目录 QuEChERS 页 食品安全概述 什么是 QuEChERS?

Transcription

1 Agilent Bond Elut SPE 全套样品前处理产品满足 您的各种需求 新内容 本手册中涉及的 QuEChERS 试剂盒仅是安捷伦众多固相萃取 (SPE) 产品中 Bond Elut 系列的一部分 QuEChERS 产品在美国严 格按照 ISO-9001 标准 采用与生产世界闻名的 Agilent ZORBAX HPLC 色谱柱填充材料相同的工艺制造而成 Agilent Bond Elut SPE 产品源自业内顶级色谱仪 色谱柱和备件制造商 性能更 胜一筹 满足您的所有期望 聚合物 硅胶和其他吸附剂形式多样 从多尺寸柱筒到 96 孔 板 选择广泛 硅胶采用三官能键合工艺 比单键合相具有更好的稳定性 还能显著提高溶剂兼容性 行业领先的质量控制过程确保一致的填料粒径 从而获得流 畅的洗脱和出色的性能 Agilent Bond Elut QuEChERS 食品安全 应用手册 第 2 卷 完整的一系列真空夹和附件可以帮助您应对所有的 SPE 挑战 要观看 QuEChERS 标准操作流程的演示 请访问 agilent.com/chem/quechersdemo 鉴定 表征和定量目标化合物与未知化合物 例如农 药 毒枝菌素 二噁英 硝酸盐 抗生素 类固醇 海 洋毒素以及重金属 了解如何能够使您的食品安全分析水平更上层楼 Agilent Bond Elut SPE 产品 agilent.com/chem/samplepreparation 安捷伦食品安全检测解决方案 agilent.com/chem/foodsafety 更快 更准确地发现更多化合物 / 污染物 有些化合物 您从未想到会存在其中 在线购买 符合最严苛的食品安全标准和法规 查找您所在地区的安捷伦客户中心 或安捷伦授权经销商 信心十足地鉴定食品种类 确认食品来源地 鉴别病原 体以及检测过敏原 最大限度提高仪器正常运行时间 确保从样品前处理到 最终报告的整个工作流程平稳顺利 如需了解更多 agilent.com/chem/food agilent.com/chem/store agilent.com/chem/contactus 安捷伦客户服务中心 免费专线 手机用户 联系我们 customer-cn@agilent.com 本资料中的信息如有变更 恕不另行通知 安捷伦科技 中国 有限公司 年 3 月 21 日 中国印制 CHCN Agilent Bond Elut QuEChERS 食品安全应用手册 第 2 卷 新 作为全球食品行业领先的测量公司 安捷伦具有独一无二 的优势 能够以多种化学及生物技术帮助您应对当前 和将 来的挑战 这些技术包括 应对目前食品分析挑战的可靠方法 详情见 正文»

2 目录 QuEChERS 页 食品安全概述 什么是 QuEChERS? Agilent Bond Elut 推荐的 QuEChERS 标准操作规程 早期的 QuEChERS 方法用 Agilent Bond Elut QuEChERS 预清洗试剂盒及 GC/MS 分析苹果中的农药残留 ( 出版号 CHCN) EN 方法使用安捷伦 Bond Elut QuEChERS 欧洲标准 EN 试剂盒对苹果中的农药残留进行 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 EN) 用安捷伦 Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒进行苹果中的农药残留的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 用 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒进行菠菜中残留农药的 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 丙烯酰胺试剂盒以 HPLC-DAD 法测定食用油中的丙烯酰胺 ( 出版号 EN) 蔬菜中农药的盲检研究 Bond Elut QuEChERS 萃取试剂盒和 Agilent 5975T LTM GC/MSD 的应用 ( 出版号 CHCN) 使用安捷伦 Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒通过 LC/MS/MS 检测分析绿茶中的农药残留 ( 出版号 EN) 使用 Agilent QuEChERS 进行样品制备后使用 Agilent 1290 Infinity 液相色谱和 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱对虾中的激素进行测定 ( 出版号 CHCN) 使用 Bond Elut QuEChERS 萃取试剂盒和 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 色谱柱分析大米中的农药残留 ( 出版号 CHCN) AOAC 方法使用安捷伦 Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒测定苹果中农药残留物的 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 采用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒测定苹果中农药残留的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 采用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒进行菠菜中残留农药的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 采用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒测定菠菜中农药残留的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 用甲苯和含有石墨化炭黑的 Agilent Bond Elut AOAC QuEChERS 试剂盒优化菠菜中平面结构农药的回收率 ( 出版号 CHCN) 使用 Agilent 1290 Infinity LC 和 Agilent 6460 三重串联四极杆液质联用仪器以 UHPLC/MS/MS 法测定婴儿食品中的农药残留 ( 出版号 EN)

3 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒以 HPLC-FLD 法测定鸡肉中的磺胺类残留物 ( 出版号 EN) 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒以 HPLC-FLD 法分析鱼类体内的多环芳烃 ( 出版号 EN) 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以 LC/MS/MS 法分析炸薯条中的丙烯酰胺 ( 出版号 CHCN) 使用 Agilent J&W DB-35ms 及 DB-XLB GC 色谱柱对鱼肉组织中的 PCB 进行 GC/µECD 分析和确认 ( 出版号 EN) 采用安捷伦 AOAC QuEChERS 萃取试剂盒结合通用分散 SPE 分析生菜和苹果样品中的农药残留 ( 出版号 CHCN) 使用 Agilent J&W DB-35ms 超高惰性 GC 柱对苹果中有机磷农药的 GC/MS/FPD 分析 ( 出版号 CHCN) 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒以 LC/MS/MS 法分析大米中的农药残留 ( 出版号 CHCN) GC/MS/MS 法定量和重复性分析种植作物中的痕量农药残留 ( 出版号 CHCN) GC/MS 和 LC/MS 联合对蔬菜汁中的农药残留进行全面检测 ( 出版号 CHCN) 其他食品方法使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以 LC/MS/MS 法测定牛肝脏中的喹诺酮抗生素 ( 出版号 EN) 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以 LC/MS/MS 法测定牛肝脏中的磺胺类抗生素 ( 出版号 EN) 使用 GC-μECD 分析并确认橄榄油中的合同实验室协议农药 ( 出版号 CHCN) 使用改进的 Agilent Bond Elut QuEChERS 方法测定柠檬油中的农药残留 ( 出版号 EN) 使用 QuEChERS/dSPE 样品制备方法和高效 DB-5ms 超高惰性 GC 色谱柱通过 GC/MS 分析鱼体内的多环芳烃 (PAH) ( 出版号 EN) 使用带玻璃毛超惰性衬管的 GC/MS/MS 进行食品中农药的分析 ( 出版号 CHCN) 使用 Agilent 7000 三重四极杆气质联用系统测定海洋贝类中的化学污染物 ( 出版号 CHCN) 采用不同的样品制备方法对小麦中的单端孢霉烯毒素和玉米赤霉烯酮进行 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 使用优化的萃取 / 净化方法和 Agilent 7000 系列三重四极杆气质联用系统测定茶叶中的多种农药残留 ( 出版号 CHCN) 采用 LC/MS/MS 结合改进的 QuEChERS 方法对动物源食品中的 36 种兽药进行筛查 ( 出版号 CHCN)

4 食品安全概述 可靠的食品测试基于可靠的样品制备 尊敬的客户 : 您承诺生产优质且绝对安全的食品和饮料 消费者的期望也同样如此 现在, 安捷伦能帮你履行这项承诺 安捷伦的仪器 系统 色谱柱和消耗品, 可以全方位地帮助您的实验室满足这些从检验 产品开发到质量保证和包装的最严格的标准 不仅如此, 安捷伦还具备丰富的经验 广博的知识和富有创造力的人才, 加上我们对行业发展趋势和全球法规所具有的敏锐的洞察力, 这些都可帮助您应对分析和商业挑战 最新 Agilent Bond Elut QuEChERS 和 SPE 产品 : 食品安全分析的第一步 高质量的 Agilent Bond Elut SPE 产品能够帮助您从复杂的基质中高效地提取和浓缩样品, 从分析的第一步开始就能确保您快速 准确和可重复地获得结果 Bond Elut 产品系列采用严格的质量生产标准, 涵盖各种形式和产品, 能够完全满足食品样品前处理的需求 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒仅需几步简单的操作就可以让您对食物样品中的多种残留物和多类别农药进行分析 预装的萃取和分散固相萃取试剂盒能够适应特定的食物种类和筛选方案, 消除疑虑 萃取盐经过预先称量并采用无水包装, 您可以在需要时方便地添加萃取盐 安捷伦科学家团队始终为您的食品检测需求提供有力支持, 请务必查看 QuEChERS 网页了解新的应用和产品开发 :agilent.com/chem/quechers 准确分析由此起步 Trisa Robarge 样品前处理产品经理 4

5 什么是 QuEChERS? QuEChERS( 发音同 Catchers ) 由美国农业部于 2003 年开发, 代表食品分析中样品制备过程的快速 简便 廉价 高效 耐用和安全 这项技术非常简单, 操作步骤少, 对于复杂样品的净化非常有效 QuEChERS 技术最初用来分析水果和蔬菜中的多类别 多残留农药, 最近也用来分析如鱼和肉等非蔬菜类物质中的痕量污染物 目前, 关于各种水果 蔬菜 肉和坚果类物质, 比如大豆和干果的分析方法已有很多报道 官方 的方法已经施行, 同时全球范围内技术标准化推广也正在进行 在美国, 官方分析化学师 (AOAC) 协会近日发布了 方法, 与欧洲正在执行的 EN 方法类似 QuEChERS 操作包括两个步骤 : 1. 基于分配和盐析萃取的提取步骤, 该步骤涉及水相和有机相之间的平衡 2. 分散固相萃取步骤 (SPE), 利用盐和多孔吸附剂的多种组合进一步净化, 清除干扰物质 在分散 SPE 中, 利用多孔吸附剂, 如伯仲胺 (PSA) C18 石墨化碳黑能够去除在第 一步中与样品同时提取出来的多种杂质 最常用的评价提取分析物的方法是 LC/MS 或 GC/MS 或其串联质谱 窍门与技巧 为支持各种 QuEChERS 产品, 我们提供了大量使用 QuEChERS 方法作为样品前处理的分析应用 本指南包括其中许多应用 根据与各种应用相关的标准方法 ( 例如 AOAC EN 或早期方法 ) 分组进行介绍, 并且单独设立一章介绍其他方法 还提供有便捷的索引, 使您可以根据基质类型和分析物类别在本指南中进行搜索 5

6 QuEChERS 萃取试剂盒 第一步 : 萃取 根据您的分析方法 (AOAC 或 EN) 选择相应的萃取盐包 缓冲性萃取盐适用于多数性质较不稳定的农药 向少量 (10 g 或 15 g) 粉碎的水果和蔬菜样品中加入溶剂和盐, 可以将目标农药萃取进入有机层 安捷伦将所需要的 QuEChERS 盐和缓冲液预装入无水包装中 使您可以按 QuEChERS 方法的要求, 在样品中加入溶剂后再加入这些盐和缓冲液 在下表中, 标注 CH 的产品中包括适当数量用于专用试剂盒的陶瓷均质子 更多有关陶瓷均质器的信息请参见第 13 页 QuEChERS 萃取试剂盒可以带或不带 50 ml 离心管 和盖子, 并且包含 MgSO 4 NaCl 或其他缓冲盐 ; 预称量后包装在无水盐包中 陶瓷均质子可以将萃取时间最多缩短 70% 它们随 QuEChERS 试剂盒提供或单独提供 QuEChERS 萃取试剂盒 方法带缓冲盐成分陶瓷均质子 采用 50 ml 试管 50 个 / 包 仅限试剂包 50 个 / 包 200 个 / 包 AOAC 是 6 g MgSO 4 ;1.5 g 乙酸钠是 CH 早期方法 (10 g 样品 ) 早期方法 (15 g 样品 ) EN 否 4 g MgSO 4 ;1 g NaCl 是 CH 否 6 g MgSO 4 ;1.5 g NaCl 是 CH 是 4 g MgSO 4 ;1 g NaCl;1 g 柠檬酸钠 ; 0.5 g 柠檬酸二钠盐 1.5 水合物 否 否 否 是 CH 丙烯酰胺 * 否 4 g MgSO 4 ;0.5 g NaCl 否 兽药否 4 g Na2SO 4,1 g NaCl 否 * 处理步骤参考 :K. Mastovska 和 S. J. Lehotay, J. Agric. Food Chem. 2006, 54, 否

7 QuEChERS 分散固相萃取试剂盒 第二步 : 分散固相萃取的净化 根据所分析的食品类型和所使用的方法, 选择分散固相萃取试剂盒 此步骤中, 第一步中萃取的样品等量加入 2 ml 或 15 ml 离心管中 离心管中含有少量的固相萃取吸附剂和 MgSO 4 吸附剂将去除样品中的干扰物质,MgSO 4 可去除多余的水份并提高样品分布 供选择的试剂盒现均提供陶瓷均质器 ( 每个离心管 2 个 ) 其部件号中含 CH QuEChERS 分散固相萃取试剂盒, 水果和蔬菜 试剂盒规格单位 常规水果和蔬菜 : 去除极性有机酸 某些糖和脂类 含脂和蜡的水果和蔬菜 : 去除极性有机酸 某些糖类 多数脂类和固醇类 部件号后标有 CH 表明萃取管配有陶瓷均质子 AOAC 方法欧盟方法 EN 试剂盒组成部件号 2 ml 100 个 / 包 50 mg PSA 150 mg MgSO CH 15 ml 50 个 / 包 400 mg PSA 1200 mg MgSO CH 2 ml 100 个 / 包 50 mg PSA 50 mg C18EC 150 mg MgSO CH 15 ml 50 个 / 包 400 mg PSA 400 mg C18EC 1200 mg MgSO CH 试剂盒组成部件号 25 mg PSA 150 mg MgSO CH 150 mg PSA 900 mg MgSO CH 25 mg PSA 25 mg C18EC 150 mg MgSO CH 150 mg PSA 150 mg C18EC 900 mg MgSO CH ( 待续 ) 7

8 QuEChERS 分散固相萃取试剂盒, 水果和蔬菜 试剂盒 规格 单位 试剂盒组成部件号 含色素的水果和蔬菜 : 2 ml 100 个 / 包 50 mg PSA 去除极性有机酸 某些糖类和脂类, 以及类胡萝卜素和叶绿素 ; 50 mg GCB 不能用于平面结构的农药 150 mg MgSO CH 15 ml 50 个 / 包 400 mg PSA 400 mg GCB 1200 mg MgSO CH 高色素含量的水果和蔬菜 : 去除极性有机酸 某些糖类和脂类, 以及高含量的类胡萝卜素和 叶绿素 ; 不能用于平面结构的农药 含脂肪和色素的水果和蔬菜 : 去除极性有机酸 某些糖类和脂类, 以及类胡萝卜素和叶绿素 ; 不能用于平面结构的农药 部件号后标有 CH 表明萃取管配有陶瓷均质子 AOAC 方法欧盟方法 EN 试剂盒组成部件号 25 mg PSA 2.5 mg GCB 150 mg MgSO CH 150 mg PSA 15 mg GCB 885 mg MgSO CH 2 ml 100 个 / 包 25 mg PSA 7.5 mg GCB 150 mg MgSO CH 15 ml 50 个 / 包 150 mg PSA 45 mg GCB 855 mg MgSO CH 2 ml 100 个 / 包 50 mg PSA 50 mg GCB 150 mg MgSO 4 50 mg C18EC CH 15 ml 50 个 / 包 400 mg PSA 400 mg GCB 1200 mg MgSO mg C18EC CH 8

9 QuEChERS 分散固相萃取试剂盒 : 其他食品方法 试剂盒 规格 单位 试剂盒组成部件号 其他食品方法 : 2 ml 100 个 / 包 25 mg C18 去除生物基质干扰, 包括疏水物质 ( 脂肪 脂类 ) 和蛋白质 150 mg MgSO CH 15 ml 50 个 / 包 150 mg C mg MgSO CH 所有食品类型 : 2 ml 100 个 / 包 50 mg PSA 去除所有基质干扰物, 包括极性有机酸 脂类 糖类 蛋白质 50 mg C18 类胡萝卜素和叶绿素 7.5 mg GCB 150 mg MgSO CH 15 ml 50 个 / 包 400 mg PSA 400 mg C18 45 mg GCB 1200 MgSO CH 动物源性食品 : 15 ml 50 个 / 包 50 mg PSA 去除基质干扰, 例如极性有机盐类 糖类 脂类和蛋白质 150 mg C18EC 900 mg Na 2 SO 部件号后标有 CH 表明萃取管配有陶瓷均质子 AOAC 方法欧盟方法 EN 试剂盒组成部件号 9

10 推荐用于不同食品类型和分析方法的 Bond Elut QuEChERS 分散试剂盒 商品分类 日用品 常规水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 含脂肪和蜡质的水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 含色素的水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 有色样品 ( 叶绿素 色素含量高的水果和蔬菜 ; EN 方法 深色样品 ( 叶绿素 含色素和脂肪的水果和蔬菜 ; 仅 AOAC 方法 适用于 淡色样品 含 > 1% 脂肪 / 脂类 的样品 类胡萝卜素 ), 非平面结构的农药 类胡萝卜素 ), 非平面结构的农药 也包含脂肪和蜡质的 有色样品 水果 柑橘类果汁 葡萄柚 柠檬 / 酸橙 柑橘 橘皮 油桃 柑橘类水果 橘子 苹果 苹果干 苹果汁 苹果酱 梨 梨果类水果 榅桲 杏 杏干 杏蜜饯 樱桃 布拉斯李子 油桃 桃 桃干 李子 核果类 李子干 黑莓 蓝莓 大果越橘 无核葡萄干 接骨木果 醋栗, 红色 葡萄, 绿色 葡萄, 红色 葡萄干 覆盆子 无核小水果 草莓 鳄梨 香蕉 无花果干 猕猴桃 芒果 甜瓜 橄榄 木瓜 其他水果 菠萝 ( 待续 ) 10

11 推荐用于不同食品类型和分析方法的 Bond Elut QuEChERS 分散试剂盒 商品分类 日用品 常规水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 含脂肪和蜡质的水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 含色素的水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 有色样品 ( 叶绿素 色素含量高的水果和蔬菜 ; EN 方法 深色样品 ( 叶绿素 含色素和脂肪的水果和蔬菜 ; 仅 AOAC 方法 适用于 淡色样品 含 > 1% 脂肪 / 脂类 的样品 类胡萝卜素 ), 非平面结构的农药 类胡萝卜素 ), 非平面结构的农药 也包含脂肪和蜡质的 有色样品 蔬菜 甜菜 黑皮婆罗门参 胡萝卜 块根芹 辣根 欧芹根 马铃薯 根类和薯芋类蔬菜 萝卜 细香葱 大蒜 韭葱 洋葱 冬葱 韭菜 冬葱 茄子 黄瓜 绿色甜胡椒粉 红色甜胡椒粉 南瓜 西红柿 茄果类蔬菜 西葫芦 西兰花 球芽甘蓝 大白菜 红球甘蓝 皱叶甘蓝 白球甘蓝 菜花 甘蓝 西兰花 大头菜 芝麻菜 罗勒 香菜 水芹 菊苣 野苣 生菜类 欧芹 叶类蔬菜和草本植物 菠菜 菜蓟 芦笋 芹菜 韭葱 茎类蔬菜 大黄 大豆 豌豆 扁豆 ( 干 ) 荚果 大豆 豌豆 扁豆 ( 鲜 ) ( 待续 ) 11

12 推荐用于不同食品类型和分析方法的 Bond Elut QuEChERS 分散试剂盒 商品分类 适用于 日用品 常规水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 淡色样品 含脂肪和蜡质的水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 含 > 1% 脂肪 / 脂类的样品 含色素的水果和蔬菜 ; EN 或 AOAC 方法 有色样品 ( 叶绿素 类胡萝卜素 ), 非平面结构的农药 色素含量高的水果和蔬菜 ; EN 方法 深色样品 ( 叶绿素 类胡萝卜素 ), 非平面结构的农药 含色素和脂肪的水果和蔬菜 ; 仅 AOAC 方法 也包含脂肪和蜡质的有色样品 动物源性食品 牛肉 鸡肉 猪肉 小牛肉 肉类 肾 肝 双壳贝类 海产品 长须鲸 乳制品 乳制品 其他食品 玉米 大米 小麦 谷物 面粉 谷物等 咖啡豆 茶 / 咖啡 茶叶 咖喱粉 胡椒粉 韭菜 干香料 胡椒籽 油菜籽 橄榄 油类 柑橘 婴儿食品 婴儿食品 其他 可可粉 农产品 棉花 大麻烟草 土壤 土壤 全血 全血 12

13 QuEChERS 陶瓷均质子 陶瓷均质器增加了您整个实验室的工作效率, 并且使您对结果更加自信 其以下优点使得样品萃取更容易 : 将所需的萃取时间从 60 秒减少到 20 秒 每个样品节省了近 70% 的时间 完成仅需要三分之一的时间, 保持了萃取的高回收率 高重现性 最大限度地减少技术人员间的差异 防止盐的析出, 并能够均匀分散样品也可购买与我们 QuEChERS 试剂盒中相同的均质子, 能够提供同样优异的样品粉碎功能 QuEChERS 陶瓷均质子 单位 部件号 适用于 50 ml 萃取管的陶瓷均质子 100 个 / 包 适用于 15 ml 萃取管的陶瓷均质子 100 个 / 包 适用于 2 ml 萃取管的陶瓷均质子 200 个 / 包 QuEChERS 产品的标样 安捷伦除了提供行业领先的 QuEChERS 试剂盒外, 还提供最常用的法规方法 ( 包括 AOAC 和 EN 方法 ) 中所需的标样, 让您的分析更轻松 节省时间并且方便实验室配制标准溶液 既适用于气相色谱仪也适用于液相色谱仪 可直接用于 QuEChERS 萃取, 无需稀释 QuEChERS 标样 说明 浓度 试剂盒组成 部件号 HPLC 和 GC 内标,AOAC 方法 1000 μg/ml 对硫磷 -d10 ( 二乙基 -d10) 酯,α-BHC-d6 (α-hch-d6) QC 溶液,AOAC 方法 500 μg/ml 磷酸三苯酯 HPLC 内标,EN 方法 100 μg/ml 磷酸三 (1,3- 二氯异丙基 ) 酯, 尼卡巴嗪 GC 内标,EN 方法 5000 μg/ml (2,2,5,5 - 四氯联苯 ), 三苯甲烷, 磷酸三 (1,3- 二氯异丙基 ) 酯 GC 标样的 QC 代用品,EN 方法 500 μg/ml 1000 μg/ml (2,2,3,4,4,5 - 六氯联苯 ) 蒽 -d

14 Agilent Bond Elut QuEChERS 推荐标准操作规程 以下是 QuEChERS 方法分析水果或蔬菜样品的基本步骤 只需简单的几个步骤, 就可以完成多类别 多残留农药的样品制备过程 选择提取试剂盒 早期方法 10 g 样品 早期方法 15 g 样品 带缓冲盐 AOAC 方法 15 g 样品 带缓冲盐 EN 方法 10 g 样品 选择标准 : QuEChERS 方法 化合物筛选 如果样品中存在对碱敏感 均质样品 : 转移到空的 50 ml 试管内 测 ph 值, 并调至 加内标, 振摇并离心 的农药, 应使用缓冲盐试 剂盒 安捷伦建议首选 该缓冲盐试剂盒 选择分散固相萃取试剂盒 AOAC 方法 EN 方法 选择标准 : 普通水果或蔬菜 含脂 / 蜡的水果和蔬菜 普通水果或蔬菜 含脂 / 蜡的水果和蔬菜 QuEChERS 方法 2 ml,15 ml 试剂盒 2 ml,15 ml 试剂盒 2 ml,15ml 试剂盒 2 ml,15 ml 试剂盒 要分析的食品类型 样品体积 有色水果和蔬菜 2 ml,15 ml 试剂盒 含脂和色素的水果和 蔬菜 2mL,15mL 试剂盒 有色水果和蔬菜 2mL,15mL 试剂盒 高色素果和蔬菜 2mL,15mL 试剂盒 样品量 :1 ml,6 ml, 或 8 ml* 振摇并离心 分析 * 样品量由方法规定, 而试剂盒正是根据这些指定的量而设计的 对于有酸性基团的农药 ( 苯氧醇酸类 ), 应直接进行 LC/MS/MS 分析 ( 跳 过分散固相萃取步骤 ) 在分散固相萃取过程中, 酸性基团能够与 PSA 相互作用 14

15 早期的 QuEChERS 方法 用 Agilent Bond Elut QuEChERS 预清洗试剂盒及 GC/MS 分析苹果中的农药残留 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要介绍了用快速 简单 廉价 高效 耐用 安全 的 QuEChERS 样品制备方法, 进行苹果中残留的 15 种农药成 份的提取 这 15 种农药代表了水果中常见的典型挥发 / 半挥发 性的农药 不用缓冲盐的 QuEChERS 提取方法最初在 2003 年 发表 采用 GC/MS 选择离子检测 (SIM) 模式分析农药残留, 灵敏度达到 10 ng/g 15

16 仪器条件 GC/MS 条件色谱柱 : 进样方式 : 进样口 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 毛细管柱,30 m x mm,0.25 µm( 部件号 UI) 手动进样 不分流 QuEChERS 操作步骤 QuEChERS 萃取步骤 ( 第一步 ) 将 10 g 苹果匀浆后装入 50 ml 离心管中样品加标并涡旋 1 min 加 10 ml 乙腈 载气 : 氦气恒流模式 升温程序 : 70 ºC (2 min), 以 25 ºC/min 升温至 150 ºC (0 min) 以 3 ºC/min 升温至 200 ºC (0 min), 以 8 ºC/min 升温至 280ºC (7min) 进样量 : 1 µl 质谱条件 调谐文件 : 模式 : Atune.u SIM 离子源 四极杆 传输线温度 : 分别为 230 ºC 150 ºC 280 ºC 溶剂延迟时间 : 倍增电压 : 4 min 自动调谐电压 4 g 硫酸镁和 1 g 氯化钠 ( 部件号 ) 50 µl 内标 ( 磷酸三苯酯 ) 涡旋 30 s 5000 rpm 离心 5 分钟 QuEChERS 分散固相萃取 ( 第二步 ) 及分析 取 1 ml 上层液于 1.5 ml 离心管中, 加入 50 mg PSA 和 150 mg MgSO 4 ( 部件号 ) 涡旋混合 3 min 离心 5 分钟 取 0.5 ml 样品于样品瓶中 进样 1.5 µl GC/MS 分析 图 1. 普通水果和蔬菜的 QuEChERS 提取步骤 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 不带缓冲盐萃取试剂盒, 部件号 用于普通水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散萃取试剂盒,2 ml, 部件号 用于普通水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散固相萃取试剂盒,15 ml, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 毛细管柱,30 m x 0.25 mm,0.25 µm, 部件号 UI 16

17 结果 采用用于普通水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取和分散固相萃取试剂盒制备样品后加标的苹果提取液 (50 ng/g) 采用用于普通水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS 提取和分散固相萃取试剂盒制备样品后的苹果空白样品 图 2. 苹果空白提取液与加标的苹果提取液的比较 表 1. 早期 QuEChERS 方法处理后分析苹果中农药残留的回收率和重现性 (n=4) 低 QC 10 ng/g 中等 QC 50 ng/g 高 QC 200 ng/g 农药 回收率 RSD 回收率 RSD 回收率 RSD 敌敌畏 邻苯基苯酚 林丹 二嗪农 甲基毒死蜱 毒死蜱 二氯二苯甲酮 外环氧七氯 g- 氯丹 a- 氯丹 狄氏剂 DDE 硫丹硫酸酯 百灭宁 蝇毒磷 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 EN 17

18 EN 方法 使用安捷伦 Bond Elut QuEChERS 欧洲标准 EN 试剂盒对苹果中的农药残留进行 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用指南介绍了使用欧盟标准中的简单 快捷 廉价 有效 耐用 安全的 (QuEChERS) 样品制备方法对苹果中 16 种农药残 留物的萃取和净化 通过液相色谱和电喷雾电离串联质谱仪联 用 (LC-ESIMS/MS), 在正离子多反应监测模式下测定了苹果萃取 物中的目标农药 18

19 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl 流动相 : 安捷伦 ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl,3.0 x 150 mm,3.5µm ( 部件号 ) 0.3 或 0.5 ml/min A: 5 mm ph 5.0 的乙酸铵甲醇 / 水 (20:80) 溶液 B: 5 mm ph 5.0 的乙酸铵乙腈溶液 洗针 : 1:1:1:1 ACN/MeOH/IPA/H 2 O(0.2% 甲酸 ) 梯度 : 后运行 : 总的分析周期 : 质谱条件正离子模式 流速 时间 (min) % B (ml/min) STOP 4 min 17 min 气体温度 : 350 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 10 L/min 40 psi 4000 V QuEChERS 操作程序 称取 10 g (±0.05 g) 粉碎的样品至一个 50 ml 的离心管 添加 100 µl 内标溶液至样品中, 涡旋混合 1 分钟 加入 10 ml 乙腈, 振摇 1 min 加入 Bond Elut EN 萃取包, 用手用力振摇 1 min 于 4000 rpm 离心 5 min 取 1 ml 上层乙腈转移至 Bond Elut QuEChERS EN 分散固相萃取 2 ml 萃取管或者 6 ml 上层乙腈转移至 Bond Elut QuEChERS EN 分散固相萃取 15 ml 萃取管 涡旋混合 1 min 2 ml 萃取管于 rpm 离心 2 min, 15 ml 萃取管于 4000 rpm 离心 5 min 将 200 µl 的提取液转移到一个自动进样器样品瓶中, 加入 10 µl 含 1% 甲酸的乙腈, 加入 800 µl 水稀释 图 1. QuEChERS EN 样品制备流程图 样品进行 LC/MS/MS 分析 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 方法提取试剂盒, 部件号 用于普通水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 方法分散固相萃取试剂盒,2 ml 部件号 ;15 ml 部件号 Agilent ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl LC 色谱柱,3.0 x 150 mm,3.5 µm, 部件号

20 结果 x MRM ( & ) low QC -1.d (%) (min) 图 ng/g 加标的苹果提取物的色谱图 峰鉴定 :1. 甲胺磷,2. 乙酰甲胺磷,3. 吡蚜酮,4. 多菌灵,5. 吡虫啉,6. 噻菌灵,7. 敌敌畏,8. 残杀威,9. 甲基硫菌灵, 10. 甲萘威,11. 灭克磷,12. 戊菌唑,13. 嘧菌环胺,14. 苯氟磺胺,15. 醚菌酯,16, 甲苯氟磺胺 ml 6 ml (%) 图 3. 1-mL 分散 SPE 和 6-mL 分散 SPE 的结果比较 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 20

21 用安捷伦 Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒进行苹果中的农药残留的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用报告报导了使用欧洲标准 (EN) 中的快速 简便 经济 高效 耐用和安全 (QuEChERS) 的样品制备方法, 提取并净化苹 果中 17 种 GC 分析的多种类型残留农药 该方法包括先用水 / 乙腈系统初步提取, 然后加盐后经提取 / 分配步骤, 再用分散固 相萃取 ( 分散 SPE) 进行净化 用气相色谱 / 质谱 (GC/MS) 选 择性离子监测 (SIM) 模式对苹果提取物中目标农药进行分析 仪器条件 GC 条件 色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱 15 m 0.25 mm,0.25 µm( 部件号 19091S-431UI) 进样口 : 不分流进样 进样口衬管 : Helix 去活双锥形衬管 ( 部件号 ) 载气 : 氦气 进样口压力 : 运行过程,20.18 psi( 恒压模式 ); 反吹过程, 1.0 psi 进样口温度 : 250 ºC 进样量 : 1.0 µl 分流出口吹扫流速 : 柱温箱升温程序 : 后运行 : 微板流路控制技术 : 辅助 EPC 气体 : 辅助 EPC 压力 : 连接管路 : 限流器 : 连接管路 : 30 ml/min, 在 0.75 min 处开始 70 ºC( 保持 1 min), 以 50 ºC/min 的速度升温至 150 ºC( 不保持 ), 以 6 ºC /min 的速度升温至 200 ºC( 不保持 ) 以 16 ºC/min 的速度升温至 280 ºC( 保持 6 min) 3 min 吹扫 Ultimate 接头 ( 部件号 G3186B) 用于反吹分析型色谱柱和进样口 氦气通入吹扫 Ultimate 接头 运行过程 4.0 psi, 反吹过程 80.0 psi 在进样口与吹扫 Ultimate 接头 ( 部件号 G3186B) 之间 65 cm 0.15 mm 0.15 µm DB-5ms 超高惰性 在吹扫 Ultimate 接头与 MSD 之间 QuEChERS 操作程序 称取 10 g 粉碎的样品 (±0.1 g), 至 50 ml 离心管中 加入 100 µl IS (TPP) 溶液, 需要时加入 QC 加标溶液, 涡旋混合 1 分钟 加入 10 ml 乙腈, 用力振摇 1 分钟 加入 Bond Elut EN QuEChERS 提取盐包 盖紧, 并用力振摇 1 分钟 4000 rpm 离心 5 分钟 取 1 ml 上层乙腈至 Bond Elut EN 分散 SPE 2 ml 萃取管中, 或取 6 ml 至 Bond Elut EN 分散 SPE 15 ml 萃取管中 涡旋混合 1 分钟,2 ml 试管 rpm 离心 2 分钟 ; 15 ml 萃取管 4000 rpm 离心 5 分钟 取 500 µl 提取液加至自动进样器样品管中, 加入 25 µl 含 1% FA 的乙腈, 充分混合 GC/MS 分析 图 1. 安捷伦 Bond Elut QuEChERS EN 提取流程图 质谱条件 调谐文件 : Atune.u 模式 : SIM( 有关详细设置请, 请参见应用摘要的表 2) 离子源 四极杆 传输线温度 : 分别为 230 ºC 150 ºC 和 280 ºC 溶剂延迟 : 倍增器电压 : 2.30 min 自动调谐电压 21

22 结果 A IS (min) 2 IS B (min) 图 2. 苹果提取物的 GC/MS 色谱图 (A) 苹果提取物空白对照 ;(B) 50 ng/g 加标苹果提取物 峰组分 :1. 敌敌畏,2. 邻苯基苯酚,3. 林丹,4. 二嗪农, 5. 百菌清,6. 甲基毒死蜱,7. 苯氟磺胺,8. 二氯二苯甲酮,9. 环氧七氯,10. g- 氯丹,11. DDE,12. a- 氯丹,13. 狄氏剂,14. 乙硫磷,15. 硫丹硫酸酯, 16. 氯菊酯,17. 蝇毒磷 内标 : 磷酸三苯酯 (TPP) 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 方法萃取试剂盒, 部件号 用于普通蔬菜和水果的 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 方法分散固相萃取试剂盒,2 ml, 部件号 , 15 ml, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 分析柱,15 m x 0.25 mm,0.25 µm, 部件号 19091S-431UI 22

23 120 1 ml 6 ml o a- (%) g- DDE 图 3. 用 2 ml 和 15 ml Agilent Bond Elut 分散提取试剂盒分别提取的 1 ml 和 6 ml 样品的回收率和精密度 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 23

24 用 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒进行菠菜中残留农药的 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用方法介绍了一种简单 快捷 廉价 有效 耐用 安全的 (QuEChERS) EN 样品制备方法及其应用, 该方法可用于菠菜中 13 种具代表性的不同类别残留农药的萃取和净化 菠菜被认为是一种高色素基质, 因此选择了用于高色素水果和蔬菜的 EN 分散固相萃取试剂盒 试剂盒中添加了 7.5 mg/ml 石墨化炭黑 (GCB) 的乙腈萃取剂 用液相色谱和电喷雾电离串联质谱联用系统 (LC-ESI-MS/MS), 采用正离子多反应监测模式 (MRM) 测定菠菜萃取物中的残留农药 QuEChERS 操作程序 称取 10 g (± 0.1 g) 菠菜样品于 50 ml 离心管中 加入 100 µl 内标溶液和 QC 加标溶液 ( 如果需要 ), 涡旋 1 分钟 加入 15 ml 含 1% 乙酸的乙腈溶液, 随后加入 Bond Elut AOAC QuEChERS 萃取试剂 盖好离心管, 剧烈振荡 1 分钟,4000 rpm 离心 5 分钟 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl Agilent ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus 苯基 - 己基柱,3.0 x 150 mm,3.5 μm( 部件号 ) 0.3 ml/min 流动相 : A: PH=5 的 5 mm 乙酸铵 MeOH/H 2 O=20:80 溶液 ; B: PH=5 的 5mM 乙酸铵乙腈溶液 洗针液 : 梯度 : 后运行 : 总分析时间 : 质谱条件正离子模式 1:1:1:1 乙腈 / 甲醇 / 异丙醇 / 水含 0.2% 甲酸 流速 时间 (min) % 乙腈 (ml/min) 停止 4 min 17 min 早期的方法 将 1 ml 乙腈萃取物加到 2 ml 分散固相萃取管中 涡旋 30 s rpm 离心 2 分钟 取一定量溶液进行 LC/MS/MS 或 GC/MS 分析 改进的方法 将 1 ml 乙腈萃取物加到 2 ml 分散固相萃取管中 加 325 µl 甲苯 涡旋 30 s rpm 离心 2 分钟 吸取 825 µl 上层乙腈到另一管中 30 ºC 氮气吹干 用 600 µl 含 0.1% 甲酸的乙腈溶液复溶 涡旋并超声处理 取一定量溶液进行 LC/MS/MS 或 GC/MS 分析 气体温度 : 350 ºC 气体流速 : 10 L/min 雾化气器压力 : 40 psi 毛细管电压 : 4000 V 图 1. QuEChERS EN 方法操作流程图 ( 早期和改进的分散固相萃取方法,2 ml 体积 ) 24

25 结果 , 6 (%) (min) 8 9 IS 图 2. 菠菜空白基质 (A) 和 50 ng/g 加标样品 (B) 经 EN 法处理后的 MRM 色谱图 峰鉴别 :1. 甲胺磷,2. 乙酰甲胺磷,3. 吡蚜酮,4. 多菌灵,5. 吡虫啉,6. 噻菌灵,7. 残杀威,8. 甲萘威, 9. 灭线磷,10. 抑霉唑,11. 戊菌唑,12. 嘧菌环胺,13. 醚菌甲基 IS: 内标物, 三苯基磷 表 1. 6 ml 分散固相萃取管 ( 部件号 ) 中加标菠菜样品中农药的回收率和重现性 10 ng/g 加标 QC 50 ng/g 加标 QC 200 ng/g 加标 QC 分析物 回收率 RSD (n=6) 回收率 RSD (n=6) 回收率 RSD (n=6) 甲胺磷 乙酰甲胺磷 吡蚜酮 * 多菌灵 * 吡虫啉 噻菌灵 * 残杀威 西维因 灭线磷 抑霉唑 戊菌唑 嘧菌环胺 * 醚菌酯 * 含平面结构的农药 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 方法提取试剂盒, 部件号 用于高色素水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒, 部件号 和 Agilent ZORBAX 增强型溶剂节省 Eclipse Plus Phenyl-Hexyl LC 色谱柱,3.0 x 150 mm,3.5 µm, 部件号 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 25

26 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 丙烯酰胺试剂盒以 HPLC-DAD 法测定食用油中的丙烯酰胺 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了以甲基丙烯酰胺为内标使用 QuEChERS 样 品制备方法分析食用油中的丙烯酰胺 丙烯酰胺是存在于烹饪 过程和食品热处理中的副产物 丙烯酰胺的回收率为 84% 至 93.8% 在配置了二元泵和二极管阵列 (DAD) 的 Agilent 1200 Infinity 系列仪器上 在 210 nm 处进行分析 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : Agilent ZORBAX HILIC Plus, mm,3.5 μm 0.2 ml/min 5 μl 流动相 : 等度洗脱 : A:3% 5 mm 乙酸 B:97% 乙腈 运行时间 : 后运行时间 : 检测器 : 10 min 3 min DAD,210 nm 处 QuEChERS 操作程序 称取 1 g 食用油样品, 放入 50 ml 离心管中 向样品中添加 1000 μl 20 ng/ml 的内标溶液 1000 μg/ml 的加标溶液 用力振摇 1 min 加入 5 ml 正己烷 用力振摇 1 min 加入 9 ml 水和 10 ml 乙腈 用力振摇 1 min 加入 Bond Elut QuEChERS 盐包进行丙烯酰胺萃取 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 弃去上层己烷相 将 6 ml 等分 CH 3 CN 相转移至 Bond Elut QuEChERS 15 ml 分散 SPE 管 ( 含有 PSA C18EC 和 MgSO 4 ) 中 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 将 1000 μl 萃取液转移至自动进样器样品瓶中 样品可直接用于 HPLC-DAD 分析 图 1. 适用于食用油中丙烯酰胺分析的 QuEChERS 样品制备程序 26

27 结果 mau 空白食用油萃取物 时间 (min) mau 加标食用油萃取物 甲基丙烯酰胺 ( 内标 ) 4 3 丙烯酰胺 时间 (min) 图 2. 空白食用油萃取物的色谱图 图 3. 加标食用油萃取物的色谱图 表 1. 食用油样品中丙烯酰胺的回收率和相对标准偏差 (n=6) 浓度 (ng/ml) % 回收率 (n=6) %RSD (n=6) 上述应用摘要中所使用的产品 适用于丙烯酰胺分析的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent ZORBAX HILIC Plus 色谱柱, mm,3.5 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 27

28 蔬菜中农药的盲检研究 Bond Elut QuEChERS 萃取试剂盒和 Agilent 5975T LTM GC/MSD 的应用 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS EN 样品制备方法鉴定茄果类蔬菜中的目标农药 使用圣女果和黄瓜作为农药基质 分析仪器是配置 Agilent 7693 自动液体进样器的 Agilent 5975T LTM GC/MSD 系统 RTL 软件是 Agilent MSD ChemStation 的特点之一 QuEChERS 操作程序 称取 5 g 蔬菜匀浆样品加入 50 ml 离心管中加入 5 ml 水, 用力振摇 1 min 加入 10 ml 乙腈, 用力振摇 30 秒 仪器条件 仪器色谱柱 : 保护柱 : GCMS 系统 : 进样口 : 自动进样器 : Agilent 7693 Agilent J&W HP-5ms LTM, 30 m 0.25 mm,0.25 μm 与分析色谱柱同相,1 m 长色谱柱, 连接至进样器 5975T LTM 分流 / 不分流 实验条件 进样口温度 : 280 ºC 进样量 : 1 μl 进样模式 : 不分流进样 载气 : 氦气 柱前压 : psi, 恒压模式 方法 : 保留时间锁定至甲基毒死蜱 min 处 LTM 柱温箱温度 : 70 ºC( 保持 2 min), 以 25 ºC/min 的速度升温 至 150 ºC( 不保持 ) 再以 3 ºC/min 的速度升温 至 200 ºC( 不保持 ), 以 8 ºC/min 的速度升温 至 280 ºC( 保持 10 min) 传输线温度 : 270 ºC MSD 接口温度 : 270 ºC 离子源温度 : 230 ºC 四极杆温度 : 150 ºC 电离模式 : 扫描模式 : EMV 模式 : EI 增益因子 : 5.00 产生的电子倍增器 (EM) 电压 : 溶剂延迟 : 全扫描, u 增益因子 1129 V 3 min 加入 Bond Elut QuEChERS EN 萃取包 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 将 6 ml 上层乙腈相转移至 Bond Elut QuEChERS EN 15 ml 分散 SPE 管中 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 移取 4 ml 等分萃取液, 经过 0.22 µm 滤膜过滤 ; 然后将其加入自动进样器样品瓶中 样品可直接用于 GC/MSD 分析 图 1. 用于分析茄果类蔬菜中农药残留的 QuEChERS EN 操作程序 28

29 结果 丰度 2.2e+07 2e e e e e+07 1e 时间 图 2. 将 0.2 至 1.0 µg/g 的农药标样加入圣女果中分析得到的色谱图 利用 DRS 软件在 2 min 内即能找到所有目标农药 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent J&W HP-5ms LTM 柱,30 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 29091S-433LTM 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 29

30 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒以 LC/MS/MS 法分析绿茶中的农药残留 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS EN 样品制备方法来萃取和净化 12 种农药残留, 这些农药代表了绿茶中的多种农药类型 由于绿茶中含有大量的叶绿素, 因而属于色素含量高的样品 通过 Agilent 1200 Infinity 系列液相色谱与在 MRM 模式下操作的电喷雾离子化 Agilent 6410 三重串联四极杆质谱仪系统联用, 来确定绿茶样品中是否存在目标农药 平均回收率在 87% 至 108% 的范围内 ( 平均值为 93.5%) QuEChERS 操作程序 称取 2 g (+/- 0.1 g) 均质肝脏样品放入 50 ml 离心管中 添加 100 µl 内标溶液 (10 µg/ml of TPP) 至样品中得到 50 ng/g 的浓度 盖紧瓶盖并涡旋 1 min 向各个离心管中分别加入 8 ml 水 ; 盖紧瓶盖并涡旋 1 min 向每根离心管中加入两个陶瓷均质子和 10 ml 乙腈 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl 流动相 : 针头清洗 : Agilent Poroshell 120 EC-C18, mm, 2.7 μm,( 部件号 ) 0.4 ml/min A:5 mm 甲酸 (FA) 的水溶液 B:5 mm 甲酸的乙腈溶液 1:1:1:1 ACN:MeOH:IPA:H 2 O w/0.2% FA 梯度 : 时间 (min) % 乙腈 0 5 后运行 : 总运行时间 : MS 条件正离子模式 min 11 min 盖紧瓶盖并振摇 1 min 加入 Bond Elut EN 萃取盐包 用力振摇 20 秒, 然后在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 6 ml 等分乙腈上清液加入 Bond Elut EN 15 ml 分散 SPE 管中 盖紧瓶盖并涡旋 1 min; 然后在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 萃取液转移至 10 ml 试管中, 并在低于 40 ºC 的温度下于氮气气氛中干燥 残渣用恒定体积的 1 ml 乙腈 / 水 (1/9) 溶解 再用 0.45 µm 滤膜对残渣进行过滤 以 LC/MS/MS 法进行分析 图 1. 用于分析绿茶中农药残留的 QuEChERS EN 操作程序 气体温度 : 350 ºC 气体流速 : 10 L/min 雾化器压力 : 40 psi 毛细管电压 : 3500 V 30

31 结果 图 2. 用 EN 方法处理的 50 ng/g 加标样品的 MRM 色谱图 峰识别 :1. 高灭磷,2. 吡蚜酮,3. 多菌灵,4. 涕必灵,5. 吡虫啉,6. 抑霉唑,7. 残杀威,8. 胺甲萘,9. 嘧菌环胺,10. 灭线磷,11. 戊菌唑,12. 醚菌酯, 内标 :TPP 表 1. 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 测得加标绿茶的回收率和重现性 QC 加标浓度 10 ng/g QC 加标浓度 50 ng/g QC 加标浓度 200 ng/g 分析物 回收率 RSD (n=6) 回收率 RSD (n=6) 回收率 RSD (n=6) 高灭磷 80.5% 5.4% 91.7% 2.9% 88.9% 8.2% 吡蚜酮 43.1% 3.0% 42.2% 3.4% 43.4% 9.8% 多菌灵 114.6% 11.6% 97.6% 2.0% 105.0% 6.2% 噻菌灵 98.1% 6.9% 90.4% 2.4% 81.7% 5.8% 吡虫啉 104.3% 11.7% 108.6% 2.5% 93.9% 7.9% 抑霉唑 97.5% 4.4% 87.8% 5.6% 92.4% 4.6% 残杀威 98.1% 2.4% 110.2% 1.7% 107.8% 3.9% 甲奈威 89.7% 11.4% 104.9% 3.3% 108.1% 5.2% 嘧菌环胺 84.9% 2.1% 92.5% 3.7% 93.9% 5.5% 灭线磷 103.4% 3.1% 111.2% 3.2% 104.9% 5.7% 戊菌唑 108.7% 2.9% 94.3% 4.5% 89.8% 3.3% 醚菌酯 105.7% 12.4% 96.4% 2.5% 99.2% 5.5% 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒, 部件号 用于含有色素水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒, 部件号 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱, mm,2.7 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 31

32 使用 Agilent QuEChERS 进行样品制备后使用 Agilent 1290 Infinity 液相色谱和 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱对虾中的激素进行测定 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS EN 样品制备方法萃取分析虾中 13 种激素 本研究开发了一种使用配备有 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱的 Agilent 1290 Infinity LC 测定虾中激素的方法 方法回收率在 91.6% 至 107.2% 的范围内 QuEChERS 操作程序 称取 5 g (+/ g) 均质样品放入 50 ml 离心管中 离心 30 秒使样品沉降到管底, 然后加入适量的 QC 加标溶液 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 仪器 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl 检测波长 : 流动相 : Agilent Poroshell 120 EC-C18, mm, 2.7 μm( 部件号 ) 配置 DAD 检测器的 Agilent 1290 Infinity LC 0.8 ml/min 230 nm 水 - 乙腈梯度 梯度 : 时间 (min) % 水 % 乙腈 盖紧瓶盖并涡旋样品 30 秒, 再加入 5 ml 水盖紧瓶盖并涡旋 10 秒, 然后向各个管中加入 10 ml 乙腈盖紧瓶盖并振摇 30 秒加入 Bond Elut EN 萃取包盖紧瓶盖并用力振摇 1 min 在 4 ºC 下以 4000 rpm 的速度离心 5 min 移取 6 ml 等分乙腈上清液加入 Bond Elut 15 ml 分散 SPE 管中 盖紧瓶盖并涡旋 1 min 在 4 ºC 下以 rpm 的速度离心 3 min 移取 4 ml 萃取液加入另一个试管中, 在 35 ºC 下于氮气气氛中干燥 使用 2 ml 1:4 的 ACN/H 2 O 溶液重新溶解 涡旋并超声处理 10 min, 然后用 0.2 μm 醋酸纤维素离心过滤膜过滤 将过滤后的样品转移至自动进样瓶中 ; 盖紧瓶盖并充分涡旋后进行 HPLC 分析 图 1. 用于分析虾中激素的 QuEChERS EN 操作程序 32

33 结果 mau 25 极性干扰化合物 ppm 加标空白 非极性干扰化合物 空白 min min 图 2. 空白样品和 0.5 ppm 加标空白样品的色谱图 表 1. 用于虾中激素测定的 QuEChERS 方法的回收率和重现性 分析物浓度回收率 (%) %RSD (n=6) 雌三醇 泼尼松 地塞米松 勃地酮 氢化可的松 醋酸氟氢可的松 美雄酮 雌二醇 睾酮 甲睾酮 雌酮 乙烯雌酚 己烷雌酚 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒, 部件号 用于分析肉类中药物残留的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒,15 ml, 部件号 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱, mm,2.7 µm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 33

34 使用 Bond Elut QuEChERS 萃取试剂盒和 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 色谱柱分析大米中的农药残留 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS EN 样品制备方法来萃取和净化大米中的 57 种可进行 GC 分析的多农药残留 安捷伦开发的 GC 和 GC/MS RTL 数据库中 ( 部件号 G1672AA) 包括有 962 种农药 农药代谢物和疑似内分泌干扰物 本实验在配置 5975C 惰性 MSD 和 Agilent 7683 自动液体进样器 (ALS) 的 Agilent 7890 GC 上进行 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 色谱柱可对多种化合物进行分离 大多数化合物的回收率在 80% 至 110% 的范围内 QuEChERS 操作程序 称取 5 g 粉碎大米放入 50 ml 离心管中, 并加入 5 ml 水添加内标溶液, 必要时添加 GC 分析加标溶液, 然后涡旋 1 min 加入 10 ml 乙腈, 涡旋 1 min 加入 Bond Elut EN QuEChERs 萃取盐包 盖紧瓶盖并用力振摇 1 min 仪器条件 在 4000 rpm 下离心 5 min GC 条件 色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱,30 m 0.25 mm,0.25 μm( 部件号 19091S-433UI) 进样口温度 : 250 ºC 载气 : 保留时间锁定 : 进样模式 : 进样量 : 柱温箱 : 氦气, 恒压模式 甲基毒死蜱锁定于 min 不分流进样, 吹扫流量 50 ml/min,0.75 min 1 μl 70 ºC( 保持 2 min), 以 25 ºC/min 的速度升温至 150 ºC( 不保持 ), 再以 3 ºC/min 的速度升温至 200 ºC, 接着以 8 ºC/min 的速度升温至 280 ºC ( 保持 10 min), 后运行 :320 ºC( 保持 5 min) 移取上层的乙腈溶液 6 ml 至 Bond Elut EN 15 ml 分散 SPE 管中涡旋 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 移取 0.5 ml 萃取液到自动进样器样品瓶中以 GC/MS 法分析样品图 1. 大米中农药残留的 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取操作程序 质谱条件 溶剂延迟 : 4 min MS 温度 : 230 ºC( 离子源 );150 ºC( 四极杆 ) 传输线 : 280 ºC MS 谱库 : Agilent RTL 农药库 (G1672AA) 和 NIST08 质谱库 MS: EI,SIM/ 扫描 扫描模式 : 质量范围 ( amu) 34

35 结果 丰度 , , , , , * 16, , , * 140, , , ,000 时间 甲胺磷 2 敌敌畏 3 氧化乐果 4 久效磷 5 六六六 α 异构体 6 六氯苯 7 乐果 8 六六六 β 异构体 9 林丹 10 五氯硝基苯 11 菲 -d10* 12 二嗪农 13 六六六 δ 异构体 14 敌稗 15 甲基对硫磷 16 甲基毒死蜱 17 烯菌酮 18 七氯 19 甲霜灵 20 杀螟硫磷 21 甲基嘧啶磷 22 艾氏剂 23 马拉硫磷 24 倍硫磷 25 毒死蜱 26 对硫磷 27 三唑酮 28 七氯环氧化物 29 二甲戊乐灵 30 异柳磷 31 喹硫磷 32 三唑醇 33 杀扑磷 34 丁草胺 35 狄氏剂 36 稻瘟灵 37 p,p -DDE 38 腈菌唑 39 异狄氏剂 40 p,p -DDD 41 o,p -DDT 42 乙硫磷 43 p,p -DDT 44 磷酸三苯酯 * 45 异丙二酮 46 亚胺硫磷 47 联苯菊酯 48 甲氰菊酯 49 四氯杀螨砜 50 伏杀磷 51 氯氟氰菊酯 52 氯菊酯 I 53 氯菊酯 II 54 氯氰菊酯 I 55 氰戊菊酯 56 氯氰菊酯 II 57 溴氰菊酯 * 内标 图 2. 大米中 200 ng/ml 农药的总离子流色谱图 (TIC) 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱,30 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 19091S-433UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 35

36 AOAC 方法 使用安捷伦 Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒测定苹果中农药残留物的 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用指南介绍了一种简单 快捷 廉价 有效 耐用 安全的 (QuEChERS) 样品制备方法, 即美国官方分析化学师协会 (AOAC) 方法对苹果中 16 种农药残留物的萃取和净化 本应用方法的苹果中农药的定量限 (LOQ) 为 5 ng/g, 大大低于最大容许残留限量 (MRLs) 回收试验的加标水平分别为 ng/g, 平均回收率范围为 76% 到 117%( 平均 95.4%), 相对标准偏差低于 15%( 平均 4.3%) 36

37 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl 安捷伦 ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus Phenyl- Hexyl,3.0 x 150 mm, 3.5 µm( 部件号 ) 0.3 或 0.5 ml/min 流动相 : A:PH=5 的 5 mm 乙酸铵甲醇 / 水 =20:80 溶液 ; B:PH=5 的 5 mm 乙酸铵乙腈溶液 针清洗 : 1:1:1:1 乙腈 / 甲醇 / 异丙醇 / 水 (0.2% 甲酸 ) 梯度 : 后运行 : 总分析时间 : 质谱条件正离子模式 流速 时间 (min) % B (ml/min) 停止 4 min 17 min 气体温度 : 350 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 10 L/min 40 psi 4000 V 图 1. QuEChERS AOAC 样品制备流程图 QuEChERS 操作程序 精确称取 15 g 均质样品 (± 0.05 g) 至 50 ml 离心管中 添加 100 µl 内标溶液至样品中, 涡旋混合 1 分钟 添加 15 ml 1% 的乙酸 - 乙腈溶液, 用力振摇 1 分钟 加入 Bond Elut QuEChERS AOAC 盐包, 盖好萃取管, 用力振摇 1 分钟 4000 rpm 条件下离心 5 分钟 将上层乙腈层转移至 Bond Elut QuEChERS 分散固相萃取管中, 1 ml/2 ml 管或 8 ml/15 ml 管 涡旋 1 分钟然后离心 将 200 µl 萃取物转移至自动进样器样品瓶中 如果需要的话, 用 800 µl 相应的溶液稀释 样品进行 LC/MS/MS 分析 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 缓冲盐萃取试剂盒, 部件号 用于普通蔬菜和水果的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒,2 ml, 部件号 或 15 ml, 部件号 Agilent ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl LC 色谱柱,3.0 x 150 mm,3.5 µm, 部件号

38 结果 MRM ( & ) low QC -1.d (%) (min) 图 ng/g 浓度加标苹果萃取物的色谱图 峰组分 :1. 甲胺磷 ;2. 乙酰甲胺磷 ;3. 吡蚜酮 ;4. 多菌灵 ;5. 吡虫啉 ;6. 涕必灵 ;7. 敌敌畏 ;8. 残杀威 ;9. 甲基硫菌灵 ;10. 胺甲萘 ; 11. 灭线磷 ;12. 戊菌唑 ;13. 嘧菌环胺 ;14. 苯氟磺胺 ;15. 醚菌酯 ;16. 对甲抑菌灵 ml 8 ml (%) 图 3. 1 ml 与 8 ml 分散 SPE 样品量的分析结果对比 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 38

39 采用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒测定苹果中农药残留的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用报告报导了使用快速 简便 经济 高效 耐用和安全 (QuEChERS) 的 AOAC 样品制备方法, 提取并净化苹果中 17 种 GC 分析的多类别残留农药 使用气相色谱 / 质谱 (GC/MS) 的选择离子检测 (SIM) 模式对苹果提取物中的目标农药进行了 分析 仪器条件 气相色谱条件 色谱柱 : 自动采样器 : 进样口 : 载气 : 保留时间锁定 : Agilent J&W HP-5ms Ultra Inert, 30 m x 0.25 mm, 0.25 µm (Part No S-433UI) Agilent 7683 自动液体进样器 不分流 氦气, 恒压模式 甲基毒死蜱锁定于 分钟 ( 柱头压力为 22.0 psi) 柱箱升温程序 : 70 ºC(2 分钟 ), 以 25 ºC/min 升到 150 ºC (0 分 ), 以 3 ºC/ 分钟升至 200 ºC(0 分 ), 以 8 ºC/ 分钟升 进样量 : 1.0 µl 质谱条件 调谐文件 : 模式 : 到 280 ºC(11.5 分钟 ) Atune.u SIM( 参见应用摘要的表 2 了解有关设置的详细信息 ) 离子源 四极杆 传输线温度 : 分别为 230 ºC 150 ºC 和 280 ºC 自动调谐电压 : 倍增电压 : 3 min 自动调谐电压 QuEChERS 操作程序 称取 15 g 粉碎的样品 (±0.01 g), 至 50 ml 离心管中 加入 100 µl IS (TPP) 溶液, 需要时加入 QC 加标溶液, 涡旋混合 1 分钟 加入 15 ml 的含有 1% HAc 的 ACN 溶液 加入 Bond Elut AOAC QuEChERS 萃取盐包 盖紧, 并用力振摇 1 分钟 4000 rpm 下离心 5 分钟 取 1 ml 上层乙腈至 Bond Elut AOAC 分散 SPE 2 ml 萃取管中, 或取 8 ml 至 Bond Elut AOAC 分散 SPE15 ml 萃取管中 涡旋混合 1 分钟,2 ml 萃取管 rpm 离心 2 分钟 ; 15 ml 萃取管 4000 rpm 离心 5 分钟 取 500 µl 提取液加至自动进样器样品管中 Analyze by GC/MS 进行 GC/MS 分析 图 1. Agilent QuEChERS AOAC 样品萃取过程的流程图 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 缓冲盐萃取试剂盒, 部件号 用于普通蔬菜和水果的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒,2 ml, 部件号 或 15 ml, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 毛细管柱,30 m x 0.25 mm,0.25 µm, 部件号 19091S-433UI 39

40 结果 A IS B 图 2. 苹果提取物的 GC/MS 色谱图 (A) 苹果提取空白 ;(B) 50ng/g 加标苹果提取物 峰鉴定 :1. 敌敌畏,2. s- 苯基苯酚,3. 二嗪磷,4. 百菌清,5. 西维因,6. 苯氟磺胺,7. 百灭宁, 8. 灭菌丹,9. γ- 氯丹,10. 硫丹,11. 狄氏剂,12. DDE,13. 乙磷酸,14. 硫丹硫酸盐,15. 异狄氏剂酮,16. 氯菊酯,17. 蝇毒磷 内标为磷酸三苯酯 (TPP) ml 8 ml σ- γ- DDE (min) IS (min) (%) 图 3. 分别用 Agilent Bond Elut 2 ml 和 15 ml 分散试剂盒处理 1 ml 和 8 ml 提取物的回收率和精密度结果 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 40

41 采用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒进行菠菜中残留农药的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 快速 简单 廉价 高效 耐用 安全的 (QuEChERS) AOAC 样品制备方法, 可用于菠菜中 18 种适合于气相色谱分析的多种农药残留样品的萃取和净化 为了解决分散固相萃取中石墨化炭黑 (GCB) 引起的平面结构分子显著损失的问题, 对于平面结构的农药分子, 添加甲苯进行改进 利用 GC/MS 联用, 在选择离子检测 (SIM) 模式下对菠菜中目标农药萃取物进行了分析 QuEChERS 操作程序 将 15 g 菠菜样品 (± 0.1 g) 置于 50 ml 离心管中 添加 100 μl 内标溶液和 QC 加标溶液 ( 如果需要的话 ), 涡旋 1 分钟 加入 15 ml 1% 的冰醋酸乙腈溶液和 Bond Elut AOAC QuEChERS 萃取试剂盒 盖好离心管, 用力摇 1 min,4000 rpm 离心 5 min 仪器条件 早期方法 改进方法 气相色谱条件 色谱柱 : 进样口 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性,15 m x 0.25 mm,0.25 µm( 部件号 19091S-431UI) 不分流 进样衬管 : 螺纹锥型, 去活 ( 部件号 ) 载气 : 进样压力 : 氦气 进样温度 : 250 ºC 进样量 : 1.0 µl 分流出口吹扫流量 : 升温程序 : 后运行 : 微板流控技术 : Aux EPC 气体 : Aux EPC 压力 : 运行时 19.6psi( 恒压模式 ), 反吹时 1.0 psi 0.75 min 时 30mL/min 70 ºC( 保持 1 min), 以 50 ºC/min 的速度升温至 150 ºC( 保持 0 分钟 ), 后以 6 ºC/min 的速度升温至 200 ºC( 保持 0 分钟 ), 再以 16 ºC/min 的速度升温至 280 ºC( 保持 6 分钟 ) 3 min 带吹扫的 Ultimate Union( 部件号 G3186B)- 用于反吹分析柱和进样口 氦气直通至带吹扫的 Ultimate Union 运行时 4.0 psi; 反吹时 80.0 psi 色谱柱 : Agilent J&W HP-5MS 超高惰性柱 15 m 0.25 mm,0.25 μm( 部件号 19091S-431UI) 限流器 : 连接管路 : 质谱条件 调谐文件 模式 65 cm x 0.15 mm,0.15 μm DB-5MS 超高惰性 带吹扫的 Ultimate Union 和 MSD 之间 Atune.u 选择性离子 离子源 四极杆 传输线温度分别为 230 ºC 150 ºC 和 280 ºC 溶剂延迟 倍增器电压 2.30 min 自动调谐电压 将 1 ml 乙腈萃取物转移至 2 ml 分散固相萃取管中 涡旋 30 秒 rpm 离心 2 min 转移溶液进行 GC/MS 分析 将 1 ml 乙腈萃取物转移至 2 ml 分散固相萃取管中 加 325 µl 甲苯 涡旋 30 秒 rpm 离心 2 min 转移 825 μl 上层乙腈层至另一管中 30 ºC 氮气吹干 复溶于 600 μl 含 0.1% 甲酸的乙腈溶液 涡旋和超声助溶 转移溶液进行 GC/MS 分析 图 1. 菠菜样品的整个萃取流程图 ( 传统和改进分散固相萃取,2 ml 体系 ) 41

42 结果 A ,8 12 IS B ,8 12 IS 图 2. 经传统分散固相萃取法 (A) 和改进分散固相萃取法 (B) 处理的 50 ng/g 加标菠菜样品萃取物的 GC/MS 色谱图 峰鉴定 :1. 敌敌畏,2. σ- 苯基苯酚,3. 林丹,4. 二嗪农,5. 百菌清, 6. 甲基毒死蜱,7. 二氯二苯甲酮,8. 毒死蜱,9. 环氧七氯,10. 福尔培 ( 灭菌丹 ),11. γ- 氯丹,12. DDE,13. α- 氯丹,14. 狄氏剂,15. 乙硫磷,16. 硫丹硫酸盐,17. 百灭宁,18. 蝇毒磷 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 缓冲盐提取试剂盒, 部件号 用于高色素水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒,2 ml, 部件号 或 15 ml, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性气相柱,15 m x 0.25 mm,0.25 µm, 部件号 19091S-431UI 42

43 表 1. 菠菜的 AOAC 分散固相萃取,1 ml 样品量,2 ml 离心管,LC/MS/MS 测定结果 低 QC (10 ng/g) 中等 QC (50 ng/g) 高 QC (200 ng/g) 农药 回收率 RSD 回收率 RSD 回收率 RSD 敌敌畏 o- 苯基苯酚 林丹 二嗪农 百菌清 * 甲基毒死蜱 二氯二苯甲酮 * 毒死蜱 环氧七氯 福尔培 ( 灭菌丹 )* NA NA g- 氯丹 DDE a- 氯丹 狄氏剂 乙硫磷 硫丹硫酸盐 百灭宁 蝇毒磷 * * 由改进的分散固相萃取法得到的结果 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 43

44 采用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒测定菠菜中农药残留的 GC/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 用快速 简便 廉价 高效 耐用和安全的 (QuEChERS) AOAC 样品制备过程萃取和净化菠菜中的 13 种多类别农药残留 为了解决在分散相固相萃取中的石墨化炭黑 (GCB) 明显降低平面结构农药含量的问题, 采用了加入甲苯的改进方法 菠菜萃取物中目标农药由 LC-ESI-MS/MS 多反应监测 (MRM) 测定 将原始的方法和改进后的分散相固相萃取相结合, 测定了感兴趣的分析物的回收率和重现性, 对方法进行了验证 QuEChERS 操作程序 称取 15 g (± 0.1 g) 菠菜样品放入 50 ml 离心管中加入 100 µl 内标和 QC 加标溶液 ( 必要时 ), 涡旋振荡 1 min 加入 15 ml 1% HAc 的乙腈溶液和 Bond Elut QuEChERS AOAC 萃取试剂盒盖紧瓶盖并用力振摇 1 min, 在 4000 rpm 下离心 5 min 仪器条件 早期方法 改进的方法 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl 流动相 : 针清洗 : 梯度 : 后运行 : 总分析时间 : 质谱条件正离子模式 Agilent ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus Phenyl- Hexyl,3.0 x 150 mm,3.5 µm( 部件号 ) 0.3 或 0.5 ml/min A:pH 为 5.0 含 5 mm 乙酸铵的 20:80 甲醇 / 水溶液 B:pH 为 5.0 含 5 mm 乙酸铵的乙腈溶液 含 0.2% 甲酸的 1:1:1:1 ACN/ 甲醇 / 异丙醇 (IPA)/H 2 O 流速 时间 (min) % B (ml/min) 停止 4 min 17 min 气体温度 : 350 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 10 L/min 40 psi 4000 V 移取 1 ml 乙腈萃取液转移至 2 ml 分散 SPE 管中 涡旋振荡 30 秒 在 rpm 下离心 2 min 移取一定体积溶液进行 LC/MS/MS 或 GC/MS 分析 移取 1 ml 乙腈萃取液转移至 2 ml 分散 SPE 管中 加入 325 µl 甲苯 涡旋振荡 30 秒 在 rpm 下离心 2 min 移取 825 µl 乙腈上清液至另一个管中 在 30 ºC 下于 N 2 气氛中干燥 复溶于 600 µl 0.1% 甲酸的乙腈溶液 涡旋并超声 移取一定体积溶液进行 LC/MS/MS 或 GC/MS 分析 图 1. 所示流程图为菠菜样品的整个萃取过程 ( 原始和改进后的分散固相萃取方法 ) 44

45 结果 LC/MS/MS A IS B IS 图 ng/g 加标菠菜样品通过原始分散固相萃取 (A) 和改进分散固相萃取 (B) 萃取过程的 LC/MS/MS 谱图, 峰识别 :1. 甲胺磷,2. 乙酰甲胺磷,3. 吡蚜酮, 4. 多菌灵,5. 益达胺,6. 噻苯咪唑,7. 残杀威,8. 胺甲奈,9. 灭克磷,10. 抑菌唑,11. 戊菌唑,12. 嘧菌环胺,13. 醚菌酯 IS: 内标,TPP 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 缓冲提取试剂盒, 部件号 用于高色素水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒,2 ml, 部件号 或 15 ml, 部件号 Agilent ZORBAX 增强型溶剂节省 Eclipse Plus Phenyl-Hexyl LC 色谱柱,3.0 x 150 mm,3.5 µm, 部件号

46 120 1 ml 8 ml (%) 图 3. 1 ml 分散固相萃取和 8 ml 分散固相萃取的回收率和精密度结果 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 46

47 用甲苯和含有石墨化炭黑的 Agilent Bond Elut AOAC QuEChERS 试剂盒优化菠菜中平面结构农药的回收率 ( 出版号 CHCN) 引言 这一应用报告描述了在分散固相萃取 (SPE) 步骤加入甲苯对于 分析菠菜中农药的影响, 分析使用了安捷伦的专门用于高色素 的水果和蔬菜的 Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒 使用 改进过的 AOAC 方法,8 种难分析农药的回收率大幅度提高了 50% 到 300%, 并且 RSD < 10% 早期方法 移取 1 ml 乙腈萃取液转移至 2 ml 分散 SPE 管中 涡旋振荡 30 秒 在 rpm 下离心 2 min 移取一定体积溶液进行 LC/MS/MS 或 GC/MS 分析 QuEChERS 操作程序 第一次提取 / 分配后的乙腈提取物 改进的方法 移取 1 ml 乙腈萃取液转移至 2 ml 分散 SPE 管中 加入 325 µl 甲苯 涡旋振荡 30 秒 在 rpm 下离心 2 min 移取 825 µl 乙腈上清液至另一个管中 在 30 ºC 下于 N 2 气氛中干燥 复溶于 600 µl 0.1% 甲酸的乙腈溶液 涡旋并超声 移取一定体积溶液进行 LC/MS/MS 或 GC/MS 分析 图 1. 传统方法 ( 不加甲苯 ) 和改进方法 ( 加入甲苯 ) 的分散 SPE 步骤 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl Agilent ZORBAX 溶剂节省柱 Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl, mm,3.5 µm( 部件号 : ) 0.3 或 0.5 ml/min 流动相 : A:5 mm ph 5.0 的醋酸铵甲醇 / 水 (20:80) 溶液 ; B:5 mm ph 5.0 的醋酸铵乙腈溶液 针清洗 : 梯度 : 后运行 : 总分析时间 : 气相色谱仪条件 1:1:1:1 ACN/MeOH/IPA/H 2 O 含 0.2% FA 流速 时间 (min) % B (ml/min) 停止 4 min 17 min 色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱 15 m 0.25 mm,0.25 μm( 部件号 :19091S-431UI) 进样方式 : 不分流 进样口衬管 : Helix 双锥型, 去活 ( 部件号 : ) 载气 : 进样压力 : 氦气 进样温度 : 250 ºC 进样量 : 1.0 µl 分流出口吹扫流量 : 柱箱升温程序 : 后运行 : 毛细管 : Aux EPC 气体 : Aux EPC 压力 : 连接管路 : 限流器 : 连接管路 : 运行时 19.6 psi( 恒压模式 ), 反吹时 1.0 psi 0.75 min 时速度为 30 ml/min 70 ºC 保持 1 min, 以 50 ºC/min 的速度升到 150 ºC, 保持 0 min, 再以 6 ºC/min 的速度升到 200 ºC, 保持 0 min, 再以 16 ºC/min 的速度升到 280 ºC, 保持 6 min 3 min 带吹扫的 Ultimate Union( 部件号 :G3186B) 用于反吹分析柱和进样口 氦气通至带吹扫的 Ultimate Union 毛细管吹扫 运行时为 4.0 psi, 反吹时为 psi 进样口和带吹扫的 Ultimate Union 毛细管 ( 部件号 :G3186B) 之间 65 cm x 0.15 mm,0.15 μm DB-5 ms 超高惰性 带吹扫的 Ultimate Union 毛细管和 MSD 之间 47

48 结果 ml 1 ml 8 ml 8 ml 图 2. 使用改进方法 ( 加入甲苯 ) 和传统方法 ( 不加甲苯 ) 对于 1 ml 和 8 ml 分散 SPE 的结果比较 上述应用摘要涉及的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 提取试剂盒, 部件号 用于高色素水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒,2 ml, 部件号 或 15 ml, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 毛细管柱,15 m x 0.25 mm x 0.25 µm, 部件号 19091S-431UI Agilent ZORBAX 溶剂节省 Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl 液相色谱柱,3.0 x 150 mm,3.5 µm, 部件号

49 表 1. 加入甲苯改进的分散 SPE 对于一些农药的影响 传统方法 ( 不加甲苯 ) 改进方法 ( 加入甲苯 ) 分析物 回收率 RSD (n=6) 回收率 RSD (n=6) 改进方法的影响 检测方法 多菌灵 效果好 LC/MS/MS 噻菌灵 效果好 LC/MS/MS 吡蚜酮 效果好 LC/MS/MS 嘧菌环胺 效果好 LC/MS/MS 百菌清 效果好 GC/MS 蝇毒磷 效果好 GC/MS 二氯苯甲酮 效果好 GC/MS 灭菌丹 效果好 GC/MS 敌敌畏 效果很差 GC/MS o- 苯基苯酚 效果略差 GC/MS 二嗪农 效果略差 GC/MS 氯丹 无 GC/MS 合成菊脂 无 GC/MS 高灭磷 无 LC/MS/MS 胺甲萘 无 LC/MS/MS 残杀威 无 LC/MS/MS 如需查看本应用报告全文, 请登录 网站查找 CHCN 49

50 使用 Agilent 1290 Infinity LC 和 Agilent 6460 三重串联四极杆 LC/MS 以 UHPLC/MS/MS 法测定婴儿食品中的农药残留 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法萃取和净化婴儿食品中浓度低于欧盟条例 396/2005 中规定的最高残留限量 (MRL)( 对于水果或蔬菜,MRL 为 10 μg/kg) 的 40 种农药 使用 UHPLC 和三重串联四极杆 MS 来定性和定量分析婴儿食品基质中的痕量农药 根据重现性 线性和灵敏度对方法和萃取的效果进行评估 此外, 还考察了附加分散固相萃取净化的影响 检测限在 500 ng/kg 至 10 ng/kg (ppt) 的范围内, 远低于欧盟强制执行的 10 μg/kg (ppb) MRL 标准 QuEChERS 操作程序 称取 15 g 样品放入 50 ml 离心管中 加入 100 μl TPP 溶液 必要时加入加标溶液 涡旋 30 秒 加入 15 ml 1% v/v 乙酸的乙腈溶液和 Bond Elut AOAC 萃取盐包 ( 部件号 ) 仪器条件 方法参数 色谱柱 : Agilent ZORBAX Eclipse Plus RRHD C18, mm,1.8 µm 流动相 : 流速 : A:0.05% (w/v) 甲酸铵 % (v/v) 甲酸水溶液 B: 甲醇 0.5 ml/min 梯度 : 时间 (min) % B 0 至 5 10 至 65 5 至 至 至 至 温度 : 45 ºC 进样量 : 2 μl, 带针头清洗 ( 冲洗口,5 s, 水 / 甲醇 1/1) 检测器 : 离子化模式 : 喷射流参数 MS/MS 干燥气温度 : 250 ºC 干燥气流速 : 喷雾器压力 : 电喷雾模式, 正电离 10 L/min 30 psig 鞘气温度 : 340 ºC 鞘气流速 : 毛细管电压 : 喷嘴电压 : 11 L/min 4500 V 500 V 盖紧试管并用力振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 用进样针过滤器 ( 孔径 0.2 μm, 再生纤维素, 部件号 ) 对移取的 1 ml 样品进行过滤, 然后直接分析 ( 不经 SPE) 或继续执行下列步骤 ( 附加净化 ) 移取 8 ml 离心萃取液加入用于多脂样品的 15 ml Bond Elut AOAC 分散 SPE 管 ( 部件号 ) 中 涡旋 30 秒 在 rpm 下离心 2 min 用进样针过滤器 ( 孔径 0.2 μm, 再生纤维素, 部件号 ) 对移取的 1 ml 萃取液进行过滤, 然后分析 图 1. 婴儿食品中农药残留的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 萃取操作程序 采集 动态多反应监测 : 参见应用摘要的表 1 Delta EMV: 50 周期时间 : 200 ms 50

51 结果 10 1 * 定量 > *5.972 定性 > 响应 响应 采集时间 (min) 采集时间 (min) 相对响应 校准曲线 R 2 = _ 浓度 (ppb) 图 2. LOD 处 (0.5 ppb 标准溶液 ) 的两个 transitions 的离子流色谱图以及婴儿食品中吡氟禾草灵的校准曲线 51

52 响应与采集时间 (min) 的对比图 图 3. 加标 1 ppb 的婴儿食品样品 2 萃取物的 MRM 谱图 ( 仅显示定量转换 ) 该样品未执行分散 SPE 净化 未显示内标的转换 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 用于多脂样品的 Agilent Bond Elut AOAC 分散 SPE 管, 部件号 Agilent ZORBAX Eclipse Plus RRHD C18 色谱柱, mm,1.8 μm,( 部件号 ) 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 EN 52

53 使用 Agilent SampliQ QuEChERS AOAC 试剂盒以 HPLC-FLD 法测定鸡肉中的磺胺类残留物 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS EN 样品制备方法, 在用荧光 胺柱前衍生化后, 以 HPLC-FLD 法测定鸡肉中的磺胺类药物 回 收率在 76.8% 至 95.2% 的范围内, 开发并验证了一种可测定九 种磺胺类药物的 HPLC- 荧光检测 (FLD) 方法 分析仪器是配置二元泵和荧光检测器 (DAD) 的 Agilent 1200 Infinity 系列 HPLC,DAD 设置为 λ ex = 405 nm 且 λ em = 495 nm 采用 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱实现化合物的分 离 采用 HPLC 2D ChemStation 软件对数据进行处理 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18, mm,3.5 μm 流速 : 1 ml/min 柱温 : 25 ºC 进样量 : 5 μl 流动相 : A:0.05 M 乙酸钠,pH 4.5 B: 甲醇 梯度 : 时间 (min) %B 检测器 : Ex = 405 nm Em = 495 nm QuEChERS 操作程序 称取 2 g 均质化鸡肉样品放入 50 ml 离心管中 向样品中加入 1000 μl 20 μg/ml 的内标溶液和 1000 μl 10 μg/ml 的加标溶液 用力振摇 1 min 加入 8 ml 水 用力振摇 30 s 加入 10 ml 1% HOAc 的乙腈溶液 用力振摇 1 min 加入 Bond Elut QuEChERS AOAC 盐包 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 移取 6 ml 等分萃取液加入 Bond Elut QuEChERS 分散 SPE 15 ml 管中 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 将 4 ml 萃取液转移至试管中 ; 在氮气气氛中于 35 ºC 下干燥 将 200 μl 萃取液复溶于 600 μl 0.05M NaOAc (ph 3.5); 加入 200 μl 0.02% 荧光胺 振摇 1 min, 衍生化反应 60 min 样品可直接用于 HPLC-FLD 分析 图 1. 用于分析鸡肉中磺胺类药物残留的 QuEChERS AOAC 样品制备程序 53

54 0.155 结果 Intensity (LU) 强度 (LU) Time (min) 时间 (min) 图 2. 空白鸡肉萃取物的色谱图 LU LU Time (min) 图 3. 浓度为 50 ng/g 加标鸡肉萃取物的色谱图 :1. 磺胺嘧啶 ;2. 磺胺噻唑 ;3. 磺胺吡啶 ( 内标 );4. 磺胺甲嘧啶 ;5. 磺胺甲基嘧啶 ;6. 磺胺甲噻二唑 ;7. 磺胺甲氧哒嗪 ; 8. 磺胺氯哒嗪 0.12 ;9. 磺胺甲基异恶唑 ;10. 磺胺二甲嘧啶 时间 (min) 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱, mm,3.5 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 54

55 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒以 HPLC-FLD 法分析鱼类体内的多环芳烃 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS AOAC 样品制备方法来 测定鱼排中的十六种多环芳烃 (PAH) 分析物在三个不同配 方水平下的回收率在 83.4% 到 101% 范围内, 相对标准偏差 在 0.6% 到 1.9% 范围内 分析仪器是配置二元泵和荧光检测器 (DAD) 的 Agilent 1200 Infinity 系列 HPLC, 采用 HPLC 2D ChemStation 软件对数据进 行处理 获得了高回收率和优异的精度 因此, 本方法适合对 实际样品中的 PAH 进行质量控制测试 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : Agilent ZORBAX Eclipse PAH C18, mm,1.8 μm 流速 : 柱温 : 18 ºC 进样量 : 流动相 : 0.8 ml/min 5 μl A: 去离子水 B:CH 3 CN 梯度 : 时间 (min) %B 检测器 : 波长 : 230 nm 紫外检测 ( 苊 ), 荧光激发 (Ex) 和发射 (Em) 波长可变 QuEChERS 操作程序 称取 5 g 均质鱼类样品放入 50 ml 离心管中 向样品中加入 2000 μl 加标溶液 用力振摇 1 min 加入 8 ml 乙腈 用力振摇 1 min 加入 10 ml 1% HOAc 的乙腈溶液 用力振摇 1 min 加入 Bond Elut QuEChERS AOAC 盐包 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 移取 6 ml 等分萃取液加入 Bond Elut QuEChERS 分散 SPE 15 ml 管中 振摇 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 使用 0.45 µm PVDF 进样针过滤器进行过滤 移取 1 ml 萃取液加入自动进样器样品瓶中 样品可直接用于 HPLC-FLD 分析 图 1. 用于分析鱼类中 PAH 残留的 QuEChERS AOAC 样品制备程序 Ex/Em 时间 (min) 波长 (nm) 检测的 PAH 0-5( 深蓝色 ) 260/352 萘 二氢苊 芴 菲 苯并菲 0-14( 红色 ) 260/420 蒽 芘 苯并 [e] 芘 二苯并 [a,h] 蒽 苯并 [g,h,i] 0-14( 浅蓝色 ) 260/460 荧蒽 1,2- 苯并 [a] 蒽 苯并 [e] 苊 苯并 [k] 荧蒽 茚并 [1,2,3-cd] 芘 55

56 结果 0.4 LU 时间 (min) 图 2. 空白鱼类萃取物的色谱图 色谱条件列于应用摘要的表 1 中 基线色谱图采用下列激发 / 发射波长 :260 nm/352 nm 其他的激发/ 发射条件没有显示其他干扰 LU 时间 (min) 图 3. 加标鱼类样品的重叠 HPLC FLD 色谱图包含 :1. 萘 ;2. 苊 ;3. 苊 ;4. 芴 ;5. 菲 ;6. 蒽 ;7. 荧蒽 ;8. 芘 ;9. 1,2 苯并蒽 ;10. 屈 ;11. 苯并 [e] 芘 ;12. 苯并 [e] 苊 ;13. 苯并 [k] 荧蒽 ; 14. 二苯并 [a,h] 蒽 ;15. 苯并 [g,h,i] 芘 ;16. 茚并 [1,2,3-cd] 芘 此样品加标水平为 1 级 ( 参见应用摘要的表 3) 色谱图的蓝色部分采用下列激发 / 发射波长 :260 nm/352 nm; 红色部分 : 260 nm/420 nm; 浅蓝色部分 :260 nm/440 nm 对于苊, 紫外检测采用的是 230 nm 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut AOAC 脂肪分散 SPE 试剂盒,15 ml, 部件号 Agilent ZORBAX Eclipse PAH C18 色谱柱, mm,1.8 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 56

57 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以 LC/MS/MS 法分析炸薯条中的丙烯酰胺 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 丙烯酰胺萃取步骤结合 AOAC dspe 净化样品制备方法, 以 13 C 3 - 丙烯酰胺作为内标, 并 以 LC/MS/MS 法分析炸薯条中的丙烯酰胺 丙烯酰胺的回收 率为 97% 至 116% 使用 Agilent 1200 Infinity 系列仪器与 Agilent 6460 三重串联四极杆 LC/MS 联用来进行分析 基于适用于丙烯酰胺萃取和净化的 Agilent Bond Elut QuEChERS 开发出了简单快捷的 LC/MS/MS 分析方法, 该方法可获得高萃 取率和优异的精度 仪器条件 LC/MS/MS 条件 色谱柱 : 反相 C18 柱, mm,3 μm 柱温 : 30 ºC 等度模式 (%B): 流速 : 进样量 : 运行时间 : 后运行时间 : 2.5% 的甲醇 /97.5% 的 0.1% 甲酸溶液 0.2 ml/min 10 μl 7 min 3 min 质谱仪 : 喷射流离子聚焦离子源, 毛细管电压 : 4000 喷嘴电压 : 鞘气温度 : 干燥气温度 : 正离子模式 500 V 325 ºC,5 L/min 325 ºC,11 L/min QuEChERS 操作程序 称取 1 g 炸薯条放入 50 ml 离心管中 向样品中加入 500 μl 浓度为 1000 ng/ml 13 C 3 - 丙烯酰胺 加入 5 ml 己烷, 涡旋振荡 加入 10 ml 水 10 ml 乙腈和 Bond Elut QuEChERS 丙烯酰胺盐包 用力振摇 1 min 在 5000 rpm 下离心 5 min 弃去己烷相 将 1 ml 乙腈上清液加入装有 50 mg PSA 和 150 mg MgSO 4 的 2 ml 微量离心瓶中 涡旋 30 秒 在 5000 rpm 下离心 1 min 取 500 μl 萃取液加入自动进样器样品瓶中 以 LC/MS/MS 法进行分析 图 1. 适用于炸薯条中丙烯酰胺分析的 QuEChERS 样品制备程序 57

58 结果 MRM transitions: TIC 12C-AA C-AA C-AA C-AA C A i i i Ti ( i ) 图 2. 浓度为 10 ng/ml 的丙烯酰胺标准品和浓度为 500 ng/ml 13 C 3 - 丙烯酰胺内标的色谱图 表 1. 丙烯酰胺标样添加的炸薯条样品和 1:1 乙腈水溶液的回收率和相对标准偏差 (n=3) 基质 丙烯酰胺的加标浓度 (ng/ml) % 回收率 (n=3) %RSD (n=3) 1:1 水 : 乙腈 :1 水 : 乙腈 炸薯条 ( 背景校正之后 ) 5.04 炸薯条 ( 背景校正之后 ) 2.55 上述应用摘要中所使用的产品 适用于丙烯酰胺分析的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut AOAC 分散 SPE 试剂盒,2 ml, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 58

59 使用 Agilent J&W DB-35ms 及 DB-XLB GC 色谱柱对鱼肉组织中的 PCB 进行 GC/μECD 分析和确认 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法萃取和净化 鱼肉组织中的 19 种 PCB( 多氯联苯 ) 同系物 加标回收率在 72% 至 116% 的范围内 使用配置双 μecd 检测器和双毛细管 GC 色谱柱的 Agilent 7890A GC 系统, 能够通过一次进样同时 鉴定和确认 19 种 PCB GC 还配置有未吹扫的两通分流毛细管 微板流路控制技术 (CFT) 装置 QuEChERS 操作程序 称取 3 g (± 0.1g) 鱼类样品放入 50 ml 离心管中 加入替代标准品 / 内标溶液以及 QC 加标溶液 ( 必要时 ) 涡旋振荡 1 min 向样品中加入 12 ml 去离子水和两个陶瓷均质子 ( 部件号 ) 涡旋振荡 1 min 加入 15 ml 含有 1% 乙酸的 ACH 涡旋振荡 1 min 加入 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 萃取盐包 ( 部件号 ) 盖紧瓶盖并在 Geno/Grinder 上以 1500 rpm 的转速剧烈振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 乙腈上清液加入 Bond Elut AOAC 脂肪分散 SPE 2 ml 管 ( 部件号 ) 中, 或取 8 ml 加入 Bond Elut AOAC 15 ml 脂肪分散 SPE 管 ( 部件号 ) 中 涡旋振荡 1 min, 对于 2 ml 离心管在 rpm 下离心 2 min, 对于 15 ml 离心管在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 500 μl 萃取液加入自动进样器样品瓶中 以 GC μecd 法进行分析 图 1. 适用于鱼类样品的 Agilent Bond Elut QuEChERS 改进的 AOAC 萃取程序 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 1: 色谱柱 2: GC: 进样器 : 微板流路控制技术装置 : 载气 : Agilent J&W DB-35 ms, 30 m 0.25 mm, 0.25 μm( 部件号 ) Agilent J&W DB-XLB, 30 m 0.25 mm, 0.50 μm( 部件号 ) 配置双 μecd 检测器的 Agilent 7890A Agilent 7873B 5.0 μl 进样针 ( 部件号 ) 两通未吹扫的分流微板流路控制技术装置 ( 部件号 G3181B) 氢气 85 cm/s, 恒定流速 3.5 ml/min 进样量 : 1.0 µl 不分流进样 ;250 ºC 0.3 min 时吹扫流速 60 ml/min, 2 min 时载气节省开启, 流速 20 ml/min 柱温箱 : 进样量 : 110 ºC( 保持 0.1 min), 以 25 ºC/min 的速度升温至 200 ºC( 保持 0.5 min), 以 10 ºC/min 的速度升温至 240 ºC ( 保持 0.5 min), 以 30 ºC/min 的速度升温至 325 ºC( 保持 1.5 min) 1 µl 不分流进样,250 ºC 下,0.3 min 时吹扫流速 50 ml/min,2 min 时载气节省开启, 流速 50 ml/min 双 μecd 检测器 : 350 ºC,N 2 作尾吹气 ; 色谱柱流速 + 尾吹气流速 = 30 ml/min 并保持恒定 流路消耗品 样品瓶 : 琥珀色螺纹盖玻璃样品瓶 ( 部件号 ) 样品瓶盖 : 蓝色螺口盖 ( 部件号 ) 样品瓶内插管 : 100 μl 玻璃 / 聚合物支脚 ( 部件号 ) 进样针 : 5 μl( 部件号 ) 隔垫 : 高级绿色隔垫 ( 部件号 ) 进样口密封垫 : 进样口衬管 : 密封圈 : CFT 接头 : CFT 密封圈 : 分流平板进样口密封垫 ( 部件号 ) 去活双锥形直接连接衬管 ( 部件号 G ) 0.4 mm 内径短密封圈 ;85/15 Vespel/ 石墨密封圈 ( 部件号 ) 内螺母 ( 部件号 G ) SilTite 密封圈, 内径 0.25 mm ( 部件号 ) 20 倍放大器 : 20 倍放大器环 ( 部件号 ) 59

60 结果 Hz Hz Agilent J&W DB-35 ms Agilent J&W DB-XLB SS = 替代标准品 min min 1. IUPAC 1 2. 三氯间二甲苯 (SS) 3. IUPAC 5 4. IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC IUPAC 十氯联苯 (SS) 图 2. 在 Agilent J&W DB-35ms 和 DB-XLB GC 色谱柱上分析 50 ng/ml 加标鱼类萃取物得到的 GC/µECD 色谱图 色谱条件列于应用摘要的表 1 中 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 脂肪样品分散 SPE,2 ml,( 部件号 ) 或 15 ml, 部件号 Agilent J&W DB-35ms 色谱柱,30 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 Agilent J&W DB-XLB 色谱柱,30 m 0.25 mm,0.50 μm 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 60

61 采用安捷伦 AOAC QuEChERS 萃取试剂盒结合通用分散 SPE 分析生菜和苹果样品中的农药残留 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了依次使用 AOAC 缓冲萃取方法 通用分散 SPE 方法制备生菜和苹果样品, 并最终通过 GC/MS 进行残留物 分析, 共研究了 26 种不同类型的农药 使用 Agilent 7890 GC 系统与在选择性离子监测 (SIM) 模式下操作的 Agilent 5975C 系列 GC/MSD 联用执行该分析 所有化合物均不存在干扰, 表现出优异的线性 仪器条件 GC 条件 色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 30 m 0.25 mm,0.25 μm ( 部件号 UI) 进样器 : 进样口 : 载气 : 柱温箱升温程序 : 进样量 : Agilent 7683 自动液体进样器, 使用可容纳 100 个样品的样品盘 不分流进样 氦气, 恒流模式 70 ºC( 保持 2 min), 以 25 ºC/min 的速度升温至 150 ºC( 不保持 ), 以 3 ºC/min 的速度升温至 200 ºC( 不保持 ),8 ºC/min 升温至 280 ºC, 保持 7 min 1 μl QuEChERS 操作程序 称取 15 g 样品放入 50 ml 离心管中 向样品中加入内标物和加标溶液 涡旋振荡 1 min 加入 15 ml ACN( 含 1% 的乙酸 ) 用力振摇 30 秒 加入用于 AOAC 缓冲萃取的盐包 振摇 1 min, 然后以 3000 rcf 离心 2 min 移取 1 ml 等分的乙腈相加入通用分散 SPE 管 ( 其中含有 MgSO 4 PSA C18 和 GCB) 中 涡旋振荡 30 秒, 离心 2 min 移取 0.5 ml 加入自动进样器样品瓶中 图 1. 适用于分析生菜和苹果中农药残留的 QuEChERS 样品制备程序 质谱条件 调谐文件 : 模式 : Atune.u SIM 离子源 四极杆 传输线温度 : 分别为 230 ºC 150 ºC 280 ºC 溶剂延迟 : 倍增器电压 : 4 min 自动调谐电压 61

62 结果 a) b) 空白生菜萃取物 加标生菜萃取物 *IS 敌敌畏 2. α-bhc 3. 六氯苯 4. β-bhc 5. γ-hch 6. 乙拌磷 7. 甲基毒死蜱 8. 甲基对硫磷 9. 七氯 10. 杀螟松 11. 艾氏剂 12. 马拉硫磷 13. 毒死蜱 14. 对硫磷 15. 腐霉利 16. 硫丹 I 17. 狄氏剂 18. 4,4 -DDE 19. 硫丹 II 20. 4,4 -DDD 21. 硫丹硫酸酯 22. 4,4 -DDT 内标 *TPP 23. 溴螨酯 24. γ- 三氟氯氰菊酯 25. 氰戊菊酯 26. 溴氰菊酯 图 2. 生菜萃取物的 GC/MS 谱图 (a) 经过 QuEChERS 样品制备后的空白生菜萃取物和 (b) 加标生菜萃取物 a) b) 空白苹果萃取物 加标苹果萃取物 *IS 敌敌畏 2. α-bhc 3. 六氯苯 4. β-bhc 5. γ-hch 6. 乙拌磷 7. 甲基毒死蜱 8. 甲基对硫磷 9. 七氯 10. 杀螟松 11. 艾氏剂 12. 马拉硫磷 13. 毒死蜱 14. 对硫磷 15. 腐霉利 16. 硫丹 I 17. 狄氏剂 18. 4,4 -DDE 19. 硫丹 II 20. 4,4 -DDD 21. 硫丹硫酸酯 22. 4,4 -DDT 内标 *TPP 23. 溴螨酯 24. γ- 三氟氯氰菊酯 25. 氰戊菊酯 26. 溴氰菊酯 图 3. 苹果萃取物的 GC/MS 谱图 :(a) 经过 QuEChERS 样品制备后的空白苹果萃取物和 (b) 加标苹果萃取物 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 适用于所有食品类型的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散试剂盒, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱,30 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 62

63 使用 Agilent J&W DB-35ms 超高惰性 GC 柱对苹果中有机磷农药的 GC/MS/FPD 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要详细报导了一种检测苹果萃取物中低至 ppm 及痕 量级有机磷 (OP) 农药残留的快速 高效分析方法 使用中等 极性的超高惰性 GC 色谱柱 ( 具有反吹功能的惰性流路 ) 以及 QuEChERS 样品净化方法获得了优异的结果, 即使对于极性更 强的 OP 农药也是如此 该系列实验在配置火焰光度检测器的 Agilent 7890 GC 与 Agilent 5975C MSD 联用仪上进行, 并用 Agilent 7683B 自动液体进样器进样 QuEChERS 操作程序 称取 15 g (± 0.1 g) 均质样品放入 50 ml 离心管中 加入替代标准品 / 内标溶液以及 QC 加标溶液 ( 必要时 ) 涡旋振荡 1 min 向样品中加入 15 ml 乙腈和 2 个陶瓷棒 ( 部件号 ) 涡旋振荡 1 min 加入 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包 ( 部件号 ) 在 Geno/Grinder 上以 1500 rpm 的转速剧烈振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 8 ml 上层乙腈溶液转移至 15 ml AOAC 通用水果与蔬菜分散 SPE 管 ( 部件号 ) 涡旋振荡 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 将萃取物转移至自动进样器样品瓶中 仪器条件 GC 条件 色谱柱 : Agilent J&W DB-35ms 超高惰性色谱柱,20 m 0.18 mm,0.18 μm( 部件号 UI) GC/MSD: 进样器 : 微板流路控制技术装置 : MSD 限流器 : FPD 限流器 : PCM 1: Agilent 7890 GC/Agilent 5975C 系列 GC/MSD Agilent 7683B 自动液体进样器,5.0 μl 进样针 ( 部件号 ) 可吹扫的两路分流器 ( 部件号 G3180B) 分流比 MSD:FPD = 3:1 1.2 m 0.15 mm 内径去活熔融石英管 1.4 m 0.15 mm 内径去活熔融石英管 3.8 psi 恒压 进样口 : 1 μl 不分流进样 ;250 ºC;0.25 min 时开始吹扫, 吹扫流速 60 ml/min;2 min 时载气节省开启, 流量 20 ml/min 载气 : 柱温箱 : 后运行反吹 : 氦气, 恒压模式,95 ºC 时为 43.5 psi 95 ºC( 保持 1.3 min), 以 15 ºC/min 的速度升温至 125 ºC, 后以 5 ºC/min 升温至 165 ºC, 后以 2.5 ºC/min 升温至 195 ºC, 最后以 20 ºC/min 升温至 280 ºC, 保持 3.75 min 280 ºC 下保持 5 min, 反吹过程中 PCM 1 压力为 70 psi, 进样口压力为 2 psi MSD: 传输线,300 ºC; 离子源,300 ºC; 四极杆,150 ºC 流路消耗品 样品瓶 : 琥珀色钳口盖玻璃样品瓶 ( 部件号 ) 样品瓶盖 : 钳口盖 ( 部件号 ) 样品瓶内插管 : 250 μl 玻璃 / 聚合物支脚 ( 部件号 ) 进样针 : 5 μl( 部件号 ) 隔垫 : 高级绿色隔垫 ( 部件号 ) 进样口衬管 : 去活双锥形 Helix 衬管 ( 部件号 ) 密封圈 : PCT 接头 : 0.4 mm 内径短密封圈 ;85/15 Vespel/ 石墨密封圈 ( 部件号 ) 内螺母 ( 部件号 G ) PCT 密封圈 : SilTite 密封圈, 内径 0.25 mm( 部件号 ) 20 倍放大器 : 20 倍放大器环 ( 部件号 ) 以 GC/MS/FPD 法进行分析 图 1. 适用于苹果样品的 Agilent QuEChERS 萃取程序 63

64 结果 利用 Agilent J&W DB-35ms 超高惰性色谱柱分析低浓度极性农药, 能够获得良好的峰形 1. 乙酰甲胺磷 2. 甲胺磷 3. 速灭磷 4. 高灭磷 2 3 MSD (SIM): 45 ng/ml FPD (P): 25 ng/ml 图 2. 使用 Agilent J&W DB-35ms 超高惰性毛细管柱分析较难处理的极性农药所得到 GC/MS/SIM 及 FPD 色谱图的放大部分 色谱条件列于应用摘要的表 1 中 流出物分流比为 MSD:FPD = 3:1 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS 通用型水果和蔬菜分散 SPE,15 ml 管, 部件号 Agilent J&W DB-35ms 超高惰性色谱柱,20 m 0.18 mm,0.18 μm, 部件号 UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 EN 64

65 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 试剂盒以 LC/MS/MS 法分析大米中的农药残留 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS AOAC 样品制备方法来萃取和净化 12 种农药残留, 这些农药代表了大米中的多种农药类型 分析仪器是 Agilent 1200 Infinity 系列液相色谱仪与配置电喷雾离子化的 Agilent 6460 三重串联四极杆 LC/MS 平均回收率在 76% 至 108% 的范围内 ( 平均值为 97.8%) QuEChERS 操作程序 称取 5 g (+/- 0.1 g) 均质样品放入 50 ml 离心管中 除对照空白样品外, 其余所有样品中均加入 50 µl 内标溶液 (10 µg/ml TPP), 制备内标浓度为 100 ng/g 的样品溶液 盖紧瓶盖并涡旋 1 min; 向各个离心管中加入 10 ml 水 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 流动相 : Agilent Poroshell 120 EC-C18, mm, 2.7 μm( 部件号 ) 0.4 ml/min 5 μl A:0.1% 甲酸 (FA) 的水溶液 B:0.1% 甲酸的乙腈溶液 梯度 : 时间 (min) % B 后运行 : 总运行时间 : MS 条件正离子模式 2 min 11 min 气体温度 : 350 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 10 L/min 40 psi 3500 V 盖紧瓶盖并涡旋 1 min; 向各个离心管中加入陶瓷均质子 向各个离心管中加入 15 ml 乙腈溶液 ( 含有 0.1% AA) 盖紧瓶盖并振摇 1 min; 加入 Bond Elut 萃取盐包 盖紧瓶盖并剧烈振摇 20 秒 在 4000 rpm 下离心 5 min 取 8 ml 等分乙腈上清液, 将其转移至 Bond Elut AOAC 15 ml 分散 SPE 管中 盖紧瓶盖并涡旋 1 min; 然后在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 萃取液转移至 10 ml 试管中, 并在低于 40 ºC 的温度下于氮气气氛中干燥 使用乙腈 : 水 (1:9) 溶解残留物并将其定容至 1 ml 使用 0.45 µm 滤膜过滤, 并以 LC/MS/MS 法进行分析 图 1. 适用于大米样品的 Agilent QuEChERS 萃取程序 65

66 结果 计数与采集时间 (min) 的对比图 图 2. 用 AOAC 方法处理的 10 ng/g 加标样品的 MRM 色谱图 峰识别 :1. 吡蚜酮,2. 高灭磷,3. 多菌灵,4. 涕必灵,5. 吡虫啉,6. 抑霉唑,7. 残杀威,8. 胺甲萘,9. 嘧菌环胺, 10. 灭线磷,11. 戊菌唑,12. 醚菌酯, 内标物 :TPP 120% 100% 80% 60% 40% 20% 0% 吡蚜酮 高灭磷 多菌灵 涕必灵 吡虫啉 抑霉唑 残杀威 甲奈威 嘧菌环胺 灭线磷 戊菌唑 醚菌酯 图 3. 大米中 12 种农药的回收率和精密度 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 用于含有脂和蜡的水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒, 部件号 适用于 50 ml 萃取管的安捷伦陶瓷均质子, 部件号 Agilent Poroshell 120 EC-C18 色谱柱, mm,2.7 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 66

67 GC/MS/MS 法定量和重复性分析种植作物中的痕量农药残留 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法来萃取和净化六种种植作物 ( 包括梨 橙子 草莓 面粉 辣椒和菠菜 ) 中的 33 种代表性农药残留 该分析在 Agilent 7890 GC 与 Agilent 7000 三重串联四极杆 GC/MS/MS 分析仪上进行, 该仪器系统中包含农药和环境污染物 MRM 数据库 QuEChERS 操作程序 称取 15 g (± 0.1 g) 样品放入 50 ml 离心管中加入 100 µl 内标和 QC 加标溶液 ( 必要时 ), 涡旋振荡 1 min 加入 15 ml 1% HAc 的乙腈溶液和 Bond Elut QuEChERS AOAC 萃取试剂盒盖紧瓶盖并用力振摇 1 min, 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 乙腈萃取液转移至 2 ml 分散 SPE 管中涡旋振荡 30 秒在 rpm 下离心 2 min 移取一定体积溶液进行 GC/MS/MS 分析图 1. 适用于种植作物的 QuEChERS AOAC 萃取程序 仪器条件 GC 条件 分析型色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm,0.25 μm( 部件号 UI) 色谱柱连接 : GC: 自动进样器 : 载气 : 进样口 : 进样口温度 : 280 ºC 进样模式 : 进样脉冲压力 : 分流出口吹扫流速 : 在进样口与吹扫 Ultimate 接头之间 ( 部件号 G ) Agilent 7890 系列 GC Agilent 7693 自动进样器和样品盘 5 μl 进样针 ( 部件号 ), 1 μl 进样量进样后溶剂 A( 丙酮 ) 清洗次数 :3 进样后溶剂 B( 乙腈 ) 清洗次数 :3 样品抽取次数 :3 氦气, 恒压模式 多模式进样口 (MMI) 脉冲不分流模式 36 psi 持续 1 min 50 ml/min, 在 1 min 处开始 进样口压力 : 运行期间 psi( 保留时间锁定 ), 反吹期间 1.0 psi 保留时间锁定 : 柱温箱升温程序 : 甲基毒死蜱,8.298 min 后运行 : 2 min,280 ºC 微板流路控制技术 : Bleed line: 辅助气压力 : 限流器 : 限流器连接 : MS: 模式 : 数据库 : 传输线温度 : 280 ºC 离子源温度 : 300 ºC 100 ºC( 保持 2 min), 以 50 ºC/min 的速度升温至 150 ºC, 再以 6 ºC/min 升温至 200 ºC, 最后以 16 ºC/min 升温至 280 ºC 并保持 6 min 吹扫 Ultimate 接头 ( 部件号 G ) 用于反吹分析型色谱柱及进样口 辅助 EPC 气体 : 氦气通入吹扫 Ultimate 接头 in 外径 in 内径 100 cm,316 不锈钢管线, 柱温箱上方 运行过程 4 psi, 反吹过程 75 psi 惰性熔融石英管,0.65 m 0.15 mm ( 部件号 ) 吹扫 Ultimate 接头与 MS 之间 Agilent 7000 三重四极杆气质联用系统 多反应监测模式 安捷伦农药和环境污染物数据库 ( 部件号 G9250AA) 四极杆温度 : Q1 和 Q2 = 150 ºC 溶剂延迟 : 碰撞气流速 : 质谱分辨率 : 2.3 min 淬灭气氦气流速 2.35 ml/min, N 2 碰撞气流速 1.5 ml/min MS1 和 MS2 = 1.2 amu ( 低分辨率或宽范围设定 ) 67

68 结果 橙子基质空白 响应与采集时间 (min) 的对比图 ng/ml 加标橙子基质 响应与采集时间 (min) 的对比图 图 2. 橙子基质空白和 1 ng/ml 橙子基质农药残留加标溶液的 GC/QQQ MRM 色谱图 峰鉴别参见应用摘要的表 3 由于响应低, 在橙子基质中未能鉴别出 1 ng/ml 的溴氰菊酯 (33) 68

69 梨橙子草苺 面粉辣椒菠菜 次进样的响应因子 RSD (%) 甲胺磷敌敌畏速灭磷高灭磷 苯基苯酚氧化乐果乐果 阿特拉津林丹二嗪农百菌清 甲基毒死蜱乙烯菌核利 甲基立枯磷胺甲萘抑菌灵艾氏剂 马拉硫磷二氯二苯甲酮 甲基嘧啶磷对甲抑菌灵腐霉利异狄氏剂乙硫磷 硫丹硫酸盐 DDT 异狄氏剂酮异丙二酮亚胺硫磷伏杀磷氯菊酯蝇毒磷 溴氰菊酯 图 3. 不同基质中 10 次进样的重复性 ( 响应系数 %RSD) 比较 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS 通用型分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 色谱柱,15 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 UI 安捷伦农药和环境污染物 MRM 数据库, 部件号 G9250AA 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 69

70 GC/MS 和 LC/MS 联合对蔬菜汁中的农药残留进行全面检测 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法有效利用三种 质谱技术 GC/MS GC/MS/MS 和 LC/MS/MS 全面 分析蔬菜汁中的 39 种农药 GC/MS 实验使用 Agilent 7890A 系列 GC 与配置三轴检测器并在电子电离模式下操作的 Agilent 5975C 系列 GC/MS 惰性 XL MSD 联用系统 GC/MS/MS 实 验使用 Agilent 7890A 系列 GC 与在电子电离模式下操作的 Agilent 7000B 三重串联四极杆 GC/MS 联用系统 LC/MS/MS 实验使用 Agilent 1200 Infinity 系列 HPLC 与使用喷射流技术 的 Agilent 6460 系列三重串联四极杆 LC/MS 联用系统 该全 面分析方法涵盖了多种农药类型, 可对蔬菜汁中的 39 种农药进 行可靠的筛查和确认 注意 : 下列程序为使用 QuEChERS 萃取和 dspe 净化步骤对饮 品进行萃取的常规方法 QuEChERS 操作程序 将 15 g (± 0.05 g) 蔬菜汁转移至 50 ml 的空离心管中 加入 15 ml 1% 乙酸的乙腈溶液和内标, 盖紧瓶盖, 并剧烈混合 1 min 加入 AOAC 缓冲萃取盐包 ( 部件号 ), 盖紧瓶盖, 并用力振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 上清液至 2 ml dspe 管 ( 部件号 ) 中, 盖紧瓶盖, 并用力振摇或涡旋振荡 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 200 µl 上清液直接用 GC/MS GC/MS/MS 或 LC/MS/MS 仪器系统进行分析 图 1. Agilent QuEChERS 萃取程序 注意 : 该程序为使用 QuEChERS 萃取和分散 SPE 净化步骤对饮品进行萃取的常规方法 GC/MS 条件 GC 条件 色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm,0.25 μm ( 部件号 19091S-433UI) 进样量 : 进样模式 : 进样口升温程序 : 柱温箱升温程序 : SIM 模式下的流速 : 1 μl 使用多模式进样口进行冷不分流进样 60 ºC( 保持 0.35 min); 以 900 ºC/min 的速度升温至 280 ºC( 保持 15 min); 以 900 ºC/min 的速度升温至 300 ºC 扫描模式 70 ºC 保持 1 min 以 50 ºC/min 的速度从 70 ºC 升温至 150 ºC 以 6 ºC/min 的速度从 150 ºC 升温至 200 ºC 以 16 ºC/min 的速度从 200 ºC 升温至 280 ºC, 保持 5 min 290 ºC 时增加 4 min 以反吹色谱柱 SIM 模式 60 ºC 保持 1.5 min 以 50 ºC/min 的速度从 60 ºC 升温至 150 ºC 以 8 ºC/min 的速度从 150 ºC 升温至 240 ºC 以 50 ºC/min 的速度从 240 ºC 升温至 280 ºC, 保持 2.5 min 以 100 ºC/min 的速度从 280 ºC 升温至 290 ºC, 保持 2.05 min 290 ºC 时增加 4 min 以反吹色谱柱 1 ml/min, 恒流模式 扫描模式下的初始流速 : 2.7 ml/min( 标称值, 恒压模式 ) 保留时间锁定 : 甲基毒死蜱锁定于 min, 在扫描运行过程中 限流器 : 0.7 m 0.15 mm 去活 ( 部件号 ) 传输线温度 : 280 ºC 反吹配置 : MSD 条件 扫描模式 : 模式 : 分析柱连接在多模式进样口与吹扫 Ultimate 接头之间 0.7 m 限流器连接在吹扫 Ultimate 接头与 MSD 之间 吹扫 Ultimate 接头处的压力用辅助 EPC 模块设置为 4 psig 扫描和 SIM 模式独立运行 电子电离 (EI) 离子源温度 : 300 ºC 四极杆温度 : 200 ºC 70

71 GC/MS/MS 条件 GC 条件 色谱柱 : 两根 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm,0.25 μm( 部件号 19091S-431UI), 这两根色谱柱通过吹扫 Ultimate 接头相连 进样量 : 进样模式 : 进样口升温程序 : 柱温箱升温程序 : 1 μl 使用多模式进样口进行冷不分流进样 60 ºC( 保持 0.35 min); 以 600 ºC/min 的速度升温至 270 ºC 60 ºC( 保持 1 min) 以 40 ºC/min 的速度从 60 ºC 升温至 170 ºC 以 10 ºC/min 的速度从 170 ºC 升温至 310 ºC, 保持 1.25 min 流速 : ml/min( 恒流模式 ) 溶剂延迟 : 流量模式 : 2.3 min 传输线温度 : 300 ºC 运行时间 : 反吹配置 : 三重串联四极杆质谱条件 模式 : 恒流, 甲基毒死蜱保留时间锁定在 min 19 min 离子源温度 : 300 ºC 吹扫 Ultimate 接头 (PUU) 连接在两根 15 m 分析柱之间 在运行结束时, 色谱柱 1 在 310 ºC 柱温箱温度下反吹 4 min, 进样口压力 1 psi,puu 压力保持在 60 psi 电子电离 (EI),MRM 四极杆温度 : 均为 180 ºC LC/MS/MS 条件 LC 条件 色谱柱 : Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱, mm,1.8 μm( 部件号 ) 柱温 : 40 ºC 进样量 : 流动相 : 运行时间 : 流速 : 5 μl A:0.1% 甲酸水溶液 B:0.1% 甲酸的乙腈溶液 15 min 0.3 ml/min 梯度 : 初始为 5% B;10 min 内升至 95% B, 然后在 5 min 内升至 100% B 三重串联四极杆质谱条件 模式 : 鞘气 : 干燥气流速 : 喷雾器压力 : 毛细管电压 : 喷嘴电压 : ESI, 正离子模式,MRM 350 ºC,11 L/min 11 L/min 40 psi 4000 V 1000 V 71

72 结果 A B 响应 响应 采集时间 (min) 采集时间 (min) 图 2. 以 GC/MS/MS( 图 2A) 和 LC/MS/MS( 图 2B) 法分析蔬菜汁混合基质中的 10 ppb(ng/ml) 农药所获得的 MRM transitions 色谱图 ( 叠加图 ) 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 用于水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒, 部件号 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 色谱柱, mm,1.8 μm, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱,15 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 19091S-431UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 72

73 其他食品方法 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒以 LC/MS/MS 法测定牛肝脏中的喹诺酮抗生素 ( 出版号 EN) 引言 报导了一种测定牛肝脏中 11 种喹诺酮抗生素的分析方法 : 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒对牛肝脏中的分析物进行萃取和净化 萃取过程使用 Bond Elut EN 萃取试剂盒和 5% 甲酸 (FA) 的乙腈溶液 净化过程使用 Bond Elut 分散 SPE 试剂盒, 部件号 ( 内含 25 mg C18 和 150 mg MgSO 4 ) 萃取后的样品采用 LC/MS/MS 分析 定量限 (LOQ) 为 5.0 ng/g 校准曲线的线性范围为 5.0 至 400 ng/g 预加标样品的回收率在 62.0% 与 113.1% 之间,RSD (n=6) 值在 2.2% 至 13.4% 之间 73

74 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl Agilent ZORBAX Solvent Saver Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl, mm,3.5 µm ( 部件号 ) 0.3 ml/min 流动相 : A:5 mm 乙酸铵水溶液,pH 3.0 B:1:1 甲醇 : 乙腈 后运行时间 : 梯度 : 质谱条件 极性 : 4 min 流速 时间 (min) % B (ml/min) 停止 正 气体温度 : 325 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 8 L/min 50 psi 4000 V QuEChERS 操作程序 称取 2 g (± 0.05 g) 均质肝脏样品放入 50 ml 离心管中加入 100 µl 内标溶液,50 µl QC 加标溶液 必要时涡旋振荡 30 s 加入 8 ml 30 mm 的 KH 2 PO 4 (ph 7.0) 的缓冲液, 涡旋振荡加入 10 ml 含 5% 甲酸的乙腈, 用力振摇 30 s 加入 Bond Elut EN QuEChERS 萃取试剂盒, 用力振摇 1 min 以 4000 rpm 离心 5 min 移取 1 ml 乙腈上清液至 Bond Elut QuEChERS 2 ml 分散 SPE 管中涡旋振荡振荡 1 min, 用微型离心机以 rpm 离心 3 min 将 800 ml 萃取液转移至另一个管中 ; 在 N 2 气氛中于 40 ºC 下干燥复溶于 800 µl 含 0.1% 甲酸的 1:9 MeOH:H 2 O 中, 涡旋并超声 样品经 0.22 μm 醋酸纤维素滤头过滤 ( 部件号 ) 样品可直接进行 LC/MS/MS 分析 图 1:Agilent QuEChERS 抗生素萃取流程图 74

75 结果 图 2: 牛肝中十一种喹诺酮类抗生素的回收率和重现性 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散 SPE 试剂盒,2 ml 管 ( 部件号 ) 或 15 ml 管 ( 部件号 ) Agilent ZORBAX Solvent Saver Plus Eclipse Plus Phenyl-Hexyl LC 色谱柱, mm,3.5 µm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 EN 75

76 使用 Bond Elut QuEChERS EN 试剂盒以 LC/MS/MS 法测定牛肝脏中的磺胺类抗生素 ( 出版号 EN) 引言 报导了一种测定牛肝脏中九种磺胺类抗生素的分析方法 : 使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 试剂盒对牛肝脏中的分 析物进行萃取和净化 萃取过程使用 Bond Elut EN 萃取试剂盒和 1% 乙酸 (AA) 的 乙腈溶液 净化过程使用 Bond Elut EN 脂肪分散 SPE 试剂盒,6 ml( 内 含 150 mg PSA 150 mg C18 和 900 mg MgSO 4 ) 萃取后的样品采用 LC/MS/MS 分析 定量限 (LOQ) 为 2.0 ng/g 校准曲线的线性范围为 2.0 至 400 ng/g 预加标样品的回收率在 53.0% 与 92.8% 之间,RSD (n=6) 值 在 2.1% 至 16.8% 之间 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 10 µl Agilent ZORBAX Eclipse Rapid Resolution HT Plus C18, mm,1.8 µm ( 部件号 ) 0.3 ml/min 流动相 : A:5 mm 乙酸铵水溶液,pH 3.0 B:1:1 甲醇 : 乙腈 后运行时间 : 3.5 min 梯度 : 时间 % B (min) 停止 质谱条件 极性 : 正 气体温度 : 325 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 8 L/min 50 psi 4000 V QuEChERS 操作程序 称取 2 g (± 0.05 g) 均质肝脏样品放入 50 ml 离心管中 加入 100 µl 内标溶液,50 µl QC 加标溶液 必要时, 涡旋振荡 30 s 加入 8 ml 水, 涡旋振荡 加入 10 ml 含 1% 乙酸 (AA) 的乙腈, 用力振摇 30 s 加入 Bond Elut EN QuEChERS 萃取试剂盒, 用力振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 6 ml 乙腈上清液至适用于多脂样品的 Bond Elut EN QuEChERS 2 ml 分散 SPE 管中 涡旋振荡 2 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 移取 4 ml 萃取液至另一个管中 ; 在 N 2 气氛中于 40 ºC 下干燥 复溶于 800 µl 含 0.1% 甲酸的 1:9 MeOH:H 2 O 中, 涡旋并超声 样品经 0.22 μm 醋酸纤维素滤头过滤 ( 部件号 ) 样品可直接进行 LC/MS/MS 分析 图 1. 适用于牛肝脏中九种磺胺类抗生素的 Agilent QuEChERS 操作程序 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 萃取试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS EN 脂肪分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent ZORBAX Eclipse Rapid Resolution HT Plus C18 LC 色谱柱, mm,1.8 µm, 部件号 安捷伦离心过滤膜,0.22 μm 乙酸纤维膜, 部件号

77 结果 x MRM ( > ) std 5-2.d IS 图 ng/g 加标肝脏萃取物的 LC/MS/MS 色谱图 峰识别 :1. 磺胺嘧啶,2. 磺胺噻唑,3. 磺胺二甲嘧啶,4. 磺胺甲噻二唑,5. 磺胺甲基嘧啶,6. 磺胺甲氧哒嗪,7. 磺胺氯哒嗪, 8. 磺胺甲基异恶唑,9. 磺胺二甲氧嘧啶,IS( 内标物 ) 表 1. 定量结果 回收率和重现性 (n=6) 低浓度质量控制 (5 ng/g) 中等浓度质量控制 (100 ng/g) 高浓度质量控制 (400 ng/g) 化合物 回收率 RSD 回收率 RSD 回收率 RSD 磺胺嘧啶 磺胺噻唑 磺胺二甲嘧啶 磺胺甲噻二唑 磺胺二甲基嘧啶 磺胺甲氧哒嗪 磺胺氯哒嗪 新诺明 磺胺二甲氧嘧啶 图 3. 牛肝脏中九种磺胺类药物的回收率和重现性 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 EN 77

78 使用 GC-µECD 分析并确认橄榄油中的合同实验室协议农药 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法对购自本地 杂货店的橄榄油样品进行 20 种合同实验室协议 (CLP) 农药的 分析 双 μecd 和双毛细管 GC 柱方法能够同时完成对橄榄 油样品中存在的硫丹硫酸酯和硫丹 1 的基本分析和确认性分 析 本应用摘要成功开发出一种用于监测橄榄油中 CLP 农药 的 稳定且效费比高的分析方法, 以应对日益严峻的食品安全 形势 该方法可灵活选用双柱 μecd 以代替 GC/MS 作为常 规的橄榄油筛查方法 QuEChERS 操作程序 称取 3 g (± 0.1 g) 橄榄油样品和 7.0 g 去离子水放入 50 ml 离心管中 加入 10 ml 乙腈 * 加入 Agilent Bond Elut Original QuEChERS 萃取盐包 ( 部件号 ), 其中含有 4 g MgSO 4 和 1 g NaCl 仪器条件 GC 条件 色谱柱 1: 色谱柱 2: GC/ 双 μecd: 微板流路控制技术装置 : 载气 : 柱温箱 : 进样量 : Agilent J&W DB-35 ms, 30 m 0.25 mm,0.25 μm ( 部件号 ) Agilent J&W DB-XLB 30 m 0.25 mm,0.50 μm ( 部件号 ) 配置双 μecd 检测器和 7873B 自动进样器的 7890A 两通未吹扫的分流微板流路控制技术装置 ( 部件号 G3181B) 氢气, 流速为 56 cm/s 110 ºC( 保持 1.4 min), 以 21 ºC/min 的速度升温至 285 ºC( 保持 1 min), 以 30 ºC/min 的速度升温至 300 ºC( 保持 2 min) 1 µl 不分流进样,250 ºC 下,0.3 min 时吹扫流速 50 ml/min,2 min 时载气节省开启, 流速 50 ml/min 双 μ-ecd: 350 ºC,N 2 作尾吹气 ; 恒定色谱柱流速 + 尾吹气流速 = 30 ml/min 盖紧瓶盖并用力振摇 1 min 在 3000 rpm 下离心 2 min 移取 1 ml 乙腈上清液至适用于多脂样品的 2 ml Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC( 部件号 ) 分散 SPE 管中 涡旋振荡 1 min, 对 2 ml 离心管在 3200 rpm 下离心 3 min 移取 500 μl 萃取液加入自动进样器样品瓶中 使用 μgc-ecd 进行分析 图 1. 适用于分析橄榄油中农药残留的 Agilent QuEChERS 操作程序 * 加标样品添加量 流路消耗品 样品瓶 : 琥珀色螺纹盖玻璃样品瓶 ( 部件号 ) 样品瓶盖 : 螺口盖 ( 部件号 ) 样品瓶内插管 : 100 μl 玻璃 / 聚合物支脚 ( 部件号 ) 进样针 : 5 μl( 部件号 ) 隔垫 : 高级绿色隔垫 ( 部件号 ) 进样口密封垫 : 分流平板进样口密封垫 ( 部件号 ) 进样口衬管 : 密封圈 : CFT 接头 : CFT 密封圈 : 双锥形直接连接衬管 ( 部件号 G ) 0.4 mm 内径短密封圈,85/15 Vespel/ 石墨密封圈 ( 部件号 ) 内螺母 ( 部件号 G ) SilTite 密封圈, 内径 0.25 mm ( 部件号 ) 20 倍放大器 : 20 倍放大器环 ( 部件号 ) 78

79 结果 Hz min 1. 四氯间二甲苯 ( 替代标准品 ) 2. α-bhc 3. g-bhc 4. b-bhc 5. 七氯 6. d-bhc 7. 艾氏剂 8. 环氧七氯 9. 反式氯丹 10. α- 氯丹 11. 硫丹 I 12. 狄氏剂 13. p,p-dde 14. 异狄氏剂 15. p,p-ddd 16. 硫丹 II 17. p,p-ddt 18. 异狄氏醛 19. 硫丹硫酸酯 20. 甲氧滴滴涕 21. 异狄氏剂酮 22. 十氯联苯 ( 替代标准品 ) 图 2. 加入 80 ng/ml CLP 农药和 20 ng/ml 替代标准品的橄榄油样品的 GC-µECD 色谱图 79

80 Hz min 1. 四氯间二甲苯 ( 替代标准品 ) 2. α-bhc 3. g-bhc 4. b-bhc 5. 七氯 6. d-bhc 7. 艾氏剂 8. 环氧七氯 9. 反式氯丹 10. α- 氯丹 11. 硫丹 I 12. p,p-dde 13. 狄氏剂 14. 异狄氏剂 15. p,p-ddd 16. 硫丹 II 17. 异狄氏醛 18. p,p-ddt 19. 硫丹硫酸酯 20. 甲氧滴滴涕 21. 异狄氏剂酮 22. 十氯联苯 ( 替代标准品 ) 图 3. 加入 80 ng/ml CLP 农药和 20 ng/ml 替代标准品的橄榄油样品的 GC-µECD 色谱图 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut Original QuEChERS 萃取盐包, 部件号 适用于多脂样品的 2 ml Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散 SPE 管, 部件号 Agilent J&W DB-35ms 色谱柱,30 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 Agilent J&W DB-XLB 色谱柱,30 m 0.25 mm,0.50 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 80

81 使用改进的 Agilent Bond Elut QuEChERS 方法测定柠檬油中的农药残留 ( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 Agilent Bond Elut QuEChERS 及改进的分散 SPE 与安捷伦气相色谱仪及 Agilent 5975C 系列 GC/MSD 联用, 简便 快速地萃取并分析柠檬精油中的农药残留 由于油性基质的复杂性, 萃取精油中的农药残留是非常困难的 本文所报导的方法使用多步分散 SPE 并在初始萃取步骤中使用己烷, 从而得到更为洁净的萃取物, 可以 GC/MS 法在电子电离模式下采用选择离子监测 (SIM) 进行分析 QuEChERS 操作程序 称取 3 g (± 0.5 g) 柠檬油样品放入 50 ml 离心管中加入内标加标溶液和 QC 标准物 ( 必要时 ), 涡旋混合 1 min 加入 12 ml 水, 再加入 10 ml 乙腈和 2 ml 己烷 用力振摇 1 min 加入 Bond Elut QuEChERS EN 萃取盐包 用力振摇 1 min, 离心 5 min 使用移液管移除上层己烷相和油层 仪器条件 GC 条件 色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm,0.25 μm 进样口 : 不分流进样 进样口衬管 : Helix 去活双锥形衬管 ( 部件号 ) 载气 : 氦气 进样口压力 : 19.6 psi( 恒压模式 ) 进样口温度 : 250 ºC 进样量 : 分流出口吹扫流速 : 柱温箱升温程序 : 质谱条件 调谐文件 : 1.0 μl 30 ml/min, 在 0.75 min 处开始 70 ºC( 保持 1 min) 以 50 ºC/min 的速度升温至 150 ºC( 不保持 ) 以 6 ºC /min 的速度升温至 200 ºC( 不保持 ) 以 16 ºC/min 的速度升温至 280 ºC( 保持 6 min) Atune.u 模式 : SIM( 有关详细设置信息, 请参见应用摘要的表 3) 离子源 四极杆 传输线温度 : 分别为 230 ºC 150 ºC 和 280 ºC 移取 1.6 ml 乙腈萃取液至适用于多脂和含色素样品的 1 ml AOAC 分散 SPE 管 涡旋振荡 2-3 min, 然后以 rpm 离心 2-5 min 将乙腈萃取液转移至另一个适用于多脂含色素样品的 1 ml AOAC 分散 SPE 管中 涡旋振荡 2-3 min, 然后以 rpm 离心 2-5 min 移取上层清液进行 GC/MS 分析 图 1. 适用于柠檬油中农药残留的安捷伦改进的 QuEChERS EN 操作程序 溶剂延迟 : 倍增器电压 : 2.30 min 自动调谐电压 81

82 结果 1e+08 TIC: CB 3X FP 2 ml HEX SIM: CB 3X FP 2 ml HEX 8e+07 4 TIC: CB 2X FP 2 ml HEX SIM: CB 2X FP 2 ml HEX 6e e+07 TIC: CB 1X FP 2 ml HEX 2 SIM: CB 1X FP 2 ml HEX 2e 图 2. 方法开发实验中对萃取程序加以优化, 包括添加己烷和采用多步分散 SPE CB( 对照空白样品 ),FP( 适用于多脂含色素样品的 AOAC 分散 SPE),HEX( 己烷 ) 82

83 IS 200 ng/ml 预加标 QC , ,13, IS 200 ng/ml 后加标 std 3 7, , 敌敌畏 2. α-bhc 3. 六氯苯 4. β-bhc 5. γ-hch 6. 乙拌磷 7. 甲基毒死蜱 8. 甲基对硫磷 9. 七氯 10. 杀螟松 11. 艾氏剂 12. 马拉硫磷 13. 毒死蜱 14. 对硫磷 15. 腐霉利 16. 硫丹 I 17. 狄氏剂 18. 4,4 -DDE 19. 硫丹 II 20. 4,4 -DDD 21. 硫丹硫酸酯 22. 4,4 -DDT 23. 溴螨酯 24. λ- 三氟氯氰菊酯 25. 氰戊菊酯 26. 溴氰菊酯 图 ng/ml 萃取前与萃取后在基质中添加标样所获得的 GC/MS 色谱图 该图显示了预加标和后加标柠檬油萃取物的色谱图 二十六种农药中的二十五种表现出高度重现的结果, 平均 RSD < 5% 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 EN 萃取试剂盒, 部件号 适用于多脂和含色素作物的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散固相萃取试剂盒, 部件号 Agilent J&W HP-5MS 超高惰性色谱柱,15 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 19091S-431UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 EN 83

84 使用 QuEChERS/dSPE 样品制备方法和高效 DB-5ms 超高惰性 GC 色谱柱通过 GC/MS 分析鱼体内的多环芳烃 (PAH)( 出版号 EN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 分散固相萃取 (dspe) 样品 制备方法测定鱼类体内低浓度和痕量多环芳烃 (PAH) 分析仪 器是 Agilent 7890 GC 和配置多模式进样口 (MMI) 及 Agilent 7693 自动液体进样器的 Agilent 5975B GC/MS 系统 同 时, 该 GC 还安装有柱后压力控制三通装置 (PCT), 以实现自 动反吹 回收率在 80% 至 139% 范围内 QuEChERS 操作程序 称取 3 g (± 0.05 g) 样品放入 50 ml 离心管中 加入替代标准品 / 内标溶液以及 QC 加标溶液 ( 必要时 ) 涡旋振荡 1 min 向样品中加入 12 ml 去离子水和两个陶瓷棒 ( 部件号 ) 加入 15 ml 乙腈, 涡旋振荡 1 min 向 15 g 样品中加入原始的 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包 ( 部件号 ) 在 Geno/Grinder 上以 1500 rpm 的转速剧烈振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 8 ml 乙腈上清液至适用于多脂样品的 15 ml Agilent AOAC 分散 SPE 管 ( 部件号 ) 中 涡旋振荡 1 min, 然后以 4000 rpm 离心 5 min 以 GC/MS 法分析样品萃取液 图 1. Agilent Bond Elut QuEChERS 改进的适用于鱼类样品的萃取程序 仪器条件 GC 条件 色谱柱 : GC/MSD: 进样器 : PCT 装置 : 载气 : 限流器 : PCM 1: Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱 20 m 0.18 mm,0.18 μm( 部件号 UI) Agilent 7890 GC/Agilent 5975B GC/MS 系统 Agilent 7693 自动液体进样器,5.0 μl 进样针 ( 部件号 ) 吹扫 Ultimate 接头 ( 部件号 G ) 氦气, 恒流模式,1.7 ml/min 0.7 m 0.15 mm 内径的去活石英管 3.8 psi 恒压 MMI: 0.5 μl 不分流进样,320 ºC,0.8 min 时开始吹扫, 吹扫流速 50 ml/min;2 min 时载气节省开启, 流速 30 ml/min 柱温箱 : 后运行反吹 : MSD: 流路消耗品 50 ºC( 保持 0.4 min), 以 25 ºC/min 的速度升温至 195 ºC( 保持 1.5 min), 以 8 ºC/min 的速度升温至 265 ºC, 以 20 ºC/min 的速度升温至 315 ºC( 保持 1.25 min) 315 ºC, 保持 7 min, 反吹压力 70 psi, 反吹过程中进样口压力 2 psi 传输线温度 340 ºC, 离子源温度 340 ºC, 四极杆温度 150 ºC 样品瓶 : 琥珀色螺纹盖玻璃样品瓶 ( 部件号 ) 样品瓶盖 : 蓝色螺口盖 ( 部件号 ) 样品瓶内插管 : 100 μl 玻璃 / 聚合物支脚 ( 部件号 ) 进样针 : 5 μl( 部件号 ) 隔垫 : 高级绿色隔垫 ( 部件号 ) 进样口衬管 : 密封圈 : PCT 接头 : 去活双锥形 Helix 衬管 ( 部件号 G ) 0.4 mm 内径短密封圈 ;85/15 Vespel/ 石墨密封圈 ( 部件号 ) 内螺母 ( 部件号 G ) PCT 密封圈 : SilTite 密封圈, 内径 0.25 mm( 部件号 ) 20 倍放大器 : 20 倍放大器环 ( 部件号 ) 84

85 Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱上 16 种 PAH 的分离结果 丰度 萘 2. 苊烯 3. 二氢苊 4. 芴 5. 菲 6. 蒽 荧蒽 8. 芘 9. 苯并 [a] 蒽 10. 屈 11. 苯并 [b] 荧蒽 12. 苯并 [k] 荧蒽 时间 苯并 [a] 芘 14. 茚并 [1,2,3-c,d] 芘 15. 二苯 [a,h] 蒽 16. 苯并 [g,h,i] 图 2. 在 Agilent J&W DB-5ms 超高惰性 GC 毛细管柱 ( 部件号 UI) 上分析含有 500 ng/ml PAH 标准品的样品基质所得到的 GC/MS 色谱图 色谱条件列于应用摘要的表 1 中 85

86 丰度 萘 2. 苊烯 3. 二氢苊 4. 芴 5. 菲 6. 蒽 7. 荧蒽 8. 芘 9. 苯并 [a] 蒽 10. 屈 11. 苯并 [b] 荧蒽 12. 苯并 [k] 荧蒽 时间 13. 苯并 [a] 芘 14. 茚并 [1,2,3-c,d] 芘 15. 二苯 [a,h] 蒽 16. 苯并 [g,h,i] 25 ppb 加标鱼类萃取物样品 鱼类萃取物空白样品 图 3. 在 Agilent J&W DB-5ms 超高惰性 GC 毛细管柱上分析鱼类萃取物空白样品和 25 ng/ml 加标鱼类萃取物样品所得到的 GC/MS SIM 色谱图 色谱条件列于应用摘要的表 1 中 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 萃取盐包, 部件号 适用于多脂样品的 15 ml Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 分散 SPE 管, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS 陶瓷均质子, 适用于 50 ml 管, 部件号 Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱,20 m 0.18 mm,0.18 μm, 部件号 UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 86

87 使用带玻璃毛超惰性衬管的 GC/MS/MS 进行食品中农药残留的分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法来分析多种农 药残留 选择了五种水果和蔬菜 : 野花 香蕉 草莓 梨以及 生菜 选择了 33 种具有代表性的农药对安捷伦超高惰性衬管 进行评估 将农药标准品加入到由 QuEChERS AOAC 方法萃 取的水果和蔬菜基质空白样品中 所有测试均使用配置 7693B 自动进样器的 Agilent 7890A GC 与 7000 系列三重串联四极杆 MSD 系统 使用了萃取样品以证实带玻璃毛的安捷伦超高惰性衬管的性能优势 QuEChERS 操作程序 准确称取 15 g (± 0.05 g) 均质样品放入 50 ml 离心管中 向样品中加入 100 µl 内标溶液并涡旋振荡 1 min 加入 15 ml 1% 乙酸的乙腈溶液, 用力振摇 1 min 加入 Bond Elut QuEChERS AOAC 盐包, 盖紧瓶盖并用力振摇 1 min 在 4000 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 乙腈上清液至 Bond Elut AOAC 2 ml 分散 SPE 管中, 或移取 8 ml 加入 Bond Elut AOAC 15 ml 分散 SPE 管中 涡旋振荡 1 min, 然后进行离心处理 将萃取液转移至自动进样器样品瓶中以便进行分析 样品可直接进行 GC/MS/MS 分析 图 1. 适用于分析食品中农药残留的 QuEChERS AOAC 样品制备程序 仪器条件 GC 条件 分析型色谱柱 : Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm,0.25 μm( 部件号 UI) GC: 自动进样器 : 载气 : Agilent 7890A 系列 Agilent 7693 自动进样器和样品盘,5 μl 进样针 ( 部件号 ),1 μl 进样量 进样后溶剂 A( 丙酮 ) 清洗次数 :3 样品抽取次数 :3 进样后溶剂 B( 乙腈 ) 清洗次数 :3 氦气, 恒压模式 进样口 : MMI 进样口, 脉冲不分流模式 :280 ºC 进样脉冲压力 : 分流出口吹扫流速 : 进样口压力 : 保留时间锁定 : 柱温箱升温程序 : 36 psi 持续 1 min 50 ml/min, 在 1 min 处开始 运行期间 psi( 保留时间锁定 ), 反吹期间 1.0 psi 甲基毒死蜱,8.298 min 后运行 : 2 min,280 ºC 微板流路控制技术 : 辅助 EPC 气体 : Bleed line: 辅助气压力 : 接口 : 限流器 : 接口 : MSD: 真空泵 : 模式 : 调谐文件 : 100 C 保持 2 min, 然后以 50 ºC/min 的速度升温至 150 ºC, 以 6 ºC/min 的速度升温至 200 ºC, 再以 16 ºC/min 的速度升温至 280 ºC 并保持 6 min( 样品运行 );100 ºC 保持 1 min, 然后以 100 ºC/min 的速度升温至 280 ºC, 保持 5.2 min ( 对于基质空白运行 ) 吹扫 Ultimate 接头 ( 部件号 G )- 用于反吹分析型色谱柱和进样口 氦气通入吹扫 Ultimate 接头 in 外径 in 内径 100 cm, 316 不锈钢管线, 柱温箱上方 运行过程 4 psi, 反吹过程 75 psi 在进样口与吹扫 Ultimate 接头 ( 部件号 G ) 之间 惰性熔融石英管,0.65 m 0.15 mm ( 部件号 ) 在吹扫 Ultimate 接头与 MSD 之间 配置高性能电路的 Agilent 7000 惰性三重四极杆 MSD 高性能涡轮泵 多反应监测模式 Atune.u 传输线温度 : 280 ºC 离子源温度 : 300 ºC 四极杆温度 : Q1 和 Q2,150 ºC 溶剂延迟 : 碰撞气流速 : 质谱分辨率 : 2.3 min 氦气淬灭气流速 2.35 ml/min,n 2 碰撞气流速 1.5 ml/min MS1 和 MS2,1.2 u 87

88 甲胺磷 2. 敌敌畏 3. 速灭磷 4. 高灭磷 5. σ- 苯基苯酚 6. 氧化乐果 7. 乐果 8. 阿特拉津 9. 林丹 10. 二嗪农 11. 百菌清 12. 甲基毒死蜱 13. 乙烯菌核利 14. 甲奈威 15. 甲基立枯磷 16. 抑菌灵 17. 艾氏剂 18. 马拉硫磷 19. 二氯二苯甲酮 20. 甲基嘧啶磷 21. 对甲抑菌灵 22. 腐霉利 23. 异狄氏剂 24. 乙硫磷 25. 硫丹硫酸酯 26. DDT 27. 异狄氏剂酮 28. 异丙二酮 29. 亚胺硫磷 30. 伏杀磷 31. 氯菊酯异构体 32. 蝇毒磷 33. 溴氰菊酯异构体 图 2. 使用超高惰性带玻璃毛衬管对加标 10 ppb 的 QuEChERS 样品进行分析所得到的 GC/MS/MS 色谱图 (MRM) 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 适用于水果和蔬菜的 Agilent Bond Elut QuEChERS AOAC 2 ml 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性 GC 色谱柱,15 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 UI 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 88

89 使用 Agilent 7000 三重四极杆气相色谱 / 质谱系统测定海洋贝类中的化学污染物 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用 QuEChERS 样品制备方法测定海洋贝 类组织中的选定有机氯农药 多环芳烃和多氯联苯同系物 分 析仪器是配置二氧化碳冷却的多模式进样口 (MMI) 和 Agilent 7693A 自动液体进样器的 Agilent 7890 GC 与 Agilent 7000 三重串联四极杆 GC/MS 系统 在本应用中, 将 QuEChERS 萃取 与基于溶剂和管的 SPE 净化方法相结合, 得到适用于 GC/QQQ 分析的最终萃取物, 然后确认目标分析物 仪器条件 GC 条件 色谱柱 (1): Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm 内径,0.25 μm ( 部件号 UI) 色谱柱 (2): Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱, 0.65 m 0.15 mm 内径,0.15 μm ( 截自部件号为 的产品 ) 进样模式 (1): 进样口升温程序 : 进样口压力脉冲 : 分流出口吹扫流速 : 1 µl 冷脉冲不分流进样, 使用 CO 2 进行冷却的多模式进样口 (MMI) 和 10 µl 进样针 50 ºC, 保持 0.05 min, 以 600 ºC/min 升温至 325 ºC 13.0 psig,0.75 min 50 ml/min, 在 1.0 min 处开始 进样口衬管 : 2 mm 内径, 多阻板 ( 部件号 ) 进样模式 (2): 进样口升温程序 : 进样口排空压力 : 进样口排空流速 : 进样口排空时间 : 出口压力 : 进样速度 : 分流出口吹扫流速 : 10 μl 溶剂排空, 使用 CO 2 冷却的多模式进样口 (MMI) 和 25 μl 进样针 40 ºC, 保持 0.31 min, 以 600 ºC/min 升温至 325 ºC 5.0 psig 100 ml/min 0.31 min 0 psig 100 μl/min 50 ml/min, 在 1.0 min 处开始 进样口衬管 : 2 mm 内径, 多阻板 ( 部件号 ) 载气 : 柱温箱升温程序 : RTL 化合物 : 压力控制三通 : 反吹条件 : 氦气, 恒流模式,1.2 ml/min 50 ºC( 保持 1 min), ºC/min( 保持 0 min),10 ºC/min,300 ºC( 保持 1.5 min) PCB 118, 锁定于 min 处 G3186B, 在 2.0 psig 恒压模式下运行 进样口压力 质谱条件 MS 传输线温度 : 325 ºC MS 离子源温度 : 300 ºC MS 四极杆 1 2 温度 : 150 ºC 150 ºC 碰撞池气体 : 氮气 1.5 ml/min, 氦气 2.25 ml/min MS1/MS2 分辨率 : 宽 / 宽 MRM 设置 : 参见应用摘要的表 3 电子能量 : -70 ev 电离模式 : 电子碰撞 (EI) EI 自动调谐 : 增益归一化 增益因子 : 5 89

90 QuEChERS 操作程序 称取 2 g 均质化贻贝组织放入 QuEChERS 萃取管中 移取 10 ml 透明萃取液放入清洁的 turbvap 管中并蒸发至 0.5 ml 加入标记的 ISTD( 以丙酮制备 ) 加入 20 ml 二氯甲烷 (DCM) 蒸发至 0.5 ml, 然后加入 10 ml DCM 蒸发至 0.5 ml 将样品涡旋混合 30 s 向其中加入 13 ml 去离子水和两个陶瓷均质子 加入 10 ml 己烷并蒸发至 0.5 ml 将样品涡旋混合 1 min 加入 15 ml 萃取溶剂 (1% 乙酸的乙腈溶液 ) 涡旋混合 1 min 在 180 ºC 下过夜活化硅胶 将 1 g 硅胶加入 15 ml 的空 SPE 管中 加入 QuEChERS AOAC 盐混合物 ( ) 振摇萃取管 1 min, 涡旋混合 1 min 在 3900 rpm 下离心 5 min, 然后将试管放入冷冻箱中在 -20 ºC 下冷冻 30 min 将丙酮层转移至清洁 干燥的含有 1 g 无水硫酸的离心管中 将 SPE 管中的 1 g 硅胶与 10 ml DCM 和 20 ml 己烷进行平衡 将浓缩后的萃取液加入硅胶型 SPE 管中 ; 使用 13 ml 40:60 DCM: 己烷混合液进行洗脱 将萃取物蒸发至 0.5 ml 重复执行步骤 13 和 14 用手振荡 1 min, 然后将管放入冷冻箱中, 在 -20 ºC 下冷冻过夜 将萃取物蒸发至 0.5 ml, 并将其转移至 2 ml 自动进样器样品瓶中 图 1. 适用于贝类中污染物的 QuEChERS 萃取和净化程序 萘 2. 苊烯 3. 二氢苊 4. 芴 5. 二苯并噻吩 6. 菲 7. 蒽 8. 荧蒽 9. 芘 10. 苯并 [a] 蒽 11. 屈 + 三亚苯 12. 苯并 [b+j] 荧蒽 13. 苯并 [k] 荧蒽 14. 苯并 [e] 芘 15. 苯并 [a] 芘 16. 二萘嵌苯 17. 茚并 [1,2,3-cd] 芘 18. 二苯 [a,h] 蒽 19. 苯并 [g,h,i] 响应与采集时间 (min) 的对比图 图 2. PAH 分析物的 TIC MRM 色谱图 90

91 (A) 回收率 % HCBD a-hch HCB b-hch g-hch d-hch Aldrin Isodrin op-dde p,p-dde Dieldrin op-ddd Endrin pp-ddd o,p-ddt p,p-ddt (B) 回收率 % 萘 苊烯 二氢苊 芴 二苯并噻吩 菲 蒽 荧蒽 芘 苯并 [a] 蒽 屈 + 苯并菲 苯并 [b] 荧蒽 苯并 [k] 荧蒽 苯并 [e] 芘 苯并 [a] 芘 苝茚并 [1,2,3-cd] 芘 苯并 [a,h] 蒽 苯并 [g,h,i] 苝 (C) 回收率 % PCB28 PCB52 PCB101 PCB118 PCB153 PCB138 PCB180 图 3. 加标贻贝组织中的 (a) OCP (b) PAH 和 (c) PCB 同系物的分析物百分比回收率图示 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 缓冲 AOAC 萃取试剂盒, 部件号 Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱,15 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 UI Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱,0.65 m 0.15 mm,0.15 μm, 截自部件号为 的产品 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 91

92 采用不同的样品制备方法对小麦中的单端孢霉烯毒素和玉米赤霉烯酮进行 LC/MS/MS 分析 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了利用改进的 QuEChERS 方法和 Agilent Bond Elut Mycotoxin SPE 进行样品制备, 然后以 LC/MS/MS 法检测单端孢霉烯毒素和玉米赤霉烯酮 结合 Agilent 6460 三重串联四极杆 LC/MS 与 MassHunter Optimizer 软件对样品进行分析 相对于免疫吸附提取的回收率为 72% 至 105% QuEChERS 方法与使用 Mycotoxin 柱的传统 SPE 净化方法均可获得良好的回收率 使用 SPE 净化制备的样品更纯, 从而可以获得更低的检测限 ; 而使用 QuEChERS 制备样品更加快速 QuEChERS 操作程序 研细 5 g 谷物样品, 加入 50 ml 空离心管中 加入 10 ml MeOH: 乙腈 (85:15 v:v), 盖紧瓶盖并混合 加入 Bond Elut 非缓冲萃取包 ( 部件号 ), 盖紧瓶盖 振荡并离心 移取 1 ml 上清液至 2 ml 分散 SPE 管 ( 部件号 ) 中 盖紧瓶盖 涡旋混合并离心 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 仪器 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 流动相 : MS/MS 条件 Agilent ZORBAX Rapid Resolution HT Eclipse Plus C18 色谱柱, mm,1.8 μm ( 部件号 ) Agilent 6460 三重串联四极杆 LC/MS, Agilent 1290 Infinity LC 0.25 ml/min 10 μl A: 水 + 0.2% 乙酸,5 mm 乙酸铵 B: 甲醇 + 0.2% 乙酸,5 mm 乙酸铵 配置安捷伦喷射流的 ESI 参数, 正 / 负极性快速切换 干燥气温度 : 200 ºC 干燥气流速 : 喷雾器压力 : 8 L/min 45 psi 鞘气温度 : 400 ºC 鞘气流速 : 毛细管电压 : 喷嘴电压 : Delta EMV: 分辨率 : 12 L/min ± 3000 V ± 500 V 500 V 单位, 单位 使用 0.2 µm 滤膜进行过滤 在 N 2 气氛下蒸发并复溶于 1 ml H 2 O:ACN (80:20 v:v) 中 图 1. 适用于谷物的 QuEChERS AOAC 样品制备程序 Bond Elut Mycotoxin 方法 粉碎 25 g 谷物样品 加入 100 ml MeOH: 乙腈 (85:15 v:v), 盖紧瓶盖并振摇 1 小时 将 8 ml 等分样品加入 Bond Elut Mycotoxin 管 ( 部件号 ) 中并收集滤出物 在 N 2 气氛下蒸发并复溶于 1 ml H 2 O:ACN (80:20 v:v) 中 使用 0.2 µm 滤膜进行过滤 图 2. 适用于谷物中霉菌毒素的 Bond Elut Mycotoxin SPE 样品制备方法 92

93 表 1. 单端孢霉烯毒素和玉米赤霉烯酮的 MS 分析条件 毒枝菌素 前体离子 子离子 碎片 碰撞能量 极性 15- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 正 15- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 正 15- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 正 3- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 负 3- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 负 二乙酰氧基镰草镰刀菌醇 (DAS) 正 二乙酰氧基镰草镰刀菌醇 (DAS) 正 脱氧雪腐镰刀菌醇 (DON) 负 脱氧雪腐镰刀菌醇 (DON) 负 镰刀菌烯酮 -X 负 镰刀菌烯酮 -X 负 HT-2 毒素 正 HT-2 毒素 正 新茄病镰刀菌烯醇 正 新茄病镰刀菌烯醇 正 雪腐镰刀菌烯醇 负 雪腐镰刀菌烯醇 负 雪腐镰刀菌烯醇 负 T-2 毒素 正 T-2 毒素 正 玉米赤霉烯酮 负 玉米赤霉烯酮 负 玉米赤霉酮 负 玉米赤霉酮 负 表 2. 改进的 QuEChERS 和柱筒式 SPE 方法处理的 50 µg/kg (n=9) 加标小麦样品的回收率数据比较 分析物 分析物保留时间 (min) 改进的 QuEChERS 回收率 (%) 改进的 QuEChERS RSD (%) BE Mycotoxin SPE 回收率 (%) 雪腐镰刀菌烯醇 脱氧雪腐镰刀菌醇 镰刀菌烯酮 -X 新茄病镰刀菌烯醇 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 二乙酰氧基镰草镰刀菌醇 HT T-2 毒素 玉米赤霉烯酮 BE Mycotoxin SPE RSD (%) 93

94 x 雪腐镰刀菌烯醇 脱氧雪腐镰刀菌醇 镰刀菌烯酮 -X 新茄病镰刀菌烯醇 15- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 3- 乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇 二乙酰氧基镰草镰刀菌醇 HT-2 毒素 T-2 毒素 玉米赤霉烯酮 相对丰度 采集时间 (min) 图 ppb 小麦基质标准品 : 一级 transitions 的归一化色谱图 请注意该方法不需要对同分异构体 15- 乙酰基 DON 和 3- 乙酰基 DON 进行色谱分离, 可通过使用不同的质谱极性对它们进行区分 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERS 非缓冲萃取包, 部件号 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent Bond Elut Mycotoxin SPE 柱,500 mg,3 ml, 部件号 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 快速分离高通量色谱柱, mm,1.8 μm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 94

95 使用优化的萃取 / 净化程序和 Agilent 7000 系列三重四极杆气质联用系统测定茶叶中的多农药残留 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用摘要报导了使用优化的 QuEChERS 样品制备方法有效 萃取茶叶中的农药残留, 同时将咖啡因和其他可能影响色谱峰 形 导致保留时间漂移和灵敏度损失的共萃取物的萃取率降至 最低 在 MRM 模式下通过 GC/MS/MS 对茶叶萃取物进行分 析, 分析采用 Agilent 7890 GC 和 Agilent 7000B 三重四极杆 GC/MS 系统 这种全新的方法使用 QuEChERS 萃取与液相萃 取净化相结合, 可获得一致的结果 QuEChERS 操作程序 在 50 ml 塑料离心管中加入 2 g 干茶叶和 10 ml 水, 振摇 30 秒, 放置 30 min 使基质溶于水 加入 10 ml 乙腈 : 搅拌 1 min, 加入 4 g MgSO g NaCl; 搅拌 1 min, 加入 TPP( 内标物 ), 在 rpm 下离心 5 min 移取 1 ml 乙腈层至 15 ml 塑料离心管中, 加入 1 ml 正己烷和 5 ml 20% 的 NaCl 水溶液, 搅拌 1 min 在 rpm 下离心 1 min 移取部分正己烷上清液至 2 ml 自动进样器样品瓶中 图 1. 适用于茶叶的 QuEChERS 萃取和净化流程图 仪器条件 GC 条件 色谱柱 (1): Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱, 15 m 0.25 mm,0.25 μm ( 部件号 19091S-431UI) 色谱柱 (2): Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱, 0.50 m 0.15 mm,0.15 μm ( 截自部件号为 的产品 ) 微板流路控制装置 : 配置微板流路控制模块 (PCM) 的压力控制三通 (PCT) 自动进样器 : 进样量 : 不分流进样持续时间 : 1 min Agilent 7693A 自动液体进样器 2 μl 冷不分流进样, 使用 CO 2 冷却的多模式进样口 (MMI) 进样量 : 2 mm 内径带凹槽去活衬管 ( 部件号 ) 进样口升温程序 : 50 ºC, 保持 0.1 min, 以 600 ºC/min 升温至 300 ºC 分流出口吹扫流速 : RTL 化合物 : 载气 : 50 ml/min, 在 1.0 min 处开始 氟乐灵, 锁定在 min 处 氦气 进样口压力 : psi 恒压模式 ( 运行期间 ) PCM 压力 : 2.0 psi 恒压模式 ( 运行期间 ) 柱温箱升温程序 : 后运行时间 : 50 ºC( 保持 1.0 min), 以 50 ºC/min 的速度升温至 150 ºC, 以 6 ºC/min 的速度升温至 200 ºC, 以 16 ºC/min 的速度升温至 280 ºC( 保持 4.07 min) 2.0 min 后运行温度 : 280 ºC 后运行压力 : MS 传输线温度 : 280 ºC 进样口压力 1.0 psig,pcm 压力 60.0 psig 质谱条件 电离模式 : 电子能量 : 调谐 : EM 增益因子 : 10 MS1 分辨率 : MS2 分辨率 : 电子电离 -70 ev EI 自动调谐 最大半峰宽 1.2 amu 最大半峰宽 1.2 amu 转换 : 参见应用摘要的参考文献 [2] 碰撞能量 : 参见应用摘要的参考文献 [2] 驻留时间 : 碰撞池气体流速 : 2-28 ms, 根据每个时间窗口的转换数, 实现 5 个循环 / 秒 氮气 1.5 ml/min, 氦气 2.35 ml/min MS 温度区域 : 离子源 280 ºC,Q1 150 ºC,Q2 150 ºC 95

96 焦 酸 咖啡因 邻苯二酚 2 可可碱 角鲨烯 响应 亚麻酸 1 (1) 0 3 (2) 保留时间 (min) 目标分析物的洗脱区 图 2. 经乙腈萃取后的 QuEChERS 萃取液的全扫描质谱谱图显示有大量咖啡因和其他共萃取物存在 (1 蓝色曲线 ), 与之形成鲜明对比的是经过液液萃取后, 最终萃取液中咖啡因和其他共萃取物的丰度显著下降 ( 黄色曲线 ) 农药数量 (1) 0.01 mg/kg 0.1 mg/kg 红茶 1 mg/kg 0.01 mg/kg 0.1 mg/kg 绿茶 1 mg/kg <50% 50-70% % 农药数量 160 (2) mg/kg 0.1 mg/kg 红茶 1 mg/kg 0.01 mg/kg 0.1 mg/kg 绿茶 1 mg/kg <20% 20-30% >30% 160 (2) 图 3. 加标浓度分别为 和 1 mg/kg 的绿茶和红茶样品中农药残留的 (1) 总体回收率和 (2) RSD 分布图 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut QuEChERs 非缓冲萃取包, 部件号 Agilent J&W HP-5ms 超高惰性色谱柱,15 m 0.25 mm,0.25 μm, 部件号 19091S-431UI Agilent J&W DB-5ms 超高惰性色谱柱,0.50 m 0.15 mm,0.15 μm, 截自部件号为 的产品 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 96

97 采用 LC/MS/MS 结合改进的 QuEChERS 方法对动物源食品中的 36 种兽药进行筛查 ( 出版号 CHCN) 引言 本应用简报介绍了一种改进的 QuEChERS 方法, 可对食品中 的四类兽药 : 磺胺类 大环内酯类 喹诺酮类和氯吡多进行筛 查 采用该方法萃取这四类兽药均可获得满意的回收率 采 用配置二极管阵列检测器的 Agilent 1260 Infinity LC 与配置安 捷伦喷射流技术电喷雾离子源的 Agilent 6460 三重串联四极杆 LC/MS 仪器系统进行分析 除肉类基质以外, 该方法还可成 功用于鸡蛋 牛奶和蜂蜜样品的分析 QuEChERS 操作程序 称取 2 g (+/ g) 样品 ( 必要时进行均质化 ) 放入 50 ml 空离心管中 加入 4 ml H 2 0, 盖紧瓶盖并涡旋振荡 1 min 加入 10 ml 1% 乙酸的乙腈溶液, 盖紧瓶盖并涡旋振荡 1 min 加入 QuEChERS 萃取盐包 ( 部件号 ) 盖紧瓶盖并剧烈振摇 1 min 在 4 ºC 下以 5000 rpm 的转速离心 5 min 静置 30 min 移取 6 ml 上层 ACN 相至 15 ml 分散 SPE 管 ( 部件号 ) 中, 盖紧瓶盖并涡旋振荡 1 min 仪器条件 高效液相色谱条件 色谱柱 : 流速 : 柱温 : 30 ºC 进样量 : 流动相 : Agilent ZORBAX Solvent Saver HD Eclipse Plus C18 色谱柱, mm,1.8 μm 0.5 ml/min 5 μl A:H 2 O 0.1% 甲酸 B: 乙腈 梯度 : 时间 (min) %A %B 质谱条件 极性 : 正 气体温度 : 300 ºC 气体流速 : 雾化器压力 : 毛细管电压 : 7 L/min 50 psi 3000 V 鞘气温度 : 350 ºC 鞘气流速 : 扫描模式 : 10 L/min DMRM 在 5000 rpm 下离心 5 min 移取 4 ml 上清液至干净的管中 在 40 C 下于 N 2 气氛中干燥 复溶于 1 ml 的 2:8 ACN:H 2 O 中, 然后在 rpm 下离心 10 min 移取上清液至自动进样器样品瓶中 图 1. 适用于动物源食品中兽药的 QuEChERS AOAC 样品制备程序 97

98 图 2. 兽药的 MRM 提取离子流色谱图 98

99 表 1. 萃取步骤的不同方法优化结果 选用含有 Na 2 SO 4 的萃取盐混合物可获得更高的回收率 方法 萃取盐 MgSO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl 分散 SPE 混合物 C18EC+MgSO 4 C18EC+Na 2 SO 4 C18EC+Na 2 SO 4 C18EC+Na 2 SO 4 萃取溶剂 1% 甲酸乙腈 1% 甲酸乙腈 1% 甲酸乙腈 1% 甲酸乙腈 水 8 ml 8 ml 4 ml 4 ml 大环内酯类药物的平均回收率 22.95% 43.66% 45.12% 70.46% 磺胺类药物的平均回收率 10.86% 25.96% 33.25% 54.35% 喹诺酮类药物的平均回收率 86.79% 47.69% 62.69% 64.44% 氯吡多的平均回收率 55.12% 38.02% 49.89% 65.37% 玉米赤霉烯酮 表 2. 分散 SPE 参数优化结果 选用包含 PSA 的 dspe 混合物可获得更高的通用性 方法 萃取盐 Na 2 SO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl Na 2 SO 4 +NaCl 分散 SPE 混合物 50 mg PSA+ 150 mg C18EC+ 900 mg Na 2 SO mg PSA+ 150 mg C18EC+ 900 mg Na 2 SO 4 50 mg SAX+ 150 mg C18EC+ 900 mg Na 2 SO mg NH mg C18EC+ 900 mg Na 2 SO mg C18EC+ 900 mg Na 2 SO 4 萃取溶剂 1% 乙酸 1% 乙酸 1% 乙酸 1% 乙酸 1% 乙酸 乙腈 乙腈 乙腈 乙腈 乙腈 水 4 ml 4 ml 4 ml 4 ml 4 ml 大环内酯类药物的平均回收率 54.57% 42.23% 59.87% 33.70% 66.10% 磺胺类药物的平均回收率 % % 77.35% 51.71% 71.80% 喹诺酮类药物的平均回收率 73.88% % 76.82% 97.03% 84.66% 氯吡多的平均回收率 85.12% % 71.57% 70.27% 91.17% 上述应用摘要中所使用的产品 Agilent Bond Elut 萃取管, 部件号 适用于药物残留的 Agilent Bond Elut QuEChERS 分散 SPE 试剂盒, 部件号 Agilent ZORBAX Solvent Saver HD Eclipse Plus C18 色谱柱, mm,1.8 µm, 部件号 要查看本应用摘要的完整版本, 请访问 搜索 CHCN 99

100 利用安捷伦 LC 和 GC 仪器快速准确地测量萃取所得分析物 LC 和 LC/MS 仪器 卓越的性能克服严峻的定性和定量分析 从最好的液相技术到高准确度和精密度的质谱, 再到 TOF-MS 系统, 使您无需谱库即可确定经验公式, 安捷伦 LC/MS 仪 器助您轻松实现目标化合物分析 定性及定量 Agilent 6230 TOF LC/MS Agilent 1290 Infinity LC GC/MS 仪器 高灵敏度和选择性用于苛刻环境下的复杂基质样品 无论您的气相应用目的是定量目标化合物还是开发未知化合物, 使低检测限和高速测量得到关键结合的最佳方法是使用专门为 GC/MS/MS 应用设计的系统 7000B 三重四极杆 GC/MS 100

101 安捷伦的色谱柱和配件对难以应对的任务 至关重要 食品安全检测的风险已达到了前所未有的高度 分析的任何阶 段都需要谨慎 不能对分析效率和结果产生不利影响 正是出 于这个原因 安捷伦将其制造的色谱柱和消耗品设计得较竞争 产品更耐久 同时又确保仪器在其整个寿命期都能保持对复杂 食品应用至关重要的巅峰性能 色谱柱和标样使您对结果完全放心 用于 HPLC 和 UHPLC 的 Agilent ZORBAX 和 Poroshell 120 色谱柱 GPC/SEC 色谱柱和标准品 包括 PLgel 柱 PL aquagel-oh 柱 专用柱和 EasiVial 标准品 Agilent J&W GC 色谱柱 包括超惰性柱 高效柱 高选择 性柱和 PoraBOND PLOT 色谱柱 用于 GC LC 和 MS 的测试和性能验证标准物 适用于独特应用的 GC 和 LC 色谱柱 安捷伦设计的配件保证仪器最佳性能 利用 GC 的安捷伦惰性流路组件 超高惰性衬管和分流平 板 UltiMetal Plus 灵活金属密封圈等 使您分析食品应用 中复杂 活性化合物的能力得到提高 用于 GC LC MS 以及原子和分子光谱的多种产品组合 安捷伦 CrossLab 是可用于主要品牌分析仪器的 GC 和 LC 消 耗品产品组合 经 MS 测试的样品瓶套装 超惰性进样口衬管和其它新型的 配件 安捷伦的 ph 计和电极是专为色谱工作者量身打造 101

102 索引 分析物丙烯酰胺 , 57 抗生素 , 73, 76, 97 激素 真菌毒素 农药 , 18, 21, 24, 28, 30, 34, 36, 39, 41, 44, 47, 50, 61, 63, 65, 67, 70, 78, 81, 87, 95 多环芳烃 (PAH) , 84, 89 多氯联苯 (PCB) , 89 多核芳香烃 (PNA) , 89 单端孢霉烯毒素 兽药 玉米赤霉烯酮 基质页码苹果 , 18, 21, 36, 39, 61, 63 婴儿食品 香蕉 鸡肉 黄瓜 鸡蛋 鱼类 , 59, 84 面粉 蜂蜜 生菜 , 87 肝脏 , 76 牛奶 食用油 柠檬油 橄榄油 橙子 梨 , 87 胡椒 猪肉 马铃薯 大米 贝类, 贻贝 贝类, 虾 菠菜 , 41, 44, 47,

103 草莓 , 87 茶叶 番茄 蔬菜汁 小麦 野花 QuEChERS 定义 QuEChERS 分散试剂盒 QuEChERS 萃取试剂盒 QuEChERS 陶瓷均质子 QuEChERS AOAC 方法 QuEChERS EN 方法 QuEChERS 早期方法 QuEChERS 其他方法 QuEChERS 标准方法 QuEChERS 选择指南 适用于 QuEChERS 产品的标准品