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1 中华放射医学与防护杂志 2017 年 8 月第 37 卷第 8 期 Chin J Radiol Med Prot, August 2017,Vol. 37,No 小檗碱增强宫颈癌细胞放射敏感性的研究放射生物学刘明珠樊锐太顾浩王新杰刘艳杰郑州大学第一附属医院中医科 ( 刘明珠王新杰 ), 放疗科 ( 樊锐太顾浩 ), 妇科 ( 刘艳杰 ) DOI: / cma. j. issn 摘要目的探讨小檗碱对宫颈癌细胞凋亡及放射敏感性的影响方法用 μmol / L 的小檗碱作用于宫颈癌细胞 Siha HeLa Caski 记为给药组, 同时以只加入二甲基亚砜 (DMSO) 的细胞为对照组,CCK 8 法检测 48 h 细胞存活率, 计算小檗碱半数抑制浓度用半数抑制浓度的小檗碱作用于宫颈癌 Siha 细胞 48 h, 流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,Western blot 检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3( Cleaved Caspase 3) 细胞周期素 B1( Cyclin Bl) 细胞周期蛋白依赖性激酶 1 ( CDK1 ) 信号转导和转录因子 ( STAT) 磷酸化的 STAT3 (p STAT3) 表达水平含有半数抑制浓度的小檗碱培养液培养宫颈癌 Siha 细胞 24 h 后, 用 Gy X 射线照射细胞, 细胞克隆形成实验检测放射敏感性结果小檗碱能够抑制宫颈癌细胞的生长, 抑制作用从大到小为 :Siha Caski HeLa, 半数抑制浓度依次为 (16 84 ± 3 52) (23 54 ± 8 67) (21 86 ± 6 35) μmol / L 17 μmol / L 的小檗碱能够促进宫颈癌细胞 Siha 凋亡 ( t = , P < 0 01), 将细胞周期阻滞在 G 2 / M 期 ( t = ,P < 0 01), 并抑制宫颈癌细胞中 Cyclin B1 CDK1 p STAT3 表达, 促进 Cleaved Caspase 3 表达, 对宫颈癌细胞中 STAT3 表达没有影响 17 μmol / L 的小檗碱能够降低宫颈癌细胞的存活分数, 放射增敏比为结论小檗碱能够抑制宫颈癌细胞增殖, 促进凋亡, 阻滞细胞周期, 增加宫颈癌细胞的放射敏感性关键词宫颈癌 ; 小檗碱 ; 放射敏感性 ; 信号通路 ; 细胞凋亡 Effect of berberine on radiosensitivity of cervical cancer cells Liu Mingzhu, Fan Ruitai, Gu Hao, Wang Xinjie, Liu Yanjie Department of Traditional Chinese Medicine( Liu MZ,Wang XJ), Department of Radiotherapy( Fan RT, Gu H), Department of Gynaecology( Liu YJ), The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou , China Abstract Objective To investigate the effect of berberine on the radiosensitivity of cervical cancer cells. Methods 5, 10, 15, 20 μmol / L of berberine were used to treat cervical cancer cell lines of Siha, HeLa, Caski. DMSO was applied as control of drug treatment. Cell proliferation was detected by the CCK 8 method, and then the half inhibitory concentration of berberine was calculated. Cell apoptosis and cell cycle distribution were detected by flow cytometry. Protein expressions of Cleaved Caspase 3, Cyclin B1, CDK1, STAT3 and p STAT3 were detected by Western blot. Cervical cancer cells of Siha were treated by berberine with a half inhibitory concentration for 24 h and then irradiated with 0, 2, 4, 6, 8 Gy of X rays. Cell clone assay was used to detect cell survival. Results Berberine could inhibit the growth of cervical cancer cells with a half inhibition concentration of(16 84 ± 3 52),(23 54 ± 8 67),(21 86 ± 6 35)μmol / L for Siha, Caski, and HeLa cells, respectively. The berberine at 17 μmol / L could induce apoptosis(t = ,P < 0 01) and G 2 / M phase arrest( t = ,P < 0 01) in Siha cells, which also inhibited the expressions of Cyclin B1, CDK1 and p STAT3 and promoted the expression of cleaved Caspase 3, but did not influence the expression of STAT3 in cervical cancer cells. Treatment of cells with 17 μmol / L berberine increased the radiosensitivity of cervical cancer cells with a sensitivity enhancement ratio of Conclusions Berberine can inhibit cell proliferation, promote apoptosis, block cell cycle, and increase radiosensitivity of cervical cancer cells. Key words Cervical cancer; Berberine; Radiosensitivity; Signaling pathway; Cell apoptosis

2 582 中华放射医学与防护杂志 2017 年 8 月第 37 卷第 8 期 Chin J Radiol Med Prot, August 2017,Vol. 37,No. 8 宫颈癌的发病率在女性生殖器官恶性肿瘤中位居第 2 位, 严重危害着女性的生命健康目前放射治疗是宫颈癌的主要治疗方法之一据统计有超过 80% 的宫颈癌患者需要接受放射治疗, 临床上 Ⅰ 和 Ⅱ 期的患者经过放射治疗后 5 年生存率为 65% ~ 85% [1] 并且放射治疗容易引起并发症, 如放射性直肠炎膀胱炎盆腔纤维化等, 因此降低放射剂量提高宫颈癌细胞放射敏感性一直是临床研究的热点小檗碱又称为黄连素, 是提取至毛莨科植物黄连的一种生物碱, 属于异喹啉类, 对心律失常高血压心力衰竭等有一定的改善作用 [2 4] 近年来的研究表明, 小檗碱能够影响癌细胞的生长, 促进癌细胞的凋亡, 对肿瘤具有一定的抑制作用 [5 6] 本研究主要探讨小檗碱对宫颈癌细胞生长凋亡及放射敏感性的影响, 以期为小檗碱治疗宫颈癌提供理论依据材料与方法 1. 细胞试剂及仪器 : 人宫颈癌细胞 Siha HeLa Caski 均购自于中国科学院细胞库胎牛血清购自美国 GIBCO 公司 ;RPMI 1640 培养基胰蛋白酶购自美国 Sigma 公司 ;Cell Counting Kit( CCK 8) 试剂盒购自上海前尘生物科技有限公司 ; BD AnnexinV FITC / PI 细胞凋亡双染试剂盒 BD 细胞周期检测试剂盒均购自美国 BD 公司 ;P0012 二喹啉甲酸 ( BCA) 蛋白浓度测定试剂盒购自上海碧云天生物技术研究所 ; 活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3( Cleaved Caspase 3) 单克隆抗体细胞周期素 B1(Cyclin Bl) 单克隆抗体细胞周期蛋白依赖性激酶 1 ( CDK1) 单克隆抗体信号转导和转录因子 ( STAT) 单克隆抗体磷酸化的 STAT3(p STAT3) 单克隆抗体甘油醛 3 磷酸脱氢酶 ( GAPDH ) 单克隆抗体均购自于美国 Cell Signaling 公司 ; Attune NxT 流式细胞仪购自美国 Thermo 公司 ; Clinac 23EX 直线加速器购自美国 Varian 公司 2. 细胞培养 : 将人宫颈癌细胞 Siha HeLa Caski 加入到含有 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 细胞培养液中,800 r / min, 离心半径 5 cm, 离心 5 min, 弃上清液, 加入 5 ml 的细胞培养液混合后, 放在饱和湿度 5% CO 2 培养箱中培养, 观察细胞融合度达到 80% 时, 吸除细胞培养液, 加入含有 0 25% 胰蛋白酶消化液 2 ml,37 消化 2 min, 观察细胞变成圆形时, 加入 RPMI 1640 培养基,800 r / min, 离心半径 5 cm, 离心 5 min, 用细胞培养液悬浮细胞后, 接种到细胞培养板中继续培养 3. 细胞增殖活性检测 : 细胞增殖能力检测用 CCK 8 法取培养至对数生长期的宫颈癌细胞, 去除上清液, 加入胰蛋白酶消化后, 用细胞培养液悬浮细胞, 以每孔中加入细胞接种到 96 孔细胞培养板中, 每孔中加入 100 μl 的细胞悬浮液, 培养 24 h 后, 弃上清, 用小檗碱终浓度为 μmol / L 的细胞培养液培养细胞 48 h, 记为给药组同时将只加入二甲基亚砜 (DMSO) 溶液的细胞记为对照组, 不加细胞的记为空白组, 每组设置 6 个复孔培养结束后, 加入 10 μl 的 CCK 8 溶液, 放在 37 孵育 2 h 后, 检测 490 nm 处的吸光度值 ( A) 细胞增殖活性 = ( 给药组 A 值 - 空白组 A 值 ) / ( 对照组 A 值 - 空白组 A 值 ) 100% 4. 细胞凋亡检测 : 取 10 5 / ml 的人宫颈癌细胞 Siha, 接种到 35 cm 2 的细胞培养瓶中, 每个细胞培养瓶中加入 5 ml 的细胞悬浮液, 细胞贴壁后, 弃去上清液, 加入含有半数抑制浓度的小檗碱培养液, 培养 48 h 后, 加入胰蛋白酶消化, 收集 10 6 个细胞, 加入 5 μl 的膜联蛋白 V FITC(Annexin V FITC), 混合均匀后, 放在 4 避光环境下反应 15 min, 再加入 10 μl 的碘化丙啶 (PI) 溶液, 同样放在 4 避光环境下反应 5 min, 流式细胞仪检测细胞凋亡 5. 细胞周期检测 : 取培养至对数生长期的宫颈癌细胞 Siha, 接种到 6 孔细胞培养板中, 每孔中加入细胞, 培养过夜后, 更换为含有半数抑制浓度的小檗碱培养液, 培养 48 h 后, 离心半径 5 cm, 800 r / min 离心 5 min, 吸除上清液, 用冰预冷的 75% 的乙醇放在 4 固定 24 h 后, 收集 10 6 个细胞, 用磷酸盐缓冲液悬浮细胞, 离心 5 min, 收集细胞, 用含有 5 μl 的浓度为 1 mg / ml 的 PI 和 10 μl 的浓度为 10 mg / ml 的核糖核酸酶 A(RNAseA) 的磷酸盐缓冲液悬浮细胞, 放在 37 中反应 30 min, 流式细胞仪检测细胞周期 6. 照射条件 : 采用 6 MV X 射线, 吸收剂量率 400 cgy / min, 源靶距 100 cm 7. 细胞克隆形成实验 : 含有半数抑制浓度的小檗碱培养液培养宫颈癌细胞 Siha 24 h 后, 用 Gy 照射细胞, 放在 37,5% CO 2 培养箱中培养 12 d, 期间每隔 3 天更换 1 次培养液观察细

3 中华放射医学与防护杂志２０１７年８月第３７卷第８期ＣｈｉｎＪＲａｄｉｏｌＭｅｄＰｒｏｔＡｕｇｕｓｔ２０１７Ｖｏｌ３７Ｎｏ８５８３胞培养板中出现细胞克隆后吸除细胞培养液用８００倍稀释的一抗４过夜１０００倍稀释的二成率利用ＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍ软件进行曲线拟合绘的蛋白的表达趋势甲醇固定２０ｍｉｎ姬姆萨染色计算分析细胞克隆形抗３７０ｍｉｎ中充分反应后曝光洗片分析目制存活曲线克隆形成率ＰＥ克隆数接种细胞９统计学处理所得的实验数据均采用ＳＰＳＳ数１００存活分数ＳＦ受照射细胞克隆形成２２０软件分析计量资料以ｘ ± ｓ表示所有数据８细胞中ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３ＣｙｃｌｉｎＢ１ＣＤＫ１相对表达量存活分数两组数据比较用独立样本ｔ率对照细胞克隆形成率１００符合正态分布对细胞存活率凋亡率周期蛋白ＳＴＡＴ３ｐＳＴＡＴ３水平检测收集细胞用半数抑制检验Ｐ００５为差异有统计学意义浓度的小檗碱培养液培养Ｓｉｈａ细胞４８ｈ后将细胞结加入磷酸盐缓冲液重悬细胞８００ｒｍｉｎ离心半径５ｃｍ离心５ｍｉｎ吸除上清液加入细胞裂解液苯果１小檗碱对３种细胞增殖活性的影响宫颈癌甲基磺酰氟与蛋白裂解液体积比例为１１００每组细胞ＳｉｈａＨｅＬａＣａｓｋｉ经过５１０１５２０ μｍｏｌＬ１２０００ｒｍｉｎ离心半径５ｃｍ离心１０ｍｉｎ吸取蛋浓度依次为１８４ ± ３５２２３５４ ± ８７加入８０ μｌ的裂解液放在冰上裂解３０ｍｉｎ后４的小檗碱作用后细胞增殖活性降低半数抑制２１８ ± ３５ μｍｏｌＬ从表１中可以看出小檗碱白上清液ＢＣＡ法对蛋白进行定量检测将蛋白样品与５上样缓冲液混合其中每４０ μｇ的蛋白样对Ｓｉｈａ细胞的生长抑制作用比其他两组更强对后品加入５ μｌ的缓冲液放在１００煮沸反应５ｍｉｎ续选用１７ μｍｏｌＬ的小檗碱作用于Ｓｉｈａ细胞进一加入到蛋白凝胶上样孔中每孔５０ μｌ蛋白凝胶步研究用１０的分离胶和的浓缩胶８０Ｖ电压电泳２小檗碱对细胞凋亡影响见图１２流式细３０ｍｉｎ后１３０Ｖ直至溴酚蓝进入分离胶的下端边胞仪检测结果显示对照组和给药组细胞凋亡率依０ｍｉｎ用５脱脂奶粉在室温下封闭０ｍｉｎ后在作用后的宫颈癌Ｓｉｈａ细胞凋亡增多ｔ５８４７缘取出凝胶在４１００Ｖ电压条件下转膜表１Ｔａｂｌｅ１组别次为９３２ ± ０９５３２２５ ± １２５小檗碱不同浓度小檗碱对３种细胞增殖活性的影响ｘ ± ｓＥｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｂｅｒｂｅｒｉｎｅｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆ３ｋｉｎｄｓｏｆｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｌｉｎｅｓｘ ± ｓＳｉｈａ样本数ＨｅＬａ对照组９９９７ ± ７４１０ μｍｏｌＬ给药组７０２４ ± ９２ｂ４２３１ ± ３４ｄ５ μｍｏｌＬ给药组１５ μｍｏｌＬ给药组２０ μｍｏｌＬ给药组８９４ ± ７４ａ５０７ ± ５３１Ｃａｓｋｉ９９９５ ± ７９５１０００１ ± ５２９５３１ ± ２７ａ８２４ ± ４２８ｂ０８４ ± ５４５ｄ７４９ ± ５８５ｃ９２３４ ± ５３５ａ８３５４ ± ８０３ｂ９５８ ± ３９ｃｃ５８７ ± ５９４ｄ注与同一细胞对照组相比ｔ８２５３５８１７５１３Ｐ００５ｔ１５８４８４３１２４５Ｐ００５ｔ２５４０１８２４３２２２２７Ｐａ００５ｄｔ３８７７４２９８５２８４２Ｐ００５图１Ｆｉｇｕｒｅ１ｂ小檗碱对宫颈癌Ｓｉｈａ细胞凋亡的影响ＥｆｆｅｃｔｏｆｂｅｒｂｅｒｉｎｅｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＳｉｈａｃｅｌｌｓＡ对照组Ｂ给药组ｃＡＣｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐＢＢｅｒｂｅｒｉｎｅｇｒｏｕｐ

584 中华放射医学与防护杂志 2017 年 8 月第 37 卷第 8 期 Chin J Radiol Med Prot, August 2017,Vol. 37,No.

给药组图 2 小檗碱对宫颈癌 Siha 细胞中凋亡相关蛋白 Cleaved Caspase 3 表达影响 Figure 2 Effects of berberine on expression of apoptosis related protein Cleaved Caspase 3 in Siha cells 图 3 Figure 3 注 :1. 对照组 ; 2.

小檗碱对宫颈癌细胞周期的影响 : 结果列于表 2,3 小檗碱作用后的细胞 G 2 / M 期数目增多, 说明小檗碱能够将细胞阻滞在 G 2 / M 期, 随着药物浓度的增加,G 2 / M 期比例增加 ( 明显, 浓度依赖 t = 47 251,P < 0. 05),S 期几乎没有变化, 而 G 1 期比例减少 (t = 36. 514,P < 0.

4 584 中华放射医学与防护杂志 2017 年 8 月第 37 卷第 8 期 Chin J Radiol Med Prot, August 2017,Vol. 37,No. 8 P < 0 05) 小檗碱作用后的宫颈癌细胞中 Cleaved Caspase 3 表达增多, 以 GAPDH 为内参, 计算对照组和小檗碱作用组中 Cleaved Caspase 3 表达量依次为 0 23 ± ± 0 09 提示小檗碱可能通过提高 Cleaved Caspase 3 表达, 促进宫颈癌细胞凋亡注 :1. 对照组 ; 2. 给药组图 2 小檗碱对宫颈癌 Siha 细胞中凋亡相关蛋白 Cleaved Caspase 3 表达影响 Figure 2 Effects of berberine on expression of apoptosis related protein Cleaved Caspase 3 in Siha cells 图 3 Figure 3 注 :1. 对照组 ; 2. 给药组小檗碱对宫颈癌 Siha 细胞中周期相关蛋白 Cyclin B1 CDK1 表达影响 Effects of berberine on the expression of Cyclin B1 and CDK1 in Siha cells 3. 小檗碱对宫颈癌细胞周期的影响 : 结果列于表 2,3 小檗碱作用后的细胞 G 2 / M 期数目增多, 说明小檗碱能够将细胞阻滞在 G 2 / M 期, 随着药物浓度的增加,G 2 / M 期比例增加 ( 明显, 浓度依赖 t = ,P < 0. 05),S 期几乎没有变化, 而 G 1 期比例减少 (t = ,P < 0. 05) 检测细胞周期相关蛋白 Cyclin B1 CDK1 表达情况, 如图 3 中所示, Cyclin B1 CDK1 蛋白水平下降, 以 GAPDH 为内参, 对照组和给药组中 Cyclin B1 蛋白表达量依次为 1 14 ± ± 0 07,CDK1 蛋白表达量依次为 1 09 ± ± 0 04 提示小檗碱可能通过降低 Cyclin B1 CDK1 蛋白水平影响宫颈癌细胞周期注 :1. 对照组 ; 2. 给药组图 4 小檗碱对宫颈癌细胞中 STAT3 / p STAT3 表达影响 Figure 4 Effect of berberine on STAT3 / p STAT3 expression in Siha cells 5. 小檗碱对宫颈癌细胞放疗敏感性影响 : 通过细胞克隆实验检测小檗碱对宫颈癌细胞放射敏感性的作用, 对照组和给药组集落形成数依次为 : ( ± 28 64) (68 25 ± 16 18) ( t = , P < 0. 05) 从图 5 可以看出, 小檗碱作用后的细胞存活分数降低, 表 3 结果显示, 小檗碱能够提高宫颈癌的放射敏感性, 增敏比为表 2 小檗碱对宫颈癌 Siha 细胞周期影响 (%, x ± s) Table 2 Effects of berberine on cell cycle of Siha cells(%, x ± s) 组别样本数 G 1 期 G 2 / M 期 S 期对照组 ± ± ± 2 47 给药组 ± 6 83 a ± 4 57 a ± 3 21 注 : a 与对照组比较,t = ,P < 细胞中 STAT3 p STAT3 水平检测 : 结果见图 4 小檗碱作用后的宫颈癌细胞中 p STAT3 水平下降, 而 STAT3 水平没有变化以 GAPDH 为内参, 对照组和小檗碱作用组中 p STAT3 蛋白表达量依次为 0 82 ± ± 0 04,STAT3 蛋白表达量依次为 1 04 ± ± 0 07 提示小檗碱可能通过作用于 STAT3 磷酸化影响宫颈癌细胞的生长和凋亡图 5 X 射线照射后 Siha 细胞存活曲线 Figure 5 The survival curves of siha cells after X ray irradiation 讨论小檗碱最初常用来治疗糖尿病心律失常等疾病, 随着研究的不断发展, 小檗碱对白血病胶质

5 中华放射医学与防护杂志 2017 年 8 月第 37 卷第 8 期 Chin J Radiol Med Prot, August 2017,Vol. 37,No 表 3 单击多靶模型参数值 Table 3 Multiple target model parameters 组别 D 0 (Gy) D q (Gy) N SF 2 k SER 对照组给药组注 : 为无数据 ;SF. 存活分数 ;SER. 放射增敏比瘤前列腺癌胃癌食管癌等癌症均具有抑制作用 [7] 小檗碱能够抑制乳腺癌细胞的生长, 能够阻滞黑色素瘤细胞周期, 诱导黑色素瘤细胞在 G 1 期停滞 [8] 还有研究表明, 小檗碱能够下调 Cyclin B1 的表达, 抑制胃癌肝癌细胞增殖, 使癌细胞周期阻滞在 G 2 期 [9 11] 本研究选取 3 种人宫颈癌细胞, 用 μmol / L 的小檗碱作用后,CCK 8 法检测了细胞的增殖活性, 发现小檗碱能够抑制宫颈癌细胞 Siha HeLa Caski 的增殖, 而对 Siha 细胞的抑制作用最为明显癌细胞的生长凋亡受到多种细胞因子的共同调控, 是一个极其复杂的过程 [12] Caspase 是一个目前公认的与细胞凋亡有关的蛋白家族, 而在这个蛋白家族中 Caspase 3 是凋亡执行因子, 当细胞凋亡信号发出时, 传递至 Caspase 3, 导致 Caspase 3 活化, 细胞凋亡发生 [13 15] Cyclin B1 和 CDK1 是与细胞周期相关的蛋白 [16] 有研究表明, 小檗碱能够作用于 Cyclin B1 和 CDK1 而导致癌细胞周期阻滞在 G 2 期 [17 19] 本研究用 17 μmol / L 的小檗碱作用后, 宫颈癌细胞 Siha 早期凋亡和晚期凋亡数目均升高, 细胞周期在 G 2 / M 期受到阻滞, 而进一步检测发现, 小檗碱作用后的细胞中 Caspase 3 活化水平升高, 细胞中 Cyclin B1 和 CDK1 表达水平下降说明小檗碱可能促进 Caspase 3 活化影响宫颈癌细胞凋亡, 可能通过下调 Cyclin B1 和 CDK1 表达水平使宫颈癌细胞周期阻滞在 G 2 / M 期 STAT3 在肿瘤的发生过程中发挥重要作用 [20] 有研究表明,STAT3 在肿瘤组织中磷酸化异常增多, STAT3 信号通路异常活化, 而抑制 STAT3 活化后, 肿瘤细胞的凋亡增多, 生长受到明显的抑制作用 [21 22] 本研究进一步探讨了小檗碱对宫颈癌细胞中 STAT3 信号通路的影响, 发现小檗碱作用后宫颈癌细胞中 STAT3 磷酸化水平降低提示小檗碱可能通过抑制 STAT3 信号通路的激活促进宫颈癌细胞凋亡, 抑制宫颈癌细胞生长, 阻滞宫颈癌细胞周期本研究中, 通过细胞克隆实验检测了小檗碱对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响, 发现小檗碱可降低宫颈癌细胞存活分数, 放射增敏比为提示小檗碱能够提高宫颈癌细胞放射敏感性综上所述, 小檗碱能够抑制宫颈癌细胞生长, 促进宫颈癌细胞凋亡, 提高宫颈癌细胞放疗敏感性随着药物浓度的增加,G 2 / M 期比例明显增加, S 期几乎没有变化, 而 G 1 期比例减少本研究结果为后续在体内研究小檗碱对宫颈癌细胞的作用及机制提供了实验依据利益冲突所有作者共同认可文章无相关利益冲突作者贡献声明刘明珠负责实验操作和论文撰写 ; 樊锐太负责实验设计和论文审校 ; 顾浩和王新杰负责资料收集和协助实验 ; 刘艳杰参与论文修改参考文献 [1] Bhosale PR, Iyer RB, Ramalingam P, et al. Is MRI helpful in assessing the distance of the tumour from the internal os in patients with cervical cancer below FIGO Stage IB2? [ J]. Clin Radiol, 2016,71(6): DOI: / j. crad [2] Zhao GL, Yu LM, Gao WL, et al. Berberine protects rat heart from ischemia / reperfusion injury via activating JAK2 / STAT3 signaling and attenuating endoplasmic reticulum stress[ J]. Acta Pharmacol Sin, 2016, 37 ( 3 ): DOI: / aps [3] Shin JS, Choi HE, Seo S, et al. Berberine decreased inducible nitric oxide synthase mrna stability through negative regulation of human antigen R in lipopolysaccharide induced macrophages[ J]. J Pharmacol Exp Ther, 2016,358(1):3 13. DOI: / jpet [4] Vivoli E, Cappon A, Milani S, et al. NLRP3 inflammasome as a target of berberine in experimental murine liver injury: interference with P2X7 signalling [ J]. Clin Sci ( Lond), 2016,130 ( 20 ): DOI: / CS [5] Naveen CR, Gaikwad S, Agrawal Rajput R. Berberine induces neuronal differentiation through inhibition of cancer stemness and epithelial mesenchymal transition in neuroblastoma cells [ J ]. Phytomedicine, 2016, 23 ( 7 ): DOI: / j. phymed [6] Su YH, Tang WC, Cheng YW, et al. Targeting of multiple oncogenic signaling pathways by Hsp90 inhibitor alone or in combination with berberine for treatment of colorectal cancer[ J]. Biochim Biophys Acta, 2015,1853(10 Pt A): DOI: / j. bbamcr

6 586 中华放射医学与防护杂志 2017 年 8 月第 37 卷第 8 期 Chin J Radiol Med Prot, August 2017,Vol. 37,No. 8 [7] Varghese FS, Thaa B, Amrun SN, et al. The antiviral alkaloid berberine reduces chikungunya virus induced mitogen activated protein kinase signaling[ J]. J Virol, 2016,90(21): DOI: / JVI [8] Kou Y, Li L, Li H, et al. Berberine suppressed epithelial mesenchymal transition through cross talk regulation of PI3K / AKT and RARα / RARβ in melanoma cells[ J]. Biochem Biophys Res Commun, 2016, 479(2): DOI: / j. bbrc [9] Wen C, Wu L, Fu L, et al. Berberine enhances the antitumor activity of tamoxifen in drugsensitive MCF7 and drugresistant MCF7 / TAM cells[j]. Mol Med Rep, 2016, 14(3): DOI: / mmr [10] Refaat A, Abdelhamed S, Saiki I, et al. Inhibition of p38 mitogen activated protein kinase potentiates the apoptotic effect of berberine / tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand combination therapy[ J]. Oncol Lett, 2015,10 (3): DOI: / ol [11] Mittal A, Tabasum S, Singh RP. Berberine in combination with doxorubicin suppresses growth of murine melanoma B16F10 cells in culture and xenograft[ J]. Phytomedicine, 2014,21 (3): DOI: / j. phymed [12] Serresi M, Gargiulo G, Proost N, et al. Polycomb repressive complex 2 is a barrier to KRAS driven inflammation and epithelial mesenchymal transition in non small cell lung cancer[ J]. Cancer Cell, 2016, 29 ( 1 ): DOI: / j. ccell [13] Okada K, Hakata S, Terashima J, et al. Combination of the histone deacetylase inhibitor depsipeptide and 5 fluorouracil upregulates major histocompatibility complex class II and p21 genes and activates caspase 3 / 7 in human colon cancer HCT 116 cells[j]. Oncol Rep, 2016, 36(4): DOI: / or [14] Anwar S, Fratantonio D, Ferrari D, et al. Berry anthocyanins reduce proliferation of human colorectal carcinoma cells by inducing caspase 3 activation and p21 upregulation[ J]. Mol Med Rep, 2016, 14 ( 2 ): DOI: / mmr [15] Sohn D, Peters D, Piekorz RP, et al. mir 30e controls DNA damage induced stress responses by modulating expression of the CDK inhibitor p21waf1 / CIP1 and caspase 3 [ J]. Oncotarget, 2016,7(13): DOI: / oncotarget [16] Rattani A, Vinod PK, Godwin J, et al. Dependency of the spindle assembly checkpoint on Cdk1 renders the anaphase transition irreversible[ J ]. Curr Biol, 2014, 24 ( 6 ): DOI: / j. cub [17] Zhang YY, Liu ZB, Ye XG, et al. Iodine regulates G 2 / M progression induced by CCL21 / CCR7 interaction in primary cultures of papillary thyroid cancer cells with RET / PTC expression [J]. Mol Med Rep, 2016,14 (4): DOI: / mmr [18] Liu L, Xu Y, Reiter RJ, et al. Inhibition of ERK1 / 2 signaling pathway is involved in Melatonin's antiproliferative effect on human MG 63 osteosarcoma cells [ J]. Cell Physiol Biochem, 2016,39 (6): DOI: / [19] Danilov AV, Hu S, Orr B, et al. Dinaciclib induces anaphase catastrophe in lung cancer cells via inhibition of cyclin dependent kinases 1 and 2 [ J]. Mol Cancer Ther, 2016,15 ( 11 ): DOI: / MCT [20] Sanchez Lopez E, Flashner Abramson E, Shalapour S, et al. Targeting colorectal cancer via its microenvironment by inhibiting IGF 1 receptor insulin receptor substrate and STAT3 signaling [J]. Oncogene, 2016,35(20): DOI: / onc [21] Kumar V, Cheng P, Condamine T, et al. CD45 phosphatase inhibits STAT3 transcription factor activity in myeloid cells and promotes tumor associated macrophage differentiation [ J ]. Immunity, 2016, 44 ( 2 ): DOI: / j. immuni [22] Nagathihalli NS, Castellanos JA, VanSaun MN, et al. Pancreatic stellate cell secreted IL 6 stimulates STAT3 dependent invasiveness of pancreatic intraepithelial neoplasia and cancer cells [ J ]. Oncotarget, 2016, 7 ( 40 ): DOI: / oncotarget ( 收稿日期 : ) 欢迎订阅欢迎投稿欢迎刊登广告中华放射医学与防护杂志 www. cjrmp. net 邮发代号 :18 93 电话 ( 传真 ): cjrmp@ cjrmp. sina. net 邮编 : 地址 : 北京市西城区德胜门外新康街 2 号

马丽媛, 等. 油茶皂苷体外诱导人白血病 Jurkat 细胞凋亡及其可能机制 1073 力争将茶油作为食用油的主流品种 [5] 茶麸系油茶果实榨除茶油后的废弃残渣, 药用名为茶子饼,

马丽媛, 等. 油茶皂苷体外诱导人白血病 Jurkat 细胞凋亡及其可能机制 1073 力争将茶油作为食用油的主流品种 [5] 茶麸系油茶果实榨除茶油后的废弃残渣, 药用名为茶子饼, 1072 基础研究 Basic Research www.tumorsci.org 肿瘤 2011 年 12 月第 31 卷第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油茶皂苷体外诱导人白血病 Jurkat