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1 864 Chinese Journal of Pathophysiology Rg1 * Rg1 HFD NAFLD β- 60 SD CON HFD Rg1 LDG MDG HDG PDT HFD 8 NAFLD 4 8 HE RT-PCR Western blotting CoA 1 CoASH1 I CATI CoA 1 ACOX1 mrna 4 HE HDG PDT LDG MDG 8 PDT LDG MDG HDG 4 PDT LDG MDG HDG HFD AST ALT AKP TC TG LDL- C P < HDL-C 8 CON 4 4 CoASH1 CACTI ACOX1 P < MDG HDG PDT P < Rg1 β- NAFLD Rg1 A 1 I A 1 R A doi /j. issn Ginsenoside Rg1 improves liver function by regulating fat metabolism in rats with non-alcoholic fatty liver disease PENG Xuan 1 HUANG De-bin 1 YAN Mi-ya 1 PENG Shi-jun 2 1 Medical School of Hubei Minzu University 2 The Central Hospital of Enshi Autonomous PrefectureEnshi China @ qq. com ABSTRACTAIM To investigate whether ginsenoside Rg1 attenuates high-fat diet HFD -induced non-alcoholic fatty liver disease NAFLD by improving β-oxidation. METHODS SD rats n = 60 were randomly divided into control group CON HFD grouplow-dosemedium-dose and high-dose ginsenoside Rg1 groups LDGMDG and HDG and positive drug sodium ursodeoxycholate treatment group PDT. High-fat diet was given for 8 weeks to successfully establish an NAFLD model. The animals were treated with the appropriate medications for 4 weeks and 8 weeks after modelingand sacrificed to collect the liver tissues for observing the pathologic changes with HE staining and for detecting liver functions and lipid levels. The expression of hepatic acyl-coa synthetase 1 CoASH1 carnitine acyltransferase I CATI and acyl-coa oxidase 1 ACOX1 at mrna and protein levels was determined by RT-PCR and Western blotting. RESULTS After 4-week treatmentthe fatty infiltration of the liver tissues in PDT groupldg group and MDG group was not attenuated except HDG group. After 8 weeks of treatmenta small number of fat particles was observed in PDT group and LDG groupwhile no infiltration of lipid droplet was found in MDG group and HDG group. Compared with HFD group the levels of ASTALTAKPTCTG and LDL-C were significantly decreased after 4-week treatment in PDT groupldg groupmdg group and HDG group P < these indexes were further reduced after 8-week treatment. After 4-week treatmenthdl-c was significantly increased in the 4 treatment groups and almost restored to the level of * No Tel @ qq. com

2 865 CON group after 8-week treatment. The levels of CoASH1 CACTI and ACOX1 in the liver tissue of the 4 treatment groups were significantly increased after 4-week treatment P < and much improved after 8-week treatmentand those in MDG group and HDG group were better than those in PDT group P < CONCLUSION Ginsenoside Rg1 regulates β-oxidation-related enzymes to improve the fat metabolismthus playing a therapeutic role in liver injury in the rats with NAFLD. KEY WORDSGinsenoside Rg1 Non-alcoholic fatty liver disease Acyl-CoA synthetase 1 Carnitine acyltransferase I Acyl-CoA oxidase 1 non-alcoholic fatty liver ECL Santa Cruz II disease NAFLD 30% 1 NAFLD NAFLD % 2% 0. 5% 77. 5% 100% 8 3 Rg1 HE 4 Rg SD control CON 6 NAFLD high-fat diet HFD Rg1 7 1 aspartate aminotransferase AST mg4% alanine aminotransferase ALT alkali 24 h phosphatase AKP ELISA Bio-Swamp SD ~ 180 g Rg1 5 mg /kg 10 mg /kg 20 mg / kg 8 1 PDT SCXK mg /kg SCXK Rg total cholesterol TC triglyceride TG high-density 3% 3 ml lipoprotein cholesterol HDL-C 10 ml low-density lipoprotein cholesterol LDL-C r /min - 80 RNA HE 2 Master PCR Mix MBI Fermentas In vitrogen CoA 1 acyl- CoA synthetase 1 I CoASH1 CoA carnitine acyltransferase CATI 1 acyl-coa oxidase 1 ACOX1 β-actin LDG MDG HDG positive drug treatmentpdt 10 CON HFD LDG MDG HDG

3 RT-PCR mrna TGAAGA-3 5 -TAGTTCCTCGCGG- GAACGAT bp 30 mg BCA 60 μg SDS- RNA RNA PAGE 2 μg cdna ECL ImageJ RNA β-actin PCR PCR II V 1 μl 3 GeneFinder 1. 6% 30 min 3 SPSS ImageJ β- ± mean ± SD actin 3 β-actin 5 -GTGACGAGGC- CCAGAGCAAGAG-3 5 -ACGCAGCT- CATTGTAGAAGGTGTGG bp CoASH1 5 -CTTCGGTCGTGAT- GAAAGGA-3 5 -ATAGCTGACGGTT- GCCGTAC bp CATI HFD 4 5 -CTTGCATGGCTGTGAGAAGA AGTCGGACTGCCTTCAGTGA bpacox1 5 -GTTACGTGGCGCAT r /min P < Western blotting MDG HDG 100 mg 1 1 HE HE CON 4 8 PDT LDG Figure 1. The pathological changes of liver tissues in the rats with different treatments for different weeks HE staining HE 2 4 HFD CON AST ALT AKP P < HFD 4 PDT LDG MDG HDG HFD CON PDT AST ALT AST ALT AKP P < AKP LDG MDG HDG PDT LDG MDG HDG 8 PDT LDG MDG HDG HFD AST ALT AKP 1

4 867 1 Table 1. The changes of the liver functions in the rats with different treatments U /L. Mean ± SD. n = 5 Group Time point AST ALT AKP Control 4 weeks ± ± ± weeks ± ± ± HFD 4 weeks ± ± ± weeks ± ± ± PDT 4 weeks ± * ± * ± * 8 weeks ± * ± * ± * LDG 4 weeks ± * # ± * # ± * # 8 weeks ± * # ± * # ± * # MDG 4 weeks ± 0. 1 * # ± * # ± * # 8 weeks ± * # ± * # ± * # HDG 4 weeks ± 5. 3 * # ± * # ± * # 8 weeks ± * # ± * # ± * # 3 4 HFD CON TC TG LDL-C P < HDG HFD TC TG LDL-C 4 HLD-C P < HLD-C HFD PDT LDG MDG HDG PDT LDG MDG HDG 8 PDT LDG MDG CON PDT TC HFD TC TG LDL-C TG HLD-C LDL-C LDG MDG HLD-C P < HDG 2 Table 2. 2 The biochemical parameters of lipid metabolism of the rats with different treatments at different time points mmol /L. Mean ± SD. n = 5 Group Time point TC TG HDL-C LDL-C CON 4 weeks ± ± ± ± weeks ± ± ± ± HFD 4 weeks ± ± ± ± weeks ± ± ± ± PDT 4 weeks ± * ± * ± * ± * 8 weeks ± * ± * ± * ± * LDG 4 weeks ± * # ± * # ± * # ± * # 8 weeks ± * # ± * # ± * ± * # MDG 4 weeks ± * # ± * # ± * ± * # 8 weeks ± * # ± * # ± * ± * # HDG 4 weeks ± * # ± * # ± * # ± * # 8 weeks ± * # ± * # ± * # ± * # 4 CoASH1 CATI ACOX1 < CoASH1 CATI ACOX1 4 PDT LDG MDG HDG PDT LDG HFD CoASH1 CATI ACOX1 MDG HDG MDG HDG P < MDG HDG P < ~ 3 CoASH1 CATI ACOX1 PDT P

5 868 Figure 2. The protein expression of CoASH1 CATI and ACOX1 in the rat liver tissues after 4 weeks of treatment. Mean ± SD. n = CoASH1 CATI ACOX1 Figure 3. The protein expression of CoASH1CATI and ACOX1 in the rat liver tissues after 8 weeks of treatment. Mean ± SD. n = CoASH1 CATI ACOX1 5 CoASH1 CATI ACOX1 mrna 9 NAFLD mrna 25% 4 PDT LDG MDG HDG HFD CoASH1 CATI ACOX1 mrna P < MDG HDG CoASH1 CATI ACOX1 mrna 10 PDT P < CoASH1 CATI ACOX1 mrna PDT LDG MDG HDG P < PDT CoASH1 ACOX1 mrna MDG HDG P < PDT CATI mrna HDG 4 ~ 5 NAFLD NAFLD NAFLD NAFLD NAFLD 11 NAFLD 12 NAFLD HE CON 4 8

6 869 Figure 4. The mran expression of CoASH1 CATI and ACOX1 in the rat liver tissues after 4 weeks of treatment. Mean ± SD. n = CoASH1 CATI ACOX1 mrna Figure 5. The mrna expression of CoASH1CATI and ACOX1 in the rat liver tissues after 8 weeks of treatment. Mean ± SD. n = CoASH1 CATI ACOX1 mrna HFD 4 8 CoASH1 CoA CATI CoA ACOX1 2 CoA MDG HDG CoASH1 CATI ACOX1 PDT LDG MDG HDG HFD 3 β- RT-PCR Western blot AST ALT AKP PDT 4 PDT LDG MDG LDG MDG HDG HDG HFD CoASH1 CATI ACOX1 mrna MDG Rg1 HDG 3 mrna PDT 8 3 mrna Rg1 4 Rg1 β- CoA β- CO 2 H 2 O Rg1

7 870 8 in PC12 cells J. Pharmazie NAFLD 7. Rg1 Con A Rg1 β- D J Berlanga AGuiu-Jurado EPorras JAet al. Molecular Rg1 pathways in non-alcoholic fatty liver disease J. Clin Exp Gastroenterol Méndez-Sánchez N. Non alcoholic fatty liver disease J. Ann Hepatol20098 Suppl 1 S3. 2Chen QRBraun RHu Yet al. Multi-SNP analysis of GWAS data identifies pathways associated with nonalcoholic fatty liver diseasej. PLoS One J Tushuizen MEBunck MCPouwels PJet al. Incretin mimetics as a novel therapeutic option for hepatic steatosis J. Liver Int Zhou SSXu JDZhu Het al. Simultaneous determination of original degraded ginsenosides and aglycones by ultra high performance liquid chromatography coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry for quantitative evaluation of Du-Shen-Tang the decoction of ginseng J. Molecules Huang SLHe XJLi ZFet al. Neuroprotective effects of ginsenoside Rg1 on oxygen-glucose deprivation reperfusion 10Tok DEkiz FBasar Oet al. Serum endocan levels in patients with chronic liver diseasej. Int J Clin Exp Med Mili 'c SLuli 'c D timac D. Non-alcoholic fatty liver disease and obesity biochemicalmetabolic and clinical presentations J. World J Gastroenterol e Ramos ANde Oliveira Rocha Bde Almeida Rêgo VR 3. et al. The linkage between psoriasis and non-alcoholic fat- PPARa ACOX1 ty liver disease a literature review J. Acta Dermatovenerol Croat Osumi THashimoto T. Acyl-CoA oxidase of rat liver a new enzyme for fatty acid oxidation J. Biochem Biophys Res Commun Aon MABhatt NCortassa SC. Mitochondrial and cellular mechanisms for managing lipid excess J. Front Physiol Lu HJLiou SSChang CJet al. Ruscogenin protects against high-fat diet-induced nonalcoholic steatohepatitis in hamsters J. Planta Med

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