442 ChinJEvidBasedPediatr December204,Vol9,No6 hereditymodelandrecesivehereditymodelwasanalyzed.results TBgroupincluded435children,themeanagewas5.6 ye

Size: px

Start display at page:

Download "442 ChinJEvidBasedPediatr December204,Vol9,No6 hereditymodelandrecesivehereditymodelwasanalyzed.results TBgroupincluded435children,themeanagewas5.6 ye"

寮虫段
5 years ago
Views:

中国循证儿科杂志 204 年 2 月第 9 卷第 6 期 44 论著 DOI:0.3969/j.isn.673 550.204.06.

1 中国循证儿科杂志 204 年 2 月第 9 卷第 6 期 44 论著 DOI:0.3969/j.isn TLR2 基因多态性与中国汉族儿童结核病易感性的关联研究徐,3 放 2,3 谢兰品 2 董雅坤綦辉孙琳李洁琼肖婧焦伟伟申晨申阿东摘要目的探讨 TLR2 基因 5 个 SNP 位点多态性与中国汉族儿童结核病 (TB) 易感性的关联方法以 2005 年 2 月至 200 年 0 月在北京儿童医院临床诊断和确诊的 TB 且排除其他肺部感染的病例作为 TB 组, 并根据感染部位和严重程度分别分为肺 TB 亚组肺外 TB 亚组和重症 TB 亚组非重症 TB 亚组 ; 以健康查体且除外 TB 的儿童作为对照组应用高通量 MasARRAY 技术对于 TLR2 基因的 5 个 SNP 位点 :rs ( 等位基因 C/T) rs898830( 等位基因 A/G) rs76564( 等位基因 G/T) rs935252( 等位基因 A/G) rs ( 等位基因 C/T) 行基因分型, 比较 5 个 SNP 位点各基因型和等位基因频率在 TB 组和对照组的差异, 同时采用显性遗传和隐性遗传模式分析各 TB 亚组与对照组基因型的差异结果 TB 组 345 例, 平均年龄 (5.6±4.7) 岁, 男 29 例 ; 肺 TB 亚组 5 例 (43.8%), 肺外 TB 亚组 94 例 ; 重症 TB 亚组 55 例 (44.9%), 非重症 TB 亚组 90 例对照组 385 例, 年龄 (6.±3.8) 岁, 男 226 例 Hardy Weinberg 检验提示 TLR2 基因的 5 个 SNP 位点在 TB 组和对照组的基因型分布均符合遗传平衡 (P=0.54~0.992) 调整了年龄和性别因素后, rs 位点 TC CC 型和 C 等位基因频率 TB 组和对照组比较,OR=0.929~.07;rs 位点 GA GG 型和 G 等位基因频率 TB 组和对照组比较,OR=.00~.4;rs76564 位点 GT TT 型和 T 等位基因频率 TB 组和对照组比较,OR= 0.82~.0;rs 位点 GA GG 型和 A 等位基因频率 TB 组和对照组比较,OR=0.497~.89;rs 位点 CT CC 型和 C 等位基因频率 TB 组和对照组比较,OR=0.888~.034;, 差异均无统计学意义 (P 均 >0.05) 5 个 SNP 按照显性和隐性遗传模式分析, 各基因型 TB 组和对照组间差异均无统计学意义 (P 均 >0.05) 2TLR2 基因的 5 个 SNP 位点在显性或隐性遗传模式下, 基因型频率在肺 TB 亚组肺外 TB 亚组和对照组比较,OR=0.737~.326; 重症 TB 亚组非重症 TB 亚组和对照组比较,OR=0.675~.248; 差异均无统计学意义 (P 均 >0.05) 3TLR2 基因 5 个 SNP 位点在各染色体之间均无强连锁结论 TLR2 基因的 5 个 SNP 多态性与中国汉族儿童 TB 易感性不存在关联关键词结核病 ; 儿童 ; TLR2 基因 AssociationbetweenPolymorphismsofTollikereceptor2andthesuseptibilitytotuberculosis inchinesehanchildren XUFang,3,XIELan pin 2,3,DONGYa kun,qihui,sunlin,lijie qiong,xiaojin,jiaowei wei,shenchen,shen A dong (KeyLaboratoryofMajorDiseasesinChildrenandNationalKeyDisciplineofPediatrics(CapitalMedicalUniversity), MinistryofEducation,BeijingKeyLaboratoryofPediatricRespiratoryInfectionDiseases,BeijingPediatricResearchInstitute,Beijing Children shospital,capitalmedicaluniversity,beijing00045;2hebeikeydisciplineofmedicaldevelopment,hebeichest Hospital,Shijiazhuang05004,China;3hasequalcontributiontothisstudy)) CorespondingAuthor:SHENA dong,e mail:shenad6@hotmail.com AbstractObjectiveToinvestigatetheasociationbetweenpolymorphismsofTollikereceptor2 (TLR2) geneand tuberculosis(tb)inchinesehanchildren.methods Acase controlstudywasperformedintbpatientsobtainedfrompediatric patientswithtbadmitedtobeijingchildren shospitalbetweenfebruary2005andoctober200,andotherlunginfectionwas excluded.tbpatientswerediagnosedaspulmonarytb(ptb),extrapulmonarytb(eptb),severetuberculosis(sevtb)and non severetuberculosis(nonsevtb).healthycontrolswereperformedinhealthexaminationchinesehanchildren,andtb infectionwasexcluded.masarraywasusedtofindthediferenceof5snpsoftlr2gene,includingrs (alelec/t), rs898830(alelea/g),rs76564(aleleg/t),rs935252(alelea/g),rs (alelec/t)andgenotypingbetween TBgroupandthehealthycontrolgroup.ThenthediferenceofgenotypesbetweenTBandthecontrolgroupsdetectedwithdominant 作者单位儿科学国家重点学科, 省部共建儿科重大疾病研究重点实验室, 儿童呼吸道感染性疾病研究北京市重点实验室, 北京市儿科研究所, 首都医科大学附属北京儿童医院北京,00045;2 河北省医学重点发展学科, 河北省胸科医院石家庄,05004;3 共同第一作者通讯作者申阿东,E mail:shenad6@hotmail.com

2 442 ChinJEvidBasedPediatr December204,Vol9,No6 hereditymodelandrecesivehereditymodelwasanalyzed.results TBgroupincluded435children,themeanagewas5.6 years(sd4.7),male(n=29,63.5%);ptb(n=5,43.8%),eptb(n=94);sevtb(n=55,44.9%),nonsevtb(n= 90).Thecontrolgroupenroled385childrenwithmeanage6.(SD3.8)years,males(n=226,58.7%).Genotypefrequen ciesof5snpsincases,controlsandalsubjectsmethardy Weinbergequilibrium.Nostatisticalysignificantdiferencesinalelic andgenotypicdistributionsof5snpswereobservedbetweentbandcontrolgroups(p= ).afteradjustmentbyage andgender,thegenotypeofrs (tc,cc)andthefrequencyofalelecwerefoundnostatisticalsignificancecomparedwith thecontrolgroup( );rs898830(ga,gg)andthefrequencyofalelegwerealsofoundnosignificantdiference comparedwiththecontrolgroups(or=.0-.4);rs76564(gt,tt)andthefrequencyofaleletwerefoundno statisticalsignificancebetweentbandcontrolgroup(or= );rs935252(ga,gg)andthefrequencyofalelea werefoundnosignificantdiferencecomparedwiththecontrolgroup(or= )andrs (tt,ct)andthe frequencyofalelecwerefoundnostatisticalsignificancecomparedwiththecontrolgroup(or= )(p>0.05)too. 2 Neitherinthedominanthereditymodelnorrecesivehereditymodel,thegenotypedistributionofthe5SNPsincasesgroup significantlydiferedfromthatinthecontrolgroup,eitherinptbsubgrouporineptbsubgroup(or= ).and sameresultswerefoundinsevtbandnonsevtbsubgroups(or= ),p>0.05.3noldblockswereidentifiedin the5snps oftlr2.conclusion SNPsofTLR2geneswerenotasociatedwithTBsuseptibilityinChineseHanchildren. Keywords Tuberculosis; Children; TLR2genes 研究发现感染了结核分枝杆菌 (MTB) 的个体, 某些可为无临床表现的潜伏感染, 某些可发展为活动型结核病 (TB), 而 TB 病例中可根治抑或转化为难治性 TB [,2], 均提示宿主免疫应答的相关免疫基因在 TB 的发生发展中起着重要的作用 [3] Tol 样受体位于单核细胞和巨噬细胞表面, 是一种重要的模式识别受体, 是巨噬细胞最早接触 MTB 的抗原递呈分子 [4] 迄今为止, 人类已发现了 TLR~ TLR 共个 Tol 样受体家族成员, 其中 TLR2 基因及其信号通路更被认为在抗结核免疫中起着关键作用 [5] TLR2 基因可识别存在于 MTB 细胞壁上的阿拉伯甘露糖 PAMP 和肽聚糖 PGN 等成分, 通过启动细胞内信号传导, 激活转录因子和活化蛋白从而促使细胞因子表达, 进一步诱导机体的特异性免疫应答 TLR2 基因及其信号通路被认为是机体产生针对 MTB 非特异性和特异性免疫应答的重要途径 [6~9] 目前关于 TLR2 基因 SNP 位点与 TB 的易感性报道较少, 且结论不一, 缺乏中国人群的研究数据本文采用病例对照研究设计, 以首都医科大学附属北京儿童医院 ( 我院 ) 收治的 TB 患儿为病例组, 非 TB 健康儿童为对照组, 选取 TLR2 基因 5 个 SNP 位点进行分析, 探讨其与儿童 TB 易感性的关联方法. 伦理和知情同意本研究经我院伦理委员会审核同意, 并获得患儿监护人的知情同意.2 TB 诊断和分型标准儿童 TB 的诊断参考儿童肺结核的临床诊断标准和治疗方案 ( 试行 ) [0], 包括临床诊断和确诊 TB 病例其中重症 TB 为全身播散型 TB 和结核性脑膜炎 ; 非重症 TB 为除重症 TB 外的 TB.3 TB 组病例来源和亚组回顾性分析 2005 年 2 月至 20 年 0 月在我院呼吸科住院治疗的 TB 病例, 并调阅 TB 患儿的病史资料, 符合以下条件者行 TLR2 基因检测 : TB 确诊和临床诊断病例 ;2 汉族 ;3 有冻存血标本可以提取 DNA 者 ; 排除 :TB 外合并其他肺部感染的病例, 如肺炎等 ;2TB 部位和严重程度描述不完整的病例并根据 TB 感染部位和严重程度将 TB 组分别分为 2 个亚组 : 肺 TB 亚组和肺外 TB 亚组 ; 非重症 TB 亚组和重症 TB 亚组.4 对照组来源来自 200 年 8 月至 202 年 9 月我院门诊健康查体儿童, 取生化检查的剩余血标本, 并符合以下条件 : 无既往 TB 史, 除外 TB 感染 ;2X 线胸片未见异常 ;3 有 PPD 接种史 ;4 汉族其中对照组病例数和 TB 组病例数约匹配, 年龄和性别尽量匹配.5 TLR2 基因 5 个 SNP 位点分析.5. DNA 提取取外周静脉血 2mL,EDTA 抗凝, 采用 Qiagen 公司血液 DNA 提取试剂盒提取 DNA.5.2 SNP 的选择引物设计以及 SNP 分型 SNP 位点选择策略是以标签 SNP 为主, 并且补充文献报道的 SNP 位点, 共选择 5 个 SNP 位点 (rs ,rs898830,rs76564, rs935252,rs ) 进入本文分析标签 SNP 根据 Hapmap 数据库 (htp:// 的中国人群数据得到, 为了加强对于 5 非编码区和 3 非编码区的研究, 选取标签 SNP 的范围在基因的 5 端和 3 端各延伸 5000bp, 引物设计见表本研究采用 iplex GOLD (Sequenom MasARRAY ) 对所选位点的引物设计, 确保引物的特异性和反应的顺利进行 SNP 分型采用美国 Sequenom 公司的高通量飞行质谱 MasARRAY 技术, 按照说明书操作.6 统计学方法基因型和等位基因频率数据以百分比表示 ; 率的显著性采用 χ 2 检验 ; 人群的群体代表性用 Hardy Weinberg 平衡 (HWE) 分析, 采用 χ 2 检验 ; 应用 HWE 检验分析 TB 组和对照组基因型频率是否符合遗传平衡 ;TB 组和对照组的基因型及等位基因频率差异采用 Logistic 回归调整年龄和性别的影响 ;TB 组及其不同亚组易感性均采用显

3 中国循证儿科杂志 204 年 2 月第 9 卷第 6 期 443 表 TLR2 基因的 5 个 SNP 位点选择和引物设计 Tab 5SNPsandprimersofTLR2gene SNPs Area Reverseprimer Forwardprimer Primerextension rs Synonymousvariation ACGTTGGATGGATCTACAG AGCTATGAGCC rs Introns ACGTTGGATGCCCCTATTTT CTAGCACATT rs UTR ACGTTGGATGGTACATGTGA GCTAAATAG rs Introns ACGTTGGATGTCAAAGAC AGCAGAAAAAGG rs Introns ACGTTGGATGTGCTTCTTT GCACGGCCCAG ACGTTGGATGCTGCTTCA TATGAAGGATCAG ACGTTGGATGCCTTAAA AACTGGAAAAGGA ACGTTGGATGCCTTTAAA TTACTGTGTATC ACGTTGGATGGGGCT TTCCTGTAGTCATAC ACGTTGGATGTTTCCGT GTAGCCCCTGCTT GGGACAGTTTGAAGTCA ATTCAGAA CTTATATTATTATT TCCCCTGTTC CTTTTTAAGCAAATATAT ACCTAGAG AGCAGAAAAAGG TCTCTCTTA GGAATGTGGACACCAG 性遗传和隐性遗传模式分别进行分析,Logistic 回归分析各 TB 亚组与对照组基因型的差异采用 SNPStats 软件 (htp://bioinfo.iconcologia.net/snpstats/start.htm) 和 SPSS 8.0 软件 (Chicago,USA) 进行统计分析 P<0.05 为差异有统计学意义 2 结果 2. 一般情况 370 例 TB 患儿留有 DNA 样本, 其中 25 例因合并除 TB 外的其他肺部感染 TB 的严重程度数据缺失被排除,345 例进入分析平均年龄 (5.6±4.7) 岁 ; 男 29 例, 女 26 例 ; 肺 TB 亚组 5 例 (43.8%), 肺外 TB 亚组 94 例 ; 重症 TB 亚组 55 例 (44.9%), 非重症 TB 亚组 90 例对照组 385 例, 年龄 (6.±3.8) 岁 ; 男 226 例, 女 59 例 TB 组和对照组年龄性别匹配 (P 分别为 0.35 和 0.87) 2.2 TLR2 基因连锁不平衡分析图显示,TLR2 基因的 5 个 SNP 位点在各染色体之间均无强连锁 2.3 TLR2 基因 5 个 SNP 位点基因型和等位基因在 TB 组和对照组的差异分析 TLR2 基因 5 个 SNP 位点分型图如图所示 HWE 检验提示 TLR2 基因的 5 个 SNP 位点在 TB 组和对照组的基因型分布均符合遗传平衡,rs rs rs76564 rs 和 rs 的 P 分别为和表 2 显示, 调整了年龄和性别因素后,rs 位点 TC CC 型和 C 等位基因频率 TB 组和对照组差异无统计学意义 (OR=0 929~ 07);rs 位点 GA GG 型和 G 等位基因频率 TB 组和对照组差异无统计学意义 (OR= 0~ 4);rs76564 位点 GT TT 型和 G 等位基因频率 TB 组和对照组差异无统计学意义 (OR =0 82~ 0);rs 位点 GA GG 型和 G 等位基因频率两组差异无统计学意义 (OR=0 497~ 89);rs 位点 GG GT 型和 G 等位基因频率两组差异无统计学意义 (OR=0 888~ 034);P 均 > 个 SNP 位点按照显性和隐性遗传模型分析, 各基因型频率两组间差异均无统计学意义 (P>0 05) 图 TLR2 基因 SNP 位点的连锁不平衡分析 Fig LD plotof5 SNPsin TLR2 genein ChineseHan population 图 2 TLR2 基因 SNP 位点分型图 Fig2 TLR2geneSNPclassification

4 444 ChinJEvidBasedPediatr December204,Vol9,No6 表 2 TB 组和对照组 TLR25 个 SNP 位点基因型和等位基因频率比较 [n(%)] Tab2 ComparisonofTLR2genepolymorphismsbetween twogroups[n(%)] Genotype Control TB OR(95%CI) P ) (n=385) (n=345) rs :caaaaagtttgaagtcaattcagaa[c/t] GTAAGTCATCTGATCCTTCATATGA TT 75(45.5)63(46.6) Reference TC 78(46.2)55(44.3).07( )0.803 CC 32(8.3) 32(9.) 0.929( )0.636 CC+TC 20(54.5)87(48.7).052( )0.734 TT 75(45.5)63(46.6) Reference CC 32(8.3) 32(9.) 0.900( )0.690 TC+TT 353(9.7)38(82.8) Reference T 528(68.6)48(68.7) Reference C 242(3.4)29(3.3)0.993( )0.952 rs898830:atagtaaaataaatccagagaaatc[a/g] GAACAGGGGAAATAATAATATAAGA AA (28.8) 82(23.4) Reference GA 89(49.)96(56.0).68( )0.475 GG 85(22.) 72(20.6).4( )0.054 GG+GA 274(7.2)268(69.8)0.748( )0.088 AA (28.8) 82(23.4) Reference GG 85(22.) 72(20.6) 0.97( )0.624 GA+AA 300(77.9)278(72.4) Reference G 398(5.7)380(54.3).0( )0.39 T 372(48.3)320(45.7) Reference rs76564:tttttaagcaaatatatacctagag[g/t] TTCCTCATAATGACTCAAAAATAGT GG 05(27.3)03(29.4) Reference GT 88(48.8)74(49.7)0.82( )0.32 TT 92(23.9) 73(20.9) 0.926( )0.662 TT+GT 280(72.7)247(64.3).225( )0.474 GG 05(27.3)03(29.4) Reference TT 92(23.9) 73(20.9).74( )0.370 GG+GT 293(76.)277(72.) Reference G 398(5.7)380(54.3).0( )0.39 T 372(48.3)320(45.7) Reference rs935252:acaaagaataacactggttcatcag[a/g] TAAGAGAGACCTTTTTCTGCTGTCT GG 2(5.5) 0(0.029) Reference GA 32(34.3)8(33.7)0.497( )0.078 AA 232(60.3)222(63.4)0.96( )0.597 AA+GA 364(94.5)340(88.5).65( )0.39 GG 2(5.5) 0(2.9) Reference AA 232(60.3)222(63.4).95( )0.089 GG+GA 53(38.7)28(33.3) Reference G 74(22.6)38(9.7) Reference A 596(77.4)562(80.3).89( )0.77 Genotype Control TB (n=385) (n=345) 续表 2 OR(95%CI) P ) rs :cccagcgcgggaatgtggacaccag[c/t] GAAGCCGGCTCAGGTCGGCCCTCGG TT 22(0.057)7(0.049) Reference CT 3(34.0)2(34.6)0.888( )0.726 CC 232(60.3)22(60.6).06( )0.923 CT+CC 363(94.3)333(86.8).002( )0.987 TT 22(5.7) 7(4.9) Reference CC 232(60.3)22(60.6).32( )0.709 TT+CT 53(39.7)38(35.9) Reference T 75(22.7)55(22.) Reference C 595(77.3)545(77.9).034( )0.789 Notes TB:tuberculosisgroup;ORswereadjustedforsexandagein thecontrolgroupvstbgroupinalogisticregresionmodel.significant diferenceswereindicatedbypvalue<0.05.orsandpvaluewere theresultsby comparing the SNPs genotypes, dominantmodel, recesivemodel,aleleswiththereference 2.3 TLR2 基因 SNP 位点基因型在 TB 各亚组及对照组间差异分析如表 3 所示,TLR2 基因的 5 个 SNP 位点在显性和隐性遗传模式下, 基因型频率在肺 TB 亚组肺外亚组和对照组间差异均无统计学意义 (OR=0.737~ 326), 重症 TB 亚组非重症 TB 亚组和对照组间差异亦无统计学意义 (OR=0.675~.248);P 均 > 讨论基于 Tol 样受体 TLR2 基因及其信号通路在抗结核免疫中起着关键作用, 为研究 TLR2 基因多态性与中国汉族儿童 TB 易感性的关联, 本研究利用高通量 MasARRAY 平台, 开展了病例对照研究结果提示 TLR2 基因 5 个 SNP 位点基因型等位基因在对照组和 TB 组及其亚组的分布差异均无统计学意义 (P 均 >0.05) 目前有关 TLR2 基因 SNP 位点和 TB 的易感性仅有 Arg753Gln(rs ) 和 Arg677Trp(rs ) 是关注的热点, 土耳其几内亚比绍突尼斯以及中国人群的研究中均有相关报道土耳其儿童的研究中,TB 组纳入 98 例, 结核潜伏感染 (LTBI) 组纳入 200 例, 分层研究发现 rs 的杂合型及 Gln 等位基因型频率在肺 TB 和肺外 TB 组中明显高于 LTBI 组 [], 提示 rs 多态性与儿童 TB 易感相关 [2] 几内亚比绍人群研究中,TB 组 32 例, 健康对照组 347 例, 选取了包括 rs 在内的 TLR2,TLR4 和 TLR9 基因上的 5 个 SNP 位点, 结果显示 rs 多态性与 TB 的易感并不相关 [3] 突尼斯人群研究 TB 组 33 例 ( 年龄 20~75 岁 ), 健康对照组 33 例 ( 年龄 22~50 岁 ), 研究发现 rs 的 C/T 杂合突变型在

5 中国循证儿科杂志 204 年 2 月第 9 卷第 6 期 445 表 3 TLR2 基因 5 个 SNP 位点基因型在 TB 亚组和对照组显性和隐性遗传模式分析 [n(%)] Tab3 Genotypingof5SNPsofTLR2genepolymorphismsincontrolsvsPTB,controlvsEPTB,controlsvsNonsevTBandcontrolsvssevereTBindominanthereditymodelandre cessivehereditymodel[n(%)] Group Genotype Genotype OR(95%CI) ) P ) OR(95%CI) 2) P 2) Genotype Genotype OR(95%CI) ) P ) OR(95%CI) 2) P 2) rs TT CC+TC TTvsCC+TC TTvsCC+TC CC TT+TC CCvsTC+TT CCvsTC+TT Control(385) 75(45.6) 20(54.4) (9.7) 32(8.3) PTB(5) 70(46.3) 8(53.6).030( ) (55.6) 67(44.4) 0.894( ) EPTB(94) 94(48.5) 00(5.5).48( ) ( ) (56.7) 84(43.4).048( ) ( ) 0.70 SeverityTB(50) 78(50.3) 80(5.6).248( ) (59.4) 63(40.6) 0.973( ) NonsevTB(90) 84(36.5) 46(53.4) 0.952( ) ( ) (54.2) 87(45.8) 0.868( ) ( ) rs AA GG+GA AAvsGG+GA AAvsGG+GA GG AA+GA GGvsGA+AA GGvsGA+AA Control(385) (28.9) 274(7.) (5.8) 85(48.2) PTB(5) 35(23.2) 6(76.8) 0.744( ) (48.3) 78(5.7) 0.744( ) EPTB(94) 46(23.7) 48(76.3) 0.737( ) ( ) (82.5) 34(7.5).326( ) ( ) SeverityTB(50) 35(22.6) 20(77.4) 0.675( ) (80.6) 30(9.4).45( ) NonsevTB(90) 46(24.2) 44(75.8) 0.796( ) ( ) (77.9) 42(22.) 0.933( ) ( ) rs76564 GG TT+GT GGvsTT+GT GGvsTT+GT TT GG+GT TTvsGT+GG TTvsGT+GG Control(385) 05(27.3) 280(72.7) (89.8) 39(0.2) PTB(5) 47(3.) 04(68.9).247( ) (52.3) 72(47.7).27( ) EPTB(94) 52(26.8) 42(73.2) 0.979( ) (49.0) 99(5.0).099( ) ( ) 0.74 SeverityTB(50) 43(27.7) 2(72.3).04( ) (50.3) 77(49.7).08( ) NonsevTB(90) 58(25.2) 72(74.8).9( ) ( ) (5.6) 92(48.4).090( ) ( ) 0.56 rs AA GG+GA AAvsGG+GA AAvsGG+GA GG GA+AA GGvsGA+AA GGvsGA+AA Control(385) 232(60.4) 53(39.6) (94.5) 2(5.5) PTB(5) 93(60.8) 60(39.2).02( ) (65.6) 52(34.4).706( ) EPTB(94) 23(63.) 72(36.9).57( ) ( ) (66.0) 66(34.0) 2.93( ) ( ) 0.73 SeverityTB(50) 99(62.7) 59(37.3).82( ) (67.) 5(32.9).75( ) NonsevTB(90) 8(62.) 72(37.9).095( ) ( ) (64.7) 67(35.3).794( ) ( ) 0.96 rs CC TT+CT CCvsTT+CT CCvsTT+CT TT CC+CT TTvsCC+CT TTvsCC+CT Control(385) 232(60.4) 53(39.6) (94.3) 22(5.7) PTB(5) 96(63.6) 55(36.4) 0.74( ) (68.2) 48(3.8).254( ) EPTB(94) (57.2) 83(42.8) 0.864( ) ( ) (6.6) 73(38.4).032( ) ( ) SeverityTB(50) 89(57.4) 66(42.6) 0.882( ) (6.9) 59(38.).36( ) NonsevTB(90) 2(52.6) 09(47.4).70( ) ( ) (69.5) 58(30.5).024( ) ( ) Notes TB:tuberculosisgroup;PTB:pulmonarytuberculosis;EPTB:extra pulmonarytb.sevtb:severetb;nonsevtb:notseveretb.orswereadjustedforsexandageincontrolgroupvstbsubgroupinalogis ticregresionmodel.significantdiferenceswereindicatedbypvalue<0.05.)vscontrol;2)ptbvseptborseveretbvsnotseveretb

6 446 ChinJEvidBasedPediatr December204,Vol9,No6 TB 组 (3 例 ) 明显高于对照组 (0 例 ), 且在 TB 组和对照组中均未发现纯合突变型 (T/T) [4] 韩国人群研究中, 结核样型麻风病组 4 例, 瘤型麻风病组 45 例, 健康对照组 45 例, 选取 TLR2 基因启动子区 SNP 位点进行研究, 结果显示突变型等位基因 (C/T) 仅出现在瘤型麻风病组中, 结核样型麻风病组与健康对照组中均未检出, 提示该突变可能是导致瘤型麻风病易感因素, 但与 TB 易感没有相关性 [5] 此外,Yim 等研究位于 TLR2 内含子的微卫星多态性位点与韩国人群 TB 的易感性,TB 组 76 例, 健康对照 96 例, 对 TLR2 基因的关键区域 ( 启动子区外显子内含子限制内切酶剪切位点荧光素酶报告基因位点 ) 选取了 SNPs 位点进行研究, 结果发现 TB 组内含子区的 GT 重复最少, 提示低 GT 重复可减弱 TLR2 基因启动子活性, 从而导致易感 TB [6] 中国东南部人群的研究显示,rs 和 rs 的突变非常罕见, 并且与中国人群的 TB 易感并没有相关性 [7] 结合本研究未发现 TLR2 基因的 5 个 SNP 位点与 TB 易感呈现相关性, 且不同国家地区及种族的相关研究结论不尽一致, 分析有如下几种可能 :TB 的发生发展是由多个基因共同调控, 本文所研究的 TLR2 基因的调控作用可能不占主导地位, 其作用的发挥是在一个巨大的网络和通路中的多个基因共同协调的结果 ;2 研究中不同种族的遗传差异性研究样本量的大小和方法学的差异, 可能导致研究结果出现差异 ;3 一般认为儿童的免疫功能尚未完善, TB 的发生及发展过程与成人存在一定差异, 本文所研究的 TLR2 基因与儿童 TB 无相关性, 未必不在成人 TB 中无相关性本文未发现 TLR2 基因多态性与汉族儿童 TB 易感的相关性, 该基因及其 SNP 位点与 TB 的关系还需在后续的研究中进一步揭示参考文献犤犦 Globaltuberculosisreport202.WorldHealthOrganization 牞 202 犤 2 犦 BloomBR 牞 SmalPM.Theevolvingrelationbetweenhumans andmycobacteriumtuberculosis.nengljmed 牞 998 牞 338 牗 0 牘牶犤 3 犦 BasuRR 牞 WhitakerE 牞 KampmannB.Curentunderstanding oftheimmuneresponsetotuberculosisinchildren.curopin InfectDis 牞 202 牞 25 牗 3 牘牶犤 4 犦 AkiraS 牞 TakedaK 牞 KaishoT.Tol likereceptors 牶 critical proteinslinkinginnateandacquiredimmunity.natimmunol 牞 200 牞 2 牗 8 牘牶犤 5 犦 WetzlerLM.TheroleofTol likereceptor2inmicrobial diseaseandimmunityvaeeine 牞 2003 牞 2 牗 S2 牘牶犤 6 犦 MeansTK 牞 WangS 牞 LienE 牞 etal.humantol likereceptors mediatecelularactivationbymycobacteriumtuberculosis.j Immunol 牞 999 牞 63 牗 7 牘牶犤 7 犦 WetzlerLM.TheroleofTol likereceptor2inmicrobial diseaseandimmunity.vaeeine 牞 2003 牞 2 牗 S2 牘牶犤 8 犦 ReilingN 牞 HolscherM 牞 FelrenbachA 牞 etal.cutingedge 牶 Tol likereceptor 牗 TLR 牘 2 andtlr4 mediatedpathogen recognitioninresistancetoairborneinfectionwith Mycobacteriumtuberculosis.JImmunol 牞 2002 牞 69 牗 7 牘牶犤 9 犦 LorenLzE 牞 MiraJP 牞 FreesKL 牞 etal.relevanceofmutations inthetlr4receptorinpatientswithgram negativeseptic shock.axchinternmed 牞 2002 牞 62 牗 9 牘牶犤 0 犦 TheSubspecialtyGroupofRespiratoryDiseasesTheSocietyof Pediatrics 牞 ChineseMedicalAsociation 牗中华医学会儿科学分会呼吸学组牘.Diagnosticstandardsandtherapeutic recommendationsforpulmonarytuberculosisinchildren.chin JPediatr 牗中华儿科杂志牘牞 2006 牞 44 牗 4 牘牶犤犦 OgusAC 牞 YoldasB 牞 OzdemirT 牞 etal.thearg753gln polymorphismofthehumantol likereceptor2genein tuberculosisdiseasej.eurrespirj 牞 2004 牞 23 牗 2 牘牶犤 2. 犦 DalgicN 牞 TekinD 牞 KayaaltiZ 牞 etal.arg753gln polymorphismofthehumantol likereceptor2genefrom infectiontodiseaseinpediatrictuberculosis.jhumimmunol 牞 20 牞 72 牗 5 牘牶犤 3 犦 OlesenR 牞 WejseC 牞 VelezDR 牞 etal.dc SIGN 牗 CD209 牘 pentraxin3andvitamindreceptorgenevariantsasociatewith pulmonarytuberculosisriskinwestafricans.jgenes Immunl 牞 2007 牞 8 牗 6 牘牶犤 4 犦 Ben AliM 牞 BarboucheMR 牞 BousninaS 牞 etal.tol like receptor2arg677trppolymorphismisasociatedwith susceptibilitytotuberculosisintunisianpatients.jclindiagn LabImmunol 牞 2004 牞牗 3 牘牶犤 5 犦 KangTJ 牞 ChaeGT.DetectionofTol likereceptor2 牗 TLR2 牘 mutationinthelepromatousleprosypatients.femsimmunol MedMicrobiol 牞 200 牞 3 牗牘牶犤 6 犦 Yim J 牞 LeeHW 牞 LeeHS 牞 etal.theasociationbetween mierosatelitepolyn0rphismsinintronofthehumantol like receptor2geneandtuberculosisamongkoreans.genes Immumol 牞 2006 牞 7 牗 2 牘牶犤 7 犦 XueY 牞 ZhaoZQ 牞 WangHJ 牞 etal.tol likereceptors2and4 genepolymorphismsinasoutheasternchinesepopulationwith tuberculosis.intjimmunogenet 牞 200 牞 37 牗 2 牘牶 ( 收稿日期 : 修回日期 :204 27) ( 本文编辑 : 丁俊杰 )