poroshell 12 6 bar UHPLC Poroshell 12 EC-C18 UHPLC 3. mm ID. ml 4 bar LC bar 12 UHPLC =. ml P = 3 bar, N BA = 2497 =.7 ml P = 433 bar = 1. ml P = 9 bar P P P 2 4 Poroshell 12 EC-C18 3. x 1 mm 2.7 µm PN % A.2% 3% B 1 µl TCC 26 ºC DAD = 22 4 nm = HPLC UHPLC 13
14 . HPLC UHPLC Poroshell 12 EPA 833 Poroshell 12 UHPLC Poroshell 12 mau mau mau mm P = 23 Bar USCFZ117 B mm P = 38 Bar USCFX169 B mm P = 68 Bar USCFW149 B Poroshell 12 EC-C µm 2% 7% 1 ml 44 ºC Poroshell 12 HPLC UHPLC Poroshell 12 k 2 Acetophenone Benzene Touene Poroshell 12 EC-C x 1 mm 2.7 µm PN µ mau 1 ml 17. N bar mau 1. ml 17. N bar mau ml N bar ml 14
15 6 4 Poroshell 12 EC-C18 11 Poroshell ,3 4 Bar Poroshell 12 EC-C x 1 mm 2.7 µm PN A +.1% B ACN 3. ml 4 ºC DAD 24 nm µl 1. Acetaminophen 2. Caffeine 3. 2-Acetamidophenol 4. Acetamide. Phenacetin 6. Sulindac 7. Piroxicam 8. Tolmetin 9. Ketoprofen 1. Diflusinal 11. Diclofenac Poroshell
16 2 mm µm C18 Poroshell 12 (USP) 3 Poroshell 12 µm 3-16
17 Naproxen HPLC Poroshell Naproxen Poroshell 12 Eclipse Plus C mm Poroshell 12 EC-C bar HPLC mm Poroshell 12 EC-C18 µm bar HPLC mau mau mau N > 4 (Rs) N= 11, x 1 mm (L1) Poroshell 12 EC-C µm PN µl Rs = 17. N= 21,46 P = 238 bar N= 2, N= 12,1 N= 12, :49:1 MeCN:H 2 O 1.2 ml 4.6 x 1 mm (L1) Eclipse Plus C18 µm PN µl Rs = Naproxen 2. Butyrophenone N= 14, x mm (L1) Poroshell 12 EC-C µm PN µl Rs = 12.6 P = 133 bar HPLC Poroshell 12 Poroshell 12 Simvastatin 1 Simvastatin Poroshell 12 7% 7 mm Poroshell 12 EC-C18 2 mm Poroshell 12 EC-C18 L1 Poroshell 12 EC-C x 2 mm, µm ZORBAX Eclipse Plus C18 PN µm 1. ml µm Poroshell ml ºC 2 DAD = nm 2 = 36 1 nm x 7 mm 2.7 µm Poroshell 12 EC-C18 PN % CH 3 CN 3% 3.9 g/l N ah 2 PO 4 (ph 4.) µm (1. ml/) 2.7 µm (2.8 ml/) T R n/a k > N > T f <
18 4.6 x 2 mm µm ZORBAX Eclipse Plus C x 1 mm 2.7 µm Poroshell 12 EC-C18 2 mm µm 1 mm Poroshell 12 EC-C18 mau bar ZORBAX Eclipse Plus C x 2 mm µm PN ml %B bar mau bar Poroshell 12 EC-C x 1 mm 2.7 µm PN ml %B Sulfadiazine 2. Sulfathiazole 3. Sulfapyridine 4. Sulfamerazine. Sulfamethazine 6. Sulfamethazole 7. Sulfamethoxypyridazine 8. Sulfachloropyridazine 9. Sulfamethoxazole 1. Sulfadimethoxine A.1% B.1% ACN Naproxen Poroshell 12 LC 18
19 Poroshell 12 2 µm 2 µm. µm Poroshell 12 2 µm Poroshell 12 2 µm Poroshell 12 Poroshell µm Poroshell 12 ph LC Poroshell 12 Poroshell 12 HPLC HPLC 12 LC LC ID 19
20 Poroshell 12 2 µm Poroshell 12 2 Poroshell 12 EC-C18 3. x mm 2.7 µm PN µm RRLC (SL) 2 7 2/8 MeCN.1 % 1 Diflusinal / MeCN 1 µg/ml Diflusinal 1 µg/ml A.1 % TFA B MeCN.8 % TFA 1 ml 1 µl Diflusinal %B (N) 1 µl Nortriptyline nortriptyline Poroshell µm 1.8 µm 3. µm.7.6. Poroshell 12 EC-C18 3. x 1 mm 2.7 µm (USCFX184) PN ZORBAX Eclipse Plus C18 3. x 1 mm 1.8 µm (USUYB144) PN Poroshell ZORBAX Eclipse Plus C18 3. x 1 mm 3. µm (USUXV1418) PN % 2 mm Na 2 HPO 4 PH 3. 2% 3 ºC 2 nm Nortriptyline (mg/ml) 2
21 Poroshell 12 Poroshell Poroshell 12 EC-C18 (Tf) = 1.48 μm S Tf = 2.68 P Tf = 4.78 Poroshell 12 4 S P x mm PN mm 4% Na2HPO4 PH 7. 6% 1. ml 2 µl 2 µg/ml amitriptyline µg/ml H 2 O/CH 3 CN (9:1) uracil 24 ºC DAD 24 nm 2 µl Poroshell
22 Poroshell Poroshell 3 Poroshell 12 µm (ID) 2.1 mm Poroshell Poroshell 3 1 Poroshell 3 Poroshell 3 SB-C x 7 mm µm PN A.1% TFA B ACN.7 % TFA 1. 1% B 3. ml 7 ºC 2 bar (UV) 21 nm (Angiotensin II) 2. (Neurotensin) 3. RNA (Insulin) 4. (Insulin). (Lysozyme) 6. (Myoglobin) 7. (Carbonic Anhydrase) 8. (Ovalbumin) 22
23 Poroshell 12 mab (mab Tryptic) Poroshell 12 Stratagene mab (Stratagene mab Tryptic) BioConfirm BioConfirm (QTOF) (ESI) 32 ºC 1L 4psi 4V 1V (Skimmer) 6V (Octapole) 1 RF 7V 4 Hz 2-32 m/z (Acq.) (2GHz) 3. x 1 mm 2.7 µm Poroshell 12 SB-C18 HPLC Poroshell 12 SB-C18 3. x 1 mm 2.7 µm PN ml 4 ºC A.1% B ACN.1% QTOF ESI %B %B Poroshell
24 UHPLC LC LC/MS LC Poroshell LC 126 LC 129 LC 24
25 129 LC 129 LC 129 LC UHPLC HPLC HPLC RRLC UHPLC HPLC UHPLC 126 LC LC 126 LC HPLC 6 bar 8Hz 1 HPLC RRLC HPLC RRLC Poroshell LC HPLC RRLC 6 bar 8Hz
26 Rs (N) 4 bar LC RRLC 112 Compact 122 LC 126 LC 6 bar LC 12 RRLC 122 LC 126 LC 1+ bar LC 129 LC µm mm Poroshell 12 6 bar 2.7 µm RRHT 6 bar < mm RRHD 12 bar mm Poroshell ph (Endcapped) SB-C18 12Å 9 ºC No 7.% EC-C18 12Å 6 ºC % EC-C8 12Å 6 ºC % Poroshell 12 SB-C18 EC-C18 EC-C8 4.6 x 1 mm 2.7 µm x 1 mm 2.7 µm x 7 mm 2.7 µm x mm 2.7 µm x 3 mm 2.7 µm x 1 mm 2.7 µm x 1 mm 2.7 µm x 7 mm 2.7 µm x mm 2.7 µm x 3 mm 2.7 µm x 1 mm 2.7 µm x 1 mm 2.7 µm x 7 mm 2.7 µm x mm 2.7 µm x 3 mm 2.7 µm Poroshell 12 6 bar/9 psi 26
27 Poroshell 3 ph (Endcapped) Poroshell 3 SB-C18 C8 C3 3Å 9 ºC Poroshell 3Extend 3Å ph 8 4 ºC ph 8 6 ºC Poroshell 3 (mm) (µm) Poroshell 3 SB-C18 Poroshell 3 SB-C8 Poroshell 3 SB-C3 Poroshell 3 Extend-C x x x x x Poroshell 3 4 bar/6 psi 27
28 Poroshell 12 Poroshell 12 HPLC Poroshell 12 Poroshell 3 Poroshell Agilent Technologies, Inc CHTW The Mea sure of Confidence
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