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第 5 期 李 正 发 等 : 骨 髓 单 个 核 细 胞 抗 体 及 外 周 血 B 淋 巴 细 胞 与 IRP 的 相 关 性 研 究 419 vide reliable diagnostic evidence, which is better than the bone marrow Coomb s test. Keywords: pancytopenia;immunorelated;autoantibodies;flow cytometry;b-lymphocytes;cd5 + Blymphocytes (Life Science Research,2014,18(5):418 耀 422) 免 疫 相 关 性 全 血 细 胞 减 少 症 (immuno-related pancytopenia, IRP) 是 由 于 T 淋 巴 细 胞 调 控 失 衡 导 致 B 淋 巴 细 胞 数 量 亚 群 功 能 异 常, 进 而 B 淋 巴 细 胞 产 生 自 身 抗 体, 最 终 引 起 血 细 胞 减 少 症 候 群 作 为 临 床 多 个 学 科 易 见 的 疾 病, 其 与 再 生 障 碍 性 贫 血 (aplastic anemia, AA) 骨 髓 增 生 异 常 综 合 征 (myelodysplastic syndromes, MDS) 阵 发 性 血 红 蛋 白 尿 (paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, PNH) 慢 性 病 性 贫 血 (anemia of chronic disease, ACD) 等 骨 髓 衰 竭 性 疾 病 不 易 区 分, 容 易 混 淆, 危 害 性 大, 治 疗 难 以 着 手, 是 困 扰 临 床 医 师 的 一 大 难 题 [1] 自 2001 年 IRP 由 邵 综 鸿 等 提 出 以 来, 对 于 IRP 的 实 验 室 诊 断 研 究 尤 为 引 起 关 注 目 前 IRP 患 者 自 身 抗 体 的 实 验 室 检 测 手 段 有 骨 髓 单 个 核 细 胞 Coombs 试 验 骨 髓 细 胞 抗 体 放 散 试 验 流 式 细 胞 术 双 标 法, 其 中 敏 感 性 最 高 的 属 流 式 细 胞 术 双 [2] 标 法 近 期 有 研 究 提 出,IRP 患 者 自 身 抗 体 的 产 生 可 能 与 骨 髓 B 淋 巴 细 胞 及 其 亚 群 数 量 异 常 有 [3] 关 本 文 在 证 实 流 式 细 胞 术 双 标 法 检 测 患 者 自 身 抗 体 敏 感 性 的 同 时, 摸 索 最 佳 检 测 条 件 以 便 日 后 开 展 于 临 床 检 验 并 利 用 流 式 细 胞 术 检 测 正 常 人 非 免 疫 系 统 的 恶 性 血 液 病 患 者 及 IRP 患 者 外 周 血 B 淋 巴 细 胞 及 CD5+B 淋 巴 细 胞 比 率, 比 较 三 类 患 者 的 差 异, 为 IRP 的 鉴 别 诊 断 提 供 更 多 的 鉴 别 参 考, 而 且 还 有 利 于 制 定 更 有 效 的 治 疗 策 略 1 实 验 部 分 1.1 材 料 1.1.1 病 例 29 例 患 者 均 取 自 于 云 南 省 第 一 人 民 医 院 血 液 科 初 治 住 院 病 人, 其 中 18 例 按 照 文 献 [4] 标 准 拟 诊 为 IRP 患 者, 男 11 例 女 7 例, 年 龄 17~56 岁, 即 未 明 确 诊 断 组 (A 组 ); 另 11 例 为 明 确 诊 断 非 免 疫 相 关 性 恶 性 血 液 病 组 (B 组 ), 男 5 例 女 6 例, 年 龄 17~48 岁, 分 别 诊 断 为 再 生 障 碍 性 贫 血 3 例 阵 发 性 睡 眠 性 血 红 蛋 白 尿 4 例 及 骨 髓 增 生 异 常 综 合 征 4 例, 均 符 合 国 内 诊 断 [5] 标 准 ;A 组 经 确 诊 为 IRP 后 设 为 C 组 ; 另 设 正 常 对 照 22 例, 其 中 男 11 例 女 11 例, 年 龄 18~56 岁 1.1.2 试 剂 与 仪 器 异 硫 氰 酸 荧 光 素 (FITC) 标 记 的 鼠 抗 人 IgG IgM IgA CD5 CD3 单 克 隆 抗 体, 藻 红 蛋 白 (PE) 标 记 的 鼠 抗 人 CD34 CD15 CD19 CD235 CD4 单 克 隆 抗 体 以 及 它 们 各 自 的 同 型 对 照 均 购 自 于 美 国 Beckman Coulter 公 司, 流 式 细 胞 仪 型 号 FM500 MPL 为 Beckman Coulter 公 司 产 品 1.2 实 验 方 法 1.2.1 Facs 双 标 法 检 测 骨 髓 造 血 细 胞 自 身 抗 体 取 9 根 检 测 管 分 成 3 组 均 加 入 肝 素 抗 凝 的 骨 髓 液 100 滋 L, 3 组 分 别 加 入 PE 荧 光 标 记 的 鼠 抗 人 CD15 或 PE 标 记 的 鼠 抗 人 CD34 PE 标 记 的 鼠 抗 人 Glyco-A 单 克 隆 抗 体 20 滋 L, 每 组 内 再 分 别 加 入 FITC 标 记 的 鼠 抗 人 IgG IgM IgA 常 温 避 光 孵 育 20 min 后, 加 入 红 细 胞 裂 解 液, 混 匀 后 室 温 孵 育 10 min, 最 后 加 入 适 量 PBS 液 混 匀 同 型 对 照 加 入 鼠 抗 人 IgG1 单 克 隆 抗 体 -PE 鼠 抗 人 IgG2 单 克 隆 抗 体 -FITC 各 20 滋 L, 按 同 样 方 法 操 作 处 理 后 标 本 上 流 式 细 胞 仪 测 定 骨 髓 单 个 核 细 胞 (CD15 + 细 胞 CD34 + 细 胞 GlycoA + 细 胞 ) 表 面 自 身 抗 体 IgG IgM IgA 的 结 合 率 每 个 样 品 收 集 15 000 个 细 胞 1.2.2 检 测 外 周 血 总 B 淋 巴 细 胞 尧 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 取 1 根 检 测 管, 加 入 20 滋 LPE 标 记 的 鼠 抗 人 CD19 单 克 隆 抗 体 20 滋 LFITC 标 记 的 鼠 抗 人 CD5 单 克 隆 抗 体, 再 加 入 100 滋 L 新 鲜 外 周 血, 混 匀, 室 温 避 光 孵 育 20 min, 加 入 红 细 胞 裂 解 液, 混 匀 再 孵 育 10 min, 加 入 适 量 PBS 液 混 匀 同 型 对 照 管 加 入 FITC 标 记 的 鼠 抗 人 IgG2 单 克 隆 抗 体 PE 标 记 的 鼠 抗 人 IgG1 单 克 隆 抗 体 各 20 滋 L, 其 他 均 按 同 样 方 法 操 作 处 理 好 样 品 用 流 式 细 胞 仪 分 别 测 定 CD5 + CD19 + CD19 + 细 胞 的 表 达 率 每 个 样 本 收 集 15 000 个 细 胞 1.2.3 统 计 学 处 理 应 用 SPSS19.0 数 据 软 件 进 行 相 关 数 据 分 析 对 正 态 分 布 的 数 据 变 量 以 x 依 s 表 示, 用 t 检 验 比 较 两 组 间 是 否 有 显 著 性 2 结 果 与 讨 论 2.1 结 果 2.1.1 骨 髓 单 个 核 细 胞 表 面 相 关 抗 体 的 表 达 A 组 : 参 照 天 津 医 科 大 学 血 液 肿 瘤 科 标 准,

420 生 命 科 学 研 究 圆 园 14 年 各 型 造 血 细 胞 ( 粒 细 胞 造 血 干 / 祖 细 胞 红 细 胞 ) 与 各 种 自 身 抗 体 (IgG IgM IgA) 的 结 合 率 大 于 4% 为 阳 性, 和 ( 或 )CD5 + CD19 + /CD19 + 细 胞 比 率 明 显 偏 高 18 例 拟 诊 断 为 免 疫 相 关 性 全 血 细 胞 减 少 症 患 者 中 16 例 骨 髓 自 身 抗 体 检 测 结 果 阳 性, 阳 性 率 [6] 为 88.88% ( 此 16 例 设 为 C 组 ) 参 照 既 往 文 献 骨 髓 单 个 核 细 胞 Coombs 试 验 阳 性 率 为 46.43% 约 88.88% B 组 :11 例 中 1 例 骨 髓 自 身 抗 体 检 测 结 果 为 阳 性, 阳 性 率 为 9.09%, 此 例 阳 性 患 者 为 再 生 障 碍 性 贫 血 患 者 比 较 两 组, 未 明 确 诊 断 组 阳 性 率 显 著 高 于 明 确 诊 断 组 ( 表 1) 骨 髓 造 血 细 胞 自 身 抗 体 检 测 阳 性 典 型 图 例 见 图 1 2.1.2 外 周 血 总 B 淋 巴 尧 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 C 组 患 者 总 B 淋 巴 细 胞 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 为 (13.00 依 6.81)% 和 (16.71 依 15.91)%, B 组 总 B 淋 表 1 Table 1 巴 细 胞 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 为 (9.27 依 3.52)% 和 (5.23 依 2.21)%, 正 常 对 照 组 总 B 淋 巴 细 胞 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 为 (11.9 依 3.05)% 和 (8.13 依 3.96)% C 组 CD5 + B 淋 巴 细 胞 B 淋 巴 细 胞 比 率 显 著 高 于 正 常 对 照 组 及 B 组 (P 均 约 0.05), 而 正 常 对 照 组 CD5 + B 淋 巴 细 胞 B 淋 巴 细 胞 比 率 显 著 高 于 B 组 (P 约 0.05) 见 表 2 及 图 2 2.2 讨 论 骨 髓 单 个 核 细 胞 自 身 抗 体 表 达 情 况 The expression of autoantibodies in bone marrow mononuclear cells Group n Number of positive Positive rate of autoantibody/(% ) A 18 16 88.88 B 11 1 9.09 Total 29 17 89.47 IRP 是 临 床 多 个 学 科 易 见 的 疾 病, 患 者 主 要 临 床 表 现 为 出 血 贫 血 感 染 及 某 些 脏 器 受 损 [7], (a) FITC-lgG (b) FITC-lgM (c) FITC-lgA (d) FITC-lgG (e) FITC-lgM (f) FITC-lgA (g) FITC-lgG (h) FITC-lgM (i) FITC-lgA 图 1 流 式 细 胞 术 检 测 A 组 骨 髓 造 血 细 胞 自 身 抗 体 (a) 尧 (b) 尧 (c) 分 别 为 粒 细 胞 上 IgG 尧 IgM 尧 IgA 表 达 ;(d) 尧 (e) 尧 (f) 分 别 为 造 血 干 / 祖 细 胞 上 IgG 尧 IgM 尧 IgA 表 达 ;(g) 尧 (h) 尧 (i) 分 别 为 红 细 胞 上 IgG 尧 IgM 尧 IgA 表 达 遥 Fig.1 The expression of bone marrow mononuclear cells autoantibodies of group A (a), (b), (c) are IgG, IgM, IgA expression on granulocytes, respectively; (d), (e), (f) are IgG, IgM, IgA expression on hematopoietic stem cells; (g), (h), (i) are IgG, IgM, IgA expression on red blood cell.

第 5 期 李 正 发 等 : 骨 髓 单 个 核 细 胞 抗 体 及 外 周 血 B 淋 巴 细 胞 与 IRP 的 相 关 性 研 究 421 表 2 Table 2 Group 外 周 血 B 淋 巴 细 胞 及 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 Proportion of CD19 + and CD5 + Blymphocytes in peripheral blood ( x 依 s) 注 : * P<0.05, 实 验 组 C 与 正 常 对 照 组 比 较 ; 实 验 组 B 与 正 常 对 照 组 比 较 遥 Notes: * P<0.05, comparison between group Cand normal con 鄄 trol or comparison between group Band normal control. 仅 凭 临 床 表 现 和 其 他 血 细 胞 减 少 症 无 法 鉴 别 邵 宗 鸿 [4] 等 曾 提 出 此 类 疾 病 的 拟 诊 标 准 : 血 象 三 系 或 两 系 一 系 血 细 胞 减 少, 但 网 织 红 细 胞 或 ( 和 ) 中 性 粒 细 胞 百 分 比 不 低 ; 骨 髓 红 系 或 ( 和 ) 粒 系 百 分 比 不 低, 或 巨 核 细 胞 不 少, 易 见 红 系 造 血 岛 或 嗜 血 现 象 ; 除 外 了 其 他 原 继 发 血 细 胞 减 少 症 符 合 以 上 条 件 者 可 拟 诊 IRP n Proportion of CD19 + B lymphocytes/(%) B 11 9.27 依 3.52 5.23 依 2.21 C 16 13.00 依 6.81 16.71 依 15.91* Normal control 22 11.9 依 3.05 8.13 依 3.96* ( 三 系 血 细 胞 少 ) 或 IRH ( 一 系 或 两 系 血 细 胞 少 ), 符 合 拟 诊 标 准 者 测 及 骨 髓 造 血 细 胞 膜 结 合 自 身 抗 体 后 确 诊 Proportion of CD5 + B lymphocytes/(%) 对 于 此 类 患 者 骨 髓 造 血 细 胞 膜 结 合 自 身 抗 体 的 检 测 方 法, 和 虹 等 [8, 9] 发 现 此 类 患 者 骨 髓 单 个 核 细 胞 Coombs 试 验 阳 性 付 蓉 等 [10] 提 出 利 用 流 式 细 胞 术 双 标 法 检 测 此 类 患 者 骨 髓 造 血 细 胞 膜 结 合 的 自 身 抗 体, 其 试 验 敏 感 性 较 骨 髓 Coombs 试 验 更 高 近 年 来 有 学 者 发 现 了 一 种 基 层 医 院 易 开 展 的 骨 髓 细 胞 抗 体 放 散 试 验, 其 敏 感 性 也 比 Coombs 试 验 高 [11] 分 析 既 往 检 测 方 法 发 现, 传 统 的 实 验 方 法 是 用 外 周 血 或 / 和 骨 髓 做 Coomb s 试 验 来 诊 断 溶 血 的 原 因 然 而 如 果 抗 体 是 针 对 骨 髓 早 期 造 血 细 胞 ( 造 血 干 / 祖 细 胞 有 核 红 细 胞 有 核 粒 细 胞 ), 传 统 方 法 将 无 法 检 测 到 抗 体 存 在 因 而 利 用 流 式 细 胞 术 可 标 记 早 期 造 血 细 胞, 并 对 其 表 面 抗 体 表 达 进 行 检 测 的 特 点, 可 以 解 决 这 一 技 术 难 点 B 淋 巴 细 胞 是 骨 髓 造 血 细 胞 自 身 抗 体 的 产 生 机 制, 现 已 有 研 究 证 实 IRP 患 者 自 身 抗 体 的 产 生 与 B 淋 巴 细 胞 及 其 亚 群 数 量 异 常 功 能 亢 进 及 凋 亡 受 抑 [12] 有 关 Seidi 等 在 多 发 性 硬 化 症 中 观 察 到 CD5 + B 细 胞 与 髓 鞘 蛋 白 抗 体 产 生 有 关, 并 且 也 与 多 发 性 硬 化 的 活 动 期 有 关 ;Huck 等 研 究 系 统 性 红 斑 狼 疮 (SLE) 得 出 同 样 结 论, 发 现 活 动 期 SLE 患 者 的 CD5 + B 细 胞 是 升 高 的, 而 非 活 动 期 SLE 患 者 CD5 + B 细 胞 是 下 降 的, 提 示 CD5 + B 细 胞 的 改 变 与 SLE [13,14] 病 情 活 动 有 关 2005 年 研 究 者 发 现 : 此 类 患 者 B 淋 巴 细 胞 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 明 显 高 于 正 常 对 照 组, 并 进 一 步 发 现 此 类 患 者 B 淋 巴 细 胞 并 非 [7] 单 克 隆 的 恶 性 细 胞 本 文 检 测 IRP 患 者 和 其 他 恶 性 血 液 病 患 者 外 周 血 B 淋 巴 细 胞 及 其 CD5 + B 淋 巴 细 胞 结 果 显 示,IRP 患 者 外 周 血 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 显 著 高 于 恶 性 血 液 病 患 者 及 正 常 对 照 组 结 合 临 床 分 析 发 现, 确 诊 IRP 患 者 中 B 淋 巴 细 胞 数 量 亚 群 比 率 及 功 能 异 常, 进 而 使 B 淋 巴 细 胞 生 存 时 间 延 长, 促 进 抗 体 分 泌, 导 致 患 者 全 血 细 胞 减 少 这 与 既 往 研 究 结 果 相 一 致, 即 Th1 型 细 胞 因 子 介 导 B 淋 巴 细 胞 凋 亡,IRP 患 者 Th1 型 细 胞 因 子 较 正 常 人, [15] 特 别 是 AA 明 显 降 低 正 常 对 照 组 外 周 血 CD5 + B 淋 巴 细 胞 显 著 高 于 恶 性 血 液 病 患 者,B 组 中 MDS AA PNH 这 类 疾 病 均 是 骨 髓 造 血 功 能 出 现 障 碍 或 异 常 的 骨 髓 造 血 功 能 衰 竭 性 疾 病, 尤 其 是 AA 是 一 类 T 淋 巴 细 胞 功 能 亢 进, 通 过 细 胞 毒 性 T 淋 巴 细 胞 (cytotoxic lymphocyte, CTL) 直 接 杀 伤 或 凋 亡 骨 髓 导 致 的 造 血 功 能 衰 竭 症, 这 些 不 稳 定 因 (a) FITC-CDS (b) FITC-CDS (c) FITC-CDS 图 2 外 周 血 CD5 + CD19 + /CD19 + 细 胞 检 测 (a) B 组 ;(b) C 组 ;(c) 正 常 对 照 组 遥 Fig.2 The peripheral blood CD5 + CD19 + /CD19 + cells ratio (a) Group B; (b) Group C; (c) Normal control.

422 生 命 科 学 研 究 圆 园 14 年 素 可 能 导 致 B 组 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 偏 低 提 示 此 类 疾 病 可 能 因 骨 髓 造 血 功 能 衰 竭 而 致 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 偏 低 3 结 论 对 比 传 统 的 骨 髓 单 个 核 细 胞 Coombs 试 验, 利 用 流 式 细 胞 术 检 测 骨 髓 单 个 核 细 胞 自 身 抗 体 灵 敏 性 显 著 增 高 IRP 患 者 B 淋 巴 细 胞 CD5 + B 淋 巴 细 胞 显 著 高 于 非 免 疫 性 恶 性 血 液 病 患 者, 此 亦 可 以 作 为 诊 断 MDS AA PNH 等 疾 病 时 的 鉴 别 参 考 之 一 本 实 验 检 测 还 发 现 非 免 疫 性 的 恶 性 血 液 病 患 者 B 淋 巴 细 胞 CD5 + B 淋 巴 细 胞 比 率 显 著 低 于 正 常 对 照 组, 文 章 中 作 了 部 分 分 析, 深 层 次 的 原 因 还 有 待 于 进 一 步 的 研 究 参 考 文 献 (References): [1] 邵 宗 鸿, 杨 天 楹. 重 视 原 发 性 骨 髓 造 血 功 能 衰 竭 症 的 鉴 别 [J]. 中 华 血 液 学 杂 志 (SHAO Zhong-hong, YANG Tian-yin. Iden tification of primary importance bone marrow failure disorder[j]. Chinese Journal of Hematology), 2001, 22(10): 509-511. [2] 董 婷, 李 正 发, 欧 阳 红 梅, 等. 骨 髓 造 血 干 / 祖 细 胞 自 身 抗 体 与 免 疫 相 关 性 全 血 细 胞 减 少 [J]. 中 国 组 织 工 程 研 究 (DONGTing, LI Zhen-fa, OUYANG Hong-mei, et al. Hematopoietic stem/ progenitor cell autoantibodies and immune-related decrease in bloodcells[j].chinatissueengineeringresearch),2013,17(19): 3603-3610. [3] 牛 占 恩. 免 疫 相 关 性 全 血 细 胞 减 少 症 (IRP) B 淋 巴 细 胞 及 其 CD5 + B 数 量 检 测 的 临 床 意 义 [J]. 中 国 现 代 医 学 杂 志 (NIU Zhanen. Immune-related disorders pancytopenia (IRP) Blympho 原 cytes and their clinical significance of detecting the number of CD5 + B s[j]. Chinese Journal of Modern Medicine), 2011, 21 (25): 3140-3142. [4] 邵 宗 鸿, 付 蓉. 免 疫 相 关 性 血 细 胞 减 少 症 一 种 新 认 知 的 疾 病 ( 下 )[J]. 中 国 医 刊 (SHAO Zhong-hong, FU Rong. Im 原 mune-relatedpancytopenia-anewcognitivedisorders(under)[j]. Chinese Journal of Medicine), 2005, 40(2): 70-73. [5] 张 之 南, 沈 悌. 血 液 病 诊 断 及 疗 效 标 准 [M]. 北 京 : 科 学 技 术 出 版 社 (ZHANG Zhi-nan, SHEN Ti. Blood disease diagnosis and treatment standards[m]. Beijing: Science Press), 1998. 33-36. [6] 李 燕, 王 晓 敏, 富 玲, 等. 骨 髓 单 个 核 细 胞 抗 人 球 蛋 白 分 型 试 验 在 免 疫 相 关 性 全 血 细 胞 减 少 症 (IRP) 中 的 诊 断 意 义 [J]. 中 国 实 验 诊 断 学 (LI yang, WANG Xiao-min, FU Lin, et al. The diagnosis meaning of bone marrow mononuclear cells antiglob ulintypingtestsinimmunorelatedpancytopenia[j].chinesejour 原 nal of Laboratory Diagnosis), 2009, 13(11): 1546-1548. [7] 邵 宗 鸿, 付 蓉. 免 疫 相 关 性 血 细 胞 减 少 症 一 种 新 认 知 的 疾 病 ( 上 )[J]. 中 国 医 刊 [SHAO Zhong-hong, FU Rong. Im mune-relatedpancytopenia-anewcognitivedisorders(upper)[j]. Chinese Journal of Medicine, 2005, 40(1): 5-8. [8] 和 虹, 邵 宗 鸿. 改 良 直 接 抗 人 球 蛋 白 试 验 的 进 展 [J]. 中 华 检 验 医 学 杂 志 (HE Hong, SHAO Zhong-hong. Progress in improving direct antiglobulin test[j].journal of Laboratory Medicine),2001, 24(5): 313-315. [9] 和 虹, 邵 宗 鸿, 刘 鸿, 等. 与 异 常 免 疫 相 关 的 全 血 细 胞 减 少 症 [J]. 中 华 血 液 学 杂 志 (HE Hong, SHAO Zhong-hong, LIU Hong, et al.associated with abnormal immune pancytopenia syndrome[j]. Chinese Journal of Hematology), 2001, 22(1): 79-82. [10] 付 蓉, 邵 宗 鸿, 刘 鸿, 等. 与 异 常 免 疫 相 关 的 血 细 胞 减 少 患 者 骨 髓 造 血 细 胞 自 身 抗 体 的 研 究 [J]. 中 华 血 液 学 杂 志 (HE Hong, SHAO Zhong-hong, LIU Hong, et al. Associated with abnormal immune cytopenias study autoantibodies in patients with bone marrow cells[j].chinese Journal of Hematology),2003, 24(4): 177-181. [11] 朱 晓 东. 骨 髓 细 胞 抗 体 放 散 试 验 对 免 疫 相 关 性 血 细 胞 减 少 症 的 诊 断 价 值 [J]. 中 国 临 床 实 用 医 学 (ZHU Xiao-dong. The diagnostic value of bone marrow cell antibody elution test for immune-related pancytopenia[j]. Chinese Medicine Clinical U 原 tility), 2009, 3(1): 50-52. [12] 付 蓉, 邵 宗 鸿, 刘 鸿, 等. 免 疫 相 关 性 全 血 细 胞 减 少 症 患 者 骨 髓 B 淋 巴 细 胞 数 量 功 能 及 凋 亡 [J]. 医 学 研 究 通 讯 (FU Rong, SHAO Zhong-hong, LIU Hong, et al. Pancytopenia in patients with immune-related bone marrow B lymphocytes, function and apoptosis[j]. Medical Research Communications), 2003, 32 (11): 9-12. [13] SEIDI OA, SEMRA YK, SHARIEF MK. Expression of CD5 on Blymphocytes correlates with disease activity in patients with multiple sclerosis[j]. Journal Neuroimmunol, 2002, 133(1-2): 205-210. [14] HUCK S, JAMIN C, YOUINON P, et al. High-density expres 原 sion of CD95 on Bcells and under representation of the B-1 cell subset in human lupus[j]. Journal Autoimmun, 1998, 11(5): 449-455. [15] 马 军, 邵 宗 鸿, 王 建 祥. 造 血 系 统 疾 病 临 床 诊 疗 规 范 教 程 [M]. 北 京 : 北 京 大 学 医 学 出 版 社 (MA Jun, SHAO Zhong-hong, WANG Jian-xiang. Hematopoietic system diseases clinical di agnosticandtreatmentpracticestutorials[m].beijing:pekingu 原 niversity Medical Press), 2008, 187-189.