标题)

Size: px

Start display at page:

Download "标题)"

帅胡
5 years ago
Views:

1 2017 年 5 月第 27 卷第 5 期中国比较医学杂志 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE May, 2017 Vol. 27 No. 5 研究报告脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌 TH29 细胞增殖及诱导凋亡作用与机制张海燕 1,2, 孙勇 3,4, 夏惠 2, 王锋 2, 王少康 2, 邢新会 3, 孙桂菊 2 1, 彭景 (1. 扬州大学食品科学与工程学院, 江苏扬州 ;2. 东南大学公共卫生学院营养与食品卫生系, 教育部环境医学工程重点实验室, 南京 ;3. 清华大学化学工程系, 工业生物催化教育部重点实验室, 北京 ;4. 中国肉类食品综合研究中心, 北京 ) 摘要目的探讨脱氧紫色杆菌素 (Deoxyviolacein) 对人结肠癌 HT29 细胞增殖抑制和诱导凋亡及其可能机制方法用不同浓度的脱氧紫色杆菌素处理 HT29 细胞, 采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT) 比色法, 检测脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞的抑制率 ; 流式细胞术检测细胞周期和凋亡 ;Western Blot 法检测凋亡相关蛋白 Bax Bcl 2 和 Caspase9 表达的变化结果脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞有明显的增殖抑制作用 ; 可提高 G 0 期细胞比例, 降低 S 期细胞比例 ; 细胞凋亡率升高,Bax 和 Caspase9 蛋白表达升高,Bcl 2 蛋白的表达降低结论脱氧紫色杆菌素抑制结肠癌 HT29 细胞增殖并诱导凋亡, 其凋亡机制可能作用于线粒体介导的内源性通路关键词脱氧紫色杆菌素 ;HT29 细胞 ; 凋亡中图分类号 R 33 文献标识码 A 文章编号 (2017) doi: j. issn Effect of deoxyviolacein on inhibiting proliferation and inducing apoptosis of colon cancer HT29 cells ZHANG Hai yan 1, 2,SUN Yong 3, 4,XIA Hui 2,WANG Feng 2, WANG Shao kang 2,XING Xin hui 3,SUN Gui ju 2,PENG Jing 1 (1. College of Food Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou ,China; 2. Key Laboratory of Environmental Medicine and Engineering, Ministry of Education, Department of Nutrition and Food Hygiene, School of Public Health, Southeast University, Nanjing ; 3. Key Laboratory of Industrial Biocatalysis, Ministry of Education, Department of Chemical Engineering, Tsinghua University, Beijing ,China; 4. China Meat Research Center, Beijing ) Abstract Objective To evaluate the effect of deoxyviolacein on the apoptosis in HT29 cells and its possible mechanisms of anticancer effects. Methods In vitro,human colon cancer HT29 cells were treated by deoxyviolacein in a series of concertrations. The absorbance value was detected by means of MTT assay and growth inhibition rate was calculate. Cell cycle and apoptosis was assessed by flow cytometry. The expression of Bax, Bcl 2 and Caspase9 were analyzed by Western blotting. Results Deoxyviolacein could inhibit the growth of human colon cancer HT29 cells. The cells at period G 0 and the apoptosis rates were significantly increased, and the cells at period S were significantly decreased. The [ 作者简介 ] 张海燕 ( ), 女, 硕士研究生, 研究方向 : 营养与食品卫生学 E mail: zhyrita369@ 163. com [ 通讯作者 ] 孙桂菊 ( ), 女, 博士生导师, 研究方向 : 植物化学物与食品功效 E mail: gjsun@ seu. edu. cn; 彭景 ( ), 女, 副教授, 研究方向 : 烹饪营养学 E mail: yzupj@ 163. com

2 90 中国比较医学杂志 2017 年 5 月第 27 卷第 5 期 Chin J Comp Med, May 2017,Vol. 27. No. 5 expression of Bax, Caspase9 were upregulated and Bcl 2 was downregulated by deoxyviolacein at 48 hours. Conclusions Deoxyviolacein could inhibit the growth and induce apoptpsis of human colon cancer HT29 cells. The mechanism may be associated with up regulation of Bax and Caspase9 and down regulation of Bcl 2 expression. Key words Deoxyviolacein; HT29 cells; Apoptpsis 结直肠癌是最常见的恶性肿瘤之一, 近年来发病率和死亡率总体呈上升趋势 [1], 位列全球女性和男性常见恶性肿瘤的第二位和第三位 [2] 目前, 针对结肠癌的主要治疗手段为手术切除, 辅以放化疗及生物治疗等, 但治疗效果通常不理想, 辅助治疗产生的副作用大, 预后较差 [3] 脱氧紫色杆菌素作为一种蓝紫色的微生物代谢产物, 兼具抗肿瘤 [4] [5] [6] 抗革兰氏阳性菌和抗植物致病菌等活性, 属于低基因毒性物质 [7], 在医药行业具有广泛的应用前景已有文献报道, 紫色杆菌素和脱氧紫色杆菌素 [8, 的混合物可以抑制人肿瘤细胞增殖 9], 但对于脱氧紫色杆菌素单独作用肿瘤细胞的研究很少, 其抗肿瘤作用机制尚不明确本实验旨在研究脱氧紫色杆菌素对人结肠癌 HT29 细胞的抑制增殖与凋亡诱导作用, 并进一步探索脱氧紫色杆菌素影响 HT29 细胞凋亡的可能分子机制脱氧紫色杆菌素结构式如图 1 所示图 1 Fig. 1 1 材料和方法脱氧紫色杆菌素的化学结构 Structure of deoxyviolacein 1 1 主要试剂和仪器脱氧紫色杆菌素 ( 纯度为 99% ) 来自清华大学邢新会教授实验室 ; 人结肠癌细胞株 HT29 上海拜力生物科技公司 ; 噻唑蓝 ( MTT) 购自德国 Sigma 公司 ; 二甲基亚砜 ( DMSO) 周期检测试剂盒凋亡试剂盒购自凯基生物技术股份有限公司 ; 胰蛋白酶溶液购自上海源培生物科技股份有限公司 ;McCoy s 5A 培养基胎牛血清购自美国 Gibco 公司 ; 磷酸缓冲液 ( PBS) 购自美国 Hyclone 公司 ;Anti beta Actin (abcam,ab6276) 1 mol / L Tris HCl(pH8 0) 购自上海碧云天生物技术公司 ; 辣根过氧化酶标记的山羊抗兔 lgg (ZB 2301) 购自北京中杉金桥生物技术有限公司 ; TEMED ( T8133 ) 购自美国 Sigma 公司 ; Enhanced chemiluminescence reaction( ECL kit, ) 购自美国 Bio Rad 公司 Centrifude 5424R 小型台式高速冷冻离心机 ( 德国 Eppendorf 公司 );TDL 4 台式离心机 ( 上海安亭科学仪器厂 );IX51 倒置显微镜 ( 日本 OLYMPUS 公司 ); RT 6000 酶标分析仪 ( 美国雷杜公司 ); FACSCanto Ⅱ 流式细胞仪 ( 美国 BD ( Becton, Dickinson) 公司 ); 电泳仪电泳槽水平摇床 ( 北京六一厂 ); 旋涡混匀器 ( 江苏海门其林贝尔公司 ); 半干转膜仪 ( 美国 Bio rad 公司 );Image Master VDS 凝胶自动成像仪 ( 瑞典 Pharmacia 公司 ) 1 2 实验方法细胞培养结肠癌 HT29 细胞复苏后于 37 5% CO 2 细胞培养箱中, 用含 10% 胎牛血清的 McCoy s 5A 培养基 ( 含 100 U / ml 青霉素 100 U / ml 链霉素 ) 培养实验分组 : 对照组 : 用 McCoy s 5A 培养基常规培养细胞 ; 实验组 : 分别用含脱氧紫色杆菌素浓度为 μmol / L 的 McCoy s 5A 培养基培养细胞细胞增殖抑制率检测采用 MTT 比色法取对数生长期 HT29 细胞, 以 / L 浓度接种于 96 孔板, 每孔接种 150 μl, 不同组别均设不加细胞只加培养液的调零孔, 培养 24 h 后吸弃上清, 按照不同组别处理加入培养基, 每孔 150 μl, 以培养 h 为检测点, 每孔加入 MTT 溶液 20 μl 继续培养 4 h 后吸弃上清, 加 DMSO 溶液 150 μl, 振荡 10 min 以对应的调零孔数值调零, 在酶标仪上读取每孔 490 nm 处的 OD 值, 根据以下公式计算细胞增殖抑制率增殖抑制率 = (1 - OD 实验 / OD 对照 ) 100% 细胞周期和凋亡检测采用流式细胞术取对数生长期 HT29 细胞, 以 / L 浓度接种于 6 孔板, 每孔接种 2 ml, 培养 24 h 后吸弃上清, 加入脱氧紫色杆菌素浓度为 μmol / L 的培养基, 培养 48 h, 收集细胞, 按照试剂盒操作染色, 流式细胞仪检测凋亡蛋白检测采用蛋白免疫印迹 ( Western Blot) 法细胞培养处理同 1 2 3, 每孔加 200 μl RIPA 裂解液, 提取蛋白, 行 SDS PAGE 凝胶电泳, 转膜, 室温下用含

3 中国比较医学杂志 2017 年 5 月第 27 卷第 5 期 Chin J Comp Med, May 2017,Vol. 27. No % 脱脂奶粉的 TBS 封闭 2 h 加一抗 4 摇床孵育过夜, 次日用 TBS 洗 3 次, 每次 10 min, 加辣根过氧化物酶标记的羊抗兔 IgG 抗体, 室温孵育 1 h, TBS 洗膜 3 次, 每次 10 min,ecl 显色, 凝胶成像系统检测杂交信号, 以条带灰度值比间接代表各蛋白表达量 1 3 统计学方法实验数据采用平均值 ± 标准差 ( x ± s) 表示, 各组间均数比较采用单因素方差分析 one way ANOVA, 应用 SPSS 20 0 统计软件进行分析, 以 P < 0 05 表示差异有显著性 2 结果 2 1 脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞的增殖抑制作用脱氧紫色杆菌素对结肠癌 HT29 细胞的增殖抑制作用与浓度及作用时间呈相关性, 随着脱氧紫色杆菌素浓度的增加作用时间的延长, 脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞的生长抑制作用增强 ( 图 2) 当浓度为 9 6 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素作用 HT29 细胞 24 h 后, 抑制率可达 26 0%, 在作用时间不变的情况下, 抑制率不再随药物浓度的增加而升高 ; 浓度为 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素作用 HT29 细胞 48 h 后, 抑制率可高达到 56 3% ( 图 2) 以上结果表明, 脱氧紫色杆菌素在体外具有较好的抑制肿瘤细胞增殖的效果 2 2 脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞周期的影响流式细胞仪结果显示, 随着脱氧紫色杆菌素浓度的增加, 处于 G 0 期的细胞比例增加, 处于 S 期细胞的比例减少与对照组相比,2 4 μmol / L 和 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素作用 HT29 细胞 48 h 后,G 0 期细胞比例显著性增加 ( P < 0 05); 2 4 ~ 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素作用 48 h 后, 可使处于 S 期的 HT29 细胞比例显著降低 ( P < 0 05)( 图 3) 以上结果说明, 脱氧紫色杆菌素可使结肠癌 HT29 细胞发生 G 0 期阻滞, 使 DNA 复制受阻, 从而抑制肿瘤细胞增殖 2 3 脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞凋亡率的影响通过 Annexin V / PI 双染色检测 HT29 细胞的凋亡程度, 结果见图 4 与对照组相比, 脱氧紫色杆菌素可显著增加 HT29 细胞的凋亡率 ( P < 0 05), 且呈明显的剂量相关性 ; 浓度为 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素作用 48 h 后,HT29 细胞的凋亡率高达 34 7% 以上结果表明, 脱氧紫色杆菌素可以增加 HT29 细胞凋亡比例, 诱导 HT29 细胞发生程序性死亡 2 4 脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞凋亡相关蛋白表达的影响经 Western Blot 对 HT29 细胞内相关凋亡蛋白的表达水平分析, 结果发现, 随着脱氧紫色杆菌素浓度的增加,Bax 和 Caspase9 蛋白表达升高,Bcl 2 蛋白表达降低与对照组相比, 浓度为 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素可明显增加凋亡蛋白 Bax 和 Caspase9 的表达水平 ( P < 0 05) ; 浓度为 9 6 μmol / L 和 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素可显著降低 Bcl 2 蛋白的表达水平 ( P < 0 05), 详见表 1 从上述结果可知, 脱氧紫色杆菌素可以上调促凋亡蛋白 Caspase9 和 Bax 的表达, 下调细胞存活促进因子 Bcl 2 的表达, 从而促进 HT29 细胞的凋亡 Fig. 2 图 2 脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞增殖的抑制率 Inhibition rate of deoxyviolacein on proliferation of HT29 cells

９２中国比较医学杂志２０１７年５月第２７卷第５期图３脱氧紫色杆菌素作用ＨＴ２９细胞４８ｈ后对周期的影响Ｆｉｇ３ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｏｘｙｖｉｏｌａｃｅｉｎｏｎｃｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆＨＴ２９ｃｅｌｌｓ图５图４Ｆｉｇ４ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｏｘｙｖｉｏｌａｃｅｉｎｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＨＴ２９ｃｅｌｌｓ表１

０６５ ± ００４２４３８４Ｆｉｇ５脱氧紫色杆菌素对ＨＴ２９细胞的凋亡的影响浓度 μｍｏｌＬＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ０８１ ± ００２０９８ ± ００３０６５ ± ００７Ｃａｓｐａｓｅ９０２４ ± ０２２０７０ ± ００４ＣｈｉｎＪＣｏｍｐＭｅｄＭａｙ２０１７Ｖｏｌ２７Ｎｏ５０５８ ± ０１１０７１ ±

4 ９２中国比较医学杂志２０１７年５月第２７卷第５期图３脱氧紫色杆菌素作用ＨＴ２９细胞４８ｈ后对周期的影响Ｆｉｇ３ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｏｘｙｖｉｏｌａｃｅｉｎｏｎｃｅｌｌｃｙｃｌｅｏｆＨＴ２９ｃｅｌｌｓ图５图４Ｆｉｇ４ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｏｘｙｖｉｏｌａｃｅｉｎｏｎａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆＨＴ２９ｃｅｌｌｓ表１脱氧紫色杆菌素对ＨＴ２９细胞蛋白表达的影响Ｔａｂ１ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｏｘｙｖｉｏｌａｃｅｉｎｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓｒｅｌａｔｅｄｔｏａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｎＨＴ２９ｃｅｌｌｓＢａｘ蛋白表达ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓＢｃｌ２００８２ ± ０１００８２ ± ００７９６０８７ ± ００７０６５ ± ００４２４３８４Ｆｉｇ５脱氧紫色杆菌素对ＨＴ２９细胞的凋亡的影响浓度 μｍｏｌＬＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ０８１ ± ００２０９８ ± ００３０６５ ± ００７Ｃａｓｐａｓｅ９０２４ ± ０２２０７０ ± ００４ＣｈｉｎＪＣｏｍｐＭｅｄＭａｙ２０１７Ｖｏｌ２７Ｎｏ５０５８ ± ０１１０７１ ± ０２１０９４ ± ０２５３不同浓度脱氧紫色杆菌素Ｃａｓｐａｓｅ９ＢａｘＢｃｌ２蛋白表达的影响ＥｆｆｅｃｔｏｆｄｅｏｘｙｖｉｏｌａｃｅｉｎｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＣａｓｐａｓｅ９ＢａｘａｎｄＢｃｌ２ｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ讨论结直肠癌是由环境饮食以及生活方式与遗传因素等协同作用的结果１０１２近年来随着膳食结构和生活饮食习惯的改变我国结肠癌的发病率也不断上升５氟尿嘧啶５Ｆｕ作为第一个用于治疗结直肠癌的化疗药物可降低术后结肠癌复发率已被应用于结直肠癌化疗领域２０余年１３１５已有文献报道显示１９２ μｍｏｌＬ的５Ｆｕ作用于ＨＴ２９细胞２４ｈ和４８ｈ后抑制率分别可达１４４９和２７７９１６而本研究通过ＭＴＴ实验发现浓度仅为９６ μｍｏｌＬ的脱氧紫色杆菌素作用ＨＴ２９细胞２４ｈ和４８ｈ后就可以使ＨＴ２９细胞的增殖抑制率分别高达２６０和

5 中国比较医学杂志 2017 年 5 月第 27 卷第 5 期 Chin J Comp Med, May 2017,Vol. 27. No %, 显然脱氧紫色杆菌素对结肠癌 HT29 细胞的增殖抑制效果要明显高于常规化疗药物 5 Fu 细胞无限增殖及凋亡受阻是肿瘤发病的症结所在细胞增殖源于细胞周期的有序进行, 受 G 1 / S G 2 / M 两个关键点的调控 ; 细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡, 肿瘤细胞减弱或失去了凋亡能力干扰细胞周期的正常运转以及诱导细胞凋亡的发生已经成为抗癌药物作用的新靶点本实验以不同浓度的脱氧紫色杆菌素处理结肠癌 HT29 细胞, 结果显示脱氧紫色杆菌素可将 HT29 细胞阻滞在 G 0 期, 使 DNA 合成受阻, 不能进行有丝分裂, 抑制结肠癌细胞的无限增殖浓度在 2 4 ~ 38 4 μmol / L 的脱氧紫色杆菌素作用 HT29 细胞 48 h 后, 可使早凋及中晚期凋亡的细胞比例均明显增加, 且凋亡比例随浓度的升高而增加由此可见, 脱氧紫色杆菌素在体外对结肠癌 HT29 细胞的生长抑制作用, 可能是通过阻滞细胞周期诱发细胞凋亡来实验的哺乳动物细胞凋亡主要有内部线粒体介导和外部死亡受体介导两种途径 [17, 18] 为了进一步探索脱氧紫色杆菌素对 HT29 细胞的凋亡机制, 选用 Western Blot 法检测内部线粒体途径相关蛋白 Caspase9 Bax 和 Bcl 2 Caspase9 属于半胱氨酸蛋白酶家族, 是细胞凋亡的重要调节因子 Bax 和 Bcl 2 属于 Bcl 2 家族, 通过调节线粒体通透性以及细胞色素 C 释放介导细胞凋亡其中,Bcl 2 是最主要的抗凋亡蛋白, 可以稳定线粒体膜功能, 阻止线粒体释放细胞色素 C 等 [19] ;Bax 是最早发现的促凋亡家族成员, 主要存在于细胞质中, 受到凋亡刺激后转位到线粒体, 引起细胞色素 C 的释放本实验结果显示随着脱氧紫色杆菌素浓度升高,Caspase9 和 Bax 蛋白表达随之升高, 而 Bcl 2 的蛋白表达随之下降, 认为脱氧紫色杆菌素可通过内部线粒体途径诱导 HT29 细胞凋亡当前, 结肠癌治疗面临转移复发和对放化疗产生抗性等主要问题 [20], 进一步明确结肠癌细胞凋亡的分子机制, 通过诱导癌变细胞凋亡是癌症治疗需要研究的热点问题本实验的结果印证, 脱氧紫色杆菌素可抑制结肠癌 HT29 细胞, 并干扰细胞周期, 诱发细胞凋亡, 上调 Caspase9 和 Bax 蛋白表达下调 Bcl 2 蛋白表达可能是其作用机制之一接下来, 我们将进一步观察脱氧紫色杆菌素对结肠癌细胞其他凋亡通路的影响, 为脱氧紫色杆菌素的未来临床应用提供理论基础参考文献 : [ 1 ] 李道娟, 李倩, 贺宇彤. 结直肠癌流行病学趋势 [ J]. 肿瘤防治研究,2015,42(3): [ 2 ] Ferlay J, Soerjomatarem I, Dikshit R, et al. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012[J]. Int J Cancer,2015,136(5):E359 - E386. [ 3 ] Laszlo L. Predictive and prognostic factors in the complex treatment of patients with colorectal cancer [ J]. Magy Onkol, 2010,54(4): [ 4 ] Jiang PX,Wang HS, Xiao S, et al. Pathway redesign for deoxyviolacein biosynthesis in Citrobacter freundii and characterization of this pigment[ J]. Appl Microbiol Biotechnol, 2012,94(6): [ 5 ] Aruldass CA, Rubiyatno, Venil CK, et al. Violet pigment production from liquid pineapple waste by Chromobacterium violaceum UTM5 and evaluation of its bioactivity [ J ]. Rsc Advances,2015,5(64): [ 6 ] Wang HS, WANG FZ, Zhu XF, et al. Biosynthesis and characterization of violacein, deoxyviolaceiri and oxyviolacein in heterologous host, and their antimicrobial activities [ J ]. Biochemical Engineering Journal,2012,67: [ 7 ] 孙勇, 张金兰, 刘鸿儒, 等. 紫色杆菌素及脱氧紫色杆菌素的基因毒性评价 [J]. 食品科学,2016,37(9): [ 8 ] Rodrigues AL, Trachtmann N, Becker J, et al. Systems metabolic engineering of Escherichia coli for production of the antitumor drugs violacein and deoxyviolacein[j]. Metab Eng,2013,20: [ 9 ] Menezes CB, Silva BP, Sousa IM, et al. In vitro and in vivo antitumor activity of crude extracts obtained from Brazilian Chromobacterium sp isolates[ J]. Braz J Med Biol Res,2013,46 (1): [10] Vargas AJ,Thompson PA. Diet and Nutrient Factors in Colorectal Cancer Risk[ J]. Nutr Clin Pract,2012,27(5): [11] 乌日丽其, 宋华, 李左军, 等. 结直肠癌患病饮食相关危险因素病例对照研究 [J]. 疾病监测与控制,2016,10(1): [12] 万德森. 结直肠癌流行趋势及其对策 [J]. 癌症,2009,28(9): [13] Pestalozzi BC,Jäger D,Knuth A. [ Systemic therapy for colorectal cancer][ J]. Der Chirurg,2005,76(6): [14] 蒋蔚茹, 刘杰. 结直肠癌化疗进展 [ J]. 中国肿瘤,2011,20 (3): [15] Van Cutsem E, Rivera F, Berry S, et al. Safety and efficacy of first line bevacizumab with FOLFOX, XELOX, FOLFIRI and fluoropyrimidines in metastatic colorectal cancer: the BEAT study [ J]. Ann Oncol,2009,20(11): [16] 周萍. EGCG 联合 5 FU 抑制结肠癌 HT 29 细胞生长及其机制的实验研究 [D]. 苏州大学,2008. [17] 赵彦超, 顾耘. 细胞凋亡通路研究进展 [ J]. 现代医学,2013, 41(4): [18] 刘晓婷, 王延让, 张明. 线粒体介导细胞凋亡的研究进展 [ J]. 环境与健康杂志,2013,30(2): [19] Adams KW, Cooper GM. Rapid turnover of mcl 1 couples translation to cell survival and apoptosis[ J]. J Biol Chem,2007, 282(9): [20] Zhang Q,Sha S,Xu B,et al. Prevalence of colorectal cancer in patients with ulcerative colitis: A retrospective, monocenter study in China[J]. J Cancer Res Ther,2015,11(4): 收稿日期

马丽媛, 等. 油茶皂苷体外诱导人白血病 Jurkat 细胞凋亡及其可能机制 1073 力争将茶油作为食用油的主流品种 [5] 茶麸系油茶果实榨除茶油后的废弃残渣, 药用名为茶子饼,

马丽媛, 等. 油茶皂苷体外诱导人白血病 Jurkat 细胞凋亡及其可能机制 1073 力争将茶油作为食用油的主流品种 [5] 茶麸系油茶果实榨除茶油后的废弃残渣, 药用名为茶子饼, 1072 基础研究 Basic Research www.tumorsci.org 肿瘤 2011 年 12 月第 31 卷第 12 期 TUMOR Vol. 31, December, 2011 DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2011.12. 004 Copyright 2011 by TUMOR 油茶皂苷体外诱导人白血病 Jurkat