叶向阳, 等. 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性中的孔隙大于 5 μm 时, 才有利于骨细胞长入材料内部实验就大粒径利福平 /PLGA 微球的制备及其特性进行前期研究, 旨在为下一步的实验奠定基础 1 材料和方法设计 : 材料学与药物体外缓释实验

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版麦苗咎
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1 中国组织工程研究与临床康复第 15 卷第 51 期出版 Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research December 17, 211 Vol.15, No.51 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性叶向阳 1, 孙湘 2, 贾会文 3, 汤立新 1, 赵玉果 1 4, 甄平 Preparation and characterization of rifampicin-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres Ye Xiang-yang 1, Sun Xiang 2, Jia Hui-wen 3, Tang Li-xin 1, Zhao Yu-guo 1, Zhen Ping 4 1 First Department of 473, Henan 2 Department of Blood Transfusion, Xichuan Country People s Hospital, Xichuan 47445, Henan 3 Emergency Department, 473, Henan 4 Department of Lanzhou General Hospital of Lanzhou Military Area Command of Chinese PLA, Lanzhou 735, Gansu Province, China Ye Xiang-yang, Master, Attending physician, First Department of Orthopaedics, 473, Henan Province,China; yexyang28@ Correspondence to: Zhen Ping, Doctor, Chief physician, Professor, Master s supervisor, Department of Lanzhou General Hospital of Lanzhou Military Area Command of Chinese PLA, Lanzhou 735, Gansu Province, China zhenpingok@ Received: Accepted: Abstract BACKGROUND: Some scholars prepared rifampicin-loaded poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) microspheres with diameter of 1μm which was not suitable to be combined with calcium phosphate cement to prepare repair materials with good degradation. OBJECTIVE: To conduct the preparation of rifampicin-loaded PLGA microspheres with large size and to study the physicochemical characteristics of the microspheres and the characteristics of drug release in vitro. METHODS: Rifampicin-loaded microspheres of biodegradable PLGA were prepared using a double-emulsion solvent-extraction [(water-in-oil)-in-water] technique. The morphology of the microspheres was observed by scanning electron microscope and light microscope. Their average diameter and the span were measured. Their envelopment rate and drug-carried rate were determined by high performance liquid chromatography. Their release characteristics were studied in vitro by dissolution method. The curve of drug release in vitro was fitted and the equation of the curve was established. RESULTS AND CONCLUSION: Rifampicin-loaded PLGA microspheres presented complete globe, good dispersibility and no obviously aggregation. Their average diameter was (8.±9.4) μm, drug-carried rate was (33.18±1.36)% and envelopment rate was (54.79±1.13)%. In vitro release property of the microspheres was good. In the burst release phase, the rate of drug release in vitro was (14.66±.18)%, and rose to (18.9±.45)% and (92.17±1.23)% 3 and 42 days later. Rifampicin-loaded PLGA microspheres have the characteristics of slowing antituberculosis drugs releasing. Ye XY, Sun X, Jia HW,Tang LX, Zhao YG, Zhen P. Preparation and characterization of rifampicin-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) microspheres. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu. 211;15(51): [ 摘要背景 : 虽然国内外有很多制备利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸共聚物 (poly lactic acid-glycolic acid copolymer,plga) 微球的报道, 但这些微球粒径多在 1 μm 左右, 不适合与磷酸钙骨水泥复合制备成具有良好降解性的抗结核修复材料目的 : 制备大粒径利福平 /PLGA 缓释微球, 观察其理化特性和体外缓释特性方法 : 以 PLGA 为载体, 将利福平分散于 PLGA 的有机溶剂中, 采用复乳溶剂挥发法制备利福平 / PLGA 缓释微球光镜和扫描电镜下观察微球的形态特征, 测定微球平均直径和跨距, 高效液相色谱法测定载药量和包封率, 以溶出法和高效液相色谱法观察其体外释药特性, 并拟合药物体外释放曲线建立曲线方程结果与结论 : 利福平 /PLGA 微球电镜观察呈圆球形, 分散性好, 粘连少, 粒径分布集中, 平均粒径 (8.±9.4) μm 载药量包封率分别为 (33.18±1.36)%,(54.79±1.13)% 体外缓释试验显示突释期内微球释放度为 (14.66±.18)%, 前 3 d 累计释放度 (18.9±.45)%, 到 42 d 体外累积释放度达到 (92.17±1.23)% 提示利福平 /PLGA 微球具有良好的缓释效果, 是一种较为理想的抗结核药物的载体材料和释放系统 ;PLGA 是良好的药物缓释载体, 可以用来制备载药缓释微球关键词 : 聚乳酸 - 聚羟基乙酸 ; 利福平 ; 药物载体 ; 微球 ; 缓释 ; 骨缺损 doi:1.3969/j.issn 叶向阳, 孙湘, 贾会文, 汤立新, 赵玉果, 甄平. 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性 [J]. 中国组织工程研究与临床康复,211,15(51): [ 引言目前临床上治疗骨关节结核的方法是, 术中对病灶清除后, 用自体骨移植填充残留的骨缺损, 并同时在病灶处一次性直接留置或喷洒常用剂型的抗结核药物其缺点是因自体骨有限, 缺损空腔填充不完全, 往往少量的自体骨短期内就被吸收, 常规剂型抗结核药物很快被机体代谢, 局部抗结核作用极有限因此, 骨结核病灶术后复发率高为解决这个问题, 作者利用利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸共聚物 (poly lactic acid-glycolic acid copolymer,plga) 缓释微球复合磷酸钙骨水泥 (calcium phosphate cement,cpc) 用于修复结核性骨缺损, 以期达到骨修复替代和局部药物缓释的双重目的利福平对结核杆菌有高度敏感性, 可透入细胞内, 对细胞内外的结核杆菌有强大的抑制和杀灭作用目前 PLGA 广泛应用于载药系统的研制, PLGA 已得到美国 FDA 批准, 可用于制作药物微球制剂的材料 [1] 虽然国内外有很多制备利福平/ PLGA 微球的报道, 但这些微球粒径多在 1 μm 左右, 不适合与 CPC 复合制备成具有良好降解性的抗结核修复材料因为研究表明, 只有 CPC 968 P.O. Box 12, Shenyang 114 cn.zglckf.com

2 叶向阳, 等. 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性中的孔隙大于 5 μm 时, 才有利于骨细胞长入材料内部实验就大粒径利福平 /PLGA 微球的制备及其特性进行前期研究, 旨在为下一步的实验奠定基础 1 材料和方法设计 : 材料学与药物体外缓释实验时间及地点 : 实验于 29-11/21-2 在解放军兰州军区兰州总医院骨科研究所完成材料 : 主要试剂及仪器 : 试剂及仪器来源利福平原药 Sigma 公司聚乳酸 - 聚羟基乙酸共聚物山东岱罡生物技术公司 (5 5, 重均分子量 2 ) 聚乙烯醇 (PVA) 北京有机化学厂透析袋 ( 截留相对分子质量 7 ~12 ) 南京都莱生物技术有限公司利福平标准品中国食品药品检定所 78HW-1 型磁力搅拌器杭州仪表电机厂离心机北京仪器厂 LGJ 冷冻干燥机解放军军事医学科学院实验仪器厂气浴恒温振荡器江苏太仓医疗器械厂高效液相色谱仪日本岛津扫描电镜 (JSM-56) 日本 Jeol 公司 IX7 倒置显微镜日本 Olympus 公司微量电子天平德国赛多利斯 (Sartorious1721 型 ) 实验方法 : 利福平 /PLGA 微球的制备 : 采用复乳 - 溶剂挥发法 [2-5], 即准确称取利福平原药和 PLGA 各 2 mg 共溶于 2 ml 二氯甲烷中, 充分溶解混匀形成油相将其置于 4 冰块上高速磁力搅拌, 待混匀时将 2% 的聚乙烯醇 (PVA) 缓慢加入其中待搅拌均匀后, 速度下调为 3 r/min 持续搅拌过夜挥发二氯甲烷, 固化微球将乳液离心分离, 离心得到的固体以 PBS 洗涤再次离心分离, 反复洗涤离心 3 次, 见微球混悬于 PBS 中最后将离心得到的固体置于玻璃皿中, 放入低温冷冻真空干燥机中干燥 24 h 直到固体粉末质量恒定不变 -2 保存备用利福平 /PLGA 微球外观形态观察 : 将少量微球悬浮于适量蒸馏水, 置于载玻片, 在光学显微镜下观察形态另将适量微球喷金后粘于导电胶带上, 电镜下观察其形态光学显微镜下观察 2 粒微球, 采用 Leica QWin 分析软件测量微球的平均粒径及跨距载药量和包封率的测定 : 采用高效液相色谱仪法测定载药量和包封率 [6] 1 利福平的高效条件 ( 中国药典 25 版 ) :CLC-ODS 色谱柱 (4.6 mm 25. mm), 预柱 YWG-ODS(4.6mm 1 mm); 流动相为甲醇乙睛.75 mol/l 磷酸二氢钾溶液 1. mol/l 枸椽酸溶液 = ; 流速 1. ml/min ; 检测波长 254 nm; 柱温 25 ; 理论板数按 Col 色谱峰计算应不低于 1 5, 归一化法测定含量大于 98% 2 标准曲线的绘制 : 利用利福平标准品配置成 5 个浓度梯度溶液, 依据利福平的高效条件测定, 记录峰面积以浓度为横坐标, 峰面积为纵坐标作图, 并得出曲线回归方程载药量 = 微球中所含药物质量 / 微球的总质量 1% 包封率 =( 系统中的总药量 - 液体介质中未包封的药量 )/ 系统中的总药量 1% 载药量的测定 : 精密称取含药微球 1 mg, 3 ml CH 2 C 12 溶解后, 甲醇定容取 1 μl 溶液注入色谱仪, 以外标一点法计算含量, 代入计算公式即得包封率的测定 : 按照以上工艺制备微球, 记录加入总药量, 微球制备完成后离心取上清液 1 μl 注入色谱仪, 以外标一点法计算含量, 代入计算公式即得利福平 /PLGA 微球体外缓释试验 : 称取利福平 / PLGA 微球 23 mg, 置于透析袋 ( 截留相对分子质量 7 ~12 ) 中, 加入 1 ml ph 为 7.4 的 PBS, 使其悬浮于 PBS 中 ; 将透析袋封口后置入盛有 1 ml PBS 的试管中, 封口, 于 37 恒温气浴振荡器中振荡孵育 ; 并于 1,2,3,7, 14,21,28,35,42 d 分别从试管中取出 1 ml 液体 (-2 冻存待检 ), 同时加入 1 ml PBS 于试管内用高效液相色谱法检测上述样本中 RFP 含量并以时间为横坐标, 累积释放百分度为纵坐标绘图主要观察指标 : 微球形态, 粒径, 载药量与包封率, 体外释放情况统计学分析 : 由第三作者采用 Sigma Plot 软件完成统计处理, 实验数据以 x _ ±s 表示 2 结果 2.1 微球形态观察利福平 /PLGA 微球大体 1 南阳市中心医院骨一科, 河南省南阳市 473; 2 河南省淅川县人民医院输血科, 河南省淅川县 47445; 3 南阳市中心医院急救中心, 河南省南阳市 473; 4 解放军兰州军区兰州总医院全军骨科中心, 甘肃省兰州市 735 叶向阳, 男, 1978 年生, 河南省南阳市人, 汉族, 硕士, 主治医师, 主要从事骨结核治疗与骨组织工程修复材料的研究 yexyang28@ 通讯作者 : 甄平, 主任医师, 教授, 博士, 硕士生导师, 解放军兰州军区兰州总医院全军骨科中心, 甘肃省兰州市 735 zhenpingok@ 中图分类号 :R318 文献标识码 :B 文章编号 : (211) 收稿日期 : 修回日期 : ( /WL W) ISSN CN /R CODEN: ZLKHAH 969

3 叶向阳, 等. 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性外观呈橘红色细粉状, 颗粒分散均匀, 无粘连显微镜下微球呈橘黄色圆球状, 隐约可见包裹的深红色利福平颗粒, 微球大小比较均一, 见图 1a 电镜下观察微球的大小均匀, 轻度粘连, 分散性较好, 见图 1b 表 1 利福平 /PLGA 微球的体外释放情况 Table 1 in vitro release of rifampicin-loaded poly lactic-co-glycolic acid microspheres (x _ ±s, %) Drug released 1 8.1± ± ± ± ± ± ± ± ±1.23 a: Morphology of microspheres suspended in distilled water under light microscope ( 1) Figure 1 Observe the morphological characteristics of microspheres under light microscope and scanning electron microscope 图 1 光镜和扫描电镜下观察微球的形态特征 2.2 微球粒径测定光学显微镜下观察 2 粒微球, 采用 Leica QWin 分析软件计算平均粒径及跨距微球的球形度较好, 均匀圆整, 粒径范围较窄, 平均粒径为 (8±9.4) μm, 跨距载药量与包封率测定利福平 /PLGA 缓释微球的载药量与包封率分别为 (33.18±1.36)%, (54.79± 1.13)% 2.4 利福平 /PLGA 缓释微球的体外释放试验结果显示, 该微球的体外释药过程较平稳, 其释放曲线较光滑, 无明显的锯齿状改变, 见图 Cumulative release curve b: Observe the microspheres under scanning electron microscope (Scale=1 μm) Figure 2 Cumulative release curve of rifampicin-loaded poly 图 2 利福平 /PLGA 微球的体外释放趋势图突释期内微球释放度为 (14.66±.18)%, 前 3 d 累计释放度 (18.9±.45)%, 到 42 d 体外累积释放度达到 (92.17±1.23)%, 见表 1 以累积释放百分率为纵坐标, 以时间为横坐标拟合零级动力学直线及方程, 见图 y=2.38 1x , R= Figure 3 Cumulative release curve and zero-order dynamics equation of rifampicin-loaded poly 图 3 利福平 /PLGA 微球的体外释放模拟图及零级动力学方程式零级动力学方程 y=2.38 1x ,R= 以累积释放百分率的常用对数与 1 的差值为纵坐标, 以时间为横坐标拟合一级动力学模型图及方程式, 见图 4 1-lgy Y= t+.112, R= Y=1-lgy, y means the percentage of cumulative release Figure 4 Cumulative release curve and first-order dynamics equation of rifampicin-loaded poly 图 4 利福平 /PLGA 微球的体外释放模拟图及一级动力学方程式 961 P.O. Box 12, Shenyang 114 cn.zglckf.com

4 叶向阳, 等. 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性一级动力学方程式 :Y= t+.112,R= , 这里 Y=1-lgy,y 表示累积释放百分率值亦即 :lgy=.133 5t ,R= 以累积释放百分率为纵坐标, 以时间值的 1/2 次方为横坐标拟合 Higuichi 曲线及动力学方程, 见图 5 方程式 :Y=11.393X ,R=.991 1, 亦即 : Y= t1/ ,R= 以累积释放百分率为纵坐标, 以时间为横坐标拟合零级动力学方程, 一级动力学方程,Higuchi 方程, 相关系数 R 值分别为.99 33, ,.991 1, 以 Higuchi 方程最接近 1 故以 Higuchi 方程拟合较好本微球体外释放更符合 Higuchi 方程的释放规律 3 讨论 Higuchi: y=11.393x , R= y=11.393t1/ t1/2 Figure 5 Cumulative release curve and Higuichi equation of rifampicin-loaded poly lactic-co-glycolic microspheres in vitro 图 5 利福平 /PLGA 微球的体外释放 Higuichi 模拟图及方程式微球是溶解或分散于高分子材料中形成的微小球状或类球状实体, 一般可供注射, 口服, 呼吸道吸入, 皮下埋植或关节腔注射用, 粒径一般介于 1~5 μm 目前用于制备缓 ( 控 ) 释微球的可降解高分子材料中, 以聚乳酸及 PLGA 应用最广 [3] 制备微球的方法很多, 包括乳化溶剂挥发法 [7] 相分离法 [8-9] 乳化溶剂萃取法喷雾干燥法等 [1], 其中乳化溶剂挥发法最为常用目前, 以聚乳酸和 PLGA 为载体制备微球的方法多采用乳化法和相分离法乳化法适合水溶性和脂溶性药物的微球制备, 而相分离法适用于水溶性药物利福平属于脂溶性药物, 故宜采用乳化溶剂挥发法溶剂挥发法是从乳状液中去除分散相中挥发性溶剂以制备微球的方法, 也是目前制备含抗结核药物的聚乳酸类微球最常用的方法 [11-12] 工艺包括两个主要过程 : 两液相之间的萃取过程和气液相间的溶剂挥发过程根据聚合物材料溶液和水溶液形成乳状液的类型, 分为 O/W 法和 W/O/W 复乳法本实验采用改良的复乳溶剂挥发法 (W/O/W 复乳法 ) 制备微球, 可以进一步提高载药量和包封率微球的载药量和包封率是两个重要的指标微球中药物含量的提高不仅可以降低所需载体材料量, 而且可提高组织对药物的摄取量, 故载药量越高越好包封率是指被包封在微球制剂中的药物量和投入药物量之比, 包封率越高, 体系中游离药物就越少, 药物在制备过程中的利用率也就越好, 因此包封率也越高越好影响载药量和包封率的因素很多, 如乳化剂种类及用量单体浓度搅拌速度反应温度均是影响载药量和包封率的 [13] 重要因素根据费正奇等的研究,PLGA 浓度乳化剂 PVA 浓度油水相之体积比 (PLGA/PVA) 是主要的影响因 [14] 素 Blanco 等用复乳 - 干燥法制备的 PLGA 缓释微球, [15] 包封率达 95% 张万国等采用溶剂挥发法制备聚乳酸 / 利福平微球, 经析因设计分析, 确定最佳制备工艺条件为利福平与聚乳酸比例为 1 1, 以二氯甲烷作有机溶剂, 甘油为分散介质, 二氯甲烷与甘油体积比为 2 4, 分散时间和扩散时间 1 min 在此条件下制成的微球大小分布集中, 粒径在 1~15 μm 的占 74.26%, 包封率为 31.9% 作者采用 W/O/W 复乳法制备利福平 /PLGA 微球, 所得微球的载药量和包封率分别为 (33.18±1.36)% 和 [4-5] (54.79±1.13)%, 与林旭的研究结果很接近作者的载药量高于文献报道 Dutt [16] [17] 的 12%~14%, 与 Debra 等的 (3%) 微球相当微球的外观形态粒径大小及其分布, 不但反映了制备工艺的优劣, 还直接影响到药物缓释生物利用度和有机溶剂残留量故微球的粒径及其分布直接与其物理稳定性和应用安全性密切相关粒径的选择是根据给药途径及预期降解时间决定的通常静脉给药时, 微球需要通过毛细血管上皮细胞间隙进入靶向组织部位, 故需要较小的微球粒径, 最好为纳米级而局部用药途径的微球粒径通常为微米级研究表明粒径介于.2 5 ~ 1 μm 之间的微球较易被吞噬细胞所摄取容易扩散 [18] 若粒径过小则会造成微球扩散过快, 从而不利于在局部维持有效药物浓度一般用于静脉途径和呼吸道的微球粒径较小药物缓释时间短, 而用于关节腔注射皮下或口服的粒径微球较大药物缓释时间相对较长影响微球粒径的因素很多, 包括乳化剂种类及用量单体浓度搅拌速度反应温度等 [19] [2] Dutt 等制备的用于皮下注射的利福平 /PLGA 微球平均粒径 μm, 体外缓 [21] 释时间可达 7 周而 Pandey 等以 PLGA 为载体制备的用于呼吸道的利福平微球平均粒径 1.88 μm, 体外释放时间 [13] 约 6 d 费正奇等认为满足 PLGA 浓度 2%, 乳化剂 PVA 浓度 1%, 油水相体积比例 (PLGA/PVA) 为 1 1, 搅拌速度 3 r/min 时制备的微球粒径较大, 平均 (253± 64) μm 本实验中制备的微球预期要达到 3 个要求 :1 微球具有较高的载药量和包封率 2 具有较长的降解时间, 一般为 4~6 周 3 具有较大的粒径, 平均粒径至少 >5 μm, 但又不能太大 (>15 μm), 否则会引起利福平 /PLGA 微球 / CPC 复合材料抗压强度的大幅下降这种大粒径的微球 ISSN CN /R CODEN: ZLKHAH 9611

5 叶向阳, 等. 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸缓释微球的制备及特性 ( 平均直径 >5 μm) 和 CPC 以一定的比例混合后用于修复结核性骨缺损, 微球在 CPC 中降解后能在其内形成较高的大孔隙率虽然人的成骨细胞可以通过直径 3 μm 的孔, 但只有当互通孔径 >5 μm 时才有利于骨单元在大孔内形成, 利于骨细胞长入, 进一步加速 CPC 降解 [22-23], 从而达到骨修复替代和局部药物缓释的双重目的基于以上考虑, 作者设计的微球选择了较大微米级的粒径实验制备的利福平 /PLGA 微球外观为橘黄色, 细粉状, 光镜及扫描电镜显示微球表面均光滑圆整, 球体均匀度好, 无明显粘连现象, 平均粒径 (8.±9.4) μm, 跨距.61 [1, 3, 一般认为, 微球中药物的释放有 2 种机制 24] :1 扩散机制 : 药物由进入微球的溶液溶解后经微球的孔隙扩散到介质中, 微球表面药物的溶解及扩散可形成释药的突释效应 2 降解机制 : 聚合物降解成为体内的代谢产物, 使药物释放实验释药结果表明 : 利福平 /PLGA 微球中的利福平释放符合双相药物动力学释药规律, 即早期为快速释药相, 后期为缓释相, 这种释药特点可以使局部形成有效浓度并维持下去, 符合抗结核药物的局部浓度要求和时间要求实验表明, 采用复乳 - 溶剂挥发法能够制备具有较大粒径 (>5 μm) 的利福平 /PLGA 缓释微球该利福平 / PLGA 微球具有良好的缓释效果, 是一种较为理想的抗结核药物的载体材料和释放系统实验为利用利福平 / PLGA 微球复合 CPC 制备新型抗结核多孔人工骨修复材料的研究奠定了基础 4 参考文献 [1] Li X, Wei K, Luo Y, et al. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu. 29;13(47): 李像, 魏坤, 罗云, 等. 聚乳酸羟基乙酸 / 纳米羟基磷灰石 -5- 氟尿嘧啶复合微球的制备及体外释放 [J]. 中国组织工程研究与临床康复,29, 13(47): [2] Yao Q, Zhang LH, Huang P, et al. 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Biomaterials. 26;27(23): 来自本文课题的更多信息 -- 作者贡献 : 第一作者进行实验设计, 实验实施为第一三作者, 实验评估为第五作者, 资料收集为第四作者, 第一作者成文, 通讯作者审校, 第一作者对文章负责利益冲突 : 课题未涉及任何厂家及相关雇主或其他经济组织直接或间接的经济或利益的赞助本文创新性 : 通过检索中国期刊全文数据库 (CNKI, /21-12) 中文科技期刊全文数据库(VIP, /21-12) 万方数据库(1979-1/21-12) PubMed(1966-1/21-12) Embase 数据库 (1974-1/ 21-12); 检索词 : 利福平, 聚乳酸 - 聚羟基乙酸, 聚乳酸 - 聚乙醇酸, 微球,rifampicin,poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA,microsphere; 可知, 国内外关于制备利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸微球报道较多, 制备的微球粒径多在 1 μm 左右, 用于制备呼吸道吸入的气雾剂和腔内注射剂实验利用复乳 - 溶剂挥发法, 通过调整制备工艺参数制备出了适合与磷酸钙骨水泥复合的大粒径 (>5 μm) 利福平 / 聚乳酸 - 聚羟基乙酸微球微球降解后在磷酸钙骨水泥中形成大孔径的微孔, 利于骨细胞长入孔隙, 进一步促进骨水泥降解 P.O. Box 12, Shenyang 114 cn.zglckf.com

% TFA 1. 0 ml rahp-pl- min nm GA AUFS 20 μl LC 20A Eclipse XDB-C mm 250 mm Ag- % = / + ilent ALPHA 2-4 PL

% TFA 1. 0 ml rahp-pl- min nm GA AUFS 20 μl LC 20A Eclipse XDB-C mm 250 mm Ag- % = / + ilent ALPHA 2-4 PL - * 孙海燕, 方科伟, 刘冬 518055 制备重组降血压肽 ( rahp, 氨基酸序列为 VLPVPR) 缓释微球以不同单体比和相对分子质量的乳酸 - 羟基乙酸共聚物 ( PLGA) 为缓释材料, 利用正交设计优化微球制备的最佳工艺条件, 并考察微球的体外释药特性乳酸 - 羟基乙酸共聚物相对分子质量越小, 微球粒径越小 ( P < 0. 05), 孔隙率越高 ; 乳酸 - 羟基乙酸共聚物中乳酸比例越大,