茂县土地岭大熊猫走廊带

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禾师
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1 中国组织工程研究 Chinese Journal of Tissue Engineering Research 牙科修复材料苯扎氯铵表面活性剂对 5 种常见口腔致病菌的体外抑菌效果研究原著代静, 陈燕斌, 陈珊, 任静, 李昆蔓, 杨军英 ( 中山大学附属第一医院口腔科, 广东省广州市 ) DOI: /j.issn ORCID: X( 杨军英 ) 文章快速阅读 : 苯扎氯铵表面活性剂对 5 种常见口腔致病菌的体外抑菌效果复苏培养 : 牙龈卟啉单胞菌 (P.g) 中间普氏菌 (P.i) 伴放线放线杆菌 (A.a) 变形链球菌 (S.m) 粪肠球菌 (E.f ) 代静, 女,1991 年生, 安徽省阜阳市人, 汉族, 中山大学附属第一医院口腔科在读硕士, 主要从事口腔内科方面的研究琼脂扩散法检测 :0.1% 苯扎氯铵 3% 双氧水与 5.25% 次氯酸钠对 P.g P.i A.a S.m E.f 产生的抑菌环试管稀释法检测 : 苯扎氯铵对 P.g P.i A.a S.m E.f 的最低抑菌浓度通讯作者 : 杨军英, 硕士, 教授, 硕士生导师, 中山大学附属第一医院口腔科, 广东省广州市比较 :0.1% 苯扎氯铵 3% 双氧水与 5.25% 次氯酸钠对 P.g P.i A.a S.m E.f 抑菌效果观察 : 试管内液体浑浊情况, 平板上细菌生长情况, 测定最低抑菌浓度中图分类号 :R318 文献标识码 :A 稿件接受 : 结果提示 :0.1% 苯扎氯铵对 5 种常见口腔致病菌 P.g P.i A.a S.m E.f 具有较强的抑菌效果文题释义 : 苯扎氯铵 : 常用的消毒防腐药, 是一种季铵盐类阳离子表面活性剂, 在水溶液中显中性或弱碱性反应, 振摇时产生大量泡沫, 可离解成阳离子活性基团, 能改变细菌胞浆膜通透性, 使菌体胞浆物质外渗导致细菌死亡, 具有广谱高效的杀菌能力, 在医疗手术时被广泛用于皮肤和手术器械的消毒, 也被广泛用于杀菌消毒防腐等方面口腔致病菌 : 口腔内的微生物以细菌为主, 目前已知至少 700 余种细菌, 是人类与微生物长期共存进化过程中形成的最复杂的微生物群, 正常情况下对宿主无不良影响, 当菌群失调时, 某些具有显著毒力或致病性的致病菌过度繁殖, 能通过多种机制干扰宿主防御能力, 具有引发疾病的潜能如牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌等均是常见的口腔致病菌摘要背景 : 目前, 苯扎氯铵已被用于牙科修复材料中, 能增强材料的抗菌性并作用持久然而, 目前尚缺乏苯扎氯铵与牙髓牙周感染相关细菌作用的研究目的 : 研究苯扎氯铵对口腔主要致病菌的体外抑菌效果方法 : 采用琼脂扩散法比较 0.1% 苯扎氯铵体积分数 3% 双氧水生理盐水与 5.25% 次氯酸钠对牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌的体外抑菌效果, 采用试管稀释法测定苯扎氯铵对上述细菌的最低抑菌浓度结果与结论 :1 对牙龈卟啉单胞菌与中间普氏菌,0.1% 苯扎氯铵表现出了较强的抑菌效果, 抑菌效果弱于 5.25% 次氯酸钠 (P < 0.05); 对牙龈卟啉单胞菌,0.1% 苯扎氯铵的抑菌效果与体积分数 3% 双氧水无差异 (P > 0.05); 对中间普氏菌,0.1% 苯扎氯铵的抑菌效果优于体积分数 3% 双氧水 (P < 0.05); 对伴放线放线杆菌和变形链球菌,0.1% 苯扎氯铵的抑菌效果均优于体积分数 3% 双氧水 (P < 0.05), 与 5.25% 次氯酸钠无差异 (P > 0.05); 对粪肠球菌,0.1% 苯扎氯铵的抑菌效果优于体积分数 3% 双氧水 (P < 0.05), 弱于 5.25% 次氯酸钠 (P < 0.05); 体积分数 3% 双氧水对粪肠球菌不产生抑菌环 ;20.1% 苯扎氯铵对牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌的最低抑菌浓度分别为 16,2,4,2,4 mg/l;3 结果表明,0.1% 苯扎氯铵对牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌具有较强的抑菌效果关键词 : 口腔材料 ; 苯扎氯铵溶液 ; 牙龈卟啉单胞菌 ; 中间普氏菌 ; 伴放线放线杆菌 ; 变形链球菌 ; 粪肠球菌 ; 琼脂扩散法 ; 生物材料主题词 : 牙科材料 ; 苯扎胺化合物 ; 微生物敏感性试验 ; 组织工程基金资助 : 横向课题 (K ): 苯扎氯铵对口腔疾病常见致病菌的体外抑菌实验 Dai Jing, Master candidate, Department of Stomatology, the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou , Guangdong Province, China Corresponding author: Yang Jun-ying, Master, Professor, Master s supervisor, Department of Stomatology, the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou , Guangdong Province, China 文章编号 : (2018)

2 代静, 陈燕斌, 陈珊, 任静, 李昆蔓, 杨军英. 牙科修复材料苯扎氯铵表面活性剂对 5 种常见口腔致病菌的体外抑菌效果 [J]. 中国组织工程研究,2018,22(18): DOI: /j.issn In vitro antibacterial effect of benzalkonium chloride on five common oral pathogens Dai Jing, Chen Yan-bin, Chen Shan, Ren Jing, Li Kun-man, Yang Jun-ying (Department of Stomatology, the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou , Guangdong Province, China) Abstract BACKGROUND: Benzalkonium chloride has been used in dental restorative materials to enhance the long-lasting antibacterial properties of materials. OBJECTIVE: To evaluate the antibacterial activity of benzalkonium chloride on oral common pathogenic bacteria in vitro. METHODS: The agar diffusion method was used to determine the inhibitory effects of antibacterial agents, 0.1% benzalkonium chloride, 3% H 2O 2 and 5.25% sodium hypochlorite, on five kind of oral pathogens, Porphyromonas gingivalis (P.g), Prevotella intermedia (P.i), Actinobacillus actionmycemcomitans (A.a), Streptococcus mutans (S.m) and Enterococcus faecalis (E.f). The tube dilution method was used to detect the minimal inhibitory concentration of benzalkonium chloride against the five bacteria mentioned above. RESULTS AND CONCLUSION: The antibacterial effect of 0.1% benzalkonium chloride on P.g was not significantly different from that of 3% hydrogen peroxide (P > 0.05), while 0.1% benzalkonium chloride showed better effect on P.i than 3% hydrogen peroxide (P < 0.05). On P.g and P.i, the antibacterial effect of 0.1% benzalkonium chloride was worse than that of 5.25% sodium hypochloritethe (P < 0.05). The antibacterial effect of 0.1% benzalkonium chloride on A.a and S.m was better than that of 3% hydrogen peroxide (P < 0.05), and similar to that of 5.25% sodium hypochlorite (P > 0.05). The antibacterial effect of 0.1% benzalkonium chloride on E.f was better than that of 3% hydrogen peroxide (P < 0.05), but worse than that of 5.25% sodium hypochlorite (P < 0.05). The minimal inhibitory concentration of benzalkonium chloride to P.g, P.i, A.a, S.m, E.f was 16, 2, 4, 2, 4 mg/l, respectively. To conclude, 0.1% benzalkonium chloride has strong antibacterial effects on P.g, P.i, A.a, S.m and E.f. Subject headings: Dental Materials; Benzalkonium Compounds; Microbial Sensitivity Tests; Tissue Engineering Funding: A Transverse Issue: In Vitro Bacteriostasis Experiment of Benzalkonium Chloride on Common Pathogens of Oral Diseases, No. K 引言 Introduction 牙髓病和牙周病是口腔临床中较为常见慢性感染性疾病, 细菌微生物是二者的主要病因, 如牙龈卟啉单胞菌 (Porphyromonas gingivalis,p.g) 中间普氏菌(Prevotella intermedia,p.i) 变形链球菌(Streptococcus mutans, S.m) 粪肠球菌(Enterococcus faecalis,e.f) 及伴放线放线杆菌 (Actinobacillus actinaomycetemcomitans,a.a) 等, 与牙髓病和牙周病的发生发展密切相关 [1-6] 在口腔临床医疗中, 由于此类疾病的特点, 消毒防腐类药应用非常广泛, 包括 : 卤素化合物 ( 次氯酸钠 ) 双氧水去污剂( 阴离子, 阳离子 ) 氯己定等, 其中关于次氯酸钠和双氧水控制牙髓和牙周感染的研究居多 [7-10] 苯扎氯铵是一种常见的阳离子去污剂, 季铵盐类化合物, 已被广泛用于牙科修复材料, 如玻璃离子复合树脂材料 [11-12], 抗菌性强并作用持久然而, 目前苯扎氯铵与牙髓牙周感染相关细菌作用的研究较少, 因此有必要对其抗菌性能进行更多的研究研究的主要目的在于探讨苯扎氯铵对牙髓牙周感染相关微生物 ( 牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌及粪肠球菌 ) 的抗菌效果, 并检测苯扎氯铵对其最小抑菌浓度, 为苯扎氯铵进一步应用于牙周牙髓疾病的临床治疗提供依据 1 材料和方法 Materials and methods 1.1 设计以细菌为观察对象的体外抑菌实验 1.2 时间及地点实验于 2015 年 9 月至 2016 年 4 月在中山大学口腔医学研究所完成 1.3 材料实验菌株与药品 : 牙龈卟啉单胞菌 (ATCC33277) 中间普氏菌 (ATCC25611) 伴放线放线杆菌 (ATCC43717) 变形链球菌 (ATCC25175) 粪肠球菌 (ATCC29212), 以上菌种均购自广东省微生物研究所 ; 脑心浸液肉汤 (BHI, 北京陆桥技术有限责任公司 ); 胰酪胨大豆肉汤 (TSB, 美国 BD 公司 ); 血平板 ( 基本配方 : 蛋白胨 10 g/l, 牛肉浸出粉 10 g/l, 氯化钠 5 g/l, 琼脂 15 g/l, 脱纤维羊血或兔血 80 ml/l, 最终 ph 值 7.4±0.2, 广东环凯微生物科技有限公司 ); 优可适苯扎氯铵溶液 ( 规格 150 ml 0.15 g, 批号 : A08, 汕头保税区洛斯特制药有限公司 ) 体积分数 3% 双氧水 (H 2 O 2, 规格 100 ml/ 瓶, 批号 :H , 广东恒健制药有限公司 );5.25% 次氯酸钠溶液 (NaOCl, 规格 500 ml/ 瓶, 批号 :ZH , 上海普瑞生物研究所 ); 9 g/l 生理盐水 ( 规格 500 ml:45 g, 批号 :L , 四川科伦药业股份有限公司 ) 1.4 实验方法样品准备 0.1% 优可适苯扎氯铵溶液体积分数 3% 双氧水及 5.25% 次氯酸钠均密闭避光保存牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌复苏将牙龈卟啉单胞菌与伴放线放线杆菌悬浮于脑心浸液肉汤中,37 培养箱培养 48 h, 中间普氏菌, 变形链球菌与粪肠球菌悬浮于胰酪胨大豆肉汤中,37 培养箱培养 48 h 后取出,3 000 r/min 离心 10 min, 弃上清, 菌液调至 0.5Mcfarland 比浊标准 ( 浓度为用 CFU/mL) 备琼脂扩散法实验分 4 组,0.1% 苯扎氯铵体积分数 3% 双氧水 5.25% 次氯酸钠及对照组生理盐水将已 121 灭菌 15 min 的直径 6 mm 圆形滤纸片, 分别浸泡上述 4 种药液各 1 ml 中, 每种溶液 5 片滤纸片,5 min 后取出沥 2850 ISSN CN /R CODEN: ZLKHAH

Dai J, Chen YB, Chen S, Ren J, Li KM, Yang JY. In vitro antibacterial effect of benzalkonium chloride on five common oral pathogens. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2018;22(18):2849-2854. DOI:10.

3 Dai J, Chen YB, Chen S, Ren J, Li KM, Yang JY. In vitro antibacterial effect of benzalkonium chloride on five common oral pathogens. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2018;22(18): DOI: /j.issn 干用无菌棉签分别沾取已制备好的 5 种菌液, 在血琼脂板上 4 个方向轻轻平行交叉画线, 均匀涂干将浸有不同药液的滤纸片分别放于已接种细菌的琼脂平板表面的不同区域 ( 每个培养皿分 4 区, 分别放置 4 组浸有不同药液的滤纸片 ), 做好标记每种细菌实验重复 6 次将各板置于 37 培养箱中,48 h 后取出, 以游标卡尺测量各板上抑菌环直径, 每环测量 3 次取平均值, 记录结果液体试管法测定苯扎氯铵对实验细菌的最低抑菌 [13] 浓度将 0.1% 苯扎氯铵溶液用液体培养基对倍稀释, 从 1 1 起连续对倍稀释至共 12 个药物浓度培养基所含苯扎氯铵分别为 :1 000,500,250,125,63,31,16, 8,4,2,1,0.5 mg/l( 即 0.10%,0.05%,0.025%, %, %, %, %, %, %, %, %, %) 将各菌分别接种入装有 2 ml 培养基的试管中, 菌液调至 0.5Mcfarland 比浊标准 ( 浓度为 CFU/mL) 备用吸取 1 ml 制备好的菌液, 分别加入已制备好的药液中 (1 ml) 混匀, 放入 37 培养箱中培养 48 h 后取出摇匀试管, 观察试管内液体浑浊度, 吸取 50 μl 接种于平板上, 37 培养箱培养 48 h, 观察平板上有无细菌生长以试管内液体清亮透明且平板上无细菌生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度实验重复 3 次阴性对照组未加入抑菌药物, 可见试管内液体培养基浑浊, 平板上大量细菌生长 ; 空白对照组只加入等量培养基, 可见试管内液体清澈透明, 平板上未见细菌生长 1.5 主要观察指标琼脂扩散法观察 4 种药液对实验细菌产生的抑菌环, 测量抑菌环直径 ; 液体试管法观察含不同浓度梯度苯扎氯铵的试管内细菌生长抑制情况, 平板内细菌生长情况 1.6 统计学分析用 SPSS 20.0 软件进行统计分析, 实验数据以 x _ ±s 表示各组抑菌环大小比较采用单因素方差分析, 组间采用最小显著法 (least significant difference,lsd) 两两比较检验水准 α= 结果 Results 2.1 不同溶液对 5 种细菌的抑菌环除对照组外, 每种溶液对 5 种细菌均产生抑菌环, 其中体积分数 3% 双氧水对粪肠球菌不产生抑菌环, 图 1 示 0.1% 苯扎氯铵体积分数 3% 双氧水 5.25% 次氯酸钠及生理盐水牙龈卟啉单胞菌产生的抑菌环 2.2 单因素方差分析结果对牙龈卟啉单胞菌与中间普氏菌,0.1% 苯扎氯铵表现出了较强的抑菌效果, 抑菌环直径分别为 (14.2±1.0),(15.7±0.4)mm, 然而其抑菌效果均次于 5.25% 次氯酸钠 (P < 0.05);0.1% 苯扎氯铵对牙龈卟啉单胞菌的抑菌效果与体积分数 3% 双氧水比较差异无显著性意义 (P > 0.05); 对中间普氏菌,0.1% 苯扎氯铵优于体积分数 3% 双氧水 (P < 0.05);0.1% 苯扎氯铵对伴放线放线图注 : 图中 1 为生理盐水,2 为 0.1% 苯扎氯铵,3 为 5.25% 次氯酸钠,4 为体积分数 3% 双氧水 0.1% 苯扎氯铵 5.25% 次氯酸钠体积分数 3% 双氧水对牙龈卟啉单胞菌均产生抑菌环图 1 不同药液对牙龈卟啉单胞菌的抑菌环 Figure 1 Bacteriostatic rings produced by different antibacterial agents to Porphyromonas gingivalis 杆菌和变形链球菌的抑菌效果均优于体积分数 3% 双氧水 (P < 0.05), 与 5.25% 次氯酸钠比较差异无显著性意义 (P > 0.05),0.1% 苯扎氯铵对两者抑菌环直径分别为 (9.7±0.9), (13.4±1.2)mm;0.1% 苯扎氯铵对粪肠球菌的抑菌环直径为 (8.3±0.5)mm, 抑菌效果优于体积分数 3% 双氧水 (P < 0.05), 较 5.25% 次氯酸钠差 (P < 0.05), 体积分数 3% 双氧水对粪肠球菌不产生抑菌环, 见表苯扎氯铵对各菌种的最低抑菌浓度苯扎氯铵对牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌的最低抑菌浓度分别为 16,2,4,2,4 mg/l, 见表 2 3 讨论 Discussion 龋病牙髓病及牙周疾病主要是由细菌性感染引起, 因此, 这些疾病的诊断预防和治疗干预主要针对相关的致病微生物目前, 预防龋齿最常见策略是通过定期刷牙机械去除牙齿修复体或义齿上的生物膜, 然而, 采用机械菌斑控制方法并不能完全去除口腔中的菌斑生物膜, 因此, 化学抗菌制剂的使用不可或缺牙髓治疗即根管治疗术是临床上治疗牙髓炎和根尖周炎最常用的手段, 主要通过根管预备根管消毒和根管充填 3 大步骤完成根管预备是通过化学和机械过程清除根管系统中的感染物, 即根管清理与成形研究表明, 机械清创可去除根管系统中的细菌及病变组织, 减少根管中细菌微生物量, 但并不能实现彻底灭菌 [14] 而随着根管治疗技术的发展, 口腔医务研究者开始重视根管的成形和清理, 强调机械用于快速成形根管, 以便于根管化学冲洗液进入整个根管系统, 使灭菌更加彻底 [14-16] 同样的, 临床上也不能忽略牙周袋内冲洗对牙周治疗的重要性一般, 牙龈炎症可通过专业的器械清洁恢复到健康状态然而, 牙周炎不同于牙龈炎, 牙周炎患者牙周组织破坏相对严重, 黏附在深牙周袋底或根分叉等菌斑易堆积区域的微生物很难以清除研究表明, 在牙周治疗中, 抗菌药物局部袋内冲洗不仅可减少牙周袋内细菌微生物量, 还可改善牙龈炎症, 控制牙龈出血 [9,17] 因此, 临床上治疗牙周疾病时, 常使用化学抗菌制剂作为 P.O. Box 10002, Shenyang

4 代静, 陈燕斌, 陈珊, 任静, 李昆蔓, 杨军英. 牙科修复材料苯扎氯铵表面活性剂对 5 种常见口腔致病菌的体外抑菌效果 [J]. 中国组织工程研究,2018,22(18): DOI: /j.issn 表 1 不同溶液对 5 种细菌的抑菌环直径 Table 1 Diameter of bacteriostatic rings produced by different antibacterial agents to five kinds of bacteria (x _ ±s,mm) 溶液 n 牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌 0.1% 苯扎氯铵 ±1.0 a 15.7±0.4 ab 9.7±0.9 b 13.4±1.2 b 8.3±0.5 a 体积分数 3% 双氧水 ± ± ± ±0.2 无抑菌环 5.25% 次氯酸钠 ± ± ± ± ±0.8 生理盐水 6 无抑菌环无抑菌环无抑菌环无抑菌环无抑菌环表注 : 与 5.25% 次氯酸钠比较, a P < 0.05; 与体积分数 3% 双氧水比较, b P < 0.05 表 2 苯扎氯铵溶液对各菌种的体外抑菌情况 Table 2 Antibacterial activity of benzalkonium chloride on five kinds of bacteria in vitro 药物质量浓度牙龈卟啉单胞菌中间普氏菌伴放线放线杆菌变形链球菌粪肠球菌 mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l 表注 : + 表示平板上有细菌生长, - 表示平板上无细菌生长机械清创的补充双氧水用于口腔科的历史已长达 70 余年 [18] 双氧水具有广泛的抗菌活性, 可释放具有强氧化能力的氧原子控制菌斑 [19] 体积分数 3% 双氧水常作为龈下冲洗液辅助治疗慢性牙周炎 [9] 然而, 体积分数 3% 双氧水为弱酸性溶液, 对口腔及舌黏膜有一定的刺激灼伤, 长期含漱会引起牙牙釉质脱钙出现舌乳头肥大等不良反应 [20] 在牙髓疾病治疗中, 体积分数 3% 双氧水也可作为根管冲洗剂控制牙髓感染 [16,21], 然而其抗菌性能和组织溶解能力低于较为常用的 NaOCl [22] NaOCl 是临床上应用较多的根管冲洗剂, 杀菌范围广作用强, 且可溶解坏死的牙髓组织 [23] NaOCl 溶液可分解产生次氯酸 (HOCl) 氢氧化钠 (NaOH) 和次氯酸根 (ClO - ), HOCl 主要起杀菌作用, 而 NaOH 和 ClO - 与其组织溶解特性相关 [24-25] NaOCl 的抗菌性能和溶解牙髓组织的能力与其浓度有关, 浓度高者, 抗菌性能和溶解牙髓组织的能力较强 [26] 有研究推荐使用 5.25%NaOCl, 该项研究认为高浓度的 NaOCl 在根管中可保持较长的生物活性 [27] 然而 5.25%NaOCl 的刺激性较大, 若根管治疗过程中冲洗剂超出了根尖孔或隔湿不佳溢漏入口腔, 则易损伤根尖周组织及口腔黏膜 [28] 因此, 寻找高效低毒的口腔局部用抗菌剂成为备受关注的研究热点苯扎氯铵是一种季铵盐类阳离子表面活性剂, 其分子中具有活性阳离子烷基基团 [29] 阳离子表面活性剂具有抑菌与杀菌作用, 它能定向排列在菌体细胞表面与其周围的介质面上, 使界面活化, 明显降低细胞表面张力, 破坏细胞膜的正常功能, 呈现杀菌作用 [29-30] 其抗菌谱广, 显效快, 而且对组织无刺激, 能杀灭多种革兰阳性菌革兰阴性菌等 [31] 在口腔临床医疗中, 常用的阳离子表面活性剂包括氯己定 [32-33] 西吡氯铵等 [33] 西吡氯铵与苯扎氯铵同属季铵类化合物, 苯扎氯铵主要作为外科冲洗消毒用药, 用于伤口皮肤及黏 [34] 膜的消毒冲洗 1998 年,Tarbox 等报道苯扎氯铵是一种有效的伤口冲洗溶液,0.1% 苯扎氯铵能有效降低创口金黄色葡萄球菌的感染且不会对皮肤黏膜造成损伤美国大学毒理学杂志曾报道 0.1% 及以下浓度的苯扎氯铵对皮肤黏膜无刺激性, 是一种比较安全的抗菌剂 [35] 口腔内的微生物与多种细菌性疾病如龋齿牙髓炎和牙周病有关牙菌斑是附在牙齿表面上的生物膜, 在牙齿清洁后的几小时内即可形成 [17] 生物膜可释放出包括蛋白质毒素脂多糖 ( 内毒素 ) 和有机酸等, 在特定的环境下如 ph 和氧张力改变, 这些分子可通过牙龈上皮扩散并触发宿主炎症反应 [36] 龋齿的发展归因于生物膜中的革兰氏阳性细菌, 其中 S.m, 远缘链球菌连同一些乳酸杆菌属被认为是关键病原体 [37] S.m 附在牙齿表面, 能发酵食物中的糖 2852 ISSN CN /R CODEN: ZLKHAH

5 Dai J, Chen YB, Chen S, Ren J, Li KM, Yang JY. In vitro antibacterial effect of benzalkonium chloride on five common oral pathogens. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2018;22(18): DOI: /j.issn 释放酸性物质, 降低 ph 值, 使局部去矿化, 最终导致龋齿 [38-39] 在牙周疾病类型中, 有一组特殊的类型侵袭性牙周炎 (Aggressive periodontitis,agp ), 在年轻时牙周组织即发生快速附着丧失和骨质破坏, 并具有明显的家族聚 [41] 集性 Feng 等选择了 8 种牙周微生物, 研究中国 AgP 患者家族成员中牙周微生物分布的信息, 结果发现牙周微生物的家族内传播可能发生在中国 AgP 的患者与其亲属之间, 并认为牙周微生物的家族内传播可部分解释 AgP 的家族聚集现象 A.a 一直被认为是 AgP 的主要致病菌, 能产生毒力因子破坏牙周组织, 出现在 90% 的 AgP 及 30%-50% 重度成人牙周炎患者的牙周袋内 [6] 并且多数牙周治疗研究显示伴放线放线杆菌的抑制与侵袭性牙周炎的临床参数的降低之间存在显着相关性 [42-43] 尽管目前 AgP 病因未完全明了, 但微生物仍是一个不容忽视的因素另外,P.g P.i 与牙周病也密切相关, 能分泌大量的毒力因子, 在牙周组织的损害中起到重要作用 [2-3] P.g P.i 也常被从原发性感染的根管中分离出 [1], 而在继发性感染的根管中,E.f 的检出率更高 [44],E.f 能渗入牙本质小管深部而逃避根管治疗, 成为治疗后根管内少数存活细菌 [45] 此次研究采用的琼脂扩散实验及试管稀释法, 是常用的经典的抗菌活性的测定技术 [46] 结果发现, 对 P.g 表现出了相似于体积分数 3% 双氧水抑菌效果, 而对 P.i, 其抑菌效果优于体积分数 3% 双氧水,0.1% 苯扎氯铵对两者抑菌效果均次于 5.25%NaOCl 0.1% 苯扎氯铵对 A.a 抑菌效果的抑菌效果优于体积分数 3% 双氧水, 且与 5.25%NaOCl 的抑菌效果相似, 表明 0.1% 苯扎氯铵可作为局部袋内冲洗液和根管冲洗液治疗牙周疾病和牙髓病, 清除牙周牙髓相关致病菌, 控 [47] 制感染另外, 邢飞鹏等的临床研究结果也表明苯扎氯铵对感染根管内厌氧菌有较强杀灭作用 0.1% 苯扎氯铵对 P.g P.i 及 A.a 表现出了较好的抑菌效果, 这给临床医生在治疗牙髓牙周相关疾病时带来更多选择而对粪肠球菌, 体积分数 3% 双氧水未产生抑菌环,0.1% 苯扎氯铵对 E.f 粪肠球菌的抑菌环直径为 (8.3±0.5)mm, 抑菌效果较 5.25%NaOCl 差 (10.2±0.8)mm, 结果提示临床治疗持续性根尖周炎时,0.1% [48] 苯扎氯铵比体积分数 3% 双氧水更具有优势 Baron 等将苯扎氯铵与次氯酸钠联合应用, 发现对根管内 E.f 粪肠球菌的抗菌效果优于次氯酸钠在不久的将来, 根管治疗的理念或许会发生微妙的改变, 苯扎氯铵与次氯酸钠联合应用作为根管冲洗液是否比双氧水与次氯酸钠联合应用更具有应用前景, 也需要进一步研究此外,0.1% 苯扎氯铵对 S.m 抑菌效果与 5.25%NaOCl 相似, 优于体积分数 3% 双氧水,0.1% 苯扎氯铵对 S.m 较强的抑菌作用为其在临床预防和治疗龋齿提供了广阔的发展空间此次研究是一项体外抑菌实验, 旨在寻找一种新的抗菌剂控制牙髓牙周感染在应用于临床之前, 相关的临床调查研究不可缺少在今后的工作中, 也应明确苯扎氯铵可能的不良反应, 并深入口腔黏膜的损伤性研究致谢 : 感谢中山大学口腔医学研究各位技术人员的帮助作者贡献 : 实验设计为第一作者, 第二作者, 第三作者, 实验实施为全体作者, 资料收集为第二作者, 第一作者成文, 实验评估与审校为第六作者 ( 通讯作者 ) 并对文章负责经费支持 : 该文章接受了横向课题 (K ) 的基金资助所有作者声明, 经费支持没有影响文章观点和对研究数据客观结果的统计分析及其报道利益冲突 : 所有作者共同认可文章无相关利益冲突伦理问题 : 研究用材料学的实验方案符合相关伦理学要求, 文章的撰写与编辑修改后文章遵守了国际医学期刊编辑委员会学术研究实验与报告和医学期刊编辑与发表的推荐规范文章查重 : 文章出版前已经过 CNKI 反剽窃文献检测系统进行 3 次查重文章外审 : 文章经国内小同行外审专家双盲外审, 符合本刊发稿宗旨作者声明 : 第一作者对于研究和撰写的论文中出现的不端行为承担责任论文中涉及的原始图片数据 ( 包括计算机数据库 ) 记录及样本已按照有关规定保存分享和销毁, 可接受核查文章版权 : 文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议开放获取声明 : 这是一篇开放获取文章, 根据知识共享许可协议署名 - 非商业性使用 - 相同方式共享 3.0 条款, 在合理引用的情况下, 允许他人以非商业性目的基于原文内容编辑调整和扩展, 同时允许任何用户阅读下载拷贝传递打印检索超级链接该文献, 并为之建立索引, 用作软件的输入数据或其它任何合法用途 4 参考文献 References [1] Rajaram A,Kotrashetti VS,Somannavar PD,et al.culture-based identification of pigmented Porphyromonas and Prevotella species in primary endodontic infections.j Dent Res Dent Clin Dent Prospects.2016;10(3): [2] Pan C,Liu J,Wang H,et al.porphyromonas gingivalis can invade periodontal ligament stem cells. BMC Microbiol.2017; 17(1):38. [3] Choi EY,Bae SH,Ha MH,et al. Genistein suppresses Prevotella intermedia lipopolysaccharide-induced inflammatory response in macrophages and attenuates alveolar bone loss in ligature- induced periodontitis.arch Oral Biol.2016;62: [4] Nomura R,Ogaya Y,Nakano K.Contribution of the Collagen- Binding Proteins of Streptococcus mutans to Bacterial Colonization of Inflamed Dental Pulp.PLoS One.2016;11(7):e [5] Stojanović N,Krunić J,Popović B,et al.prevalence of Enterococcus faecalis and Porphyromonas gingivalis in infected root canals and their susceptibility to endodontic treatment procedures: a molecular study.srp Arh Celok Lek.2014;142(9-10): [6] Raja M,Ummer F,Dhivakar CP.Aggregatibacter actinomycetemcomitans a tooth killer J Clin Diagn Res.2014; 8(8):ZE [7] Priyank H,Pandey V,Bagul A,et al.evaluation of 4% Sodium Hypochlorite in eliminating Enterococcus faecalis from the Root Canal when Used with Three Irrigation Methods: An in vitro Study.J Contemp Dent Pract.2017;18(3): [8] Kobayashi Y,Hayashi M,Yoshino F,et al.bactericidal effect of hydroxyl radicals generated from a low concentration hydrogen peroxide with ultrasound in endodontic treatment.j Clin Biochem Nutr. 2014;54: [9] Sahebjam AM,Moradi HJ,Khoshhal M,et al.clinical Effect of Periodontal Pocket Irrigation with H2O2.Avicenna J Dent Res. 2011;3(1): [10] Rashed HT.Evaluation of the effect of hydrogen peroxide as a mouthwash in comparison with chlorhexidine in chronic periodontitis patients: A clinical study.j Int Soc Prev Community Dent.2016;6(3): P.O. Box 10002, Shenyang

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Microsoft Word - 7469-7474张斌6.0最终版.DOC 中国组织工程研究第 17 卷第 42 期 2013 10 15 出版 Chinese Journal of Tissue Engineering Research October 15, 2013 Vol.17, No.42 doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.42.020 [http://www.crter.org] 张斌, 王兵济, 李