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- 伤 咸
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1 南 京 农 业 大 学 学 报 2015ꎬ38(6): http: / / nauxb.njau.edu.cn Journal of Nanjing Agricultural University doi: / j.issn 万 永 杰 ꎬ 肖 慎 华 ꎬ 邓 明 田 ꎬ 等. 胚 龄 季 节 和 胚 胎 数 量 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 [J]. 南 京 农 业 大 学 学 报 ꎬ2015ꎬ38(6): 胚 龄 季 节 和 胚 胎 数 量 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 万 永 杰 ꎬ 肖 慎 华 ꎬ 邓 明 田 ꎬ 张 国 敏 ꎬ 贾 若 欣 ꎬ 张 艳 丽 ꎬ 王 锋 ꎬ 黄 明 睿 ( 南 京 农 业 大 学 江 苏 省 家 畜 胚 胎 工 程 实 验 室 ꎬ 江 苏 南 京 ) 摘 要 :[ 目 的 ] 研 究 不 同 的 胚 龄 移 植 季 节 以 及 胚 胎 数 量 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 ( hlf) 体 细 胞 克 隆 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 ꎮ [ 方 法 ] 用 奶 山 羊 的 转 hlf 基 因 成 纤 维 细 胞 为 供 体 细 胞 生 产 克 隆 胚 胎 ꎬ 并 以 不 同 的 胚 龄 胚 胎 数 量 ꎬ 在 不 同 的 季 节 移 植 给 同 期 的 受 体 山 羊 ꎮ [ 结 果 ] 移 植 1 细 胞 期 和 2~ 8 细 胞 期 胚 胎 受 体 羊 的 妊 娠 率 ( 分 别 是 17.95% 和 28.57%) 产 羔 率 ( 分 别 是 12.82% 和 14.29%) 显 著 高 于 移 植 桑 椹 胚 囊 胚 的 受 体 羊 (3.70% 和 0ꎬP<0.05)ꎻ 转 hlf 基 因 克 隆 胚 胎 在 秋 季 移 植 效 率 最 高 ꎬ 虽 然 秋 季 和 春 季 受 体 羊 妊 娠 率 ( 分 别 是 19.57% 和 18.18%) 与 冬 季 (10.34%) 差 异 不 显 著 ꎬ 但 秋 季 受 体 羊 产 羔 率 (13.04%) 显 著 高 于 冬 季 (1.72%ꎬP < 0. 05)ꎻ 虽 然 移 植 10 ~ 20 枚 克 隆 胚 胎 的 受 体 羊 妊 娠 率 ( %) 显 著 高 于 移 植 5 ~ 9 枚 胚 胎 的 受 体 羊 (7.89%)ꎬ 但 是 由 于 其 流 产 率 高 ꎬ 两 者 产 羔 率 差 异 并 不 显 著 (7.89% vs 6.36%ꎬP>0.05)ꎮ [ 结 论 ] 转 基 因 克 隆 山 羊 胚 胎 移 植 试 验 的 最 适 季 节 是 秋 季 ꎬ 最 好 移 植 激 活 后 体 外 培 养 2 d 内 的 胚 胎 ꎮ 关 键 词 : 转 基 因 克 隆 ꎻ 胚 胎 移 植 ꎻ 妊 娠 率 ꎻ 产 羔 率 ꎻ 奶 山 羊 中 图 分 类 号 :Q813.7ꎻQ492.2 文 献 标 志 码 :A 文 章 编 号 : (2015) Influence of the ageꎬseasonality and number of transferred embryos on the efficiency of hlf transgenic cloned goat production WAN YongjieꎬXIAO ShenhuaꎬDENG MingtianꎬZHANG GuominꎬJIA Ruoxinꎬ ZHANG YanliꎬWANG FengꎬHUANG Mingrui ( Jiangsu Livestock Embryo Engineering LaboratoryꎬNanjing Agricultural UniversityꎬNanjing ꎬChina) Abstract:[Objectives]Embryo transfer is one of the important factors that influence the efficiency of transgenic cloned goat production and three factors affect the embryo transfer:the embryo ageꎬseason and number of embryo transferred. The aim of the paper is to investigate the effect of the embryo ageꎬseason and number of embryo transferred on the efficiency of human lactoferrin(hlf)transgenic cloned goat production. [Methods]Cloned embryos using dairy goat hlf transgenic fibroblast cells as donor cells at different stage and number were transferred to the uterus of recipient goat at different seasons. The current study was conducted from October to April next yearꎬlasting for seven months. Firstꎬestrus synchronization and superovulation were carried out. Secondlyꎬsomatic cell nuclear transfer (SCNT)was performed according to the standard protocol using dairy goat hlf transgenic fibroblast cells as donor cells. Lastlyꎬthe constructed embryos were transferred to the uterus of recipient goat. [Results]Our results showed that both the pregnancy rate and the kidding rate of the recipient with one cell(17.95%ꎬ12.82%ꎬrespectively) and 2-8 cell embryo(28.57%ꎬ14.29%ꎬrespectively) trans ferred were higher than those of the recipient with morale or blastocyst transferred(3.70%ꎬ0ꎬrespectivelyꎬp<0.05). Embryo transfer was conducted during springꎬautumn and winterꎬand we found that the efficiency was higher during autumn and the pregnancy rate of the recipient was not affected by the seasonꎬwhile the kidding rate of the recipient was higher in autumn than that in winter(13.04% vs 1.72%ꎬP<0.05). Moreoverꎬthe pregnancy rate of the recipient with cloned embryos transferred was significantly greater than that with 5-9 cloned embryos transferred( 18.18% vs 7.89%ꎬP< 0.05)ꎬhoweverꎬthe abortion was also higher in the former group. Thusꎬthere was no significant difference in the kidding rate between these two groups. To test the development ability of constructed embryosꎬthe embryos were coated by agarose and transferred to uterus for a certain time and rushed out. Taken all these togetherꎬour experiment indicated that intermediate receptor method can be used to determine the embryo quality and the number of embryos trans 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 自 然 科 学 基 金 项 目 ( )ꎻ 中 央 高 校 基 本 科 研 业 务 费 专 项 资 金 项 目 ( KJQN201401)ꎻ 国 家 转 基 因 新 品 种 培 育 重 大 专 项 (2014ZX ꎻ2014ZX ) 作 者 简 介 : 万 永 杰 ꎬ 讲 师 ꎬ 主 要 从 事 动 物 胚 胎 工 程 研 究 ꎮ 通 信 作 者 : 黄 明 睿 ꎬ 副 编 审 ꎬ 主 要 从 事 肉 羊 繁 育 研 究 及 畜 牧 兽 医 技 术 推 广 ꎬE mail: hmr@ njau.edu.cnꎮ
2 第 6 期 万 永 杰 ꎬ 等 : 胚 龄 季 节 和 胚 胎 数 量 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 981 ferred(7.89% vs 6.36%ꎬP>0.05). [ Conclusions] Our current work revealed that the most suitable season for hlf transgenic cloned goat production is autumn and the embryos transfer should be conducted within 2 days after the activation. This work might lay a foun dation for the research of SCNT efficiency. Keywords:transgenic cloneꎻembryo transferꎻpregnancy rateꎻkidding rateꎻdairy goat 自 世 界 首 例 体 细 胞 克 隆 动 物 - 克 隆 羊 多 莉 诞 生 以 来 [1] ꎬ 体 细 胞 克 隆 技 术 就 成 为 了 生 产 转 基 因 动 物 的 理 想 方 法 ꎬ 并 已 经 在 很 多 种 动 物 身 上 获 得 成 功 [2-4] ꎮ 但 是 该 技 术 还 存 在 较 多 问 题 ꎬ 生 产 效 率 平 均 不 到 5% [5] ꎮ 为 此 ꎬ 许 多 科 学 家 为 提 高 转 基 因 克 隆 动 物 的 生 产 效 率 ꎬ 围 绕 转 基 因 体 细 胞 克 隆 各 个 技 术 环 节 ꎬ 如 供 [6] 体 细 胞 处 理 体 细 胞 核 移 植 技 术 改 进 融 合 与 激 活 条 件 筛 选 以 及 胚 胎 培 养 体 系 的 优 化 等 进 行 了 大 量 的 研 究 工 作 ꎮ 在 影 响 转 基 因 克 隆 山 羊 生 产 效 率 的 诸 多 因 素 中 ꎬ 胚 胎 移 植 是 重 要 的 影 响 因 素 之 一 ꎮ 虽 然 第 一 只 转 基 因 克 隆 山 羊 诞 生 已 经 16 年 了 [7] ꎬ 但 是 系 统 分 析 胚 胎 移 植 技 术 环 节 对 转 基 因 克 隆 山 羊 生 产 效 率 影 响 的 研 究 还 很 少 ꎮ 因 此 ꎬ 本 试 验 拟 从 不 同 胚 龄 季 节 及 移 植 胚 胎 数 量 来 探 讨 胚 胎 移 植 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 (hlf) 体 细 胞 克 隆 山 羊 生 产 的 影 响 ꎬ 为 进 一 步 提 高 转 基 因 克 隆 山 羊 胚 胎 移 植 妊 娠 率 及 转 基 因 克 隆 山 羊 生 产 效 率 提 供 参 考 依 据 ꎮ 1 材 料 与 方 法 1.1 主 要 试 剂 除 另 有 说 明 外 ꎬ 本 试 验 试 剂 均 为 Sigma 产 品 ꎬ 液 体 培 养 基 均 为 Gibco 产 品 ꎮ 1.2 转 hlf 基 因 成 纤 维 细 胞 的 培 养 [8] 用 脂 质 体 转 染 法 将 本 实 验 室 构 建 的 hlf 基 因 乳 腺 表 达 载 体 转 染 到 奶 山 羊 耳 成 纤 维 细 胞 中 ꎬ 筛 选 阳 性 克 隆 ꎬ 经 鉴 定 后 扩 大 培 养 ꎬ 冷 冻 保 存 ꎮ 体 细 胞 核 移 植 操 作 前 ꎬ 从 液 氮 中 取 出 转 hlf 基 因 的 奶 山 羊 成 纤 维 细 胞 ꎬ 迅 速 投 入 37 水 浴 中 解 冻 ꎬ 然 后 加 入 含 体 积 分 数 为 10% 胎 牛 血 清 ( FBS) 的 DMEM 培 养 液 ꎬ 置 于 37 5% CO 2 饱 和 湿 度 的 二 氧 化 碳 培 养 箱 中 培 养 ꎮ 1.3 卵 母 细 胞 获 取 及 体 外 成 熟 培 养 从 屠 宰 场 采 集 山 羊 的 卵 巢 ꎬ 在 3 ~ 4 h 内 带 回 实 验 室 ꎮ 将 卵 巢 用 生 理 盐 水 清 洗 后 ꎬ 剔 除 结 缔 组 织 和 附 着 的 输 卵 管 ꎬ 然 后 将 卵 巢 转 移 至 玻 璃 培 养 皿 中 ꎬ 用 切 剖 法 切 开 卵 巢 上 2 ~ 6 mm 的 卵 泡 ꎬ 在 体 视 显 微 镜 下 分 拣 出 适 宜 成 熟 培 养 的 卵 丘 卵 母 细 胞 复 合 体 (COCs)ꎬ 在 % CO 2 饱 和 湿 度 下 培 养 20 ~ 23 hꎮ 1.4 卵 母 细 胞 去 核 卵 母 细 胞 体 外 成 熟 培 养 后 ꎬ 用 体 积 分 数 为 0.3% 的 透 明 质 酸 酶 吹 打 消 化 去 除 卵 丘 细 胞 ꎬ 挑 选 排 出 第 一 极 体 的 卵 母 细 胞 备 用 ꎮ 分 批 ( 每 批 15 ~ 20 个 ) 将 卵 母 细 胞 置 于 含 7.5 μg ml -1 细 胞 松 弛 素 B 10 μg ml -1 Hoechst 和 体 积 分 数 为 10% FBS 的 TCM 199 中 处 理 10 minꎬ 然 后 将 它 们 放 在 荧 光 显 微 镜 下 ꎬ 用 固 定 吸 管 吸 住 1 个 卵 母 细 胞 ꎬ 将 其 第 一 极 体 调 至 1 ~ 2 点 钟 位 置 ꎬ 迅 速 在 紫 外 线 下 观 察 细 胞 核 的 位 置 ꎬ 吸 出 第 一 极 体 细 胞 核 及 少 量 胞 质 ꎬ 随 后 在 紫 外 线 下 检 查 是 否 完 成 去 核 ꎬ 将 去 核 完 全 的 卵 母 细 胞 用 于 核 移 植 ꎮ 1.5 核 移 植 与 电 融 合 在 倒 置 显 微 镜 下 用 注 核 吸 管 吸 取 准 备 好 的 供 体 细 胞 ꎬ 将 其 注 入 到 去 核 卵 母 细 胞 的 透 明 带 下 ꎬ 用 注 核 吸 管 在 透 明 带 外 轻 轻 挤 压 ꎬ 使 体 细 胞 贴 紧 卵 黄 膜 ꎮ 注 核 后 的 重 构 胚 在 融 合 液 ( mol L -1 山 梨 醇 0.1 mmol L -1 醋 酸 钙 0.5 mmol L -1 醋 酸 镁 0.5 mmol L -1 Hepes 和 1 mg ml -1 BSA) 中 清 洗 3 次 ꎬ 然 后 移 入 加 有 融 合 液 的 融 合 电 极 中 ꎬ 拨 动 重 构 卵 使 体 细 胞 与 卵 黄 膜 的 接 触 面 与 电 极 平 行 ꎬ 给 予 2 个 融 合 脉 冲 (1.2 kv cm -1 间 隔 1 s 脉 冲 宽 度 20 μs) 进 行 电 融 合 ꎮ 电 融 合 后 的 重 构 胚 放 入 含 FBS 的 TCM 199 中 ꎬ38.5 5% CO 2 饱 和 湿 度 下 孵 育 ꎬ0.5 h 后 检 查 融 合 结 果 ꎬ 没 有 融 合 的 重 构 卵 再 融 合 1 次 ꎮ 1.6 重 构 胚 激 活 和 体 外 培 养 重 构 胚 在 含 5 μmol L -1 离 子 霉 素 的 TCM 199 中 处 理 5 minꎬ 然 后 在 含 2 mmol L -1 6 DMAP 的 TCM 199 培 养 液 中 培 养 4 hꎮ 激 活 后 的 胚 胎 在 胚 胎 培 养 液 中 洗 3 次 ꎬ 然 后 转 移 到 胚 胎 培 养 液 中 ꎬ 在 % CO 2 饱 和 湿 度 的 二 氧 化 碳 培 养 箱 中 培 养 ꎬ 每 48 h 半 量 换 液 1 次 ꎮ 1.7 胚 胎 移 植 及 移 植 后 受 体 羊 的 管 理 选 择 自 然 发 情 的 本 地 山 羊 作 为 受 体 羊 ꎬ 分 别 通 过 手 术 法 将 1 细 胞 期 ( 激 活 后 10 ~ 12 h) 和 2 ~ 8 细 胞 期
3 ９８２ 南 京 农 业 大 学 学 报 第 ３８ 卷 ( 激活后 ４０ ~ ４４ ｈ) 的克隆胚胎植入到同期的受体山羊输卵管内ꎬ而将桑椹胚和囊胚( 激活后 ７.５ ｄ) 通过手 术ꎬ用腹腔内窥镜移植到同期受体山羊子宫角ꎮ 胚胎移植后的受体羊集中饲养ꎬ每天早上试情 １ 次ꎬ详细 记录羊只发情 流产情况ꎮ 流产或返情的受体羊拉出受体羊群ꎬ流产或胚胎移植后连续 ２ 个情期未发情的 受体羊认定为妊娠ꎮ １.８ 统计分析 试验所得数据用卡方( χ ２ ) 分析ꎬ确定差异的显著性ꎮ ２ 结果与分析 ２.１ 转 ｈｌｆ 基因克隆胚胎移植情况 本次试验将转 ｈｌｆ 基因克隆胚胎( 图 １) 通过手术方法移植到 １７５ 只受体羊输卵管或子宫角内ꎬ得到 怀孕受体羊 ２４ 只ꎬ足月生产的受体羊为 １０ 只ꎬ共生出转 ｈｌｆ 基因克隆奶山羊 １０ 只( 图 ２) ꎮ 图 １ 不同发育阶段的转基因克隆胚胎 Ｆｉｇ １ Ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｃｌｏｎｅｄ ｅｍｂｒｙｏｓ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｔａｇｅ Ａ:激活后 １０ ｈ 的 １ 细胞期胚胎 １ ｃｅｌｌ ｓｔａｇｅ ｅｍｂｒｙｏ ａｔ １０ ｈ ｏｆ ｐｏｓｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎꎻｂ:激活后 ４０ ｈ 的 ２ ~ ８ 细 胞期胚胎 ２ ８ ｃｅｌｌ ｓｔａｇｅ ｅｍｂｒｙｏ ａｔ ４０ ｈ ｏｆ ｐｏｓｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎꎻｃ:激活后 ７.５ ｄ 的桑椹胚 Ｍｏｒｕｌａ ａｔ ７.５ ｄ ｏｆ ｐｏｓｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎꎻｄ:激活后 ７.５ ｄ 的囊胚 Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔ ａｔ ７.５ ｄ ｏｆ ｐｏｓｔ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ 图 ２ 试验得到的转人乳铁蛋白( ｈｌｆ) 基因克隆奶山羊 Ｆｉｇ ２ Ｈｕｍａｎ ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎ ｇｅｎｅ( ｈｌｆ) ｔａｎｓｇｅｎｉｃ ｃｌｏｎｅｄ ｄａｉｒｙ ｇｏａｔｓ
4 第 6 期 万 永 杰 ꎬ 等 : 胚 龄 季 节 和 胚 胎 数 量 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 移 植 不 同 胚 龄 的 胚 胎 对 转 基 因 克 隆 山 羊 生 产 的 影 响 本 试 验 在 山 羊 繁 殖 季 节 10 至 11 月 份 进 行 ꎬ 分 别 将 1 细 胞 和 2 ~ 8 细 胞 期 的 克 隆 胚 胎 移 植 到 同 期 的 受 体 山 羊 输 卵 管 内 ꎬ 而 将 桑 堪 胚 和 囊 胚 通 过 腹 腔 内 窥 镜 方 法 移 植 到 受 体 山 羊 子 宫 角 ꎮ 比 较 移 植 不 同 胚 龄 的 胚 胎 对 转 hlf 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 的 影 响 ꎬ 结 果 ( 表 1) 表 明 : 移 植 1 细 胞 和 2 ~ 8 细 胞 期 克 隆 胚 胎 的 受 体 羊 妊 娠 率 ( 分 别 是 17.95% 和 28.57%) 产 羔 率 ( 分 别 是 12.82% 和 14.29%) 要 显 著 高 于 移 植 桑 椹 胚 囊 胚 阶 段 胚 胎 的 受 体 羊 (3.70% 和 0ꎬP<0.05)ꎬ 而 移 植 1 细 胞 期 和 2 ~ 8 细 胞 期 克 隆 胚 胎 的 受 体 羊 妊 娠 率 和 产 羔 率 差 异 不 显 著 ꎮ Table 1 胚 龄 Age of embryo 表 1 不 同 胚 龄 的 胚 胎 移 植 对 转 hlf 基 因 克 隆 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 Influence of embryo age on the efficiency of hlf tansgenic cloned goat production 受 体 羊 / 只 No of recipients 妊 娠 率 / % Pregnancy rate 怀 孕 至 足 月 羊 / 只 No of term pregnancies 产 羔 率 / % Kidding rate 1 细 胞 期 1 cell stage (7) a (5) a 2 ~ 8 细 胞 期 2-8 cell stage (2) a (1) a 桑 椹 胚 囊 胚 期 Morulaꎬblastocyst stage (1) b 0 0(0) b 注 : 同 一 列 不 同 上 标 (a 和 b) 表 示 差 异 显 著 (P<0.05)ꎻ 括 号 中 数 字 分 别 为 妊 娠 和 产 羔 山 羊 只 数 ꎮ Values in the same column with different superscripts( a and b) are significantly different( P<0.05). The same as follows. 2.3 不 同 季 节 对 转 基 因 克 隆 山 羊 生 产 的 影 响 本 试 验 在 10 月 至 次 年 3 月 份 ꎬ 将 1 ~ 8 细 胞 期 克 隆 胚 胎 移 植 到 同 期 受 体 山 羊 输 卵 管 内 ꎬ 胚 胎 移 植 结 果 ( 表 2) 显 示 : 虽 然 秋 季 和 春 季 移 植 胚 胎 的 受 体 羊 妊 娠 率 ( 分 别 是 19.57% 和 18.18%) 高 于 冬 季 (10.34%)ꎬ 但 差 异 并 不 显 著 ꎮ 秋 季 移 植 胚 胎 的 受 体 羊 产 羔 率 (13.04%) 显 著 高 于 冬 季 (1.72%ꎬP<0.05)ꎬ 但 与 春 季 的 受 体 羊 产 羔 率 (6.82%) 差 异 不 显 著 ꎻ 而 春 季 移 植 胚 胎 的 受 体 羊 产 羔 率 虽 然 高 于 冬 季 (6.82% vs 1.72%)ꎬ 但 两 者 差 异 也 不 显 著 ꎮ 季 节 Season Table 2 表 2 季 节 对 转 hlf 基 因 克 隆 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 Seasonal influence on the efficiency of hlf tansgenic cloned goat production 受 体 羊 No of recipients 妊 娠 率 / % Pregnancy rate 怀 孕 至 足 月 羊 / 只 No of term pregnancies 产 羔 率 / % Kidding rate 秋 Autumn (9) (6) a 冬 Winter (6) (1) b 春 Spring (8) (3) ab 2.4 移 植 胚 胎 数 量 对 转 基 因 核 移 植 奶 山 羊 生 产 的 影 响 为 了 探 讨 转 基 因 克 隆 胚 胎 的 移 植 数 量 对 克 隆 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 ꎬ 本 试 验 将 1 ~ 8 细 胞 期 克 隆 胚 胎 移 植 到 同 期 受 体 山 羊 输 卵 管 内 ꎬ 根 据 移 植 胚 胎 的 数 量 分 为 两 组 :5 ~ 9 枚 胚 胎 和 10 ~ 20 枚 胚 胎 ꎮ 由 表 3 可 以 发 现 :10 ~ 20 枚 胚 胎 组 的 妊 娠 率 显 著 高 于 5 ~ 9 枚 胚 胎 组 (18.18% vs 7.89%ꎬP<0.05)ꎬ 而 两 组 的 产 羔 率 则 没 有 显 著 差 异 (7.89% vs 6.36%)ꎮ Table 3 胚 胎 移 植 数 No of embryos transferred 3 讨 论 表 3 克 隆 胚 胎 移 植 数 对 转 hlf 基 因 克 隆 受 体 山 羊 生 产 的 影 响 Effect of the embryo number on the efficiency of hlf tansgenic cloned goat production 受 体 羊 / 只 No of recipients 妊 娠 率 / % Pregnancy rate 怀 孕 至 足 月 羊 / 只 No of term pregnancies 产 羔 率 / % Kidding rate 5 ~ (3) b (3) 10 ~ (20) a (7) 3.1 移 植 不 同 胚 龄 的 克 隆 胚 胎 对 转 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 的 影 响 胚 胎 质 量 是 影 响 胚 胎 移 植 成 功 率 的 主 要 因 素 ꎬ 胚 胎 的 发 育 阶 段 也 会 影 响 胚 胎 的 受 胎 率 ꎮ 在 山 羊 常 规 的 胚 胎 移 植 生 产 研 究 中 ꎬ 通 常 将 体 内 和 体 外 培 养 的 卵 裂 期 或 桑 椹 胚 囊 胚 期 胚 胎 移 植 到 受 体 羊 的 输 卵 管 或 子 宫 角 ꎮ 而 在 山 羊 的 体 细 胞 克 隆 研 究 中 ꎬ 大 多 数 是 通 过 手 术 法 将 激 活 后 第 2 天 ( 卵 裂 期 ) [9-12] 甚 至 第 1 天 (1 细 胞 期 ) [13] 的 胚 胎 移 植 到 受 体 山 羊 的 输 卵 管 中 ꎬ 也 有 个 别 报 道 是 将 克 隆 囊 胚 移 植 到 受 体 羊 子 宫 角 [14-15] ꎮ 本 研 究 分 别 将 体 外 培 养 至 1 细 胞 期 2 ~ 8 细 胞 期 和 桑 椹 胚 囊 胚 期 的 转 hlf 基 因 克 隆 胚 胎 移 植 到 同 期 受 体 羊 的 输 卵 管 或 子 宫 角 内 ꎬ 以 研 究 不 同 胚 龄 对 转 基 因 克 隆 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 ꎮ 其 中 ꎬ 移 植 1 细 胞 期
5 984 南 京 农 业 大 学 学 报 第 38 卷 和 2 ~ 8 细 胞 期 克 隆 胚 的 受 体 羊 产 羔 率 分 别 达 到 12.82% 和 14.29%ꎬ 得 到 6 只 转 hlf 基 因 克 隆 奶 山 羊 ꎻ 而 移 植 桑 椹 胚 囊 胚 的 37 只 受 体 羊 仅 有 1 只 妊 娠 ꎬ 且 并 没 有 得 到 活 的 后 代 ꎮ 原 因 可 能 是 由 于 山 羊 克 隆 胚 胎 对 体 外 培 养 环 境 更 敏 感 ꎬ 随 着 体 外 培 养 时 间 的 延 长 ꎬ 克 隆 胚 胎 质 量 下 降 ꎬ 影 响 了 胚 胎 移 植 的 受 胎 率 ꎮ 由 于 体 内 外 胚 胎 发 育 环 境 的 差 异 ꎬ 体 外 培 养 的 胚 胎 质 量 尚 不 及 体 内 胚 胎 ꎮ 所 以 ꎬ 为 了 提 高 体 外 生 产 胚 胎 质 量 ꎬ 在 早 期 的 胚 胎 移 植 研 究 中 ꎬ 会 采 用 中 间 受 体 培 养 法 [16] ꎮ 它 是 将 体 外 生 产 的 胚 胎 移 入 中 间 受 体 的 输 卵 管 内 ꎬ 经 过 几 天 的 培 养 后 再 回 收 囊 胚 进 行 胚 胎 移 植 ꎮ 而 早 前 体 细 胞 克 隆 研 究 中 ꎬ 移 植 山 羊 克 隆 囊 胚 获 得 活 的 后 代 就 是 采 用 这 种 方 法 [14-15] ꎮ 但 是 中 间 受 体 的 方 法 培 养 克 隆 囊 胚 技 术 太 复 杂 ꎬ 成 本 较 高 ꎬ 不 适 合 用 于 转 基 因 克 隆 动 物 的 大 规 模 生 产 ꎮ 本 研 究 的 结 果 可 以 认 为 ꎬ 克 隆 胚 胎 经 过 1 ~ 2 d 的 短 时 间 体 外 培 养 ꎬ 移 植 到 受 体 羊 输 卵 管 后 ꎬ 跟 中 间 受 体 法 相 当 ꎬ 胚 胎 质 量 好 ꎬ 能 得 到 较 高 的 胚 胎 移 植 受 胎 率 ꎬ 比 较 适 合 用 于 克 隆 山 羊 研 究 和 生 产 ꎮ 3.2 季 节 对 转 基 因 核 移 植 奶 山 羊 生 产 的 影 响 动 物 繁 殖 是 一 个 复 杂 和 消 耗 能 量 的 活 动 ꎬ 一 些 内 部 和 外 部 的 条 件 ( 能 量 负 平 衡 ꎬ 应 激 ꎬ 恶 劣 的 季 节 ) 都 会 影 响 动 物 繁 殖 的 成 功 ꎬ 使 繁 殖 活 动 受 到 抑 制 [17] ꎮ 不 同 季 节 气 候 条 件 的 不 同 ꎬ 对 克 隆 胚 胎 的 质 量 和 受 体 羊 的 妊 娠 也 会 造 成 影 响 ꎮ 本 研 究 结 果 显 示 ꎬ 秋 季 对 于 转 基 因 克 隆 胚 胎 的 移 植 来 说 是 最 好 的 季 节 ꎮ 与 秋 季 相 比 ꎬ 虽 然 春 季 妊 娠 率 跟 秋 季 相 近 ꎬ 但 是 春 季 有 更 多 的 怀 孕 受 体 羊 流 产 ꎮ 在 许 多 物 种 中 ꎬ 繁 殖 活 动 被 限 制 在 一 年 的 某 个 时 期 ꎬ 使 后 代 出 生 在 春 季 或 夏 季 ꎬ 确 保 能 在 最 佳 的 环 境 条 件 下 ꎬ 得 到 更 容 易 存 活 的 生 产 条 件 [18] ꎮ 山 羊 属 短 日 照 动 物 ꎬ 虽 然 一 年 四 季 均 可 发 情 ꎬ 但 在 某 些 季 节 的 繁 殖 率 较 低 ꎬ 最 佳 自 然 繁 殖 季 节 在 9 至 11 月 份 ꎮ 山 羊 这 种 季 节 性 繁 殖 活 动 是 受 内 源 性 生 理 节 律 调 节 的 ꎬ 对 内 源 性 生 理 节 律 影 响 最 大 的 是 光 周 期 [18] ꎬ 而 光 周 期 主 要 是 通 过 调 节 体 内 激 素 水 平 来 影 响 动 物 繁 殖 活 动 [19] ꎮ 由 于 春 季 日 照 时 间 是 逐 渐 增 加 ꎬ 所 以 本 试 验 认 为 ꎬ 春 季 移 植 转 基 因 克 隆 胚 胎 的 受 体 羊 流 产 率 高 可 能 是 由 于 其 对 光 周 期 造 成 的 体 内 激 素 水 平 的 变 化 更 为 敏 感 造 成 的 ꎮ 在 所 有 的 3 组 中 ꎬ 冬 季 的 妊 娠 率 较 低 ꎬ 且 由 于 多 数 怀 孕 受 体 流 产 ꎬ 产 羔 率 极 低 ꎬ 而 在 实 际 生 产 中 ꎬ 自 然 交 配 的 山 羊 则 没 有 发 现 这 种 差 异 ꎮ 因 此 我 们 可 以 假 定 ꎬ 转 基 因 克 隆 胚 胎 在 冬 季 繁 殖 效 率 低 的 原 因 是 由 于 体 外 操 作 程 序 造 成 的 ꎮ 因 为 ꎬ 与 山 羊 正 常 繁 殖 相 比 ꎬ 转 基 因 克 隆 胚 胎 在 胚 胎 移 植 手 术 时 会 直 接 暴 露 在 冷 的 [20] 气 温 下 ꎬ 而 这 可 能 影 响 克 隆 胚 胎 的 发 育 ꎮ 而 Bilton 等 研 究 中 也 发 现 ꎬ 胚 胎 暴 露 在 低 温 环 境 下 会 降 低 胚 胎 的 发 育 潜 能 及 其 产 羔 率 ꎮ 因 此 ꎬ 本 研 究 认 为 ꎬ 冬 季 转 基 因 克 隆 胚 胎 移 植 的 受 体 山 羊 受 胎 率 和 产 羔 率 低 是 由 胚 胎 的 生 产 和 移 植 过 程 中 暴 露 在 低 温 中 造 成 的 ꎮ 3.3 植 入 胚 胎 的 数 量 对 怀 孕 羊 流 产 的 影 响 在 本 试 验 中 ꎬ 受 体 羊 选 用 当 地 的 黄 淮 山 羊 ꎬ 该 品 种 的 产 羔 率 在 250% 左 右 ꎮ 在 山 羊 受 精 胚 胎 的 移 植 中 ꎬ 一 般 会 植 入 1 ~ 4 枚 胚 胎 [21] ꎮ 目 前 ꎬ 大 多 数 活 的 克 隆 山 羊 都 来 自 移 植 1 ~ 8 细 胞 胚 胎 到 输 卵 管 的 受 体 ꎬ 每 一 个 受 体 通 常 植 入 7 ~ 10 枚 胚 胎 ꎬ 妊 娠 率 为 17% ~ 50% [9-10ꎬ13-14] ꎬ 显 然 这 是 由 于 克 隆 胚 胎 发 育 能 力 较 差 ꎮ 为 了 提 高 克 隆 山 羊 的 生 产 效 率 ꎬ 一 些 研 究 者 提 高 了 植 入 的 胚 胎 数 量 [11ꎬ22-23] ꎮ 本 试 验 结 果 显 示 ꎬ 虽 然 植 入 10 ~ 20 枚 胚 胎 组 妊 娠 率 要 显 著 高 于 5 ~ 9 枚 胚 胎 组 ꎬ 但 由 于 10 ~ 20 枚 胚 胎 组 流 产 率 高 ꎬ 最 终 的 产 羔 率 并 没 有 显 著 差 异 ꎮ 相 似 研 究 也 发 现 ꎬ 增 加 移 植 克 隆 胚 胎 数 量 可 以 提 高 受 体 羊 妊 娠 率 ꎬ 甚 至 移 植 胚 胎 数 量 提 高 到 40 枚 ꎬ 可 以 得 到 73% 的 妊 娠 率 ꎬ 但 是 其 受 体 流 产 率 也 高 达 63% [24] ꎮ 体 细 胞 克 隆 研 究 发 现 ꎬ 如 果 核 重 编 程 中 表 观 遗 传 修 饰 标 志 清 除 或 重 建 失 败 ꎬ 就 会 导 致 重 构 胚 全 能 性 消 失 ꎬ 从 而 影 响 后 期 的 分 化 和 发 育 [25] ꎬ 使 移 植 胚 胎 的 受 体 流 产 ꎮ 因 此 ꎬ 本 研 究 推 断 ꎬ 植 入 克 隆 胚 胎 数 量 过 多 时 ꎬ 着 床 的 胚 胎 也 会 增 加 ꎬ 这 样 会 大 大 增 加 受 体 流 产 的 概 率 ꎬ 反 而 降 低 克 隆 动 物 的 生 产 效 率 ꎮ 综 上 所 述 ꎬ 转 基 因 体 细 胞 克 隆 山 羊 胚 胎 移 植 的 最 佳 方 案 是 在 秋 季 植 入 激 活 后 体 外 培 养 2 d 内 的 胚 胎 ꎮ 由 于 各 个 胚 胎 实 验 室 条 件 的 差 异 ꎬ 在 体 细 胞 克 隆 山 羊 生 产 试 验 前 ꎬ 可 以 使 用 中 间 受 体 法 检 测 得 到 克 隆 胚 胎 囊 胚 发 育 率 ꎬ 根 据 克 隆 胚 胎 体 内 发 育 情 况 确 定 每 只 受 体 植 入 克 隆 胚 胎 的 数 量 ꎮ 参 考 文 献 Reference: [1] Campbell K HꎬMcWhir JꎬRitchie W Aꎬet al. Sheep cloned by nuclear transfer from a cultured cell line[ J]. Natureꎬ1996ꎬ380(6569):64-66 [2] McCreath K JꎬHowcroft JꎬCampbell K Hꎬet al. Production of gene targeted sheep by nuclear transfer from cultured somatic cells[ J]. Natureꎬ
![移 植 的 受 胎 率 ꎮ 由 于 体 内 外 胚 胎 发 育 环 境 的 差 异 ꎬ 体 外 培 养 的 胚 胎 质 量 尚 不 及 体 内 胚 胎 ꎮ 所 以 ꎬ 为 了 提 高 体 外 生 产 胚 胎 质 量 ꎬ 在 早 期 的 胚 胎 移 植 研 究 中 ꎬ 会 采 用 中 间 受 体 培 养 法 [16] ꎮ 它 是 将 体 外 生 产 的 胚 胎 移 入 中 间 受 体 的 输 卵](/docs-images/41/22788596/images/page_5.jpg "管 内 ꎬ 经 过 几 天 的 培 养 后 再 回 收 囊 胚 进 行 胚 胎 移 植 ꎮ 而 早 前 体 细 胞 克 隆 研 究 中 ꎬ 移 植 山 羊 克 隆 囊 胚 获 得 活 的 后 代 就 是 采 用 这 种 方 法 [14-15] ꎮ 但 是 中 间 受 体 的 方 法 培 养 克 隆 囊 胚 技 术 太 复 杂 ꎬ 成 本 较 高 ꎬ 不 适 合 用 于 转 基 因 克 隆 动 物")
6 第 6 期 万 永 杰 ꎬ 等 : 胚 龄 季 节 和 胚 胎 数 量 对 转 人 乳 铁 蛋 白 基 因 克 隆 奶 山 羊 生 产 效 率 的 影 响 ꎬ405(6790): [ 3] Polejaeva I AꎬCampbell K H. New advances in somatic cell nuclear transfer:application in transgenesis[ J]. Theriogenologyꎬ2000ꎬ53(1): [4] Lai LꎬKolber Simonds DꎬPark K Wꎬet al. Production of alpha 1ꎬ3 galactosyltransferase knockout pigs by nuclear transfer cloning[ J]. Scienceꎬ 2002ꎬ295(5557): [5] Wakayama T. Production of cloned mice and ES cells from adult somatic cells by nuclear transfer:how to improve cloning efficiency? [J]. J Reprod Devꎬ2007ꎬ53(1):13-26 [ 6] Xiong X RꎬWang L JꎬWang Y Sꎬet al. Different preferences of IVF and SCNT bovine embryos for culture media[j]. Zygoteꎬ2014ꎬ22(1):1-9 [7] Baguisi AꎬBehboodi EꎬMelican D Tꎬet al. Production of goats by somatic cell nuclear transfer[ J]. Nat Biotechnolꎬ1999ꎬ17(5): [8] 孟 立 ꎬ 张 艳 丽 ꎬ 许 欣 ꎬ 等. 人 乳 铁 蛋 白 cdna 基 因 乳 腺 表 达 载 体 的 构 建 与 鉴 定 [J]. 生 物 工 程 学 报 ꎬ2011ꎬ27(2): [Meng LꎬZhang Y LꎬXu Xꎬet al. Construction and identification of mammary expressional vector for cdna of human lactoferrin[ J]. Chinese Journal of Biotechnologyꎬ2011ꎬ27(2): ( in Chinese with English abstract)] [9] Reggio B CꎬJames A NꎬGreen H Lꎬet al. Cloned transgenic offspring resulting from somatic cell nuclear transfer in the goat:oocytes derived from both follicle stimulating hormone stimulated and nonstimulated abattoir derived ovaries[ J]. Biol Reprodꎬ2001ꎬ65(5): [10] Melican DꎬButler RꎬHawkins Nꎬet al. Effect of serum concentrationꎬmethod of trypsinization and fusion / activation utilizing transfected fetal cells to generate transgenic dairy goats by somatic cell nuclear transfer[ J]. Theriogenologyꎬ2005ꎬ63(6): [11] Apimeteetumrong MꎬThuangsanthia AꎬLeingcharoen Nꎬet al. The effect of activation protocols on the development of cloned goat embryos[ J]. J Vet Med Sciꎬ2004ꎬ66(12): [ 12] Nasr Esfahani M HꎬHosseini S MꎬHajian Mꎬet al. Development of an optimized zona free method of somatic cell nuclear transfer in the goat[ J]. Cell Reprogramꎬ2011ꎬ13(2): [13] Keefer C LꎬKeyston RꎬLazaris Aꎬet al. Production of cloned goats after nuclear transfer using adult somatic cells[ J]. Biol Reprodꎬ2002ꎬ 66(1): [14] Behboodi EꎬMemili EꎬMelican D Tꎬet al. Viable transgenic goats derived from skin cells[ J]. Transgenic Researchꎬ2004ꎬ13(3): [15] Chen J QꎬChen JꎬXu X Jꎬet al. Effect of cytoplast on the development of inter subspecies nuclear transfer reconstructed goat embryo[ J]. Mol Reprod Devꎬ2007ꎬ74(5): [ 16] Willadsen S M. A method for culture of micromanipulated sheep embryos and its use to produce monozygotic twins[j]. Natureꎬ1979ꎬ277(5694): [17] Simonneaux VꎬAnsel LꎬRevel F Gꎬet al. Kisspeptin and the seasonal control of reproduction in hamsters[ J]. Peptidesꎬ2009ꎬ30(1): [18] Gerlach TꎬAurich J E. Regulation of seasonal reproductive activity in the stallionꎬram and hamster[j]. Anim Reprod Sciꎬ2000ꎬ58(3 / 4): [19] 李 丰 田 ꎬ 王 红 光 ꎬ 郑 旭 ꎬ 等. 不 同 光 照 时 间 对 辽 宁 绒 山 羊 羊 绒 生 长 增 重 和 繁 殖 性 能 的 影 响 [J]. 现 代 畜 牧 兽 医 ꎬ2012(8):53-56 [Li F TꎬWang H GꎬZheng Xꎬet al. Effect of light duration on cashmere growthꎬweight gain and reproduction of Liaoning cashmere goat[ J]. Modern Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicineꎬ2012(8):53-56( in Chinese)] [20] Bilton R JꎬMoore N W. In vitro cultureꎬstorage and transfer of goat embryos[ J]. Aust J Biol Sciꎬ1976ꎬ29(12): [21] 王 敬 军 ꎬ 胡 大 伟 ꎬ 刘 国 辉 ꎬ 等. FSH 剂 量 受 体 品 种 及 移 植 胚 胎 数 对 崇 明 白 山 羊 胚 胎 移 植 效 率 的 影 响 [J]. 上 海 交 通 大 学 学 报 : 农 业 科 学 版 ꎬ2011ꎬ29(1):38-42 [ Wang J JꎬHu D WꎬLiu G Hꎬet al. Effect of the dose of FSHꎬthe species of recipient and the number of embryos transplanted on the efficiency of embryo transfer of chongming white goat[ J]. Journal of Shanghai Jiaotong University: Agricultural Science Editionꎬ2011ꎬ29( 1):38-42 ( in Chinese with English abstract)] [22] Keefer C LꎬBaldassarre HꎬKeyston Rꎬet al. Generation of dwarf goat ( Capra hircus) clones following nuclear transfer with transfected and nontransfected fetal fibroblasts and in vitro matured oocytes[ J]. Biol Reprodꎬ2001ꎬ64(3): [23] Baldassarre HꎬKeefer CꎬWang Bꎬet al. Nuclear transfer in goats using in vitro matured oocytes recovered by laparoscopic ovum pick up[ J]. Cloning Stem Cellsꎬ2003ꎬ5(4): [24] Liu JꎬLi L LꎬDu Sꎬet al. Effects of interval between fusion and activationꎬcytochalasin B treatmentꎬand number of transferred embryosꎬon cloning efficiency in goats[j]. Theriogenologyꎬ2011ꎬ76(6): [25] Ohgane JꎬWakayama TꎬKogo Yꎬet al. DNA methylation variation in cloned mice[ J]. Genesisꎬ2001ꎬ30(2):45-50 责 任 编 辑 : 周 广 礼
![Production of alpha 1ꎬ3 galactosyltransferase knockout pigs by nuclear transfer cloning[ J]. Scienceꎬ 2002ꎬ295(5557):1089-1092 [5] Wakayama T.](/docs-images/41/22788596/images/page_6.jpg "Production of cloned mice and ES cells from adult somatic cells by nuclear transfer:how to improve cloning efficiency? [J]. J Reprod Devꎬ2007ꎬ53(1):13-26 [ 6] Xiong X RꎬWang L JꎬWang Y Sꎬet al.")
32期
中 国 农 学 通 报 2014,30(32):38-42 Chinese Agricultural Science Bulletin 中 草 药 饲 料 添 加 剂 对 黄 鳝 性 激 素 含 量 的 影 响 1,2 1,2 1,2 2 赵 庆 凯, 丁 炜 东, 邴 旭 文, 王 建 新 ( 1 南 京 农 业 大 学 无 锡 渔 业 学 院, 江 苏 无 锡 214081; 2 中 国 水 产
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211 better than those in the control group, with significant difference between two groups (P < 0.05). The ocular hypertension of patients in the cont
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第 31 卷 第 1 期 2013 年 3 月 经 济 林 研 究 Nonwood Forest Research Vol. 31 No.1 Mar. 2013 木醋对几种小浆果扦插繁殖的影响 健 1,2 杨国亭 1 刘德江 2 (1. 东北林业大学 生态研究中心 黑龙江 哈尔滨 150040 2. 佳木斯大学 生命科学学院 黑龙江 佳木斯 154007) 摘 要 为了解决小浆果扦插繁殖中生根率及成活率低等问题
22 Animal Husbandry & Veterinary Medicine 2011 Vol. 43 No % 3% 3% /% % 6. 67% 1. 71% 1. 11% 0. 14% 0.
2011 43 5 21 3 1 1* 1 2 3 1 1. 2. 3. 78. 68±2. 95 g 28 300 3 5 3% 3 1 ALT TP ALB AST 0. 05 P>0. 05 ALT TP ALB P>0. 05 AST 0. 05 GLOB P>0. 05 2 INS 0. 05 TSH T 3 0. 05 P>0. 05 GLU GH T4 IGF-I P>0. 05 S816.
2 3 4 5 22 22 23 25 35 38 39 45 46 1
97017626 O O 2 3 4 5 22 22 23 25 35 38 39 45 46 1 intrauterine insemination IUI 202 IUI a 24 IUI b 24 IUI c hcg 36 IUI d hcg 24 48 IUI 202 262 30 2 1 27 1 14.9% 11.5% a 122 151 13.9%, 11.3% b 42 46 2.38%,
2014年1月A 1期 排版.FIT)
第 26 卷 第 15 期 中 国 现 代 医 学 杂 志 Vol. 26 No.15 2016 年 8 月 China Journal of Modern Medicine Aug. 2016 DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2016.15.022 文 章 编 号 : 1005-8982(2016)15-0114-05 声 检 查 对 产 前 出 血 病 因 诊 断 的
第二部分
中 国 农 通 报 0,7(04):478-48 Chinese Agricultural Science Bulletin 基 于 网 络 平 台 的 生 物 统 计 改 革 及 实 践 效 果 分 析 袁 文, 彭 惠 茹, 张 洪 亮, 刘 文 欣, 华 金 平, 苏 胜 宝, 孔 繁 玲 ( 中 国 农 大 科 技 术 发 展 研 究 院, 北 京 0093; 中 国 农 大 农 与 生 物
5月15期
中 国 农 学 通 报 2012,28(15):106-111 Chinese Agricultural Science Bulletin 旱 地 小 麦 休 闲 期 不 同 耕 作 措 施 对 土 壤 水 分 蓄 纳 利 用 与 产 量 形 成 的 影 响 贺 立 恒, 高 志 强, 孙 敏, 李 青 ( 山 西 农 业 大 学 农 学 院, 山 西 太 谷 030801) 摘 要 : 为 了 提
% GIS / / Fig. 1 Characteristics of flood disaster variation in suburbs of Shang
20 6 2011 12 JOURNAL OF NATURAL DISASTERS Vol. 20 No. 6 Dec. 2011 1004-4574 2011 06-0094 - 05 200062 1949-1990 1949 1977 0. 8 0. 03345 0. 01243 30 100 P426. 616 A Risk analysis of flood disaster in Shanghai
Microsoft Word - 22 栗志民.doc
44 6 Vol.44, No.6 2013 11 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA Nov., 2013 (Argopecten irradians concentricus) * 1 1 2 2 (1. 524025; 2. 524022) 2011 10 2012 4 (Argopecten irradians concentricus),,,,,,,, (P
2001,30(1):1-4
Subtropical Plant Science 2015,44(3): 188~192. 三 种 植 物 生 长 调 节 剂 对 楝 叶 吴 茱 萸 光 合 作 用 的 影 响 董 奇 妤 1, 张 亮 2, 张 亨 3, 王 婧 1, 陈 红 跃 (1. 华 南 农 业 大 学 林 学 与 风 景 园 林 学 院, 广 东 广 州 510642;2. 广 东 省 林 业 调 查 规 划 院,
Nature (2003) 422:
The Studies and Applications of Transgenic and Cloned Animals 1 Nature (2003) 422:835-847 2 James Watson Francis Crick 1953 DNA (double helix) 1962 Watson and Crick / Genome = Gene + Chromosome 3 Nature
1269 malondialdehyde (MDA) were significantly decreased, while oxygen partial pressure (PaO 2 ), ph value, superoxide dismutase (SOD) and glutathione
1268 维 生 素 A 联 合 牛 肺 表 面 活 性 物 质 治 疗 新 生 儿 呼 吸 窘 迫 综 合 征 的 临 床 研 究 朱 琼 1, 陈 小 利 2, 叶 华 2 1. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 儿 科, 重 庆 401520 2. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 内 儿 科, 重 庆 401520
13期
中 国 农 学 通 报,9():- Chinese Agricultural Science Bulletin 药 百 合 种 子 萌 发 及 染 色 体 倍 性 检 测 吴 昀, 马 怡 迪, 张 琳, 夏 宜 平 ( 浙 江 大 学 农 业 与 生 物 技 术 学 院 园 艺 系 / 农 业 部 园 艺 植 物 生 长 发 育 与 品 质 调 控 重 点 开 放 实 验 室, 杭 州 ) 摘 要
% % * ~ 14 % 15~ 64 % 65 %
2018 4 * 210095 DOI:10.13246/j.cnki.jae.2018.04.002 2000 65 7. 5%2010 65 10. 06% 2. 56 2009 20032006 2011 19782009 2008 2013 2013 20032010 2010 * 71473123 14ZDA037 15 2018 4 2014 1 2000 2005 2010 3 65
戊 酸 雌 二 醇 片 联 合 宫 颈 注 射 利 多 卡 因 用 于 绝 经 后 妇 女 取 环 的 临 床 效 果 评 价 陆 琴 芬, 等 371 Keywords groups, no removal difficulties and failure, was statistically s
370 临 床 与 病 理 杂 志 J Clin Pathol Res 2015, 35(3) http://www.lcbl.net doi: 10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 View this article at: http://dx.doi.org/10.3978/j.issn.2095-6959.2015.03.009 戊 酸 雌 二 醇 片 联
by mild (22.7%). Inhaled corticosteroids, systemic corticosteroids, and antibiotics were applied to 94.8% (292 cases), 74.7% (230 cases), and 90.9% (2
论 著 临 床 研 究 doi: 0.7499/j.issn.008-8830.204.2.007 郑 州 市 城 区 儿 童 哮 喘 的 流 行 病 学 调 查 及 发 病 相 关 因 素 分 析 赵 坤 宋 桂 华 古 华 倩 2 刘 爽 3 张 岩 郭 彦 荣 (. 河 南 中 医 学 院 第 一 附 属 医 院 儿 科 医 院, 河 南 郑 州 450000; 2. 杭 州 市 余 杭 区
畜牧 动物医学 蚕 蜂
中国农学通报 2015,31(20):181-185 Chinese Agricultural Science Bulletin 老河口市砂梨花期的物候特点分析 邓 环 1 马德栗 1 徐洪海 2 洪国平 1 2 武汉区域气候中心 武汉 430074 老河口气象局 湖北老河口 441800 1 摘 要 为掌握湖北省老河口市砂梨花期的物候规律 利用老河口市 20 年的砂梨裂蕾期 初花期 和盛花期 4
OncidiumGower Ramsey ) 2 1(CK1) 2(CK2) 1(T1) 2(T2) ( ) CK1 43 (A 44.2 ) CK2 66 (A 48.5 ) T1 40 (
35 1 2006 48 35-46 OncidiumGower Ramsey ) 2 1(CK1) 2(CK2) 1(T1) 2(T2) (93 5 28 95 1 9 ) 94 1-2 5-6 8-10 94 7 CK1 43 (A 44.2 ) CK2 66 (A 48.5 ) T1 40 (A 47.5 ) T2 73 (A 46.6 ) 3 CK2 T1 T2 CK1 2006 8 16
01-0982.doc
第 32 卷 第 7 期 岩 土 工 程 学 报 Vol.32 No.7 2010 年 7 月 Chinese Journal of Geotechnical Engineering July 2010 沿 海 碎 石 回 填 地 基 上 高 能 级 强 夯 系 列 试 验 对 比 研 究 年 廷 凯 1,2, 水 伟 厚 3, 李 鸿 江 4, 杨 庆 1,2, 王 玉 立 (1. 大 连 理 工
- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 料 ), 山 西 皇 城 相 府 药 业 有 限 公 司, 批 号 20111003 ( 人 口 服 推 荐 剂 量 为 每 日 3 次, 每 次 4 粒, 成 人 体 质 量 按 60
Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治 疗 作 用 研 究 * 刘 聪, 岳 永 花, 郝 旭 亮 山 西 省 中 医 药 研 究 院, 山 西 太 原 030012 摘 要 : 目 的 探 讨 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治
标题
环 球 中 医 药 2016 年 5 月 第 9 卷 第 5 期 摇 Global Traditional Chinese Medicine, May 2016,Vol 郾 9, No 郾 5 摇 557 两 种 电 针 对 脊 髓 损 伤 14 天 后 大 鼠 运 动 功 能 神 经 元 及 MEK2 p 鄄 ERK1 表 达 的 影 响 论 著 宋 良 玉 摇 吕 威 摇 景 泉 凯 摇 莫 雨
ADR ADR ADR : 2
8 2000 10 2001 5 ADR ADR 415 ADR44 ADR 10.6% 2661 ADR105 ADR 3.9% P
<46495420446F63756D656E7428442D2D796E2DB9A4D7F72D31C6DABFAF2D31D6D0D2BDD2A9CFD6B4FABBAF2D32303133C4EA2DB5DA35C6DA2D30352D31302DC1C9C4FEBBF9B5D82DB8BEB6F9B2A12E6D6469>
绎 1. 110032 2. 100029 3. 100045 4. 300193 5. 116023 6. 510120 7. 110004 8. 250011 9. 210029 10. 200032 11. 510405 12. 210008 13. 201102 14. 300074 13 3 1~2 doi: 10.11842/wst.2013.05.039 R725.6 A World
度 身 體 活 動 量 ; 芬 蘭 幼 兒 呈 現 中 度 身 體 活 動 量 之 比 例 高 於 臺 灣 幼 兒 (5) 幼 兒 在 投 入 度 方 面 亦 達 顯 著 差 異 (χ²=185.35, p <.001), 芬 蘭 與 臺 灣 幼 兒 多 半 表 現 出 中 度 投 入 與 高 度
臺 灣 與 芬 蘭 幼 兒 園 室 內 自 由 遊 戲 內 涵 之 探 討 林 昭 溶 毛 萬 儀 經 國 管 理 暨 健 康 學 院 幼 兒 保 育 系 副 教 授 joyce@ems.cku.edu.tw 吳 敏 而 國 家 教 育 研 究 院 研 究 員 rozwu@mail.naer.edu.tw wanyi@ems.cku.edu.tw 摘 要 自 由 遊 戲 被 視 為 是 幼 兒 的
H 2 SO ml ml 1. 0 ml C 4. 0 ml - 30 min 490 nm 0 ~ 100 μg /ml Zhao = VρN 100% 1 m V ml ρ g
16 6 2018 11 Chinese Journal of Bioprocess Engineering Vol. 16 No. 6 Nov. 2018 doi 10. 3969 /j. issn. 1672-3678. 2018. 06. 004 1 2 1 1 1. 330200 2. 330006 4 Box-Behnken 1 25 g /ml 121 92 min 2 6. 284%
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
中 药 混 悬 型 乳 房 注 射 剂 ( 吉 林 大 学 实 验 室 自 制 ), 批 号 45; 注 射 用 生 理 盐 水 ( 长 春 豪 邦 药 业 有 限 公 司 生 产 ), 批 号 为 4;,4 二 硝 基 氯 苯 ( 石 家 庄 莫 高 化 学 试 剂 有 限 公 司 ), 批 号
第 8 卷 第 期 期 年 月 Journal of Heilongjiang Bayi Agricultural University 8():9~4 Feb. doi:.99/j.issn.9...5 治 疗 奶 牛 乳 房 炎 中 药 混 悬 型 注 射 剂 安 全 性 试 验 李 诗 莹, 邹 晓, 许 启 有, 刘 瑶, 付 世 新 ( 黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 动 物 科 技
相 关 报 道 近 年 来 临 床 上 运 用 多 种 针 灸 疗 法 治 疗 肥 胖 及 其 引 起 的 并 发 症, 如 高 脂 血 症 糖 尿 病 高 血 压 及 痛 经 等, 均 获 得 满 意 疗 效. caused by sedentary lifestyle and genetic f
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v24.i5.815 世 界 华 人 消 化 杂 志 2016 年 2 月 18 日 ; 24(5): 815-820 ISSN 1009-3079 (print)
405 急 性 心 肌 梗 死 是 临 床 较 为 常 见 的 心 血 管 疾 病, 病 情 危 急, 病 死 率 高 [1] 随 着 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 疗 (percutaneous coronary intervention,pci) 技 术 在 急 性 心 肌 梗 死 急 诊
![405 急 性 心 肌 梗 死 是 临 床 较 为 常 见 的 心 血 管 疾 病, 病 情 危 急, 病 死 率 高 [1] 随 着 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 疗 (percutaneous coronary intervention,pci) 技 术 在 急 性 心 肌 梗 死 急 诊](/thumbs/42/23094402.jpg "405 急 性 心 肌 梗 死 是 临 床 较 为 常 见 的 心 血 管 疾 病, 病 情 危 急, 病 死 率 高 [1] 随 着 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 疗 (percutaneous coronary intervention,pci) 技 术 在 急 性 心 肌 梗 死 急 诊")
404 冠 心 舒 通 胶 囊 预 防 急 性 心 肌 梗 死 PCI 术 后 再 狭 窄 的 临 床 研 究 李 静, 王 建 榜, 王 西 辉 西 安 医 学 院 第 二 附 属 医 院 心 内 科, 陕 西 西 安 710038 摘 要 : 目 的 研 究 冠 心 舒 通 胶 囊 预 防 急 性 心 肌 梗 死 经 皮 冠 状 动 脉 介 入 治 疗 (PCI) 术 后 再 狭 窄 的 临 床
Microsoft Word - 793-797 tb20150504赵宏宇s-高校教改纵横.doc
微 生 物 学 通 报 Microbiology China tongbao@im.ac.cn Apr. 20, 2016, 43(4): 793 797 http://journals.im.ac.cn/wswxtbcn DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150504 高 校 教 改 纵 横 生 物 工 程 专 业 发 酵 课 程 群 建 设 探 索 * 赵 宏 宇
(Microsoft Word - 11-\261i\256m\253i.doc)
不 同 接 棒 方 法 對 國 小 學 童 大 隊 接 力 成 績 影 響 之 研 究 不 同 接 棒 方 法 對 國 小 學 童 大 隊 接 力 成 績 影 響 之 研 究 張 峻 詠 林 瑞 興 林 耀 豐 國 立 屏 東 教 育 大 學 摘 要 本 研 究 主 要 目 的 在 探 討 不 同 接 棒 方 法 對 國 小 學 童 大 隊 接 力 成 績 影 響 之 研 究, 以 高 雄 市 楠
Microsoft Word - 360145.doc
项 目 批 准 号 81273814 归 口 管 理 部 门 申 请 代 码 收 件 日 期 H2716 360145 y 国 家 自 然 科 学 基 金 委 员 会 资 助 项 目 计 划 书 资 助 类 别 : 面 上 项 目 亚 类 说 明 : 非 连 续 资 助 类 项 目 附 注 说 明 : 项 目 名 称 : 益 气 养 肺 法 拮 抗 bfgf 对 肺 癌 微 环 境 介 导 化 疗
<4D6963726F736F667420576F7264202D20B2CCA3BA4542B2A1B6BE52746120496747BFB9CCE5D3EBB1C7D1CAB0A9B7D6C6DAB5C4B9D8CFB52E646F63>
EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 分 期 的 关 系 蔡 永 林, 郑 裕 明, 成 积 儒, 李 军, 莫 永 坤, 钟 青 燕 ( 广 西 梧 州 市 红 十 字 会 医 院, 梧 州 市 肿 瘤 防 治 研 究 所, 广 西 梧 州 543002) 摘 要 : 目 的 探 讨 EB 病 毒 Rta/IgG 抗 体 与 鼻 咽 癌 临 床 分 期 的 关 系 方 法 用 酶
兩願離婚之研究
裂 不 1 女 女 不 sol-sol-sol-mi 令 不 女 不 念 力 沈 異 諾 不 來 倫理 律 兩 Paganini 靈 不 來 了 靈 羅 靈 1 年 62 1 2 La campanella 律 若 說 3 不理 2 說 女 律 理 不 不 了 不 類 律 類 理 歷 3 1860 年 chromosome 葉 1944 年 DNA 良 了 類 2 1 40 3 理 錄 諾 年 4
2月5期aa
中 国 农 学 通 报 212,28():2-27 Chinese Agricultural cience Bulletin 血 清 11 型 鸭 疫 里 默 氏 菌 的 分 离 鉴 定 1,2 2, 2, 2, 2, 2, 2, 杨 晓 辉, 程 龙 飞, 陈 红 梅, 施 少 华, 傅 光 华, 万 春 和, 黄 瑜 ( 1 福 建 省 农 业 科 学 院 畜 牧 兽 医 研 究 所, 福 州
<46495420446F63756D656E7428442D2D796E2DD6D0D2BDD2A92DB5DA3132C6DA2DB7E2C3E6CDC6BDE9A3A8323031342D3132A3A9CCE6BBBB2E6D6469>
2014 第十六卷 第十二期 绎Vol.16 No.12 清热利湿化瘀汤联合针灸治疗慢性盆腔炎 湿热瘀结证临床研究 周 萍 1 曾志华 1元元 向阳红 2 1. 重庆医科大学中医药学院 摘 重庆 401331 2. 重庆市中医研究院 重庆 400020 要 目的 观察清热利湿化瘀汤联合针灸治疗慢性盆腔炎湿热瘀结证的临床疗效 方法 将 120 例病例随机分为 每组各 40 例 给予口服清热利湿化瘀汤
08陈会广
第 34 卷 第 10 期 2012 年 10 月 2012,34(10):1871-1880 Resources Science Vol.34,No.10 Oct.,2012 文 章 编 号 :1007-7588(2012)10-1871-10 房 地 产 市 场 及 其 细 分 的 调 控 重 点 区 域 划 分 理 论 与 实 证 以 中 国 35 个 大 中 城 市 为 例 陈 会 广 1,
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
66 臺 中 教 育 大 學 學 報 : 人 文 藝 術 類 Abstract This study aimed to analyze the implementing outcomes of ability grouping practice for freshman English at a u
臺 中 教 育 大 學 學 報 : 人 文 藝 術 類 0 年,(),-0 65 私 立 科 技 大 學 四 技 大 一 新 生 英 文 能 力 分 級 教 學 成 效 分 析 An Analysis of the Implementing Outcomes of Ability Grouping of Freshman English in a University of Technology 溫
®
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 15 期 214 年 8 月 2277 稳 心 颗 粒 治 疗 心 律 失 常 的 Meta 分 析 * 何 颖, 刘 莹, 邹 爱 英 天 津 中 医 药 大 学 第 二 附 属 医 院, 天 津 15 摘 要 : 利 用 Meta 分 析 法 评 价 稳 心 颗 粒 治 疗 心 律 失 常 的
240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通
![240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通](/thumbs/42/22943812.jpg "240 生 异 性 相 吸 的 异 性 效 应 [6] 虽 然, 心 理 学 基 础 研 [7-8] 究 已 经 证 实 存 在 异 性 相 吸 异 性 相 吸 是 否 存 在 于 名 字 认 知 识 别 尚 无 报 道 本 实 验 选 取 不 同 性 别 的 名 字 作 为 刺 激 材 料, 通")
2011 年 Journal of Capital Medical University 4月 第2 期 Apr 2011 Vol 32 No 2 基础研究 doi: 10 3969 / j issn 1006-7795 2011 02 015 人脑识别不同性别名字反应时的差异研究 高迎霄 陈昭燃 * 张明霞 ( 首都医科大学神经生物系高级脑功能中心) 摘要 目的 探讨男女对不同性别名字认知加工速度是否存在差异
184 涼 季 採 集 之 冷 凍 胚 移 置 改 善 荷 蘭 乳 牛 熱 季 懷 孕 率 緒 言 臺 灣 地 區 之 荷 蘭 乳 牛, 尤 其 5-10 月 份 的 熱 季 中, 受 到 高 環 境 溫 度 濕 度 的 影 響, 導 致 發 情 的 不 明 顯 不 發 情 排 卵 延 遲 等 及
畜 產 研 究 41(3):183~192, 楊 德 威 2008蕭 宗 法 謝 昭 賢 王 治 華 沈 朋 志 李 善 男 劉 炳 燦 183 涼 季 採 集 之 冷 凍 胚 移 置 改 善 荷 蘭 乳 牛 熱 季 懷 (1) 孕 率 (2) 楊 德 威 (4) 沈 朋 志 (2) 蕭 宗 法 (5) 李 善 男 (2) 謝 昭 賢 (4)(6) 劉 炳 燦 (3) 王 治 華 收 件 日 期 :96
PCA+LDA 14 1 PEN mL mL mL 16 DJX-AB DJ X AB DJ2 -YS % PEN
21 11 2011 11 COMPUTER TECHNOLOGY AND DEVELOPMENT Vol. 21 No. 11 Nov. 2011 510006 PEN3 5 PCA + PCA+LDA 5 5 100% TP301 A 1673-629X 2011 11-0177-05 Application of Electronic Nose in Discrimination of Different
中 文 摘 要 : 胃 食 管 反 流 病 食 管 外 表 现 与 酸 反 流 关 系 的 研 究 研 究 生 : 赵 莉 导 师 : 刘 新 光 目 的 : 探 讨 反 流 性 食 管 炎 (RE) 常 见 的 食 管 外 表 现,24 小 时 食 管 ph 监 测 对 伴 有 食 管 外 表 现
( 医 学 部 ) 在 职 人 员 申 请 硕 士 学 位 论 文 论 文 题 目 胃 食 管 反 流 病 食 管 外 表 现 与 酸 反 流 关 系 的 研 究 学 院 ( 医 院 所 ): 北 京 大 学 第 一 医 院 学 科 专 业 : 消 化 内 科 申 请 人 姓 名 : 赵 莉 导 师 姓 名 职 称 : 刘 新 光 二 OO 七 年 五 月 1 中 文 摘 要 : 胃 食 管 反 流
2015 1 330 GLOBAL EDUCATION Vol. 44 No1 2015 / 300387 / 300387 20 20 1926 20 1912 1912 1918 1919 34 1919 1921 1 1922 1923 1925 7 100 2 1922 3 1923 5 1923 1924 4 1927 1949 20 1. 20 5 35 2. 20 20 1927 1949
18 A B S 17.44±1() ±6.26( ) 54.23±5.5( ) 6.42±1.51() m 30m t α =.05 ( )AB 1 5 (p>.05)( )AB 1 5 (p<.05)( )A (p>.05)( )B (p<.05)( )A B
The Effect of Different Training Method on Quick Coordination ability in High School Female Soccer Players 18 A B S 17.44±1() 161.39±6.26( ) 54.23±5.5( ) 6.42±1.51() 15 60-90 30m 30m t α =.05 ( )AB 1 5
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网 络 环 境 下 元 认 知 策 略 运 用 的 性 别 差 异 研 究 王 志 茹 ( 湖 北 大 学 外 国 语 学 院, 武 汉 430062) 摘 要 : 研 究 以 问 卷 的 形 式 对 参 加 网 络 英 语 课 程 学 习 的 520 名 大 学 生 的 元 认 知 策 略 使 用 中 的 性 别 差 异 进 行 调 查 研 究 采 用 独 立 样 本 T 检 验 对 性 别 差
2 1: 1 7-27 ( 2001) Formosa n Entomol. 2 1 : 1 7-27 (2001) (Orgyia posticus) ( ) * (Orgyia posticus (Walker)) 10 15 20 25 30 35 12L : 12D 25 5 10-35 64.1 40.0 26.2 16.2 16.2 21.1 19.6 16.0 8.2 6.9 6.0
TGF-β AngⅡ B SD ~ 220g SPF. SCXK No SYXK ~ 25 40% ~ 70% OR37G-C
2017 7 43 4 Journal of Southwest Minzu University Natural Science Edition Jul. 2017 Vol. 43 No. 4 doi10. 11920 /xnmdzk. 2017. 04. 008 1 1 1 2 1 1 3 1. 610212 2. 6100413. 610031 AngⅡ TGF-β. SD 60 180 ~
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R2 10315 20042008 2004 CLINICAL RESEARCH OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE THEORY & TREATMENT TO RELIEVE PAIN OF BREAST CANCER PATIENTS 2007 5 -----------------------------------------------------------------------------------------------
~ 4 mm h 8 60 min 1 10 min N min 8. 7% min 2 9 Tab. 1 1 Test result of modified
30 1 2013 1 Journal of Highway and Transportation Research and Development Vol. 30 No. 1 Jan. 2013 doi 10. 3969 /j. issn. 1002-0268. 2013. 01. 004 1 2 2 2 2 1. 400074 2. 400067 240 U416. 217 A 1002-0268
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55 doi:10.3969j.issn.1000-3606.2014.01.01 论 著 不 同 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 赵 玉 祥 岳 虹 霓 杨 占 华 江 苏 省 淮 安 市 保 健 院 新 生 儿 科 ( 江 苏 淮 安 223002) 摘 要 : 目 的 探 讨 妊 娠 期 高 血 压 疾 病 胎 膜 早 破 等 围 生 因 素 对 妊 娠 的 影 响 方 法 回 顾 性
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1. 530023 2. 530001 3. 530001 DCP 100 DCP 47 53 3 HOMA -IR HOMA - IR P
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I II III IV 1 2 3 4 5 Effects of dietary medium-chain triglycerides on the growth performance and the intestinal microflora in young pigs Wei-Kang Lai Abstract The purpose of the study is to investigate
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绎 阴 元元 / 100102 MCAT MCAO 84~333 mg kg -1 167 333 mg kg -1 MCAT 84 167 mg kg -1 MCAT 27% 37% 84~333 mg kg -1 MCAT 21%~ 32% MCAO LDH 10%~ 12% MDA 28%~38% SOD 15%~36% GSH 14%~36% doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.016
标题
吉林农业大学学报 ２０１６ ３８ １ ８７ ９１ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｊｉｌｉｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｈｔｔｐ ｘｕｅｂａｏ ｊｌａｕ ｅｄｕ ｃｎ Ｅ ｍａｉｌ ｊｌｎｄｘｂ ｖｉｐ ｓｉｎａ ｃｏｍ 神 经 生 长 因 子 ｍｒｎａ 在 鹅 等 级 前 卵 泡 中 的 表达 刘璐璐 隋玉健 朱海洋 武惠岩 杨 辉 孙永峰 吉林农业大学动物科学技术学院 长春 １３０１１８
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ph ph ph Langmuir mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 3 CO 2-3 PO mg /L 5 p
1 2 1 2 3 1 2 1. 100054 2. 100054 3. 100036 ph ph ph Langmuir 166. 67 mg /g Al 2 O 3 ph 7. 0 ~ 9. 0 ph HCO - 4 5. 00 mg /L 5 ph doi 10. 13928 /j. cnki. wrahe. 2017. 03. 017 TV213. 4 + TU991. 26 + 6 A 1000-0860
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,,,,,,, :,,,,, ;,,,,,, : N = Y pr, dn N = dy Y - dpr pr, Y, N, pr,, (1),, ( : / ) :,, : t pr = e 1980 t = 1,t 9
() FUDAN JOURNAL (Social Sciences) 2005 5 No. 5 2005 (, 200433) [ ] 2005 2010, :,10-12 %,300 600,, :,;, [] [] C913. 2 ;F127 [] A [ ] 0257 0289 (2005) 05 0202 011,, 1980 1990,1988 2500,1995 8000,2003 9820
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IPCC CO (IPCC2006) 1 : = ( 1) 1 (kj/kg) (kgc/gj) (tc/t)
2011 5 5 (278 ) China Industrial Economics May 2011 No.5 1 12 (1. 100005; 2. 066004) [ ] : ; ; : ; ; [ ] ; ; ; [ ]F290 [ ]A [ ]1006-480X(2011)05-0047-11 2008 CO 2 ( ) (2009) (GDP) (Binhocker et al. 2008)
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绎 330004 3 2010 doi: 10.11842/wst.2014.06.028 R288 A A stragalus mem 原 branaceus Fisch. Bge. var.mongholicus Bge. Hsiao A stragalus membranaceus Fisch. Bge. [1] 22 14 [2] [3] [4] [5] [6] 1 1.1 Ultimate
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10384 070302 9825042 UDC 2001.6. 2001.7. 20016 THE APPLICATION OF ISOTOPE RATIO ANALYSIS BY INDUCTIVELY COUPLED PLASMA MASS SPECTROMETER A Dissertation Presented By Chaoyong YANG Supervisor: Prof.Dr. Xiaoru
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853 对实验性大鼠甲状腺肿的影响 * 田先翔,王瑞,泮剑英,吴勇,鲁云,郑国华 ( 湖北中医药大学药学院,武汉摇 430065) 摘摇 要摇 目的摇 研究对实验性大鼠甲状腺肿模型的影响及其作用机制 方法摇 将 SD 大鼠随机分为 6 组:,,低 中 高剂量组, 除外,其余各组大鼠连续灌服 丙基硫氧嘧啶(20 mg kg d ) 造模 低 中 高剂量组同时灌服水溶液,剂量分别为 4. 4, 8. 8,17.
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微 生 物 学 通 报 FEB 20, 2008, 35(2) 306~30 Microbiology 2008 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@im.ac.cn 生 物 实 验 室 响 应 面 分 析 法 优 化 副 溶 血 性 弧 菌 生 长 条 件 刘 代 新 宁 喜 斌 * 张 继 伦 2 (. 200090) (2. 20202) 摘 要
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4 51 1 Scoones 1998 20 60 70 2002 2001 20 90 World Bank DFID Sussex IDS 2012 2 2. 1 UNDP CARE DFID DFID DFID 1997 IDS 2009 1 5
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81 J Chin Med 13(2): 81-88, 2002 固 本 解 鬱 法 論 治 中 風 後 抑 鬱 症 (poststroke depression) 對 照 研 究 劉 慶 憲 1,2 宋 永 建 3 1 浙 江 省 平 湖 市 中 醫 醫 院 神 經 內 科 浙 江, 平 湖, 中 國 2 上 海 第 二 醫 科 大 學 2002 屆 高 級 醫 師 班 3 上 海 第 二 醫 科
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针 灸 临 床 杂 志 2012 年 第 28 卷 第 6 期 1 临 床 研 究 针 刀 治 疗 膝 关 节 创 伤 性 滑 膜 炎 的 临 床 研 究 向 伟 明 1, 丁 思 明 1, 张 秀 芬 2, 权 五 成 2, 唐 吉 莲 1, 杨 友 金 1, 黄 涣 强 1, 颜 勋 1, 曾 晓 宇 1, 朱 传 芳 1 1, 张 雄 ( 1. 重 庆 市 梁 平 县 第 二 人 民 医 院,
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绎 阴 元 元 渊 210046 210046 渊 210046 173 111 62-76 P 约 0.05 doi: 10.3969/j.issn.1674-3849.2013.01.020 喎 喎 喎 [1] 2012-07-13 2012-08-15 元 973 2011CB505300-01 元 元 105 2013 绎 Vol.15 No.1 1. [2] CNKI 1911 ~1979
United Nations ~ ~ % 2010
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