待定量的农药是印度农产品和加工食品出口发展局 (APEDA) 根据其秋葵出口农用化学品控制流程选出 [1] APEDA 是印度负责监测残留和出口促进活动的监管机构, 对秋葵出口要监控的化合物及其 MRL 限值作出了规定对适合气相色谱分析的化合物进行分离, 以进行 GC- MS/MS 分析回收率实

Size: px

Start display at page:

Download "待定量的农药是印度农产品和加工食品出口发展局 (APEDA) 根据其秋葵出口农用化学品控制流程选出 [1] APEDA 是印度负责监测残留和出口促进活动的监管机构, 对秋葵出口要监控的化合物及其 MRL 限值作出了规定对适合气相色谱分析的化合物进行分离, 以进行 GC- MS/MS 分析回收率实"

盆驯乌孙
5 years ago
Views:

采用 QuEChERS 样品前处理技术和气相色谱串联质谱测定新鲜秋葵中的多农药残留应用简报食品安全作者 Koushik Banerjee 和 Narayan Kamble 国家葡萄研究中心印度农业研究委员会 (ICAR) 国家葡萄研究中心国家参考实验室 (NRL),Pune, Maharashtra K Hari Chandra Prasad 和 Prabakaran R 必维国际检验集团

1 采用 QuEChERS 样品前处理技术和气相色谱串联质谱测定新鲜秋葵中的多农药残留应用简报食品安全作者 Koushik Banerjee 和 Narayan Kamble 国家葡萄研究中心印度农业研究委员会 (ICAR) 国家葡萄研究中心国家参考实验室 (NRL),Pune, Maharashtra K Hari Chandra Prasad 和 Prabakaran R 必维国际检验集团 Chennai, Tamilnadu 摘要本应用简报描述了如何使用快速简便经济高效耐用和安全 (QuEChERS) 的 AOAC 样品前处理方法萃取和净化新鲜秋葵中的多农药残留该 AOAC 方法包括 : 在水 / 乙腈缓冲系统中进行初步萃取加入盐进行萃取 / 分离步骤使用分散固相萃取 ( 分散式固相萃取 ) 进行净化步骤 Chandrasekar Kandaswamy 和 Thierry Faye 安捷伦科技公司 Block C, RMZ Centennial Mahadevapura, Bangalore

2 待定量的农药是印度农产品和加工食品出口发展局 (APEDA) 根据其秋葵出口农用化学品控制流程选出 [1] APEDA 是印度负责监测残留和出口促进活动的监管机构, 对秋葵出口要监控的化合物及其 MRL 限值作出了规定对适合气相色谱分析的化合物进行分离, 以进行 GC- MS/MS 分析回收率实验的加标浓度为和 50 ng/g 前言秋葵 (Abelmoschus esculentus) 又名美人指, 是一种锦葵科的开花植物其价值在于可食用的绿色种荚这种植物栽培于全球范围内的热带亚热带和暖温带地区秋葵是热带国家 / 地区的一种重要蔬菜, 深受喀麦隆加纳印度伊拉克尼日利亚巴基斯坦瑞士阿联酋和美国等地消费者的欢迎有人认为秋葵起源于非洲, 在世界上大多数亚热带和热带地区都有种植印度巴基斯坦伊拉克等都是重要的秋葵种植国家印度是秋葵产量排名第一的国家, 占全球产量的 73% 在印度, 秋葵主要用作辅食西非许多地区经常使用粘稠食物为当地的汤类和炖菜增稠样品前处理萃取去除果柄 ( 植物上附着的小部分 ) 之后, 在搅拌机中对新鲜秋葵进行均质化称取 2 g 样品置于 50 ml 离心管中加入一粒陶瓷均质子 ( 部件号 ) 以提高振荡效率使用改良的 QuEChERS 技术进行样品前处理 [2], 加入 15 ml 蒸馏水, 让样品静置 30 min 以便水合加入 10 ml 含 1% 乙酸的乙腈, 将试管剧烈振荡 1 分钟加入硫酸镁 (6 g) 和乙酸钠 (1.5 g), 剧烈振荡 1 分钟将管在 6000 rpm 下离心 5 分钟分散将 1 ml 样品移至含有 50 mg N- 丙基乙二胺 (PSA) 50 mg C mg 石墨化炭黑 (GCB) 和 150 mg 硫酸镁 ( 部件号 CH) 的 2 ml 分散管中将管剧烈振荡 1 分钟, 然后以 9000 rpm 的速率离心 10 分钟本应用简报介绍了通过设置样品前处理方法优化秋葵定量分析的农药回收率, 同时最大限度减少衬管污染, 从而简化常规分析, 提高通量表 g 秋葵中可食用部分的含量项目水能量蛋白质总脂质灰分碳水化合物总膳食纤维总糖蔗糖葡萄糖含量 g 31 kcal (129 kj) 2.00 g 0.10 g 0.70 g 7.03 g 3.2 g 1.2 g 0.40 g 0.13 g 图 1. 样品前处理流程图 2

3 样品分析在气相色谱方法中, 将甲基毒死蜱的保留时间 (RT) 锁定至 9.14 分钟, 预设后运行柱中反吹秋葵中的粘液和胶状物实际上是多糖其可溶于水 [3], 因此加入 15 ml 水将其除去秋葵含有的叶绿素类胡萝卜素和叶黄素等色素不会挥发, 进样时会粘附在高温衬管上分散净化中的石墨化炭黑可吸附这些色素 ( 萃取流程第 3 步 ) 柱温箱升温程序反吹进样口温度和选择性反应监测 (SRM) 离子对等仪器参数来自安捷伦农药和环境污染物数据库 [4] 为了选择方法, 对所有可用的离子对进行分析, 并根据峰形丰度和离子比选择两个无基质离子对准确度实验的离子对方法中也使用无基质离子对图示为 50 ppb 甲基毒死蜱基质匹配标样及其所有离子对分别选择 Q4 和 Q5 作为定量离子和定性离子图 2. 数据库中甲基毒死蜱的所有可用 SRM 3

4 气相色谱仪器参数色谱柱 1 Agilent HP-5MS, 15 m 0.25 mm, 0.25 µm ( 部件号 19091s-431) 色谱柱 2 Agilent HP-5MS, 15 m 0.25 mm, 0.25 µm ( 部件号 19091s-431) A B 微板流路控制装置自动进样器进样采用电子气路控制 (EPC) 的压力控制三通 (PCT) Agilent 7693A 2 µl 冷不分流, 多模式进样口 (MMI) 衬管 4 mm 带玻璃毛的超高惰性单细径锥衬管 ( 部件号 ) 进样口温度 70 C 保持 0.1 min, 以 450 C/min 升至 325 C 升温程序图 3. 净化前 (A) 和分散净化后 (B) 秋葵样品的乙腈萃取物进样口吹扫流速 1 min 时 50 ml/min RTL 化合物甲基毒死蜱锁定至 9.14 RT 载气氦气柱温箱程序 60 C 保持 1 min 以 40 C/ min 升至 170 C 以 10 C/min 升至 310 C, 保持 3 min 后运行时间 3.3 min 后运行温度 310 C MS 传输线温度 310 C Agilent 7000 三重四极杆 GC/MS 系统以 MS/MS 电子电离 (EI) 模式运行, 在 SRM 模式下定量仪器校准农药的秋葵基质匹配校准标样采用浓度分别为和 200 ng/ml 的秋葵对照溶液配制每个基质匹配标样还含有浓度为 25 ng/ml 的灭蚊灵内标 (IS) 方法性能本应用简报所述的样品前处理方法在一项验证研究中进行了评估, 该研究对和 50 ng/g 三种不同浓度进行了六次重复分析 MS 参数离子化模式电子轰击能量调谐电子电离 70 ev EI 自动调谐 EM 增益因子 50 驻留时间 10 ms 离子对参考表 1 碰撞池气体流速氮气 1.5 ml/min, 氦气 2.25 ml/min MS 温度离子源 300 C,Q1 150 C,Q2 150 C 图 ng/g 浓度下的回收率研究 4

5 表 2. 两个无基质 SRM 离子对以及碰撞能量 TS 化合物 Q1 CE Q2 CE 溴 -2- 氯苯酚敌敌畏莠去津 BHC-α 六氯苯甲拌磷残杀威氟乐灵艾氏剂莠去津 BHC-β BHC-δ BHC-γ 百菌清甲基毒死蜱二嗪农三氯杀螨醇异稻瘟净敌稗胺丙畏甲草胺艾氏剂毒死蜱甲基毒死蜱三氯杀螨醇杀螟硫磷倍硫磷氟虫腈七氯马拉硫磷甲霜灵甲霜灵 M 异丙甲草胺对硫磷甲基对硫磷敌稗氟醚唑四氟苯菊酯毒虫畏 I 毒虫畏 II 顺式氯丹甲基毒死蜱三氯杀螨醇

6 表 2. 两个无基质 SRM 离子对以及碰撞能量 ( 续 ) TS 化合物 Q1 CE Q2 CE 氟虫腈内环氧七氯环氧七氯二甲戊乐灵喹硫磷氟醚唑丁草胺顺式氯丹反式氯丹溴虫腈 o,p -DDD p,p -DDD o,p -DDE p,p -DDE o,p -DDT 三氯杀螨醇狄氏剂硫丹 I 硫丹 II 异狄氏剂乙硫磷己唑醇异丙二酮醚菌酯乙氧氟草醚丙溴磷 p,p -DDT 硫丹硫酸酯克螨特 I 克螨特 II 丙环唑 I 丙环唑 II 戊唑醇磷酸三苯酯联苯三唑醇 I 联苯三唑醇 II 氟氯氰菊酯 I 氟氯氰菊酯 II 氟氯氰菊酯 III 氟氯氰菊酯 IV λ- 氯氟氰菊酯氯氰菊酯 I 氯氰菊酯 II

7 表 2. 两个无基质 SRM 离子对以及碰撞能量 ( 续 ) TS 化合物 Q1 CE Q2 CE 氯氰菊酯 III 氯氰菊酯 IV 甲氰菊酯灭蚁灵氯菊酯 I 氯菊酯 II 伏杀磷吡丙醚氯氰菊酯 I 氯氰菊酯 II 氯氰菊酯 III 氯氰菊酯 IV 苯醚甲环唑 I 苯醚甲环唑 II 顺式氰戊菊酯醚菊酯氰戊菊酯 I 氰戊菊酯 II τ- 氟胺氰菊酯 I τ- 氟胺氰菊酯 II 嘧菌酯溴氰菊酯苯醚甲环唑 I 苯醚甲环唑 II 苯醚甲环唑 I 苯醚甲环唑 II TS = 时间段 ;Q1 = 定量离子 ;Q2 = 定性离子 ;CE = 碰撞能量方法开发和验证完成之后, 使用从泰米尔纳德邦和卡纳塔克邦收集的市场样品检验了该方法的性能适用性和稳定性图 5. 卡纳塔克邦样品中的农药以及定量农药数量图 6. 泰米尔纳德邦市场样品中检出的农药 7

8 结论由于秋葵基质较为复杂, 很难在新鲜秋葵样品前处理和分析中对农药残留进行定量分析本研究设法去除色素和胶状物, 以延长衬管和色谱柱的使用寿命, 提高回收率采用 QuEChERS 样品前处理技术进行净化, 包括用乙腈萃取, 然后进行分散步骤净化步骤可减少色素和胶状物, 从而提升目标化合物的灵敏度, 同时也延长了色谱柱和衬管的使用寿命使用微板流路控制技术配置后运行柱中反吹, 可去除进样间残留的高沸点组分, 减轻对质谱仪离子源的污染大多数目标化合物回收率在可接受限度内, 符合 DG SANCO 12495/2013 [5] 文件的规定具体而言, 回收率为 70% 120%, 三个加标浓度 (10 25 和 50 ng/g) 的重现性均 < 20% 有几种化合物回收率较低 (< 70%), 但在三个准确性浓度下的 RSD 保持一致由于这些农药的结果一致 (< 20% RSD), 在分析中可以根据已知回收率对结果进行校正就灵敏度而言, 大多数化合物可在 1 3 ng/g 浓度下定量参考文献 1. Export_Regulations.htm 2. Agilent QuEChERS 样品前处理手册, 安捷伦科技公司, 出版号 CHCN, M. L. Woolfe, M. F. Chaplid, Gifty Otchere, Studies on the Mucilages Extracted from Okra Fruits (Hibiscus esculentus L.) and Baobab Leaves (Adans oniadigitata L.) Department of Nutrition and Food Science, University of Ghana, Legon, Ghana 4. 安捷伦农药和环境污染物 SRM 数据库, 部件号 G9250AA 图 7. 三个浓度回收的相对标准偏差更多信息这些数据仅代表典型的结果有关我们的产品与服务的详细信息, 请访问我们的网站查找当地的安捷伦客户中心 : 免费专线 : , ( 手机用户 ) 联系我们 : LSCA-China_800@agilent.com 在线询价 : 安捷伦对本资料可能存在的错误或由于提供展示或使用本资料所造成的间接损失不承担任何责任本资料中的信息说明和指标如有变更, 恕不另行通知安捷伦科技 ( 中国 ) 有限公司, 年 12 月 1 日, 中国出版 CHCN 5. Safety of the food chain chemicals, contaminants, pesticides; DG SANCO/12571/ November 2013 rev. 0

print

print p 真 (3Cx, 0535-(388435 第 1 页 - w 5 页 1 戊菌隆 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 2 甲拌磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 3 k 氯硝基苯 0.0125 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 4 地虫硫磷 0.00(3 OI/MI 4//T 19(48-200( :1 5 艾氏剂 0.0125