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1 48 1 () Vol. 48 No Journal of Xiamen University (Nat ural Science) Jan , 1 3, 2 (1.,, ; 2., ) :, (DMSO). :DMSO,. 75 mmol/ L DMSO 48 h,, ;10mol/ L 48 h,,;,. : ; ; ; :Q :A : (2009) ,,. [1 ].,(,, ) [2 ].,,. [1-2 ].,,,.,,,,,,,,,,. : :(C ), ( ) 3 edu. cn [3 ], DMSO, /, MS 0. 8 mg/ L 2,42D,, (25 1), r/ min [3 ] Sigma,DMSO ( H PL C ) Olymp us ( CX31212C02 ), Agi2 lent1100, UV22500,,
2 114 () ml,60 2 g 20 ml, 120 r/ min,12. 3,, 3, ( Fluroscein diacetate, FDA). 2 mg FDA 1 ml, 50,0. 04 g/ L. FDA 1 1, 10 min,,., = / 100 % ,60, [4 ], 80 % ( 1 50), 50 2 h, 3,, r/ min 10 min,,,uv nm OD ,0. 22m,,4,. [ 5 ] : ODS Hypersil C18 ( 5 m, g4. 0 mm 250 mm) ;1. 0 ml/ min. :A 0. 1 %,B 0. 1 % ;B 50 min 15 % 35 % ;250 nm. 1 1 Fig. 1 Comparison of total isoflavone contents in seed, hypocotyls,callus,and suspension cells of J 1 soy2 bean DMSO,,. DMSO,,, mol/ L [6 ]. DMSO,, 75 mmol/ L., mol/ L [7 ] h, FDA. 2 () () Fig. 2 Growth curve (left) and total isoflavone contents in suspension cells (right) of J 1 soybean hypocotyl
3 1 : DMSO ( 48 h) A B. ; C D. 5mol/ L ; E F. 75 mmol/ L DMSO A C E ; B D F (40 ) Fig. 3 Light and fluorescent microscopies of FDA stained suspension cells after MJ (10 mol/ L,C and D) and DMSO (75 mmol/ L,E and F) treatment for 48 h and control suspension cells (A and B) A,C,and E : Total cells under white light ; B,D,and F :Living cells appeared green under fluorescent light (40 ) (22 d) (7,) (1) :,1. 55 mg/ g dm ;, ,,.
4 116 () DMSO Fig. 4 Effect of MJ and DMSO on levels of total isofla2 vone in cell2suspension cultures of soybean 5 DMSO Fig. 5 Effect of MJ and DMSO on daidzein contents in cell2suspension cultures of soybean 2. 2,12, 3, 2. :0 3 d ;47 d,6 ;79 d (2 ).,,, (8 ), mg/ g dm (2 ) :,, (6 ), mol/ L., 5 mol/ L, 10mol/ L,, 5mol/ L h, :(3 A),5 mol/ L 24 h,,, ( p > 0. 05,4) ; 48 h,,,(3c D), (4) ;72 h,,( p < 0. 05, 4),, ( p < 0. 05,5),, DMSO DMSO,, 75 mmol/ L. :DMSO 48 h, 95 % (3 E F),. DMSO 24 h, ( p < 0. 05), ( p > 0. 05) ;48 h,, mg, (4 5),4. 67, DMSO , mol/ L, h. 10 mol/ L 48 h,, 1. 3 ( p
5 1 : I. 48 h II. () 10mol/ L 48 h () HPLC Fig. 6 I. Effect of different concentrations of Phe on lev2 els of daidzein in cell2suspension cultures of soy2 bean (treated for 48 h) II. HPL C chromatograms of isolated isoflavone samples f rom suspended cells treated without (upper) or with 10mol/ L Phe for 48 h (lower) < 0. 05,6 I) ;, 38 % (6 ), (), , [8-9 ].,,,., [10 ].,10 mol/ L 48 h, 1. 3 ;,,, 138 % (6).,,, [11 ]., [9,12-13 ].,200mol/ L 9 d, % [ 13 ] ;100 mol/ L,10 [9 ].,, mg/ L,, [14 ] ;110mol/ L,, 20 mol/ L, [6 ]. 5mol/ L, (3C D),,,. DMSO,,, DMSO,,, [15 ]. DMSO, [14,16-17 ]., 75 mol/ L DMSO 48 h, (4 5).,,.
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