研究成果報告書

Size: px

Start display at page:

Download "研究成果報告書"

圆仁
5 years ago
Views:

1 ~ MMP13 promotes prostate tumor growth in the bone microenvironment by activating TGF-β. MMP MMP RNA microarray MMP7 MMP13 MMP13 MMP13 MMP13 ONO4817 TGFβ TGFβ MMP13 TGFβ MMP

2 1,2 PLS-P F344 MMP7 receptor activator of NF-kB ligand (RANKL) TGF TGFβ (Fig 1) β TGFβ TGFβ Smad2 TGFβ TGFβ TGFβ Smad2 β TGFβ RNA microarray plasmin chymase TGFβ protease rat collagenase 3 (MMP13) MMP13 MMP13

3 growth factor TGFβ TGFβ MMP13 TGFβ MMP13 TGFβ MMP13 in vivo MMP13 TGFβ TGFβ ONO4817 MMP2, MMP3, MMP9, MMP13 TB-interface MMP7 MMP13 up-regulation MMP2, MMP3, MMP9 TB-interface ONO-4817 MMP13 MMP7 MMP13 TB-interface TA-area MMP13 substrate assay (PLS-P) F344 MMP inhibitor ONO mg/kg 4 (Tumor bone interface) (Tumor alone area) H.E. (IPAP ) TRAP Acid Phosphatase kit (Sigma ) T-PER (PIERCE ) Micro BCA Protein Assay Kit (PIERCE ) MMP13 Santa Cruz Western blotting substrate assay TB-interface tumor alone area MMP13 activity TGFβ TGFβ ELISA assay kit(bender Med Systems) 1mg TB-interface MMP13 TB-interface MMP13 ONO4817 TB-interface MMP13 1/2 TA-area MMP13 ONO4817 Negative control (Fig. 2) MMP13 Western blotting MMP13 Fig. 2 MMP7 ONO4817 TB-interface ONO4817 MMP7 Fig.2 TB-interface

ONO4817 MMP13 ONO4817 ONO4817 34 Fig. 3 ONO4817 ONO4817 TB-interface ONO4817 ONO4817 Fig.3 TB-interface TA-area ONO4817 PCNA Fig.

4 β TGFβ TB-interface ONO4817 TGFβ TB-interface TA-area active form TGFβ total (active + latent form) TGFβ Fig.

4 ONO4817 MMP13 ONO4817 ONO Fig. 3 ONO4817 ONO4817 TB-interface ONO4817 ONO4817 Fig.3 TB-interface TA-area ONO4817 PCNA Fig. 4 TB-interface PCNA ONO4817 TB-interface TA-area ONO4817 TBinterface TA-area ONO4817 TB-interface TA-area ONO 4817 Fig. 4 β TGFβ TB-interface ONO4817 TGFβ TB-interface TA-area active form TGFβ total (active + latent form) TGFβ Fig. 5 active form TGFβ TA-area TB-interface ONO4817 active form TGFβ level PCNA Fig. 5 total TGFβ level TB-interface TA-area ONO4817 TB-interface ONO4817 total TGFβ level active form TGFβ TGFβ latent form active form MMP13 ONO4817

(5) まとめ我々は前立腺癌の骨転移巣では潜在型 TGFβ が骨芽細胞由来の MMP13 により活性化され前立腺癌や破骨細胞に TGFβ のシグナルが伝達された結果前立腺癌の骨転移巣が進展すると仮説を立てたこの仮説を検証する目的で我々の動物モデルを用い MMP13 抑制作用を持つ ONO-4817 の溶骨性変化および骨微小環境における腫瘍細胞の影響を検索した ONO4817 投与により

5 (5) まとめ我々は前立腺癌の骨転移巣では潜在型 TGFβ が骨芽細胞由来の MMP13 により活性化され前立腺癌や破骨細胞に TGFβ のシグナルが伝達された結果前立腺癌の骨転移巣が進展すると仮説を立てたこの仮説を検証する目的で我々の動物モデルを用い MMP13 抑制作用を持つ ONO-4817 の溶骨性変化および骨微小環境における腫瘍細胞の影響を検索した ONO4817 投与により TB-interface における活性型 TGFβ の量は対照群に比較して有意に減少したまた腫瘍細胞の細胞増殖破骨細胞の誘導および溶骨性変化も ONO4817 投与群で有意に抑制されていたこれらの結果から骨芽細胞から分泌された MMP13 は骨基質由来の TGFβ を活性化し腫瘍細胞の増殖破骨細胞骨芽細胞の誘導を促進することが示唆されたさらに骨微小環境におけるラット前立腺癌の増殖にプロテアーゼが重要な役割を果たしていることからヒト前立腺癌の骨転移巣において Protease Inhibitor が抑制効果を示すことが示唆された 5. 主な発表論文等雑誌論文 ( 計 9 件 ) 1.Futakuchi, M., Nannuru, K. C., Varney, M. L., Sadanandam, A., Nakao, K., Asai, K., Shirai, T., Sato, S. Y., and Singh, R. K. Transforming growth factor-beta signaling at the tumor-bone interface promotes mammary tumor growth and osteoclast activation. Cancer Sci 100, 71-81, 査読有 2.Wilson, T. J., Nannuru, K. C., Futakuchi,M., Sadanandam, A., and Singh, R. K.Cathepsin G enhances mammary tumor-induced osteolysis by generating soluble receptor activator of nuclear factor-kappab ligand. Cancer Res 68, , 査読有 3. Sato, S., Futakuchi, M., Ogawa, K., Asamoto, M., Nakao, K., Asai, K., and Shirai, T. Transforming growth factor beta derived from bone matrix promotes cell proliferation of prostate cancer and osteoclast activation-associated osteolysis in the bone microenvironment. Cancer Sci 99, , 査読有 4. Mizoguchi, Y., Ogawa, K., Futakuchi, M., Takahashi, S., Hirose, M., and Shirai, T. Differences in expression patterns of cell cycle regulators after cessation of genotoxic and non-genotoxic carcinogen treatment in the rat forestomach. J Toxicol Pathol 21, 77-87, 査読有 5. Kawai, N., Futakuchi, M., Yoshida, T., Ito, A., Sato, S., Naiki, T., Honda, H., Shirai, T., and Kohri, K. Effect of heat therapy using magnetic nanoparticles conjugated with cationic liposomes on prostate tumor in bone. Prostate 68, , 査読有 6. Kawabe, M., Futakuchi, M., Tamano, S., Shirai, T., and Hirose, M. Modifying effects of chitin, chitosan and their related compounds on 2-amino-3,8-dimethylimidazo[4,5-f]qu inoxaline (MeIQx) in a rat medium-term hepatocarcinogenesis model, and their post-initiation effects in a female rat 2-stage multi-organ carcinogenesis model. Food Chem Toxicol 46, , 査読有 7. Solheim, J. C., Reber, A. J., Ashour, A. E., Robinson, S., Futakuchi, M., Kurz, S. G., Hood, K., Fields, R. R., Shafer, L. R., Cornell, D., Sutjipto, S., Zurawski, S., LaFace, D. M., Singh, R. K., and Talmadge, J. E. Spleen but not tumor infiltration bydendritic and T cells is increased by intravenous adenovirus-flt3 ligand injection. Cancer Gene Ther 14, , 査読有 8. Hokaiwado, N., Asamoto, M., Futakuchi, M., Ogawa, K., Takahashi, S., and Shirai, T. Both early and late stages of hepatocarcinogenesis are enhanced in cx32 dominant negative

6 mutant transgenic rats with disrupted gap junctional intercellular communication. J Membr Biol 218, , 査読有 9. Futakuchi, M., Hirose, M., Kawabe, M., Yamaguchi, T., Sato, S.-Y., and Shirai, T. Combined chemopreventive effects of perilla or corn oil and indomethacin in a rat medium-term multi organ carcinogenesis model. J Toxicol Pathol 20, , 査読有学会発表 ( 計 15 件 ) 1. 二口充, 佐藤慎哉, 白井智之, 津田洋幸. 骨微小環境における前立腺癌の増殖機構 : TGFβ とプロテアーゼの関与. 第 26 回日本骨代謝学会学術集会大阪, 10 月 29 日, 佐藤慎哉, 二口充, 小川久美子, 白井智之. 骨微小環境における前立腺癌の進展に対する Docetaxel の効果. 第 17 回日本がん転移学会総会鹿児島,7 月 25 日, 二口充, 佐藤慎哉, 小川久美子, 白井智之. 骨微小環境における前立腺癌の増殖における MMP7 MMP13 の役割と治療標的としての有用性. 第 17 回日本がん転移学会総会鹿児島, 7 月 25 日, 佐藤慎哉, 二口充, 小川久美子, 内木綾, 白井智之. 骨微小環境における前立腺癌の進展に及ぼす COX2 阻害剤の効果. 第 15 回日本がん予防学会福岡,5 月 23 日, 二口充, 佐藤慎哉, 鈴木周五, 小川久美子, 朝元誠人, 白井智之. 骨微小環境に腫瘍間質相互作用における MMP13 の役割. 第 97 回日本病理学会総会石川,5 月 16 日, Chewonarin, T., 朝元誠人, 小川久美子, 唐明希, 二口充, 白井智之. Inhibition of prostate carcinogenesis by ellagic acid in vitro and in vivo. 第 24 回日本毒性病理学会学術集会名古屋, 2 月 7 日, 二口充, 佐藤慎哉, 小川久美子, 白井智之. 前立腺癌の骨微小環境下での増殖機構. 第 10 回癌と骨病変研究会東京, 11 月 17 日, Sato, S., Futakuchi, M., Asamoto, M., Azman, S., Naiki-Ito, A., and Shirai, T. Suppressive effect of COX inhibitor on osteolysis associated with prostate tumor growth in the bone microenvironment. 66th Annual Meeting of the Japanese cancer Association Yokohama,Oct. 3-5, Futakuchi, M., Sato, S., Asamoto, M., Takahashi, S., and Shirai, T. TGF-beta derived from bone promoted the development of prostate cancer bone metastasis. 66th Annual Meeting of the Japanese canser Association Yokohama, Oct. 3-5, 二口充. 骨微小環境における前立腺癌の増殖機構とその抑制. 第 12 回前立腺那須フォーラム宇都宮, 9 月 8 日, 佐藤慎哉, 二口充, 小川久美子, 白井智之. 骨微小環境における前立腺癌の進展 : COX2 阻害剤による溶骨性変化の抑制. 第 16 回日本がん転移学会総会富山, 7 月 9 日, 二口充, 佐藤慎哉, 小川久美子, 白井智之. 骨微小環境における前立腺癌の発育 : TGF-β の活性化機構と腫瘍の進展第 16 回日本がん転移学会総会富山,7 月 9 日, Kalyan, C. N., Futakuchi, M., Wilson, T. J., Singh, R. K., Varney, L. M., Vincent, T. M., and Marcusson, E. G. Up-regulation of soluble RANKL at tumor-bone interface is critical for mammary tumor-induced osteolysis. 98th Annual Meeting of American Association for Cancer Research Los Angeles, CA, April 14-18, 佐藤慎哉, 朝元誠人, 二口充, 内木綾, 白井智之. 前立腺癌の進展に伴う骨微小環境における TGF-β の役割. 第 96 回日本病理学会総会大阪, 3 月日, 二口充, 佐藤慎哉, 鈴木周五, 白井智之. 前立腺癌骨転移巣を促進する TGF-β の活性化機構の検索. 第 96 回日本病理学会総会大阪, 3 月日, 図書該当無し産業財産権該当無し 6. 研究組織 (1) 研究代表者二口充 (Futakuchi Mitsuru) 名古屋市立大学大学院医学研究科准教授研究者番号 : (2) 研究分担者該当無し (3) 連携研究者白井智之 (Shirai Tomoyuki) 名古屋市立大学大学院医学研究科教授研究者番号 :

121025　資料４　国民年金保険料の後紊制度の実施状況等について

121025　資料４　国民年金保険料の後紊制度の実施状況等について平成 24 年 10 月 25 日国民年金部資料 4 国民年金保険料の後納制度の実施状況等について高齢期の年金権の確保等を目的とした国民年金及び企業年金等による高齢期における所得の確保を支援するための国民年金法等の一部を改正する法律 ( 平