Microsoft Word - 第四章_護肝研究_.doc
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1 第四章 桂花萃取物及 rutin 護肝功能 之評估 大綱 一 桂花抑制 Acetaminophen 傷肝模式試驗 1. 護肝試驗期間小鼠體重變化 2. 小鼠臟器重量變化 3. 血液生化值檢測 (GOT GPT) 4. 臟器組織病理檢查 5. 脂質過氧化檢測
2 摘 要 本研究之目的在探討 BALB/c 小鼠先以管灌餵食 75 % 乙醇桂花萃取物及抗氧化成分 rutin 連續 15 天, 於小鼠犧牲前三小時腹腔注射 acetaminophen (1.0 g/kg B.W.), 評估體重 血液分析 (GOT GPT) 臟器脂質過氧化程度及器官組織切片等, 發現可減緩 acetaminophen 之毒性作用 實驗以 6~8 週大之雌性小鼠, 將小鼠隨機分成七組, 發現分別是桂花萃取物組 [ 低劑量 100 mg/kg (LEKF) 中劑量 800 mg/kg (MEKF) 及高劑量 1000 mg/kg (HEKF) ] rutin 組 [ 低劑量 10 mg/kg (LR) 及高劑量 100 mg/kg (HR) ] Positive control (PC) Negative control (NC), 依照組別分別餵食 15 天, 每組六隻小鼠, 投與體積為 1 ml/100g B.W.,15 天後桂花萃取物組 rutin 組及 PC 組小鼠皆在犧牲前三小時腹腔注射 acetaminophen (1.0 g/kg B.W.) 實驗結果顯示, 桂花萃取物能明顯降低 acetaminophen 所導致 GOT 值的上升, 減少肝臟及肺臟脂質過氧化現象 於組織切片檢驗中, 桂花萃取物組及 rutin 組能明顯降低 acetaminophen 所造成小鼠肝臟組織空泡化之損傷現象 綜合以上結果顯示, 桂花及其抗氧化成分 rutin 確實能夠降低過量 acetaminophen 所導致肝臟損害及組織脂質氧化現象, 具有發展成為護肝保健產品的潛力
3 材料與方法 一 桂花 75 % 乙醇萃取物製備桂花 (Osmanthus fragrans flower;kwei-fah) 75 % 乙醇萃取物 : 處理方法及流程如第二章所述, 管餵用之桂花萃取物於管餵前以 0.9 % normal saline 配製成適當劑量 二 動物實驗設計 ( 一 ) 實驗流程及分組 1. 實驗流程 day 1 d 15 d 16 Sacrifice Oral feeding i.p. APAP 1.0 g/kg rat BW of sacrifice before 3 hours LEKF: 管餵 100 mg kwei-fa extract/kg B.W. /day MEKF: 管餵 800 mg kwei-fa extract /kg B.W. /day HEKF: 管餵 1000 mg kwei-fa extract /kg B.W. /day LR: 管餵 10 mg rutin/kg B.W. /day HR: 管餵 100 mg rutin/kg B.W. /day PC: Positive control 管餵 0.9 % normal saline /day NC: Negative control 管餵 0.9 % normal saline /day
4 2. 實驗分組 Group N Oral feeding Sensitize (i.p.) sacrifice before 3 hours LEKF mg KFE/kg mice B.W. APAP 1.0 g/kg mice B.W. MEKF mg KFE/kg mice B.W. APAP 1.0 g/kg mice B.W. HEKF mg KFE/kg mice B.W. APAP 1.0 g/kg mice B.W. LR 6 10 mg rutin/kg mice B.W. APAP 1.0 g/kg mice B.W. HR mg rutin/kg mice B.W. APAP 1.0 g/kg mice B.W. PC % normal saline APAP 1.0 g/kg mice B.W. NC % normal saline 0.9 % normal saline 3. 實驗分析指標 : 體重測定 每週稱量小鼠體重, 並在投予終止日量測為最終 體重重量, 作為體重臟器重量比例之計算基準 血液生化值檢測 組織病理切片 脂質過氧化指標 GOT GPT 肝臟 肺臟 腎臟 TBARs ( 二 ) 試驗動物 1. 動物品系 : BALB/c 小鼠 2. 動物來源 : 財團法人國家實驗研究院國家實驗動物繁殖及研究中心 3. 動物週期及性別 : 四週大, 雌性小鼠
5 4. 動物重量 : 20 ± 5 克 5. 飼養環境 : 本系之動物房, 飼養於不繡鋼鐵籠中, 以 Lab 5001 之動物飼料及飼養墊料 (BETA CHIP), 空調設備, 房內溫度維持在 25 ± 3 相對溼度 55 ± 5 %, 控制光照 黑暗各為 12 小時循環條件下 試驗期間, 飼料及飲水均採自由攝食 6. 動物實驗模式 : 小鼠飼養於 6 週大時, 將小鼠隨機分成七組分別為桂花萃取物組 ( 低劑量 100 mg KFE/kg B.W. 中劑量 800 mg KFE/kg B.W. 及高劑量 1000 mg KFE/kg B.W.) 抗氧化成分 rutin 組 ( 低劑量 rutin 10 mg/kg B.W. 高劑量 rutin 100 mg/kg B.W.) Positive control 組 (0.9 % norm Negative control 組 (0.9 % normal saline), 等方式餵食, 每組六隻小鼠, 投與體積為 1 ml/100 g B.W., 以 1 ml 塑膠針管套附餵食管 ( 直徑 0.9 mm, 長度 50 mm), 以強迫方式連續管餵小鼠 15 天, 於第 16 天犧牲前三小時以腹腔內注射方式, 分別桂花萃取物組 抗氧化成分 rutin 組 Positive control 組注射 acetaminophen 1.0 g/kg rat B.W.;Negative control 組注射 0.9 % normal saline 三 動物犧牲及實驗檢體收集與分析 ( 一 ) 血液檢體收集
6 於試驗終了將小鼠犧牲, 分別對小鼠進行眼窩採血 (retro-orbital) 先將小鼠以腹腔內注射麻醉藥 pentobarbital 20 μg/mice in 0.2 ml 0.9 % normal saline, 待小鼠昏迷後以滅菌之玻璃滴管迅速自小鼠眼窩靜脈竇採血, 採血量約 300 μl, 於室溫下靜置 2 3 小時後, 以 1200 rpm (MPW) 轉速離心 20 分鐘, 收集上層之血清, 保存於 -80 待分析 ( 二 ) 血液生化值檢測以眼窩採血方式採取小鼠血液完畢後靜置二小時, 使血漿沉澱, 以 1200 rpm,4,5 分鐘離心後, 取上層之血清, 依 GPT (ALAT) IFCC mod.liquiuv Test GOT (ASAT) IFCC mod.liquiuv Test 套組方法測進行血清生化學分析 ( 三 ) 動物犧牲取樣犧牲過程依序收集小鼠血液 心臟 肝臟 脾臟 肺臟 腎臟 各臟器以冰冷 0.9 % normal saline 洗淨, 棉紙吸乾水分稱重後, 將各臟器區分一半置於離心管, 以石蠟膜包封儲存於 -80 冰箱待後續分析 ; 另一半取出浸於 10 % 福馬林溶液, 以供組織病理切片檢查用
7 ( 四 ) 組織病理切片小鼠之肝臟 肺臟 腎臟儲存於 10 % 福馬林溶液, 委託奇美醫學中心病理部切片及顯微鏡觀察 (H&E 400 ), 並委請李建隆醫師判讀 ( 五 ) 組織脂質過氧化 (TBARs) 測定 實驗試劑 1. Potassium-phosphate buffer (KP buffer): 0.01 M,pH 7.4;K 2 HPO 4 (Riedel-deHaen 31293) g,kh 2 PO 4 (J.T. Baker ) g,kcl (J.T. Baker ) g, 以去離子水配製, 調 ph 至 7.4, 定量至 1 L 2. 1,1,3,3-Tetraathoxy-propane, approx (TEP):(Sigma T-9889), 以去離子水配製成各濃度 ( nmol/ml) 標準品溶液供樣品濃度之計算 3. Trichloroacetic acid (TCA) solution:10% (Riedel-deHaen 33731), 取 10 g 溶於 100 ml 去離子水 N HCl:12 N HCl, 取 8.33 ml 以去離子水定量至 500 ml 5. 2-thiobarbituric acid (TBA) solution:0.4% (Sigma T-5500), 取 0.2 g 以 0.2 N HCl 定量至 50 ml
8 6. 2,6-di-tert-butyl-4-methyl-phenol (BHT):0.2 % (Sigma B-1378), 取 0.1 g 以絕對酒精定量至 50 ml 7. 1-butanol:(Riedel-deHaen 33065) 實驗方法 取適量小鼠所測臟器, 加入 3 倍冰冷的 ph 7.4 K.P buffer, 以組織均質機 (Glas-Col ) 磨碎成均質液 先以 Lowry 法 (Lowry, 1951) ELISA 全波長光度計 (Molecular derices) 測定臟器均質液中蛋白質濃度 抗氧化分析, 分別先取出臟器均質液及標準品溶液各 1 ml 於玻璃試管, 各加入 1 ml 10 % TCA 溶液, 震盪均勻, 使蛋白質沉澱, 經 3600 rpm 10 分鐘離心後取上層液, 再加入 1 ml 0.4 % TBA 溶液及 0.1 ml 0.2 % BHT 溶液, 震盪均勻, 於 50 下反應 1 小時, 冷卻後加入 butanol 溶液 3 ml, 震盪均勻, 經離心 3600 rpm 10 分鐘, 取上層液以螢光光度計 (HITACHI, F-2500) 於設定波長 (EX WL: 515nm EM WL: 550nm) 下測定吸光值 抗氧化分析試驗過程於加入 TCA 溶液後續步驟須全程避光 四 統計 每一組實驗進行六重覆, 所得實驗結果採用 Statistical Analysis
9 System V8 ( 賽仕軟體股分有限公司 ) 進行變異數分析 (ANOVA, Analysis of variance), 以比較結果之統計顯著性 結果與討論 一 試驗期間小鼠體重變化試驗期間每五天秤其體重, 結果顯示各組與控制組之間是沒有差異的, 於犧牲時各組之間也沒有差異 ( 圖 4-1) 顯示餵取桂花萃取物及純物質 rutin 不會影響小鼠生理機能及代謝 二 臟器重量變化小鼠在管餵桂花萃取物及抗氧化成分 rutin 連續 15 天, 直到犧牲時其心臟 肝臟 脾臟 肺臟 腎臟等與控制組間重量方面沒有差異, 顯示於試驗餵食期間不會造成小鼠器官上的病變 ( 表 4-1) 但是解剖過程發現, 經注射 APAP 的 PC 組其肺臟與肝臟組織較為脆弱, 臟器夾取上稍有困難度, 但經餵食桂花萃取物及 rutin 之小鼠, 臟器則明顯改善此現象, 三 血液分析 GOT 和 GPT 兩者為最常用肝細胞損傷生化檢測指標, 實驗結果顯示, 小鼠於犧牲前三小時腹腔注射 APAP 1.0 g/kg B.W. (PC 組 ), 和正常小鼠 (NC 組 ) 相比,APAP 確實會造成肝細胞損傷, 促
10 使 GOT 及 GPT 上升,GOT 上升達 70 % GPT 上升達 178 %, 與 Agne 等 (2001) 及 Leonard 等 (1985) 研究顯示相符, APAP 確實會造成老鼠 GOT 及 GPT 值上升, 進而造成肝臟組織傷害 若於腹腔注射 APAP 前先餵取桂花萃取物及抗氧化成分 rutin 連續 15 天, 能夠降低注射 APAP 所導致 GOT 上升現象,LEKF 降低 65.2 %; MEKF 降低 43.7 %;HEKF 降低 46.4 %;LR 降低 31.2 %;HR 降低 20.3 % 且桂花萃取物低劑量 LEKF 組及中劑量 MEKF 組能降低 APAP 所導致 GPT 的上升,LEKF 降低 17.9 %;MEKF 降低 41.0 %, 由上述結果顯示, 桂花萃取物之保護效果優於 rutin, 能降低 APAP 所導致小鼠肝指數 GOT 及 GPT 值上升, 降低 APAP 所造成肝臟傷害 ( 表 4-2) 四 臟器組織病理檢查實驗結果顯示, 先餵取桂花萃取物及純物質 rutin 連續 15 天情形下, 各組和 PC 組相比較, 能有效減少 APAP 造成肝臟組織空泡化現象, 降低肝臟組織損傷, 其保護效果, 桂花萃取物優於純物質 rutin ( 圖 4-2) 而肺臟及腎臟切片組織在顯微鏡觀察下, 並沒有病變傷害現象產生 ( 圖 4-3 ~ 4-4), 由此顯示 APAP 主要由肝臟所分解代謝, 其 APAP 毒性副作用主要於肝臟 五 臟器脂質過氧化由圖 4-5 之實驗結果顯示, 小鼠腹腔注射 APAP 三小時後和控制組相比較, 明顯造成老鼠肝臟氧化現象產生 TBARs 值上升, 由 nmol/mg protein (NC 組 ) 到 nmol/mg protein (PC 組 ), 上升達 280 %, 而餵取桂花萃取物及抗氧化成分 rutin 連續 15 天後
11 再經 APAP 處理下, 能降低 APAP 毒性作用所造成肝細胞損傷及氧化現象, 降低 TBARs 達 LEKF 降低 %;MEKF 降低 %;HEKF 降低 %;LR 降低 %;HR 降低 %, 其中又以桂花萃取物的保護效果較 rutin 佳 ( 圖 4-2) 於肺臟部分發現 APAP 也會造成肺臟氧化現象的產生 TBARs 值上升, 由 nmol/mg protein (NC 組 ) 到 nmol/mg protein (PC 組 ), 上升達 113 % ( 圖 4-6),Baudouin 等 (1995) 之研究報告也指出, 由 APAP 所造成急性肝衰竭的病人身上, 同時也會併發肺臟毒性, 造成病人肺細胞的傷害, 增加肺臟衰竭的機率, 與本實驗結果相同, 而桂花萃取物之保護效果優於 rutin, 能降低 APAP 所導致肺臟氧化現象, 降低 TBARs 值達 LEKF 降低 %;MEKF 降低 %;HEKF 降低 % 在腎臟方面各組間並沒有顯著性的差異, 顯示腹腔注射 1.0 g APAP /kg B.W. 三小時下, 肝臟是最先受到氧化傷害的臟器, 並由本實驗結果證實, 不同劑量的桂花萃取物及其抗氧化指標成分 rutin, 確實能進入肝細胞內, 達到保護肝細胞的效果 ( 圖 4-2) 結 論 BALB/c 小鼠先以管灌餵食 75 % 乙醇桂花萃取物及抗氧化成分 rutin 連續 15 天, 確實能降低注射 APAP (1.0 g/kg B.W. ) 所造成肝臟損傷 桂花萃取物組能明顯降低 APAP 所導致 GOT 值的上升, 減少肝臟及肺臟脂質氧化現象, 以及肝臟組織空泡化之傷害現象 綜合以上結果顯示, 桂花萃取物及其抗氧化成分 rutin 先經管灌餵食 BALB/c 小鼠連續 15 天, 確實能夠降低 acetaminophen 藥物毒性傷害達護肝效用
12 25 Body Weight (g) Day LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 圖 4-1 桂花萃取物及 rutin 管餵食期間各組小鼠之體重變化 Figure 4-1. The body weight changes of female BALB/c mice treated with Kwei-Fah extract and rutin by gastric gavage consecutively for 15 days. LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
13 表 4-1 BALB/c 小鼠管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 臟器相對重量百分比 Table 4-1. The relative organ weight to body weight of oral administration Kwei-Fah extract in BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). Organ Relative Organ weight to body weight (%) Group Heart Liver Spleen Lung Kidney LEKF 0.56±0.03a 5.26±0.35a 0.51±0.09a 0.54±0.05a 1.20±0.02a MEKF 0.58±0.06a 5.89±0.35a 0.45±0.09a 0.54±0.05a 1.20±0.06a HEKF 0.62±0.10a 4.92±0.12a 0.49±0.08a 0.51±0.07a 1.15±0.02a LR 0.64±0.08a 5.08±0.37a 0.43±0.05a 0.51±0.06a 1.17±0.02a HR 0.63±0.16a 5.02±0.29a 0.49±0.12a 0.45±0.16a 1.15±0.14a PC 0.67±0.12a 5.19±0.55a 0.53±0.13a 0.51±0.03a 1.25±0.10a NC 0.59±0.08a 4.90±0.27a 0.48±0.11a 0.57±0.08a 1.21±0.02a LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
14 表 4-2 BALB/c 小鼠管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 血清 GOT GPT 之影響 Table 4-2. Effect of Kwei-Fah extract and rutin of serum GOT and GPT in BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). Group GOT (ULN) GPT (ULN) LEKF 0.59±0.29c 2.26±0.29ab MEKF 0.95±0.43bc 1.63±1.39ab HEKF 0.91±0.55bc 2.71±0.79a LR 1.19±0.30ab 2.62±1.14a HR 1.35±0.38ab 2.91±0.83a PC 1.70±0.39a 2.95±1.08a NC 1.00±0.50bc 1.00±0.47b LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
15 NC PC LEKF LR MEKF HR HEKF LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 100 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 800 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 1000 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 10 mg rutin/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 100 mg rutin/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 0.9% normal saline + i.p. APAP 1.0g/kg 0.9% normal saline + i.p 0.9% normal saline
16 圖 4-2 BALB/c 小鼠經管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 之肝臟病理切片觀察 Figure 4-2. Photographs of liver in all treated groups with Kwei-Fah extract and rutin in BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
17 NC PC LEKF LR MEKF HR HEKF LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 100 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 800 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 1000 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 10 mg rutin/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 100 mg rutin/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 0.9% normal saline + i.p. APAP 1.0g/kg 0.9% normal saline + i.p 0.9% normal saline
18 圖 4-3 BALB/c 小鼠經管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 之肺臟病理切片觀察 Figure 4-3. Photographs of lung in all treated groups with Kwei-Fah extract and rutin in BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
19 NC PC LEKF LR MEKF HR HEKF LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 100 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 800 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 1000 mg KFE/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 10 mg rutin/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 100 mg rutin/kg B.W. + i.p. APAP 1.0g/kg 0.9% normal saline + i.p. APAP 1.0g/kg 0.9% normal saline + i.p 0.9% normal saline
20 圖 4-4 BALB/c 小鼠經管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 之腎臟病理切片觀察 Figure 4-4. Photographs of kidney in all treated groups with Kwei-Fah extract and rutin in BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
21 0.4 TBARs (nmol/mg protein) ab ab ab ab ab a b 0 LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 圖 4-5 BALB/c 小鼠經管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 之肝臟組織 TBARs 值之影響 Figure 4-5. The effects of single oral administration of Kwei-Fah extract and rutin on the TBARs content in liver homogenate of BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
22 TBARs (nmol/mg protein) ab ab ab ab a a b 0 LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 圖 4-6 BALB/c 小鼠經管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 之肺臟組織 TBARs 值之影響 Figure 4-6. The effects of single oral administration of Kwei-Fah extract and rutin on the TBARs content in lung homogenate of BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
23 0.4 TBARs (nmol/mg protein) a a a a a a a 0 LEKF MEKF HEKF LR HR PC NC 圖 4-7 BALB/c 小鼠經管餵食桂花萃取物及 rutin 對腹腔內注射 APAP 之腎臟組織 TBARs 值之影響 Figure 4-7. The effects of single oral administration of Kwei-Fah extract and rutin on the TBARs content in kidney homogenate of BALB/c mice injected i.p. APAP (1.0 g/kg B.W.). LEKF: 100 mg KFE/kg B.W.; HEKF: 1000 mg KFE/kg B.W.; LR: 10 mg rutin/kg B.W.; HR: 100 mg rutin/kg B.W.; PC: Positive control; NC: Negative control
Microsoft Word - 誌 謝.doc
誌 謝 本 論 文 之 完 成, 首 先 感 謝 恩 師 洪 敏 元 及 洪 千 雅 教 授 於 二 年 研 究 所 生 涯 期 間 視 如 己 出 般 細 心 的 指 導 及 關 愛, 使 論 文 得 以 順 利 完 成 文 稿 初 成, 承 蒙 東 海 大 學 食 品 科 學 系 蘇 正 德 教 授 於 百 忙 之 中 詳 閱 學 生 之 初 稿, 並 給 予 釜 正 與 建 議, 使 本 論
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Key words: Qi-diffciency syndrome, Cyclophosphamide, Codonopsis pilosula, Shenlinbaizhu Powder, Biochemical study CTX CTX RT-PCR CTX
2002207202 CTX 1 2 CTX 10mg/ml 0.2ml/ /d,2d 1 2 RT-PCR 1 2 1 2 P>0.05) RT-PCR CTX CTX A study on symptom model induced by Cyclophosphamide in mice Effects of Codonopsis pilosula (Dangshen) and Shenlinbaizhu
标题
文学蓝皮书 ９ 网络文学 趋向主流化 酝酿新格局 摘 要 ２０１５ 年的网络文学 在中央重视 政府主导 民间先 行 资本发力等诸多因素联手推动下 呈现出借势发 展和强势进取的良好势头 网络小说创作 在虚构类 的玄幻与仙侠 写实类的历史与都市 都有好的和比 较好的力作佳构联袂而来 主流体制组建网络文学机 构 ＩＰ 热 愈演愈烈 都从不同的侧面和层面推动网 络文学进而做大做强 使之成为当代文学中最具成长
目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第 三 節 研 究 方 法... 2 第 二 章 溫 泉 的 歷 史... 3 第 三 章 溫 泉 法 律 與 分 布 第 一 節 溫 泉 的 法 律 / 定 義... 5 第 二 節
修 平 科 技 大 學 應 用 日 語 系 題 目 : 日 本 の 温 泉 と 台 湾 の 温 泉 指 導 教 師 : 古 瀨 和 彥 老 師 姓 名 : 袁 緣 姓 名 : 楊 錡 學 號 :BX99063 學 號 :BX99512 中 華 民 國 103 年 01 月 10 日 目 錄 第 一 章 緒 論 第 一 節 研 究 背 景 與 動 機... 2 第 二 節 研 究 目 的... 2 第
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抗 衰 老 食 疗 食 谱 第 十 一 章 老 年 营 养 保 健 第 一 节 老 年 人 注 意 保 肾 饮 水 注 意 : 人 体 内 许 多 有 毒 的 代 谢 产 物 主 要 经 肾 脏 排 泄 因 此, 保 持 一 定 的 饮 水 量 是 很 重 要 的, 每 日 饮 水 1500-2000 毫 升 为 宜 即 使 口 不 渴, 也 应 适 当 饮 水, 夏 日 或 汗 多 时, 应 增
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脱 发 症 208 医 院 李 雪 松 完 成 本 单 元 的 学 习 后, 您 应 该 了 解 : 如 何 评 估 具 有 脱 发 症 状 的 患 者 如 何 辨 别 常 见 头 发 脱 失 疾 病, 该 做 哪 些 检 查 如 何 在 初 级 保 健 阶 段 治 疗 常 见 头 发 脱 失 疾 病, 以 及 何 时 转 诊 给 专 科 医 生 药 物 治 疗 脱 发 的 常 见 副 作 用 以
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- 14 - Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 料 ), 山 西 皇 城 相 府 药 业 有 限 公 司, 批 号 20111003 ( 人 口 服 推 荐 剂 量 为 每 日 3 次, 每 次 4 粒, 成 人 体 质 量 按 60
Drug Evaluation Research 第 36 卷 第 1 期 2013 年 2 月 - 13 - 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治 疗 作 用 研 究 * 刘 聪, 岳 永 花, 郝 旭 亮 山 西 省 中 医 药 研 究 院, 山 西 太 原 030012 摘 要 : 目 的 探 讨 柴 青 消 癖 胶 囊 对 乳 腺 增 生 模 型 大 鼠 的 治
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模 块 三 饲 料 及 其 加 工 利 用 模 块 目 标 了 解 饲 料 的 有 关 概 念 及 国 际 饲 料 分 类 中 八 大 类 饲 料 的 分 类 标 准 ; 掌 握 青 饲 料 粗 饲 料 青 贮 饲 料 能 量 饲 料 蛋 白 质 饲 料 矿 物 质 饲 料 饲 料 添 加 剂 的 营 养 特 性 和 利 用 特 点 ; 掌 握 各 类 饲 料 中 常 用 饲 料 原 料 的 种 类
中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 1339 非 酒 精 性 脂 肪 性 肝 病 (nonalcoholic fatty liver disease,nafld) 是 一 种 与 胰 岛 素 抵 抗 遗
1338 中 草 药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46 卷 第 9 期 2015 年 5 月 九 味 肝 泰 胶 囊 对 高 脂 饮 食 诱 导 大 鼠 非 酒 精 性 脂 肪 肝 的 治 疗 作 用 陈 菲 1 2,, 艾 国 3, 盛 柳 青 1, 麻 佳 蕾 1, 黄 正 明 1. 金 华 职 业 技 术 学 院 医 学 院, 浙 江 金 华
健康食品查驗登記許可資料摘要
健 康 食 品 查 驗 登 記 許 可 資 料 摘 要 許 可 證 字 號 : 衛 署 健 食 字 第 A00197 號 1. 品 名 : 天 地 合 補 含 鐵 四 物 飲 2. 申 請 商 號 : 佳 格 食 品 股 份 有 限 公 司 電 話 :02-27092323 地 址 : 台 北 市 仁 愛 路 三 段 136 號 5 樓 3. 原 料 成 分 : 四 物 萃 取 液 ( 水 當 歸
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第 3 章 孵 化 技 术 本 章 按 照 种 蛋 孵 化 的 程 序, 介 绍 了 蛋 的 构 造 与 形 成 种 蛋 的 管 理 家 禽 的 胚 胎 发 育 人 工 孵 化 的 条 件 和 控 制 孵 化 机 的 构 造 与 管 理 孵 化 效 果 的 检 查 与 分 析 以 及 初 生 雏 的 处 理 等 内 容 对 种 蛋 的 选 择 与 消 毒 孵 化 条 件 的 标 准 与 控 制 孵
吃 油 中 寻 健 康 随 着 社 会 的 进 步 和 人 们 生 活 的 提 高, 向 吃 油 要 健 康 是 广 大 群 众 十 分 关 心 的 焦 点 吃 什 么 植 物 油 好? 橄 榄 油 是 否 最 好 的 食 用 油? 转 基 因 原 料 制 成 的 食 用 油 安 全 吗? 人 体
无 锡 粮 食 科 技 信 息 总 第 二 十 八 期 无 锡 市 粮 食 局 2015 年 6 月 1 吃 油 中 寻 健 康 随 着 社 会 的 进 步 和 人 们 生 活 的 提 高, 向 吃 油 要 健 康 是 广 大 群 众 十 分 关 心 的 焦 点 吃 什 么 植 物 油 好? 橄 榄 油 是 否 最 好 的 食 用 油? 转 基 因 原 料 制 成 的 食 用 油 安 全 吗? 人
性病临床诊疗指南（全）.doc
Guidelines for Diagnosis and Treatment of Sexually Transmitted Diseases National Center for STD Control, China CDC 1 2 / 3 4 5 6 1991 2000 8 1996 2004 1 1 HIV HIV 7 HIV HIV 1991 2000 8 1996 2004 1 1 HIV
出國報告(出國類別：研習)
出 國 報 告 ( 出 國 類 別 : 實 習 ) 赴 日 本 北 海 道 大 學 研 習 家 禽 流 行 性 感 冒 野 鳥 跨 國 監 測 網 絡 高 病 原 性 (HPAI) 病 毒 特 性 分 析 及 進 行 研 究 現 況 交 流 服 務 機 關 : 行 政 院 農 業 委 員 會 家 畜 衛 生 試 驗 所 姓 名 職 稱 : 陳 麗 璇 助 理 研 究 員 李 婉 甄 助 理 研 究
水、土壤污染
[email protected] (04)23302101 412 1940 10-90 10-70 1-40 20-80 20-90 20-80 1-10 0-5 % 61973 1981 1994 (g/kg) 1973 1981 1994 11.3 1.6 0.5 0.8 1.88 0.80 17.8 11.7 0.5 1.7 0.30 0.33 20.3 7.4 14.9 5.3
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老 年 健 康 檢 查 常 見 異 常 之 簡 介 老 年 醫 學 部 陸 鳳 屏 醫 師 2008.8.23 今 日 內 容 視 聽 力 異 常 肥 胖 三 高 : 高 血 壓 高 血 糖 高 血 脂 尿 酸 與 痛 風 其 他 健 檢 常 見 異 常 視 聽 力 異 常 為 何 要 篩 檢 視 力 及 聽 力? 視 聽 力 異 常 在 老 年 人 相 當 常 見, 但 不 是 正 常 老 化 過
中華民國第51屆中小學科學展覽會
中 華 民 國 第 53 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 國 中 組 化 學 科 030217 精 油 如 解 液, 飛 蚊 莫 摧 殘 - 真 薰 傳 學 校 名 稱 : 臺 中 市 立 居 仁 國 民 中 學 作 者 : 指 導 老 師 : 國 二 許 哲 睿 國 二 黃 冠 綸 王 翠 妃 陳 惠 如 國 二 黃 靖 惟 關 鍵 詞 : 精 油 白 線 斑 蚊 壹 摘
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7 12 Vol. 7 No. 12 2016 12 Journal of Food Safety and Quality Dec., 2016 黄远英 *, 汪玉芳 (, 510663) 摘要 : 目的 方法 3, 0.3 0.6 1.2 g/kg BW 30 d 结果 (P
21 13 D / 2 10 ig ig 10 d 1. 0 g kg /2 2 β- 5 g kg g kg mg kg - 1 ig ig 24 h 5% 1 2% CMC-Na 2. 5 ml 30
21 13 1 2 1* 2 1. 430065 2. 445000 20 10 5 g kg - 1 5 mg kg - 1 ig 10 d ig HE 1 TFF1 TFF1 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 01 P < 0. 05 R285. 5 doi 10. 13422 /j. cnki. syfjx. 2015130100 A 1005-9903 2015 13-0100-05
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第 3 章 肉 用 牛 生 产 技 术 本 章 提 要 本 章 主 要 介 绍 了 肉 用 牛 品 种, 肉 用 牛 的 体 型 外 貌 特 征 及 选 择 方 法, 繁 殖 母 牛 的 饲 养 管 理 技 术, 重 点 介 绍 了 肉 用 牛 的 肥 育 技 术 学 完 本 章, 要 求 了 解 优 良 肉 用 牛 品 种 特 征 和 育 肥 牛 的 选 择 要 求, 掌 握 肉 用 牛 生 产
《米开朗琪罗传》
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奶牛饲养管理
( 成 海 荣 编 ) 奶 牛 饲 养 管 理 奶 牛 的 饲 养 管 理 是 指 对 奶 牛 生 产 的 全 过 程 进 行 饲 养 管 理, 包 括 从 犊 牛 到 成 年 牛 从 交 配 开 始, 经 过 妊 娠 产 犊 直 到 再 次 交 配 ; 从 产 奶 开 始 经 过 干 奶 直 至 再 次 产 奶 的 整 个 过 程 奶 牛 产 奶 量 的 高 底, 主 要 由 产 奶 遗 传 性
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知 识 目 标 : 了 解 药 物 鉴 别 的 意 义 学 习 目 标 理 解 药 物 鉴 别 试 验 的 项 目 掌 握 药 物 鉴 别 试 验 的 常 用 方 法 能 力 目 标 : 能 熟 练 应 用 药 物 鉴 别 的 常 用 方 法 对 药 物 进 行 鉴 别 第 一 节 概 述 药 物 的 鉴 别 试 验 是 根 据 药 物 的 组 成 分 子 结 构 和 理 化 性 质, 采 用 化
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加 工 食 品 安 全 - 食 品 添 加 物 黎 明 國 小 李 叔 蓮 營 養 師 2012/3/1 1 NEWS NEWS 麵 類 製 品 包 子 及 饅 頭 抽 驗 結 果 2011/10/03 臺 北 市 政 府 衛 生 局 至 各 傳 統 市 場 麵 攤 ( 店 ) 製 麵 店 包 子 饅 頭 製 售 店 超 商 等 地 點 抽 驗 麵 類 製 品 ( 陽 春 麵 拉 麵 油 麵 麵 線
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附件四：作品送展表（夾於作品說明書第一頁，請勿裝訂）
嘉 義 市 第 31 屆 中 小 學 科 學 展 覽 會 作 品 說 明 書 科 別 : 生 活 與 應 用 科 學 科 組 別 : 國 小 組 作 品 名 稱 : 果 真 有 酵 - 水 果 酵 素 的 應 用 關 鍵 詞 : 水 果 酵 素 環 保 編 號 : 1 摘 要 本 研 究 主 要 的 目 的 是 蒐 集 常 見 的 水 果, 利 用 多 餘 的 果 皮 和 剩 餘 的 果 肉 製 造
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閱 讀 (1) 楊 桃 毒 素 過 去 有 許 多 糖 尿 病 或 高 血 壓 患 者 吃 過 新 鮮 楊 桃 或 楊 桃 汁 後, 出 現 嘔 吐 頭 暈 意 識 不 清 等 症 狀, 研 判 因 為 他 們 腎 功 能 不 佳, 無 法 排 出 楊 桃 中 不 明 的 中 毒 成 分 楊 桃 中 的 不 明 成 分 可 能 導 致 部 分 特 殊 體 質 的 尿 毒 症 病 患, 出 現 神 經
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摘要 本實驗依據衛生署公佈之 護肝功能評估方法 ( 針對化學性肝損傷 ) 功能評估規範進行實驗, 針對化學性肝損傷進行護肝功能之評估 本評估方法之進行主要是以四氯化碳 (CCl 4 ) 誘導大白鼠慢性肝損傷的實驗模式, 探討不同劑量試驗樣品之處理對於大白鼠慢性肝損傷之影響 測試物為財翰公司提供之人蔘萃取物 以雄性 SD 大白鼠 (200-250 克 ) 為實驗動物, 每組 12 隻, 共分 6 組
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神 奇 的 滅 孑 師 太 ~~ 探 討 日 常 生 活 常 用 水 溶 液 及 植 物 對 於 消 滅 孑 孓 之 成 效 壹 研 究 動 機 春 眠 不 覺 曉, 處 處 蚊 子 咬, 夜 來 巴 掌 聲, 蚊 子 死 多 少? 夏 天 即 將 到 來, 蚊 子 的 惡 夢 一 直 困 擾 著 我 們 了, 班 上 同 學 舉 起 手 腳 指 著 一 個 一 個 紅 豆 冰 咒 念, 真 是 令
instillation therapy combined with Western medicine can reduce the levels of ALT, TBA, ALP, TBIL, DBIL and GGT, and improve the anti-cmv-igm negative
在 线 投 稿 : http://www.baishideng.com/wcjd/ch/index.aspx 帮 助 平 台 : http://www.wjgnet.com/esps/helpdesk.aspx DOI: 10.11569/wcjd.v23.i28.4568 世 界 华 人 消 化 杂 志 2015 年 10 月 8 日 ; 23(28): 4568-4573 ISSN 1009-3079
研 訂 鑿 井 技 術 參 考 手 冊 及 行 政 管 理 作 業 要 點 ( 草 案 ) 第 二 年 度 成 果 報 告 書 及 總 報 告 書 初 稿 - 附 冊 一 地 下 水 水 井 鑿 井 行 政 管 理 作 業 要 點 ( 草 案 ) Guideline for Administrati
研 訂 鑿 井 技 術 參 考 手 冊 及 行 政 管 理 作 業 要 點 ( 草 案 ) 第 二 年 度 成 果 報 告 書 及 總 報 告 書 初 稿 - 附 冊 一 地 下 水 水 井 鑿 井 行 政 管 理 作 業 要 點 ( 草 案 ) Guideline for Administration of Groundwater Well Construction(Draft) 經 濟 部 水
鼠 疫（Plague）
鼠 疫 (Plague) 一 疾 病 概 述 (Disease description) 存 在 囓 齒 類 及 其 跳 蚤 的 一 種 人 畜 共 通 傳 染 病, 並 藉 跳 蚤 傳 染 給 各 種 動 物 及 人 類, 其 最 初 反 應 為 跳 蚤 咬 傷 部 位 臨 近 的 淋 巴 腺 發 炎, 這 就 是 腺 鼠 疫, 經 常 發 生 於 鼠 蹊 部, 少 發 生 於 腋 下 或 頸 部,
禽 病 治 疗 过 程 中 的 用 药 误 区 及 防 治 对 策 一 用 药 误 区 : 目 前, 在 禽 类 疾 病 的 治 疗 过 程 中, 药 物 的 应 用 经 常 存 在 以 下 几 个 方 面 的 误 区 和 不 足 : 1 不 注 意 给 药 的 时 间 : 无 论 什 么 药 物, 因 固 定 给 药 模 式 或 用 药 习 惯, 不 是 在 料 前 喂, 就 是 在 料 后 喂
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理 例 類 CNPH-93-08 行 93 年 1 1 93 年 12 31 參 行 94 年 2 27 度 率 力 85 > 2.0 mg/dl 度 度 HBABA [2-(4 -hydroxybenzene azo) benzoic acid] 510 nm 度 (4 g/dl) 度 留 力 類 Piperacillin 類 Cefoperazone 量不 度 (1~30 mg/dl) 3 率
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核 电 工 程 培 训 与 人 才 培 养 年 会 暨 成 立 大 会 核 电 工 程 培 训 与 人 才 培 养 年 会 暨 成 立 大 会 会 议 指 南 主 办 : 承 办 : 中 广 核 工 程 有 限 公 司 中 国 深 圳 大 亚 湾 二 〇 一 三 年 十 一 月 核 电 工 程 培 训 与 人 才 培 养 年 会 暨 成 立 大 会 欢 迎 您 参 加 本 届 核 电 工 程 培 训
2 2010-2020 2010 83 5000 1.7
2010 7 2 3 4 5 6 6 6 7 8 8 HR 10 11 1 2 2010-2020 2010 83 5000 1.7 53.2 2009 7.3 15.90% 6 72.22% 81.10% 31.56 81.80% 2009 55096 40642 6 5054 4620 2009 518 3 29.35 2009 952 130 250 2009 1.51 9514 63% 1-6
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无 忧 HR 信 息 参 考 无 忧 HR 信 息 参 考 由 前 程 无 忧 薪 酬 报 告 部 门 为 薪 酬 报 告 会 员 倾 力 奉 献, 在 每 月 月 初 以 电 子 邮 件 形 式 发 送 给 各 位 会 员 无 忧 HR 信 息 参 考 报 汇 集 和 整 合 各 种 HR 信 息 渠 道 有 用 资 讯, 为 会 员 浏 览 HR 信 息 把 握 HR 发 展 动 态 学 习 HR
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學 習 目 標 第 二 章 飲 食 與 治 療 讀 完 本 章 後, 您 應 能 夠 : 1. 了 解 治 療 飲 食 之 目 標 及 基 礎 2. 了 解 治 療 飲 食 的 分 類 3. 了 解 各 種 治 療 飲 食 的 目 的 及 適 用 對 象 4. 了 解 各 種 治 療 飲 食 的 一 般 飲 食 原 則 第 一 節 治 療 飲 食 與 正 常 飲 食 本 章 大 綱 壹 治 療 飲
校园之星
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中 国 农 学 通 报 2014,30(13):225-229 hinese gricultural Science ulletin 滴 灌 加 工 番 茄 测 土 配 方 施 肥 效 果 分 析 1,2 张 晓 宏, 王 著 龙 3 1, 盛 建 东 ( 1 新 疆 农 业 大 学 草 业 与 环 境 科 学 学 院, 乌 鲁 木 齐 830052; 2 新 疆 农 业 职 业 技 术 学 院 生
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33 3 OOD & MACHINERY 217 3 食品与机械 Vol.33No.3 Mar.217 DOI:1.13652/j.issn.13-5788.217.3.29 Extractionprocessoptimizationandanticanceractivityofmaizeyelowpigment YU Hui LIU Mei-jia LIU Jian-li CAO Xiang-yu
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第 六 章 灰 分 及 几 种 重 要 矿 物 元 素 含 量 的 测 定 第 一 节 灰 分 的 测 定 一 概 述 食 品 的 组 成 十 分 复 杂, 除 含 有 大 量 有 机 物 质 外, 还 含 有 丰 富 的 无 机 成 分, 这 些 无 机 成 分 包 括 人 体 必 须 的 无 机 盐 ( 或 称 矿 物 质 ), 其 中 含 量 较 多 的 有 Ca Mg K Na S P C1
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理 類 CN9626 行 96 年 1 1 96 年 12 31 參 行 97 年 2 28 1 行 離 Lactic acid bacteria 金 Staphylococcus aureus 行 離 159 API 50 CHL 行 離 159 不 度 了 行 H 2 O 2 1 Lactobacillus plantarum 了 識 益 益 來 不 利 來 益 切 了 流 Joerger 2003
北京市基本医疗保险政策解答
首 都 经 济 贸 易 大 学 全 日 制 本 科 学 生 学 籍 管 理 规 定 首 经 贸 政 发 2013 60 号 第 一 章 总 则 第 一 条 根 据 教 育 部 普 通 高 等 学 校 学 生 管 理 规 定 和 首 都 经 济 贸 易 大 学 学 生 管 理 规 定, 结 合 我 校 实 际 情 况, 制 定 本 规 定 第 二 条 本 科 基 本 修 业 年 限 为 四 年, 实
綜 焚化爐爐床維修感電職災案例
從 事 栽 種 盆 栽 作 業 時 發 生 勞 工 羅 OO 墜 落 職 業 災 害 案 (93)0930060431 一 行 業 分 類 : 園 藝 服 務 業 (0133) 二 災 害 類 型 : 墜 落 (01) 三 媒 介 物 : 升 降 機 (214) 四 罹 災 情 形 : 死 亡 1 人 五 災 害 發 生 經 過 : 據 ooo 稱 : 當 時 ooo 在 二 樓 頂 上 先 按 開
5-8 5 d d d 0.155 0.08 0.1 X k, X1 G X k-x 1 d = G-1 d( X k d 0.5ml/20g LD50 8 10 6 9 10 6 6 7 10 7 2 4 6 7 5 3 1 2 1 1 7 8 0 2
LD50 LD50 LD50 1. 2. 3. Kärbar LD50 Bliss Bliss 1. 2. 3. Pn 0 Pm 100 Pn < 20% Pm > 80% Pn > 20% Pm < 80% 1ml Dm (Dn) 2 3 Pm = 100 % Pn = 0% 1 5-8 5 d d d 0.155 0.08 0.1 X k, X1 G X k-x 1 d = G-1 d( X k
1269 malondialdehyde (MDA) were significantly decreased, while oxygen partial pressure (PaO 2 ), ph value, superoxide dismutase (SOD) and glutathione
1268 维 生 素 A 联 合 牛 肺 表 面 活 性 物 质 治 疗 新 生 儿 呼 吸 窘 迫 综 合 征 的 临 床 研 究 朱 琼 1, 陈 小 利 2, 叶 华 2 1. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 儿 科, 重 庆 401520 2. 重 庆 市 合 川 区 妇 幼 保 健 计 划 生 育 服 务 中 心 内 儿 科, 重 庆 401520
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高 瞻 一 班 專 題 研 究 報 告 作 品 名 稱 : 果 真 好, 柑 係 金 A? 水 果 養 分 測 定 ( 柑 橘 類 果 汁 之 養 份 測 定 ) 關 鍵 詞 : 水 果 養 分 健 康 作 者 : 葉 淳 高 二 3 班 張 伯 丞 高 二 3 班 楊 祐 銓 高 二 3 班 何 仁 傑 高 二 3 班 指 導 老 師 : 王 姍 佩 蔡 欣 育 1 果 真 好, 柑 係 金 A?
? 這 全 都 是 市 政 府 提 供 給 我 的 資 料 低 底 盤 公 車 計 畫 96 年 預 算 新 台 幣 4,500 萬 元 97 年 預 算 新 台 幣 1 億 6,500 萬 元 98 年 預 算 新 台 幣 3 億 2,300 萬 元, 共 有 307 台 低 底 盤 公 車,99
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98年度即測即評學科測試與即測即評即發證技術士技能檢定簡章
簡 章 103 年 度 即 測 即 評 學 科 測 試 與 即 測 即 評 及 發 證 技 術 士 技 能 檢 定 簡 章 報 名 書 表 勘 誤 表 日 期 103 年 6 月 12 日 封 面 封 面 10302A 10303A 報 檢 人 重 點 摘 要 提 示 1 6. 大 陸 地 區 人 民 ( 大 陸 配 偶 大 陸 學 位 生 ( 陸 生 就 學 ) 及 專 案 許 可 取 得 長 期