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1 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 1 国 家 863 项 目 进 展 害 虫 抗 药 性 治 理 策 略 多 位 点 杀 虫 毒 素 的 研 究 刘 波 朱 育 菁 阮 传 清 林 抗 美 冒 乃 和 ( 福 建 省 农 科 院 生 物 技 术 中 心 农 业 环 保 技 术 研 究 室, 福 州 353) 摘 要 : 害 虫 对 杀 虫 剂 产 生 抗 药 性, 降 低 了 农 药 使 用 效 率, 增 大 了 农 药 用 量, 污 染 了 环 境 害 虫 抗 药 性 可 分 为 单 一 抗 性 多 重 抗 性 交 互 抗 性 害 虫 抗 药 性 由 遗 传 因 素 生 态 因 素 和 操 作 因 素 决 定, 三 种 因 素 作 用 不 当 都 能 引 起 害 虫 抗 性 的 发 生 农 药 有 效 成 分 作 用 于 害 虫 的 特 定 位 点, 害 虫 对 农 药 抗 药 性 就 是 克 服 农 药 位 点 作 用, 使 之 失 效 钝 化, 保 持 农 药 作 用 位 点 敏 感 性 是 减 缓 害 虫 抗 药 性 的 有 效 方 法 每 一 种 农 药 对 害 虫 都 有 一 个 主 要 作 用 位 点, 每 一 种 害 虫 都 存 在 多 个 农 药 作 用 位 点 多 位 点 杀 虫 毒 素 的 研 究 是 克 服 害 虫 抗 药 性 的 有 效 途 径 将 Bt 的 杀 虫 毒 素 进 行 酶 切 改 造, 形 成 带 末 端 氨 基 的 原 毒 素, 将 阿 维 菌 素 的 羟 基 进 行 激 活 衍 生 化, 形 成 带 羧 基 的 杀 虫 毒 素 衍 生 物, 最 后 利 用 氨 基 - 羧 基 偶 联 剂 (EDC) 进 行 藕 合, 实 现 两 种 生 物 毒 素 的 结 构 改 造 和 生 化 结 合 BtA 解 决 了 生 物 农 药 杀 虫 谱 窄 和 杀 虫 速 率 慢 的 弱 点 关 键 词 : 抗 药 性 多 位 点 杀 虫 毒 素 BtA Control strategy of insect pest resistance to insecticides --research on multiple toxins insecticide LIU Bo, ZHU Yujing, RUAN Chuanqing, LIN Kangmei (Laboratory of Agricultural Environment Protection, Biotechnology Center, FAAS, Fuzhou 353, China) Abstract: The present paper dealt with control strategy of insect pest resistance to insecticides: research on multiple toxins insecticide. The development and mechanism of pest resistance to insecticides were discussed. The multiple toxins insecticide was introduced to overcome pest resistances to insecticides. Conjugation of δ-endotoxin from Bacillus thuringiensis with abamectin produced by Streptomyces avermitilis was carried out to form a new type of biocide BtA based on "Germany-China Scientific Cooperation" research for control of agricultural insect pest. The strategy for biochemical linkage was designed as conjugating an amino group in B.t. protoxin with a carboxyl group in carboxylated abamectin under the treatment of conjugator EDC [1-Ethyl-3- (3-dime- thylaminopropyl carbodiimide Hydrochloride)]. The formation of B.t. protoxin was processed by solubilizing B.t. crystal in 25 mm dithiothreitol (DTT) at 37 C for 2 h. The carboxylated abamectin was formed by carboxylating the NaH-activated abamectin with 1 mg/ml butyric anhydride at 111 C in a water circumfluent condensation device for 2 h. The conjugating reaction system consisted of 5 mg/ml B.t. protoxin, 1 mg/ml carboxylated abamectin and mg/ml EDC was successfully conducted at room temperature for 24 h. The significant differences were found among the pure abamectin, the carboxylated abamectin and the conjugated BtA by means of UV-photo absorptions recorded in the characterized points of 354, 438, 518, 6 nm wavelength (P<.1). LT 5 of the conjugated BtA to the 3 rd instar larva of Plutella xylostella (L.) (Lep., Plutellidae) was ug a.i./ml, about 62 and 76% of that caused by the B.t. protoxin and the caxboxylated abamectin, respectively. The conjugated BtA caused 87.14% mortalities in larva P. xylostella, 93.75% in adult Myzus persicae (Sulzer) (Hom., Aphididae) and 89.33% in adult Phyllotreta vittata Fabricius (Col., Chrysomelidae) as compared to 48.33% by the B.t. crystal only in P. xylostella. The symptoms caused by conjugated BtA in the 3 rd instar P. xylostella were black color in the head part and white-yellow in the abdomen of dead larvae, which differed from the black color or the white-yellow all along the body caused by either the B.t. crystal or the abamectin, respectively. It was concluded that the conjugated BtA biocide had broader host spectrum and faster killing speed than B.t. crystal or abamectin functioned alone in control of the agricultural pests. Key word:pest resistance; Multiple-toxin biocide; BtA 作 者 简 介 : 刘 波 (1957-), 男, 研 究 员, 博 士, 从 事 生 物 技 术 生 物 防 治 网 络 测 报 昆 虫 生 理 生 态

2 2 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 1 害 虫 抗 药 性 的 产 生 农 作 物 生 长 过 程 受 到 许 多 害 虫 的 危 害, 农 药 的 使 用 仍 然 是 防 治 害 虫 的 重 要 手 段 [1] 在 害 虫 防 治 过 程, 致 死 浓 度 的 农 药 施 用, 使 95% 以 上 的 害 虫 得 到 控 制, 由 于 害 虫 个 体 差 异, 对 农 药 敏 感 的 害 虫 被 杀 死, 对 农 药 具 有 耐 受 能 力 的 害 虫 生 存 下 来, 产 生 了 对 农 药 的 适 应 性, 害 虫 对 农 药 的 适 应 性 导 致 害 虫 对 农 药 的 抗 药 性 农 药 的 施 用 相 当 于 人 为 地 对 害 虫 种 群 施 加 一 种 环 境 选 择 压 力, 不 断 地 选 择 那 些 抗 药 性 强 的 害 虫, 于 是 随 着 农 药 施 用 次 数 的 增 加 害 虫 对 农 药 的 抗 药 性 不 断 加 强 [2] 据 报 道, 小 菜 蛾 (Plutella xylostella ) 对 氯 氢 菊 酯 的 抗 性 达 1 倍 (Shelton et al 1996), 对 阿 维 菌 素 的 抗 性 达 4 倍 (Iqbal and Wright 1997), 美 国 康 乃 尔 大 学 学 者 用 Bt-Cry1C 转 基 因 花 菜 饲 养 小 菜 蛾,26 代 后 对 Bt-Cry1C 转 基 因 花 菜 的 抗 性 达 124 倍 [3] 2 害 虫 抗 药 性 的 发 展 198 年 有 428 种 节 肢 动 物 对 一 种 或 一 种 以 上 杀 虫 剂 或 杀 螨 剂 有 抗 药 性, 其 中 6% 以 上 与 农 业 活 动 密 切 相 关 在 农 作 物 的 植 物 病 原 体 中, 已 知 15 种 对 农 药 有 抗 药 性 估 计 有 5 种 杂 草 对 除 草 剂 有 抗 药 性 具 抗 药 性 的 428 种 节 肢 动 物 中, 仅 有 2 种 具 有 经 济 利 用 价 值, 因 而 节 肢 动 物 抗 药 性 不 仅 危 害 农 业 生 产, 而 且 影 响 生 态 平 衡 随 着 新 的 杀 虫 剂 使 用 量 不 断 增 加 和 使 用 范 围 不 断 扩 大, 越 来 越 多 的 害 虫 对 农 药 产 生 了 抗 药 性 1938 年 报 导 杀 虫 剂 抗 药 性 的 案 例 数 目 为 7 种, 1948 为 14 种,1956 为 69 种,197 为 224 种,1976 为 364 种,198 为 428 种,1984 为 447 种,7-8 年 代 害 虫 抗 药 性 增 长 最 快 [4] 以 上 数 据 说 明 了 在 世 界 范 围 内 害 虫 对 杀 虫 剂 产 生 抗 药 性 的 严 重 性 当 新 的 农 药, 特 别 是 杀 虫 剂 被 发 现 被 使 用, 害 虫 就 会 产 生 新 的 抗 药 性, 对 付 同 样 规 模 虫 害 就 必 须 增 大 农 药 用 量 对 于 不 同 农 药 而 言, 加 大 到 两 倍 用 量 才 能 达 到 原 效 果 所 需 时 间 不 同, 时 间 短 代 表 害 虫 产 生 抗 药 性 快 依 使 用 新 农 药 品 种 先 后 为 序, 示 出 必 须 加 大 两 倍 用 量 才 能 达 到 同 样 除 虫 效 果 所 需 时 间 ( 表 1) 表 中 数 据 说 明, 引 进 农 药 品 种 越 迟 此 时 间 越 短 [4] 害 虫 越 来 越 容 易 产 生 抗 药 性, 似 乎 它 们 的 抗 药 能 力 已 经 训 练 有 素 了 表 1 两 倍 用 量 达 同 样 效 果 所 需 时 间 杀 虫 剂 种 类 加 大 农 药 两 倍 用 量 平 均 所 须 时 间 ( 年 ) 滴 滴 涕 / 甲 氧 滴 滴 涕 6.3 林 丹 / 狄 氏 剂 5. 有 机 磷 4. 氨 基 甲 酸 酯 2.5 合 成 除 虫 菊 酯 2. [5] 3 害 虫 抗 药 性 的 类 型 害 虫 抗 药 性 可 分 为 单 一 抗 性 多 重 抗 性 交 互 抗 性 单 一 抗 性 指 害 虫 对 一 种 农 药 产 生 抗 性, 多 重 抗 性 指 害 虫 对 多 种 农 药 产 生 抗 性, 交 互 抗 性 指 害 虫 因 对 某 农 药 产 生 抗 性 而 增 强 对 另 一 种 农 药 的 抗 性 如 害 虫 对 滴 滴 涕 和 拟 除 虫 菊 酯 产 生 抗 药 性, 所 以 曾 估 计 到 对 广 泛 使 用 滴 滴 涕 所 产 生 的 抗 药 性, 同 样 也 能 使 后 来 合 成 的 拟 除 虫 菊 酯 失 效, 这 是 因 为 许 多 害 虫 存 在 着 抗 性 基 因, 对 各 类 农 药 的 抗 性 表 达 趋 同, 使 害 虫 对 一 类 或 几 类 农 药 的 交 叉 和 多 重 抗 药 性 现 象 越 来 越 多, 降 低 了 农 药 使 用 效 率 [5] 4 害 虫 抗 药 性 的 机 理 害 虫 抗 药 性 由 遗 传 因 素 生 态 因 素 和 操 作 因 素 决 定 遗 传 因 素 对 害 虫 抗 药 性 的 作 用 表 现 为 代 谢 抗 性 和 靶 标 抗 性, 前 者 作 用 于 酯 酶 谷 胱 甘 肽 S- 转 移 酶 P45 基 因 等, 后 者 作 用 于 乙 酰 胆 碱 酯 酶 钠 通 道 γ- 氨 基 丁 酸 受 体 氯 离 子 通 道 等 生 态 因 素 对 害 虫 抗 药 性 的 作 用 表 现 为 害 虫 时 空 种 群 异 质 性, 包 括 生 态 抵 抗 力 生 态 嗜 好 性 生 态 迁 移 力 等 操 作 因 素 对 害 虫 抗 药 性 的 作 用 表 现 为 农 药 的 施 用 方 法 施 用 浓 度 施 用 频 次 施 用 品 种 等 三 种 因 素 作 用 不 当 都 能 引 起 害 虫 抗 性 的 发 生 5 害 虫 抗 药 性 的 位 点 农 药 对 害 虫 的 作 用 可 分 为 胃 毒 触 杀 内 吸 熏 蒸 等 类 型, 无 论 那 种 类 型, 都 是 农 药 的 有 效 成 分 作 用 于 害 虫 的 特 定 位 点, 如 Bt 的 伴 胞 晶 体 作 用 于 害 虫 中 肠 上 皮 细 胞 进 而 达 到 杀 虫 效 果 阿 维 菌 素 是 十 六 员 环 内 酯 衍 生 物, 通 过 抑 制 Y 氨 基 丁 酸 (GABA) 受 体, 从 而 使 神 经 传 导 受 阻 来 达 到 的 杀 虫 效 果 害 虫 对 农 药 抗 药 性 就 是 克 服 农 药 位 点 作 用, 使 之 失 效 钝 化 [2] 6 害 虫 抗 药 性 的 克 服 害 虫 抗 药 性 的 克 服 实 质 上 是 使 农 药 作 用 位 点 保 持 足 够 的 敏 感 性, 在 应 用 上, 农 药 轮 换 施 用 农 药 混 配 施 用 增 加 农 药 对 害 虫 的 接 触 面 积 培 育 害 虫 的 敏 感 品 系 增 加 生 态 多 样 性 以 增 加 害 虫 的 多 样 性 等 等, 都 是 保 持 农 药 作 用 位 点 敏 感 性, 减 缓 害 虫 抗 药 性 的 有 效 方 法 [2] 7 多 位 点 杀 虫 毒 素 的 研 究 每 一 种 农 药 对 害 虫 都 有 一 个 主 要 作 用 位 点, 每 一 种 害 虫 都 存 在 多 个 农 药 作 用 位 点 目 前 农 药 大 多 数 为 单 剂, 即 单 一 的 作 用 位 点, 害 虫 在 生 长 过 程 对 单 一 作 用 位 点 的 克 服 比 多 个 作 用 位 点 容 易 理 论 上 讲, 如 果 害 虫 对 单 一 农 药 ( 一 个 位 点 ) 抗 性 产 生 的 时 间 为 5 年, 那 么 害 虫 对 两 个 作 用 位 点 的 复 合 农 药 抗 性 产 生 时 间 为 25 年 农 药 复 合 对 于 延 缓 害 虫 的 抗 药 性 具 有 重 要 意 义 两 个 以 上 作 用 位 点 的 农 药 称 之 为 多 位 点 杀 虫 毒 素, 多 位 点 杀 虫 毒 素 的 研 究 是 克 服 害 虫 抗 药 性 的 有 效 途 径 形 成 多 位 点 杀 虫 毒 素 方 法 有 化 合 藕 合 混 合 [2] 化 合 是 指 两 种 物 质 生 成 一 种 物 质 的 过 程, 产 生 了 不 同 于 参 与 物 的 新 物 质 特 性, 使 得 作 用 位 点 发 生 变 化, 如 对 N- 甲 基 氨 基 甲 酸 酯 的 高 效 高 毒 化 合 物 的 N 原 子 上 引 入 含 硫 基 团, 产 生 丁 硫 克 百 威 等, 结 果 既 保 留 了 母 体 化 合 物 对 害 虫 高 效 的 特 点, 又 降 低 了 对 哺 乳 动 物 的 毒 性 藕 合 是 两 种 物 质 通 过 介 质 结 合, 生 成 一 种 新 的 物 质 联 合 体 的 过 程, 同 时 保 持 着 参 与 物 各 自 固 有 的 特 性, 产 生 多 个 作 用 位 点 藕 合 技 术 包 括 了 物 理 藕 合 (physical conjugation) 和 化 学 藕 合 (chemical conjugation), 利 用 物 理 介 质 ( 如 轻 质 碳 酸

3 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 3 钙 ) 带 电 荷 等 物 理 特 性 吸 附 毒 素, 定 义 为 物 理 藕 合 (Kostarelos et al 1999), 作 者 用 该 技 术 设 计 的 物 理 藕 合 装 置 获 国 家 专 利 (ZL ), 研 究 的 产 品 多 位 点 物 理 藕 合 生 物 杀 虫 剂 申 请 国 家 专 利, 实 审 公 开 号 为 CN A 以 化 学 介 质 ( 如 偶 联 剂 EDC) 将 毒 素 连 接, 定 义 为 化 学 藕 合 Hermanson 1996), 作 者 对 化 学 藕 合 技 术 申 报 了 国 家 专 利, 在 国 际 学 报 上 已 发 表 论 文 5 篇 利 用 藕 合 技 术 进 行 Bt 和 Abmectin 的 藕 合, 能 极 大 地 提 高 杀 虫 效 果 [6-12] 混 合 是 化 学 性 质 相 似 物 理 性 质 相 近 的 两 种 物 质 的 简 单 复 合, 不 改 变 参 与 物 的 理 化 性 质, 提 供 多 个 作 用 位 点, 提 高 杀 虫 效 果, 如 大 多 数 农 药 的 复 配 混 合 与 物 理 藕 合 的 差 异 在 于, 前 者 要 求 参 与 物 的 化 学 性 质 相 似 和 物 理 性 质 相 近, 后 者 仅 利 用 参 与 物 的 物 理 电 荷 特 性, 不 要 求 剂 型 相 同,pH 相 似 等 特 性 [13-22] 8 多 位 点 杀 虫 毒 素 BtA 的 研 究 8.1 多 位 点 杀 虫 毒 素 BtA 藕 合 原 理 多 位 点 生 物 杀 虫 剂 BtA 的 研 究 基 于 多 位 点 杀 虫 毒 素 的 理 论, 将 Bt 的 杀 虫 毒 素 进 行 酶 切 改 造, 形 成 带 末 端 氨 基 的 原 毒 素, 将 阿 维 菌 素 上 的 羟 基 进 行 激 活 衍 生 化, 形 成 带 羧 基 的 杀 虫 毒 素 衍 生 物, 最 后 利 用 氨 基 - 羧 基 偶 联 剂 (EDC) 进 行 藕 合 (conjugation), 实 现 两 种 生 物 毒 素 的 结 构 改 造 和 生 化 结 合 ( 图 1) 解 决 了 生 物 农 药 杀 虫 谱 窄 和 杀 虫 速 率 慢 的 弱 点 从 BtA 杀 死 的 小 菜 蛾 死 亡 症 状 上 看, 伴 胞 晶 体 和 原 毒 素 使 小 菜 蛾 的 死 亡 症 状 表 现 为 黑 色, 阿 维 菌 素 和 阿 维 菌 素 衍 生 物 使 小 菜 蛾 的 死 亡 症 状 表 现 为 黄 色,BtA 化 学 藕 合 物 使 小 菜 蛾 的 死 亡 症 状 表 现 为 头 部 黑 色, 腹 部 黄 色 ( 图 2) 8.2 多 位 点 杀 虫 毒 素 BtA 藕 合 检 测 B.t. 伴 胞 晶 体 的 降 解 物 - 原 毒 素, 在 28 nm 波 长 处 有 一 吸 收 峰 ( 图 3-A) 这 一 毒 素 作 为 BtA 藕 合 的 毒 蛋 白 材 料 阿 维 菌 素 在 245nm 波 长 处 有 一 吸 收 峰, 为 其 特 征 峰 ( 图 3-B) 阿 维 菌 素 加 入 NaH 激 活 后, 在 354-6nm 波 长 范 围 内 出 现 吸 收 峰 激 活 后 的 阿 维 菌 素 进 一 步 加 入 丁 二 酸 酐 进 行 衍 生 化 反 应 形 成 的 阿 维 菌 素 衍 生 物, 在 nm 波 长 范 围 内 有 较 大 的 变 化 ( 图 3-C) 在 阿 维 菌 素 激 活 和 衍 生 化 反 应 过 程 中, 阿 维 菌 素 的 特 征 峰 基 本 保 持 不 变, 保 证 了 阿 维 菌 素 的 生 物 活 性 将 伴 胞 晶 体 处 理 后 的 原 毒 素 阿 维 菌 素 衍 生 物 和 碳 化 二 亚 胺 类 偶 联 剂 EDC 进 行 藕 合 反 应, 生 成 BtA 藕 合 物, 在 nm 波 长 之 间, 吸 收 峰 发 生 了 较 大 的 变 化, 阿 维 菌 素 的 特 征 峰 基 本 不 变, 形 成 了 左 边 为 阿 维 菌 素 特 征 峰, 右 边 为 原 毒 素 藕 合 峰 的 BtA 藕 合 物 的 波 形 特 征 ( 图 3-D) 液 相 色 谱 检 测 表 明, 原 毒 素 靠 左,BtA 居 中, 阿 维 菌 素 靠 右 ( 图 4) 8.3 提 高 杀 虫 速 率 伴 胞 晶 体 生 测 达 到 1% 死 亡 率 的 时 间 为 48 小 时, 当 降 解 成 原 毒 素, 较 伴 胞 晶 体 缩 短 了 12 小 时 用 未 经 处 理 的 阿 维 菌 素 生 测 达 到 1% 死 亡 率 的 时 间 为 39 小 时, 经 激 活 和 衍 生 化 后 阿 维 菌 素 衍 生 物, 死 亡 时 间 较 阿 维 菌 素 缩 短 了 9 小 时 BtA 化 学 藕 合 物 生 测 达 到 1% 死 亡 率 的 时 间 为 24 小 时, 较 伴 胞 晶 体 缩 短 24 小 时, 较 阿 维 菌 素 缩 短 15 小 时 BtA 化 学 藕 合 物 比 伴 胞 晶 体 原 毒 素 阿 维 菌 素 阿 维 菌 素 衍 生 物 的 杀 虫 速 度 皆 提 高 6-24 小 时 ( 表 2) 8.4 扩 大 杀 虫 谱 试 验 结 果 表 明 :Bt 的 杀 虫 谱 仅 为 鳞 翅 目 害 虫, 阿 维 菌 素 和 BtA 可 以 防 治 鳞 翅 目 同 翅 目 鞘 翅 目 害 虫, 但 是 BtA 的 杀 虫 速 率 高 于 阿 维 菌 素 ( 表 3) 8.5 降 低 对 天 敌 的 毒 性 试 验 结 果 表 明 :BtA 对 小 菜 蛾 具 有 较 高 的 毒 力, 对 其 捕 食 性 天 敌 捕 食 螨 草 间 小 黑 蛛 花 蝽 七 星 瓢 虫 毒 力 较 低 : 对 照 农 药 对 小 菜 蛾 毒 力 低, 对 其 捕 食 性 天 敌 捕 食 螨 草 间 小 黑 蛛 花 蝽 七 星 瓢 虫 毒 力 较 高 ( 表 4) 图 1 BtA 藕 合 (Conjugation) 策 略 图 2 小 菜 蛾 死 亡 症 状 比 较

4 4 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 原 毒 素 阿 维 菌 素 12 1 VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA.D) 原 毒 素 BtA 阿 维 菌 素 A- 衍 生 物 BtA mi 图 3 紫 外 分 光 检 测 图 4 液 相 色 谱 检 测 表 2 BtA 化 学 藕 合 过 程 阶 段 产 物 的 生 物 测 定 阶 段 产 物 有 效 成 分 浓 度 (mg/l) 供 试 虫 数 (n) 校 正 死 亡 率 (%) 死 亡 时 间 (h) 伴 胞 晶 体 A 原 毒 素 B 阿 维 菌 素 C 阿 维 菌 素 衍 生 物 D BtA 化 学 藕 合 物 5( 阿 维 菌 素 ) 1( 原 毒 素 ) E 清 水 对 照 9. - 表 3 伴 胞 晶 体 (Bt) 阿 维 菌 素 BtA 对 小 菜 蛾 (Plutella xylostella) 桃 蚜 (Myzus persicae) 跳 甲 (Phyllotreta vittata) 毒 力 测 定 供 试 物 浓 度 (ug a.i. Plutella xylostella Myzus persicae Phyllotreta vittata /ml) n 死 亡 率 (%) n 死 亡 率 (%) n 死 亡 率 (%) 伴 胞 晶 体 (Bt-crystal) ±4.23 a ±. a ±. a 阿 维 菌 素 (Abamectin) ±6.18 b ±6.26b ±6.28 b BtA 藕 合 物 ±8.64 c ±7.94c ±9.36 c 对 照 ( 清 水 ) ±. d ±.a ±. a 处 理 BtA 阿 维 菌 素 联 苯 菊 酯 敌 敌 畏 巴 单 氯 氢 菊 酯 清 水 对 照 表 4 BtA 和 市 售 农 药 对 小 菜 蛾 (Plutella xylostella) 及 其 捕 食 性 天 敌 毒 力 测 定 死 亡 率 (%) 小 菜 蛾 捕 食 螨, 草 间 小 黑 蛛 花 蝽 七 星 瓢 虫 ± 2.3 a ± 1.82 a ±.89 a ± 1.12 a 6. ± 1.22 a 78. ± 1.67 b ± 4.31 b ± 4.43 b 22. ± 3.71 b ± 1.96 b ± 3.54 b ± 2.9 c 55.1 ± 3.11 c 16. ± 1.97 c ± 1.29 c 5.68 ± 1.98 c 7. ± 4.21 b 6. ± 2.35 d ± 3.12 d 28. ± 2.5 d ± 4.75 d ± 3.18 c 46. ± 2.7 b ± 2.27 b ± 1.27 b ± 3.34 e ± 5.37 d ± 5.82 e 81.3 ± 4.35 e ± 4.13 e 参 考 文 献 1 刘 波, 冒 乃 和. 德 国 农 药 审 批 制 度 与 农 药 危 害 的 风 险 防 范 [J]. 世 界 农 药.23,25(2): 刘 波, 苑 宝 玲,C.SENGONGCA. 高 效 生 物 杀 虫 剂 藕 合 技 术 的 研 究 [J]. 中 国 生 物 防 治.2,12( 增 刊 ): 赵 等. 害 虫 的 抗 药 性 [J]. 农 药 市 场 信 息.22,(19):3 4 张 国 洲. 害 虫 抗 药 性 及 其 治 理. 安 徽 农 业 科 学.22,3(4) : 唐 振 华, 吴 士 雄. 昆 虫 抗 药 性 的 遗 传 与 进 化 [M]. 上 海 : 上 海 科 学 技 术 出 版 社,2 年 6 SENGONCA, C.; LIU, B., 22. Effects of BtA biocide on population dynamics of cabbage pests and their natural enemies from fields in southeastern China. J. Pest Science 75, LIU, B.; SENGONCA, C., 22. Investigations on side-effects of the mixed biocide BtA on different predators of Plutella xylostella (L.)(Lep., Plutellidae) in southeast China. J. Pest Science 75, LIU, B.; SENGONCA, C., 23a. Conjugation of δ-endotoxin from Bacillus thuringiensis with abamectin of Streptomyces avermitilis as a new type of biocide BtA in control of agricultural insect pests. J. Pest Science, 23,76(2): SENGONCA,C; LIU, B.,21.Influence of biocide BtA on the pupa and adult stages of Apanteles plutellae Kurd (Hym.,Braconidae) and its host,plutella xylostella(l.)(lep., Plutellidae).J. Pest Science, 74, SENGONCA, C.; LIU, B.; ZHU, Y. J., 21. Efficiency of the biocide BtA against vegetable pests of different arthropod orders in the south-eastern China. J. Pest Science, 74, Liu, B.; Sengongca, C.;Ge, C. B., 2a. Study on carbohydrate utilization of the strain LSZ948, Bacillus thuringiensis during fermentation. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), SENGONCA, C.; LIU, B., 23. Effects of BtA biocide on arthropod species abundance and diversity in the cabbage fields in the southeastern China. J. Fujian Agri. Sci., 23,18(2): LIU, B.;SENGONCA, C.; LIN, Y. Z.; LIN, G. X., 2b. Designation of computer-controlled fermentation system of Bacillus thuringiensis. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), (in Chinese) 14 LIU, B.; SENGONCA, C.; PENG, X. T., 2c. Effect of temperatures on the development of the diamondback moth, Plutella xylostella (L.). Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), (in Chinese) 15 LIU, B.; SENGONGCA, C.; ZHU, Y. J.; LIN, G. X., 2d. Study on the strain LSZ948, Bacillus thuringiensis kustarki. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), 1-5. (in Chinese) ( 下 转 61 页 )

5 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 5 [ 试 验 简 报 ] 利 用 HPLC 测 定 不 同 保 存 时 间 对 Bt 晶 体 原 毒 素 分 解 的 影 响 朱 育 菁 刘 波 ( 福 建 省 农 科 院 生 物 技 术 中 心 农 业 环 保 技 术 研 究 室 ) 1 引 言 在 前 面 的 试 验 中 发 现, 利 用 高 效 液 相 色 谱 (HPLC) 检 测 24h 内 不 同 保 存 时 间 的 二 硫 苏 糖 醇 (DTT) 和 用 DTT 降 解 的 Bt 伴 胞 晶 体 原 毒 素, 其 检 测 结 果 会 有 很 大 的 变 化, 这 可 能 是 由 于 DTT 是 一 个 强 还 原 剂, 其 -SH 基 在 室 温 下 极 为 活 泼, SH 基 极 易 氧 化 重 新 生 成 -S-S- 键 它 在 与 晶 体 蛋 白 反 应 中, 二 硫 苏 糖 醇 形 成 一 个 含 分 子 内 二 硫 键 的 稳 定 六 元 环, 因 此 平 衡 向 右 方 移 动 但 还 原 蛋 白 不 稳 定,SH 基 也 极 易 氧 化 重 新 生 成 -S-S- 键 二 硫 苏 糖 醇 半 胱 氨 酸 残 基 本 研 究 的 目 的 是 利 用 高 压 液 相 色 谱 测 定 12h 内 不 同 保 存 时 间 的 原 毒 素 和 DTT, 在 其 反 应 稳 定 后, 确 定 原 毒 素 反 应 体 系 中 的 原 毒 素 和 DTT 的 单 组 分 色 谱 图 2 材 料 与 方 法 Bt 菌 株 LSZ948 伴 胞 晶 体, 纯 度 95% 以 上 DTT 为 北 京 华 美 生 物 工 程 公 司 的 进 品 分 装 乙 腈 为 上 海 化 学 试 剂 研 究 所 生 产 的 色 谱 纯 高 效 液 相 色 谱 为 HP11, 色 谱 柱 为 C18 (4.mmX25mm, 内 径 5um) 色 谱 分 析 条 件 : 温 度 为 室 温, 流 动 相 A 为 加 纯 水,B 为 乙 腈 流 速 为 1.ml/min, 进 样 量 1ul 梯 度 条 件 为 2-8% 乙 腈 2min 内 检 测 波 长 为 254nm 取 1ml 浓 度 为 2mg/ml 的 晶 体, 加 入 4ml 含 1mmol/ml DTT 的.1mmol/L NaCO3-HCl(pH9.5) 缓 冲 液, 37 水 浴 1h 后,.2um 注 射 过 滤 器 过 滤, 取 上 清 液 作 为 样 品 以 含 1mmol/ml DTT 的.1mmol/L NaCO3-HCl(pH9.5) 缓 冲 液 晶 体 + 缓 冲 液 的 离 心 上 清 液 和 缓 冲 液 为 对 照, 分 别 于 反 应 后 h 进 行 测 定 3 结 果 与 分 析 试 验 结 果 见 表 1, 图 1- 图 18 在 水 浴 结 束 时 立 即 进 行 测 定 结 果 表 明,DTT 和 原 毒 素 都 出 现 4 个 峰,NaCO3-HCl 缓 冲 液 有 2 个 峰, 晶 体 + 缓 冲 液 的 离 心 上 清 液 有 3 个 峰, 可 见 晶 体 在 ph9.5 的 NaCO3-HCl 缓 冲 液 有 很 小 的 降 解 或 是 晶 体 在 保 存 中 自 身 有 轻 微 的 降 解, 而 用 DTT 可 引 起 晶 体 的 降 解 ( 图 7- 图 18) 原 毒 素 与 DTT 有 同 样 的 色 谱 峰, 这 可 能 是 由 于 经 过 1h 的 37 的 水 浴,DTT 尚 未 起 降 解 作 用, 其 色 谱 峰 应 是 DTT, 在 4 个 色 谱 峰 中 以 峰 II 最 高, 峰 III 次 之, 峰 I 和 峰 IV 应 是 缓 冲 液 的 色 谱 峰 在 24h 以 后 的 检 测 结 果 表 明,DTT 和 原 毒 素 的 4 个 色 谱 峰 的 保 留 时 间 都 缩 短 了 2-3min, 说 明 物 质 的 极 性 增 加 二 者 的 峰 II 的 高 度 开 始 下 降, 峰 III 的 高 度 开 始 上 升 DTT 在 48h 以 后 峰 III 成 为 最 高 峰, h 峰 III 趋 于 稳 定, 表 明 其 物 质 已 稳 定 原 毒 素 峰 III 的 峰 高 随 着 时 间 的 延 长 不 断 地 升 高, 呈 线 性 正 相 关, 方 程 为 y = x ,R 2 =.9973 表 1 不 同 保 留 时 间 原 毒 素 的 检 测 结 果 样 品 h 峰 号 保 留 时 间 面 积 高 度 DTT DTT 收 稿 日 期 : 作 者 简 介 : 朱 育 菁 (1972-), 女, 德 国 波 恩 大 学 博 士 生, 副 研 究 员

6 6 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) DTT 48 DTT 72 DTT 96 原 毒 素 原 毒 素 24 原 毒 素 48 原 毒 素 72 原 毒 素 96 Na2CO3 缓 冲 液 晶 体 + 缓 冲 液 上 清 液 h 峰 I 峰 II 峰 III 峰 IV h 峰 I 峰 II 峰 III 峰 IV 图 1 不 同 保 存 时 间 的 DTT 四 个 色 谱 峰 峰 高 的 变 化 图 2 不 同 保 存 时 间 的 原 毒 素 四 个 色 谱 峰 峰 高 的 变 化 h DTT 原 毒 素 h DTT 原 毒 素 图 3 DTT 和 原 毒 素 色 谱 峰 I 的 比 较 图 4 DTT 和 原 毒 素 色 谱 峰 II 的 比 较

7 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) h DTT 原 毒 素 h DTT 原 毒 素 图 5 DTT 和 原 毒 素 色 谱 峰 III 的 比 较 图 6 DTT 和 原 毒 素 色 谱 峰 IV 的 比 较 VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA225\BTA6.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA225\BTA4.D) mi mi 图 7 DTT h 图 8 原 毒 素 h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA226\BTA1.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA226\BTA2.D) mi mi 图 9 DTT 24h 图 1 原 毒 素 24h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA227\BTA4.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA227\BTA1.D) mi 图 11 DTT 48h 图 12 原 毒 素 48h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA227\BTA3.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA228\BTA.D) mi mi mi 图 13 DTT 72h 图 14 原 毒 素 72h

8 8 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA31\BTA.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA31\BTA1.D) m m 图 15 DTT 96h 图 16 原 毒 素 96h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA225\BTA3.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA225\BTA2.D) mi mi 图 17 Na2CO3 缓 冲 液 图 18 晶 体 + 缓 冲 液 的 上 清 液 4 小 结 与 讨 论 4.1 二 硫 苏 糖 醇 带 有 2 个 活 泼 的 -SH( 图 19), 在 室 温 下 可 以 生 成 -S-S- 键 ( 图 2), 在 Na 2CO3 缓 冲 液 中 可 与 Na2CO3 反 应, 生 成 二 硫 苏 糖 钠 和 H2CO3, 因 此 24h 后 DTT 的 色 谱 峰 的 保 留 时 间 都 缩 短, 表 明 物 质 已 全 部 发 生 变 化, 极 性 变 大, 并 且 峰 IV 的 高 度 在 上 升, 表 明 其 峰 II 可 能 是 图 2 的 物 质, 峰 III 是 图 21 的 物 质, 峰 IV 是 H2CO3 峰 III 和 峰 IV 高 度 上 升 是 由 于 DTT 与 Na2CO3 在 不 断 反 应 的 结 果 Na S Na 图 19 图 2 图 二 硫 苏 糖 醇 作 为 蛋 白 还 原 剂, 首 先 与 蛋 白 质 -S-S- 形 成 中 间 物, 反 应 终 了, 还 原 剂 被 氧 化 形 成 一 个 稳 定 的 六 环 化 合 物, 蛋 白 质 则 被 还 原 反 应 中, 二 硫 苏 糖 醇 形 成 一 个 含 分 子 内 二 硫 键 的 稳 定 六 元 环, 因 此 平 衡 向 右 方 移 动 但 还 原 蛋 白 不 稳 定,SH 基 极 易 氧 化 重 新 生 成 -S-S- 键 随 着 保 存 时 间 的 延 长, 峰 II 的 高 度 趋 于 稳 定, 峰 III 不 断 持 续 上 升, 峰 II 可 能 是 二 硫 苏 糖 醇 形 成 一 个 含 分 子 内 二 硫 键 的 稳 定 六 元 环, 峰 II 是 原 毒 素 5 参 考 文 献 ( 略 )

9 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 9 [ 试 验 简 报 ] 利 用 HPLC 检 测 多 位 点 生 物 杀 虫 毒 素 BtA 化 学 耦 合 过 程 朱 育 菁 刘 波 ( 福 建 省 农 科 院 生 物 技 术 中 心 农 业 环 保 技 术 研 究 室 ) 1 引 言 多 位 点 生 物 杀 虫 毒 素 BtA 的 化 学 藕 合 一 方 面 是 将 苏 云 金 芽 孢 杆 菌 (B.t.) 的 伴 胞 晶 体 用 DTT 进 行 降 解 改 造, 形 成 带 末 端 氨 基 的 原 毒 素, 另 一 方 面 将 放 线 菌 阿 维 菌 素 进 行 激 活 衍 生 化, 形 成 带 羧 基 的 阿 维 菌 素 衍 生 物, 最 后 利 用 氨 基 - 羧 基 偶 联 剂 EDC 行 藕 合, 实 现 单 体 双 生 物 毒 素 BtA 的 结 构 改 造 高 效 生 物 杀 虫 剂 BtA 的 研 究 成 功, 使 得 B.t. 杀 虫 谱 扩 大 为 五 个 目 ( 鳞 翅 目 同 翅 目 双 翅 目 鞘 翅 目 和 螨 类 ), 杀 虫 速 率 大 为 提 高, 保 持 了 无 公 害 的 特 性, 对 于 农 业 环 保 具 有 重 要 意 义 与 混 合 不 同 的 是, 在 BtA 的 化 学 藕 合 过 程, 不 仅 仅 是 将 两 种 物 质 B.t. 原 毒 素 和 阿 维 菌 素 简 单 地 混 合 在 一 起, 而 是 通 过 偶 联 剂 的 作 用 生 成 新 的 物 质 在 前 面 的 研 究 中, 已 利 用 紫 外 分 光 光 度 计 将 藕 合 过 程 的 产 物, 如 原 毒 素 阿 维 菌 素 阿 维 菌 素 钠 阿 维 菌 素 衍 生 物 BtA 化 学 藕 合 物 进 行 光 谱 分 析, 证 实 了 BtA 化 学 藕 合 过 程 的 物 质 特 性 发 生 了 变 化 光 谱 分 析 结 果 表 明 B.t. 伴 胞 晶 体 的 降 解 物 - 原 毒 素, 通 过 SDS- PAGE 电 泳 分 析, 原 毒 素 的 分 子 量 为 74KD, 在 28 nm 波 长 处 有 一 吸 收 峰 ( 图 1A) 阿 维 菌 素 在 245nm 波 长 处 有 一 吸 收 峰, 为 之 特 征 峰 ( 图 1B) 阿 维 菌 素 加 入 NaH 激 活 后, 在 354-6nm 波 长 范 围 内 出 现 吸 收 峰 激 活 后 的 阿 维 菌 素 进 一 步 加 入 丁 二 酸 酐 进 行 衍 生 化 反 应 形 成 的 阿 维 菌 素 衍 生 物 (Abamectin-COONa), 在 nm 波 长 范 围 内 有 较 大 的 变 化 ( 图 1C) 然 而, 阿 维 菌 素 激 活 和 衍 生 化 反 过 成, 阿 维 菌 素 的 特 征 峰 基 本 保 持 不 变, 以 保 证 阿 维 菌 素 的 生 物 活 性 将 伴 胞 晶 体 处 理 后 的 原 毒 素 阿 维 菌 素 衍 生 物 和 碳 化 二 亚 胺 类 偶 联 剂 EDC 进 行 藕 合 反 应, 生 成 BtA 藕 合 物, 在 nm 波 长 之 间, 吸 收 峰 发 生 了 较 大 的 变 化, 阿 维 菌 素 的 特 征 峰 基 本 不 变, 形 成 了 左 边 为 阿 维 菌 素 特 征 峰, 右 边 为 原 毒 素 藕 合 峰 的 BtA 藕 合 物 的 波 形 特 征 ( 图 1D) A. 原 毒 素 紫 外 分 光 扫 描 B 阿 维 菌 素 紫 外 分 光 扫 描 C. 阿 维 菌 素 衍 生 物 紫 外 分 光 扫 描 D BtA 藕 合 物 紫 外 分 光 扫 描 高 效 液 相 色 谱 (HPLC) 是 重 要 的 现 代 分 析 手 段 之 一, 它 学 中 的 多 肽 蛋 白 质 及 核 酸 等 生 物 大 分 子 的 分 离 分 析 及 制 备 具 有 分 离 效 率 高 分 析 速 度 快 和 应 用 范 围 广 的 特 点, 在 分 析 提 纯 用 高 效 液 相 色 谱 法 (HPLC) 来 分 析 蛋 白 质 是 一 种 近 年 来 化 学 中 一 直 占 据 着 极 其 重 要 的 地 位 在 生 物 有 机 无 机 化 发 展 较 快 新 型 分 析 方 法 BIETZ: 在 年 就 第 一 次 学 等 众 多 领 域 中, 都 发 挥 着 重 大 的 作 用 作 为 当 今 一 种 较 为 对 用 反 相 (RP) 和 尺 寸 排 阻 (SE) 高 效 液 相 色 谱 法 来 分 离 小 麦 先 进 的 分 离 手 段, 它 能 将 复 杂 的 混 合 物 通 过 色 谱 柱 分 离 为 相 蛋 白 质 和 玉 米 蛋 白 质 的 实 验 进 行 报 导 : 由 于 高 效 液 相 色 谱 柱 对 单 一 的 纯 组 份, 并 可 根 据 需 要 对 纯 品 进 行 定 性 定 量 分 析 的 改 进 和 HPLC 技 术 的 迅 速 发 展,HPLC 法 在 蛋 白 质 分 析 研 究 和 制 备, 尤 其 适 用 于 目 前 最 活 跃 的 研 究 领 域 之 一 生 命 科 中 越 趋 成 熟 HPLC 分 析 蛋 白 质 不 仅 简 便 快 捷, 而 互 选 择 性 好, 分 离 效 率 高, 检 测 灵 敏 度 高 ; 根 据 分 离 机 理, 蛋 白 质 的 收 稿 日 期 : HPLC 可 以 分 成 尺 寸 排 阻 色 谱 (SEC) 反 相 高 效 液 相 色 谱 作 者 简 介 : 朱 育 菁 (1972-), 女, 德 国 波 恩 大 学 博 士 生, 副 研 究 员 (RP-HPLC) 和 凝 胶 渗 透 色 谱 (GPC) 三 大 类 其 中, 反 相 液 相 色

10 1 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 谱 (RP-HPLC) 一 般 使 用 弱 极 性 DS 固 定 相 和 极 性 比 DS 固 定 相 要 强 的 流 动 相, 是 应 用 最 广 泛 的 液 相 色 谱 法, 用 于 有 机 化 合 物 的 分 离, 在 食 品 医 药 生 物 分 析 中 扮 演 着 重 要 角 色 本 研 究 的 目 的 是 利 用 反 相 液 相 色 谱 来 检 测 多 位 点 生 物 杀 虫 毒 素 BtA 化 学 藕 合 过 程 的 物 质 变 化, 进 行 定 性 分 析, 进 一 步 证 实 藕 合 反 应 中 新 物 质 的 产 生 2 材 料 与 方 法 Bt 菌 株 LSZ948 伴 胞 晶 体, 纯 度 95% 以 上 DTT 为 北 京 华 美 生 物 工 程 公 司 的 进 品 分 装 乙 腈 为 上 海 化 学 试 剂 研 究 所 生 产 的 色 谱 纯 三 氟 乙 酸 (TFA) 为 中 国 医 药 上 海 化 学 试 剂 公 司 生 产 高 效 液 相 色 谱 为 HP11, 色 谱 柱 为 C18 (4.mm 25mm, 内 径 5um), 检 测 器 为 VWD 色 谱 分 析 条 件 : 温 度 为 室 温, 流 动 相 A 为 纯 水,B 为 加 乙 腈 流 速 为 1.ml/min, 进 样 量 为 1ul 原 毒 素 的 制 备 : 取 1ml 浓 度 为 2mg/ml 的 晶 体, 加 入 4ml 含 1mmol/mlDTT 的.1mmol/L NaCO3-HCl(pH9.5) 缓 冲 液,37 水 浴 1h 后, 用.2um 注 射 过 滤 器 过 滤, 取 上 清 液 作 为 样 品 BtA 的 藕 合 : 取 1ml 原 毒 素 与 1ml(.4mg/ml)Abamectin-COONa 在 乙 腈 中 均 匀 混 合 VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA32\BTA15.D) 后, 加 入 2mgEDC, 将 混 合 物 混 匀 后 置 于 25 下 反 应, 每 24h 取 样 检 测 以 B.t. 原 毒 素 (Protoxin) Abamectin-COONa EDC 原 毒 素 +Abamectin-COONa 原 毒 素 +EDC 和 Abamectin-COONa+EDC 作 为 对 照 而 后 分 别 进 行 不 同 反 应 时 间 BtA 藕 合 反 应 体 系 中 的 物 质 变 化,BtA 藕 合 反 应 体 系 与 单 组 分 反 应 底 物 的 比 较,BtA 藕 合 反 应 体 系 与 双 组 分 反 应 底 物 的 比 较,BtA 藕 合 反 应 体 系 中 物 质 的 定 性 分 析, 以 确 定 藕 合 新 物 质 产 生 以 及 该 物 质 的 特 征 色 谱 峰 3 结 果 与 分 析 3.1 不 同 反 应 时 间 的 BtA 反 应 体 系 中 的 物 质 变 化 试 验 结 果 见 图 2-4 在 B.t. 原 毒 素 Abamectin-COONa 和 EDC 混 合 后 立 即 进 行 HPLC 检 测, 色 谱 图 中 检 测 到 5 个 峰, 在 25 下 反 应 24h 以 后 色 谱 检 测 到 6 个 峰 ( 从 左 到 可 定 名 为 峰 1- 峰 6), 在 保 留 时 间 2min 左 右 出 现 1 个 新 峰 ( 图 2) 6 个 色 谱 峰 的 峰 高 变 化 表 明, 随 着 反 应 时 间 的 延 长, 峰 1 和 峰 4 的 高 度 不 断 升 高, 峰 2 和 峰 3 有 高 度 不 断 下 降, 峰 5 和 峰 6 有 高 度 基 本 保 持 不 变 可 以 看 出 在 峰 1 和 峰 4 位 置 的 物 质 的 量 在 不 断 地 增 加, 表 明 有 新 的 物 质 产 生 VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA33\BTA2.D) mi mi BtA at h BtA at 24h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA34\BTA.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA.D) mi BtA at 48h BtA at 12h 图 2 不 同 反 应 时 间 BtA 的 色 谱 图 mi 峰 高 () h 24h 48h 12h 反 应 时 间 P1 峰 高 (mau) h 24h 48h 12h 反 应 时 间 P2 P3 P4 P5 P6 图 3 不 同 反 应 时 间 BtA 峰 1 的 峰 高 变 化 图 4 不 同 反 应 时 间 BtA 峰 2- 峰 6 的 峰 高 变 化

11 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) BtA 反 应 体 系 中 与 单 组 分 反 应 底 物 之 间 的 比 较 试 验 结 果 见 图 5 将 反 应 12h 的 BtA 与 12 的 原 毒 素 Abamectin-COONa 和 EDC 分 别 进 行 比 较 可 以 看 出 原 毒 素 的 主 要 的 色 谱 峰 有 3 个, 其 保 留 时 间 在 4.86min 7.589min 和 min, 峰 高 分 别 为 364.9,33.7 和 86.8; 在 BtA 藕 合 反 应 体 系 中, 在 原 毒 素 的 相 应 位 置 上, 峰 2 已 几 乎 消 失, 峰 1 和 峰 3 的 高 度 大 幅 度 下 降, 分 别 降 低 了 91.92% 和 86.52%, 可 见 在 BtA 的 反 应 体 系 中, 原 毒 素 的 量 下 降 在 Abamectin-COONa 的 色 谱 图 中 检 测 到 3 个 峰, 其 保 留 时 间 分 别 为 min 2.535min 和 22.42min, 峰 高 分 别 为 和 65.6; 在 BtA 藕 合 反 应 体 系 中, 在 Abamectin-COONa 的 相 应 位 置 上, 峰 2 和 峰 3 的 峰 高 只 有 轻 微 的 变 化, 分 别 为 41.5 和 61.1, 但 在 峰 1 的 位 置, 峰 高 上 上 升 了 %, 为 97.5, 表 明 在 峰 1 位 置 有 新 物 质 产 生 溶 于 乙 腈 的 饱 和 量 的 EDC 的 色 谱 图 中 只 有 1 个 峰, 保 留 时 间 为 min, 高 度 仅 为 23.1 比 较 结 果 表 明, 与 BtA 藕 合 反 应 体 系 中 的 单 组 分 的 反 应 底 物 原 毒 素 Abamectin-COONa 和 EDC 相 比,BtA 的 峰 1 和 峰 4 位 置 出 现 的 峰 高 变 化 表 示 有 新 物 质 的 产 生, 峰 4 的 物 质 的 保 留 时 间 与 Abamectin-COONa 峰 1 的 保 留 时 间 接 近 3 25 VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA3.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA32\BTA11.D) mi mi Protoxin at 12h Abamectin-COONa at 12h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA31\BTA9.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA.D) mi EDC at 12h BtA at 12h 图 5 BtA 反 应 体 系 中 与 反 应 底 物 单 组 分 之 间 的 比 较 mi 3.3 BtA 反 应 体 系 中 与 双 组 分 反 应 底 物 之 间 的 比 较 前 面 的 结 果 已 表 明 在 BtA 藕 合 反 应 体 系 中 在 峰 1 和 峰 4 位 置 有 新 物 质 产 生, 由 于 BtA 的 藕 合 是 由 三 个 单 组 分 原 毒 素 Abamectin-COONa 和 EDC 进 行 反 应 的, 产 生 的 新 物 质 有 可 能 是 由 其 中 的 两 个 物 质 产 生, 而 不 是 由 三 个 物 质 同 时 反 应 形 成, 因 此 本 研 究 同 时 进 行 了 BtA 藕 合 反 应 与 双 组 分 反 应 底 物 的 比 较 试 验 结 果 见 图 6 在 反 应 12h 后, 在 Abamectin-COONa+ 原 毒 素 的 色 谱 图 中, 原 毒 素 和 Abamectin-COONa 保 持 着 原 有 的 特 征 峰, 表 明 在 没 有 EDC 参 与 反 应 的 条 件 下, 二 者 单 独 加 在 一 起 没 有 起 任 何 反 应 Abamectin-COONa+EDC 的 色 谱 图 与 Abamectin-COONa 的 色 谱 图 接 近, 这 可 能 是 由 于 EDC 的 色 谱 峰 与 Abamectin-COONa 的 峰 1 相 重 叠 原 毒 素 +EDC 的 色 谱 图 中, 出 现 3 个 大 峰 和 3 个 小 峰, 与 原 毒 素 相 比, 保 留 了 原 毒 素 的 特 征 峰, 但 出 现 了 与 BtA 峰 1 同 样 的 峰, 但 在 BtA 的 峰 4 位 置, 只 有 峰 高 为 31.3 的 小 峰, 其 峰 高 比 BtA 的 峰 4 低 了 66.2 比 较 结 果 表 明, 在 BtA 藕 合 体 系 与 单 组 分 反 应 底 物 表 现 出 差 异 的 峰 1 和 峰 4, 其 中 的 峰 1 在 原 毒 素 +EDC 的 双 组 分 混 合 物 中 出 检 测 到, 但 峰 4 的 变 化 在 3 组 的 双 组 分 反 应 底 物 的 混 合 物 皆 未 检 测 到, 在 此 该 峰 应 是 原 毒 素 和 Abamectin-COONa 的 峰 1 在 EDC 的 作 用 下 藕 合 而 成 BtA 3.4 BtA 藕 合 反 应 体 系 中 物 质 的 定 性 分 析 为 进 一 步 确 定 BtA 藕 合 体 系 中 峰 4 为 藕 合 产 物 BtA 的 特 征 峰, 需 进 行 定 性 分 析, 即 在 BtA 的 藕 合 反 应 体 系 中 分 别 加 入 单 组 分 的 反 应 底 物, 立 即 进 行 检 测, 观 察 色 谱 峰 的 变 化 试 验 结 果 见 图 7- 图 8, 在 48h 的 BtA 藕 合 反 应 体 系 中 加 入 原 毒 素 后, 峰 2 的 峰 高 迅 速 增 高, 表 明 峰 2 为 原 毒 素 的 特 征 峰 ; 加 入 Abamectin-COONa 后, 峰 5 和 峰 6 的 峰 高 增 高, 表 明 峰 5 和 峰 6 为 Abamectin-COONa 的 特 征 峰 ; 加 入 EDC 后, 峰 1 的 峰 高 增 高, 表 明 峰 1 为 EDC, 这 与 前 面 所 测 的 溶 于 乙 腈 的 EDC 的 色 谱 峰 的 保 留 时 间 有 所 不 同, 是 由 于 在 BtA 藕 合 体 系 中 除 了 乙 腈 外, 还 存 在 着 Na2CO3 的 缓 冲 液, 因 此 该 峰 是 EDC 与 缓 冲 液 作 用 后 的 物 质 峰 6 处 峰 中 在 3 组 定 性 分 析 中 不 产 生 变 化 的 峰 3 和 峰 4, 由 于 峰 3 属 于 原 毒 素 的 特 征 峰 之 一, 因 此 峰 4 被 再 次 确 定 为 藕 合 产 物 BtA

12 12 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA1.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA32\BTA13.D) 原 毒 素 +Abamectin-COONa at 12h min Abamectin-COONa+EDC at 12h min VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA2.D) VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA37\BTA.D) mi 原 毒 素 +EDC at 12h 图 6 BtA 反 应 体 系 中 与 双 组 分 反 应 底 物 之 间 的 比 较 VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA34\BTA4.D) BtA at 12h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA34\BTA1.D) 4.98 mi GCSC-BtA at 48h VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA34\BTA2.D) min GCSC-BtA+protoxin VWD1 A, Wavelength=254 nm (BTA34\BTA3.D) min mi GCSC-BtA+Abamectin-COONa 图 GCSC-BtA+EDC BtA 藕 合 反 应 体 系 中 物 质 的 定 性 分 析 mi Peak height Peak 1 Peak 2 Peak 3 Peak 4 Peak 5 Peak 6 BtA BtA+Protoxin BtA+A-COONa BtA+EDC 图 8 BtA 藕 合 反 应 体 系 中 物 质 的 定 性 分 析 各 处 理 色 谱 峰 的 峰 高 变 化 参 考 文 献 1 贺 延 春, 王 克 勤,1993. 北 京 鸭 血 清 HDL 主 要 载 脂 蛋 白 的 高 效 液 相 层 析 分 离 及 其 理 化 性 质. 生 物 化 学 杂 志,9(3): 王 颖,1998. 蛋 白 质 及 肽 的 快 速 液 相 分 析. 国 外 医 学 药 学 分 册,2 3 周 雅 琳, 阚 健 全, 陈 宗 道,21. 高 效 液 相 色 谱 法 在 蛋 白 质 分 析 中 应 用. 粮 食 与 油 脂.11: 徐 明 波, 姚 志 健,1992.SDS- 蛋 白 复 合 物 的 性 质 及 其 液 相 色 谱 分 离 研 究. 生 物 化 学 与 生 物 物 理 进 展.19(3): 王 迎, 谢 锦 云, 梁 宋 平,1997. 大 腹 园 蛛 拖 丝 蛋 白 一 级 结 构 初 步 研 究. 生 物 化 学 与 生 物 物 理 学 报.29(5): 毋 理 超, 朱 碧 英,21. 低 值 鱼 酶 解 蛋 白 的 制 取 及 其 组 成 研 究. 水 产 科 学.2(4): 喻 子 牛 苏 云 金 芽 孢 杆 菌 制 剂 的 生 产 和 应 用. 农 业 出 版 社

13 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 13 农 作 物 枯 萎 病 研 究 进 展 刘 波 朱 育 菁 林 营 志 林 抗 美 冒 乃 和 肖 荣 凤 葛 慈 斌 曹 宜 史 怀 苏 明 星 阮 传 清 ( 福 建 省 农 科 院 生 物 技 术 中 心 农 业 环 保 技 术 研 究 室 ) 1 农 作 物 枯 萎 病 的 发 生 与 危 害 1.1 枯 萎 病 原 植 物 病 害 是 农 业 生 产 的 主 要 问 题 之 一, 据 James(1981) 估 计 全 球 植 物 病 害 造 成 的 农 作 物 损 失 达 13-2%, 其 中 绝 大 部 份 是 由 土 传 病 害 引 起 的 枯 萎 病 是 一 类 植 物 病 害 的 总 称, 因 病 原 菌 的 侵 害, 造 成 植 物 枯 死 萎 蔫 枯 萎 病 原 有 细 菌 性 ( 如 玉 米 细 菌 性 枯 萎 病 等 ) 和 真 菌 性 病 原, 本 研 究 所 指 的 枯 萎 病 为 真 菌 性 病 原 植 物 枯 萎 病 是 由 镰 刀 菌 寄 生 引 起 的 一 种 世 界 性 的 真 菌 土 传 病 害, 其 主 要 致 病 菌 是 尖 孢 镰 刀 菌 (Fusarium oxysporum Schl.) 半 知 菌 类 (Fungiimperfecti) 梗 孢 目 (Moniliales) 痤 孢 科 (Tubercular) 镰 刀 菌 属 (Fusarium) 自 从 Snyder W. C. 和 Hansen H.N.(194) 把 镰 刀 菌 属 美 丽 组 内 的 种 合 并 为 1 个 成 为 尖 孢 镰 刀 菌 (Fusarium oxysporum Schl.) 1.2 侵 染 寄 主 (1) 经 济 作 物 : 棉 花 油 桐 甘 蔗 蓖 麻 亚 麻 等 (2) 茄 科 作 物 : 番 茄 胡 椒 马 铃 薯 烟 草 等 (3) 瓜 类 作 物 : 黄 瓜 节 瓜 冬 瓜 西 瓜 南 瓜 西 葫 芦 甜 瓜 丝 瓜 白 瓜 ( 越 瓜 ) 苦 瓜 葫 芦 瓜 哈 密 瓜 等 (4) 豆 科 作 物 : 大 豆 四 季 豆 豇 豆 猪 屎 豆 豌 豆 等 (5) 花 卉 植 物 : 康 乃 馨 郁 金 香 鱼 尾 菊 非 洲 菊 鸢 尾 水 仙 翠 菊 合 欢 百 合 仙 人 掌 穿 心 莲 一 品 红 草 坪 草 等 (6) 林 果 植 物 : 松 树 相 思 树 柑 桔 沙 棘 水 杉 铁 线 莲 属 植 物 梨 树 等 (7) 其 它 植 物 : 莴 苣 小 麦 大 蒜 荸 荠 芦 笋 姜 香 蕉 等 1.3 危 害 特 性 尖 孢 镰 刀 菌 世 界 各 地 均 有 分 布, 和 其 它 的 病 原 菌 一 样, 尖 孢 镰 刀 菌 有 多 种 专 化 型, 可 侵 染 多 种 寄 主, 但 是 不 同 专 化 型 在 不 同 地 区 的 分 布 不 同 不 同 的 专 化 型 侵 染 植 株 后 的 发 病 症 状 是 多 种 多 样 的, 一 般 导 致 维 管 束 枯 萎 植 株 枯 黄 球 茎 和 根 腐 烂, 植 株 生 长 衰 弱 其 中 起 重 要 致 病 作 用 的 是 维 管 束 枯 萎 在 镰 刀 菌 引 起 的 植 株 维 管 束 枯 萎 病 中, 尖 孢 镰 刀 菌 是 最 主 要 的 致 病 菌 植 株 发 病 后, 最 初 的 症 状 表 现 是, 嫩 叶 外 部 出 现 轻 微 的 褪 绿, 而 后 老 叶 开 始 下 垂 在 苗 期, 植 株 被 病 原 菌 侵 染 后 会 在 出 现 发 病 症 状 后 迅 速 死 去 ; 在 成 株 期, 在 叶 脉 缺 失 和 叶 片 下 垂 后, 植 株 出 现 生 长 缓 慢 下 部 叶 片 的 黄 化 不 定 根 的 形 成 叶 片 和 嫩 茎 的 萎 蔫 落 叶 剩 余 叶 片 边 缘 坏 死, 最 终 全 株 死 亡 (Agrios, 1988) 维 管 束 组 织 的 褐 变 是 镰 刀 菌 枯 萎 病 最 明 显 的 特 征 (Jones et al.,1982), 在 较 老 的 植 株 上, 从 盛 花 期 到 果 实 成 熟 期, 症 状 会 变 得 更 明 显 (Smith et al.,1988) 图 1 枯 萎 病 对 葫 芦 瓜 生 产 造 成 严 重 为 害 图 2 植 株 感 染 枯 萎 病 后 全 株 枯 死 图 3 瓜 类 作 物 的 温 室 种 植 1.4 侵 染 方 式 尖 孢 镰 刀 菌 是 一 类 在 土 壤 和 有 机 质 中 数 量 多 而 活 跃 的 腐 生 菌, 其 中 一 些 成 为 了 植 物 的 致 病 菌 (Smith et al., 1988) 它 的 腐 生 能 力 使 得 它 可 以 在 土 壤 中 长 期 生 存, 在 植 物 发 病 植 株 的 残 株 也 可 以 生 存 这 些 真 菌 可 以 菌 丝 体 或 3 种 孢 子 中 的 任 何 一 种 存 活 只 要 生 长 地 的 土 壤 被 尖 孢 镰 刀 菌 所 污 染, 健 康 的 植 株 就 会 被 病 原 菌 侵 染 尖 孢 镰 刀 菌 会 用 孢 子 萌 发 管 或 菌 丝 体 从 根 部 侵 入 植 株 体 内, 可 直 接 从 根 尖 根 部 的 伤 口 或 是 在 侧 根 的 形 成 点 进 入 植 株 体 内 一 旦 进 入 植 株 体 内, 菌 丝 体 就 在 根 皮 层 细 胞 间 生 长 当 菌 丝 体 到 达 木 质 部 后, 它 通 过 木 质 部 的 纹 孔 侵 入 导 管, 而 后 在 导 管 中 向 上 生 长 至 植 株 的 茎 和 顶 部 当 它 生 长 时, 菌 丝 体 的 会 分 枝, 并 产 生 小 分 生 孢 子, 小 分 生 孢 子 会 在 导 管 中 跟 着 树 液 的 传 输 从 下 往 上 移 动 当 小 分 生 孢 子 萌 发 时, 菌 丝 体 会 穿 透 木 质 部 的 上 层 壁, 在 相 邻 的 导 管 中 产 生 更 多 的 小 分 生 孢 子 同 时, 尖 孢 镰 刀 菌 也 会 通 过 木 质 部 的 纹 孔, 从 侧 面 进 行 进 一 步 的 侵 染 由 于 病 原 菌 在 植 株 维 管 组 织 内 的 生 长, 植 株 水 分 的 供 应 受 到 了 很 大 的 影 响, 缺 水 导 致 了 叶 片 气 孔 的 关 闭 叶 片 的 萎 蔫 和 植 株 的 整 体 死 亡 这 时, 病 原 菌 侵 入 了 植 株 的 软 组 织, 直 至 最 终 到 达 死 亡 组 织 的 表 面, 在 那 里 大 量 地 产 生 孢 子 这 些 孢 子 又 成 为 病 原 菌 新 的 进 一 步 扩 散 的 接 种 体 1.5 传 播 途 径 枯 萎 病 病 原 菌 以 菌 丝 厚 垣 袍 子 和 菌 核 在 土 壤 及 未 腐 熟 的 带 菌 绿 肥 中 越 冬, 种 子 也 可 带 菌 尖 孢 镰 刀 菌 的 短 距 离 传 播 主 要 是 通 过 灌 溉 水 和 带 菌 的 农 用 器 具 长 距 离 传 播 是 通 过 带 菌 的 种 苗 和 土 壤 尽 管 病 原 菌 有 时 也 会 侵 染 果 实 和 种 子, 但 通 过 种 子 传 播 的 可 能 性 很 小, 同 时 也 可 能 通 过 风 进 行 孢 子 传 播 1.6 病 害 流 行 在 我 国 南 方, 经 济 作 物 枯 萎 病 中 以 瓜 类 枯 萎 病 发 病 严 重, 受 害 面 积 最 大 为 害 最 广 泛 ( 丁 亚 军 等,1999) 在 我 国 北 方, 经 济 作 物 枯 萎 病 中 以 棉 花 枯 萎 病 发 生 严 重, 受 害 面 积 大 为 害 程 度 重 ( 冯 洁 等,1994) 病 原 菌 从 根 部 为 害 植 物, 引 起 维 管 束 病 害, 造 成 植 株 枯 死, 在 植 株 的 全 生 育 期 均 可 发 生, 因 此 一 旦 发 病, 就 难 以 根 除, 并 随 着 连 作 年 份 的 增 加, 发 病 率 升 高, 是 一 种 顽 固 的 土 传 病 害 2 世 纪 9 年 代 以 来, 我 国 设 施 蔬 菜 瓜 类 作 物 面 积 不 断 增 加, 由 于 在 相 对 封 闭 的 设 施 内 形 成 的 特 殊 小 气 候, 既 有 利 于 蔬 菜 生 长, 同 时 也 成 为 各 种 病 虫 害 滋 生 的 温 床, 长 年 的 连 作, 使 土 壤 中 病 原 菌 的 数 量 不 断 增 加 ; 并 在 较 适 宜 的 根 际 土 壤 中 迅 速 增 殖, 猖 撅 发 生, 土 传 性 病 害 在 3 4 年 内 就 会 由 零 星 点 片 发 展 为 普 遍 流 行 性 病 害, 更 使 得 枯 萎 病 发 生 面 积 扩 大, 危 害 逐 年 加 重 病 田 一 般 减 产 2 3% 严 重 田 块 可 达 5 6%, 甚 至 绝 产, 在 各 地 的 瓜 类 产 区 均 有 严 重 发 生, 是 目 前 造 成 瓜 类 生 产 大 面 积 减 产 的 主 要 原 因 之 一, 限 制 着 我 国 瓜 类 作 物 的 生 产 发 展 ( 王 振 跃 等,21) 2 农 作 物 枯 萎 病 原 菌 微 生 物 学 特 性 2.1 菌 落 形 态 在 固 体 培 养 基 上, 例 如 马 铃 薯 葡 萄 糖 琼 脂 培 养 基 (PDA), 尖 孢 镰

14 14 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 刀 菌 的 不 同 专 化 型 有 不 同 的 菌 落 形 态 一 般 来 说, 最 初 的 气 生 菌 丝 是 白 色 的, 而 后 不 同 的 专 化 型 菌 株 的 菌 落 会 变 成 各 种 不 同 的 颜 色, 从 淡 紫 到 深 紫 红 色 在 分 生 孢 子 座 很 多 的 情 况 下, 也 会 出 现 奶 油 色 或 桔 黄 色 在 不 同 培 养 基 上. 其 菌 落 直 径 大 小 颜 色 形 态 及 产 孢 量 均 有 所 不 同 ( 刘 雪 静 等,1996) 非 洲 菊 枯 萎 病 菌 菌 丝 生 长 发 育 适 温 为 25-3 ; 适 宜 ph 为 5-6,, 喜 中 性 偏 酸 全 光 照 或 光 照 交 替 培 养 下 生 长 良 好 ( 徐 秉 良 等,22) A B C D 图 4 尖 孢 镰 刀 菌 在 PDA 上 的 菌 落 形 态 图 5 尖 孢 镰 刀 菌 的 菌 丝 体 与 孢 子 形 态,A 为 小 分 生 孢 子, B 为 大 分 生 孢 子,C 为 厚 坦 孢 子,D 为 菌 丝 体 2.2 孢 子 形 态 尖 孢 镰 刀 菌 产 生 3 种 无 性 孢 子 : 小 分 生 孢 子 大 分 生 孢 子 和 厚 垣 孢 子 小 分 生 孢 子 为 -1 隔, 产 生 量 最 多, 在 任 何 条 件 下 都 可 形 成, 同 时 也 是 在 被 侵 染 植 株 的 导 管 中 产 生 量 最 多 的 孢 子 类 型 大 分 生 孢 子 为 3-5 隔, 这 些 孢 子 一 般 可 在 死 亡 植 株 的 表 面 和 分 生 孢 子 座 群 中 被 发 现 厚 垣 孢 子 为 圆 形 的 厚 壁 孢 子, 在 老 的 菌 丝 体 上 或 大 分 生 孢 子 中 产 生,-1 隔 分 生 孢 子 萌 发 的 温 度 范 围 为 8-36, 最 适 温 度 28-3 菌 丝 生 长 的 温 度 范 围 为 8-34, 最 适 温 度 分 生 孢 子 萌 发 的 ph 值 范 围 为 3-1 最 适 ph 为 5-7 菌 丝 生 长 的 ph 值 范 围 为 3-1, 最 适 ph 为 年 对 新 疆 棉 花 耐 高 温 菌 HAI-17 的 大 分 生 孢 子 形 态 测 定, 结 果 表 明,HAI-17 能 在 4 下 生 长, 易 产 生 粘 分 生 孢 子 团, 大 分 生 孢 子 μm, 为 镰 刀 型 ( 缪 卫 国 等,2) 2.3 生 理 分 化 枯 萎 病 原 菌 存 在 生 理 小 种 的 分 化, 并 在 种 下 设 生 理 型 (form), 后 改 为 专 化 型 (form specialis) 朱 天 圣 等 研 究 广 东 苦 瓜 枯 萎 病 原 菌, 结 果 表 明 广 东 苦 瓜 枯 萎 病 由 尖 镰 孢 (F. oxysporum) 侵 染 引 起, 经 5 科 15 种 不 同 属 植 物 接 种 的 专 化 型 研 究 证 明, 属 尖 镰 孢 苦 瓜 专 化 型 (F. oxysporum Schl.f.sp.momordicae Sun S.K. & Huang J.W. ) ( 朱 天 圣 等,1998) 至 今 已 报 道 的 尖 孢 镰 刀 菌 专 化 型 有 35 种, 其 中 已 报 道 瓜 类 枯 萎 病 菌 有 8 个 专 化 型 :1 F. oxysporum Schl. f. sp. cucumerinum Owen 尖 孢 镰 刀 菌 黄 瓜 专 化 型 2 F. oxysporum Schl. f. sp.niveum (E.F.Smith) Snyder&Hansen 尖 孢 镰 刀 菌 西 瓜 专 化 型 3 F. oxysporum Schl. f. sp melonis Snyder&Hansen 尖 孢 镰 刀 菌 甜 瓜 专 化 型 4 F. oxysporum Schl. f. sp.luffae Kwai, Suzuki & Kawai 尖 孢 镰 刀 菌 丝 瓜 专 化 型 5 F. oxysporum Schl. f. sp.lagenariae Matuo & Yamamoto 尖 孢 镰 刀 菌 葫 芦 专 化 型 6 F. oxysporum Schl. f.sp.momordicae Sun S.K.&Huang J.W. 尖 孢 镰 刀 菌 苦 瓜 专 化 型 7 F. oxysporum Schl. f. sp. benincasae Gerlagh M. & Ester A. 尖 孢 镰 刀 菌 冬 瓜 专 化 型 8 F. oxysporum Schl. f. sp. cucurbitacearum Gerlagh M.&Block W.J. 瓜 类 专 化 型 我 国 已 经 明 确 报 道 的 有 西 瓜 甜 瓜 黄 瓜 冬 瓜 葫 芦 专 化 型 ; 苦 瓜 丝 瓜 上 在 海 南 被 发 现 有 镰 刀 菌 枯 萎 病, 专 化 型 正 鉴 定 中 同 时, 同 一 专 化 型 的 枯 萎 病 原 菌 在 不 同 的 地 区, 存 在 着 明 显 的 致 病 性 分 化, 形 成 不 同 的 生 理 小 种 将 西 瓜 甜 瓜 和 冬 瓜 枯 萎 病 菌 专 化 型, 分 别 接 种 于 幼 苗 期 和 成 株 期 7 种 葫 芦 科 作 物 后, 均 严 重 侵 害 专 化 型 寄 主, 而 非 专 化 型 寄 主 一 般 轻 度 受 侵 或 不 受 侵, 各 菌 株 具 有 高 度 选 择 致 病 性, 专 化 性 表 现 较 为 典 型, 同 时 发 现 甜 瓜 枯 萎 病 菌 严 重 侵 害 苗 期 瓠 子 (Lagenarium siceraria Var.hispida)( 吉 加 兵 等,1992) 专 化 型 尖 孢 镰 刀 菌 的 分 化 在 同 工 酶 上 存 在 着 差 异,1989 年 在 郑 州 开 封 两 市 郊 区 采 集 黄 瓜 西 瓜 瓠 瓜 和 冬 瓜 枯 萎 病 株, 经 分 离 鉴 定, 其 病 菌 都 是 尖 孢 镰 刀 菌 尖 孢 镰 刀 菌 菌 酯 酶 同 工 酶 酶 谱 测 定 结 果 表 明,4 个 专 化 型 的 酶 谱 明 显 不 同 ( 吴 营 昌 等,1996) 鉴 别 寄 主 的 抗 感 鉴 定, 可 以 区 别 尖 孢 镰 刀 菌 的 生 理 分 化, 中 国 黄 瓜 枯 萎 病 病 原 菌 为 尖 孢 镰 刀 菌, 经 生 理 小 种 鉴 定, 引 用 Armstrong 等 所 采 用 的 鉴 别 寄 生 MSU8519,MSU44134 PI39265 进 行 抗 或 感 的 反 应 测 定, 结 果 分 别 为 抗 一 抗 - 感 的 反 应, 证 明 国 内 黄 瓜 枯 萎 病 菌 孢 镰 刀 菌 也 存 在 小 种 分 化 ( 黄 仲 生 等,1994) 尖 孢 镰 刀 菌 是 许 多 重 要 作 物 枯 萎 病 的 病 原 真 菌, 迄 今 已 报 道 的 专 化 型 分 化 有 8 多 个, 专 化 型 下 又 划 分 为 许 多 生 理 小 种 专 化 型 和 生 理 小 种 的 鉴 别, 对 于 抗 病 育 种, 植 物 检 疫 以 及 病 害 防 治, 具 有 重 要 的 理 论 和 实 际 意 义 ( 郑 服 丛 等,1995) 3 农 作 物 抗 枯 萎 病 的 研 究 3.1 毒 素 作 用 枯 萎 病 菌 生 长 过 程 会 分 泌 胞 外 毒 素, 通 过 过 滤 枯 萎 病 菌 的 发 酵 液 可 得 到 胞 外 毒 素 利 用 遗 传 背 景 一 致 而 抗 病 性 不 同 的 岱 16 变 异 品 系 和 抗 病 品 种 中 12, 研 究 了 接 种 棉 花 枯 萎 病 菌 (Fusarium oxysporum f.sp. vasinfectum) 及 用 枯 萎 病 菌 粗 毒 素 处 理 后, 棉 苗 维 管 束 的 病 理 变 化 结 果 表 明, 接 种 枯 萎 病 菌 后, 病 株 茎 部 导 管 及 薄 壁 细 胞 中 有 枯 萎 菌 丝 存 在, 粗 毒 素 处 理 能 引 起 棉 苗 维 管 束 的 病 理 变 化 ( 袁 红 旭 等,22) 粗 毒 素 可 用 于 品 种 抗 性 鉴 定, 用 苦 瓜 枯 萎 病 菌 滤 液 - 粗 毒 素 测 定 苦 瓜 不 同 品 种 的 苗 期 抗 性, 所 得 结 果 与 常 规 人 工 苗 期 接 种 鉴 定 结 果 基 本 一 致, 因 此 采 用 病 菌 滤 液 来 测 定 苦 瓜 苗 期 对 枯 萎 病 抗 性 的 方 法 是 可 行 的 ( 饶 雪 琴 等,1999) 3.2 蛋 白 抗 原 通 过 蛋 白 抗 原 的 制 备, 可 进 行 枯 萎 病 菌 的 特 异 性 测 定 以 棉 花 枯 萎 病 菌 菌 株 为 材 料, 用 D.Iannelli 法 提 取 菌 丝 孢 子 蛋 白 抗 原, 按 改 进 的 J.E.Devay 免 疫 方 案 制 备 抗 血 清 琼 脂 双 扩 散 测 得 效 达 1/64, 用 琼 脂 双 扩 散 ( 比 较 ) 对 流 免 疫 电 泳 间 接 ELISA 及 SPA-ELISA 测 定 血 清 的 特 异 性, 用 于 鉴 定 枯 萎 病 菌 的 存 在, 灵 敏 度 较 高 ( 李 启 新 等,1997) 3.3 抗 性 蛋 白 抗 性 等 级 不 同 的 寄 主, 存 在 着 抗 性 蛋 白 的 差 异 用 SDS-PAGE 方 法 分 析 了 4 种 感 枯 萎 病 棉 花 及 其 抗 病 后 代 的 种 子 蛋 白 棉 花 种 子 蛋 白 主 要 有 分 子 量 的 14KD 16KD 23KD 27KD 34KD 41KD 46KD 的 8 种 组 分 抗 病 类 型 及 其 相 关 的 敏 感 品 种 间, 种 子 蛋 白 组 间 差 异 甚 微, 但 蛋 白 组 分 量 有 较 大 差 异 ( 朱 新 产 等,1996) 3.4 同 工 酶 测 定 枯 萎 病 菌 侵 染 寄 主, 能 引 起 寄 主 同 工 酶 的 变 化 在 温 室 盆 栽 条 件 下 研 究 了 丛 枝 菌 根 (Arbuscular Mycorrhiza,AM) 真 菌 Glomus versiforme 和 西 瓜 枯 萎 镰 刀 菌 Fusarium oxysporum f.sp.niveum 对 西 瓜 根 系 中 过 氧 化 物 酶 (POD), 苯 丙 氨 酸 解 氨 酶 (PAL),β-1,2- 葡 聚 糖 酶 和 几 丁 质 酶 活 性 的 影 响 较 大 ( 李 敏 等,21) 利 用 过 氧 化 物 酶 同 工 酶 酶 谱 鉴 定 西 瓜 黄 瓜 不 同 品 种 的 抗 枯 萎 病 能 力, 结 果 发 现, 高 抗 种 抗 病 品 种 在 接 菌

15 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 15 后 过 氧 化 物 酶 同 工 酶 没 有 新 生 酶 带 出 现 或 出 现 很 少 ; 感 病 品 种 在 接 菌 后 有 新 生 酶 带 出 现, 感 病 愈 重, 新 生 酶 带 愈 多 ( 王 守 正 等,21) 镰 刀 菌 枯 萎 病 的 侵 染 使 寄 主 黄 瓜 根 部 的 苯 丙 氨 酸 解 氨 酶 过 氧 化 物 酶 和 多 酚 氧 化 酶 活 性 增 加, 抗 病 感 病 各 品 种 的 3 种 酶 活 性 曲 线 均 呈 现 两 个 峰 值, 抗 病 各 品 种 酶 活 性 峰 I 值 比 感 病 品 种 高 ( 徐 建 华 等,1995) 3.5 DNA 导 入 肖 光 辉 等 综 述 了 外 源 DNA 直 接 导 入 技 术 的 原 理 方 法 和 技 术 特 点 ; 瓠 瓜 枯 萎 病 抗 性 导 入 西 瓜 的 方 法, 后 代 性 状 的 变 异 与 抗 枯 萎 病 材 料 和 抗 性 组 合 的 选 育 结 果, 以 及 西 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 所 取 得 的 突 破 性 进 展 ( 肖 光 辉 等,22) 通 过 3keV 不 同 剂 量 的 Ar + 注 入 和 DNA 溶 液 浸 滴 法, 将 比 克 氏 棉 和 红 麻 DNA 导 入 泗 棉 2 号, 结 果 表 明 : 离 子 注 入 可 显 著 地 促 进 外 源 DNA 导 入 受 体, 增 加 受 体 后 代 性 状 的 变 异 频 率 和 变 异 类 型, 而 且 多 数 变 异 可 迅 速 趋 于 稳 定 在 供 试 剂 量 中, 以 Ar + 为 最 佳 ( 程 备 久 等,1996) 利 用 外 源 DNA 导 入 生 物 技 术, 并 结 合 病 圃 连 续 定 向 培 育, 获 得 的 棉 花 新 品 系 , 经 大 面 积 重 病 地 试 验 示 范, 不 仅 表 现 有 良 好 的 抗 ( 耐 ) 棉 花 枯 萎 病 性, 尚 兼 有 丰 产 优 质 性 进 而 验 证 了 该 技 术 用 于 棉 花 抗 病 育 种 的 可 行 性 ( 闫 春 吟 等,22) 3.6 转 基 因 技 术 用 花 粉 管 通 道 法 将 菜 豆 几 丁 质 酶 基 因 与 烟 草 β-1 3 葡 聚 糖 酶 基 因 双 价 植 物 表 达 载 体 pblgc 导 入 新 疆 棉 花 主 栽 品 种 ( 系 ) 系 石 远 321 通 过 卡 那 霉 素 检 测 PCR-Southern 验 证 抗 黄 萎 病 枯 萎 病 性 筛 选, 得 到 抗 病 性 良 好 且 遗 传 性 稳 定 的 转 基 因 棉 花 ( 乐 锦 华 等,22) 3.7 凝 集 素 分 析 用 PH7.2,.5mol/L Tris-HCL 缓 冲 液 从 高 抗 枯 萎 病 棉 花 品 种 86-1 种 子 脱 脂 粉 中 抽 提 出 棉 花 凝 集 素, 测 定 其 专 一 性 结 合 糖, 结 果 表 明 : 棉 花 凝 集 素 的 专 一 性 结 合 糖 是 D- 半 乳 糖 N- 乙 酰 -D- 氨 基 葡 萄 糖 D - 葡 萄 糖, 棉 花 凝 集 素 最 适 PH 为 6-8, 具 有 较 高 的 抗 热 性 ( 蔡 马 等,1996) 研 究 了 FITC 或 HRP 标 记 的 棉 花 凝 集 与 枯 萎 病 菌 丝 体 作 用 后, 在 荧 光 显 微 镜 下 或 扫 描 电 镜 下 可 以 清 晰 地 看 到 FITC- 凝 集 素 或 HRP- 凝 集 素 - 受 体 复 合 物 在 菌 丝 体 上 的 均 匀 分 布 实 验 表 明, 纯 化 的 棉 花 凝 集 素 对 棉 花 枯 萎 病 菌 丝 体 的 生 长 有 较 强 的 抑 制 作 用 ( 曾 仲 奎 等,1995) 通 过 几 丁 质 柱 层 析 和 SephadexG-75 过 滤, 得 到 SDS-PAGE 电 泳 显 一 条 蛋 白 带, 专 性 结 合 甘 露 糖 和 葡 萄 糖, 能 凝 集 兔 血 红 细 胞 的 棉 花 凝 集 素, 分 子 量 为 134 利 用 电 镜 和 凝 集 素 探 针 检 测 棉 花 枯 萎 病 菌 分 生 孢 子 表 面 结 构, 发 现 分 生 孢 子 壁 的 骨 架 成 份 是 几 丁 质 ( 刘 士 庄 等,1996) 4 农 作 物 枯 萎 病 的 生 物 防 治 4.1 生 物 防 治 的 优 势 生 物 防 治 有 许 多 的 好 处 ; 一 是 可 以 挖 掘 常 规 品 种 的 利 用 潜 力, 象 一 些 非 重 病 田 可 以 采 用 常 规 品 种 和 行 之 有 效 的 生 防 措 施 相 结 合, 获 得 更 好 的 收 成 ; 二 是 可 以 延 长 抗 病 品 种 的 使 用 寿 命, 可 以 使 抗 病 品 种 抗 病 性 能 更 好, 丰 产 性 和 优 质 性 接 近 常 规 品 种 ; 三 是 可 以 避 免 出 现 类 似 化 学 药 剂 使 用 后 病 原 菌 产 生 抗 性 等 等 同 时, 枯 萎 病 生 防 资 源 丰 富, 陈 三 凤 等 从 几 十 种 作 物 的 根 际 和 叶 围 分 离 获 得 35 株 微 生 物, 其 中 细 菌 和 放 线 菌 分 别 为 2 株 和 15 株, 对 所 有 这 些 分 离 物 进 行 了 抑 制 真 菌 试 验 和 几 丁 质 酶 活 性 测 定 抑 菌 试 验 中 以 棉 花 枯 萎 病 菌 棉 花 黄 萎 病 菌 黄 瓜 枯 萎 病 菌 及 西 瓜 枯 萎 病 菌 作 为 供 试 病 原 菌 ( 陈 三 凤 等,1994) 对 来 自 以 色 列 和 中 国 的 分 属 Enterobacter,Pseudomonas 和 Bacillus 三 个 属 9 个 菌 株 的 室 内 测 试 结 果 表 明, 基 中 几 个 菌 株 对 Rhizoctonia solani 和 Fusarium meloni 具 有 很 强 的 拮 抗 能 力 和 对 几 丁 质 具 有 很 强 的 分 解 能 力, 其 抗 菌 活 性 物 质 因 对 象 菌 的 不 同 可 分 别 表 现 抑 菌 作 用 或 杀 菌 作 用 ( 吴 加 志 等,1996) 4.2 真 菌 类 生 防 菌 生 防 真 菌 中 研 究 应 用 较 多 的 有 木 霉 属 真 菌 (Trichoderma) 丛 技 菌 根 真 菌 (Arbuscular Mycorrhize,AM) 非 致 病 尖 孢 镰 刀 菌 木 霉 分 布 广 泛, 极 易 分 离 和 培 养. 可 以 在 许 多 基 物 上 迅 速 生 长. 对 多 种 病 原 菌 有 抑 制 作 用, 是 一 种 理 想 的 生 防 菌 木 霉 的 生 防 机 制 目 前 认 为 主 要 有 重 寄 生 抗 生 和 竞 争 作 用 已 报 道 用 于 防 治 枯 萎 病 的 有 哈 次 木 霉 (Trichoderma harzianum) 和 绿 色 木 霉 (Trichoderma viride) 电 镜 扫 描 表 明, 哈 茨 木 霉 菌 对 枯 萎 菌 丝 有 强 烈 的 寄 生 作 用, 产 生 吸 器 直 接 穿 入 枯 萎 菌 丝, 分 泌 胞 外 溶 菌 酶, 从 而 减 轻 病 害 AM 菌 根 是 自 然 界 普 遍 存 在 的 一 类 真 菌 与 植 物 根 系 建 立 的 互 惠 共 生 体, 它 可 促 进 共 生 植 物 的 生 长, 增 强 植 株 的 抗 逆 性, 应 用 AM 真 菌 防 治 枯 萎 病 是 利 用 它 与 镰 刀 菌 存 在 的 竞 争 关 系 非 致 病 尖 孢 镰 刀 菌 的 利 用 是 应 用 了 弱 株 系 交 互 保 护 作 用 原 理, 不 同 尖 镰 抱 菌 株 间 都 存 在 有 不 同 程 度 的 诱 导 抗 性 作 用 然 而 作 为 微 生 物 之 间 的 这 种 干 扰 作 用, 往 往 因 各 种 因 素 的 影 响 而 降 低 效 果, 同 时 在 大 面 积 应 用 上, 必 须 考 虑 选 用 无 致 病 力 或 致 病 力 很 弱 的 尖 镰 孢 菌, 并 注 意 防 止 新 选 择 的 诱 导 菌 的 致 病 性 变 异 问 题, 否 则 产 生 的 后 果 将 不 堪 设 想 吴 石 平 等 研 究 了 木 霉 菌 与 微 量 三 唑 酮 配 合 使 用 对 西 瓜 枯 萎 病 的 防 效 和 对 寄 主 生 长 根 系 发 育 及 根 分 泌 物 的 影 响 木 霉 菌 与 微 量 三 唑 酮 配 合 对 防 治 西 瓜 枯 萎 病 有 增 效 作 用, 在 药 砂 培 处 理 的 西 瓜 根 分 泌 物 作 用 下, 尖 孢 镰 刀 菌 厚 垣 孢 子 萌 发 率 较 水 砂 培 处 理 低 ( 吴 石 平 等,22) 将 土 壤 中 分 离 出 的 木 霉 菌 株 (T41), 通 过 对 峙 法 对 尖 镰 孢 菌 进 行 了 体 外 拮 抗 作 用 测 定 评 价, 并 利 用 制 备 的 木 霉 生 防 菌 剂 对 番 茄 枯 萎 病 进 行 了 室 内 盆 栽 防 治 试 验 结 果 表 明 : 木 霉 T41 对 番 茄 枯 萎 病 的 防 效 达 86%, 并 具 有 防 效 长 久 和 刺 激 作 物 生 长 的 作 用 ( 田 连 生 等,21) 离 体 培 养 测 定 表 明, 黄 枯 萎 病 原 真 菌 和 木 霉 单 独 培 养 均 符 合 S 生 长 曲 线 病 菌 与 木 霉 对 峙 培 养 及 病 菌 在 涂 木 霉 培 养 基 中 生 长, 培 养 6 天 后 比 较 病 菌 菌 落 半 径, 结 果 表 明, 病 原 真 菌 生 长 受 到 极 大 限 制, 且 部 分 病 菌 菌 丝 死 亡 病 菌 在 一 定 浓 度 棉 萎 灵 中 培 养, 生 长 缓 慢, 但 符 合 生 长 曲 ( 陈 建 爱 等,22) 从 土 壤 中 分 离 得 到 的 4 种 拮 抗 真 菌 (Trichoderma koningii, T. pseudokoningii, T. harzianum 和 Gliocladium sp) 分 别 用 紫 外 光 诱 变, 得 到 抗 氧 氮 化 铜 扑 海 因 和 多 菌 灵 的 变 异 菌 株, 这 些 变 异 菌 株 对 西 瓜 枯 萎 病 具 有 抑 制 作 用 ( 黎 起 秦 等,2) 4.3 细 菌 类 生 防 菌 目 前 研 究 证 明, 有 18 个 属 的 细 菌 在 植 物 土 传 病 害 生 防 上 有 潜 力, 生 防 细 菌 的 抑 菌 机 制 主 要 有 营 养 基 质 的 竞 争 和 生 态 位 的 排 斥, 嗜 铁 素 和 抗 菌 素 细 菌 在 其 生 长 环 境 里 能 分 泌 胞 外 活 性 物 质, 细 菌 素 是 其 中 的 一 大 类, 它 具 有 很 强 的 拮 抗 专 化 性 利 用 产 细 菌 素 菌 株 防 治 植 物 病 害 的 研 究 有 许 多 成 功 报 道, 在 实 际 应 用 中 也 取 得 了 一 定 的 效 果 在 枯 萎 病 的 防 治 中, 已 有 报 道 的 有 萤 光 假 单 胞 细 菌 (fluorescent Pseudomonas spp.) 恶 臭 假 单 胞 杆 菌 和 芽 孢 杆 菌 属 (Bacillus spp.), 其 中 研 究 最 多 的 是 芽 抱 杆 菌 芽 孢 杆 菌 属 已 在 许 多 种 作 物 上 进 行 了 广 泛 的 控 制 病 虫 害 能 力 的 测 试, 芽 孢 杆 菌 用 于 植 物 土 传 病 害 防 治 的 例 子 很 多, 而 且 芽 孢 杆 菌 不 仅 有 防 病 作 用, 而 有 增 产 作 用 由 于 这 个 种 群 能 产 生 耐 热 耐 干 燥 的 厚 沿 孢 子. 且 分 布 广 泛, 极 易 分 离 培 养, 批 量 生 产 广 工 艺 简 单, 成 本 也 比 较 低. 施 用 方 便 和 贮 藏 期 长, 也 是 一 种 理 想 的 生 防 微 生 物 平 板 共 生 培 养 测 定 表 明,B36-1 菌 对 供 试 的 8 种 植 物 病 原 真 菌 均 有 不 同 程 度 的 拮 抗 性, 其 中 含 B36-1 菌 活 菌 体 液 剂 对 玉 米 小 斑 病 菌 小 麦 赤 霉 病 菌 黄 瓜 炭 疽 病 菌 棉 花 枯 萎 病 菌 和 水 稻 恶 苗 病 菌 菌 丝 生 长 抑 制 率 依 次 为 8.22% 8.5% 77.75% 75.3%( 王 明 祖 等,1996) APS 抗 真 菌 多 肽 是 一 种 由 蜡 状 孢 杆 菌 产 生 的 新 型 抗 真 菌 环 多 肽, 研 究 表 明, APS 具 有 广 谱 抗 菌 性, 对 棉 花 枯 萎 病 等 种 病 原 真 菌 及 黑 曲 霉 的 孢 子 萌 发 具 强 烈 的 抑 制 作 用, 最 小 的 MIC 达 2.5μg m1-1, 对 真 菌 的 生 长 亦 具 有 强 烈 的 抑 制 作 用, 随 着 APS 处 理 浓 度 的 增 加, 抑 制 作 用 增 强 ( 刘 建 国 等,1999) 拮 抗 菌 BS-98 菌 株 在 BPY 液 体 培 养 基 中 产 生 的 蛋 白 质 经 硫 酸 铵 分 级 盐 析 Sephadex G-1 柱 层 析 DEAE- 纤 维 素 柱 层 析 和 Sephadex G-1 柱 再 层 析 后, 分 离 纯 化 得 到 的 抗 菌 蛋 白 在 电 泳 中 显 现 出 三 条 带, 经 初 步 纯 化 的 抗 菌 蛋 白 对 热 稳 定 ( 胡 剑 等,1997) 孔 建 等 报 道 枯 草 芽 孢 杆 菌 B-93 菌 株 对 棉 枯 萎 病 等 多 种 土 传 镰 刀 菌 和 苹 果 轮 纹 病 等 的 抑 菌 活 性 电 镜 和 光 学 镜 观 察 证 实, 该 菌 抗 菌 物 质 可 使 病 菌 细 胞 畸 形, 胞 内 物 质 外 泄 和 细 腻 壁 崩 溃 盆 栽 和 田 间 试 验, 证 明 以 B-93 菌 液 浸 种 可 显 著 降 低 棉 炭 疽 病 等 棉 苗 丰 和 菠 菜 枯 萎 病 ( 孔 建 等,1999) 许 煜 泉 等 设 计 了 一 种 新 的 高 效 筛 选 程 序, 从 植 物 根 际 土 壤 中 分 离 出 一 株 具 有 ACC 脱 氨 酶 活 性 的 促 生 拮 抗 双 功 能 假 单 胞 菌 株 M18 在 培 养 皿 中,M18 能 有 效 地 抑 制 黄 瓜 枯 萎 病 菌 以 及 多 种 其 他 枯 萎 病 原 菌 和 植 物 病 原 菌 的 生 长 M18 活 菌 浸 种 处 理 春 黄 瓜 种 子 以 及 在 大 棚 定 植 后, 根 际 土 壤 病 原 菌 显 著 减

16 16 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 少, 对 黄 瓜 幼 苗 的 根 系 具 有 明 显 的 促 进 作 用 ( 许 煜 泉 等,1999; 王 灿 华 等,2) 4.4 链 霉 菌 生 防 菌 链 霉 菌 生 防 菌 通 过 分 泌 抗 菌 素, 抑 制 枯 萎 病 菌 的 生 长, 达 到 控 病 的 目 的 通 过 室 内 和 田 间 试 验 测 定 了 从 小 麦 根 际 筛 选 的 一 株 链 霉 菌 (Streptomyces spp.)s-5 对 棉 花 苗 期 病 害 根 腐 病 红 腐 病 炭 疽 病 和 棉 花 枯 黄 萎 病 菌 的 防 病 效 果 抑 菌 作 用 测 定 结 果 表 明, 链 霉 菌 S-5 具 有 广 谱 抑 菌 作 用, 对 棉 花 枯 黄 萎 病 菌 抑 菌 作 用 明 显 ( 张 克 诚 等,22) 以 西 瓜 枯 萎 病 菌 为 实 验 菌, 研 究 了 中 生 菌 素 ( 链 霉 菌 的 一 种 ) 对 丝 状 真 菌 的 作 用 结 果 表 明 : 中 生 菌 素 能 显 著 地 引 起 菌 丝 细 胞 内 原 生 质 凝 集, 对 病 原 菌 孢 子 的 萌 发 具 有 强 烈 的 抑 制 作 用,2.5μg/mL 完 全 抑 制 孢 子 萌 发, 并 具 有 杀 死 作 用, 对 孢 子 的 形 成 有 较 强 的 阻 碍 作 用 ( 蒋 细 良 等,1997) 农 抗 12 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 抑 制 作 用 结 果 表 明, 农 抗 12 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 孢 子 的 萌 发 和 菌 丝 的 形 态 无 明 显 影 响, 对 孢 子 的 形 成 和 菌 丝 生 长 有 一 定 抑 制 作 用, 能 够 提 高 西 瓜 幼 苗 抗 枯 萎 病 菌 毒 素 致 萎 的 能 力 和 幼 苗 体 内 过 氧 化 物 酶 活 性 ( 蒋 细 良 等,1998) 田 间 试 验 表 明 生 物 杀 菌 剂 农 抗 12 对 西 瓜 枯 萎 病 具 有 一 定 的 防 治 效 果, 对 其 防 病 机 理 进 行 了 初 步 研 究 表 明 :2% 农 抗 12 水 剂 对 其 菌 丝 生 长 具 有 明 显 的 抑 制 作 用, 同 时 还 可 以 抑 制 小 孢 子 的 萌 发 ( 韩 巨 才 等,1995) 4.5 几 丁 糖 作 用 观 察 了 由 蝇 蛆 壳 制 备 而 成 的 几 丁 糖 ( 壳 聚 糖 ), 在 PH5.6 1mg/ ml 时 16 种 常 见 植 物 病 原 真 菌 的 生 长 抑 制 作 用, 以 及 几 丁 糖 含 量 分 别 在 mg/ml 时 对 菌 丝 生 长 的 抑 制 情 况, 发 现 几 丁 糖 具 有 广 谱 抑 菌 特 性, 而 且 随 几 丁 糖 浓 度 的 提 高 抑 制 作 用 加 强 ( 赖 凡 等,1998) 4.6 诱 导 抗 性 枯 萎 病 非 致 病 菌 株 能 诱 导 寄 主 的 抗 病 机 制 王 守 正 等 研 究 了 西 瓜 黄 瓜 对 枯 萎 病 和 炭 疽 病 的 诱 导 抗 病 机 制 结 果 发 现 : 西 瓜 黄 瓜 经 枯 萎 病 非 致 病 菌 株 诱 导 后 与 抗 病 性 有 关 的 过 氧 化 物 酶 多 酚 氧 化 酶 苯 丙 氨 酸 解 氨 酶 活 性 明 显 增 强 ; 酚 类 物 质 和 木 质 素 含 量 增 多 西 瓜 黄 瓜 对 枯 萎 病 的 诱 导 抗 病 机 制 和 黄 瓜 对 炭 疽 病 的 诱 导 抗 病 机 制 基 本 一 致 ( 王 守 正 等,21) 研 究 了 西 瓜 黄 瓜 对 枯 萎 病 和 炭 疽 病 的 诱 导 抗 病 性, 结 果 表 明 : 用 从 西 瓜 维 管 束 中 分 离 到 的 尖 孢 镰 刀 菌 非 致 病 菌 株 F-3 和 茄 病 镰 刀 菌 非 致 病 株 F5-1 诱 导 处 理 西 瓜 幼 苗, 能 使 西 瓜 产 生 对 枯 萎 病 的 抗 性, 非 致 病 菌 与 致 病 接 种 间 隔 天 数 越 多, 诱 导 抗 病 效 果 越 好 ( 王 守 正 等,21) 黄 瓜 枯 萎 菌 [Fusarium oxysporum (Schl.) f.sp. cucumerinum Owen] 能 诱 导 黄 瓜 几 丁 酶 的 积 累, 但 在 诱 导 的 速 度 和 强 度 上, 抗 病 品 种 和 感 病 品 种 有 明 显 的 差 异 抗 病 品 种 津 杂 四 号 积 累 的 幅 度 远 大 于 感 病 品 种 研 四 号, 升 高 的 幅 度 是 泽 研 四 号 的 2.8 倍 ( 史 娟 等,21) 4.7 益 微 菌 作 用 益 微 菌 是 一 类 有 益 微 生 物 制 剂 的 简 称, 对 枯 萎 病 具 有 抑 制 作 用 用 平 板 测 定 与 生 测 法 相 结 合, 针 对 棉 花 枯 萎 病 菌, 将 益 微 菌 AB34-2,AB272 与 病 原 菌 导 入 植 物 体 中, 测 定 益 微 菌 的 抑 制 能 力, 结 果 表 明, 在 平 板 培 养 基 中, 对 枯 萎 病 菌 具 有 较 强 抑 菌 能 力, 被 抑 制 枯 萎 病 菌 的 分 生 孢 子 数 减 少, 在 植 物 体 中, 两 种 益 微 菌 对 棉 花 的 生 长 具 有 促 进 作 用 ( 缪 卫 国 等,1998) 5 农 作 物 枯 萎 病 的 化 学 防 治 5.1 杀 菌 剂 (1) 咪 唑 类,4% 灭 菌 净 是 以 有 机 硫 咪 唑 类 农 药 添 加 助 剂 复 配 而 成 的 新 型 杀 菌 剂 福 美 双 多 菌 灵 在 PSA 培 养 基 上 测 得 对 稻 恶 苗 病 菌 EL5 分 别 为 2.437μg/mL,4.6μg/mL; 配 成 混 剂 后 的 EL5 为.266 μg/ml,sr 为 1.891, 证 实 混 剂 有 明 显 增 效 作 用, 配 比 科 学 合 理 同 时, 经 浙 江 江 西 多 点 小 区 试 验, 对 稻 恶 苗 病 菌 具 有 较 好 的 抑 制 作 用 ( 诸 葛 龙 等,21) (2) 安 索 菌 毒 清,5% 安 索 菌 毒 清 防 治 棉 花 枯 萎 病 具 有 一 定 的 防 效, 防 效 达 36.5%-51.7%, 且 随 浓 度 升 高 防 效 增 加, 生 产 上 应 用 采 用 2 倍 液,2mg/ 穴, 定 苗 后 灌 根, 生 长 期 灌 根 二 次 ( 杨 世 刚 等,1995) (3) 华 光 霉 素, 通 过 测 定 2 种 助 剂 对 华 光 霉 素 制 剂 的 影 响, 结 果 筛 选 到 4 种 对 华 光 霉 素 的 抑 菌 作 用 较 为 理 想 的 助 剂, 对 西 瓜 枯 萎 病 菌, 棉 花 枯 萎 病 菌 和 苹 果 轮 纹 病 菌 防 效 较 高, 田 间 试 验 示 范 结 果 表 明, 助 剂 Z-7(.3 ) 和 华 光 霉 素 (12.5μg/ml) 的 混 合 液 对 苹 果 叶 螨 的 防 治 效 ( 朱 昌 雄 等,1999) (4) 菌 线 威, 用 不 同 剂 量 的 菌 线 威 在 西 瓜 定 植 和 膨 瓜 期 进 行 灌 根 试 验, 结 果 表 明 : 每 67.5 m 2 计 9 株 西 瓜, 每 次 用 菌 线 威 9 7 5g 兑 水 45kg, 于 定 植 时 和 膨 瓜 初 期 2 次 灌 根 对 枯 萎 病 的 防 治 效 果 较 好, 尤 以 每 次 用 菌 线 威 9g 兑 水 45kg 的 处 理 效 果 最 好, 在 连 续 2 年 重 茬 田 中 应 用 后, 西 瓜 枯 萎 病 病 情 指 下 降 ( 徐 宗 刚 等,22) (5) 丰 抗 素, 通 过 27-1 丰 抗 素 在 棉 花 各 生 育 期 用 不 同 剂 量 次 数 喷 施 后, 结 果 表 明, 丰 抗 素 对 棉 花 枯 萎 病 有 一 定 的 抑 制 作 用, 防 治 效 果 分 别 达 36.46%-39.82% 介 于 在 没 有 抗 病 品 种 和 钉 菌 剂 的 情 况 下, 应 用 丰 抗 素 可 增 加 植 株 的 抗 逆 能 力, 减 轻 枯 萎 病 的 发 生, 起 到 防 病 的 效 果 ( 何 海 芬 等,2) (6) 硅 唑 类, 合 成 了 2 个 新 型 含 硅 唑 类 化 合 物, 其 化 学 结 构 经 IR,MS,1HNMR 和 元 素 分 析 确 证 生 物 活 性 测 定 显 示 一 些 化 合 物 对 棉 花 枯 萎 病 菌 等 有 较 好 的 抑 制 活 性, 一 些 化 合 物 对 黄 瓜 灰 霉 病 菌 的 抗 性 菌 有 很 好 的 活 性 讨 论 了 化 合 物 的 结 构 与 生 物 活 性 关 系 ( 李 文 明 等,1995) (7) 二 硝 基 苯 胺 类, 棉 花 感 病 品 种 种 入 含 二 硝 基 苯 胺 类 化 合 物 的 育 苗 土 中, 移 栽 后 能 明 显 提 高 对 棉 枯 萎 病 的 抗 性, 效 果 达 7% 二 硝 基 苯 胺 类 化 合 物 为 非 杀 菌 化 合 物 试 验 表 明, 该 化 合 物 对 FOV 的 生 长 无 抑 制 作 用, 反 而 还 能 刺 激 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 FOV 对 处 理 过 的 棉 苗 侵 染 率 低, 且 只 能 侵 ( 葛 银 林 等,1995) (8) 枯 萎 立 克, 在 棉 花 枯 萎 病 重 发 棉 田, 用 5 倍 枯 萎 立 克 在 棉 花 苗, 蕾 期 各 喷 施 一 次 能 有 效 降 低 棉 花 枯 萎 病 发 病 率, 显 著 提 高 棉 花 保 苗 效 果, 能 显 著 提 高 棉 花 产 量, 增 加 植 棉 经 济 效 益 ( 郑 仁 富 等,1999) (9) 铜 制 剂, 通 过 铜 大 师 不 同 比 例 拌 种 灌 根 和 喷 施, 对 棉 花 苗 期 的 根 腐 病 立 枯 病 枯 萎 病 均 有 防 治 效 果, 使 三 种 病 发 病 晚 发 病 轻 增 强 无 病 区 的 免 疫 能 力, 同 时 对 棉 花 生 育 也 有 促 进 作 用 其 中 拌 种 灌 根 叶 面 喷 施 以 8 倍 液 效 果 最 好, 防 治 效 果 分 别 达 83.84%-69.62% ( 罗 巨 海 等,22) 5.2 除 草 剂 ( 氟 乐 灵 ) 田 间 试 验 结 果, 除 草 剂 氟 乐 灵 48% 乳 油 以.86kg/hm2 作 棉 苗 播 前 土 壤 处 理, 可 明 显 减 轻 棉 花 枯 萎 病 的 发 生, 在 现 苗 期, 施 用 氟 乐 灵 后 对 感 病 品 种 沪 棉 211 和 抗 病 品 种 中 棉 12 枯 萎 病 株 发 病 率 的 防 治 效 果 分 别 48.25%-69.42% 和 49.41%-7( 宋 凤 鸣 等,1994) 分 析 了 氟 乐 灵 (2μg/g 土 ) 诱 发 处 理 及 枯 萎 病 菌 侵 染 后 棉 苗 叶 片 和 根 茎 部 不 同 细 胞 定 位 过 氧 化 物 酶 (POD) 活 性 的 变 化 结 果 表 明 :(1) 总 可 溶 性 POD 胞 内 POD 胞 间 POD 以 及 细 胞 壁 结 合 型 POD 的 活 性 抗 病 品 种 高 于 感 病 品 种 ;(2) 氟 乐 灵 诱 发 处 理 及 枯 萎 病 ( 宋 凤 鸣 等,1997) 田 间 试 验 在 棉 花 苗 病 和 枯 萎 病 常 年 发 病 田 进 行 以 175ml48% 氟 乐 灵 乳 油 /666.7m2 的 剂 量 处 理 苗 床 地 表 土, 播 种 棉 籽 后 以 含 氟 乐 灵 (1.-1.5mg 有 效 成 分 /kg 土 ) 的 土 壤 覆 盖 以 清 水 处 理 为 对 照, 结 果 表 明 L 氟 乐 灵 处 理 组 的 出 苗 率 高 于 对 照 ( 宋 凤 鸣 等,1995) 5.3 增 抗 剂 用 83 增 抗 剂 防 治 西 瓜 枯 萎 病, 试 验 结 果 表 明,83 增 抗 剂 对 西 瓜 枯 萎 病 具 有 较 好 的 防 治 效 果, 且 增 产 显 著 使 用 方 法 : 种 子 处 理 用 5kg 种 姜 拌 4g 菌 剂 ; 灌 根 用 6kg/hm2 剂 量, 对 水 5 倍 ( 卢 灿 坤 等,1999) 3.4- 亚 甲 二 氧 基 苯 甲 酸 酯, 是 一 种 重 要 的 精 细 化 学 品, 广 泛 地 用 作 合 成 香 料, 高 档 防 霉 抗 菌 剂, 抗 肿 瘤 和 防 治 高 血 压 的 药 物, 以 及 治 疗 小 麦 粉 锈 病, 柑 桔 菌 致 枯 萎 病 等 植 物 病 症 高 效 农 药 的 中 间 5.4 种 子 胞 衣 用 本 所 研 制 的 蔬 菜 种 衣 剂 对 黄 瓜 黑 星 病 发 疽 病 枯 萎 病 菌 核 病 马 铃 薯 晚 疫 病 病 菌 进 行 杀 菌 效 果 试 验, 抑 菌 率 达 67-1%, 差 异 极 显 著 ; 对 经 包 衣 处 理 的 黄 瓜 种 子 进 行 表 面 和 内 部 杀 菌 效 果 试 验, 灭 菌 效 果 达 1% ( 马 文 荷 等,1999) 棉 花 枯 萎 病 首 先 于 1891 年 在 美 国 亚 拉 巴 马 州 发 现, 现 在 除 澳 大 利 亚 外 几 乎 遍 及 世 界 各 产 棉 国 抗 病 机 制 是 由 于 物 理 阻 碍 或 化 学 抑 菌 作 用 所 致, 或 者 是 两 者 同 时 存 在 的 结 果, 但 化 学 抑 菌 起 着 主 导 作 用 ( 何 旭 平 等,1999) 6 农 作 物 枯 萎 病 的 农 业 防 治 6.1 嫁 接 砧 木 用 六 个 常 用 的 南 瓜 (Cucurbita moschata Duch.) 砧 木 品 种 嫁 接 网 纹 甜

17 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 17 瓜 (Cucumis melo L.var reticulatus Nand.) 试 验 结 果 表 明 : 网 纹 甜 瓜 嫁 接 后, 可 大 大 降 低 枯 萎 病 (Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum),( 陈 幼 源 等,22) 6.2 家 畜 沤 肥 家 畜 沤 肥 浸 渍 液 对 黄 瓜 枯 萎 病 具 有 一 定 的 防 治 效 果, 猪 粪, 马 粪 和 牛 粪 沤 肥 浸 渍 液 的 防 治 效 果 分 别 为 %, % 和 % 机 理 研 究 结 果 表 明 :(1) 沤 肥 浸 渍 液 对 黄 瓜 枯 萎 病 菌 的 小 孢 子 萌 发 具 有 明 显 的 抑 制 效 果 ( 马 利 平 等,1999) 家 畜 沤 肥 浸 渍 液 对 青 枯 萎 病 具 有 显 著 防 治 效 果, 其 中 猪 粪 沤 肥 浸 液 在 温 室 盆 栽 的 防 治 效 果 为 88.5%, 马 粪 牛 粪 沤 肥 浸 渍 液 在 温 室 盆 栽 的 防 治 效 果 分 别 为 56.6% 和 65.5%( 马 利 平 等,21) 6.3 无 土 栽 培 在 无 土 栽 培 条 件 下 对 不 同 的 网 纹 甜 瓜 品 种 进 行 两 种 不 同 的 整 枝 方 法 和 没 的 单 株 留 瓜 数 试 验, 结 果 表 明 : 双 杆 整 枝 株 2 个 瓜 的 产 量 最 高 果 实 品 质 也 较 理 想 ; 但 以 单 杆 整 枝 朱 留 1 个 抓 的 果 实 外 观 可 深 性 固 形 物 含 量 果 实 秀 品 率 等 品 质 指 标 都 最 好 ( 陈 幼 源 等,2) 6.4 控 施 氮 肥 在 相 同 环 境 条 件 下, 观 察 了 施 肥 种 类 数 量 时 期 方 法 对 蔬 菜 西 瓜 病 虫 害 发 生 危 害 衣 其 产 量 的 影 响 结 果 表 明, 花 椰 菜 黑 腐 病 菜 青 虫 西 瓜 枯 萎 病 的 危 害 随 施 氮 量 增 加 而 严 重, 当 施 氮 量 吻 合 作 物 各 个 品 种 的 耐 肥 能 力 时, 病 虫 危 害 显 著 减 轻, 增 产 率 明 显 提 高 ( 陈 一 杭 等,1995) 6.5 金 属 阳 离 子 林 福 呈 等 研 究 了 五 种 二 价 金 属 阳 离 子 化 合 物, 即 CaC12,MgC12, CuSO4,MnC12 和 CoC12 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 厚 垣 孢 子 发 芽 管 生 长 的 影 响 ( 林 福 呈 等,1996) 6.6 生 物 液 肥 报 道 腐 植 酸 类 液 肥 生 物 活 性 的 3 种 检 验 方 法,(1) 用 大 蒜 水 培 法 测 定 促 进 作 物 生 长 ;(2) 用 菜 豆 有 或 黄 瓜 的 叶 片 测 定 气 孔 开 张 度 ;(3) 用 棉 花 黄 萎 病 菌 和 枯 萎 病 菌 平 皿 培 养 法 作 抑 菌 和 杀 菌 试 验, 这 些 方 法 的 效 果 很 显 著 并 与 腐 植 酸 浓 度 相 关 ( 边 文 骅 等,1999) 在 保 护 地 黄 瓜 栽 培 中 应 用 禾 康 生 物 液, 对 真 菌 性 病 害 进 行 防 治 效 果 试 验, 结 果 表 明 : 禾 康 生 物 液 稀 释 5 倍, 采 用 浸 种 方 法 处 理, 防 治 立 枯 病 效 果 达 到 94.77%; 稀 释 1 倍 用 其 灌 根, 防 治 枯 萎 病 效 果 达 到 91.79%( 马 晓 军 等,1998) 6.7 稀 土 肥 料 本 试 验 对 稀 土 提 高 棉 花 抗 枯 萎 病 和 增 产 作 用 进 行 了 研 究, 结 果 表 明,3mg/kg 稀 土 溶 液 处 理 种 了, 发 病 率 可 降 低 18.96~11.45%, 病 情 指 数 降 低 25.6~17.43, 相 对 防 效 分 别 为 29.19~39.3% 西 瓜 专 用 药 肥 92-4 在 西 瓜 重 点 产 区 经 几 年 多 点 试 验 示 范, 结 果 证 明 在 一 般 轮 作 栽 培 条 件 下, 每 亩 用 4kg 穴 施 作 基 肥, 具 有 明 显 的 刺 激 西 瓜 生 长, 促 进 早 熟 高 产 的 作 用, 示 范 田 平 均 每 亩 增 产 商 品 瓜 435kg, 增 产 率 34.8% 对 西 瓜 枯 萎 病 的 大 田 防 治 效 果 平 均 达 67%( 储 国 良 等,1994) 6.8 播 种 期 调 节 抑 病 对 棉 花 抗 感 枯 萎 病 品 种 在 春 播 和 夏 播 的 2-3 叶 期 6-7 叶 期 和 现 蕾 期 进 行 了 根 际 真 菌 区 系 分 析, 结 果 表 明 : 第 一 品 种 都 有 自 己 独 特 的 根 际 真 菌 区 系, 抗 病 品 种 根 际 真 菌 种 数 多 于 感 病 品 种, 其 根 际 主 要 优 势 种 是 : 青 霉 (Penicillum pps.) 曲 霉 (Asqergillus spp.) 等,( 李 洪 连 等,1991) 据 研 究 表 明, 随 着 棉 花 移 栽 时 苗 龄 的 增 加, 枯 萎 病 的 发 病 率 病 指 均 极 显 著 地 减 小, 且 壮 苗 的 发 病 率 病 指 都 低 于 弱 苗 棉 花 枯 萎 病 的 发 病 期 发 病 高 峰 移 栽 时 间 关 系 不 大 因 此, 棉 花 采 取 大 苗 壮 苗 适 当 迟 栽, 既 能 推 迟 枯 萎 病 的 发 病 期, 又 能 有 效 地 降 低 发 病 率, 减 轻 发 病 程 度 ( 沈 万 陆 等,1995) 7 农 作 物 枯 萎 病 的 抗 性 育 种 7.1 杂 交 育 种 杂 交 育 种 包 括 了 双 列 杂 交 有 性 杂 交 复 合 杂 交 等 孙 玉 宏 等 综 述 了 甜 瓜 对 枯 病 的 抗 性 表 现 鉴 定 方 法 及 遗 传 多 样 性, 归 纳 了 甜 瓜 抗 枯 萎 病 的 复 合 杂 交 方 法 及 所 取 得 的 成 就, 展 望 了 我 国 甜 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 的 发 展 趋 势 ( 孙 玉 宏 等,2) 对 2 余 份 黄 瓜 品 种 资 源 进 行 抗 病 性 鉴 定, 筛 选 出 优 良 自 交 系 451 和 Q12-2, 并 配 制 成 一 代 杂 种 - 津 优 1 号 其 植 株 长 势 强, 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 第 一 雌 花 着 生 在 第 4 节 左 右, 瓜 条 么 棒 形, 长 约 36cm, 单 瓜 重 约 2g, 瓜 把 约 为 瓜 长 的 1/7, 瓜 皮 深 绿 色 ( 马 德 华 等,1997) 7.2 抗 病 基 因 转 育 抗 病 基 因 转 育 包 括 了 耐 枯 育 种 低 酚 育 种 自 然 变 异 选 择 转 基 因 育 种 等, 通 过 抗 病 基 因 的 分 析, 建 立 寄 主 抗 病 株 系, 通 过 杂 交 转 育, 将 目 标 抗 性 基 因 转 入 农 艺 形 状 优 良 的 品 种 丰 乐 5 号 是 经 抗 病 基 因 转 育 结 合 多 代 病 圃 筛 选 后, 选 配 的 1 代 优 质, 高 产 且 高 抗 枯 萎 病 的 西 瓜 新 品 种, 该 品 种 早 熟, 全 生 育 期 9 天, 雌 花 开 放 至 果 实 成 熟 3~31 天, 果 实 椭 圆 形, 浅 黑 色 底 上 覆 盖 暗 条 带, 平 均 单 瓜 重 4 ~ 5kg, 单 产 4kg/667m 2 ( 戴 祖 云 等,1998) 用 具 有 目 标 性 状 的 不 同 抗 性 材 料, 采 用 多 亲 杂 交 和 回 交 方 法, 经 病 圃 定 向 选 择, 选 育 出 2 个 抗 病 新 材 料 和 对 2 个 抗 性 材 料 遗 传 规 律 的 研 究 表 明 : 不 同 抗 性 材 料 其 杂 交 组 合 所 表 现 的 遗 传 规 律 不 一 样 ( 张 国 良 等,1999) 7.3 辐 射 诱 变 育 种 辐 射 诱 变 是 西 瓜 育 种 方 法 之 一 在 本 试 验 中 用 6 照 射 西 瓜 种 子, 适 宜 的 剂 量 为 376GY 剂 量 率 为 GH/min 处 理 西 瓜 干 种 子 容 易 操 作, 本 试 验 未 能 获 得 理 想 的 抗 病 突 变 体, 但 获 得 了 1 个 无 杈 有 用 的 突 变 体 ( 黄 学 森 等,1995) 7.4 DNA 导 入 利 用 外 源 DNA 导 入 优 良 品 种, 产 生 抗 枯 萎 病 的 突 变 株, 获 得 抗 性 品 种 采 用 DNA 浸 胚 法 将 供 本 瓠 瓜 的 总 DNA 导 入 西 瓜,D1 代 获 得 一 变 异 株, 变 异 率 为.32%,D2 代 是 植 株 成 株 期 功 能 叶 过 氧 化 物 酶 同 工 酶 酶 带 数 增 加, 出 现 了 供 体 植 株 的 酶 带, 变 异 株 部 分 染 色 体 的 臂 长 臂 比 带 型 与 受 体 相 比 产 生 了 明 显 的 差 异 ( 肖 光 辉 等,1999) 用 瓠 瓜 DNA 导 入 西 瓜 选 育 出 的 抗 性 材 料 来 亲 本, 与 性 状 优 良 的 西 瓜 品 种 或 材 料 选 配 了 24 个 杂 交 组 合 在 病 圃 中 经 小 区 测 试 和 品 比 试 验, 筛 选 出 5 个 优 良 组 合, 各 组 合 不 仅 在 病 圃 中 的 产 量 均 极 显 著 高 于 3 个 对 照 品 种 ( 肖 光 辉 等,1999) 7.5 抗 性 遗 传 规 律 通 过 对 抗 病 品 种 的 表 现 型 特 征 形 状 进 行 分 析, 研 究 抗 性 遗 传 规 律, 揭 示 抗 性 特 征 肖 光 辉 等 概 述 了 近 年 来 在 西 瓜 枯 萎 病 抗 性 遗 传 规 律 研 究, 分 子 育 种 技 术 用 于 西 瓜 种 质 创 新 与 抗 枯 萎 病 育 种 以 及 野 生 西 瓜 的 利 用 等 方 面 取 得 的 重 大 进 展, 提 出 了 今 后 西 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 的 主 要 研 究 方 向 ( 肖 光 辉 等,21) 采 用 Grifring 双 列 杂 交 方 法 Ⅱ, 对 西 瓜 枯 萎 病 上 有 不 同 抗 性 的 7 个 品 种 之 后 代 的 抗 性 表 现 进 行 研 究, 结 果 表 明, 西 瓜 品 种 对 枯 萎 病 的 抗 性 属 数 量 性 状, 抗 病 性 由 隐 性 多 基 因 控 制, 其 遗 传 效 应 符 合 加 性 - 显 性 模 型, 以 加 性 效 应 为 主, 且 感 病 对 抗 病 表 现 部 分 显 性 ( 于 利 等,1995) 采 用 高 抗 枯 萎 病 西 瓜 品 种 一 依 姆 波 利 亚, 在 重 茬 西 瓜 田 种 植, 将 全 生 育 期 枯 萎 病 Fusarium oxysporum Schlum schi.f.sp.niveum snyder et Hansen 枯 死 株 控 制 在.8%, 公 顷 产 西 瓜 达 68.25t( 鲁 占 魁 等,1997) 7.6 抗 性 基 因 分 析 用 生 物 间 遗 传 学 原 理 和 方 法 对 7 个 西 瓜 品 种 进 行 苗 期 人 工 接 种 鉴 定, 病 原 菌 采 用 由 全 国 不 同 地 区 搜 集 的 西 瓜 枯 萎 病 菌 的 1 份 单 孢 分 离 物 根 据 病 性 情 指 数 直 接 推 导 出 西 瓜 品 种 和 病 原 分 离 物 的 基 因 型 结 果 表 明 :7 个 西 瓜 品 种 和 1 份 病 析 菌 之 间 至 少 存 在 6 个 相 应 基 因 对 ( 王 浩 波 等,1994) 7.7 抗 性 鉴 定 方 法 抗 性 鉴 定 方 法 包 括 了 孢 子 液 水 倍 法 混 合 接 种 病 原 菌 液 梯 度 浓 度 接 种 粗 提 毒 素 对 组 织 器 官 的 抑 制 病 原 致 病 性 测 定 等 方 法, 对 抗 性 品 种 的 发 病 特 性 形 态 特 征 等 位 基 因 作 出 分 析 采 用 不 同 棉 萎 病 菌 系 及 枯 萎 病 菌 系, 对 新 种 质 川 737 川 282 进 行 病 圃 抗 性 鉴 定 及 不 同 区 域 的 抗 性 测 定 研 究 结 果 表 明, 川 737 川 282 对 我 国 棉 黄 萎 病 三 大 生 理 型 11 个 不 同 菌 系 的 抗 性 均 好, 又 抗 落 叶 型 棉 黄 萎 病, 并 高 抗 棉 枯 萎 病 ( 雷 鸣 等,1994) 黄 河 区 试 长 江 抗 病 区 试 麦 套 棉 区 试 和 夏 棉 区 试 三 轮 试 验 的 6 个 品 种 的 抗 现 性 鉴 定 结 果 表 明, 参 谋 品 种 的 抗 枯 萎 病 性 水 平 较 高, 而 抗 黄 萎 病 性 和 兼 抗 性 水 平 较 低 9 年 代 以 来 参 谋 品 种 的 抗 病 性 发 展 趋 势 为 抗 枯 萎 病 性 在 达 到 较 高 水 平 后 趋 于 稳 定 ; 抗 黄 萎 病 性 和 兼 抗 性 为 上 升 ( 朱 荷 琴 等,1998). 8 经 济 作 物 枯 萎 病 的 研 究

18 18 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 8.1 蓖 麻 枯 萎 病 蓖 麻 枯 萎 病 病 原 菌 的 分 离 鉴 定 表 明 病 原 菌 为 尖 孢 镰 刀 菌 蓖 麻 专 化 型 该 菌 分 生 孢 子 萌 发 适 温 25-28, 相 对 湿 度 为 1% 萌 发 和 生 长 最 适 PH 值 为 6-7, 条 件 适 宜 4 小 时 产 生 芽 突,6 小 时 萌 发 率 达 7.2%, 致 死 温 度 和 时 间 分 别 为 55,2 分 钟 和 6,( 刘 雪 静 等,1996) 应 用 多 元 回 归 法 分 析 了 蓖 麻 枯 萎 病 发 病 率 与 大 气 平 均 相 对 湿 度 及 1cm 平 均 地 温 的 关 系, 分 析 表 明 : 低 温 高 湿 及 地 温 下 降 均 使 病 株 率 增 加,8 月 末 大 气 平 均 相 对 湿 度 降 低, 病 株 率 下 降 ( 吴 国 林 等,21) 8.2 胡 麻 枯 萎 病 (1) 抗 性 品 种 对 胡 麻 18 个 抗 病 性 不 同 的 材 料 进 行 田 间 自 然 病 圃 发 病 率 调 查, 以 总 枯 死 率 为 依 据, 经 方 差 分 析 划 分 为 4 种 抗 性 类 型 即 总 枯 死 率 小 于 9% 为 高 抗 型 (HR),19%-37% 为 中 抗 型 (MR),46%-65% 为 中 感 型 (MS),8%-87% 为 高 感 型 (HS); 应 用 中 各 类 型 又 划 分 为 3 个 抗 病 等 级 ( 郭 世 华 等,22) 1978 年 以 来 通 过 种 质 资 源 鉴 定 新 品 种 选 育 杂 交 育 种, 推 荐 了 丰 产 优 质 抗 病 的 优 良 品 种 12 个 1985 年 以 来 累 计 推 广 面 积 225 多 万 亩, 基 本 控 制 了 胡 麻 枯 萎 病 蔓 延, 稳 定 胡 麻 生 产, 增 产 增 效 明 显 ( 陈 鸿 山 等,1995) 采 用 17 个 从 北 美 新 引 进 的 胡 麻 品 种 ( 系 ), 在 自 然 重 病 地 上 进 行 了 抗 枯 萎 病 性 能 的 研 究, 结 果 表 明, 新 引 进 品 种 ( 系 ) 间 抗 枯 萎 病 性 能 虽 有 差 异, 但 均 属 抗 病 类 型, 它 们 的 生 物 产 量 低 于 当 地 高 抗 枯 萎 病 主 栽 品 种 陇 亚 7 号 ( 党 占 海 等,1997) (2) 病 害 防 治 运 用 5 种 聚 集 度 指 标 分 析 了 胡 麻 枯 萎 病 的 田 间 分 布 型, 结 果 表 明 胡 麻 枯 萎 病 株 呈 聚 集 分 布,( 甘 国 福 等,1996) 刘 珊 等 报 道 了 内 蒙 古 鄂 托 克 前 旗 麻 黄 种 植 田 的 主 要 病 虫 害 : 枯 萎 病, 菟 丝 子, 蚜 虫, 金 龟 子 等, 及 其 生 长 规 律, 并 提 出 了 防 治 措 施 建 议 ( 刘 珊 等,1998) 8.3 芝 麻 枯 萎 病 (1) 抗 原 筛 选 八 五 期 间, 在 不 同 生 态 区 的 14 个 试 验 点, 连 续 三 年 对 七 五 筛 选 出 的 各 类 芝 麻 优 良 资 源 225 份 深 化 鉴 定 与 综 合 评 价, 选 出 稳 定 优 异 资 源 55 份 其 中 具 有 稳 定 高 耐 渍 高 抗 茎 点 枯 病 和 高 抗 枯 萎 病 的 多 抗 一 资 源 1 份 (WZM1523 缅 甸 黑 芝 麻 )( 冯 祥 运 等,1996) 年, 对 八 五 期 间 收 集 的 芝 麻 种 质 资 源 初 鉴 获 得 的 高 抗 茎 点 枯 病 和 高 抗 枯 萎 病 种 质 共 85 份 及 4 个 育 种 单 位 提 供 的 8 个 新 品 系, 在 芝 麻 主 产 区 三 个 生 态 试 验 点 ( 病 圃 ) 进 行 了 鉴 定 评 价, 均 与 当 地 优 良 品 种 比 较, 评 价 出 抗 性 稳 定 相 对 病 情 指 数 <15% 的 抗 茎 点 枯 病 品 种 ( 张 秀 荣 等,21) (2) 抗 性 品 种 采 用 有 性 杂 交 选 育 出 的 芝 麻 新 品 种 漯 12, 河 南 省 区 平 均 产 量 111kg/hm 2, 比 对 照 豫 芝 4 号 增 产 6.% : 省 生 产 试 验 平 均 产 量 922.5kg/hm 2, 比 对 照 豫 芝 4 号 增 产 13.7%, 其 稳 产 性 优 于 对 照 豫 芝 4 号 抗 枯 萎 病, 茎 点 枯 病 叶 斑 病, 籽 粒 纯 白, 粗 脂 肪 含 量 58.34%, 粗 蛋 白 含 量 17%( 张 仙 美 等, 22) 豫 芝 八 号 在 年 5 年 试 验 中, 平 均 亩 产 57.73kg, 比 对 照 平 均 增 产 19.43%, 其 稳 产 性 优 于 对 照 种 豫 芝 二 号 和 豫 芝 四 号 ; 高 抗 茎 点 枯 病, 叶 斑 病, 抗 枯 萎 病 ; 含 油 量 55.59%, 分 别 比 豫 芝 二 号 和 豫 芝 四 号 高 1.54 和 1.3 个 百 分 点 ( 卫 文 星 等,1993) 豫 芝 11 号 在 年 5 年 试 验 中, 平 均 亩 产 67.21kg, 比 对 照 豫 芝 4 号 9 平 均 亩 产 62.27kg) 增 产 7.93%, 其 稳 产 性 优 于 豫 芝 4 号, 高 抗 枯 萎 病, 茎 点 枯 病 和 叶 斑 病 ; 籽 粒 纯 白, 含 油 量 56.66%( 卫 文 星 等,1999) (3) 病 害 防 治 经 不 同 施 药 方 法 的 药 害 测 定 和 田 间 防 效 试 验 表 明, 多 菌 灵 可 湿 性 粉 剂.3% 拌 种, 加 其 3% 复 方 胶 悬 剂 1 倍, 于 夏 芝 麻 初 花 期 常 量 喷 防 两 次, 在 重 茬 2-3 年 的 病 地 可 有 效 控 制 估 萎 病 死 苗 和 整 个 生 长 期 危 害, 相 对 防 效 87.7%, 促 苗 增 重 %( 靳 利 民 等,1993) 8.4 荸 荠 枯 萎 病 (1) 病 原 分 离 荸 荠 枯 萎 病 是 一 种 毁 灭 性 病 害, 近 几 年 在 闽 南 发 生 严 重 为 明 确 该 病 的 病 原, 于 年 在 福 建 省 龙 海 市 荸 荠 产 区 采 集 枯 萎 病 标 样 258 份, 经 分 离 培 养, 致 病 力 测 定 和 形 态 特 征 观 察 等 试 验 表 明, 此 病 原 是 尖 孢 镰 刀 菌, 分 离 频 率 达 1%( 李 本 金 等,1999) (2) 病 原 特 性 年 从 广 州 南 海 市 采 集 荸 荠 枯 萎 标 本, 经 分 离, 纯 化, 鉴 定 和 致 病 性 测 定, 证 实 其 病 原 为 尖 孢 镰 刀 菌 的 荸 荠 专 化 型 寄 主 范 围 测 定 结 果 表 明, 被 接 种 的 16 种 植 物 中 仅 有 荸 荠 发 病 该 病 菌 分 生 孢 子 萌 发 的 温 度 范 围 为 8-36 最 适 温 度 28-3 ( 刘 爱 媛 等,1999) (3) 发 生 防 治 王 文 相 等 介 绍 了 荸 荠 枯 萎 病 的 症 状 形 态 流 行 规 律 和 影 响 因 素 药 剂 筛 选 结 果 表 明 :5% 果 病 克 36% 粉 霉 灵 和 多 霉 灵 对 该 病 菌 有 较 好 的 效 果 并 制 定 出 一 套 防 治 方 法, 经 过 1997~1999 年 的 实 践, 取 得 较 好 的 防 病 效 果 ( 王 文 相 等,2) 8.5 唐 菖 蒲 枯 萎 病 根 据 近 几 年 来 的 唐 菖 蒲 栽 培 经 验, 清 水 地 区 唐 菖 蒲 露 地 栽 植 中 的 病 害 主 要 有 如 下 几 种, 现 从 发 病 症 状 病 原 体 发 病 规 律 和 防 治 方 法 方 面 作 简 要 说 明 ( 李 渭 华 等,21) 8.6 草 坪 草 枯 萎 病 (1) 病 害 调 查 根 据 坪 用 早 熟 禾 枯 萎 病 症 状 分 离 菌 培 养 性 状 及 形 态 和 致 病 性 测 定 结 果, 诊 断 出 访 该 病 是 由 早 熟 禾 镰 孢 菌 所 致 ; 用 代 森 锰 锌 多 菌 灵 和 百 菌 清 进 行 的 室 内 毒 力 测 定 结 果 表 明, 对 病 菌 孢 子 萌 发 的 抑 制 作 用 多 菌 灵 最 好, 代 森 锰 锌 次 之 ( 袁 秀 英 等,1999) 研 究 调 查 了 上 海 地 区 高 羊 茅, 草 地 早 熟 禾, 多 年 生 黑 麦 草, 葡 匐 剪 股 颖 等 主 要 冷 季 型 草 坪 草 病 害 发 生 情 况 鉴 定 出 8 种 主 要 病 害, 其 中 早 熟 禾 枯 萎 病, 黑 麦 草 和 高 羊 在 部 分 草 坪 上 发 生 严 重, 翦 股 颖 上 没 发 现 严 重 病 害 ( 马 忠 华 等,1999) 对 杭 州 不 同 地 区 不 同 种 类 的 草 坪 的 病 害 危 害 程 度 进 行 调 查 结 果 表 明 : 杭 州 地 区 主 要 草 坪 病 害 为 7 种 并 对 这 些 病 害 提 出 综 合 防 治 方 法 ( 马 进 等,21) (2) 病 害 防 治 张 玉 琴 等 阐 述 了 腐 霉 枯 萎 病 的 分 布 病 症, 以 及 引 起 腐 霉 枯 萎 病 不 同 病 症 的 几 种 主 要 致 病 种, 介 绍 了 该 病 的 发 生 发 展 规 律 及 预 测 预 报 方 法, 指 出 腐 霉 枯 萎 病 的 防 治 策 略 是 预 防 为 主 综 合 防 治, 并 对 腐 霉 枯 萎 病 的 化 学 防 治 生 物 防 治 和 生 态 防 治 进 行 了 总 结 ( 张 玉 琴 等,22) 采 用 人 工 接 种 和 自 然 发 病 相 结 合, 促 进 草 坪 草 染 病 和 病 情 严 重, 通 过 病 情 调 查 发 现 草 地 早 熟 禾 紫 羊 茅 高 羊 茅 和 多 年 生 黑 麦 草 对 腐 霉 枯 萎 病 感 性 有 差 异, 它 们 分 别 代 表 极 感 高 感 中 感 和 低 感 类 型 ; 用 5g/666.7m2 药 量 喷 雾, 可 基 本 控 制 后 3 种 草 坪 草 的 病 情 ( 穆 合 塔 尔 等,2) 呼 和 浩 特 市 草 坪 发 生 的 病 害 主 要 有 枯 萎 病 叶 斑 病 叶 锈 病 危 害 最 重 的 是 枯 萎 病, 该 病 导 致 草 坪 草 枯 黄, 形 成 大 小 不 等 的 秃 斑, 发 病 初 期 喷 施 代 森 锰 锌 与 多 菌 灵 混 合 液 或 用 代 森 锰 锌 均 治 效 果 明 显 ; 叶 斑 病 的 发 病 率 较 高, 不 同 草 种 和 品 种 都 有 感 染,( 袁 秀 英 等,2) 8.7 亚 麻 草 枯 萎 病 (1) 发 生 规 律 从 亚 麻 枯 萎 病 的 发 生 发 展 危 害 病 原 菌 传 播 途 径 到 病 害 综 合 防 治, 进 行 了 系 统 研 究, 明 确 了 该 病 的 发 生 与 品 种 土 壤 类 型 及 气 象 因 素 等 诸 方 面 的 关 系, 为 病 害 防 治 提 供 了 理 论 依 据 ; 也 明 确 了 带 菌 土 壤 和 种 子 是 该 病 害 主 要 侵 染 源 和 传 播 途 径, 用 药 剂 防 治 效 果 可 达 8% 以 上 ( 杨 学 等,22) 通 过 田 间 系 统 调 查, 病 原 分 离 与 回 接 观 察, 病 田 土 壤 生 物 测 定 及 盆 栽 或 病 圃 鉴 定, 结 果 表 明 : 病 原 主 要 是 尖 孢 镰 刀 菌 芬 芳 变 种, 还 有 燕 麦 镰 刀 菌 和 茄 病 镰 刀 蓝 色 变 种, 经 土 壤 越 冬, 侵 染 除 亚 麻 外 还 危 害 豌 豆 等 作 物, 无 专 化 性, 但 有 明 显 的 分 布 区 域 性 ( 孟 兆 军 等,1997) (2) 抗 性 鉴 定 采 用 自 然 重 病 田, 客 土 圃 和 人 工 接 菌 病 圃 同 进 步 行 抗 病 性 鉴 定 的 方 法, 对 近 2 个 亚 麻 品 种 ( 系 ) 和 常 用 品 种 资 源 的 抗 枯 萎 病 性 进 行 了 鉴 定 从 全 国 亚 麻 区 试 的 31 个 品 种 ( 系 ) 中 筛 选 出 8 个 高 抗, 丰 产 良 种 ( 系 ); 从 国 内 育 种 单 位 选 育 的 97 个 新 品 系 和 53 个 常 用 品 种 资 源 ( 刘 信 义 等,1993) 伊 亚 2 号 是 以 油 用 品 种 喀 什 为 母 本, 高 抗 枯 萎 病 的 油 纤 兼 用 加 拿 大 品 种 红 木 65 为 父 本, 经 杂 交 单 株 选 择 和 集 团 选 择,

19 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 19 南 繁 加 代 异 地 鉴 定 选 育 而 成, 该 品 种 具 有 籽 粒 产 量, 原 茎 产 量, 含 油 率 高, 高 抗 枯 萎 病 和 工 艺 长 度 长 特 点 ( 李 睿 先 等,1995) (3) 抗 性 品 种 亚 麻 新 品 系 ( 亲 本 组 合 为 / 美 国 亚 麻 ) 是 庆 阳 地 区 农 科 所 1991 年 从 山 西 省 农 科 院 高 寒 区 作 物 所 引 进 后 经 过 多 年 选 育 而 成 该 品 系 在 品 鉴 品 比 区 试 以 及 全 省 联 合 区 试 中, 折 合 平 均 产 量 kg( 李 科 等,2) 天 亚 5 号 系 经 复 合 杂 交 选 育 而 成 的 油 纤 兼 用 亚 麻 品 种 通 过 导 入 抗 病 基 因, 在 充 分 发 病 条 件 下 的 严 格 选 择, 使 其 具 有 高 抗 枯 萎 病 的 性 能 该 品 种 果 多 粒 大 粒 多, 丰 产 性 好, 在 区 域 试 验, 生 产 试 验 和 大 面 积 示 范 推 广 中, 增 产 效 果 均 显 著 ( 周 祥 椿 等,1995) 坝 亚 七 号 由 加 拿 大 红 木 65 为 母 木, 本 所 育 成 品 系 为 父 本 有 性 杂 交, 系 统 选 择 育 种, 该 品 种 经 张 家 口 区 试, 生 产 鉴 定 和 生 产 示 范, 表 现 高 抗 亚 麻 枯 萎 病, 高 产, 籽 实 含 油 量 高 一 般 单 产 kg/hm^2, 最 高 单 产 kg/hm^2, 籽 实 含 油 是 43.64%, 是 *( 米 君 等,21) 围 绕 高 产, 抗 亚 麻 枯 萎 病 和 油 纤 两 用 的 育 种 目 标, 利 用 复 式 杂 交 选 育 出 天 亚 7 号 亚 麻 新 品 种, 并 且 在 自 然 和 人 工 病 圃 内 进 行 了 抗 亚 麻 枯 萎 病 的 鉴 定 在 品 比 和 区 试 过 程 中, 天 亚 7 号 表 现 显 著 增 产, 籽 实 含 油 率 达 41.9%( 张 金 等,1998) 8.8 一 品 红 通 过 病 原 菌 致 病 性 测 定 形 态 鉴 定, 确 认 一 品 红 枯 萎 病 是 由 尖 孢 镰 刀 菌 引 起 采 用 浸 根 接 种 法 和 灌 根 接 种 法 进 一 步 对 该 菌 进 行 寄 主 范 围 测 定 试 验, 被 接 种 的 11 个 科 14 种 植 物 中 仅 有 一 品 红 发 病, 故 鉴 定 该 菌 为 一 独 立 的 专 化 型 -- 尖 孢 镰 刀 菌 一 品 红 专 化 型 ( 姜 子 德 等,1996) 8.9 香 蕉 香 蕉 枯 萎 病 Fusarium oxysporum Schlum f..cubense(e.f.smith) Suyder et Hasen 在 福 建 为 首 次 记 录, 描 述 了 病 害 症 状 病 原 菌 形 态 学 和 生 物 学 特 性, 并 采 用 麦 粒 培 养 物 一 香 蕉 组 培 苗 进 行 了 致 病 性 快 速 测 定 ( 林 时 迟 等,2) 9 豆 类 枯 萎 病 的 研 究 9.1 抗 性 品 种 对 332 份 入 库 菜 豆 资 源 进 行 炭 疽 病 和 枯 萎 病 的 苗 期 抗 病 性 鉴 定, 对 328 份 菜 豆 嫩 荚 作 营 养 成 分 分 析, 并 对 七 五 期 间 通 过 抗 病 性 鉴 定 和 营 养 养 分 分 析 的 218 份 材 料 进 行 重 复 鉴 定, 在 此 基 础 上 将 筛 选 的 优 异 资 源 材 料 在 三 地 区 进 行 两 年 田 间 综 合 评 价, 最 后 获 得 12 份 可 直 接 利 用 ( 雷 蕾 等,1999) 对 93 份 有 代 表 性 的 菜 豆 资 源 材 料, 根 据 其 生 育 期, 嫩 荚 性 状, 营 养 品 质, 对 炭 疽 病 和 枯 萎 病 人 抗 性 等 11 个 性 状 的 数 据 进 行 了 聚 类 分 析, 最 后 将 其 分 为 7 组 其 中 第 Ⅶ 组 和 第 Ⅴ 组 粗 纤 维 含 量 低, 生 育 期 短, 早 熟, 蛋 白 质 含 量 高, 抗 炭 疽 病 或 枯 萎 病, 是 综 合 性 状 较 好 的 两 个 组 ( 王 素 等,1997) 1992~1993 年 将 七 五 期 间 通 过 抗 病 性 鉴 定 和 营 养 成 分 分 析 获 得 的 抗 炭 疽 病, 抗 枯 萎 病 和 蛋 白 质 含 量 高 的 材 料 共 218 份 进 行 了 重 复 鉴 定, 在 此 基 础 上 筛 选 出 的 优 异 资 源 材 料 在 3 地 进 行 了 2 年 的 田 间 综 合 评 价, 最 后 获 得 了 12 份 可 直 接 或 间 接 利 用 的 优 良 品 种 材 料 ( 王 素,1996) 9.2 抗 性 鉴 定 为 了 在 菜 豆 种 质 资 源 中 寻 找 抗 菜 豆 枯 萎 病 的 抗 源 及 其 更 为 简 单 有 效 的 抗 病 性 鉴 定 方 法, 对 一 周 苗 龄 的 菜 豆 采 用 根 后 培 养 基 糊 蘸 根 和 孢 子 悬 浮 液 蘸 根 等 5 种 方 法 进 行 接 种 鉴 定 试 验 结 果 表 明, 培 养 基 糊 蘸 根 法 发 病 快, 方 法 简 单 用 此 法 鉴 定 了 6 份 菜 豆 种 质 资 源 材 料 ( 王 素 等,1994) 采 用 通 径 分 析 方 法, 研 究 了 48 份 菜 豆 品 种 资 源 3 种 主 要 病 害 的 抗 病 性 与 7 个 农 艺 性 状 的 相 关 性 结 果 表 明 : 英 长 和 英 2 宽 对 病 毒 病 病 毒 情 指 数 的 直 接 作 用 最 大 ; 生 育 期 对 发 痘 病 病 情 指 数 的 直 接 作 用 最 大 ; 英 长 对 枯 萎 病 病 情 指 数 的 直 接 作 用 最 大 ( 徐 丽 鸣 等,1999) 采 用 相 关 分 析 和 通 径 分 析 的 方 法 研 究 了 吉 林 省 142 份 菜 豆 品 种 资 源 的 3 个 主 要 品 质 性 状 与 抗 病 性 之 间 的 关 系 结 果 表 明 : 水 分 含 量 对 枯 萎 病 的 病 情 指 数 直 接 作 用 最 大, 其 它 2 个 性 状 直 接 作 用 较 小 鲜 重 蛋 白 质 含 量 对 炭 疽 病 病 情 指 数 直 接 作 用 最 大 ( 徐 丽 鸣 等,1998) 从 国 家 八 五 期 间 菜 豆 品 种 资 源 苗 期 抗 病 性 鉴 定 及 品 种 分 析 中 筛 选 出 表 现 优 良 的 38 份 种 质, 于 两 年 进 行 田 间 病 毒 病 炭 疽 病 枯 萎 病 抗 性 鉴 定 及 经 济 性 状 鉴 定, 筛 选 出 13 份 双 抗 优 良 种 质 资 源 和 2 份 可 利 用 的 优 异 种 质 资 源 ( 雷 蕾 等,2) 9.3 发 病 规 律 于 1998 年 至 21 年 对 西 昌 市 蚕 豆 病 害 作 了 详 细 调 查 了, 包 括 蚕 豆 常 见 病 害 ; 蚕 豆 赤 斑 病 蚕 豆 褐 斑 病 蚕 豆 锈 病 蚕 豆 枯 萎 病, 蚕 豆 根 腐 病, 蚕 豆 立 枯 病, 蚕 豆 茎 基 腐 病, 及 其 种 类, 病 原 发 病 规 律 等, 在 此 基 础 上 提 出 相 应 的 防 治 对 策 ( 马 建 列 等,22) 1 瓜 类 枯 萎 病 研 究 1.1 病 原 鉴 定 (1) 复 合 侵 染 黄 瓜 枯 萎 病 和 根 结 线 虫 病 是 三 明 地 区 黄 瓜 的 2 种 重 要 病 害, 经 鉴 定 黄 瓜 枯 萎 病 的 病 原 为 尖 镰 孢 (Fusarium axysporum), 黄 瓜 根 结 线 虫 的 种 类 有 南 6 方 根 结 线 虫 (Meloiddogyne indcoginta) 爪 哇 根 结 线 虫 (M. jauanica ) 花 生 根 结 线 虫 (M. arenaria), 形 成 复 合 侵 染 ( 李 茂 胜 等,21) 年 间 对 黄 瓜 死 藤 研 究 结 果 表 明, 南 通 市 的 黄 瓜 死 藤 主 要 由 黄 瓜 枯 萎 病 [Fusarium oxysporum (Schl) f. sp. cucumerinum Owen] 与 菌 核 病 [Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)] 复 合 侵 染 所 致 ( 梁 继 农 等,1996) 温 室 种 植 黄 瓜, 病 害 发 生 普 遍 且 种 类 繁 多, 几 乎 瓜 类 中 的 病 害, 比 如 枯 萎 病 疫 病 霜 霉 病 炭 疽 病 白 粉 病 细 菌 性 角 斑 病 等 都 极 易 发 生, 尤 以 前 4 种 病 害 最 为 严 重, 极 大 地 影 响 产 量 和 品 质, 降 低 了 菜 农 的 经 济 收 入 ( 石 鸿 文 等,21) (2) 营 养 体 亲 和 性 在 分 离 鉴 定 侵 染 黄 瓜 的 尖 孢 镰 刀 菌 的 基 础 上, 测 定 3 个 尖 孢 镰 刀 菌 菌 株 ( 包 括 6 个 专 化 型 ) 对 黄 瓜 的 致 病 性 和 营 养 体 亲 和 性 研 究 结 果 表 明, 侵 染 我 国 黄 瓜 的 尖 孢 镰 刀 菌 至 少 有 5 个 以 上 的 营 养 体 亲 和 群 (VCGs)( 王 政 逸 等,21) (3) 营 养 缺 陷 型 测 定 选 用 15 个 采 自 新 疆 不 同 地 区 的 西 瓜 枯 萎 病 菌 体, 在 含 KC13 培 养 基 上 诱 导 出 抗 氯 酸 盐 的 不 能 利 用 硝 酸 盐 营 养 体 突 变 株, 在 不 同 氮 源 培 养 上 划 分 出 nit1,nit2,nit8,nitm 和 nitx5 种 突 变 类 型, 其 中 nit1 出 现 频 率 最 高 ( 王 冬 梅 等,1998) (4) 致 病 毒 素 测 定 镰 刀 菌 是 枯 萎 病 菌 产 生 的 一 种 非 寄 主 特 异 性 致 病 毒 素 β- 葡 萄 糖 苷 酶 在 枯 萎 病 病 程 中 起 着 降 解 细 菌 壁 纤 维 素 破 坏 植 物 细 胞 组 织 的 作 用, 为 了 探 索 西 瓜 枯 萎 病 菌 的 镰 刀 菌 酸 产 量 和 β-1,4- 葡 萄 糖 苷 酶 活 性 与 致 病 力 的 关 系, 本 试 验 测 定 了 28 个 采 自 新 疆 的 菌 株 ( 王 纯 利 等,2) (5) 生 理 小 种 鉴 定 采 用 苗 期 浸 根 法 接 种, 对 采 自 新 疆 不 同 地 区 西 瓜 田 的 32 应 孢 镰 孢 菌 中 的 1 个 分 离 物 进 行 了 专 化 型 生 理 小 种 鉴 定 和 致 病 力 测 定 发 现 新 疆 西 瓜 枯 萎 病 菌 存 在 着 生 理 小 种 分 化, 主 要 以 1 号 小 种 主 同 一 小 种 的 不 同 菌 株 间 致 病 力 存 在 着 显 著 差 异 ( 王 冬 梅 等,1998) 也 对 来 自 合 肥 地 区 的 3 个 西 瓜 枯 萎 病 菌 菌 株 用 浸 根 接 种 法 进 行 了 生 理 小 种 分 化 鉴 定, 结 果 表 明, 危 害 合 肥 地 区 西 瓜 生 产 的 主 要 生 理 小 种 为 号 小 种, 用 毒 力 更 强 的 陕 西 三 原 菌 株 对 41 份 西 瓜 材 料 和 6 个 西 瓜 杂 交 一 代 品 种 进 行 了 抗 病 鉴 定 结 果 中 抗 材 料 5 份, 高 抗 材 料 1 份 ; 杂 交 品 种 中 丰 ( 王 浩 波 等,21) 对 在 北 京 大 兴, 顺 义, 通 县 等 西 瓜 主 产 区 采 集, 经 单 孢 分 离 得 到 的 8 个 西 瓜 枯 萎 病 菌 株 进 行 了 生 理 小 种 子 化 研 究 应 用 国 际 通 用 的 3 个 鉴 别 寄 主 Sugar Baby,charleston Gray,callhour Gray 和 国 内 京 欣 1 号, 苏 蜜 1 号 2 号 品 种 ( 周 凤 珍 等,1996) 1.2 病 害 侵 染 (1) 侵 入 途 径 对 枯 萎 病 菌 侵 入 黄 瓜 不 同 抗 性 品 种 的 途 径, 以 及 黄 瓜 受 侵 染 根 部 维 管 组 织 的 变 化 进 行 了 观 察 分 生 孢 子 在 幼 根 表 皮 上 萌 发 产 生 菌 丝, 通 过 胞 间 层 侵 入 表 皮 细 胞, 之 后 菌 丝 继 续 向 内 部 生 长, 穿 过 皮 层 组 织 进 入 导 管 受 侵 染 的 导 管 内 相 继 出 现 壁 覆 盖 物, 侵 填 体 及 褐 色 物 ( 徐 建 华 等,1997) (2) 超 微 结 构 从 超 微 结 构 水 平 上 以 枯 萎 病 对 黄 瓜 幼 根 的 侵 染 过 程 和 抗 病, 感 病 品 种 受 侵 染 后 细 胞 内 部 结 构 的 变 化 进 行 研 究, 并 探 讨 了 寄 主 细 胞 结 构 变 化

20 2 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 与 抗 病 性 的 关 系 得 出 分 生 孢 子 在 幼 根 表 皮 附 着 并 萌 发 后, 抗 病, 感 病 品 种 的 表 皮 细 胞 均 发 生 迅 速 反 应 ( 苗 琛 等,1997) (3) 种 子 带 菌 籽 瓜 种 子 带 枯 萎 病 菌 率 高 达 %, 是 新 红 宝 西 瓜 的 倍 ; 重 茬 籽 瓜 田 土 壤 致 病 率 比 重 茬 西 瓜 田 增 加 倍 ( 鲁 占 魁 等,1998) 利 用 吸 水 纸 检 验 法 对 甜 瓜 枯 萎 病 发 病 较 重 地 采 集 的 种 子 进 行 保 湿 培 养 研 究, 结 果 表 明, 供 试 种 子 携 带 多 种 病 原 真 菌, 其 中 枯 萎 菌 带 菌 率 最 高, 其 次 是 黑 根 霉 菌 黑 斑 病 菌 ; 供 试 种 子 除 表 面 带 菌 外, 种 壳 和 种 仁 内 均 可 带 菌, 而 且 种 壳 带 菌 率 明 显 高 于 种 仁 带 菌 率 ( 陈 祥 付 等,2) (4) 感 病 条 件 用 感 病 品 种 蜜 桂 为 桂 材 料, 研 究 了 西 瓜 枯 萎 病 苗 期 发 病 的 规 律 结 果 表 明 : 苗 龄 越 小, 感 病 越 重 ; 最 适 感 病 温 度 2 为 5/21 ; 最 适 感 病 湿 度 为 土 壤 持 水 量 6% 光 照 不 足 是 造 成 枯 萎 病 发 生 的 重 要 因 素 ; 伤 可 加 重 枯 萎 病 的 发 生 ( 肖 光 辉 等,1997) 1.3 抗 性 机 制 (1) 生 理 生 化 指 标 以 西 瓜 为 材 料, 研 究 了 了 西 瓜 苗 期 感 染 枯 萎 病 菌 (Fusarium oxysporum Schlecht.) 后 根 部 细 胞 内 丙 二 醛 含 量 超 氧 化 物 歧 化 酶 和 过 氧 化 氢 酶 活 性 的 动 态 变 化 结 果 表 明, 受 枯 萎 病 菌 侵 染 的 幼 苗 细 胞 内 MDA 含 量 的 增 加 比 率, 抗 病 品 种 克 伦 生 低 于 感 病 品 种 早 花 ;SOD 酶 活 性 的 下 降 ( 王 建 明 等,21) 分 析 了 枯 萎 病 病 原 菌 侵 染 西 瓜 后 幼 苗 叶 片 和 根 茎 部 组 织 中 木 质 素 与 富 含 羟 脯 氨 酸 糖 蛋 白 (HRGP) 含 量 及 其 形 成 的 相 关 酶 - 过 氧 化 物 酶 (POD) 和 苯 丙 氨 酸 解 氨 酶 (PAL) 的 活 性 变 化 结 果 表 明 : 木 质 素 与 HRGP 含 量 POD 与 PAL 活 性, 随 病 菌 的 侵 染 在 抗 感 品 种 体 ( 许 勇 等,2) 研 究 了 西 瓜 不 同 品 种 苗 期 感 染 枯 蒌 病 菌 (Fusarium oxysporum Schecht.f.sp.niveum) 后 根 部 细 胞 的 质 膜 透 性 某 些 酶 类 和 化 合 物, 以 及 光 合 色 素 含 量 的 动 态 变 化 结 果 表 明, 受 枯 蒌 病 菌 侵 染 后, 抗 病 品 种 克 伦 生 在 染 病 后 的 短 时 间 内 (48h 左 右 ) 能 使 细 胞 内 MDA 相 对 电 导 率 SOD 产 生 变 化 ( 王 建 明 等,22) 研 究 表 明 西 瓜 幼 苗 体 内 多 酚 氧 化 酶 过 氧 化 物 酶 活 性 与 西 瓜 枯 萎 病 的 抗 性 间 不 存 在 显 著 相 关 ; 而 抗 坏 血 酸 氧 化 酶 活 性 与 西 瓜 枯 萎 病 抗 性 之 间 存 在 极 显 著 相 关, 这 可 作 为 鉴 定 和 筛 选 抗 病 性 个 体 的 生 化 指 标 西 瓜 幼 苗 根 系 中 苹 果 酸 含 量 草 酸 含 量 及 有 机 酸 总 量 与 抗 病 性 不 存 在 显 著 相 关 ( 张 显 等,21) 通 过 对 田 间 多 年 观 察 和 选 育 的 哈 密 瓜 不 同 品 系 进 行 苗 期 抗 病 性 鉴 定 表 明, 在 供 试 的 8 个 哈 密 瓜 品 系 中,4D16 和 4D23 为 高 抗 品 系, 4D11 为 中 抗 品 系,D3-1 为 轻 感 品 系,D2 D2-2 D4-3 和 网 纹 香 为 高 感 品 系 ( 辛 建 华 等,1997) 对 不 同 抗 性 的 西 瓜 品 种 进 行 了 苗 期 西 瓜 枯 萎 病 菌 接 种 鉴 定, 同 时 对 种 子 和 出 土 后 子 叶 内 的 脂 肪 酸 组 分 进 行 了 气 相 色 谱 测 定 结 果 表 明, 种 子 和 出 土 后 子 叶 内 的 硬 脂 酸 相 对 含 量 与 西 瓜 品 种 的 枯 萎 率 呈 正 相 关 关 系, 即 硬 脂 酸 含 量 越 高, 品 种 的 枯 萎 率 越 高, 抗 枯 萎 病 性 越 弱 ( 王 浩 波 等,1994) (2) 抗 病 基 因 分 析 对 28 个 西 瓜 品 种 进 行 抗 枯 萎 病 筛 选 苗 期 用 特 定 浓 度 接 种, 每 隔 7d 调 查 其 感 病 情 况 及 植 株 生 长 情 况 株 高 茎 粗 叶 片 等 生 长 势 指 标 与 发 病 率 均 呈 极 显 著 负 相 关, 相 关 系 数 分 别 为 ( 王 桂 英 等,1997) 运 用 RAPD 技 术, 采 用 混 合 分 组 分 析 (bulked segregant analysis, BSA) 方 法 进 行 了 西 瓜 (Citrullus lantus (Thunb.) Mansfeld var. citroides) 野 生 种 质 PI 抗 枯 萎 病 基 因 ( 许 勇 等,1999) 将 西 瓜 野 生 种 质 PI 抗 枯 萎 病 生 理 小 种 1 的 抗 性 基 因 连 锁 的 RAPD 标 记 OPP1.7 进 行 克 隆 测 序,Southern 杂 交 证 明 此 标 记 为 1 个 单 拷 贝, 并 转 化 为 SCAR 标 记, 简 化 了 SCAR 扩 增 产 物 的 检 测 技 术 ( 许 勇 等,2) 1.4 抗 性 鉴 定 (1) 孢 子 液 水 倍 法 混 合 接 种 用 属 于 不 同 生 理 小 种 的 5 个 西 瓜 枯 萎 病 菌 分 离 物 对 抗 性 不 同 的 4 个 西 瓜 品 种 进 行 了 孢 子 液 水 倍 法 混 合 接 种 和 间 隔 诱 导 接 种 试 验 结 果 表 明, 间 隔 诱 导 接 种 由 于 存 在 交 叉 保 护 作 用, 不 宜 在 复 合 抗 性 筛 选 中 采 用 提 出 了 复 合 抗 性 筛 选 的 方 法 的 基 础 单 一 接 种 筛 选 出 高 抗 材 料 ( 王 浩 波 等,1996) (2) 病 原 菌 液 梯 度 浓 度 接 种 用 胚 根 接 种 法 和 浸 根 接 种 对 三 倍 体 无 籽 西 瓜 的 幼 苗 进 行 了 枯 萎 病 人 工 接 种 抗 性 鉴 定, 结 果 表 明, 这 2 种 方 法 均 为 无 籽 西 瓜 苗 期 枯 萎 病 抗 性 鉴 定 的 有 效 方 法, 并 确 定 了 胚 根 接 种 的 适 宜 孢 子 浓 度 为 5 1^5 个 /ml, 接 种 时 间 3min 浸 根 接 种 的 适 宜 孢 子 浓 度 为 1 1^6( 王 浩 波 等,1998) 对 生 产 中 常 用 的 4 个 西 瓜 品 种 用 西 瓜 枯 萎 病 菌 接 种 证 明 : 金 钏 贯 龙 最 感 病 ; 对 西 瓜 生 产 中 常 用 的 4 种 胺 接 砧 木, 用 梯 度 浓 度 的 西 瓜 枯 萎 病 菌 接 种 证 明 : 随 着 接 种 浓 度 增 加, 砧 木 植 物 表 现 出 不 同 的 感 病 性 ( 申 卫 星 等,1998) 利 用 温 室 盆 栽 试 验, 研 究 了 枯 萎 菌 不 同 接 种 体 含 量 与 西 瓜 枯 萎 病 发 生 的 关 系 以 及 对 瓜 苗 生 长 的 影 响 ( 宗 兆 锋 等,1996) 西 瓜 枯 萎 病 是 影 响 西 瓜 生 产 的 主 要 问 题, 种 植 抗 病 品 种 是 防 治 的 一 项 主 要 措 施 通 过 人 工 接 种 室 外 盆 栽 试 验, 对 16 个 西 瓜 品 种 进 行 了 抗 枯 萎 病 鉴 定, 明 确 了 不 同 西 瓜 品 种 抗 病 性 的 强 弱, 其 中 豫 艺 57 农 抗 1 号 早 抗 3 号 西 农 8 号 郑 抗 1 号 和 台 湾 黑 宝 等 品 种 抗 病 性 较 强, 病 情 指 数 ( 王 振 跃 等,21) 苗 期 温 室 人 工 土 壤 接 种, 对 12 个 黄 瓜 品 种 抗 枯 萎 病 鉴 定 结 果 表 明, 黄 瓜 品 种 间 抗 枯 萎 病 能 力 有 明 显 差 异, 但 没 有 发 现 高 抗 品 种 较 抗 病 的 品 种 有 长 春 密 刺, 山 东 密 刺 和 中 农 5 号, 其 他 黄 瓜 品 种 感 病 或 严 重 感 病 未 接 菌 前, 过 氧 化 物 酶 同 工 酶 带 数, 山 东 密 刺 为 8 条 ( 吴 营 昌 等,1995) 采 用 大 菌 量 对 七 星 节 瓜 进 行 多 代 人 工 接 种 和 定 向 筛 选, 选 育 出 高 抗 枯 萎 病 节 瓜 新 品 种 绿 丰 该 品 种 生 长 势 旺 盛, 早 中 熟, 第 1 雌 花 着 生 于 主 蔓 第 13 节, 果 实 圆 筒 形 深 绿 色 味 较 甜 品 质 优 良, 每 公 顷 产 量 5-6kg( 虞 皓 等,21) 对 黄 皮 西 瓜 新 品 种 湘 西 瓜 十 一 号 枯 萎 病 病 症 的 田 间 表 现 和 发 病 特 点 作 了 描 述 通 过 对 该 病 害 作 病 菌 来 源 接 种 鉴 定 等 实 验, 测 定 了 黄 皮 西 瓜 新 品 种 湘 西 瓜 十 三 号 的 苗 期 抗 性 实 验 结 果 表 明, 该 新 品 种 比 台 湾 引 进 品 种 宝 冠 较 抗 枯 萎 病 ( 肖 伏 莲 等,2) (3) 粗 提 毒 素 对 组 织 器 官 的 抑 制 甜 瓜 枯 萎 病 的 粗 提 毒 素 对 哈 密 瓜 幼 茎 愈 伤 组 织 的 形 成 有 一 定 的 抑 制 作 用, 对 抗 性 不 同 的 品 系, 这 种 作 用 呈 现 出 一 定 的 差 异, 抗 病 品 系 所 受 的 抑 制 作 用 小 于 感 病 的 品 系 另 外 基 培 养 基 中 毒 素 的 浓 度 不 同, 其 对 愈 伤 组 织 的 抑 制 作 用 也 不 相 同, 浓 度 越 高, 抑 制 作 用 越 大 ( 辛 建 华 等,1998) 通 过 比 较 1 种 具 有 不 同 枯 萎 病 抗 怀 的 黄 瓜 材 料 对 两 类 选 择 压 力 的 反 应, 确 定 离 体 抗 鉴 定 的 适 应 选 择 压 力 为 FOC(the culture filtraltes of Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum) 原 液 和 1mg/L FA(fusaric acid) 粗 制 品 溶 液, 适 宜 的 鉴 定 时 间 为 愈 伤 组 织 诱 导 期,( 赵 秀 娟 等,21) 测 定 了 黄 瓜 枯 萎 病 菌 培 养 滤 液 对 黄 瓜 胚 根 生 长 的 抑 制 作 用, 随 着 枯 萎 病 菌 系 F11 培 养 滤 液 浓 度 的 增 加, 对 津 研 4 号,Msu8519 的 长 春 密 刺 胚 根 生 长 抑 制 率 均 明 显 增 强, 经 高 温 灭 菌 的 培 养 滤 液 仍 有 较 强 的 抑 制 作 用 ( 魏 惠 军 等,1997) (4) 病 原 致 病 性 测 定 年 在 自 然 病 圃 中 观 察 了 25 个 西 瓜 品 种 对 西 瓜 枯 萎 病 的 抗 病 性, 结 果 表 明, 国 内 只 中 862F1, 是 唯 一 保 持 高 抗, 中 861F1, 新 澄 1 号 和 中 育 号 等 表 现 出 中 度 抗 性 外, 其 他 均 属 轻 抗 或 感 病 ; 而 来 自 国 外 的 抗 性 品 种 显 示 出 与 原 来 一 致 的 或 更 高 的 抗 性 ( 马 立 新 等,1993) 从 海 南 岛 种 植 区 的 西 瓜 上 分 离 到 11 个 尖 镰 孢 菌 株, 青 瓜 和 毛 瓜 上 分 离 到 3 个 尖 镰 孢 菌 株 用 胚 根 接 种 法 将 这 些 菌 株 接 种 到 西 瓜 青 瓜 和 毛 瓜 上, 以 测 定 其 对 西 瓜, 青 瓜 和 毛 瓜 的 致 病 性 结 果 表 明, 所 有 参 试 菌 株 都 可 引 致 参 试 寄 主 品 种 表 现 枯 萎 病 症 状 ( 郑 服 丛 等,1999) 1.5 抗 病 育 种 (1) 自 交 系 杂 交 孙 玉 宏 等,2 综 述 了 甜 瓜 对 枯 病 的 抗 性 表 现 鉴 定 方 法 及 遗 传 多 样 性, 归 纳 了 甜 瓜 抗 枯 萎 病 的 复 合 杂 交 方 法 及 所 取 得 的 成 就, 展 望 了 我 国 甜 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 的 发 展 趋 势 对 2 余 份 黄 瓜 品 种 资 源 进 行 抗 病 性 鉴 定, 筛 选 出 优 良 自 交 系 451 和 Q12-2, 并 配 制 成 一 代 杂 种 - 津 优 1 号 其 植 株 长 势 强, 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 第 一 雌 花 着 生 在 第 4 节 左 右, 瓜 条 么 棒 形, 长 约 36cm, 单 瓜 重 约 2g, 瓜 把 约 为 瓜 长 的 1/7, 瓜 皮 深 绿 色,( 马 德 华 等,1997) 津 优 21 号 是 由 自 交 系 F8-1 与 G 配 制 而 成 的 杂 交 一 代 黄 瓜 新 品 种 该 品 种 植 株 生 长 势 强, 抗 霜 霉 病

21 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 21 白 粉 病 枯 萎 病, 丰 产 耐 低 温 弱 光, 瓜 条 长 32cm, 棒 状, 深 绿 色, 棱 刺 瘤 明 显, 商 品 性 好 品 质 佳, 单 瓜 重 2g 左 右, 黄 瓜 产 量 5kg/667m 2 以 上, ( 李 加 旺 等,21) 测 定 表 明, 黄 瓜 不 同 品 种 对 霜 霉 病 白 粉 病 的 抗 性 与 叶 片 内 叶 绿 素 含 量 呈 正 相 关, 对 枯 萎 病 疫 霉 病 的 抗 性 与 叶 绿 素 含 量 无 相 关 性 两 个 黄 瓜 抗 病 品 种 杂 交,F1 代 对 霜 霉 病 白 粉 病 枯 萎 病 的 抗 性 趋 向 中 亲 优 势 ; 对 疲 霉 病 的 抗 性 减 弱, 表 现 为 超 亲 负 优 势 ( 胥 爱 玲 等,1995) 在 广 泛 搜 集 和 深 入 研 究 西 瓜 种 质 资 源 的 基 础 上, 综 合 采 用 多 种 先 进 育 种 方 法 育 成 两 个 优 良 自 交 系, 进 一 步 杂 交 育 面 西 瓜 杂 种 一 长 新 品 种 西 农 8 号 其 经 济 性 状 全 面 超 过 金 钟 冠 龙 新 红 宝 等 进 口 主 栽 品 种, 在 全 国 各 地 均 表 现 高 产 稳 产 座 果 性 好 含 糖 量 高 ( 王 鸣 等,1997) 赣 黄 瓜 1 号 (91) 系 用 E 和 两 个 优 良 的 自 交 系 配 制 的 一 代 杂 种, 该 品 种 早 熟, 较 耐 低 温 与 弱 光, 抗 枯 萎 病, 耐 霜 霉 病, 品 质 优 良, 与 对 照 品 种 长 春 密 刺 相 比, 前 期 产 量 增 产 18.8% 总 产 量 增 产 2.8%( 王 家 训 等,1996) 海 农 6 号 为 由 国 外 引 进 的 杂 种 一 代 系 选 自 交 系 WA-3 和 抗 病 杂 种 系 选 自 交 系 杂 交 而 成 的 西 瓜 杂 种 一 代, 对 西 瓜 的 枯 萎 病 和 炭 病 有 较 强 的 抗 性, 果 实 椭 圆 形 具 花 条 纹, 规 整 美 观, 瓜 瓤 红 色, 果 实 中 心 可 溶 性 畸 形 物 含 量 11-12%, 边 部 9-1%( 王 淑 琴 等,1998) 对 黄 瓜 8 个 亲 本 及 其 16 个 杂 交 组 合 的 总 产 量 等 16 个 性 状 进 行 分 析, 结 果 表 明, 总 产 量 与 总 采 瓜 数, 单 瓜 日 增 克 数, 单 瓜 重 之 间 呈 显 著 正 相 关, 与 枯 萎 病 率 呈 显 著 负 相 关, 早 期 产 量 与 早 期 采 瓜 数 呈 显 著 正 相 关, 与 霜 霉 病, 白 粉 病 病 指 呈 正 相 关 ( 马 德 华 等,1995) (2) 抗 病 基 因 转 育 丰 乐 5 号 是 经 抗 病 基 因 转 育 结 合 多 代 病 圃 筛 选 后, 选 配 的 1 代 优 质, 高 产 且 高 抗 枯 萎 病 的 西 瓜 新 品 种, 该 品 种 早 熟, 全 生 育 期 9 天, 雌 花 开 放 至 果 实 成 熟 3~31 天, 果 实 椭 圆 形, 浅 黑 色 底 上 覆 盖 暗 条 带, 平 均 单 瓜 重 4~5kg, 单 产 4kg/667m 2 皮 薄 ( 戴 祖 云 等,1998) 用 具 有 目 标 性 状 的 不 同 抗 性 材 料, 采 用 多 亲 杂 交 和 回 交 方 法, 经 病 圃 定 向 选 择, 选 育 出 2 个 抗 病 新 材 料 和 对 2 个 抗 性 材 料 遗 传 规 律 的 研 究 表 明 : 不 同 抗 性 材 料 其 杂 交 组 合 所 表 现 的 遗 传 规 律 不 一 样 :88-57 的 抗 性 遗 传 特 性 是 单 基 因 控 制 的 显 性 遗 传 ;( 张 国 良 等,1999) 为 了 培 育 抗 枯 萎 病 的 西 瓜 良 种, 用 感 病 品 种 蜜 宝 作 母 本, 分 别 与 高 抗 枯 萎 病 材 料 D3-1 和 D3-2 杂 交,F1 代 表 现 高 抗 枯 萎 病,F2 代 及 与 感 病 亲 本 蜜 宝 回 交 的 BC1 代 群 体 抗 感 分 离 比 例 分 别 符 合 3:1 和 1:1, 说 明 枯 萎 病 抗 性 遗 传 是 受 基 因 或 单 DNA 片 段 控 制 的 显 性 遗 传 ( 肖 光 辉 等,2) 新 秀 1 号 是 中 优 秀 的 四 倍 体 G 作 母 本 抗 病 品 系 C6-1-2 作 父 本 配 制 而 成 的 无 籽 西 瓜 新 品 种, 从 播 种 至 初 收, 春 植 天 种 植 7-85 天, 一 般 亩 产 25-3kg, 抗 枯 萎 病 和 炭 疽 病, 果 近 圆 形, 皮 色 深 绿 覆 暗 条 纹, 瓤 色 大 红 ( 陈 清 华 等,1998) (3) 辐 射 诱 变 育 种 辐 射 诱 变 是 西 瓜 育 种 方 法 之 一 在 本 试 验 中 用 6 照 射 西 瓜 种 子, 适 宜 的 剂 量 为 376GY 剂 量 率 为 Gh/min 处 理 西 瓜 干 种 子 容 易 操 作, 本 试 验 未 能 获 得 理 想 的 抗 病 突 变 体, 但 获 得 了 1 个 无 杈 有 用 的 突 变 体 ( 黄 学 森 等,1995) (4)DNA 导 入 采 用 DNA 浸 胚 法 将 供 本 瓠 瓜 的 总 DNA 导 入 导 入 西 瓜,D1 代 获 得 一 变 异 株, 变 异 率 为.32%,D2 代 是 植 株 成 株 期 功 能 叶 过 氧 化 物 酶 同 工 酶 酶 带 数 增 加, 出 现 了 供 体 植 株 的 酶 带, 变 异 株 部 分 染 色 体 的 臂 长 臂 比 带 型 与 受 体 相 比 产 生 了 明 显 的 差 异 ( 肖 光 辉 等,1999) 用 瓠 瓜 DNA 导 入 西 瓜 选 育 出 的 抗 性 材 料 来 亲 本, 与 性 状 优 良 的 西 瓜 品 种 或 材 料 选 配 了 24 个 杂 交 组 合 在 病 圃 中 经 小 区 测 试 和 品 比 试 验, 筛 选 出 5 个 优 良 组 合, 各 组 合 不 仅 在 病 圃 中 的 产 量 均 极 显 著 高 于 3 个 对 照 品 种, 枯 萎 病 发 病 率 和 炭 疽 病 病 情 指 数 分 别 极 显 著 低 于 和 显 著 低 于 ( 肖 光 辉 等,1999) 采 用 DNA 浸 胚 法 将 瓠 瓜 DNA 导 入 西 瓜, 在 病 圃 中 经 3 代 自 交 纯 化 和 抗 性 筛 选, 在 D3 代 选 育 出 了 D3-1-D3-4 4 份 抗 性 材 料 苗 期 接 种 鉴 定 结 果 表 明,D3-1 和 D3-2 对 西 瓜 枯 萎 病 高 抗,D3-3 和 D3-4 对 西 瓜 枯 萎 病 中 抗 ( 肖 光 辉 等,1998) 为 了 创 造 西 瓜 新 的 种 质 资 源, 用 DNA 浸 胚 法 将 瓠 瓜 的 总 DNA 导 入 西 瓜, 在 D3 代 选 育 出 了 4 份 抗 性 材 料 ; 用 常 规 育 种 方 法, 将 野 生 西 瓜 的 抗 枯 萎 病 性 状 转 育 到 栽 培 西 瓜 中, 后 代 在 病 圃 中 经 7 代 自 交 纯 化 和 抗 性 选 择, 选 育 出 了 4 份 抗 性 材 料 ( 肖 光 辉 等,1998) 经 苗 期 接 种 鉴 定 与 疫 土 直 播 鉴 定, 湖 南 省 西 瓜 品 种 资 源 没 有 发 现 高 抗 枯 萎 病 的 材 料 用 抗 病 的 野 生 资 源 与 栽 培 品 种 杂 交, 可 获 得 既 具 抗 性 又 有 较 好 经 济 性 状 的 后 代 用 外 源 DNA 导 入 技 术, 可 获 得 外 源 瓠 瓜 DNA 导 入 西 瓜 的 变 异 后 代 ( 萧 兰 异 等,1996) 选 用 综 合 性 状 优 良 的 栽 培 西 瓜 品 种 与 高 抗 西 瓜 枯 萎 病 的 野 生 西 瓜 杂 交, 后 代 在 病 圃 中 经 连 续 多 代 抗 性 筛 选 和 自 匀 纯 化, 选 育 出 4 份 抗 性 材 料 采 用 生 物 技 术 将 对 西 瓜 枯 萎 病 免 疫 的 瓠 瓜 DNA 导 入 西 瓜, 选 育 出 4 份 性 状 稳 定 的 抗 性 材 料,( 肖 光 辉 等,1999) 采 用 子 房 注 射 法 将 南 瓜 总 DNA 导 入 西 瓜, 企 望 使 西 瓜 和 南 瓜 实 现 分 子 水 平 上 的 远 缘 杂 交, 从 而 获 得 整 合 有 效 控 制 抗 病 的 南 瓜 DNA 片 段 而 不 改 变 受 体 西 瓜 农 艺 性 状 的 西 瓜 新 种 质 ( 王 浩 波 等,22) (5) 抗 性 遗 传 规 律 概 述 了 近 年 来 在 西 瓜 枯 萎 病 抗 性 遗 传 规 律 研 究, 分 子 育 种 技 术 用 于 西 瓜 种 质 创 新 与 抗 枯 萎 病 育 种 以 及 野 生 西 瓜 的 利 用 等 方 面 取 得 的 重 大 进 展, 提 出 了 今 后 西 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 的 主 要 研 究 方 向 ( 肖 光 辉 等,21) 采 用 Griffing 双 列 杂 交 方 法 Ⅱ, 对 西 瓜 枯 萎 病 上 有 不 同 抗 性 的 7 个 品 种 之 后 代 的 抗 性 表 现 进 行 研 究, 结 果 表 明, 西 瓜 品 种 对 枯 萎 病 的 抗 性 属 数 量 性 状, 抗 病 性 由 隐 性 多 基 因 控 制, 其 遗 传 效 应 符 合 加 性 - 显 性 模 型, 以 加 性 效 应 为 主, 且 感 病 对 抗 病 表 现 部 分 显 性 抗 病 ( 于 利 等,1995) 采 用 高 抗 枯 萎 病 西 瓜 品 种 一 依 姆 波 利 亚, 在 重 茬 西 瓜 田 种 植, 将 全 生 育 期 枯 萎 病 Fusarium oxysporum Schlum Schi.f.sp.niveum Snyder et Hansen 枯 死 株 控 制 在.8%, 公 顷 产 西 瓜 达 68.25t;( 鲁 占 魁 等,1997) 1.6 抗 性 品 种 西 瓜 抗 性 品 种 (1) 早 熟 品 种 利 用 抗 枯 萎 病 西 瓜 自 交 系 87A71 和 87A12 作 为 亲 本 配 制 的 杂 交 组 合 S8, 在 多 年 西 瓜 重 茬 地 自 然 病 圃 中 进 行 了 连 续 多 代 的 抗 性 选 择, 并 经 苗 期 室 内 人 工 接 种 抗 性 鉴 定, 表 现 出 田 间 高 抗 西 瓜 枯 萎 病, 高 产, 优 质, 耐 贮 运, 商 品 性 好 等 优 点, 是 一 个 抗 病 丰 产 的 优 良 杂 交 ( 刘 东 顺 等,1999) 用 可 溶 性 固 形 物 含 量 高 薄 皮 感 枯 萎 病 的 栽 培 西 瓜 自 交 系 (Citrullus lanatus var.lanatus)9713 和 可 溶 性 固 形 物 含 量 低 皮 厚 抗 病 的 野 生 西 瓜 种 质 (Citrullus lanatus var.lanatus)pi29( 范 敏 等,2) 红 冠 龙 为 中 熟 西 瓜 一 代 杂 种, 全 生 育 期 1d 左 右, 果 实 椭 圆 形, 平 均 单 瓜 质 量 8kg 以 上, 瓤 红 色, 可 溶 性 固 形 物 含 量 12.2%, 高 抗 枯 萎 病 炭 疽 病, 抗 旱 耐 湿 性 均 佳, 适 合 全 国 主 要 西 瓜 产 区 种 植 ( 张 显 等,22) 华 西 7 号 西 瓜 是 由 新 疆 华 西 种 业 有 限 责 任 公 司 育 成 的 杂 交 一 代 西 瓜 新 品 种, 全 生 育 期 9 天 左 右, 果 实 发 育 期 35 天, 植 株 生 长 势 中 等, 适 应 性 较 广, 果 实 椭 圆 形, 果 皮 绿 色, 有 深 绿 条 带 ; 瓤 色 大 红, 中 边 可 溶 性 固 物 含 量 %, 品 质 优, 抗 病 性 强, 较 抗 枯 萎 病 ;( 刘 兹 萍 等,22) 华 夏 新 红 宝 1 代 杂 种 西 瓜 为 中 晚 熟 品 种, 抗 枯 萎 病, 无 炭 疽 病, 果 形 规 整 美 观, 瓤 红 色, 果 实 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11-12%, 边 部 9-1%, 皮 厚 约 1cm, 单 瓜 重 5-8kg, 种 子 少, 耐 贮 运, 商 品 瓜 率 高, 单 产 3-4kg/666.7 m 2 ( 王 淑 琴 等,1996) 冀 西 瓜 4 号 是 利 用 自 交 系 93 和 MS 配 制 而 成 的 杂 交 一 代, 果 实 圆 形 带 花 条 纹, 果 肉 红 色, 果 实 发 育 期 28-3d, 单 瓜 重 4-5kg, 每 667m 2 产 量 35-47kg, 比 郑 杂 5 号 和 京 欣 1 号 分 别 增 加 9.6% 和 6.( 王 洪 昌 等,1997) 湘 西 瓜 17 号 ( 西 农 9 号 ) 是 以 自 交 系 WW151 为 母 本, 自 交 系 9168 为 父 本 配 置 而 成 的 中 晚 熟 有 籽 西 瓜 一 代 杂 种 全 生 育 期 98d 左 右, 开 花 至 果 实 成 熟 期 37d 左 右 果 实 椭 圆 形, 果 皮 浅 绿 色 上 覆 深 绿 色 条 带, 果 肉 红 色, 质 脆 味 甜, 果 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11%-12%, 平 均 果 质 量 7-8kg( 莫 小 平 等,22) 利 用 西 瓜 野 生 资 源 中 存 在 的 抗 枯 萎 病 基 因 选 育 出 的 湘 西 瓜 16 号, 具 有 高 抗 西 瓜 枯 萎 病 耐 重 茬 品 质 优 良 坐 果 性 能 好 高 产 稳 产 等 特 点 该 品 种 综 合 性 状 优 良, 适 合 市 场 需 求, 推 广 前 景 广 阔 其 高 产 栽 培 技 术 主 要 包 括 : 选 择 合 适 的 土 地, 深 沟 高 畦, 培 养 壮 苗, 科 学 施 肥 等 ( 陶 抵 辉

22 22 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 等,21) 湘 西 瓜 16 号 是 由 母 本 T945 和 父 本 NS142( 长 )-948 配 组 而 成, 具 有 抗 枯 萎 病 高 产 优 质 适 应 性 广 中 晚 熟 商 品 性 状 稳 定 等 特 点 一 般 667m^2 产 量 35kg, 最 高 667m^2 产 量 5kg 以 上, 经 蜜 桂 增 产 18%-25%, 比 西 农 八 号 增 产 1%-2% 比 新 红 定 增 产 15-25%( 陶 抵 辉 等,21) 聚 宝 3 号 是 合 肥 市 西 瓜 蔬 菜 科 研 所 选 育 的 杂 交 西 瓜 新 品 种, 全 生 育 期 约 95 天, 果 实 椭 圆 形 果 面 底 色 黄 绿, 上 有 深 绿 齿 条 纹, 皮 瓤 红 色, 质 脆, 品 质 优 良, 中 心 部 可 溶 性 固 形 物 含 量 %, 果 皮 硬, 耐 运 输, 生 长 稳 健, 易 坐 果, 抗 枯 萎 病 和 炭 疽 病,( 无 名 等,1995) 开 杂 12 号 是 开 封 市 农 林 科 学 研 究 所 选 育 的 一 代 杂 交 西 瓜 新 品 种,1999,2 年 分 别 通 过 河 南 省 农 作 物 品 种 审 定 委 员 会 和 河 北 省 农 作 物 审 定 委 员 会 审 定 该 品 种 果 实 椭 圆 形, 皮 墨 绿 具 隐 条 ; 果 肉 大 红, 质 脆 多 汁, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11.5%- 一 般 每 667m 2 平 均 产 量 45-5kg( 霍 治 邦 等,22) 西 农 1 号 ( 见 彩 版 插 19) 是 天 津 市 蔬 菜 研 究 所 与 西 北 农 林 科 技 大 学 合 作 选 育 的 西 瓜 抗 枯 萎 病 新 品 种 地 膜 覆 盖 栽 培 全 生 育 期 98 天, 果 实 发 育 期 32 天, 平 均 单 瓜 重 6kg 左 右, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11% 左 右, 每 667m 2 产 量 在 35kg 以 上, 高 者 达 5kg 瓤 质 细, 风 味 好, 耐 贮 运 ( 焦 定 量 等,22) 龙 富 西 瓜 为 中 熟 品 种, 全 生 育 期 为 95 1 天 果 实 椭 圆 型, 果 皮 绿 色 稍 深, 质 地 细 脆 多 汁, 含 糖 量 11.5% 以 上, 口 感 极 佳 耐 贮 运 单 瓜 重 6 8 公 斤, 亩 产 比 新 红 宝 高 13.9% 抗 枯 萎 病 和 炭 疽 病 ( 陈 柏 杰 等,1994) 陇 丰 早 成 是 1 个 优 质, 早 熟, 耐 低 温 寡 照, 适 合 日 光 温 室 等 保 护 地 栽 培 和 露 地 早 熟 栽 培 的 优 良 杂 交 种 中 抗 西 瓜 枯 萎 病, 较 耐 叶 部 和 果 实 病 害, 耐 温 性 好 露 地 栽 培 全 生 育 期 在 9 天 以 内, 果 实 发 育 期 约 28 天 品 质 优 良, 平 均 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11.5%-12%( 刘 东 顺 等,22) 庆 农 2 号 是 大 庆 市 庆 农 西 瓜 研 究 所 培 育 的 主 抗 枯 萎 病, 炭 疽 病 和 病 毒 病, 且 优 质, 高 产 和 少 籽 的 西 瓜 新 品 种, 其 综 合 性 状 超 过 特 大 新 红 宝 和 庆 红 宝 庆 农 2 号 中 熟 品 种, 全 生 育 期 95-1 天, 果 实 椭 圆 形, 果 皮 绿 色 有 网 纹, 肉 质 细 脆, 红 瓤, 味 甘 甜 ( 张 志 发 等,1995) 抗 病 苏 红 宝, 果 实 椭 圆 形, 果 形 指 数 为 1.3, 果 皮 绿 色 具 细 网 纹, 皮 薄 瓤 色 桃 红, 质 地 细 嫩, 汁 多 味 甜, 可 溶 性 固 形 物 11.5% 果 型 大, 单 板 重 8-1kg, 亩 产 4kg 皮 质 坚 韬, 极 耐 运 贮 抗 西 瓜 枯 萎 病 能 力 强, 适 应 性 广, 全 国 南 北 均 能 栽 培 ( 陈 振 武 等,1997) 欣 大 为 早 熟 西 瓜 一 代 杂 种, 果 实 发 育 期 29d; 坐 果 性 好, 中 抗 枯 萎 病 ; 果 实 椭 圆 形, 平 均 单 瓜 质 量 6.1kg, 果 肉 鲜 红 色, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 12.8%, 品 质 极 优, 耐 运 输 ; 适 宜 全 国 西 瓜 产 区 露 地 及 保 护 地 早 熟 栽 培 ( 王 恒 炜 等,22) 浙 蜜 5 号 为 中 早 熟 杂 交 一 代 西 瓜 品 种, 适 合 我 国 长 江 以 南 地 区 露 地 栽 培 和 小 拱 棚 早 熟 栽 培 果 实 圆 形, 底 色 深 绿, 覆 墨 绿 色 隐 条 纹 果 肉 红 色, 中 光 折 光 糖 度 11.9%, 边 缘 折 光 糖 度 9.%, 肉 质 脆 爽, 汁 水 多, 品 质 佳, 平 均 单 瓜 质 量 5-6kg 较 抗 枯 萎 病 和 炭 疽 病 ( 张 明 方 等,22) 新 优 16 号 是 新 疆 生 产 建 设 兵 团 222 团 种 子 公 司 和 222 团 农 科 所 选 育 的 杂 交 一 代 西 瓜 中 早 熟 新 品 种 地 膜 栽 培 全 生 育 期 红 7 天 ; 果 实 椭 圆 形, 皮 色 浅 绿, 上 覆 15 条 左 右 的 绿 色 直 通 宽 条 带 ; 瓤 色 大 红, 肉 质 细 脆 多 汁 甘 甜 爽 口, 果 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 高 者 达 13%( 陈 代 平 等,2) 豫 艺 15 是 河 南 农 业 大 学 林 学 园 艺 学 院 选 配 的 纯 黑 皮 高 产 抗 病 优 质 中 熟 西 瓜 新 品 种 全 生 育 期 93 天, 果 实 发 育 期 33 天 植 株 长 势 中 等 稍 旺, 分 枝 力 适 中, 易 坐 果 主 蔓 第 1 雌 花 着 生 于 第 6-8 节, 以 后 每 间 隔 4-5 节 再 现 1 朵 雌 花 果 实 椭 圆 形, 皮 纯 黑 并 覆 有 蜡 质 白 粉 ( 马 长 生 等,21) 抗 病 苏 蜜 是 苏 蜜 1 号 类 型 高 抗 西 瓜 枯 萎 病 的 新 品 种 (F1) 该 品 种 早 熟, 全 生 育 期 85-9 天, 开 花 至 果 实 完 全 成 熟 3-32 天 果 实 椭 圆 形, 墨 绿 色, 单 瓜 重 4-5kg 皮 薄, 瓤 红, 质 细, 果 实 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 %( 徐 润 芳 等,1995) (2) 中 熟 品 种 庆 发 8 号 西 瓜 属 中 熟 一 代 杂 种 植 株 生 长 健 壮, 抗 枯 萎 病, 兼 抗 炭 疽 病 果 实 椭 圆 形, 外 观 似 金 钟 冠 龙 品 种 果 肉 红 色, 可 溶 性 固 形 物 含 量 12% 以 上, 少 籽 产 量 75~15t/hm 2 ( 张 志 发 等,1999) 豫 西 瓜 7 号 是 开 封 市 农 林 科 学 院 研 究 所 选 育 的 早 熟 杂 交 1 代 新 品 种, 单 产 一 般 为 3-35kg/667m 2, 果 实 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 12%, 抗 枯 萎 病 和 炭 疽 病 1998 年 4 月 通 过 漂 处 农 作 物 品 种 审 定 委 员 会 审 定 并 命 名 ( 李 国 申 等,1999) 金 丰 宝 是 兰 州 市 农 科 所 西 瓜 课 题 组 选 育 的 中 熟 杂 交 一 代 西 瓜 新 品 种 全 国 多 点 试 验, 折 合 平 均 产 量 比 对 照 品 种 京 欣 1 号 西 农 8 号 分 别 增 产 24.8% 5.5% 该 品 种 全 生 育 期 95-11d, 果 实 发 育 期 38-4d, 植 株 长 势 中 庸, 坐 瓜 整 齐, 座 果 率 98.3%, 高 抗 枯 萎 病 ( 张 延 河 等,22) 台 湾 黑 宝 西 瓜 是 河 南 农 业 大 学 林 学 园 艺 学 院 育 成 的 杂 交 一 代 中 熟 西 瓜 品 种 全 生 育 期 15 天 左 右, 果 实 发 育 期 约 33 天 果 皮 黑 色, 果 肉 大 红, 肉 质 脆, 风 味 佳, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11.5% 左 右 千 粒 重 45g 单 瓜 重 8-1kg,667m 2 产 量 5kg 左 右 ( 孙 守 如 等,21) 郑 抗 4 号 是 农 业 科 学 院 郑 州 果 树 研 究 所 育 成 的 中 熟 抗 病 丰 产 一 代 西 瓜 新 品 种, 全 生 育 期 1 天 左 右, 果 帝 发 育 期 33 天 左 右 ; 单 瓜 重 6kg, 产 量 35-45kg/667m 2 ; 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 %; 果 实 花 皮, 红 瓤 椭 圆 形 ( 徐 永 阳 等,2) 湘 育 31 是 湖 南 省 园 艺 研 究 所 和 湖 南 省 蔬 菜 研 究 所 合 作 选 育 的 早 中 熟 优 质 多 抗 无 籽 西 瓜 新 品 种 全 生 育 期 9 天 左 右, 果 实 发 育 期 29~31 天 ; 浅 绿 底 上 覆 15~18 条 清 晰 绿 齿 带, 果 形 圆 正, 外 观 美 丽 ; 瓤 色 鲜 红, 肉 质 细 脆 多 汁, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11.8% 左 右 ; 平 均 单 瓜 重 5~8kg( 陶 抵 辉 等,2) 利 用 我 国 优 质 轻 抗 枯 萎 病 材 料 为 母 本, 与 美 国 高 抗 枯 萎 病 丰 产 材 料 为 父 本 选 配 而 成 抗 病 黑 旋 风 品 种, 全 生 育 期 1 天 左 右, 雌 花 开 花 到 成 熟 需 32 天, 果 实 椭 圆, 黑 皮 红 瓤 少 子, 肉 质 细 脆, 口 感 好, 平 均 单 果 重 6kg 以 上, 最 大 可 达 3kg 中 心 糖 12% 以 上, 产 量 高 于 35kg/667m 2 ( 段 爱 民 等,22) 豫 艺 甘 甜 无 籽 属 中 熟 无 籽 西 瓜 品 种, 全 生 育 期 约 12 天, 果 实 发 育 期 3-33 天 ; 果 形 圆 正, 外 观 美 丽, 瓤 色 鲜 红, 瓤 质 细 脆 多 汁, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 1.8%-11.8%; 平 均 单 瓜 重 6-8kg,667m 2 产 量 可 达 45kg; 生 长 稳 健, 中 抗 西 瓜 枯 萎 病, 抗 西 瓜 炭 疽 病 ( 马 长 生 等,22) (3) 晚 熟 品 种 对 国 内 外 西 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 实 践 上 不 同 技 术 手 段 的 应 用 现 状 及 抗 病 育 种 新 技 术, 在 西 瓜 抗 枯 萎 病 育 种 上 的 应 用 潜 力 及 存 在 的 主 要 问 题 进 行 综 述 ( 江 洪 等,1996) 3 个 西 瓜 野 生 类 型 PI PI 和 PI 分 别 对 西 瓜 蔓 枯 病, 枯 萎 病 和 炭 疽 病 具 有 抗 性, 并 兼 抗 其 它 病 害, 抗 病 性 遗 传 多 由 单 显 性 或 隐 性 基 因 控 制, 植 株 表 现 生 长 势 强, 晚 熟, 果 实 中 大, 无 食 用 价 值 ( 张 建 农 等,1997) 菊 城 无 籽 1 号 是 开 封 市 农 林 科 学 研 究 所 育 成 的 中 晚 熟 高 产 稳 产 优 质 抗 病 耐 贮 运 无 籽 西 瓜 新 品 种, 全 生 育 期 约 1 天, 果 实 发 育 期 35 天 左 右, 产 量 35-45kg/667m^2, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 11.4%, 边 部 8.9%, 果 实 墨 绿 皮, 高 圆 形, 红 瓤, 无 籽 性 好, 耐 贮 运, 抗 枯 萎 病 ( 李 国 申 等,22) 黄 瓜 抗 性 品 种 (1) 早 熟 品 种 从 1992 年 开 始 搜 集 品 种 资 源 进 行 冬 春 茬 日 光 温 室 黄 瓜 新 品 种 的 选 育 研 究 1994 年 选 出 耐 低 温 弱 光 的 保 护 地 育 种 材 料 T54 和 451,21 年 育 成 了 黄 瓜 新 品 种 津 优 2 号, 津 优 2 号 黄 瓜 植 株 生 长 势 强, 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 瓜 条 顺 直, 长 棒 状, 腰 瓜 长 3cm 左 右, 单 瓜 质 量 15g 左 右, 商 品 性 好 ( 马 德 华 等,22) 津 优 4 号 的 亲 本 之 一 P17 是 地 方 品 种 金 早 生 突 变 株 的 多 代 自 交 后 代, 另 一 亲 本 T55 是 利 用 自 交 系 的 田 间 自 然 杂 交 株 经 多 代 自 交 选 育 的 自 交 系 该 一 代 杂 种 耐 热, 在 夏 季 34~ 36 高 温 下 可 正 常 发 育 对 枯 萎 病 霜 霉 病 和 白 粉 病 的 抗 性 强, 春 露 地 栽 培 产 量 可 达 75t hm 2 ( 马 德 华 等,21) 津 优 5 号 是 用 自 交 系 C-1-6 和 G 配 制 而 成 的 杂 交 一 代 瓜 新 品 种 该 品 种 早 熟 性 好, 耐 低 温 弱 光, 对 霜 霉 病 白 粉 病 枯 萎 病 抗 性 强 ; 植 株 生 长 势 强, 早 春 栽 培 产 量 可 达 9kg/hm 2, 秋 冬 栽 培 产 量 可 达 75kg/hm 2 ; 果 实 长 棒 状 ( 李 加 旺 等,2) 津 优 6 号 为 无 刺 瘤 黄 瓜 杂 交 种, 刺 极 少, 无 棱 无 瘤, 果 实 棒 状, 长 3cm 左 右, 单 瓜 质 量 13g 左 右, 瓜 把 短, 瓜 色 深 绿, 有 光 泽, 畸 形 瓜 率 少, 商 品 性 好 ; 果 肉 浅 纱 色 质 脆 味 甜 品 质 优, 植 株 生 长 势 强, 春 露 地 栽 培 产 量 可 达 65t/hm 2 对 枯 萎 病, 霜 霉 病, 白 粉 病 的 抗 性 强 ( 马 德 华 等,2) 湘 黄 瓜 6 号 是 由 优 良 自 交 系 L88-6 J4-11 杂 交 配 制 而 成, 适 于 春 夏 秋 三 季 栽 培 的 一 代 杂 种 该 品 种 植 株 生 长 势 强, 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 结 成 性 好, 坐 果 率 高 ; 瓜

23 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 23 长 棒 形, 长 约 31cm, 瓜 把 短, 平 均 单 果 质 量 28-3g, 瓜 皮 深 绿 色, 刺 瘤 较 多, 突 起 不 明 显, 果 脐 部 无 黄 色 条 ( 王 安 乐 等,22) 津 优 3 号 为 早 熟 型 黄 瓜 一 代 杂 种, 耐 低 温 耐 弱 光 性 能 优 良, 对 枯 萎 病 霜 霉 病 白 粉 病 的 抗 性 强, 适 用 于 华 北 地 区 越 冬 温 室 及 早 春 大 棚 栽 培 植 株 生 长 势 强, 早 春 大 棚 栽 培 产 量 可 达 9t/hm2, 越 冬 日 光 温 室 栽 培 产 量 可 达 11t/hm 2 以 上 ( 马 德 华 等,1999) 津 绿 3 号 为 早 熟 型 黄 瓜 一 代 杂 种, 耐 低 温 和 耐 弱 光 性 能 优 良, 对 枯 萎 病, 霜 霉 病, 白 粉 病 的 抗 性 强, 适 于 华 北 地 区 越 冬 温 室 及 早 春 大 棚 栽 培, 植 物 生 长 势 强, 产 量 可 达 9t/hm 2 果 实 棒 状, 长 3cm 左 右, 单 瓜 质 量 15g 左 右 商 品 性 好, 瓜 把 短, 瓜 色 深 绿 ( 马 德 华 等,1999) 通 过 征 集 国 内 外 黄 瓜 品 种 资 源, 经 筛 选 及 配 制 组 合 后 鉴 定, 育 成 的 多 抗, 优 质, 丰 产 一 代 杂 种 夏 青 4 号, 一 般 亩 产 25kg, 比 对 照 种 夏 青 2 号 增 产 46.7%, 商 品 瓜 率 增 加 1.4%, 具 有 抗 枯 萎 病, 炭 疽 病, 细 菌 性 角 斑 商, 白 粉 病 和 耐 疫 病, 霜 霉 病 的 特 点 ( 黄 涛 等,1997) 甘 丰 11 是 以 早 熟, 抗 病 的 优 良 自 交 系 C8216 为 母 本, 高 抗 霜 霉 病 的 Z8532 为 杀 本 配 制 的 一 代 杂 交 种 该 杂 交 种 具 有 早 熟, 丰 产, 抗 枯 萎 病, 霜 霉 病, 耐 低 温, 弱 光 照, 耐 盐 性 好 等 特 点 瓜 条 长 棒 状, 色 绿, 棱 大, 刺 密, 刺 瘤 白 色, 肉 厚, 质 脆, 味 浓, 商 品 性 好 ( 刘 桂 英 等,1998) 甘 丰 8 号 是 由 雌 性 强 的 An83326 自 交 系 为 母 本,Z8311 优 良 自 交 系 为 父 本 配 制 的 一 代 杂 交 种 该 杂 交 种 具 有 早 熟, 耐 低 温, 耐 弱 光, 抗 枯 萎 病, 白 粉 病, 耐 霜 霉 病, 角 斑 病, 商 品 性 好 等 特 点, 前 期 产 量 高, 丰 产 性 好, 一 般 产 量 kg/ hm 2 ( 刘 桂 英 等,1996) 津 春 2 号 是 利 用 自 交 系 和 配 制 而 成 的 杂 种 一 代, 该 品 种 熟 性 早, 从 播 种 到 始 收 为 65 天 左 右, 产 量 高, 每 667m2 前 期 产 量 9kg, 总 产 量 5kg 以 上, 分 别 比 长 春 密 刺 增 产 21% 和 29%, 抗 病 性 强, 对 霜 霉, 白 粉, 枯 萎 病 有 较 好 的 抗 性 ( 李 加 旺 等,1996) 津 优 1 号 黄 瓜 以 本 所 优 良 自 交 系 81 为 母 本, 以 荷 兰 黄 瓜 与 中 国 黄 瓜 杂 交 后 代 经 多 代 自 交 获 得 的 自 交 系 48 为 父 本 杂 交 而 成 生 长 势 强, 第 1 雌 花 节 位 在 第 4 节 左 右, 前 期 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 早 熟, 坐 瓜 率 高, 瓜 条 顺 直, 亮 绿 色, 中 等 刺 瘤, 瓜 长 36cm, 横 径 3cm, 单 瓜 质 量 16g, 抗 黄 瓜 枯 萎 病 ( 哈 玉 洁 等,21) (2) 中 熟 品 种 露 地 3 号 是 以 自 交 系 1348 为 母 本, 自 交 系 1469 为 父 本 配 制 的 黄 瓜 一 代 杂 种, 中 早 熟, 平 均 亩 产 3449 公 斤, 抗 霜 霉 病, 对 枯 萎 病 也 表 现 出 一 定 的 抗 性, 适 于 春 季 露 地 和 秋 延 栽 培 ( 杨 学 奇 等,1996) 津 优 4 号 为 耐 热 型 黄 瓜 杂 交 种, 夏 季 在 34~36 高 温 下 可 正 常 发 育 对 枯 萎 病 霜 毒 病 白 粉 病 的 抗 性 强, 适 合 华 北 地 区 春 露 地 及 秋 露 地 和 越 夏 栽 培 植 株 生 长 势 强, 春 露 地 栽 培 产 量 可 达 75t/hm 2 果 实 棒 状, 长 3cm 左 右, 单 瓜 量 15g 左 右 商 品 性 好 ( 马 德 华 等,2) 山 农 5 号 为 保 护 地 黄 瓜 新 品 种, 主 要 适 于 华 北 地 区 日 光 温 室 越 冬 栽 培, 植 株 生 长 健 壮, 后 期 不 早 衰, 丰 产 性 好, 越 冬 栽 培 产 量 可 达 12t/hm^2 以 上, 瓜 长 棒 状, 绿 色, 胡 光 泽, 刺 瘤 密, 腰 瓜 长 约 35cm, 单 瓜 质 量 约 15g, 果 肉 淡 绿 色, 质 脆, 味 清 香, 品 质 佳, 耐 低 温 ( 曹 辰 兴 等,21) 中 农 22 为 极 早 熟 抗 病 优 质 高 产 全 雌 性 一 代 杂 种 植 株 生 长 旺 盛, 田 间 高 抗 白 粉 病 角 斑 病 枯 萎 病, 兼 抗 黑 星 病 和 霜 霉 病 适 合 华 北 东 北 华 中 西 南 和 华 东 大 部 分 地 区 春 季 保 护 地 栽 培 产 量 75t/hm 2 瓜 棒 形, 长 约 3cm, 横 径 3.cm 左 右, 单 瓜 质 量 15~2g( 李 锡 香 等,21) 豫 黄 3 号 是 以 自 交 系 为 母 本, 自 交 系 为 父 本, 杂 交 育 成 的 黄 瓜 新 杂 交 种 该 品 种 全 生 育 期 天, 株 高 22cm, 主 侧 蔓 均 可 结 瓜 果 皮 深 绿 色, 刺 瘤 适 中, 果 肉 浅 绿 色, 单 果 重 g 鲜 瓜 VC 含 量.221mg/g 糖 ( 张 俊 河 等,1998) 湘 黄 瓜 4 号 系 从 2 余 份 黄 瓜 品 种 资 源 中 筛 选 出 的 优 良 自 交 系 L88-9 和 T5-8 杂 交 配 制 而 成 的 一 代 杂 种 植 株 生 长 势 强, 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 果 实 长 棒 形, 长 约 31cm, 瓜 把 长 约 3.6cm, 平 均 单 果 质 量 297g, 果 皮 深 绿 色, 刺 瘤 较 多, 突 起 较 明 显, 瓜 把 无 苦 味 ( 王 安 乐 等,21) 针 对 黄 瓜 新 品 种 津 优 2 号 的 品 种 特 征 特 性 和 生 长 习 性, 重 点 论 述 了 其 栽 培 要 点 该 品 种 熟 性 早, 产 量 高, 从 播 种 到 始 收 7 天, 每 666.7m 2 产 6kg 以 上, 品 质 佳, 商 品 性 好, 耐 低 温, 耐 弱 光 能 力 强, 抗 枯 萎 病, 白 粉 病, 霜 霉 病, 适 合 日 光 温 室 栽 培 ( 李 加 旺 等,1998) 中 农 21 是 适 于 保 护 地 间 ( 套 ) 作 或 短 季 节 茬 口 种 植 的 早 熟 黄 瓜 一 代 杂 种 植 株 半 蔓 生, 瓜 长 26-32cm, 把 短, 瓜 顺 直, 皮 色 深 绿, 有 光 泽, 单 瓜 质 量 15-2g, 品 质 脆 嫩, 叶 微 甜, 无 苦 味 比 对 照 品 种 中 农 5 号 早 熟 5-6d 早 期 产 量 比 对 照 平 均 增 加 1% 以 上 ( 沈 镝 等,21) 津 春 4 号 是 利 用 两 个 抗 病 丰 产 的 自 交 系 Jin-9-3 和 杂 交 而 成 的 黄 瓜 一 代 杂 种 该 品 种 抗 霜 霉 病, 白 粉 病, 枯 萎 病 的 能 力 接 近 津 杂 2 号 较 早 熟, 长 势 强, 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 主 侧 蔓 均 有 结 瓜 能 力, 且 有 回 头 瓜 瓜 条 棍 棒 型, 白 刺, 略 有 棱, 瘤 明 显,( 吕 淑 珍 等,1994) 碧 春 的 亲 本 为 8232 与 8129 两 个 优 良 自 交 系 该 品 种 生 长 势 强 ; 早 熟 性 好, 早 期 产 量 高 ; 对 霜 霉 病, 白 粉 病, 枯 萎 病, 病 毒 病 的 抗 性 强 ; 丰 产 性 好, 品 质 优, 一 般 666.7m2 产 量 达 5kg 左 右, 高 者 可 达 6kg 以 上 目 前 国 内 2 个 省 市 推 广 约 666( 王 秀 生 等,1993) 津 优 1 号 黄 瓜 以 高 代 稳 定 自 交 系 81 和 48 为 亲 本 杂 交 而 成 该 一 代 杂 种 生 长 势 强, 前 期 以 主 蔓 结 瓜 为 主, 早 熟, 高 产, 瓜 顺 直, 亮 绿 色, 中 等 刺 瘤, 抗 霜 霉 病 白 粉 病 枯 萎 病 能 力 强, 营 养 生 长 与 生 殖 生 长 协 调, 适 合 春 大 棚 栽 培, 产 量 可 达 12t/hm 2 ( 刘 殿 林 等,21) 早 春 二 号 黄 瓜 是 利 用 自 交 系 89-4 和 83-4 配 制 而 成 的 杂 交 一 代, 瓜 为 深 绿 色, 瓜 顶 端 不 带 黄 条 纹, 瓜 条 顺 直, 瓜 长 3cm, 直 径 3.5cm, 把 短, 单 瓜 重 2g 左 右, 刺 白, 瘤 多, 口 感 甜, 脆, 植 株 生 长 势 强, 第 一 雌 花 节 位 3-5 节, 早 熟 ( 刘 俊 山 等,2) 早 青 2 号 为 选 用 抗 病 的 黄 瓜 雌 性 系 75-1 作 母 本, 优 质 的 黄 瓜 品 种 56 号 作 父 本 配 制 而 成 的 一 代 杂 种 从 种 到 始 收 53 天, 一 般 666.7m 2 产 3kg, 高 者 可 达 4kg, 抗 枯 萎 病 疫 病 和 发 疽 病, 耐 霜 霉 病 和 白 粉 病, 瓜 条 圆 柱 形 ( 卓 齐 勇 等,1995) 中 农 8 号 是 用 优 良 自 交 系 211 和 273 配 制 而 成 的 优 良 黄 瓜 一 代 杂 种, 瓜 色 深 绿 有 光 泽, 果 面 无 黄 色 条 纹, 肉 质 脆 嫩, 商 品 性 好, 抗 霜 霉 病, 白 粉 病 和 枯 萎 病, 一 般 每 667m 2 产 量 4~6135kg, 丰 产, 稳 产, 适 于 春, 秋 两 季 露 地 栽 培, 我 国 南 北 地 均 可 种 植,( 方 秀 娟 等,1996) 豫 黄 瓜 2 号 为 中 晚 熟 一 代 杂 种, 适 合 春 季 小 拱 棚, 春 秋 露 地 及 秋 延 后 栽 培, 高 抗 黄 瓜 枯 萎 病, 霜 霉 病, 白 粉 病, 炭 疽 病, 疫 病, 果 实 商 品 性 好, 产 量 可 达 75kg/hm 2 ( 李 建 吾 等,1999) 用 多 菌 灵, 瑞 毒 霉, 代 森 锰 锌, 甲 基 托 布 津,Na 3 PO 4 等 杀 菌 剂 处 理 黄 瓜 种 子, 测 定 其 对 黄 瓜 出 苗 的 影 响 和 对 枯 萎 病, 炭 疽 病, 黄 瓜 黑 星 病 的 杀 菌 效 果 通 过 方 差 分 析 和 F 值 检 验 结 果 表 明, 甲 基 托 布 津, 瑞 毒 霉 对 黄 瓜 出 苗 有 抑 制 作 用,Na 3 PO 4 提 高 黄 瓜 出 苗 率 在 25%( 马 文 荷 等,1997) 从 蔬 菜 地 和 花 圃 土 样 中 分 离 筛 选 出 对 黄 瓜 枯 萎 病 致 尖 孢 镰 孢 菌 有 很 强 拮 抗 作 用 的 细 胞 8 株, 抑 菌 圈 直 径 从 ( )mm, 通 过 对 黄 瓜 的 胚 根, 幼 苗 以 及 在 田 上 我 所 进 行 的 防 效 测 定, 这 8 株 细 菌 混 合 培 养 液 最 高 防 效 可 达 7.27% ( 范 寰 等,2) 概 述 了 黄 瓜 新 品 种 津 优 5 号 的 生 物 学 特 征 品 种 特 性 及 其 栽 培 技 术 该 品 种 早 熟, 丰 产, 耐 低 温 耐 弱 光, 对 霜 霉 病 白 粉 病 枯 萎 病 抗 性 强 品 质 佳 商 品 性 好, 适 合 日 光 温 室 早 春 茬 及 秋 冬 茬 栽 培 ( 李 加 旺 等,2) 湘 育 黄 玫 瑰 系 杂 交 一 代 三 倍 体 黄 皮 红 瓤 无 籽 西 瓜, 熟 性 早, 全 生 育 期 85 天 左 右, 自 雌 花 开 放 到 果 实 成 熟 约 3 天, 中 抗 枯 萎 病 抗 炭 疽 病, 坐 果 能 力 强 果 实 整 齐 度 好,667m 2 产 量 2-35kg 平 均 单 瓜 重 5.8kg, 皮 厚 1.5cm, 果 皮 硬 度 18.3kg/cm 2, 耐 贮 运 性 能 强, 中 心 可 溶 ( 陶 抵 辉 等,22) 1993 年 开 始 搜 集 黄 瓜 品 种 资 源 进 行 日 光 温 室 越 冬 黄 瓜 的 新 品 种 选 育 研 究,1995 年 选 出 耐 低 温 弱 光 的 保 护 地 育 种 材 料 F69 和 F8,21 年 育 成 适 合 在 日 光 温 室 栽 培 的 黄 瓜 新 品 种 津 优 3 号 该 品 种 植 株 生 长 势 强, 主 蔓 结 瓜 为 主, 瓜 条 顺 直, 长 棒 状, 腰 瓜 长 35cm 左 右, 单 瓜 质 量 22g 左 右 ( 马 德 华 等,22) 以 C8216 为 母 本,Z8532 为 父 本 配 制 的 黄 瓜 一 代 杂 种 甘 丰 11 号, 熟 性 早, 产 量 高, 果 实 长 棒 状, 色 绿, 棱 刺 明 显, 瘤 大 且 密, 瓜 长 32.7cm, 单 果 质 量 25g, 瓜 把 短, 果 形 指 数 8.2, 商 品 性 优 良, 高 抗 枯 萎 病, 中 抗 霜 霉 病, 细 菌 性 角 斑 病 和 缘 枯 病, 一 般 产 量 8kg (667m 2 ) 2-1 ( 李 庭 红 等,22) 通 过 测 定 西 瓜 枯 萎 病 病 菌 菌 丝 生 长 量 来 评 价 供 试 药 肥 - 瑞 枯 丹 一 系 列 浓 度 的 抑 菌 效 果 ( 李 琪 等,1999) 陕 农 9 号 为 中 熟 西 瓜 一 代 杂 种, 全 生 育 期 1d 左 右 ; 果 料 椭 圆 形, 平 均 单

24 24 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 果 质 量 8kg 以 上, 果 肉 粉 红, 均 匀 一 致, 籽 极 少, 中 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 12% 以 上 ; 抗 枯 萎 病, 炭 疽 病, 耐 病 毒 病, 抗 旱 性 好, 适 合 长 江 以 北 地 区 种 植 ( 张 显 等,22) 景 丰 宝 2 号 为 杂 交 1 代 西 瓜 新 品 种, 果 实 椭 圆 形, 皮 深 绿 色, 果 肉 鲜 红, 肉 质 爽 口 多 汁 纤 维 少, 果 心 可 溶 性 固 形 物 含 量 12.6%, 平 均 瓜 重 15kg, 抗 枯 萎 病,1997 年 通 过 黑 龙 江 省 农 作 物 品 种 审 定 委 员 会 审 定 并 命 名 ( 蔡 景 学 等,1997) 利 用 94S8 和 97F3 自 交 系 选 配 的 杂 交 一 代 西 瓜 新 品 种 双 抗 8 号, 经 苗 期 枯 萎 病 接 种 鉴 定, 平 均 病 株 率 为 3.8%, 接 近 于 对 照 品 种 西 农 8 号, 抗 性 表 现 属 中 抗 水 平, 田 间 试 验 示 范 结 果 表 明, 双 抗 8 号 主 抗 枯 萎 病, 兼 抗 炭 疽 病, 生 育 期 较 对 照 西 农 8 号 提 早 3-4d; 易 坐 果, 且 坐 果 整 齐 ( 王 果 萍 等,22) 其 他 瓜 类 抗 性 品 种 (1) 苦 瓜 穗 研 2 号 苦 瓜 是 从 英 引 苦 瓜 中 采 用 系 统 选 育 而 成 的 新 品 种, 中 熟, 春 植 从 定 植 至 初 收 45-5 天, 夏 秋 植 从 播 种 至 初 收 45-5 天, 中 长 圆 筒 形, 条 瘤 粗 直, 圆 瘤 少, 瓜 皮 光 滑, 色 浅 绿, 瓜 长 25-3cm 粗 7-8cm, 肉 厚 1.1cm, 单 瓜 重 35-6g, 品 质 优, 适 宜 市 销 和 出 口 ( 李 向 阳 等,21) (2) 籽 瓜 B6 和 R9 均 系 甘 肃 农 业 大 学 瓜 类 研 究 所 培 育 的 杂 交 一 代 抗 枯 萎 病 籽 瓜 新 品 系 B6 为 黑 籽 籽 瓜, 全 生 育 期 约 13 天, 果 实 及 种 子 生 育 期 55~6 天 植 株 生 长 强 健, 高 抗 枯 萎 病, 兼 抗 蔓 枯 病 单 株 坐 果 1~2 个, 产 籽 率 约 2.5% 种 皮 黑 为 白 心, 黑 边 清 晰 均 匀 ( 陈 年 来 等,2) 兰 州 市 农 科 所 籽 瓜 课 题 组 选 育 的 兰 州 红 板 1 号 ( 原 代 号 QJ-25) 是 首 次 采 用 杂 交 技 术 选 配 的 杂 交 1 代 红 籽 瓜 品 种 中 抗 枯 萎 病, 全 生 育 期 122d 种 皮 色 泽 红 艳, 纵 径 15.4mm, 横 径 1.2mm, 千 粒 重 22.6g 营 养 成 分 丰 富, 平 均 产 量 72.68kg/667m^ 年 通 过 技 术 鉴 定 ( 翟 英 临 等,1999) 兰 州 红 板 2 号 是 兰 州 市 农 业 科 学 研 究 所 籽 瓜 课 题 组 选 育 的 红 籽 瓜 杂 交 一 代 良 种 中 抗 枯 萎 病, 全 生 育 期 115 天 种 皮 鲜 红 悦 目, 纵 径 16.mm, 横 径 1.3mm, 千 粒 重 247g,667m 2 平 均 产 籽 量 66.3kg 1999 年 通 过 甘 肃 省 科 委 组 织 的 鉴 定 验 收 ( 李 金 玉 等,21) (3) 南 瓜 以 吉 林 大 板 白 瓜 籽 为 原 始 材 料, 采 用 集 团 选 择 法 选 育 而 成 的 平 凉 大 板 南 瓜, 其 生 育 期 1d, 比 当 地 主 栽 品 种 长 蔓 戎 子 早 熟 2d 以 上, 抗 霜 霉 病 枯 萎 病, 幼 瓜 期 与 南 亚 寡 鬃 实 蝇 产 卵 盛 期 错 位, 单 间 种 皆 宜 ( 李 广 学 等,1997) 1.7 病 害 防 治 化 学 防 治 (1) 药 剂 筛 选 崔 美 香 等 于 1996 共 做 了 22 种 药 剂 对 瓜 类 枯 萎 及 炭 疽 病 菌 室 内 抑 菌 力 的 测 定, 通 过 2 次 实 验 6 个 重 复, 其 结 果 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 有 4 种 药 剂 效 果 极 显 著,7 种 显 著,3 种 有 一 定 效 果,8 种 无 效, 对 黄 瓜 炭 疽 病 菌 有 6 种 效 果 极 显 著 枯 萎 炭 疽 病 是 严 重 危 害 瓜 类 作 物 的 重 要 病 害 室 内 测 定 了 17 种 杀 菌 剂 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 的 毒 力, 其 中 速 保 利 DT 多 菌 灵 对 病 菌 的 毒 力 较 强,EC5 均 在 1mg/kg 以 下, 通 过 复 配, 筛 选 出 92-4, 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 的 EC5 为.45mg/kg, 共 毒 系 数 为 26.36, 盆 栽 和 大 田 防 治 效 果 在 5% 以 上 ( 吴 汉 章 等,1994) 西 瓜 枯 萎 病 又 称 蔓 割 病 萎 蔫 病, 是 西 瓜 上 的 主 要 病 害, 常 年 发 病 死 株 率 为 1-3%, 严 重 时 可 达 8-9%, 为 筛 选 出 防 治 该 病 的 理 想 药 剂, 进 行 了 试 验 ( 曾 宜 华 等,21) (2) 苯 菌 灵 经 盆 栽 生 测 和 田 间 重 病 地 试 验, 应 用 5% 苯 菌 灵 可 湿 性 粉 剂 (WP) 1 倍,15 倍,2 倍 防 治 西 瓜 枯 萎 病, 平 均 防 效 达 86.56%, 比 5% 多 菌 灵 WP 和 胶 悬 剂 的 防 治 效 高 34.37% 和 26.96%, 其 中 以 1 倍 的 增 产 率 最 高, 为 58.97%( 李 林 等,1994) (3) 枯 萎 立 克 采 用 8 倍 37% 的 枯 萎 立 克 毒 土, 播 种 时 每 穴 基 施.25kg, 结 合 苗 期 发 病 前 用 5 倍 37% 的 枯 萎 立 克 药 液 2ml/ 穴 灌 根, 对 籽 瓜 枯 萎 病, 防 治 效 果 可 达 88.7%( 宋 万 才 等,2) (4) 多 灵 菌 在 含 有 不 同 配 比 的 多 灵 菌 和 五 氯 硝 基 苯 的 PDA 平 板 上 测 定 其 对 菌 丝 生 长 的 抑 制 率 和 用 Finney 机 率 值 分 析 法, 求 出 药 剂 的 毒 力 回 归 方 程 及 EC5, 以 增 效 比 值 (SR) 判 别 不 同 组 配 的 毒 力 作 用 结 果 表 明 五 氯 硝 基 苯 和 多 灵 菌 的 8:32 配 比 组 合 对 驻 枯 萎 病 原 菌 能 发 挥 最 在 作 用 ( 张 颖 舒 等,2) 瓠 瓜 枯 萎 病 是 宁 波 菜 区 类 重 危 害 瓠 瓜 的 病 害, 株 病 率 高 达 2-4% 成 株 期 发 病 症 状 表 现 有 2 种 : 由 初 侵 染 引 起 全 株 性 萎 蔫 ; 由 再 侵 染 引 起 局 分 枝 萎 蔫 药 剂 防 治 采 用 5% 多 菌 灵 可 湿 性 粉 剂 毒 土 穴 旆, 发 病 前 或 发 病 初 见 时 用 5% 多 菌 灵 WP5 倍 液 加 15% 三 唑 酮 ( 赵 海 棠 等,2) (5) 使 百 克 测 定 了 甲 基 托 布 津 使 百 克 扑 海 因 农 抗 12 抗 枯 宁 等 药 剂 对 枯 萎 病 菌 的 毒 力 作 用 及 对 西 瓜 种 子 萌 发 成 苗 的 影 响, 结 果 表 明 : 使 百 克 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 生 长 具 有 明 显 的 抑 制 作 用,EC5 为.3772μg/ml; 扑 海 因 农 抗 12 抗 枯 宁 和 甲 基 托 布 津 对 病 菌 的 生 长 也 有 一 定 的 抑 制 作 用 ( 管 怀 骥 等,21) (6) 广 枯 灵 广 枯 灵 系 贵 州 省 精 细 化 工 试 验 中 心 研 制 开 发 应 用 成 功 的 一 种 集 杀 防 病 促 长 壮 苗 为 一 体 的 新 型 强 内 吸 性 的 高 效 广 谱 杀 菌 剂 和 种 子 消 毒 剂 该 剂 适 用 于 防 治 水 稻 烟 草 蔬 菜 ( 苦 瓜 ) 等 多 种 农 作 物 的 立 枯 猝 倒 病 及 苦 瓜 枯 萎 病, 效 果 显 著 ( 黄 荣 茂 等,21) (7) 植 壮 素 在 无 土 栽 培 条 件 下, 对 黄 瓜 枯 萎 病 发 生 的 特 点 与 防 治 进 行 了 研 究, 结 果 表 明 : 该 病 在 高 湿 条 件 下 发 病 严 生 ; 以 椰 糠 为 栽 培 基 质 进 行 了 育 苗 时, 其 发 病 率 高 于 营 养 土 育 苗 和 河 沙 育 苗 ; 植 壮 素 在 室 内 平 面 培 养 基 上 能 很 好 地 抑 制 菌 丝 生 长, 对 苗 期 的 病 害 防 治, 植 壮 素 明 显 优 于 多 菌 灵 ( 李 木 荣 等,1999) (8) 重 茬 剂 西 瓜 重 茬 剂 1 号 是 一 种 新 型 杀 菌 剂 通 过 试 验 表 明, 应 用 西 瓜 重 茬 剂 1 号 可 有 效 地 防 治 西 瓜 枯 萎 病, 且 可 增 加 西 瓜 含 糖 量, 提 高 产 量 ( 周 松 等,1997) 西 瓜 甜 瓜 等 瓜 类 作 物 不 能 在 同 一 地 块 上 连 年 种 植, 重 茬 种 植 可 导 致 枯 萎 病, 根 腐 病 及 其 他 土 传 病 害 的 严 重 发 生, 轻 者 减 产 2-3%, 重 者 减 产 7% 以 上, 甚 至 绝 产, 对 瓜 类 生 产 造 成 严 惩 威 胁, 为 探 索 一 条 克 服 瓜 类 土 传 病 害 的 新 路 子, 笔 者 于 2 年 3 月 进 行 了 西 坂, 甜 瓜 重 茬 剂 的 研 究 ( 原 国 辉 等,21) (9) 真 菌 灵 试 验 表 明, 真 菌 灵 对 西 瓜 枯 萎 病 最 高 防 效 达 75% 以 上, 显 著 高 于 多 菌 灵 的 防 效 真 菌 灵 防 治 西 瓜 枯 萎 病 以 预 防 作 用 为 主, 宜 在 发 病 前 灌 根, 5% 真 菌 灵 可 湿 性 粉 剂 灌 根 的 使 用 浓 度 以 35-4 倍 为 宜 ( 张 玉 等,1999) 生 物 防 治 (1) 弱 株 诱 导 利 用 从 黄 瓜 枯 萎 病 病 株 上 分 离 到 的 尖 孢 镰 刀 菌 的 弱 致 病 菌 株 (F1 F2) 的 1^7/ml 孢 子 悬 浮 液 注 射 接 种 到 黄 瓜 4 叶 期 的 幼 苗 上, 间 隔 一 定 时 期 后, 再 注 射 接 种 强 致 病 菌 株 (F3), 可 诱 导 黄 瓜 对 枯 萎 病 产 生 抗 性 诱 导 接 种 后 间 隔 期 为 5d 的 防 效 可 达 63-92%( 吴 营 昌 等,1991) (2) 芽 孢 杆 菌 从 6 个 土 壤 标 本 中 分 离 得 15 个 细 菌 菌 株, 其 中 B11 B14 B19 B24 等 4 个 菌 株 为 芽 孢 杆 菌 (Bacillussp..), 它 们 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 有 较 强 的 抑 制 作 用 经 室 内 和 田 间 初 步 防 治 试 验 测 定, 它 们 对 西 瓜 枯 萎 病 有 较 好 的 防 治 效 果 ( 黎 起 秦 等,2) 用 11 种 培 养 基, 即 CMA,TSA,PDA, NA,KMB,WSA,WA,OMA,VDYA 和 DPYA, 在 培 养 皿 平 板 上, 28 培 养 下, 测 定 它 们 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 拮 抗 细 菌 筛 选 能 力 由 西 瓜 皮 提 取 汁, 蔗 糖 溴 麝 香 草 酚 蓝 和 琼 脂 配 制 成 的 WSA 培 养 基 在 4d 内 可 清 晰 地 分 离 ( 林 福 呈 等,1997) (3) 绿 色 木 霉 本 试 验 通 过 大 量 分 离 筛 选, 共 获 得 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 具 有 较 强 拮 抗 作 用 的 木 霉 9 株 及 细 菌 1 株, 其 中 以 绿 色 木 霉 TR-8 菌 株 和 芽 孢 杆 菌 B67 菌 株 的 拮 抗 作 用 最 强 将 两 菌 株 分 别 发 酵 后, 制 备 成 TR-8 制 剂 和 B67

25 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 25 制 剂, 并 将 两 菌 株 发 酵 物 混 合 后 制 备 成 健 根 宝 粉 剂 ( 纪 明 山 等,22) 西 瓜 枯 萎 病 是 西 瓜 生 产 中 重 要 的 病 害, 至 今 仍 缺 乏 有 效 的 防 治 方 法, 绿 色 木 霉 (Trichodermaviride)TA 经 PDA 平 测 定, 试 管 离 体 夹 心 培 养 和 盆 栽 试 验, 均 能 有 效 地 抑 制 西 瓜 枯 萎 病 菌 生 长, 保 护 瓜 苗, 西 瓜 根 围 取 样 分 析 表 明,TA 能 够 在 根 围 定 殖 ( 赵 国 其 等,1998) (4) 荧 光 假 单 胞 菌 从 健 康 西 瓜 根 组 织 和 根 际 土 壤 中 分 离 到 68 个 荧 光 假 单 胞 菌 株 8.88% 的 菌 株 具 有 较 强 的 皿 内 拮 抗 细 菌 作 用 ;4.41% 的 菌 株 活 体 和 19.12% 的 菌 株 代 谢 物 明 显 抑 制 西 瓜 枯 萎 菌 分 生 孢 子 的 萌 发 ;52.8% 的 菌 株 可 以 不 同 程 度 抑 制 枯 萎 菌 的 瓜 苗 导 管 内 定 殖 ( 宗 兆 锋 等,1995) (5) 生 物 农 药 M18 为 了 筛 选 出 对 黄 瓜 枯 萎 病 防 治 效 果 较 好 且 污 染 小 的 药 剂, 本 试 验 选 用 了 生 物 农 药 M18 悬 浮 剂 和 大 田 常 用 药 剂 绿 亨 一 号 进 行 了 黄 瓜 枯 萎 病 的 药 效 试 验 结 果 表 明,.1%M18 悬 浮 剂 防 效 不 论 是 灌 根 还 是 病 疤 涂 抹 均 优 于 绿 亨 一 号, 且 对 黄 瓜 生 长 无 药 害 作 用 ( 史 娟 等,22) 砧 木 嫁 接 抗 病 (1) 西 瓜 杂 交 砧 木 超 丰 F1 西 瓜 专 用 砧 木 品 种 是 GY-1 CY-4 的 杂 交 种, 与 西 瓜 嫁 接 亲 和 力 好, 共 生 亲 和 力 强, 高 抗 枯 萎 病, 且 抗 重 茬, 产 量 高 ( 比 其 它 砧 木 品 种 嫁 接 西 瓜 增 产 3% 以 上 ), 对 果 实 品 质 无 不 良 影 响 ( 郑 高 飞 等,2) 在 对 野 生 西 瓜 种 质 资 源 搜 集 整 理 的 基 础 上, 经 过 多 代 重 茬 自 交 筛 选, 选 育 出 了 抗 枯 萎 病 并 对 炭 疽 病 疫 病 有 较 强 抗 性 的 西 瓜 一 代 杂 种 专 用 砧 木 -GKY 经 过 2A 选 育, 该 砧 木 与 栽 培 西 瓜 有 良 好 的 嫁 接 亲 和 力, 对 嫁 接 苗 果 实 品 质 无 不 良 影 响 ( 王 恒 炜 等,1999) (2) 南 瓜 嫁 接 甜 瓜 采 用 黑 籽 南 瓜 作 砧 木 嫁 接 伽 师 厚 皮 甜 瓜 防 治 甜 瓜 枯 萎 病 田 间 防 效 在 95.4% 以 上, 无 土 育 苗 条 件 下, 胚 轴 斜 插 接 法 和 生 长 点 插 接 法 防 效 均 达 1%, 生 长 点 劈 接 法 和 胚 轴 靠 接 法 防 效 分 别 为 97.2% 和 95.5%, 比 有 土 育 苗 中 的 各 种 嫁 接 法 防 效 均 高 ( 徐 胜 利 等,1999) 温 室 采 用 黑 籽 南 瓜 嫁 接 伽 师 厚 皮 甜 私 防 治 甜 瓜 枯 萎 病, 田 间 防 效 在 95.4% 以 上 无 土 育 苗 条 件 下, 胚 轴 斜 插 接 法 和 生 长 点 插 接 法 防 效 在 1%, 生 长 点 劈 接 法 和 胚 轴 靠 接 法 防 效 分 别 为 97.1% 和 95.4%, 比 有 土 育 苗 的 各 种 嫁 接 方 法 的 防 效 都 好 ( 徐 胜 利 等,2) 以 白 籽 南 瓜 为 砧 木 薄 皮 甜 瓜 红 城 7 为 接 穗, 其 嫁 接 苗 与 红 城 7 自 根 苗 在 不 同 区 域 进 行 重 茬 生 茬 栽 培 比 较, 结 果 表 明 : 薄 皮 甜 瓜 嫁 接 苗 植 株 生 长 势 强, 根 系 叶 片 茎 粗 蔓 长 都 优 于 自 根 苗 ; 产 量 显 著 提 高 ; 枯 萎 病 防 效 达 1%, 叶 部 病 害 抗 性 明 显 提 高 ; 果 实 整 剂, 明 显 增 大 ( 张 继 梅 等,22) (3) 西 瓜 嫁 接 瓠 瓜 温 室 西 瓜 连 作 会 因 枯 萎 病 的 发 生 而 造 成 严 重 的 减 产 或 绝 收, 通 过 黑 子 南 瓜 嫁 接 育 苗, 可 以 大 大 增 强 西 瓜 苗 的 生 长 势, 提 高 抗 枯 萎 病 的 能 力, 克 服 重 茬 障 碍, 达 到 防 病, 高 产, 早 上 市 的 目 的 ( 吴 东 红 等,22) 无 籽 西 瓜 嫁 接 西 葫 芦 技 术 研 究 表 明,5 种 嫁 接 方 法 的 成 活 率 均 在 85% 以 上, 嫁 接 不 但 抗 枯 萎 病, 而 且 对 西 瓜 病 毒 病 有 良 好 的 抗 病 性 ; 在 研 究 中 还 首 次 采 用 了 芽 接 法, 其 成 活 率 为 97.5%, 该 方 法 具 有 省 工, 省 地, 省 种 等 优 点 ( 王 杰 等,22) 对 西 瓜 枯 萎 病 国 内 有 不 少 研 究, 目 前 比 较 理 想 的 途 径 就 是 西 瓜 与 瓠 瓜 嫁 接 通 过 我 们 用 不 同 方 法 进 行 试 验 试 种, 认 为 在 诸 多 种 嫁 接 方 法 中, 以 插 接 为 主, 辅 助 以 贴 接 相 配 合 其 综 合 效 果 比 较 理 想 ( 陈 国 安 等,1999) 以 5 种 野 生 葫 芦 科 植 物 为 砧 木, 栽 培 品 种 黑 蜜 2 号 的 接 穗, 研 究 了 嫁 接 对 西 瓜 枯 萎 病 抗 性 的 影 响 其 结 果 表 明, 嫁 接 西 瓜 苗 对 西 瓜 枯 萎 病 的 抗 性 明 显 提 高, 其 中 以 丰 乐 葫 芦 为 砧 木 的 嫁 接 西 瓜 苗 对 西 瓜 枯 萎 病 的 抗 性 最 好, 而 且 5 种 砧 木 与 接 穗 间 都 有 很 强 的 亲 和 性, 嫁 接 西 瓜 苗 成 活 率 高 ( 雷 鸣 等,21) 西 瓜 砧 木 新 品 种 超 丰 F1 是 葫 芦 杂 交 种, 嫁 接 西 瓜 高 抗 枯 萎 病, 对 促 进 西 瓜 幼 苗 生 长, 提 前 成 熟 和 提 高 产 量 有 明 显 效 果, 克 服 了 用 瓠 瓜 做 砧 木 的 某 些 缺 点, 表 现 出 极 强 的 杂 种 优 势, 是 嫁 接 西 瓜 较 理 想 的 砧 木 品 种 ( 郑 高 飞 等,1995) 试 验 研 究 了 西 瓜 为 葫 芦 砧 1 号 短 腿 瓠 厦 门 葫 芦 杭 州 长 瓜 西 瓜 砧 1 号 及 贵 州 葫 芦 等 6 个 砧 木 的 嫁 接 苗 或 自 根 苗 的 抗 逆 性 结 果 表 明 抗 寒 性 以 葫 芦 砧 1 号 短 腿 瓠 和 西 瓜 砧 1 号 的 组 合 最 强, 耐 湿 性 以 葫 芦 砧 1 号 和 西 瓜 砧 1 号 最 好, 所 有 砧 木 品 种 均 高 抗 枯 萎 病 ( 钱 伟 等,1995) 洋 瓜 与 西 瓜 具 有 良 好 的 嫁 接 亲 和 性 和 共 生 亲 和 性, 表 现 出 高 抗 西 瓜 枯 萎 病 的 特 性 对 西 瓜 品 质 无 不 良 影 响, 中 心 糖 度 和 VC 含 量 分 别 较 自 根 苗 提 高 1.2 ( 度 ) 和.48mg /1g( 赵 瑞 等,1997) 本 试 验 以 野 西 瓜 作 砧 木 在 大 田 以 靠 接 法 嫁 接 打 瓜 对 瓜 类 枯 萎 病 具 有 显 著 的 抗 性, 并 且 能 够 明 显 地 提 高 打 瓜 籽 的 产 量 和 质 量 ( 王 文 等,1997) 5 种 供 试 砧 木, 以 瓢 用 葫 芦 表 现 最 好, 与 西 瓜 嫁 接 后 亲 和 力 强, 成 活 率 高, 植 株 健 壮, 并 具 有 产 量 高, 品 质 好 等 优 点 ; 其 次 为 黑 籽 南 瓜 ; 其 余 南 砧 1 号 美 洲 南 瓜 冬 瓜 表 现 差, 均 不 宜 做 西 瓜 嫁 接 砧 木 ( 刘 贺 昌 等,1995) 施 肥 技 术 (1) 无 土 栽 培 在 无 土 栽 培 条 件 下 对 不 同 的 网 纹 甜 瓜 品 种 进 行 两 种 不 同 的 整 枝 方 法 和 没 的 单 株 留 瓜 数 试 验, 结 果 表 明 : 双 杆 整 枝 株 2 个 瓜 的 产 量 最 高 果 实 品 质 也 较 理 想 ; 但 以 单 杆 整 枝 朱 留 1 个 抓 的 果 实 外 观 可 深 性 固 形 物 含 量 果 实 秀 品 率 等 品 质 指 标 都 最 好 ( 陈 幼 源 等,2) (2) 控 施 氮 肥 在 相 同 环 境 条 件 下, 观 察 了 施 肥 种 类 数 量 时 期 方 法 对 蔬 菜 西 瓜 病 虫 害 发 生 危 害 衣 其 产 量 的 影 响 结 果 表 明, 花 椰 菜 黑 腐 病 菜 青 虫 西 瓜 枯 萎 病 的 危 害 的 随 施 氮 量 增 加 而 严 重, 当 施 氮 量 吻 合 作 物 各 个 品 种 的 耐 肥 能 力 时, 病 虫 危 害 显 著 减 轻, 增 产 率 明 显 提 高 ( 陈 一 杭 等,1995) (3) 金 属 阳 离 子 林 福 呈 等 研 究 了 五 种 二 价 金 属 阳 离 子 化 合 物, 即 CAC12,MgC12, CuSO4,MnC12 和 Co12 对 西 瓜 枯 萎 病 菌 厚 垣 孢 子 发 芽 管 生 长 的 影 响 ( 林 福 呈 等,1996) (4) 生 物 液 肥 报 道 腐 植 酸 类 液 肥 生 物 活 性 的 3 种 检 验 方 法,(1) 用 大 蒜 水 培 法 测 定 促 进 作 物 生 长 ;(2) 用 菜 豆 有 或 黄 瓜 的 叶 片 测 定 气 孔 开 张 度 ;(3) 用 棉 花 黄 萎 病 菌 和 枯 萎 病 菌 平 皿 培 养 法 作 抑 菌 和 杀 菌 试 验, 这 些 方 法 的 效 果 很 显 著 并 与 腐 植 酸 浓 度 相 关 ( 边 文 骅 等,1999) 在 保 护 地 黄 瓜 栽 培 中 应 用 禾 康 生 物 液, 对 真 菌 性 病 害 进 行 防 治 效 果 试 验, 结 果 表 明 : 禾 康 生 物 液 稀 释 5 倍, 采 用 浸 种 方 法 处 理, 防 治 立 枯 病 效 果 达 到 94.77%; 稀 释 1 倍 用 其 灌 根, 防 治 枯 萎 病 效 果 达 到 91.79%( 马 晓 军 等,1998) 测 定 了 从 沤 肥 浸 渍 液 和 土 壤 中 分 离 并 筛 选 得 到 对 黄 瓜 枯 萎 病 菌 的 室 内 生 物 活 性 的 6 个 菌 株, 编 号 为 94-I 94-Ⅱ 94-Ⅲ 96-Ⅰ 和 98-Ⅱ, 测 定 其 孢 子 悬 浮 培 养 16h 时 对 黄 瓜 枯 萎 菌 的 抑 制 率 分 别 为 48.29%.% 6.69% 39.28% 61.29% 和 72.32%,( 郝 变 青 等,21) 研 究 了 厌 氧 消 化 物 ( 沼 液 和 沼 渣 ) 对 西 瓜 生 长 和 西 瓜 枯 萎 病 的 影 响 用 沼 液 浸 种, 浓 度 为.5-5% 时 均 可 提 高 发 芽 率, 以 2% 沼 液 与 8 小 时 浸 泡 时 间 为 最 佳 组 合, 大 于 5% 时 降 低 发 芽 率 用 沼 渣 与 土 壤 混 合, 比 例 为 1:5,1:7, 1:1 时 西 瓜 生 长 的 各 项 指 标 均 ( 沈 德 中 等,1995) (5) 稀 土 肥 料 本 试 验 对 稀 土 提 高 棉 花 抗 枯 萎 病 和 增 产 作 用 进 行 了 研 究, 结 果 表 明,3mg/kg 稀 土 溶 液 处 理 种 了, 发 病 率 可 降 低 18.96~11.45%, 病 情 指 数 降 低 25.6~17.43, 相 对 防 效 分 别 为 29.19~39.3%, 与 多 菌 灵 的 防 病 作 用 相 当, 棉 株 生 长 和 ( 白 松 等,1995) 研 究 了 单 一 稀 土 氧 化 镧 (LA23) 对 小 麦 纹 枯 病 菌 (Rhixoctoniacerealis,Rc) 棉 花 枯 萎 病 菌 (Fusariumoxysporum F.sp.vasin Fectum,3-2) 和 水 稻 纹 枯 病 菌 (Rhizoctonia solani( 刘 庆 都 等,2) 西 瓜 专 用 药 肥 92-4 在 西 瓜 重 点 产 区 经 几 年 多 试 验, 结 果 证 明 在 一 般 轮 作 栽 培 条 件 下, 每 亩 用 4kg 穴 施 作 基 肥, 具 有 明 显 的 刺 激 西 瓜 生 长, 促 进 早 熟 高 产 的 作 用, 示 范 田 平 均 每 亩 增 产 商 品 瓜 435kg, 增 产 率 34.8% 对 西 瓜 枯 萎 病 的 大 田 防 治 效 果 平 均 达 67( 储 国 良 等,1994) 综 合 治 理 保 护 地 栽 培 蔬 菜 的 目 的 就 是 为 了 获 得 高 产 高 效, 随 着 我 们 北 方 保 护 地 黄 瓜 栽 培 的 发 展, 黄 瓜 第 二 大 病 害 - 枯 萎 病 也 越 来 越 重, 必 须 要 引 起

26 26 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 足 够 的 重 视, 分 析 病 害 发 生 的 原 因, 危 害 程 度 等, 以 采 取 有 效 的 措 施 进 行 综 合 防 治, 减 轻 发 病, 提 高 产 量 和 经 济 效 益 ( 刘 玉 芝 等,1996) 研 究 结 果 表 明, 节 瓜 枯 萎 病 的 发 生 流 行, 与 连 作 引 起 的 土 壤 含 菌 量, 品 种 抗 性, 气 候 及 栽 培 条 件 有 关 通 过 品 种 改 良, 成 功 地 育 出 抗 病 品 种 37 号 节 瓜 药 剂 防 治 以 多 菌 灵 效 果 最 好 采 用 抗 病 品 种 为 主 的 综 合 防 治 措 施, 在 重 病 区 可 以 有 效 地 控 制 枯 萎 病 的 为 害 ( 虞 皓 等,1994) 当 前 对 西 瓜 为 害 最 大, 范 围 最 广 的 属 枯 萎 病, 瓜 地 一 旦 发 生 此 病, 轻 则 减 产, 重 则 成 片 枯 死, 对 于 枯 萎 病 的 防 治 目 前 尚 没 有 特 效 药, 也 无 理 想 的 抗 病 品 种, 若 通 过 轮 作 换 茬 防 病, 因 轮 作 年 限 太 长, 土 地 有 限, 又 影 响 西 瓜 生 产 的 发 展, 为 此 我 们 分 别 在 红 壤 山 地 与 旱 田 进 行 试 验 11 棉 花 枯 萎 病 研 究 11.1 病 原 分 析 (1) 病 原 调 查 山 东 省 棉 花 病 害 种 类 共 有 19 种, 根 据 其 发 病 部 位 和 时 期 等 特 点 习 惯 了 分 为 四 大 类 : 苗 期 病 害 的 发 生 枯 黄 萎 病, 铃 部 病 害 和 叶 部 病 害, 其 中 危 害 性 最 大 的 是 棉 花 枯 萎 病 和 黄 萎 病 某 些 年 份, 立 枯 病, 黑 斑 病 和 铃 疫 病 也 能 引 起 较 大 的 损 失 ( 吕 士 恩 等,1997) 经 过 两 年 的 田 间 人 工 接 菌 试 验, 作 者 提 出 了 在 棉 花 估 萎 混 生 病 田 中, 适 宜 于 两 种 病 害 共 同 危 害 的 损 失 模 型,L%= x x5,R2=.7231,S= 5.22,x1 为 棉 花 现 蕾 期 的 枯 萎 病 指,x5 为 棉 花 开 花 期 的 黄 萎 病 指 ( 杨 之 为 等,1993) (2) 营 养 突 变 体 从 采 自 新 疆 23 个 不 同 县 ( 市 或 团 场 ) 的 棉 花 枯 萎 病 菌 (Fusarium oxysporum f.sp.vasinfec-tum)52 个 菌 株 上 获 得 785 个 不 能 利 用 硝 酸 盐 的 突 变 体 (nit), 其 中 nitl 占 7.57%,nitM 占 19.75%,nit3(8) 占 9.68% 将 52 个 菌 株 分 别 与 已 知 的 4 个 7 号 小 种 菌 株 一 个 3 号 小 种 菌 株 和 一 个 ( 王 雪 薇 等,2) 从 新 疆 各 植 棉 区 采 集 棉 花 枯 萎 病 病 株, 经 分 离 纯 化 获 49 个 单 胞 菌 株 接 种 试 验 表 明 :49 个 菌 株 均 使 棉 花 产 生 枯 萎 病 症 状 利 用 氯 酸 钾 诱 变 棉 花 枯 萎 病 菌, 产 生 抗 氯 酸 盐 的 硝 酸 盐 营 养 突 变 株,49 个 菌 株 共 诱 发 获 得 336 个 nit 突 变 株, 将 获 得 的 nit 突 变 株 作 营 养 亲 和 性 ( 张 莉 等,1998) 将 分 离 自 新 疆 5 个 不 同 地 点 的 棉 病 株 或 棉 田 土 的 7 个 菌 株 经 单 孢 分 离 得 到 18 个 单 孢 株, 经 鉴 定 均 为 尖 孢 镰 孢 7 个 菌 株 的 18 个 单 孢 株 分 别 在 KPS 增 减 基 上 诱 得 数 量 不 等 的 nit 突 变 体, 将 它 人 分 别 与 两 上 采 自 老 病 区 莎 车 的 棉 枯 萎 病 进 行 营 养 体 配 对 试 验, 结 果 显 示 7 个 菌 株 ( 王 雪 薇 等,1996) 1996~1998 年, 陆 续 从 新 疆 各 主 要 棉 区 采 集 和 收 集 4 余 株 病 株 样, 共 分 离 获 得 18 株 棉 花 枯 萎 病 菌, 对 其 中 具 有 代 表 性 菌 株 致 病 性 和 生 理 性 状 研 究 结 构 表 明, 新 疆 棉 花 枯 萎 病 优 势 小 种 仍 为 7 号 生 理 小 种, 但 其 致 病 性 较 强 ( 缪 卫 国 等,2) (3) 生 理 小 钟 从 全 疆 不 同 植 棉 区 采 集 棉 花 枯 萎 病 病 株, 经 分 离 纯 化 和 单 孢 分 离 获 得 尖 孢 镰 刀 菌 菌 株, 从 中 选 2 个 代 表 菌 株, 用 目 前 国 内 外 统 一 使 用 的 一 套 鉴 别 寄 主 进 行 生 理 小 种 鉴 定, 初 步 鉴 定 结 果 表 明 : 新 疆 棉 区 棉 花 枯 萎 病 菌 以 7 号 小 种 为 主 ( 李 国 英 等,1998) 棉 花 枯 萎 病 是 影 响 棉 花 生 产 的 毁 灭 性 病 害 之 一, 近 年 来 在 我 国 有 加 重 发 展 的 趋 势 本 文 全 面 系 统 的 回 顾 了 自 我 国 成 立 棉 花 枯 黄 萎 病 综 合 防 治 研 究 协 作 组 以 来 在 棉 花 枯 萎 镰 孢 菌 生 理 小 种 鉴 定, 抗 病 育 种 等 方 面 所 取 得 的 成 果 并 重 点 介 绍 了 年 近 来 我 国 在 枯 萎 病 防 治 研 究 中 所 取 得 的 成 就 ( 田 长 彦 等,1999) 为 找 到 一 种 较 为 客 观 地 鉴 定 生 理 小 种 的 方 法, 对 采 用 鉴 别 寄 主 法 鉴 定 枯 萎 病 菌 生 理 小 种 的 一 些 数 据 运 用 UPGMA 聚 类 分 析 的 方 法 进 行 处 理, 结 果 两 者 基 本 一 致, 且 聚 类 分 析 可 将 传 统 方 法 分 类 不 明 确 的 菌 株 有 个 较 明 确 的 归 属, ( 田 新 莉 等,21) 通 过 1994 年 和 1995 年 对 辽 棉 1 号 抗 病 性 鉴 定 及 农 艺 性 状 观 察, 其 以 棉 花 枯 萎 病 菌 生 理 小 种 7 号 表 现 高 抗 在 病 田 种 植, 霜 前 皮 棉 比 新 陆 早 1 号 增 产 52%; 在 无 病 田 种 植, 比 新 陆 早 1 号 低 1%( 杨 世 刚 等,1996) (4) 分 子 标 记 以 我 国 棉 花 枯 萎 菌 3 个 生 理 小 种 的 26 个 代 菌 株 及 国 外 3 个 不 同 生 理 小 种 菌 株 进 行 随 机 扩 增 多 态 性 DAN(RAPD) 分 析, 共 产 生 了 14 个 RAPD 分 子 标 记 其 中 87.8% 具 有 多 态 性 通 过 聚 类 分 析 将 供 试 菌 株 划 分 为 6 个 RAPD 组, 确 定 了 不 同 小 种 间 的 亲 缘 关 系 ( 冯 洁 等,1999) 尖 孢 镰 刀 菌 是 重 要 的 植 物 维 管 束 病 原 真 菌, 近 年 来, 有 关 该 菌 的 有 遗 传 多 态 性 研 究 报 道 很 多, 本 文 着 重 综 述 了 利 用 营 养 体 亲 和 群 DNA 多 态 性 技 术 研 究 尖 孢 镰 刀 菌 专 化 型 小 种 及 其 相 互 关 系 等 方 面 的 进 展, 同 时 介 绍 了 对 棉 花 枯 萎 病 菌 瓜 类 枯 萎 病 菌 及 尖 孢 镰 刀 菌 小 种 起 源 等 ( 王 政 逸 等,2) 从 棉 花 枯 萎 病 菌 (Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum) 异 核 体 菌 株 Ag149 的 菌 落 我 变 处 分 离 得 到 3 个 培 养 特 征 和 致 病 性 差 异 明 显 的 单 孢 分 离 子 分 别 测 定 了 这 3 个 分 离 子 的 总 DNA 和 核 DNA 的 碱 基 组 成, 以 及 它 们 的 18S rdna 的 部 分 序 列 (1477 个 碱 基 对 )( 李 颖 等,21) 采 自 新 疆 24 同 植 棉 县 ( 市 或 团 市 场 ) 的 37 株 棉 花 枯 萎 病 菌 代 表 菌 株, 经 人 工 接 种 于 国 际 通 用 鉴 别 寄 生, 致 病 性 反 应 均 表 现 为 典 型 的 7 号 生 理 小 种 特 征,RAPD 分 析 结 果 也 显 示 出 这 37 个 供 试 菌 株 与 7 号 小 种 各 对 照 菌 株 间 基 因 组 DNA 的 指 纹 图 谱 高 度 相 似, 属 同 一 遗 传 相 似 组 ( 王 雪 薇 等,21) 切 割 野 生 型 棉 花 枯 萎 病 菌 Fusarium oxyspirum f.s.p.vasinfectum 菌 落 的 菌 丝 尖 端, 得 到 菌 株 Ag149, 该 菌 株 是 一 个 异 核 体, 其 菌 落 出 现 明 显 角 变, 自 角 变 处 经 单 孢 分 离 和 继 代 培 养, 得 到 三 种 表 观 性 状 ( 关 国 华 等,2) (5) 生 理 型 采 用 不 同 棉 黄 萎 病 菌 系 及 枯 萎 病 菌 系, 对 新 种 质 川 737 川 282 进 行 病 圃 抗 性 鉴 定 及 不 同 区 域 的 抗 性 测 定 研 究 结 果 表 明, 川 737 川 282 对 我 国 棉 黄 萎 病 三 大 生 理 型 11 个 不 同 菌 系 的 抗 性 均 好, 又 抗 落 叶 型 棉 黄 萎 病, 并 高 抗 棉 枯 萎 病, 是 我 国 抗 棉 黄 萎 病 多 菌 系 ( 谭 永 久 等,1995) 从 望 江 棉 区 分 得 5 个 菌 株 ( 系 ), 经 宿 主 致 病 性 测 定, 结 果 表 明, 菌 株 WJF3,WJF4 属 生 理 型 I, 致 病 力 强, 与 对 照 菌 株 陕 F131-1 相 似, 菌 株 WJF1,WJF2 和 WJF5 属 生 理 型 II, 致 病 力 中 度, 与 另 一 对 照 菌 株 苏 宁 相 似 ( 承 河 元 等,1999) 通 过 对 棉 花 枯 萎 镰 刀 菌 生 理 型 Ⅱ Ⅲ 号 原 生 质 体 的 分 离 纯 化 和 再 生 条 件 的 研 究, 摸 清 了 同 龄 小 型 分 生 孢 子 在 25 下 振 荡 培 养 3-4 小 时 的 菌 丝, 在.6MNacl 为 稳 定 剂 4% 的 混 合 酶 39 下 酶 解 3-4 小 时 能 得 到 较 高 数 量 的 原 生 质 体, 在 高 渗 培 养 基 上 培 养 12 小 时 即 出 现 再 生 ( 田 逢 秀 等,1989) (6) 同 工 酶 型 利 用 聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 电 泳 测 定 新 疆 棉 花 枯 萎 病 菌 的 酯 酶 同 工 酶, 结 果 表 明, 供 试 的 3 个 代 表 性 菌 株 的 酯 酶 同 工 酶 有 4 种 类 型 的 主 酶 带, 类 型 1 有 E21,E2,E19,E6,E55 条 主 酶 带, 包 括 25 个 供 试 菌 株 ; 类 型 有 E21,E2,E54 个 主 酶 带 ( 张 莉 等,2) 11.2 病 原 侵 入 系 统 分 离 研 究 证 明, 土 壤 中 的 棉 花 枯 萎 侵 入 棉 籽 的 途 径 是 : 从 棉 株 根 部 侵 入 棉 株 体 内, 由 茎 秆 - 果 枝 - 铃 柄 - 铃 托 - 胎 座 的 途 径 从 维 管 束 系 统 侵 入, 导 致 棉 带 菌 带 菌 棉 籽 主 要 集 中 在 棉 株 中, 下 部 的 果 枝 和 靠 近 茎 秆 的 第 1-3 果 节 的 棉 铃 内 ( 周 华 众 等,1997) 11.3 病 害 鉴 定 (1) 水 培 抗 病 接 种 法 棉 花 枯 黄 萎 病 液 体 病 圃 水 培 抗 病 接 种 方 法, 它 具 有 可 控 制 目 的 含 菌 数 量 在 溶 液 中 枯 黄 萎 病 菌 含 量 均 匀 可 靠 建 立 病 圃 上 马 快, 操 作 简 便, 快 速, 灭 菌 长, 减 少 人 为 带 菌 传 播 能 进 行 无 损 伤 整 株 活 体 观 察 病 菌 在 棉 苗 生 育 期 的 侵 染 活 动 机 理 ( 曾 桂 华 等,1998) (2) 病 原 人 工 接 种 法 中 国 农 科 院 植 保 所 培 育 的 抗 黄 萎 病 新 种 质 BD18, 经 6 年 北 京 人 工 黄 萎 病 圃 和 8 省, 自 治 区, 直 辖 市 共 18 个 单 位 27 次 抗 黄 萎 病 鉴 定, 平 均 病 指 11.65, 属 抗 病 类 型, 接 近 高 抗 水 平, 高 抗 枯 萎 病, 中 抗 棉 蚜, 早 熟 不 早 衰 ( 孙 文 姬 等,1999) 川 737 和 川 282 是 新 培 育 的 抗 源 种 质 采 用 棉 黄 萎 病 和 枯 萎 病 不 同 菌 系, 在 人 工 接 菌 病 圃 或 病 床 鉴 定 抗 病 性 按 完 全 双 列 杂 交 配 制 组 合, 研 究 抗 性 遗 传 结 果 表 明, 两 个 抗 源 种 质 对 我 国 大 三 生 理 型 11 个 不 同 棉 黄 萎 病 菌 系 抗 性 均 好, 又 抗 强 致 病 力 的 3 个 棉 黄 萎 病 菌 系 ( 李 琼 芳 等,1996) 用 川 棉 19 经 四 个 单 位 1983~1996 年 多 点 网 室 接 虫 和 大 田 自 然 感 虫 作 抗 虫 性 鉴 定 和 人 工 接 菌 作 抗 病 性 鉴 定 结 果 表 明, 川 棉 19 抗 棉 红 铃 虫 中 抗 立 枯 病, 高 抗 棉 枯 萎 病, 且 抗 性 稳 定, 是 一 个 多 抗 虫 多 抗 病 的 优 良 品 种 ( 董 顺 文 等,2) 栽 培 抗

27 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 27 病 品 种 是 防 治 棉 花 枯 萎 病 的 重 要 措 施,1996 年 在 石 河 子 大 学 植 病 温 室 内 对 24 个 棉 花 品 种 进 行 了 全 生 育 期 抗 枯 萎 病 鉴 定, 参 与 鉴 定 的 24 个 棉 花 品 种 经 苗 期, 蕾 期, 生 长 中 期 及 收 获 期 剖 秆 检 验 ( 张 莉 等,1998) 在 均 匀 一 致 的 黄, 枯 萎 病 病 圃 中, 分 别 对 1259 份,426 份 品 种 进 行 黄 萎, 枯 萎 病 抗 性 的 鉴 定 结 果 是 : 黄 萎 病 高 抗 材 料 为 8 份, 占.64%, 抗 病 材 料 79 份, 占 6.27%, 枯 萎 病 高 抗 材 料 3 份, 占.7%, 抗 病 材 料 8 份, 占 1.88%( 吴 蔼 民 等,1999) 年 运 用 较 客 观 的 相 对 抗 性 对 病 指 进 行 校 正, 以 校 正 病 指 划 分 病 类 型 对 156 份 优 势 抗 虫 棉 品 种 抗 枯 萎 病 性 鉴 定 结 果 为 : 抗 病 材 料 4 份, 占 2.56%; 耐 病 材 料 23 份, 占 14.74%; 感 病 材 料 129 份, 占 82.7% ( 吴 蔼 民 等,1998) 采 用 棉 枯 萎 人 工 病 床 病 圃 连 续 群 体 选 择 法 发 现, 枯 萎 抗 性 转 化 现 象 和 抗 性 形 成 规 律 ; 所 有 供 试 原 感 病 高 产 优 质 品 种 在 病 菌 连 续 入 侵 条 件 下, 病 床 病 株 主 逐 年 逐 代 下 降, 矮 化 症 状 逐 年 逐 代 缓 解, 群 体 高 度 逐 年 逐 代 上 升, 表 明 抗 性 逐 年 逐 代 提 高 经 5 年 左 右 均 转 化 为 高 抗 品 种 ( 高 永 成 等,1995) (3) 寄 主 活 体 繁 殖 病 原 菌 法 通 过 在 枯 萎 病 圃 采 用 感 病 材 料 活 体 繁 殖 病 原 菌 与 棉 子 壳 室 内 培 养 接 种 病 菌 两 种 方 法 的 研 究 与 比 较 表 明 : 利 用 感 病 材 料 活 体 繁 殖 接 种 病 原 菌 即 简 化 病 圃 的 接 种, 同 时 又 保 持 了 病 圃 较 强 的 致 病 力, 从 而 更 加 有 效 与 准 确 地 筛 选 抗 病 材 料 ( 邵 圣 才 等,1999) 应 用 西 北 农 业 大 学 创 建 的 棉 枯 萎 抗 性 定 向 培 育 法, 使 所 有 供 试 感 病 高 产 优 质 品 种 经 人 工 病 床 病 圃 的 病 原 菌 持 续 压 力, 严 格 淘 汰 与 系 统 定 向 选 择, 抗 性 逐 年 提 高, 经 3 5 年 即 可 转 化 成 为 高 抗 品 种, 这 是 寄 主 的 遗 传 免 疫 功 能 对 生 存 环 境 的 适 应, 所 产 生 的 定 向 性 渐 进 变 异 ( 张 云 青 等,1997) (4) 自 然 病 圃 诱 病 法 通 过 年 的 病 圃 鉴 定 和 田 间 试 验, 敦 棉 2 号 的 枯 萎 病 指 数 , 与 中 棉 所 16 号 属 同 一 抗 性 水 平, 生 育 期 136d 霜 前 花 率 98.9%, 比 新 陆 早 1 号 晚 熟 2d, 比 中 棉 所 16 号 早 9d; 皮 棉 产 量 kg /hm 2, 的 陆 草 1 号 增 ( 庄 生 仁 等,1997) 以 1994 年 本 所 棉 花 抗 枯, 黄 萎 病 同 步 联 合 品 比 试 验 为 例, 分 析 江 汉 棉 区 黄 萎 病 危 害 损 失 结 果 表 明, 各 品 种 ( 系 ) 在 黄 萎 病 辅 的 皮 棉 平 均 产 量 比 枯 萎 病 圃 减 产 kg hm 2 差 异 显 著, 减 产 的 主 要 原 因 是 单 株 成 铃 数 减 少 和 铃 重 降 低, 而 且 黄 萎 病 圃 各 棉 花 品 种 ( 杨 代 刚 等,2) 利 用 棉 花 枯 萎 病 (Fusarium oxyspirum f.s.p.vasinfectum) 人 工 病 圃 连 续 种 植 感 病 棉 岱 16, 经 多 年 选 育 成 对 枯 萎 病 抗 性 提 高 的 岱 16 变 易 系 对 岱 16 及 其 变 异 后 代 进 行 了 苗 期 抗 病 性 鉴 定 病 菌 毒 素 敏 感 性 测 定 及 维 管 束 解 剖 学 研 究 结 ( 袁 红 旭 等,2) (5) 种 子 带 菌 鉴 定 法 通 过 对 棉 花 种 子 枯 黄 萎 病 带 菌 量 检 测 方 法 的 探 讨, 较 广 泛 地 对 我 国 棉 花 主 产 区 的 8 省 24 个 县 市 种 子 枯 黄 萎 病 菌 带 菌 量 进 行 了 检 测, 结 果 表 明, 除 新 疆 自 治 区 莎 车 县 的 种 了 外 部 未 发 现 枯 萎 病 菌 外, 其 它 单 位 的 种 子 外 部 均 携 带 枯, 黄 萎 病 菌 ( 孙 君 灵 等,1998) 1985~1988 年 对 棉 花 种 子 抗 霉 变 筛 选 技 术 中 的 几 个 问 题 进 行 了 探 讨, 初 步 结 果, 室 内 测 定 种 子 对 霉 菌 感 染 状 况, 抗 感 品 种 间 差 异 比 较 明 显 ; 在 低 温 条 件 下, 抗 霉 和 发 芽 慢 的 种 子 在 田 间 表 现, 其 苗 病 枯 萎 病 黄 萎 病 均 有 明 显 减 轻 的 趋 势 ( 吉 贞 芳 等,1995) (6) 线 虫 感 染 接 菌 温 室 测 定 结 果 : 拟 粗 壮 螺 旋 线 虫 接 种 量 在 每 1cm^3 土 壤 1-1 条 的 条 件 下, 接 种 3 天 后 棉 苗 生 长 量 比 无 线 虫 对 照 苗 显 著 降 低 (p <.5= 抗 枯 萎 品 种 86-1 在 单 接 枯 攻 菌 无 线 虫 处 理 中 不 发 生 枯 萎 病 在 枯 萎 菌 接 种 量 为 每 克 土 7.5 1^5 孢 子 ( 马 承 铸 等,1994) 11.4 抗 病 机 制 (1) 生 化 物 质 的 产 生 通 过 对 棉 陆 地 棉 ( 抗 感 棉 花 枯 萎 病 品 种 ) 和 海 岛 棉 根 系 分 泌 物 中 葡 萄 糖 蔗 糖 及 不 同 氨 基 酸 成 分 和 含 量 的 测 定 表 明 : 棉 花 感 感 病 品 种 根 分 泌 物 中 葡 萄 糖 和 蔗 糖 的 含 量 是 抗 病 品 种 的 2-3 倍 ; 在 所 测 定 的 6 个 棉 花 品 种 中 共 含 有 12 种 氨 基 酸, 其 种 类 和 含 量 依 棉 花 品 种 不 同 而 异 ( 刘 素 萍 等,1998) 枯 萎 病 菌 侵 染 后, 抗 病 品 种 棉 苗 及 经 氟 乐 灵 诱 发 处 理 产 生 对 枯 萎 病 诱 导 抗 性 的 棉 苗 茎 与 根 组 织 中, 膜 膜 过 氧 化 产 物 丙 二 醛 (MDA) 含 量 上 升, 膜 系 统 中 不 饱 和 脂 肪 酸 含 量 下 降, 表 明 有 膜 脂 过 氧 化 的 发 生, 超 氧 阴 离 子 (O^-2) 的 产 生 速 率 H2O2 的 积 累 水 平 及 脂 氧 合 酶 (LOX) 活 必 也 ( 宋 凤 鸣 等,21) 在 含 有 儿 茶 素 的 培 养 液 中 枯 萎 病 毒 (Fusarium oxyspirum f.s.p.vasinfectum) 的 多 聚 半 乳 糖 醛 酸 酶 (PG) 和 果 胶 裂 解 酶 (PL) 活 性 明 显 长 低 儿 素 可 则 明 显 抑 制 初 步 化 的 PG 和 PL 活 性 以 及 它 们 对 棉 苗 组 织 的 浸 软 作 用, 对 棉 苗 组 织 中 儿 茶 ( 宋 凤 鸣 等,1996) 枯 萎 病 菌 侵 染 后 棉 苗 体 内 还 原 型 谷 胱 甘 肽 (GSH) 和 氧 化 型 谷 胱 甘 肽 (GSSG) 含 量 增 加, 叶 片 中 GSH 含 量 早 期 明 显 上 升, 后 期 下 降 ; 而 根 茎 部 组 织 中 GSH 含 量 逐 步 上 升, 后 期 达 到 最 高 水 平, 氟 乐 灵 诱 发 处 理 可 提 同 苗 体 内 GSH 和 GSSG 的 含 量 ( 宋 凤 鸣 等,21) (2) 遗 传 多 样 性 的 分 析 利 用 RAPD 标 记 从 分 子 水 平 上 对 在 生 产 上 有 较 大 影 响 的 51 个 抗 枯 萎 病 陆 地 棉 品 种 进 行 了 遗 传 多 样 性 分 析 51 个 陆 地 棉 品 种 在 41 个 具 多 态 性 的 随 机 引 物 上 扩 增 得 到 82 个 多 态 性 位 点 应 用 NTSYS-pc1.8 数 据 分 析 软 件, 非 加 权 组 平 均 法 (UPGMA) 聚 类 ( 徐 秋 华 等,22) (3) 酶 系 统 变 化 分 析 分 析 了 枯 萎 病 菌 溉 染 后 棉 功 叶 片 和 根 茎 部 组 织 中 超 物 歧 化 酶 (SOD) 和 过 氧 化 氢 酶 (CAT) 活 性 的 变 化 动 态, 结 果 表 明 : 抗 病 品 种 和 感 病 品 种 棉 功 中 SOD 和 CAT 酶 活 笥 无 显 著 差 异 : 氟 乐 灵 处 理 可 诱 发 棉 功 对 枯 萎 病 的 诱 导 抗 性, 且 氟 乐 灵 处 理 的 棉 功 组 织 中 SOD 和 CA( 宋 凤 鸣 等,1999) (4) 抗 药 性 筛 选 分 析 通 过 滤 纸 条 的 抑 菌 法 和 离 体 组 织 抑 菌 法 有 机 结 合 对 市 售 农 药 及 有 选 择 性 的 组 织 进 行 药 性 测 定 剂 和 组 配, 本 试 验 除 了 注 重 筛 选 对 病 菌 等 杀 抑 作 用 好 的 药 剂, 还 注 重 筛 选 对 病 菌 并 无 明 显 的 杀 抑 作 用, 但 通 过 寄 主 组 织 后 能 较 好 的 抑 制 病 菌 扩 展 的 药 剂, 同 时 也 注 重 筛 选 具 有 上 下 传 导 作 用 的 药 剂 ( 单 文 荣 等,21) (5) 诱 导 抗 病 性 植 物 诱 导 抗 病 性 是 指 经 诱 导 物 处 理 后, 植 物 体 对 有 害 病 原 菌 产 生 抗 性 的 现 象 生 物 诱 导 物 和 非 生 物 诱 导 物 皆 可 诱 导 植 物 抗 病 性 的 产 生 植 物 诱 导 抗 生 早 在 2 世 纪 初 即 被 发 现, 现 已 成 为 国 际 上 重 要 的 农 业 研 究 领 域, 并 被 认 为 是 植 物 保 护 的 一 种 新 途 径 新 技 术 ( 董 合 忠 等,22) 11.5 病 害 流 行 (1) 气 候 与 病 害 在 分 析 了 新 疆 棉 花 烂 根 病 枯 萎 病 黄 萎 病 的 发 生 特 点 及 新 疆 棉 花 主 要 病 害 发 生 趋 势 的 基 础 上, 较 为 详 细 地 阐 述 了 防 治 棉 花 病 害 所 应 采 取 的 对 策 ( 李 国 英 等,2) 年 在 石 家 庄 河 北 棉 花 所 黄, 枯 萎 病 混 生 病 圃, 对 中 棉 所 12 每 年 8 月 2-25 日 进 行 黄 萎 病 调 查, 产 与 当 地 6-8 月 每 旬 的 平 均 气 温, 降 水 量, 日 照 时 数 和 空 气 相 对 湿 度 等 与 发 生 黄 萎 病 关 系 进 行 单 项 和 综 合 分 析 结 果 表 明,7 月 份 气 温 27 发 病 轻 重 ( 齐 俊 生 等,1998) 棉 花 枯 黄 萎 病 自 1983 年 第 一 次 普 查 以 来, 发 病 范 围 和 危 害 程 度 逐 年 加 重 根 据 11 年 的 病 田 档 案 分 析, 枯 萎 病 田 在 26 公 顷 左 右, 黄 萎 病 田 在 6 公 顷 左 右 11 年 累 计 损 失 皮 棉 万 万 公 斤, 经 济 损 失 万 万 元 ( 庄 生 仁 等,1994) (2) 生 理 小 种 分 布 从 新 疆 棉 花 枯 黄 萎 病 发 生 危 害 及 研 究 现 状 角 度, 阐 述 了 新 疆 在 棉 花 枯 黄 萎 病 发 生 病 原 菌 生 理 小 种 生 理 型 致 病 及 其 他 生 理 性 状 方 面 的 研 究, 并 提 出 棉 花 枯 黄 萎 病 研 究 与 防 治 中 存 在 问 题 及 应 采 取 的 对 策 ( 缪 卫 国 等,1999) 1996 年 6 月 至 7 月 1 日, 对 新 疆 棉 区 枯 黄 萎 病 发 生 为 害 情 况 进 行 了 考 察 近 年 来 两 病 在 新 疆 为 害 日 趋 严 重, 南 北 疆 均 有 因 枯 萎 为 害 大 片 绝 产 的 严 重 病 田 1995 年 仅 莎 车 县 因 枯 萎 绝 产 棉 田 近 万 亩, 枯 黄 萎 病 有 成 为 新 疆 棉 花 高 产 主 要 障 碍 趋 势 ( 马 存 等,1997) (3) 预 测 预 报 依 据 中 棉 所 12 历 年 区 试 验 数 据 资 料, 利 用 灰 色 系 统 建 戌 预 测 技 术, 掣 民 12 演 变 进 行 了 预 测, 结 果 表 明, 其 呈 下 降 趋 势, 皮 棉 产 量 与 纺 纱 纱 品 质 均 吁 升 趋 势 ; 产 量 组 分 中 单 结 铃 铃 軎 于 上 升 趋 势, 而 衣 分 为 下 降 趋 势 ; 纤 维 主 要 物 理 性 能 指 标 的 变 化 趋 势 为 绒 长 变 长 比 强 增 加 ( 周 关 印 等,1996)

28 28 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 11.6 抗 病 育 种 (1) 双 列 杂 交 采 用 八 五 育 成 的 七 个 棉 花 品 种, 按 不 完 全 双 列 杂 交, 配 制 2 个 组 合, 分 析 了 单 株 铃 数, 铃 重, 衣 分, 衣 指, 纤 维 2.5% 跨 长, 麦 克 隆 值, 比 强, 整 齐 度, 伸 长 率 等 九 个 性 状 的 一 般 配 合 力 和 特 殊 配 合 力 结 果 表 明, 绵 育 3 号 产 量 的 构 成 性 状 和 纤 维 品 质 的 一 般 配 合 力 效 应 ( 杨 伯 祥 等,1997) 根 据 Hayman(1958) 方 法 对 4 个 抗 病 品 种 4 个 感 病 品 种 共 8 个 亲 本 及 其 28 个 半 双 列 杂 交 组 合 的 F2 代 的 平 均 病 级 进 行 双 列 杂 交 分 析, 结 果 表 明, 棉 花 对 枯 萎 病 的 抗 性 存 在 加 性 和 显 性 效 应, 无 上 位 性, 以 加 性 效 应 为 主, 抗 生 哇 不 完 全 显 性, 受 一 对 基 因 控 制 ( 冯 纯 大 等,1996) (2) 有 性 杂 交 通 过 对 574 份 试 材 的 综 合 分 析 研 究 及 抗 病 低 酚 棉 花 新 品 种 晋 棉 14 号 的 成 功 培 育, 认 为 低 酚 与 抗 ( 耐 ) 枯 萎 病 不 存 在 遗 传 负 相 关, 提 供 了 选 育 抗 病 低 酚 棉 花 的 较 佳 技 术 路 线 ( 樊 云 茜 等,1994) 采 用 最 小 范 数 二 阶 无 偏 估 算 法 [MINQUE(1)] 的 统 计 方 法, 分 析 加 性 -- 显 性 -- 母 体 (ADM) 遗 传 模 型 加 性 -- 显 性 -- 上 位 性 (ADAA) 遗 传 模 型, 估 算 陆 地 棉 8 个 杂 交 亲 本 和 F1 F2 代 各 28 个 组 合 的 病 抗 性 遗 传 效 应 结 果 表 明, 陆 地 棉 病 抗 性 的 遗 传 无 上 位 性 效 应 ( 韩 祥 铭 等,21) (3) 复 合 杂 交 棉 花 新 品 种 鄂 抗 棉 3 号 是 用 鄂 光 棉 和 荆 3247 杂 交, 再 注 入 中 2535 的 抗 病 基 因, 经 1 年 强 压 力 逆 境 条 件 下 系 统 选 育 出 的 高 产 高 抗 枯 萎 病 耐 黄 萎 病 适 应 性 广 的 高 优 质 陆 地 棉 品 种 ; 适 宜 的 栽 培 密 度 为 株 /hm 2, 栽 培 管 理 上 应 抓 好 种 子 处 理 ( 丁 俊 麟 等,1995) 抗 A1 是 在 感 枯, 黄 萎 病 核 不 育 两 用 系 473A 基 础 上 输 入 抗 病 因 子, 历 经 1 余 年 育 成 该 两 用 系 不 育 性 稳 定, 群 体 不 育 株 率 5% 左 右, 抗 枯 萎 病 指 7.3~ 16.7 用 该 两 用 系 组 配 的 中 早 熟 和 中 熟 型 杂 交 种, 已 分 别 进 入 四 川 省 生 产 试 验 和 区 域 试 验 ( 张 东 铭 等,1995) 陆 地 棉 中 99 种 质 系 采 用 复 合 杂 交, 早 代 多 年 多 点 鉴 定 和 连 续 定 向 选 择 等 技 术 育 成 它 具 有 突 出 的 兼 抗 棉 蚜, 棉 红 铃 虫 和 枯 萎 病, 黄 萎 病 的 特 性 1985 年 以 来 综 合 鉴 定 结 果, 蚜 害 指 数 比 抗 棉 蚜 对 照 非 洲 E4 和 生 产 对 照 中 棉 12,73-27 等 平 均 减 少 25% 左 右 ( 汪 若 海 等,1993) 从 1978 年 开 始, 选 用 含 棉 花 核 雄 性 不 育 基 因 msc1 的 两 用 系 473A, 抗 枯 萎 病 品 种 陕 棉 9 号 及 抗 枯 黄 萎 病 品 种 中 棉 所 12 号, 通 过 杂 交 转 育, 病 圃 与 非 病 圃, 可 育 株 与 不 育 株 的 双 重 双 向 选 择, 成 功 地 培 育 出 抗 枯 萎 病, 耐 黄 萎 病 和 抗 枯 萎 病 ( 张 相 琼 等,1998) 本 文 对 低 酚 棉 与 有 酚 棉 的 抗 病 和 感 病 品 种 及 其 杂 交 后 代 进 行 了 研 究 结 果 表 明, 在 种 子 中 棉 酚 含 量 及 色 素 腺 体 密 度 与 品 种 的 抗 枯 萎 性 没 有 相 关 在 幼 苗 中, 低 酚 棉 幼 苗 棉 酚 含 量 均 量 著 高 于 有 酚 棉 品 种, 但 它 们 之 间 的 抗 枯 萎 病 性 也 有 没 有 显 著 差 异 ( 袁 章 虎 等,1994) 参 加 湖 北 省 抗 虫 棉 区 试 的 转 Bt 基 因 抗 虫 棉 品 系 均 高 抗 红 铃 虫, 但 不 抗 枯 萎 病, 今 后 要 特 别 重 视 转 基 因 抗 虫 棉 的 抗 病 性 选 择, 杂 交 棉 区 试 参 试 组 合 的 抗 病 性 差 异 较 大, 部 分 组 合 达 到 了 抗 级 水 平, 但 从 总 体 水 平 看, 杂 交 棉 的 抗 病 性 还 应 进 一 步 提 高 才 能 满 足 棉 花 生 产 要 求 ( 吴 征 彬 等,2) (4) 农 艺 性 状 分 析 枯 萎 病 不 同 病 级 对 棉 花 各 性 状 均 有 不 同 的 影 响 在 各 性 状 中, 产 量 构 成 因 素 受 病 级 的 影 响 最 大, 其 次 是 植 株 性 状, 再 次 是 经 济 性 状 不 同 病 级 使 单 株 子 棉 减 少 %, 单 株 皮 棉 减 少 %, 单 株 结 铃 数 降 低 %, 铃 重 减 轻 16.3% 左 右 ( 庄 生 仁 等,1996) 对 14 个 陆 地 棉 品 种 抗 枯 萎 病 性 与 农 艺 性 状 间 的 相 关 性 研 究 表 明, 野 生 棉 与 栽 培 陆 地 棉 杂 种 后 代 品 系 RF-1 和 RF- 等 对 枯 萎 病 免 疫, 但 丰 产 性 较 差 以 丰 产 优 质 材 料 作 母 本 与 抗 病 材 料 作 父 本 的 杂 交 后 代 品 系 华 16 和 63 的 综 合 性 状 较 好 ( 刘 海 涛 等,1998), 年 在 江 苏 沿 海 地 区 农 科 所, 对 江 苏 省 7-9 年 代 育 成 的 抗 枯 萎 病 棉 花 品 种 进 行 产 量 及 有 关 性 状 的 比 较 试 验 结 果 表 明 :9 年 代 品 种 比 7 年 代 品 种 产 量 提 高 近 两 成 8 年 代 品 种 铃 重 的 增 加,9 年 代 单 株 铃 数 和 衣 分 率 的 提 高 是 棉 产 上 升 的 主 导 因 素 ( 周 步 海 等,1996) 分 析 表 明, 陕 棉 所 5 年 代 以 来 培 育 的 棉 花 品 种 具 有 较 好 的 丰 产 性 ; 纤 维 综 合 性 状 得 到 改 进, 但 纤 维 长 度 提 高 较 慢 ; 枯 萎 病 平 均 病 指 逐 年 降 低 ; 但 黄 萎 病 有 逐 年 加 重 趋 势 随 时 间 推 移, 各 阶 段 育 成 品 种 的 其 它 农 艺 性 状 也 呈 规 律 性 变 化 ; 衣 分 率 逐 年 提 高, 植 株 高 度 逐 年 变 矮 ( 范 万 发 等,1995) (5) 耐 枯 育 种 敦 煌 市 棉 花 生 产 中 存 在 突 出 问 题 是 棉 花 枯, 黄 萎 病 蔓 延 快, 发 病 重 和 蚜 虫 危 害 加 重 及 干 旱 的 影 响, 通 过 抗 性 育 选 育 出 适 合 当 地 种 植 的 抗 枯 萎 病 新 品 种 棉 2 号 和 抗 旱, 抗 蚜 虫 新 品 系 6918, 引 种 成 功 了 耐 枯, 黄 萎 病 品 种 中 棉 所 16, 并 从 引 进 品 种 ( 系 ) 中 筛 选 出 了 抗 旱 品 种 ( 魏 天 福 等,1999) (6) 低 酚 育 种 从 湘 棉 1 号 与 中 5655 杂 交 子 代 中 选 育 出 植 株 有 酚 种 子 低 酚 的 棉 花 新 品 种 湘 棉 18 湖 南 省 棉 花 科 学 研 究 所 以 显 性 遗 传 的 无 腺 体 品 种 中 5655 为 母 本, 以 湖 南 省 主 栽 品 种 湘 棉 1 号 为 父 本 进 行 杂 交, 杂 交 子 代 再 以 湘 棉 1 号 为 母 本 回 交 3 次, 从 BC3F4 中 选 育 到 根 茎 叶 有 腺 体 种 子 无 腺 ( 张 雪 林 等,21) 辽 棉 15 号 具 有 高 抗 枯 萎 病, 瘘 抗 黄 萎 病, 高 产, 品 质 好 的 特 点, 经 本 团 年 两 年 大 田 生 产 认 为 该 品 种 能 适 应 石 河 子 地 区 重 病 棉 田 生 态 环 境, 可 以 种 植 在 重 病 棉 田 中 ( 李 海 波 等,1998) 甘 肃 省 农 科 院 经 作 所 选 育 的 棉 花 新 品 种 陇 棉 1 号 枯 萎 病 发 病 率 3.%, 病 情 指 数 2.6, 抗 黄 萎 病 抗 蚜 虫 侵 染 ; 皮 棉 产 量 kg/hm 2 2.5% 跨 长 29.mm, 强 度 22.2, 麦 克 隆 值 3.7, 棉 籽 酚 含 量.1%, 低 于 国 标 标 准 ( 张 秉 贤 等,1998) (7) 自 然 变 异 1984 年 从 人 工 病 圃 选 择 自 然 变 异 株, 经 过 多 年 连 续 定 向 筛 选, 于 1993 年 育 成 特 早 熟 抗 病 棉 花 新 品 种 - 辽 棉 15 号 辽 宁 省 内 外 试 验 示 范 结 果 证 明, 该 品 种 早 熟 性 即, 高 抗 枯 萎 病, 抗 黄 萎 病, 比 目 前 推 广 季 棉 品 种 增 产 1%-2%, 纤 维 品 质 优 良, 适 应 性 广 泛 ( 王 国 山 等,1997) 九 五 期 间, 湖 北 育 成 棉 花 品 种 12 个,2 个 品 种 通 过 全 国 审 定, 其 产 量 潜 力 纤 维 品 质 抗 病 性 上 都 有 较 大 的 提 高 纺 织 工 业 技 术 改 造, 对 原 棉 内 在 品 质 提 出 了 更 高 的 要 求 ; 枯 萎 病 黄 萎 病 棉 铃 虫 为 害 已 成 为 制 约 棉 花 生 产 发 展 的 重 要 因 素 ( 华 金 平 等,21) 陕 棉 抗 病 种 质 资 源 对 棉 花 枯, 黄 萎 病 具 较 高 的 抗 性, 丰 产 性 及 优 质 性 累 计 在 我 区 推 广 6 万 hm 2, 有 效 地 控 制 了 枯 黄 萎 病 的 蔓 延, 起 到 防 病 增 产 作 用 ; 同 时 为 全 国 棉 花 育 种 提 供 了 丰 富 的 抗 原, 具 有 抗 较 高 的 利 用 价 值 ( 邢 宏 宜 等,1995) 年 对 棉 花 多 抗 筛 选 中 的 一 些 问 题 进 行 了 探 讨 结 果 如 下 :(1) 室 内 测 定 种 子 对 霉 菌 的 感 染 状 况, 抗 感 品 种 之 间 差 异 比 较 明 显 ;(2) 在 低 温 条 件 下 将 筛 选 出 的 抗 霉 菌 的 发 芽 慢 的 种 子 在 田 间 直 接 种 植, 苗 产 在 萎 病 黄 切 病 均 有 明 显 减 轻 的 的 趋 势 等 等 ( 樊 宝 华 等,1995) (8) 诱 变 育 种 利 用 诱 变 剂 处 理 植 体, 对 其 形 成 的 愈 伤 组 织 进 行 了 耐 枯 萎 病 菌 毒 素 的 筛 选 对 耐 毒 细 胞 系 再 生 株 当 代 及 其 后 代 进 行 了 室 内 外 鉴 定 分 析 再 生 株 物 抗 病 性 显 著 增 加, 但 后 代 分 离 不 符 合 孟 德 尔 规 律, 且 难 以 稳 定 对 再 生 株 进 行 选 择 可 获 得 抗 性 大 为 改 善 的 单 株 后 代 ( 张 献 龙 等,1998) 利 用 氯 酸 钾 毒 性, 诱 变 棉 花 枯 萎 病 菌 产 生 砂 酸 盐 利 用 缺 陷 型 突 变 体 (nit) 在 485 个 nit 突 变 体 中, 生 理 表 现 型 以 nita 为 最 多,nitB 和 nitc 次 之, nitd 极 少 不 同 生 理 表 现 型 之 间 的 互 补 关 系 复 杂, ( 王 克 荣 等,1996) (9) 转 基 因 育 种 将 用 天 麻 抗 真 菌 蛋 白 基 因 (GAFP) 转 化 的 天 然 彩 色 棉 ( 棕 色 绿 色 )R 种 子 种 植 在 黄 枯 萎 病 混 生 的 病 圃 中 根 据 标 记 基 因 的 不 同, 分 别 用 卡 那 霉 素 和 除 草 剂 (Basta) 对 9 个 筛 选 材 料 的 R1 代 ^4 株 进 行 了 筛 选, 入 选 133 株 ( 陈 大 军 等,22) 11.7 抗 性 鉴 定 (1) 常 规 鉴 定 在 发 病 严 重 而 均 匀 的 田 间 病 圃 中, 对 棉 花 8 个 亲 本 和 28 个 F1 代 进 行 了 抗 枯 萎 病 鉴 定 结 果 表 明 : 杂 种 抗 性 与 亲 本 抗 性 呈 极 显 著 正 相 关, 4 个 抗 病 品 种 的 抗 性 为 中 棉 12> 苏 棉 3 号 > 鄂 62-1> 鄂 抗 棉 1 号, 但 苏 棉 3 号 的 抗 性 传 递 能 力 高 于 中 棉 12( 张 金 发 等,1995) 通 过 对 石 河 子 垦 区 棉 花 枯 萎 病 发 生 概 况 和 棉 花 抗 病 新 品 种 选 育 和 引 种 试 验 示 范 的 介 绍, 探 讨 了 棉 花 抗 病 品 种 对 我 区 棉 花 生 产 的 重 要 性, 自 育 抗 病 品 种 在 我 区 的 重 要 作 用 ( 李 永 鹏 等,2) 以 一 组 病 和 丰 产 品 种 为 材 料 的 对 棉 花 的 抗

29 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 29 枯, 黄 萎 病 性 进 行 了 研 究 结 果 表 明 : 抗 病 品 种 对 7 号 枯 萎 菌 生 理 小 种 抗 性 较 好, 一 般 能 够 达 到 病 指 小 于 1 的 育 种 目 标 各 供 试 材 料 对 8 号 枯 萎 菌 生 理 小 种 和 7 号,8 号 混 合 枯 萎 菌 生 理 小 种 抗 性 较 差 没 有 出 现 高 抗 材 料 ( 吴 征 彬 等,1998) 对 参 加 1999 年 度 长 江 流 域 国 家 级 抗 虫 棉 区 试 和 春 棉 区 试 的 17 个 品 系 种, 在 人 工 并 且 现 圃 分 别 进 行 了 棉 花 抗 枯 黄 萎 病 鉴 定, 抗 枯 萎 病 鉴 定 结 果, 高 抗 1 个, 占 5.9%, 抗 组 成 5 个, 占 29.4%, 而 病 3 个 占 17.6%, 感 病 8 个, 占 47.1%, 抗 黄 萎 病 鉴 定 结 果, 抗 级 2 个, 占 11.8%, 耐 病 8 个, 占 47%( 吴 征 彬 等,21) (2) 形 态 鉴 定 对 陆 地 棉 8 个 野 生 种 系 的 178 份 材 料 进 行 籽 棉 性 状, 纤 维 特 性 及 枯 萎 病 抗 性 鉴 定 和 分 析, 试 图 筛 选 出 抗 性 强, 纤 维 品 质 良 好 的 材 料, 试 验 结 果 表 明, 野 生 种 系 的 种 子 普 遍 较 小, 种 子 大 小 变 异 较 明 显,178 份 野 生 种 系 的 平 均 籽 指 ( 百 粒 种 子 量 ) 为 7.37±1.17 克 ( 郑 泗 军 等,1994) 分 析 表 明, 陕 棉 气 建 国 以 来 阶 段 培 育 的 棉 花 品 种, 均 具 有 较 好 的 丰 产 性 ; 纤 维 综 合 性 状, 逐 步 得 改 良, 但 纤 维 长 度 提 高 较 慢 ; 平 均 枯 萎 病 指 逐 年 降 低, 但 黄 萎 病 情 有 逐 年 加 重 趋 势, 随 时 间 推 移, 各 阶 段 育 成 品 种 的 其 它 农 艺 性 状, 也 呈 规 律 性 变 化 ( 范 万 发 等,1995) 在 棉 花 枯 黄 萎 重 病 辅 上 连 续 种 植 抗 病 品 种, 其 枯 萎 病 指 对 皮 棉 产 量 的 影 响, 当 病 指 x 平 均 为 13.34, 皮 棉 产 量 y 平 均 为 93.75kg/hm2 时, 回 归 方 程 y= x, 回 归 系 数 为 ,t 测 验 极 显 著 相 关 系 数 r=-.89, 极 显 著 ( 王 凤 图 等,1995) (3) 等 位 基 因 年, 对 我 国 育 成 的 有 代 表 性 的 5 个 抗 病 品 种 进 行 抗 枯 萎 病 基 因 的 等 位 测 定 结 果 表 明 : 在 所 选 用 的 5 个 抗 病 品 种 中 至 少 存 在 两 个 不 同 的 抗 病 基 因 ( 暂 定 名 为 FW 和 FW2) ( 冯 纯 大 等,1998) 辽 棉 12 号 生 育 期 13 天 ( 夏 播 11 天 ), 枯 萎 病 指 数.64%, 黄 萎 病 指 数 9.6%, 纤 维 主 体 长 度 29 毫 米, 纤 维 比 强 度 22 克 / 特 克 斯, 麦 克 隆 值 4.2 丰 产 性 好, 适 应 性 广 ( 顾 恒 琴 等,1995) 简 要 介 绍 棉 花 新 品 系 B956-1 两 年 区 域 试 验 和 生 产 示 范 结 果 该 品 系 产 量 与 鄂 棉 18 基 本 持 平, 但 纤 维 品 质 比 鄂 棉 18 高 一 个 档 次, 抗 枯 萎 病 能 力 达 R 级, 适 于 长 江 流 域 及 豫 南 棉 区 种 植 ( 张 诚 侃 等,2) 11.8 抗 性 物 质 综 述 了 我 国 棉 花 枯 萎 病 的 地 理 分 布 抗 病 机 理 和 抗 病 性 遗 传 等 方 面 的 研 究 进 展 情 况 自 1931 年 首 次 报 道 棉 花 枯 萎 病, 至 今 已 蔓 延 至 全 国 各 棉 区 研 究 结 果 表 明, 接 触 细 胞 对 寄 生 的 抗 性 机 理 具 有 特 殊 重 要 性, PLA 的 活 性 高 低, 在 棉 花 抗 生 物 质 生 成 过 程 中 起 着 重 要 作 用 ( 潘 光 照 等,1999) 分 析 了 枯 萎 病 菌 侵 染 后 棉 苗 体 内 棉 酚 和 单 宁 含 量 的 变 化, 结 果 表 明 :(1) 抗 病 品 种 棉 苗 中 棉 酚 和 单 宁 含 量 高 于 感 病 品 种, 根 茎 中 含 量 高 于 叶 片,(2) 氟 乐 灵 播 前 土 壤 处 理 的 棉 苗, 叶 片 和 根 茎 部 组 织 中 的 棉 酚 含 量 较 高 于 未 处 理 组, 但 单 宁 含 量 无 明 显 差 异 ( 宋 凤 鸣 等,1997) 分 析 了 枯 萎 病 菌 侵 染 后 棉 花 叶 片 和 根 茎 部 组 织 中 不 溶 性 胞 壁 结 合 酚 类 物 质 ( 胞 壁 结 合 的 简 单 酚 复 杂 酚 聚 合 物 及 黄 酮 醇 ) 含 量 的 变 化 结 果 表 明, 抗 病 品 种 棉 苗 中 不 溶 性 胞 壁 结 合 酚 类 物 质 含 量 高 于 感 病 品 种, 同 一 品 种 内 根 茎 部 组 织 中 含 量 较 高 ; 氟 乐 灵 播 前 土 壤 处 理 可 诱 发 棉 苗 产 ( 宋 凤 鸣 等,21) 综 述 近 几 十 年 来 国 内 外 棉 花 抗 萎 蔫 病 机 理 研 究 的 进 展 和 概 况 讨 论 了 棉 花 根 系 分 泌 物, 植 株 解 剖 学 结 构, 体 内 抗 菌 物 质, 有 关 的 酶 及 糖 对 棉 花 抗 萎 蔫 病 的 影 响 ( 袁 章 虎 等,1994) 1 要 报 道 了 利 用 棉 花 致 病 菌 菌 丝 体 提 取 物 诱 导 棉 花 产 生 抗 枯 萎 病 性 通 过 诱 导 物 的 筛 选, 发 现 Rhizoctonia solani Colletotrichum gossypii 和 Fusarium monili Forme 可 诱 导 棉 苗 产 生 抗 枯 萎 病 ( 张 大 业 等,1996) 不 同 枯 萎 病 抗 性 的 棉 花 幼 苗 蛋 白 质 含 量 无 明 显 差 异, 而 抗 病 品 种 的 可 溶 性 蛋 白 质 含 量 高 于 感 病 品 种, 接 菌 比 不 接 菌 处 理, 抗 病 品 种 幼 苗 游 离 基 氨 基 酸 的 总 含 量 降 低 15~19%, 而 感 病 品 种 则 增 高 13~2%, 抗 感 枯 萎 病 例 棉 花 品 种 的 氨 基 酸 总 量 的 降 低 ( 刘 发 敏 等,1997) 不 同 抗 枯 萎 类 型 棉 花 品 种 ( 系 ), 在 病 害 胁 迫 时, 叶 片 组 分 内 SOD,POD 活 性 呈 明 显 规 律 性 变 化, 研 究 结 果 表 明, 抗 病 品 种 SOD 和 POD 活 性 弱, 可 溶 性 蛋 白 质 量 ; 不 抗 病 的 品 种 则 表 现 趋 势 相 反, 膜 脂 过 氧 化 水 平,SOD 和 POD 活 性 都 较 高, 可 溶 性 蛋 白 质 含 量 较 低 ( 李 妙 等,1995) 11.9 抗 性 品 种 苏 棉 17 号 系 中 早 熟 型 新 杂 种 棉, 产 籽 棉 kg/hm 2, 皮 棉 kg/hm2, 比 泗 棉 3 号 增 产 11.1% 和 % 高 抗 枯 萎 病 纤 维 品 质 符 合 纺 织 工 业 要 求 ( 承 泓 良 等,2) 华 抗 棉 1 号 是 华 中 农 业 大 学 用 苏 棉 3 号 作 父 本, 抗 虫 品 种 华 棉 11 的 选 系 168 作 母 本, 采 用 杂 交 育 种 方 法 培 育 的 高 产 优 质 抗 病 棉 花 新 品 种 该 品 种 丰 产 稳 产 性 好 纤 维 品 质 优 良 抗 枯 萎 病 耐 黄 萎 病 中 抗 红 铃 虫 熟 性 中 熟 偏 早, 综 合 性 状 优 良 其 产 量 品 质 抗 性 和 早 熟 性 均 优 ( 吴 征 彬 等,22) 本 文 给 出 了 的 处 理 区 试 资 料 数 学 模 型, 对 1993 年 黄 河 流 域 区 试 17 个 试 点 9 个 参 试 品 种 资 料 进 行 分 析 结 果 表 明 : 品 种 间 产 量 差 异 达 显 著 统 计 学 水 平 ; 各 品 种 间 均 能 抗 枯 萎 病, 但 对 黄 萎 病 的 抗 性 不 及 对 照 中 棉 所 12, 属 感 黄 萎 ; 品 种 对 环 境 的 稳 定 和 适 应 性 存 在 差 异 ( 杨 付 新 等,1994) 苏 棉 1 号 经 年 江 苏 省 在 切 病 中 熟 棉 花 品 种 区 域 试 验 多 点 鉴 定,2A 平 均 皮 棉 产 量 为 112kg/hA, 名 列 首 位, 比 对 照 品 种 盐 棉 48 增 产 年 参 加 江 苏 省 中 熟 棉 花 品 种 生 产 试 验, 平 均 皮 棉 产 量 为 163kg/hm 2 ( 刘 水 东 等,1996) 苏 棉 12 号 是 以 84 冀 合 328 的 F1 为 母 本, 与 911 杂 交 于 199 年 育 而 成 的 中 熟 棉 花 新 品 种 在 浙 江 省 棉 区 表 现 结 铃 性 好, 铃 重, 衣 分 率 高, 抗 枯 萎 病, 增 产 潜 力 大 等 特 点 1999 年 3 月 通 过 浙 江 省 农 作 物 品 种 审 定 委 员 会 审 定 ( 周 祥 胜 等,1999) 采 用 HSC 法 对 苏 棉 13 号 在 年 江 苏 省 早 熟 抗 病 棉 品 种 区 域 试 验 多 点 鉴 定 平 均 结 果 进 行 分 析, 表 明 苏 棉 13 号 是 一 个 稳 定 性 好 的 高 产 优 质 抗 枯 萎 病 棉 花 新 品 种 同 时 提 出 苏 棉 13 号 关 键 高 产 栽 培 技 术 ( 郝 德 荣 等,21) 苏 棉 16 具 有 产 量 高 抗 病 性 强, 纤 维 品 质 符 合 纺 工 要 求 和 适 应 性 广 等 特 点, 在 年 江 苏 省 区 试 和 1998 年 生 产 试 验 中, 其 亩 产 皮 棉 分 别 为 14.47kg 和 91.71kg, 比 对 照 泗 棉 3 号 增 产 14.51% 和 11.49%, 均 列 第 一 位, 在 年 全 国 抗 病 棉 区 试 中, 苏 棉 16 号 两 年 平 均 ( 刘 正 銮 等,1999) 1991~2 年 育 成 的 5 个 通 棉 系 列 棉 花 品 种 在 区 域 试 验 中 均 表 现 出 产 量 高 纤 维 品 质 较 好 抗 枯 萎 病 强 的 特 点, 根 据 试 验 结 果 提 出 了 以 高 产 为 主 要 育 种 目 标 的 通 棉 系 列 棉 花 品 种 产 量 构 成 因 素 的 选 择 原 则 : 结 铃 性 强 铃 重 中 等 衣 分 较 高 ( 崔 世 友 等,22) 采 用 提 前 采 粉, 第 2 天 授 粉 方 法, 利 用 棉 花 无 腺 体 指 示 性 状, 进 行 杂 种 优 势 研 究 根 据 主 要 农 艺 性 状 初 步 选 出 病 田 与 非 病 田 高 优 势 高 效 益 组 合, 从 而 为 进 一 步 研 究 杂 种 优 势 奠 定 基 础 ( 刘 文 萍 等,22) 以 文 献 调 研 为 依 据, 综 述 了 新 疆 陆 地 棉 枯 黄 萎 病 发 生 危 害 现 状 ; 致 病 生 理 类 型 鉴 定 结 果 ; 抗 病 种 质 资 源 鉴 定 筛 选 与 利 用 成 绩 ; 引 种 与 选 育 抗 病 新 品 种 的 进 展 ; 存 在 主 要 问 题 及 加 快 抗 病 品 种 选 育 的 技 术 途 径 与 对 策 ( 李 培 夫 等,2) 九 杂 四 号 系 安 徽 省 九 成 农 科 所 培 育 的 陆 地 棉 杂 交 种, 具 有 丰 产, 优 质, 耐 病 等 优 点 年 3a 皮 棉 产 量 分 别 为 ,14, 4,282.kg/hm^2, 纤 维 品 质 经 中 国 农 科 院 棉 花 研 究 所 品 质 检 测 中 心 测 定 属 优 良, 抗 枯 萎 病 经 中 国 农 科 院 棉 花 研 究 所 植 保 站 测 定 ( 江 礼 斌 等,22). 浅 述 25 年 来 采 用 常 规 杂 交 选 育 4 个 抗 病 棉 花 品 种 的 基 本 方 法 和 经 验, 在 于 对 抗 病 品 种 遗 传 规 律 的 了 解 与 掌 握, 提 出 以 抗 病 材 料 作 杂 交 配 组 母 本 是 创 造 新 抗 病 类 型 的 可 能 性 较 大, 在 重 病 圃 中 连 续 选 择 是 较 快 获 得 稳 定 材 料 的 捷 径 ; 种 质 资 源 的 广 泛 收 集 与 创 造 是 育 成 新 品 种 的 基 础 ( 郭 长 佐 等,1997) 陆 中 杂 种 后 代 遗 传 变 异 丰 富, 尤 其 是 纤 维 品 质 性 状, 具 有 较 高 的 利 用 价 值 选 育 出 的 高 强 度 优 异 种 质 1471 系, 历 时 23 天 共 计 29 代 该 材 料 纤 维 比 强 g.tex -1, 麦 克 隆 值 , 绒 长 mm ( 李 首 成 等,1997) 苏 棉 17 号 ( 原 名 宁 杂 37) 是 江 苏 省 第 一 个 通 过 审 定 的 杂 种 棉 新 组 合 1996~1997 年 江 苏 省 杂 种 棉 区 和 1998~1999 年 江 苏 省 棉 花 生 产 试 验 结 果 表 明, 该 组 合 结 铃 性 强, 丰 产 性 好, 高 抗 枯 萎 病, 纤 维 品 质 符 合 纺 工 要 求, 于 2 年 4 月 通 过 江 苏 省 农 作 物 品 种 审 定 委 员 会 审 定 定 名 ( 承 泓 良 等,2) 病 害 防 治 化 学 防 治 (1) 丰 抗 素 通 过 27-1 丰 抗 素 在 棉 花 各 生 育 期 用 不 同 剂 量 次 数 喷 施 后, 结 果 表 明, 丰 抗 素 对 棉 花 枯 萎 病 有 一 定 的 抑 制 作 用, 防 效 分 别 达 % 介 于 在 没 有 抗 病 品 种 和 钉 菌 剂 的 情 况 下, 应 用 丰 抗 素 可 增 加 植

30 3 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 株 的 抗 逆 能 力, 减 轻 枯 萎 病 的 发 生, 起 到 防 病 的 效 果 ( 何 海 芬 等,2) (2) 氟 乐 灵 田 间 试 验 结 果, 除 草 剂 氟 乐 灵 48% 乳 油 以.86kg/hm2 作 棉 苗 播 前 土 壤 处 理, 可 明 显 减 轻 棉 花 枯 萎 病 的 发 生, 在 现 苗 期, 施 用 氟 乐 灵 后 对 感 病 品 种 沪 棉 211 和 抗 病 品 种 中 棉 12 枯 萎 病 株 发 病 率 的 防 治 效 果 分 别 % 和 ( 宋 凤 鸣 等,1994) 分 析 了 氟 乐 灵 (2μg/g 土 ) 诱 发 处 理 及 枯 萎 病 菌 侵 染 后 棉 苗 叶 片 和 根 茎 部 不 同 细 胞 定 位 过 氧 化 物 酶 (POD) 活 性 的 变 化 结 果 表 明 :(1) 总 可 溶 性 POD 胞 内 POD 胞 间 POD 以 及 细 胞 壁 结 合 型 POD 的 活 性 抗 病 品 种 高 于 感 病 品 种 ;(2) 氟 乐 灵 诱 发 处 理 及 枯 萎 病 ( 宋 凤 鸣 等,1997) 田 间 试 验 在 棉 花 苗 病 和 枯 萎 病 常 年 发 病 田 进 行 以 175ml48% 氟 乐 灵 乳 油 /666.7m2 的 剂 量 处 理 苗 床 地 表 土, 播 种 棉 籽 后 以 含 氟 乐 灵 (1.-1.5mg 有 效 成 分 /kg 土 ) 的 土 壤 覆 盖 以 清 水 处 理 为 对 照, 结 果 表 明 L 氟 乐 灵 处 理 组 的 出 苗 率 高 于 对 照 ( 宋 凤 鸣 等,1995) 棉 花 感 病 品 种 种 植 在 含 氟 乐 灵 除 草 剂 (2ppm) 的 育 苗 土 中, 能 明 显 诱 发 棉 苗 对 棉 枯 萎 病 的 抗 性, 抗 病 效 果 达 7% 试 验 表 明, 该 体 合 物 无 抑 制 棉 枯 萎 病 菌 孢 子 的 萌 发 和 菌 丝 生 长 的 作 用 经 该 化 合 物 处 理 的 棉 苗 受 侵 染 率 降 低, 病 菌 局 限 大 子 叶 节 以 下 ( 张 元 恩 等,1994) 以 1μg/g 土 的 氟 乐 灵 播 前 土 壤 处 理, 棉 花 出 亩 后 移 栽 到 无 氟 乐 灵 的 土 壤 中 并 接 种 棉 花 委 病 菌 (Fusariumoxysporum Schlum F.sp.vasin Fectum) 结 果 表 明 氟 乐 灵 处 理 明 显 降 低 了 棉 苗 枯 萎 病 的 株 发 病 率 和 病 情 指 数, 提 高 了 对 枯 萎 病 的 抗 病 性 ( 宋 凤 鸣 等,1995) 分 析 了 枯 萎 病 菌 侵 染 及 氟 乐 灵 诱 发 处 理 后, 棉 苗 叶 片 和 根 茎 部 组 织 中 可 溶 性 酚 和 黄 酮 醇 以 及 不 溶 性 细 胞 结 合 酚 ( 胞 壁 结 合 简 单 酚, 胞 壁 结 合 复 杂 酚 聚 合 物 及 胞 壁 结 合 黄 酮 醇 ) 含 量 的 变 化, 结 果 表 明 : 抗 病 品 种 棉 苗 组 织 中 酚 类 物 质 的 含 量 高 于 病 品 种 棉 苗 中 含 量 ( 宋 凤 鸣 等,1997) 2μgA.i/g 土 壤 的 氟 乐 灵 作 播 前 土 壤 处 理 可 诱 发 棉 苗 对 枯 萎 病 的 诱 导 抗 性, 处 理 组 棉 苗 枯 萎 病 的 株 发 病 率 和 病 情 指 数 明 显 降 低, 对 棉 苗 叶 片 和 根 茎 产 啊 组 织 中 总 糖, 可 溶 性 糖 及 还 原 糖 含 量 以 及 蔗 糖 酶 活 性 的 测 定 结 果 表 明, 抗 病 品 种 棉 苗 中 总 糖, 可 溶 性 糖 和 还 原 糖 含 量 以 及 ( 宋 凤 鸣 等,1996) 氟 乐 灵 诱 发 处 理 及 枯 萎 病 菌 侵 染 可 明 显 提 高 棉 苗 叶 片 和 根 部 组 织 中 多 酚 氧 化 酶 活 性 枯 萎 病 菌 侵 染 后, 经 氟 乐 灵 诱 发 处 理 并 产 生 诱 导 抗 性 的 棉 苗 及 抗 病 品 种 棉 苗 中 多 酚 氧 化 酶 活 性 快 速 上 升, 增 加 幅 度 大, 而 感 病 品 种 棉 苗 中 酶 活 性 前 期 无 明 显 增 加, 后 期 才 有 一 定 程 度 的 上 升 ( 宋 凤 鸣 等,1997) 氟 乐 灵 处 理 可 诱 发 棉 苗 产 生 对 枯 萎 病 的 诱 导 抗 性, 表 现 为 推 迟 显 症, 降 低 发 病 率 和 病 情 指 数 经 1.-4.μg/g 的 氟 乐 灵 处 理 后, 棉 苗 受 枯 萎 病 菌 侵 染 时 其 叶 片 和 根 茎 部 组 织 中 乙 烯 的 产 生 量 明 显 下 降 ( 宋 凤 鸣 等,1998) (3) 二 硝 基 苯 胺 类 棉 花 感 病 品 种 种 入 含 二 硝 基 苯 胺 类 化 合 物 的 育 苗 土 中, 移 栽 后 能 明 显 提 高 对 棉 枯 萎 病 的 抗 性, 效 果 达 7% 二 硝 基 苯 胺 类 化 合 物 为 非 杀 菌 化 合 物 试 验 表 明, 该 化 合 物 对 FOV 的 生 长 无 抑 制 作 用, 反 而 还 能 刺 激 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 FOV 对 处 理 过 的 棉 苗 侵 染 率 低 ( 葛 银 林 等,1995) (4) 枯 萎 立 克 在 棉 花 枯 萎 病 重 发 棉 田, 用 5 倍 枯 萎 立 克 在 棉 花 苗, 蕾 期 各 喷 施 一 次 能 有 效 降 低 棉 花 枯 萎 病 发 病 率, 显 著 提 高 棉 花 保 苗 效 果, 能 显 著 提 高 棉 花 产 量, 增 加 植 棉 经 济 效 益 ( 郑 仁 富 等,1999) (5) 黄 枯 净 通 过 棉 花 上 应 用 黄 枯 净 克 黄 枯 的 试 验 结 果 表 明, 对 棉 花 枯 黄 萎 病 均 有 防 治 作 用, 但 防 效 较 好 的 是 黄 枯 净, 其 次 是 克 黄 枯 它 们 均 能 促 进 棉 花 生 长 发 育, 改 善 纤 维 品 质, 达 到 了 防 病 增 产 增 收 的 目 的 ( 丁 继 红 等,21) 通 过 棉 花 上 应 用 棉 枯 净 克 黄 枯 防 死 乐 之 宾, 其 试 验 结 果 表 明, 对 枯 萎 病 均 有 抑 制 作 用, 但 防 效 较 好 的 是 棉 枯 净, 基 次 是 克 黄 枯 它 们 具 有 综 合 效 应, 能 促 进 棉 花 生 长 发 育, 还 能 改 善 纤 维 品 质, 既 起 到 防 病 又 起 到 增 产 的 作 用 ( 何 海 芬 等,2) (6) 灭 菌 促 长 剂 灭 菌 促 长 剂 可 溶 性 粉 剂 采 用 喷 雾 法 田 间 防 治 棉 枯 萎 病 效 果 达 8% 以 上, 本 文 采 用 穿 透 动 力 滨 方 法, 测 定 了 供 试 剂 穿 透 棉 叶 的 速 率 大 小 及 在 棉 苗 内 的 运 转 方 向 ; 采 用 熔 点 测 定, 红 外 光 谱 分 析 等 方 法 鉴 定 了 灭 菌 促 长 剂 的 有 效 成 分 系 多 菌 灵 草 酸 盐, 并 测 定 了 它 的 油 水 分 配 系 数 ( 李 俊 凯 等,1999) 通 过 小 区 几 种 防 病 药 剂 的 试 验, 在 同 等 条 件 同 等 管 理 情 况 下, 均 有 明 显 效 果 尤 以 植 丰 2 号 1 号 效 果 最 佳 ( 彭 忠 颖 等,1998) (7) 多 菌 灵 以 多 菌 灵 为 有 效 成 分, 以 调 整 流 水 分 配 系 数 为 目 的, 添 加 TA 组 合 增 效 剂, 复 配 而 成 的 新 型 杀 菌 剂 灭 菌 促 长 剂, 对 多 种 真 菌 病 害 具 有 高 效, 速 效, 长 效 和 促 进 作 物 生 长 多 种 功 能 防 治 棉 花 枯 萎 病 毒 毒 力 为 多 菌 灵 4.31 倍, 采 用 喷 雾 法 田 间 防 治 效 果 为 88.5%( 郭 敦 成 等,1996) 采 用 抑 制 病 原 菌 菌 丝 生 长 法 在 室 内 测 定 了 多 菌 灵, 甲 基 托 布 津, 菌 毒 清 等 12 种 杀 菌 剂 对 棉 花 枯 萎 病 病 原 菌 的 毒 力 作 用, 结 果 显 示, 多 种 杀 菌 剂 对 该 病 原 菌 丝 生 长 有 明 显 的 抑 制 作 用, 其 中 以 多 菌 灵 作 用 最 强, 其 抑 制 中 浓 度 (EC5 值 ) 为.77ppm( 沪 产 ) 和.96ppm( 潘 劲 松 等,2) (8) 铜 制 剂 通 过 铜 大 师 不 同 比 例 拌 种 灌 根 和 喷 施, 对 棉 花 苗 期 的 根 腐 病 立 枯 病 枯 萎 病 均 有 防 治 效 果, 使 三 种 病 发 病 晚 发 病 轻 增 强 无 病 区 的 免 疫 能 力, 同 时 对 棉 花 生 育 也 有 促 进 作 用 其 中 拌 种 灌 根 叶 面 喷 施 以 8 倍 液 效 果 最 好, 防 治 效 果 分 别 达 %( 罗 巨 海 等,22) 农 业 防 治 (1) 施 肥 技 术 武 汉 市 沿 江 棉 田 多 为 沙 质 壤 土, 因 缺 钾 引 起 的 棉 花 凋 枯 病 危 害 损 失 较 重 为 了 使 用 有 限 优 南 钾 肥 发 挥 其 防 病 增 产 最 佳 经 济 效 益, 市 植 保 部 门 经 过 试 验 研 究, 在 摸 清 施 钾 防 病 增 产 规 律 的 基 础 上, 规 范 了 施 钾 防 病 措 施, 明 确 了 重 病 田 为 最 佳 防 病 时 象 田, 公 顷 施 氯 化 钾 225 公 斤 ( 刘 立 泰 等,1995) 生 物 活 性 磷 钾 肥 能 提 高 磷 钾 肥 的 利 用 率, 转 化 土 壤 中 的 无 效 磷 钾, 促 进 棉 花 的 生 长 发 育, 有 显 著 的 增 产 增 收 效 果 此 外, 生 物 活 性 细 菌 还 能 改 善 棉 花 根 际 环 境, 减 轻 黄 枯 萎 对 棉 花 搂 害 其 施 用 量, 以 每 公 段 112.5kg 菌 糠 + 过 磷 酸 钙 kg+ 氯 化 钾 225kg( 肖 作 敏 等,1996) 试 验 表 明, 随 着 棉 花 抗 病 品 种 连 作 时 间 的 增 长, 土 壤 中 棉 枯 萎 菌 的 数 量 和 致 病 力 由 高 逐 渐 降 低, 土 壤 的 抑 菌 作 用 逐 渐 积 累 而 形 成 抑 菌 土 土 壤 带 菌 量 与 连 作 年 代 的 关 系 为 :X= N 抗 病 品 种 根 系 分 泌 物 对 棉 枯 萎 菌 小 孢 子 萌 发 没 有 显 著 影 响 ( 杨 之 为 等,1995) 主 要 通 过 对 种 植 抗 病 棉 抗 病 棉 花 品 种 连 作 1 年 和 5 年 枯 萎 病 圃 土 样 进 行 盆 栽 和 田 间 小 区 试 验 试 验 结 果 表 明, 连 作 1 年 以 上 枯 萎 病 圃 田 间 抑 菌 效 果 5.99%, 连 作 5 年 枯 萎 病 圃 抑 菌 效 果 17.18% 上 述 结 果 证 明 了 枯 萎 病 圃 衰 退 的 主 要 病 因 是 棉 花 枯 萎 病 菌 抑 菌 土 的 产 生 和 存 在 ( 曹 桂 艳 等,21) 通 过 田 间 及 盆 栽 试 验 结 果 表 明, 棉 花 枯 萎 病 菌 抑 菌 性 土 壤 施 入 不 同 形 式 的 有 机 界 肥 后 抑 菌 性 发 生 了 变 化 施 入 马 粪 后, 抑 菌 性 被 削 弱, 枯 攻 增 殖 加 快, 棉 花 枯 萎 病 恨 病 率 与 导 菌 土 相 当, 而 施 入 棉 子 饼 及 豆 饼 之 后, 则 抑 菌 性 增 强, 抑 菌 效 果 增 加 ( 简 桂 良 等,1997) (2) 播 种 抑 病 对 棉 花 抗 感 枯 萎 病 品 种 在 春 播 和 夏 播 的 2-3 叶 期 6-7 叶 期 和 现 蕾 期 进 行 了 根 际 真 菌 区 系 分 析, 结 果 表 明 : 第 一 品 种 都 有 自 己 独 特 的 根 际 真 菌 区 系, 抗 病 品 种 根 际 真 菌 种 数 多 于 感 病 品 种, 其 根 际 主 要 优 势 种 是 : 青 霉 (Penicillum pps.) 曲 霉 (Asqergillus spp.) 等 ( 李 洪 连 等,1991). 据 研 究 表 明, 随 着 棉 花 移 栽 时 苗 龄 的 增 加, 枯 萎 病 的 发 病 率 病 指 均 极 显 著 地 减 小, 且 壮 苗 的 发 病 率 病 指 都 低 于 弱 苗 棉 花 枯 萎 病 的 发 病 期 发 病 高 峰 移 栽 时 间 关 系 不 大 因 此, 棉 花 采 取 大 苗 壮 苗 适 当 迟 栽, 既 能 推 迟 枯 萎 病 的 发 病 期, 又 能 有 效 地 降 低 发 病 率, 减 轻 发 病 程 度 ( 沈 万 陆 等,1995) 对 中 早 熟 抗 枯 萎 病 新 品 种 苏 棉 11 号 丰 产 示 范 的 栽 培 措 施 与 丰 产 结 构 进 行 汇 总 与 分 析, 结 果 表 明 :(1) 新 品 种 播 期 弹 性 较 大, 适 应 的 茬 口 亦 较 宽 ;(2) 在 麦 后 连 作 栽 培 条 件 下, 不 同 茬 每 亩 皮 产 量 的 变 幅 为 kg ( 葛 知 男 等,1997) 为 筛 选 适 宜 安 徽 种 植 优 质 棉 花 良 种, 提 高 安 徽 棉 花 的 市 场 竞 争 力, 对 引 种 的 4 个 棉 花 品 种 进 行 了 丰 产 性 优 质 性 和 其 它 性 状 的 比 较 试 验 结 果 表 明 ; 九 杂 4 号 在 经 过 枯 萎 病 抗 性 鉴 定 后, 可 以 推 广 ( 吴 宁 等,22)

31 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 生 物 防 治 (1) 生 防 真 菌 对 国 内 外 棉 花 枯 黄 萎 病 生 物 防 治 的 研 究 作 了 总 结, 论 述 了 利 用 生 防 细 菌 生 防 真 菌 和 微 生 物 肥 料 和 枯 黄 萎 病 因 之 间 的 寄 生 和 拮 抗 等 关 系, 直 接 杀 死 或 抑 制 根 同 生 物 区 系 中 枯 黄 萎 病 原 菌, 减 少 其 种 群 数 量 ; 同 时 提 高 土 壤 肥 力 促 进 棉 花 生 产 等 技 术 途 径 ( 张 世 平 等,1996) (2) 芽 孢 杆 菌 从 棉 苗 根 系 分 离 的 99 个 芽 孢 杆 菌 中, 筛 选 出 对 棉 立 枯 病 有 控 制 作 用 和 对 棉 苗 有 促 生 作 用 的 C87 菌 株, 该 菌 株 对 棉 花 立 枯 病 菌, 炭 疽 病 菌, 枯 萎 病 菌, 黄 萎 病 菌 和 水 稻, 小 麦 纹 枯 病 菌 均 有 抑 菌 活 性 每 克 棉 籽 用 个 /ml 菌 量 处 理, 死 苗 率 减 少 65.5%~8( 江 怀 仲 等,1996) 从 棉 株 根 围 土 壤 中 分 离 到 2 多 株 土 壤 微 生 物 通 过 土 壤 微 生 物 - 棉 枯 萎 病 菌 平 板 对 峙 培 养, 筛 选 出 抑 菌 效 果 较 好 的 7 个 菌 株, 即 绿 色 木 霉 T-3, 芽 孢 杆 菌 B-1 B-3, 放 线 菌 A-3 A-6 A-7 A-19( 袁 虹 霞 等,1998) 来 自 5 种 植 物 根 围 土 壤 的 5 株 芽 孢 杆 菌 对 棉 花 立 枯 病 菌 炭 疽 病 菌 黄 萎 病 菌 枯 萎 病 菌 棉 铃 疫 霉 病 菌 和 棉 叶 斑 病 菌 均 有 较 强 抑 制 效 果, 室 内 发 芽 试 验 表 明 C-62 菌 株 显 著 促 进 棉 子 发 芽, 其 余 4 个 菌 株 对 发 芽 无 显 著 影 响 ( 张 学 君 等,1994) (3) 内 生 细 菌 于 1993 年 棉 花 生 长 季 节, 对 种 植 在 偏 砂 性 和 偏 粘 性 土 壤 中 的 不 同 抗 枯 萎 病 品 种 中 棉 川 和 感 病 品 种 邯 郸 -14 进 行 了 内 生 细 菌 分 析 试 验 分 别 在 五 叶 期 现 蕾 期 和 开 花 结 铃 后 期 取 样, 在 TSA 培 养 基 上 分 离 维 管 组 织 内 生 细 菌 ( 王 琦 等,1997) 综 合 治 理 全 国 棉 花 枯, 黄 萎 病 综 合 防 治 研 究 协 作 组 自 1972 年 成 立 至 今 已 2 年 在 长 期 的 协 作 研 究 中, 对 我 国 棉 花 枯 萎 病 和 黄 萎 病 的 发 生 危 害, 病 原 菌 特 性, 致 病 与 抗 病 机 理 以 及 抗 病 品 种 培 育, 推 广 等 方 面 做 了 大 量 工 作, 压 低 了 病 情 指 数, 减 轻 了 危 害, 提 高 了 对 病 害 本 质 的 认 识 ( 马 存 等,1995) 为 稳 定 和 发 展 枯 萎 的 黄 萎 病 棉 区 棉 花 生 产, 提 出 综 合 治 理 的 措 施, 即 选 育 推 广 抗 病 品 种, 合 理 轮 作, 农 业 防 治 生 物 防 治 和 化 学 防 治 等 手 段 相 结 合, 可 保 护 无 病 区 抑 制 零 星 病 区 和 轻 病 区 病 情 恶 化, 改 造 重 病 区, 使 之 病 情 逐 年 减 轻 ( 华 金 平 等,1998) 以 长 江 流 域 棉 区 的 76 份 ( 次 ) 陆 地 棉 新 品 种 ( 系 ) 和 杂 交 种 为 材 料, 于 年 在 华 中 农 业 大 学 对 棉 花 的 抗 枯 萎 鉴 定 技 术 及 抗 病 指 标 进 行 了 研 究, 结 果 表 明, 以 相 对 抗 性 指 数 (IR) 为 抗 病 指 标 鉴 定 的 结 果 与 以 相 对 病 抗 病 效 果 (ER) 为 抗 病 指 标 鉴 定 的 完 全 一 致 ( 吴 征 彬 等,1999) 通 过 田 间 调 查 发 现 我 省 棉 田 的 主 要 线 虫 类 群 有 : 植 物 外 寄 生 线 虫 ; 小 杆 目 线 虫 ; 具 有 吻 针 非 植 物 这 厅 生 线 虫 等 3 种 大 类 群, 年 田 间 及 温 室 盆 栽 试 验, 证 明 外 寄 生 加 洲 螺 旋 线 虫 ( Helicotylenchus califormicus ) 可 加 重 棉 花 枯 萎 病 (Fusarium oxysporiumf.vasinfectum)( 王 汝 贤 等,1989) 地 膜 覆 盖 显 著 降 低 了 棉 花 枯 萎 病 的 发 病 率 与 病 情 指 数, 极 显 著 地 提 高 了 棉 花 的 产 量 ( 贺 忠 秀 等,1994) 辽 棉 15 在 北 疆 博 乐 垦 区 表 现 出 早 熟 高 抗 枯 萎 病 和 黄 萎 病, 且 丰 产 性 状 好 的 特 点, 本 文 作 者 结 合 辽 棉 15 在 八 十 一 团 种 植 5 年 的 经 验, 从 播 前 准 备 播 种 早 期 田 管 化 控 追 肥 灌 水 防 治 虫 草 害 中 后 期 管 理 及 采 收 等 方 面 总 结 了 辽 棉 15 栽 培 技 术 ( 冯 焰 等,2) 采 用 灰 色 关 联 度 分 析, 对 年 四 川 育 成 参 加 省 棉 花 新 品 种 区 域 试 验 的 34 个 中 早 熟 品 种 和 其 中 区 试 的 15 个 品 种, 单 株 铃 数 铃 重 衣 分 衣 指 纤 维 比 中 枯 萎 病 指 与 皮 棉 产 量 和 皮 棉 增 产 率 农 一 进 行 了 分 析 ( 杨 伯 祥 等,1996) 本 文 作 者 根 据 近 两 年 来 棉 花 三 虫 三 发 生 发 展 趋 势, 从 生 态 平 衡 的 基 础 理 论 分 析 其 发 生 的 原 因, 提 出 贯 彻 综 合 防 治 的 方 针 指 导 思 想 和 防 治 技 术 措 施, 强 人 防 治 措 施, 加 强 对 棉 花 三 虫 三 病 综 合 治 理 是 保 证 棉 花 生 产 持 续 发 展 的 重 要 保 证 ( 关 纯 博 等,1997) 以 不 同 历 史 时 期 的 1 个 代 表 性 棉 花 品 种 的 2 年 5 点 实 验 和 年 棉 花 品 种 区 域 实 验 的 历 史 资 料, 研 究 我 国 黄 淮 棉 区 自 5 年 代 以 来 棉 花 品 种 农 艺 性 状 抗 病 性 和 稳 定 性 的 遗 传 改 良 效 果 结 果 表 明 : 建 国 4 多 年 来, 该 棉 区 棉 花 早 熟 性 和 抗 病 性 育 种 取 得 显 著 进 展 ( 姜 保 功 等,2) 12 茄 科 枯 萎 病 研 究 12.1 抗 性 鉴 定 (1) 苗 期 复 合 接 种 番 茄 苗 期 单 一 接 种 和 复 合 接 种 都 能 准 确 地 反 映 出 品 种 的 抗 病 性, 对 生 产 上 常 见 的 番 茄 叶 霉 病 TMV 枯 萎 病 的 最 佳 鉴 定 方 法 如 下 :2 片 真 叶 接 种 TMV, 采 用 摩 擦 法 接 种, 接 种 量 为 1g 病 叶 加.1Mph 7. 的 磷 酸 缓 冲 液 或 蒸 馏 水 1ml( 毫 升 ), 接 种 后 第 3d( 天 ) 复 接 一 次 ( 许 向 阳 等,22) (2) 苗 期 浸 根 接 种 明 确 番 茄 枯 萎 病 苗 期 抗 病 性 鉴 定 方 法 中 浸 根 接 种 的 最 佳 苗 龄 为 两 片 真 叶 期, 此 龄 期 根 系 发 育 多, 拔 苗 后 须 根 自 然 伤 断, 浸 根 接 种 率 高 浸 根 接 种 随 即 移 栽 的 与 浸 根 2 5 1min 的, 它 们 之 间 发 病 差 异 不 不 大 ( 柏 敏 战 等,1997) (3) 室 内 抗 性 鉴 定 室 内 抗 病 性 鉴 定 结 果, 在 2 份 番 茄 品 种 和 材 料 中, 有 17 份 抗 或 高 抗 枯 萎 病 的 品 种, 占 85%; 感 病 品 种 有 早 魁 西 粉 3 号 中 丰, 占 15% ( 陈 仁 立 等,1997) 取 黑 龙 江 省 哈 尔 滨 和 佳 木 斯 市 郊 及 农 业 大 学 园 艺 试 验 站 收 集 和 分 离 的 2 个 番 茄 枯 萎 病 菌 菌 株, 在 进 行 专 化 测 定 的 基 础 上, 用 国 际 上 通 用 的 已 知 基 因 型 的 番 茄 品 种 做 为 鉴 别 寄 主, 采 用 泡 子 悬 浮 液 浸 根 接 种 法 进 行 了 小 种 鉴 定, 结 果 表 明,2 个 供 试 菌 株 均 属 于 尖 孢 镰 刀 菌 番 茄 专 化 型 ( 王 全 华 等,1996) 12.2 抗 性 品 种 (1) 大 果 型 番 茄 中 杂 12 番 茄 是 新 育 成 的 适 合 保 护 地 栽 培 的 中 早 熟 一 代 杂 种, 抗 ToMV, 耐 CMV, 抗 枯 萎 病 和 叶 霉 病 ; 大 果 类 型, 果 形 整 齐, 商 品 率 高 ; 丰 产 性 好, 产 量 达 75-12kg/hm 2 ( 王 孝 宣 等,21) 中 杂 11 号 番 茄 是 从 欧 洲, 日 本 等 引 进 优 良 资 源 材 料, 经 多 代 复 合 新 育 成 的 适 合 保 护 地 栽 培 的 中 熟 种 一 代 抗 ToMV, 枯 萎 病, 叶 霉 病 大 果 型, 果 实 粉 红 色, 果 形 整 齐, 耐 贮 运, 商 品 率 商 丰 产 性 好, 单 位 面 积 产 量 超 过 中 杂 9 号 ( 杜 永 臣 等,21) 利 用 从 国 外 引 进 的 17 份 和 本 所 的 65 份 番 茄 育 种 材 料, 经 田 间 观 察 和 人 工 接 种 鉴 定, 筛 选 出 5 份 抗 枯 萎 病 的 一 代 杂 种, 并 经 系 谱 法 选 择, 选 出 121 和 128 优 良 抗 病 砧 木, 经 多 代 抗 病 性 人 工 接 种 鉴 定 和 嫁 接 苗 接 种 比 较, 表 现 亲 和 力 好, 高 抗 枯 萎 病, 同 时 兼 抗 青 枯 病 ( 黄 婷 婷 等,1999) 东 农 79 是 用 美 国 品 种 Northern Exposure 的 稳 定 自 交 系 和 美 国 常 规 品 种 T66 配 制 的 一 代 杂 种 属 有 限 生 长 类 型, 生 长 势 强, 叶 色 深 绿, 高 抗 TMV 和 枯 萎 病, 耐 旱 疫 病 中 早 熟, 果 实 红 色, 畸 形 果 少, 硬 度 大, 耐 贮 运, 品 质 优 良 一 般 春 季 大 棚 每 667m^2 产 量 可 达 7-75( 许 向 阳 等,22) 浙 粉 22 为 设 施 栽 培 专 用 无 限 生 长 类 型 杂 交 一 代 粉 红 果 番 茄 品 种, 其 母 9179 系 从 欧 洲 引 进 的 高 抗 叶 霉 病 的 试 材 料 952 和 亚 洲 蔬 菜 研 究 发 展 中 心 引 进 材 料 9132 的 杂 交 后 代 中 选 出, 父 本 9178 从 美 国 引 进 品 种 Heinz 和 上 海 品 种 合 作 96 的 杂 交 后 代 中 株 选 而 成, 浙 粉 22 主 要 适 合 秋 冬 和 冬 春 ( 杨 悦 俭 等,22) (2) 中 果 型 番 茄 渝 抗 四 号 是 根 据 重 庆 地 区 番 茄 枯 萎 病 TMV 危 害 特 点 及 消 长 规 律, 选 用 具 有 抗 枯 萎 病 TMV 显 性 基 因, 早 熟 矮 生 自 封 顶 类 型 的 T4 作 父 本, 以 高 抗 枯 萎 病, 早 熟, 丰 产, 结 果 能 力 强 的 8119 作 母 本 杂 交 选 育 而 而 的 红 色 中 果 型 优 良 组 合 ( 王 文 强 等,1995) 渝 红 6 号 番 茄 是 新 育 成 的 一 代 杂 种, 自 封 顶 类 型, 生 长 势 强, 叶 片 肥 大, 叶 色 浓 绿, 不 卷 叶, 不 早 衰 ; 果 面 光 滑, 无 绿 果 肩, 成 熟 果 红 色, 平 均 单 果 质 量 23g; 可 溶 性 固 形 物 含 量 5.24%, 维 生 素 C 含 量.181mg/g; 皮 厚, 耐 贮 运 ; 中 抗 TMV, 抗 枯 萎 病 ; 耐 低 温, 耐 弱 光 ( 王 文 强 等,22) 浙 粉 22 为 设 施 栽 培 专 用 无 限 生 长 类 型 番 茄 一 代 杂 种, 主 要 适 合 秋 冬 和 冬 春 季 节 大 棚 或 日 光 温 室 栽 培, 耐 低 温 性 好, 品 质 优 良, 贮 运 性 极 佳 高 架 栽 培 (6 穗 果 ) 产 量 可 达 15t/hm 2, 矮 架 栽 培 (3-4 穗 果 ) 为 8t/h m 2 左 右 ( 杨 悦 俭 等,22) (3) 樱 桃 番 茄 圣 果 系 以 引 进 品 种 或 材 料, 经 多 代 复 合 杂 交 新 育 成 的 适 合 保 护 地 栽 培 的 樱 桃 番 茄 一 代 杂 种 该 品 种 属 无 限 生 长 类 型, 早 熟 优 质, 可 溶 性 固 形 物 含 量 9-9.5% 抗 TMV, 枯 萎 病, 叶 霉 病 和 早 疫 病, 果 实 椭 圆 形, 红 色, 整 齐, 耐 贮 运, 单 果 质 量 14-16g, 综 合 性 状 超 过 台 湾 圣 女 ( 方 凌 等,22)

32 32 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 12.3 病 害 防 治 采 用 含 毒 介 质 法 研 究 了 壳 聚 糖 对 番 茄 枯 萎 病 菌 菌 丝 生 长 和 孢 子 萌 发 的 抑 制 作 用, 结 果 表 明, 浓 度 大 于 1mg/mL 的 壳 聚 糖 能 明 显 抑 制 菌 丝 生 长, 各 设 定 浓 度 均 可 在 一 定 程 度 上 抑 制 孢 子 萌 发, 而 且 抑 制 效 果 随 着 处 理 浓 度 的 增 大 而 增 强 ; 浓 度 大 于.1mg/mL 的 壳 聚 糖 处 理 可 诱 导 初 生 菌 丝 发 ( 廖 春 燕 等,21) 探 讨 了 秋 番 茄 枯 萎 病 的 症 状 病 原 发 病 规 律 和 综 合 防 治 措 施 提 出 以 土 壤 改 良, 选 择 抗 病 品 种 调 节 播 期 为 中 心 的 综 合 防 治 配 套 措 施, 可 以 基 本 上 控 制 病 害 ( 张 时 兴 等,1998) 12.4 病 害 流 行 随 着 保 护 地 蔬 菜 生 产 的 发 展, 我 国 北 方 茄 子 保 护 地 栽 培 面 积 不 断 扩 大, 由 于 重 茬 等 原 因, 土 传 病 害 逐 渐 加 重 因 茄 子 黄 萎 病 枯 萎 病 等 土 传 统 病 害 的 发 生, 严 重 影 响 保 护 地 茄 子 生 产 的 发 展, 轻 者 减 产 3-45, 重 者 绝 收 由 于 病 菌 通 过 土 壤 传 播, 使 用 药 剂 对 难 以 控 制 ( 樊 红 杰 等,21) 13 林 木 枯 萎 病 研 究 13.1 松 树 松 枯 萎 病 是 全 球 性 普 遍 发 生 的 病 害, 其 原 因 可 归 纳 为 6 个 方 面 :1 大 气 污 染 因 素 ;2 病 原 线 虫 ;3 环 境 气 候 因 素 ;4 病 害 因 素 ;5 虫 害 因 素 ;6 土 壤 因 素 油 松 作 为 辽 宁 森 林 资 源 的 重 要 组 成 部 分, 近 年 来 也 发 生 大 面 积 枯 萎 死 亡 现 象, 其 原 因 不 外 乎 以 上 6 方 面, 但 对 辽 东 山 区 油 松 的 ( 苏 宝 玲 等,21) 本 文 对 松 树 枯 萎 类 型 和 引 起 松 树 枯 萎 的 主 要 因 子 进 行 了 研 究, 结 果 表 明, 枯 萎 松 树 根 据 木 质 部 内 线 虫 种 类 和 媒 介 昆 虫 种 类 在 宁 波 可 分 为 4 个 类 型, 松 墨 天 牛 松 树 线 虫, 松 墨 天 牛 拟 松 材 线 虫, 松 墨 天 牛 其 他 线 虫 和 松 墨 天 牛 无 线 虫 松 树 枯 萎 数 量 与 气 候 条 件 有 关 ( 来 燕 学 等,1996) 13.2 相 思 树 报 道 有 马 占 相 思 林 的 一 种 新 病 害 - 枯 萎 病, 该 病 害 在 广 州 郊 区 的 马 占 相 思 林 造 成 很 大 的 危 害, 于 2~3 月 份 开 始 发 病,4~5 月 份 为 发 病 盛 期, 阴 雨, 高 湿 的 天 气 条 件 有 利 于 该 病 的 发 生, 通 过 对 病 组 的 分 离, 培 养, 纯 化, 接 种 及 培 养 菌 的 致 病 性 测 定, 鉴 定 其 病 原 为 尖 镰 刀 菌 ( 詹 小 红 等,1997) 13.3 柑 桔 提 供 美 国 柑 桔 业 总 的 情 况, 它 简 单 报 道 了 当 前 柑 桔 业 存 在 的 不 利 因 素 包 括 低 温, 柑 桔 溃 疡 病, 枯 萎 病, 果 蝇, 大 吉 丁 虫, 斜 纹 夜 蛾 和 墨 蚊, 以 及 由 使 用 农 药 所 带 来 的 相 关 问 题 同 时 也 报 道 了 美 国 在 其 他 领 域 的 超 前 研 究, 包 括 柑 桔 蓟 马, 柑 桔 红 蜘 蛛, 蚧 壳 虫, 脚 腐 病 等 ( 考., 查 W 等,1995) 报 道 我 国 南 方 引 种 欧 美 杨 ( 主 要 是 63 杨 69 杨 和 72 杨 ) 的 34 个 病 害, 其 中 除 枯 萎 病 溃 疡 病 腐 烂 病 日 灼 病 等 有 较 大 影 响 外, 其 余 多 数 为 害 较 轻, 且 未 发 现 大 斑 溃 疡, 叶 锈 病 等 对 杨 树 威 胁 较 大 的 病 害 ( 谢 宝 多 等,1994) 13.4 沙 棘 两 年 来 对 沙 棘 枯 萎 病 的 症 状 病 原 发 病 规 律 及 防 治 进 行 了 研 究, 确 定 病 原 菌 为 Fusarium sp; 同 时 进 行 了 室 内 外 防 治 试 验, 确 定 甲 基 托 布 津 和 多 菌 灵 等 为 主 要 防 治 药 剂 ( 张 军 等,21) 13.5 水 杉 对 引 起 水 杉 Metasepuoia gglyptostroboides Hu et Chang 枯 萎 病 的 病 原 进 行 了 分 离 接 种 和 鉴 定 鉴 定 结 果 表 明 病 原 为 一 种 色 二 孢 菌 Diplodia sp.( 吴 大 椿 等,2) 水 杉 枯 萎 病 病 原 菌 色 二 孢 (Diplodia sp) 真 菌 可 以 产 生 有 毒 代 谢 物 生 物 测 定 结 果 表 明 : 该 毒 素 具 有 广 谱 性, 对 裸 子 植 物 水 杉 和 池 杉 被 子 植 物 中 杨 柳 科 的 垂 柳 安 石 榴 科 的 石 榴 等 树 木 枝 条 具 致 萎 作 用, 对 小 麦 玉 米 油 菜 等 种 子 的 发 芽 及 生 长 具 有 一 定 的 抑 制 作 用 ( 吴 大 椿 等,2) 13.6 铁 线 莲 属 植 物 在 昆 明 地 区 对 铁 线 莲 属 植 物 常 见 病 虫 害 进 行 了 调 查, 发 现 枯 萎 病 白 粉 病 蛞 蝓 蜗 牛 蠼 螋 蚜 虫 潜 叶 蝇 和 红 蜘 蛛 是 该 植 物 的 主 要 病 虫 害, 并 提 出 了 相 应 的 防 治 措 施 ( 李 志 坚 等,22) 13.7 梨 树 解 放 前 湖 北 甚 少 商 品 生 产, 后 经 不 断 引 试 种, 选 育 新 品 种, 创 新 培 管 技 术, 在 研 究 解 决 梨 红 叶 枯 萎 病 后, 沙 滩 所 产 鲜 梨 更 耐 贮 运, 因 而 开 拓 了 市 场, 使 湖 北 发 展 成 当 前 南 方 梨 的 主 产 省 ( 张 力 田 等,1999) 参 考 文 献 1. 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J. of Phytopathology 128: Xie W S,Hu J S.1995,Molecular cloning, sequence analysis, and detection of banana bunch top virus in Hawaii[J].Phytopathology, 85(3): 陈 廷 述, 胡 德 泉 等, 22. 国 内 外 香 蕉 产 业 发 展 概 况 及 我 区 对 策. 广 西 农 业 科 学, (1): 陈 铣, 赖 真 如, 陈 树 帮, % 降 黄 龙 可 湿 性 粉 剂 防 治 香 蕉 花 叶 心 腐 病 和 香 蕉 束 顶 病 示 范 试 验. 广 东 农 业 科 学, (2): 费 继 锋, 肖 火 根, 李 华 平, 范 怀 忠, 21. 香 蕉 线 条 病 毒 病 研 究 进 展. 病 毒 学 报, 17(4): 冯 岩, 曹 莉, 陈 健, 香 蕉 花 叶 病 的 发 生 及 综 合 防 治. 植 物 检 疫, 13(3): 何 自 福, 李 华 平, 2I, BBTV 两 个 株 系 DNA 组 分 1 的 克 隆 及 序 列 分 析. 植 物 病 理 学 报, 2,3(4): 何 自 福, 李 华 平, 2II, 香 蕉 束 顶 病 毒 DNA 组 分 6 的 克 隆 和 序 列 分 析. 病 毒 学 报, 2,16(2) 贺 竹 梅, 李 宝 健, 香 蕉 生 物 技 术 研 究 现 状 与 展 望. 生 物 工 程 进 展, 17(5): 腊 平, 蔡 文 启, 2, 香 蕉 束 顶 病 毒 基 因 Ⅰ 的 克 隆 及 序 列 分 析. 病 毒 学 报, 2,16(2) 林 纬, 黎 起 秦, 韦 绍 兴 等, 年 广 西 香 蕉 花 叶 心 腐 病 严 重 发 生 原 因 分 析. 植 物 保 护, 26(3): 孙 茂 林, 和 春 育, 庄 俊 英, 等.1992, 香 蕉 束 顶 病 毒 单 克 隆 抗 体 的 制 备 及 其 应 用. 西 南 农 业 学 报, 5(3): 田 郎, 张 茹 莲, 香 蕉 组 培 苗 生 产 及 其 问 题 的 探 讨. 云 南 热 作 科 技,2(2): 肖 火 根, J. Hu, 李 华 平, 等.1999, 香 蕉 束 顶 病 毒 基 因 克 隆 和 序 列 分 析. 病 毒 学 报, 15(1): 肖 火 根, 高 乔 婉, 张 曙 光 等, 香 蕉 试 管 苗 黄 瓜 花 叶 病 毒 检 疫 检 验 技 术 研 究. 中 国 病 毒 学, 1(3): 徐 平 东 柯 冲, 1996, 菲 律 宾 引 种 香 蕉 花 叶 病 毒 的 鉴 定. 福 建 省 农 科 院 学 报. 11(4) 张 海 保, 朱 西 儒, 刘 卫, 等, 1995, 应 用 单 克 隆 抗 体 检 测 香 蕉 束 顶 病. 植 物 保 护 学 报, 22(1): 张 建 军, 莫 晓 风, 香 蕉 苞 片 花 叶 病 毒 及 其 检 测 技 术. 植 物 检 疫, 12(5): 周 莉 娟, 郑 伟 文. 21. PCR 法 检 测 香 蕉 束 顶 病 毒. 福 建 农 业 学 报, 16(4): 周 仲 驹, 郑 国 璋, 1993, 香 蕉 束 顶 病 的 研 究 :Ⅰ. 病 害 的 发 生, 流 行 与 分 布, 福 建 农 学 院 学 报, 22(3) 周 仲 驹, 郑 国 璋, 1995, 香 蕉 束 顶 病 的 研 究 :Ⅲ. 传 毒 介 体 香 蕉 交 脉 蚜 的 发 生 规 律, 福 建 农 业 大 学 学 报, 24(1) 朱 靖 杰, 香 蕉 组 织 培 养 中 变 异 的 发 生 与 控 制. 果 树 科 学, 12(2): 朱 靖 杰, 香 蕉 苗 的 工 厂 化 生 产. 植 物 杂 志, (2): 朱 西 儒, 张 海 保, 张 云 开 等, 香 蕉 花 叶 病 病 原 病 毒 及 其 卫 星 RNA 的 研 究. 广 西 科 学 院 学 报, 15(1): 朱 西 儒, 张 海 保, 张 云 开 等, 香 蕉 花 叶 病 病 原 病 毒 及 其 卫 星 RNA 的 研 究. 广 西 科 学 院 学 报, 15(1):6-1

48 48 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 研 究 进 展 从 可 持 续 植 物 保 护 理 念 看 自 然 与 人 文 的 共 通 性 李 芳 ( 福 建 农 林 大 学 植 保 学 院 福 州 352) 摘 要 : 可 持 续 植 物 保 护 理 念 有 着 深 厚 的 哲 学 府 蕴, 其 内 涵 的 辩 证 思 维 生 态 理 念 以 及 多 样 性 非 线 性 有 限 性 对 人 文 和 社 会 科 学 的 研 究 有 很 大 的 借 鉴 意 义 关 键 词 : 可 持 续 理 念 ; 植 物 保 护 ; 人 文 ; 共 通 性 Review on general characters between nature science and humanities from the perspective of sustainable plant protection Li Fang (College of plant protection FAD352) Abstract:The ideal of sustainable plant protection are rich in philosophy meaning.all the containing philosophic and diversity,nonlinear and limit thinking are close related to humanities and society science.znfact,nature and humanities are implicative of each other,meanwhile all can draw lesson from each other Key word:sustainable theory,plant protection,humanities,general characters 人 类 面 对 前 所 未 有 的 资 源 与 环 境 危 机, 在 痛 苦 而 深 刻 地 反 思 以 往 的 发 展 模 式 后 作 出 了 可 持 续 发 展 战 略 的 明 智 选 择 作 为 人 类 生 活 中 具 有 实 质 性 和 整 体 性 变 革, 可 持 续 发 展 不 仅 是 人 类 社 会 运 作 模 式 的 自 主 性 和 整 体 性 的 变 革, 而 且 包 含 并 体 现 为 人 类 主 体 生 存 观 念 的 重 大 变 革 可 持 续 农 业 是 可 持 续 发 展 理 念 的 最 重 要 体 现 与 实 践, 同 样, 可 持 续 植 保 作 为 可 持 续 农 业 的 重 要 环 节 也 充 分 体 现 了 可 持 续 的 发 展 理 念 可 持 续 性 发 展 理 念 强 调 代 际 平 等, 既 维 护 当 代 人 的 利 益, 又 不 对 下 一 代 人 的 切 身 利 益 造 成 伤 害, 同 时 将 经 济 的 可 持 续 发 展 寓 于 生 态 系 统 的 可 持 续 性 发 展 之 中 可 持 续 植 保 的 主 旨 是 最 大 限 度 地 发 挥 自 然 种 群 之 间 的 生 态 关 系, 综 合 运 用 多 种 控 制 手 段, 因 时 因 地 制 宜 经 济 安 全 有 效 地 将 有 害 生 物 控 制 在 值 之 下, 从 而 达 到 经 济 效 益 社 会 效 益 与 生 态 效 益 的 兼 顾 与 平 衡, 环 境 质 量 生 态 稳 固 性 动 植 物 生 产 力 以 及 社 会 经 济 的 协 调 性 可 行 性, 三 者 缺 一 不 可, 在 动 态 变 化 中 求 得 平 衡 可 见, 可 持 续 植 保 充 分 体 现 了 现 代 社 会 的 可 持 续 发 展 理 念, 研 究 和 探 讨 可 持 续 植 物 保 护 的 哲 学 底 蕴, 有 助 于 深 刻 理 解 自 然 与 人 文 的 共 通 性 以 下 从 四 个 方 面 阐 述 之 : 1 辩 证 思 维 辩 证 思 维 是 可 持 续 植 物 保 护 理 念 的 基 本 内 核 农 业 生 态 系 统 是 一 个 开 放 系 统, 生 态 系 中 的 各 个 组 份 之 间 既 相 互 依 存 又 相 互 抑 制, 是 一 种 动 态 平 衡 关 系 同 样, 植 物 与 植 食 性 昆 虫 ( 所 谓 害 虫 ) 也 是 一 种 对 立 统 一 关 系 一 定 数 量 的 植 食 性 昆 虫 不 仅 不 会 对 植 物 造 成 危 害, 而 且 有 益 于 植 物 种 群 的 健 康 发 展 例 如, 少 量 的 螟 虫 能 帮 助 水 稻 去 除 无 效 分 蘖 而 且 植 收 稿 日 期 : 作 者 简 介 : 李 芳 (1963-), 女, 汉, 从 事 植 物 保 护 农 药 学, 副 教 授 物 本 身 也 有 一 定 的 自 动 补 偿 调 节 机 制, 能 自 动 弥 补 少 量 害 虫 造 成 的 损 失 害 虫 之 所 以 为 害, 在 数 量 上 过 分 膨 胀 造 成 的, 量 变 导 致 了 质 变, 害 益 之 间 是 相 对 的 动 态 的, 从 量 变 可 导 致 质 变 度 的 概 念, 即 经 济 阀 值 可 持 续 植 物 保 护 理 念 认 为, 只 有 当 害 虫 数 量 增 大 到 一 定 程 度, 由 它 导 致 的 经 济 损 失 大 于 我 们 防 治 所 付 出 的 成 本 时, 防 治 才 有 实 际 意 义, 如 果 不 管 害 虫 数 量 多 少, 沿 袭 过 去 打 保 险 药 的 思 维 与 方 法, 不 仅 在 经 济 上 得 不 偿 失, 而 且 干 预 和 破 坏 了 自 然 界 的 动 态 平 衡, 导 致 害 虫 抗 药 性 的 产 生 在 农 业 生 态 系 中, 仅 有 5% 左 右 的 植 食 性 昆 虫 能 对 植 物 造 成 明 显 伤 害,95% 的 昆 虫 是 因 为 它 们 受 到 多 种 天 敌 的 抑 制, 而 天 敌 又 有 天 敌 来 制 约, 由 此 环 环 相 扣, 形 成 生 态 系 的 自 动 调 控 机 制 不 能 造 成 虫 灾 可 持 续 植 物 保 护 理 念 要 求 要 充 分 认 识 到 天 敌 对 害 虫 的 控 制 作 用, 并 充 分 保 护 和 助 长 这 种 控 制 作 用 但 同 时, 这 种 对 立 关 系 也 不 能 过 分 夸 大, 以 为 释 放 某 种 天 敌 就 能 一 劳 永 逸 地 控 制 害 虫 的 想 法 是 低 估 了 自 然 界 的 复 杂 性 以 及 害 虫 与 其 天 敌 的 统 一 性 社 会 系 统 内 部 各 个 组 份 之 间 也 存 在 着 相 互 依 存 与 相 互 制 约 关 系, 每 个 行 为 主 体 都 处 在 以 其 中 心 的 交 互 作 用 所 限 定 的 生 态 位 中, 并 且 每 个 行 为 主 体 的 存 在 和 发 展 都 依 赖 由 其 它 行 为 主 体 构 成 的 环 境, 而 环 境 的 变 化 又 使 每 个 行 为 主 体 所 处 的 生 态 位 发 生 变 化 [1] 因 此, 我 们 在 研 究 和 考 察 社 会 系 统 及 其 构 成 元 素 时, 也 应 该 从 生 态 系 统 结 构 而 不 是 以 机 械 结 构 的 观 点 和 角 度 思 考 问 题, 生 态 系 统 结 构 的 每 个 单 元 间 有 着 微 妙 复 杂 的 非 线 性 关 系, 现 实 社 会 各 种 事 物 与 力 量 非 线 性 相 互 作 用, 使 世 界 充 满 了 非 确 定 性 复 杂 性 和 相 互 依 赖 性 随 着 科 技 的 发 展 与 全 球 化 进 程 的 推 进, 非 线 性 作 用 日 益 显 著, 生 态 和 系 统 理 念 也 就 更 加 深 入 人 心, 现 代 企 业 管 理 已 把 生 态 系 统 理

49 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 49 念 引 入 管 理 思 维 中, 使 企 业 管 理 更 具 有 人 性 化 当 今 社 会, 生 态 理 念 已 成 为 自 然 与 人 文 共 有 的 理 念 2 多 样 性 生 物 多 样 性 是 指 生 物 和 其 组 成 的 系 统 总 体 的 多 样 性 与 变 异 性 生 态 系 统 的 稳 定 性 直 接 依 赖 于 系 统 结 构 的 复 杂 度 以 及 系 统 内 物 种 的 多 样 性, 即 生 态 系 统 结 构 的 复 杂 度 以 及 系 统 内 物 种 的 多 样 性 导 致 了 系 统 的 稳 定 性, 多 样 性 愈 高, 稳 定 性 越 大 主 要 机 理 在 于 多 样 性 高 的 生 态 系 统 其 能 量 与 信 息 传 递 形 式 也 是 多 种 多 样 的, 不 会 因 个 别 路 径 受 阻 而 影 响 系 统 内 循 环, 另 外 多 样 性 的 物 种 之 间 相 互 依 存 相 互 制 约, 形 成 了 一 种 缓 冲 和 调 节 的 兼 容 机 制 多 样 性 使 系 统 产 生 较 强 的 自 净 和 抗 干 扰 能 力, 同 时 系 统 的 生 产 力 也 随 之 提 高 农 业 生 态 系 往 往 十 分 脆 弱, 其 主 要 原 因 是 过 度 单 化 以 及 长 期 使 用 农 药 化 肥, 使 得 系 统 多 样 性 大 大 降 低, 导 致 某 种 病 虫 大 流 行 或 暴 发 可 持 续 植 物 保 护 的 主 旨 就 是 尽 量 保 护 和 增 加 系 统 的 多 样 性, 进 而 达 到 无 为 而 治 的 效 果 如 尽 量 少 用 高 毒 广 谱 杀 伤 性 农 药, 保 护 非 靶 标 昆 虫, 或 者 有 意 识 引 入 其 它 物 种, 加 链 抑 害 插 种 关 联 作 物, 组 建 新 的 农 田 食 物 链 结 构, 能 有 效 地 控 制 病 虫 发 生 如 麦 田 或 棉 田 间 种 油 菜 招 引 食 蚜 蝇 能 控 制 麦 蚜 或 棉 蚜 为 害 Raheja 发 现, 高 粱 与 鹰 嘴 豆 隔 行 交 替 种 植 时, 高 粱 穗 蝇 发 生 率 大 大 降 低 ; 在 甘 蔗 或 玉 米 地 插 种 向 日 葵 或 南 瓜, 为 赤 眼 蜂 提 供 食 料, 能 明 显 提 高 赤 眼 蜂 对 蔗 螟 玉 米 螟 的 控 制 效 能 适 当 的 混 作 间 作 不 仅 有 利 于 害 虫 的 控 制, 而 且 对 病 害 的 抑 制 也 有 明 显 效 能, 如 糯 稻 与 粳 稻 间 种 能 明 显 控 制 稻 瘟 病 流 行 ; 当 棉 花 与 乌 头 叶 芽 豆 间 套 作 时, 棉 花 枯 萎 病 显 著 减 少 ; 高 梁 与 木 豆 间 套 时, 木 豆 枯 萎 病 的 发 病 率 降 低 55%, 稳 定 在 2-3% [2-4] 类 似 的 例 子 不 胜 枚 举, 这 充 分 说 明 了 多 样 性 对 维 持 系 统 平 衡 的 重 要 性 对 一 个 农 业 生 态 而 言, 基 因 的 异 质 互 作 有 利 于 提 高 系 统 的 抗 病 抗 虫 能 力 和 生 产 力 对 社 会 系 统 而 言, 多 极 化 趋 势 有 利 于 社 会 稳 定 世 界 稳 定, 对 一 个 团 体 而 言, 异 质 互 作 / 学 术 争 鸣 有 助 于 启 迪 思 维, 促 进 观 念 更 新 当 今 社 会, 科 学 创 新 的 生 长 点 往 往 在 学 科 交 叉 处, 而 具 有 创 新 能 力 的 科 学 家 往 往 都 具 备 交 叉 的 学 术 背 景 据 统 计, 诺 贝 尔 获 得 者 中 具 有 交 叉 知 识 背 景 的 人 数 比 例 呈 稳 步 上 升 趋 势 广 博 而 交 叉 的 学 科 知 识 背 景 以 及 多 元 化 的 文 化 教 育 是 孕 育 原 创 性 成 果 的 重 要 条 件 因 此, 一 个 健 全 的 社 会 系 统 必 须 具 备 多 样 性 与 兼 容 性, 并 注 重 异 质 文 化 的 互 作 与 交 流 海 纳 百 川, 有 容 乃 大 相 反, 一 个 表 面 上 高 度 统 一 的 系 统 往 往 是 贫 乏 而 脆 弱 的, 高 度 的 趋 同 往 往 是 缺 乏 创 造 力 和 生 产 力 的 外 在 表 现 因 此, 多 样 性 不 仅 既 是 自 然 生 态 系 统, 也 是 社 会 系 统 是 否 可 持 续 发 展 的 重 要 标 志 3 选 择 压 力 与 反 进 化 在 农 业 生 态 系 统 中, 发 生 最 多 也 是 难 治 理 的 高 繁 殖 生 存 对 策 的 害 虫, 如 红 蜘 蛛 小 菜 蛾 蚜 虫, 高 繁 殖 率 害 虫 以 其 强 大 的 繁 殖 效 能 与 变 异 性, 很 容 易 产 生 抗 药 性 来 抵 御 来 自 杀 伤 性 农 药 的 威 胁 另 一 方 面, 长 期 大 量 使 用 杀 伤 性 农 药 也 使 天 敌 的 作 用 大 为 减 弱, 事 实 上 也 助 长 了 高 繁 殖 生 存 对 策 的 害 虫 的 危 害 由 于 害 虫 天 敌 繁 殖 率 较 低, 个 体 寿 命 较 长, 在 面 对 杀 伤 性 农 药 这 一 强 大 选 择 因 素 时, 显 得 不 如 R 对 策 害 虫 那 样 具 有 灵 活 性, 因 而 处 于 相 对 劣 势 这 就 是 人 为 的 汰 选 机 制 导 致 物 种 的 反 进 化 现 象 目 前, 农 业 害 虫 的 抗 药 性 已 成 为 一 种 普 遍 现 象, 蚜 虫 小 菜 蛾 对 有 机 磷 农 药 的 抗 药 性 更 是 直 线 上 升 面 对 抗 药 性 害 虫 群 体, 农 民 往 往 不 得 不 加 大 用 药 量 与 用 药 浓 度, 从 而 造 成 恶 性 循 环, 因 此 单 一 依 赖 化 学 防 治 是 没 有 出 路 的, 也 是 与 可 持 续 发 展 原 则 相 背 离 的 抗 药 性 治 理 的 基 本 原 则 是 多 管 齐 下, 综 合 治 理, 避 免 单 一 用 药, 减 少 害 虫 的 人 为 选 择 压 力 另 一 方 面, 在 实 施 抗 病 抗 虫 育 种 时 也 要 减 少 选 择 压 力, 尽 量 采 用 复 合 抗 性 中 抗 耐 害 品 种, 在 推 广 抗 性 品 种 时, 还 要 在 附 近 保 留 一 些 感 性 品 种, 让 害 虫 的 敏 感 性 基 因 有 个 出 口, 只 有 这 样, 才 能 延 长 抗 虫 抗 病 作 物 的 使 用 寿 命 单 一 的 高 抗 品 种 有 时 在 试 验 田 就 可 使 害 虫 产 生 适 应 性 抗 性, 失 去 推 广 价 值 因 此, 单 一 强 烈 的 人 为 选 择 机 制 往 往 是 脆 弱 的, 生 物 一 旦 突 破 这 种 桎 梏, 就 会 变 本 加 利 地 扩 张 繁 殖 联 系 到 社 会 系 统, 汰 选 机 制 很 大 程 度 上 决 定 人 们 的 行 为 模 式 即 所 谓 楚 王 好 细 腰, 宫 中 多 饿 死 教 育 界 过 重 的 分 数 导 向 是 形 成 应 试 教 育 的 主 要 成 因 ; 过 重 的 论 文 与 功 利 导 向 是 科 技 界 浮 躁 的 主 要 原 因 ; 在 选 拔 官 员 的 过 程 中, 向 上 负 责 的 机 制 是 导 致 大 量 关 系 干 部 产 生 的 原 因 虽 然, 社 会 系 统 与 生 态 系 统 有 本 质 的 不 同, 但 有 一 点 是 相 通 的, 他 们 都 有 进 化 现 象, 即 系 统 内 部 有 规 律 的 分 化 组 合 与 优 胜 劣 汰, 对 自 然 系 统 强 加 单 一 的 人 为 汰 选 因 素, 就 会 使 物 种 出 现 反 进 化 以 一 个 社 会 系 统 而 言, 偏 颇 单 一 的 汰 选 机 制 或 利 益 导 向, 也 会 产 生 人 才 的 优 汰 劣 胜 现 象 因 此, 我 们 必 须 重 视 系 统 内 部 的 自 然 调 节 机 制, 人 为 的 选 择 机 制 也 必 须 更 加 多 元 化, 更 适 合 系 统 的 运 行 规 律, 否 则 只 会 适 得 其 反, 出 现 拨 苗 助 长 或 优 汰 劣 胜 现 象 4 螺 旋 与 逻 辑 斯 蒂 螺 旋 这 一 奇 妙 的 空 间 构 型 与 人 类 息 息 相 关, 从 微 观 的 DNA 与 生 命 分 子 空 间 构 型 到 宏 观 的 人 类 历 史 发 展 进 程 都 与 螺 旋 结 构 有 很 大 的 对 应 性 可 持 续 植 物 保 护 理 念 的 形 成 与 发 展 也 是 一 种 螺 旋 式 上 升 过 程 早 期 人 类 的 天 人 合 一 既 包 含 对 自 然 与 人 的 整 体 性 认 识, 也 体 现 了 人 类 对 大 自 然 的 无 知 与 无 奈, 天 不 仅 指 自 然 而 且 指 主 宰 自 然 的 神 灵 因 此, 天 人 合 一 在 很 大 程 度 上 是 人 类 对 自 然 敬 畏 无 知 的 一 种 被 动 选 择, 对 害 虫 也 只 有 采 取 忍 让, 对 付 害 虫 主 要 以 农 业 防 治 为 主, 辅 以 植 物 农 药 与 无 机 农 药, 一 遇 蝗 灾 来 临, 人 们 只 能 祈 求 神 灵 的 佑 护 有 机 合 成 农 药 问 世 并 用 于 害 虫 防 治 以 来, 植 物 保 护 的 观 念 也 随 之 发 生 了 根 本 转 变, 有 机 合 成 农 药 ( 有 机 物 ) 高 效 的 杀 伤 力 让 人 产 生 一 种 错 觉, 以 为 消 灭 害 虫 为 时 不 远, 只 要 按 时 打 药, 害 虫 问 题 就 可 以 迎 刃 而 解 ( 下 转 5 页 )

50 5 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 香 蕉 病 毒 病 及 其 检 测 技 术 研 究 进 展 周 莉 娟 ( 福 建 省 农 科 院 生 物 技 术 中 心, 福 州 353) 香 蕉 是 世 界 四 大 名 果 之 一, 是 最 重 要 的 热 带 水 果, 栽 培 香 蕉 轻 花 叶 病 毒 (Banana mild mosaic virus, BMMV) 面 积 仅 次 于 葡 萄 柑 桔 位 居 第 三 近 几 年, 随 着 人 们 食 物 等 前 四 种 病 毒 病 对 香 蕉 生 产 威 胁 较 大, 在 亚 州 和 太 平 洋 蕉 结 构 的 变 化, 香 蕉 在 热 带 亚 热 带 的 种 植 面 积 不 断 扩 大, 产 区 都 有 发 生 量 逐 年 提 高 香 蕉 原 产 亚 州 东 南 部, 现 主 要 分 布 于 南 北 两 半 这 些 病 毒 病 通 常 通 过 采 用 无 病 毒 苗 消 除 病 毒 来 源 和 防 球 热 带 南 亚 热 带 的 地 区 我 国 香 蕉 主 要 分 布 在 台 湾 广 东 止 传 病 昆 虫 的 次 生 传 播 等 措 施 来 综 合 控 制 其 中 应 用 组 织 培 广 西 海 南 福 建 和 云 南 等 省 区 作 为 福 建 省 六 大 名 果 之 一, 养 技 术 代 替 传 统 的 吸 芽 繁 殖 方 法, 具 繁 殖 指 数 高 生 长 整 齐 香 蕉 的 产 量 仅 次 于 柑 桔, 列 第 二 位 ; 其 中, 以 漳 州 市 栽 培 面 一 致 有 利 工 厂 化 生 产 等 优 点, 并 且 与 传 统 的 吸 芽 苗 相 比 产 积 最 大, 所 产 香 蕉 品 质 最 佳, 如 天 宝 香 蕉 以 其 皮 薄 味 香 量 可 成 倍 增 加, 香 蕉 试 管 苗 的 工 厂 化 生 产 及 其 应 用, 使 香 蕉 质 甜 肉 软 无 芯 等 特 色, 闻 名 于 海 内 外 但 长 期 以 来, 福 生 产 发 生 了 革 命 性 变 化, 已 成 为 农 村 新 兴 的 产 业, 显 示 出 很 建 省 乃 至 我 国 香 蕉 出 口 都 极 少, 除 台 风 冻 害 等 自 然 灾 害 频 大 的 经 济 和 社 会 效 益 ( 朱 靖 杰, 1995; 1997; 田 郎, 1997) 然 而 繁, 栽 培 技 术 落 后, 采 后 处 理 包 装 贮 运 及 销 售 渠 道 滞 后 由 于 香 蕉 不 同 品 种 的 感 病 性 不 同, 或 者 个 别 脱 毒 不 彻 底, 或 这 些 原 因 外, 另 一 个 非 常 重 要 的 制 约 因 素 就 是 病 害 对 香 蕉 产 者 漏 检 未 查 出 带 毒 外 植 体, 即 使 进 行 了 脱 病 毒 处 理, 也 只 可 量 品 质 及 经 济 效 益 的 影 响 ( 陈 廷 速, 22) 能 是 部 分 植 株 除 去 了 某 种 病 毒, 而 相 当 部 分 植 株 仍 带 有 病 毒 病 毒 病 是 影 响 世 界 香 蕉 生 产 的 重 要 因 素 之 一, 侵 染 香 蕉 的 病 ( 贺 竹 梅,1997), 尤 其 是 香 蕉 花 叶 病 病 原 可 随 试 管 苗 更 快 毒 主 要 有 香 蕉 束 顶 病 毒 (Banana bunchy top virus, BBTV) 黄 速 地 扩 大 传 染, 常 常 给 生 产 带 来 惨 重 损 失, 成 为 香 蕉 试 管 苗 瓜 花 叶 病 毒 (Cucumber mosaic virus, CMV) 香 蕉 条 纹 病 毒 生 产 的 一 大 隐 患 ( 朱 西 儒,1994) 为 此, 采 用 快 速 灵 敏 (Banana streak virus, BSV) 香 蕉 苞 片 嵌 纹 病 毒 (Banana bract 准 确 的 检 测 方 法 对 香 蕉 组 培 苗 进 行 病 毒 检 测, 对 防 止 香 蕉 病 mosaic virus, BBrMV) 害 的 发 生 和 流 行 具 有 重 大 意 义 下 面 就 香 蕉 主 要 病 毒 病 害 及 收 稿 日 期 : 其 检 测 技 术 进 行 扼 要 综 述 作 者 简 介 : 周 莉 娟 (1972-), 女, 福 建 农 林 大 学 博 士 研 究 生, 1 香 蕉 束 顶 病 助 理 研 究 员 香 蕉 束 顶 病 是 香 蕉 生 产 中 最 为 严 重 的 一 种 病 毒 病,1889 ============================================================================================= ( 上 接 49 页 ) 随 着 时 间 的 推 移, 滥 用 农 药 所 带 的 三 R 效 化, 树 立 人 类 与 科 技 发 展 有 限 性 的 基 本 观 点, 科 技 发 展 与 物 应 以 及 一 系 列 的 环 境 问 题 迫 使 人 们 重 新 审 视 以 往 的 植 物 保 种 的 发 展 都 是 适 宜 有 限 的, 这 种 适 宜 有 限 的 发 展 就 是 促 护 策 略 今 天 提 倡 的 天 人 合 一 与 可 持 续 发 展 是 一 种 能 动 进 大 自 然 平 衡 的 人 类 生 存 方 式 和 可 持 续 性 发 展 模 式 自 主 的 认 识, 也 是 人 类 从 占 有 性 片 面 性 的 生 存 观 上 升 到 注 5 小 结 重 生 存 意 义 与 生 命 质 量, 强 调 人 社 会 自 然 的 全 面 协 调, 可 持 续 植 物 保 护 理 念 蕴 含 着 丰 富 的 哲 学 理 念, 说 明 了 自 这 种 自 我 反 思 与 协 调 机 制 与 早 期 天 人 合 一 相 比, 似 乎 又 然 与 人 文 的 深 层 共 性 显 然, 可 持 续 植 物 保 护 理 念 所 蕴 含 的 回 到 了 起 点, 同 时 又 高 于 起 点, 是 一 种 螺 旋 式 上 升 螺 旋 式 辩 证 思 维 与 生 态 理 念 对 人 文 及 社 会 的 研 究 和 管 理 有 重 要 借 发 展 同 时 也 是 一 种 有 限 性 与 非 线 性 上 升 路 径, 就 象 逻 辑 斯 蒂 鉴 意 义 ; 同 理 人 文 学 科 的 人 本 思 维 与 发 散 性 思 维 也 有 助 于 拓 模 型 : 一 个 种 群 发 展 有 一 定 的 环 境 阈 值, 种 群 在 初 期 缓 慢 生 展 与 深 化 植 物 保 护 研 究 和 发 展 总 之, 自 然 科 学 与 人 文 科 学 长, 在 最 适 环 境 中 是 一 种 近 乎 直 线 的 上 升, 到 一 定 程 度, 就 彼 此 想 通 相 互 启 迪 互 动 发 展, 对 于 困 扰 人 类 的 普 遍 问 题 会 因 环 境 制 约 作 用 稳 定 在 一 定 范 围 内, 这 是 物 种 发 展 的 有 限 如 环 境 污 染 生 态 危 机 等, 也 只 能 采 用 自 然 与 人 文 综 合 科 学 性 与 适 当 性 任 何 物 种 如 果 失 去 制 约, 过 度 繁 殖, 那 么 它 带 与 社 会 的 方 式 来 加 以 研 究 和 解 决 来 的 只 能 是 一 种 灾 难 参 考 文 献 同 样, 人 类 也 应 尊 重 螺 旋 发 展 与 逻 辑 斯 蒂, 人 1 杨 冠 球, 非 线 性 心 智 模 式 : 不 确 定 时 代 管 理 炼 金 术 的 根 基, 经 济 管 理.23.1 口 过 度 膨 胀 以 及 人 类 对 经 济 利 益 的 过 度 追 求 同 样 也 会 造 成 2 逢 焕 成, 赵 跃 龙, 国 外 间 混 套 作 的 研 究 进 展, 世 界 农 业,1994(1) 灾 难 应 充 分 认 识 到 人 类 终 极 实 在 的 有 限 性 这 是 苏 格 拉 底 式 的 智 慧, 是 对 人 生 的 一 种 顿 悟 [5] 随 着 现 代 科 学 技 术 的 发 3 曹 克 强, 曾 士 近, 品 种 混 合 种 植 栽 培 抗 病 保 产 作 用, 植 物 保 护,199 展 人 类 渐 渐 失 去 了 这 种 智 慧, 转 而 追 求 经 济 财 富 与 物 质 享 16(2) 龚 杨, 张 志 勇, 水 稻 品 种 混 植 栽 培 抗 病 增 产 机 理 的 研 究, 核 农 学 通 受 的 无 限 性, 从 而 在 生 态 危 机 中 愈 陷 愈 深, 因 此, 科 学 技 术 报, (6) 的 发 展 理 念 必 须 从 传 统 的 征 服 自 然 转 变 为 人 与 自 然 协 调 进 5 卢 风, 论 苏 格 拉 底 的 智 慧, 自 然 辩 证 法 研 究,23 19(1)1-5

51 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 51 年 斐 济 首 次 报 道 了 香 蕉 束 顶 病,19 年 在 台 湾 蕉 园 中 也 有 发 现 (Sun, 1961), 自 此 束 顶 病 成 为 香 蕉 普 遍 发 生 的 毁 灭 性 病 害, 曾 经 多 次 爆 发 (Dale, 1987; 周 仲 驹, 1993), 在 亚 洲 和 南 太 平 洋 地 区 的 香 蕉 产 区 均 有 发 生 (Xie, 1995), 发 病 率 可 达 2-3%, 甚 至 7~8%( 肖 火 根, 1999) 香 蕉 束 顶 病 在 香 蕉 各 生 长 期 均 可 感 染 发 病, 症 状 随 不 同 香 蕉 品 种 及 同 一 品 种 不 同 发 病 阶 段 而 有 所 变 化 感 病 植 株 主 要 表 现 为 : 新 抽 叶 片 的 支 脉 中 脉 及 茎 脉 上 首 先 出 现 深 绿 色 点 线 状 的 青 筋, 其 后 病 叶 褪 绿 黄 化 皱 缩, 叶 质 脆 硬, 叶 片 直 立 呈 束 状, 最 后 病 株 枯 死 ; 成 株 感 染 后 不 能 孕 穗 现 蕾 ; 若 孕 穗 后 期 感 病, 则 停 止 抽 穗 ; 若 在 初 穗 期 患 病, 则 蕉 穗 生 长 停 滞, 穗 轴 不 能 下 弯 ; 病 株 根 系 生 长 不 良, 时 有 烂 根 香 蕉 束 顶 病 的 病 原 已 被 证 实 为 等 轴 二 十 面 体 球 状 病 毒 ( BBTV )( Iskra, 1989;Wu,199I;Thomas,1991;Harding, 1991), 由 香 蕉 交 脉 蚜 (Pentalonia nigronervosa) 以 持 久 性 方 式 传 播 (Magee,C.J.P.,194; 周 仲 驹,1995) 澳 大 利 亚 美 国 和 中 国 等 国 家 和 地 区 对 BBTV 的 DNA 进 行 克 隆 及 序 列 分 析, 结 果 表 明, 病 毒 基 因 组 至 少 含 6 个 为 kb 的 单 链 环 状 DNA 组 分 (Xie 等,1995;Burns,1995;Wanitchakorn,1997; 肖 火 根,1999; 何 自 福,2I;2II; 腊 平,2) 由 于 BBTV 只 侵 染 香 蕉 植 物 的 韧 皮 部, 病 毒 含 量 极 低 (Xie 等, 1995), 故 建 立 灵 敏 度 高 的 检 测 技 术 显 得 十 分 重 要 迄 今 已 用 过 DAS ELISA 免 疫 吸 附 电 镜 (Immunosorbent electron microscopy,isem) 同 位 素 标 记 和 非 同 位 素 标 记 的 Dot blot 和 Sounthern blot 以 及 PCR 等 技 术 进 行 检 测 199 年 台 湾 大 学 植 物 病 理 学 系 研 究 人 员 克 服 了 香 蕉 组 织 中 酚 类 物 质 的 干 扰, 率 先 纯 化 得 到 香 蕉 束 顶 病 毒 (Wu 等, 199Ⅰ), 并 制 备 出 了 高 效 的 单 克 隆 抗 体 McAb(Wu,199 Ⅱ) 用 于 实 际 检 测, 此 后, 澳 大 利 亚 (Thomas, 1991) 和 中 国 ( 张 海 保, 1994; 孙 茂 林, 1993) 也 相 继 制 备 BBTV 多 克 隆 抗 血 清, 并 成 功 地 用 于 BBTV 实 际 检 测 Thomas(1991) 将 制 备 的 多 克 隆 抗 体 作 为 包 被 抗 体 和 酶 结 合 物, 借 助 双 抗 夹 心 酶 联 免 疫 吸 附 检 测 (DAS-ELISA) 检 测 病 株, 均 呈 阳 性 反 应 ; 而 不 与 感 染 CMV 的 病 株 发 生 反 应, 并 证 明 病 蕉 叶 片 中 脉 组 织 中 的 病 毒 含 量 高 于 叶 片 的 叶 肉 当 用 多 克 隆 抗 体 或 抗 台 湾 分 离 物 的 McAb(2H6,3D12) 分 别 作 为 包 被 抗 体 和 酶 结 合 物, 或 是 两 种 包 被 抗 体 和 酶 结 合 物 交 叉 使 用, 所 检 测 的 病 株 都 为 阳 性 反 应, 健 株 都 呈 阴 性 反 应 将 McAb2H6 3D12 应 用 于 ISEM 中 来 检 测 部 分 纯 化 的 病 毒 制 剂, 见 到 大 量 的 BBTV 粒 体 ; 用 多 克 隆 抗 体 作 包 被 抗 体,McAb3D12 作 为 酶 结 合 物 时, 用 DAS-ELISA 检 测 到 病 株 汁 液 的 稀 释 度 达 1:128 Harding 等 (1991) 首 次 将 得 到 的 克 隆 pbt338 用 32 P 标 记, 制 备 成 探 针, 应 用 Dot blot 杂 交 法 来 检 测 BBTV 从 病 蕉 中 得 到 的 病 毒 提 取 物 核 酸 提 取 物 以 及 纯 化 的 病 毒 核 酸, 均 与 这 一 探 针 发 生 特 异 性 很 强 的 杂 交 反 应, 而 不 与 从 健 株 中 提 取 的 核 酸 以 及 受 CMV 侵 染 的 香 蕉 植 株 中 提 取 的 核 酸 发 生 杂 交 反 应 自 1993 年 开 始, 澳 大 利 亚 夏 夷 威 中 国 等 国 家 的 研 究 者 先 后 对 不 同 来 源 BBTV 基 因 组 6 个 组 分 进 行 克 隆 和 序 列 分 析 (Harding, 1993; Xie, 1995; 肖 火 根, 1999), 在 研 究 各 基 因 功 能 的 同 时, 根 据 这 些 序 列 设 计 的 特 异 性 引 物 也 被 用 于 PCR 检 测 Xie(1995) 和 Hu(1993) 比 较 了 ELISA Dot blot 杂 交 法 以 及 PCR 法 检 测 BBTV 的 灵 敏 度 和 适 用 性 结 果 表 明 : 当 包 被 抗 体 和 酶 标 记 的 抗 体 均 为 来 自 台 湾 的 McAb2H6, 而 测 定 样 品 均 为 病 叶 中 脉 时, 如 用 DAS-ELISA 法 捡 测, 则 病 株 汁 液 的 稀 释 度 可 达 到 1:25, 相 当 于.4mg 蕉 叶 组 织 中 的 病 毒 含 量 ; 当 DNA 探 针 用 地 高 辛 (Digoxigenin,DIG) 标 记, 测 定 样 品 同 样 为 叶 片 中 脉 时, 如 用 Sounthern blot 以 及 Dot blot 法, 检 测 的 灵 敏 度 均 达 到.4mg; 但 探 针 DNA 用 32 P dctp 标 记 时, 用 同 样 方 法 捡 测 相 同 样 品, 灵 敏 度 可 达 到.8mg; 用 PCR 法 检 测 时, 病 株 汁 液 释 稀 度 可 达 到 1:1 4, 相 当 于 8ng 蕉 叶 的 中 脉 组 织 中 的 病 毒 含 量 上 述 几 种 方 法 相 比,PCR 法 的 检 测 灵 敏 度 至 少 提 高 了 1 倍 从 单 个 带 毒 蚜 虫 体 内 提 取 BBTV DNA, 并 以 其 作 为 模 板 进 行 PCR 扩 增. 就 可 获 得 病 毒 基 因 组 特 异 性 的 扩 增 产 物, 而 用 健 蚜 的 DNA 提 取 物 为 对 照 则 得 不 到 相 应 的 产 物 (Hu, 1996) 上 述 三 种 方 法 比 较 结 果 表 明, 在 BBTV 的 捡 测 中, 具 血 清 学 特 异 性 的 ELISA 法 以 及 非 同 位 素 标 记 的 核 酸 探 针 杂 交 捡 测 法 是 经 济 适 用 的 ; 而 用 同 位 素 标 记 的 核 酸 探 针 杂 交 法 特 别 是 PCR 法 则 可 大 大 提 高 捡 测 的 灵 敏 度 为 了 简 化 检 测 程 序, Thomson(1995) 将 少 量 的 香 蕉 组 织 加 入 含 有 1 mm Tris-HCl, ph 7.4 或 8.4, 1 M KCl and 1 mm EDTA 的 提 取 缓 冲 液 中, 并 在 95 条 件 下 水 浴 1 分 钟 后, 上 清 液 直 接 用 于 PCR 扩 增, 结 果 证 明 这 种 方 法 大 大 简 化 了 模 板 制 备 的 复 杂 程 序, 而 且 还 适 用 于 检 测 RNA 病 毒 1998 年 台 湾 大 学 Su 等 按 照 BBTV 台 湾 分 离 物 的 核 酸 序 列 设 计 出 3 种 引 物 C1-CR S-CR SR-CR, 对 采 集 自 台 湾 其 它 亚 州 和 太 平 洋 国 家 的 BBTV 样 品 进 行 PCR 检 测, 根 据 PCR 扩 增 结 果 他 们 认 为 用 这 三 对 引 物 可 用 于 区 分 台 湾 其 它 亚 洲 和 太 平 洋 国 家 BBTV 的 不 同 株 系 此 后, 周 莉 娟 等 (21) 用 这 三 对 引 物 对 来 自 福 建 漳 州 的 BBTV 病 株 样 品 进 行 了 检 测, 结 果 认 为 福 建 的 病 毒 株 系 与 广 东 台 湾 越 南 泰 国 菲 律 宾 等 亚 洲 国 家 和 地 区 一 样, 都 属 于 亚 洲 亚 组 中 的 一 种 以 上 结 果 均 说 明 PCR 法 不 仅 可 用 于 灵 敏 地 检 测 到 病 毒, 而 且 还 可 用 于 区 分 病 毒 株 系 2 香 蕉 花 叶 心 腐 病 香 蕉 花 叶 心 腐 病 的 由 黄 瓜 花 叶 病 毒 (CMV) 引 起, 首 次 于 1929 年 在 澳 大 利 亚 新 南 威 尔 士 州 报 道 (Gowen, 1995), 1957 年 在 中 美 洲 报 道, 台 湾 于 1974 年 由 于 组 培 苗 的 大 量 推 广 造 成 心 腐 病 的 大 暴 发, 并 由 此 引 起 人 们 的 重 视 (Su, 1998) 在 我 国 1974 年 首 次 发 现 此 病 以 后 在 广 州 市 郊 及 附 近 县 市 迅 速 蔓 延, 严 重 的 地 区, 发 病 率 高 达 6%, 现 已 成 为 我 国 南 方 香 蕉 生 产 上 的 一 个 重 要 的 检 疫 性 病 毒 病 害 ( 冯 岩,

52 52 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 1999) 花 叶 病 在 叶 片 上 的 典 型 症 状 是 引 起 断 断 续 续 或 长 或 短 的 褪 绿 黄 色 条 纹 和 梭 状 圈 斑, 分 布 整 片 叶 上, 或 局 部 叶 片 上, 随 着 叶 片 逐 渐 老 熟, 条 纹 逐 渐 变 为 黄 褐 色 至 紫 黑 色, 最 后 可 发 展 成 为 坏 死 条 纹 香 蕉 早 期 感 染, 植 株 矮 缩, 甚 至 死 亡 ; 成 株 期 感 染 后 生 长 较 弱, 不 能 抽 蕾 种 植 香 蕉 组 培 苗 是 控 制 此 病 的 措 施 之 一, 但 在 生 产 组 培 苗 时, 若 脱 毒 不 彻 底, 又 未 经 过 严 格 检 疫, 其 病 原 就 可 能 随 组 培 苗 以 更 快 的 速 度 传 播, 使 带 毒 组 培 苗 成 为 传 播 香 蕉 花 叶 心 腐 病 一 个 重 要 的 初 侵 染 来 源 ( 肖 火 根, 1995; 朱 西 儒, 1999; 林 纬, 2), 因 此 对 香 蕉 脱 毒 组 培 苗 进 行 严 格 检 疫 显 得 至 关 重 要 对 CMV 的 检 测 以 血 清 学 方 法 研 究 最 多, 应 用 得 也 较 广, 由 于 CMV 存 在 很 多 株 系, 即 使 在 同 一 作 物 上 也 有 许 多 不 同 的 株 系, 而 植 物 病 毒 株 系 间 的 差 异, 部 份 反 映 在 病 毒 外 壳 蛋 白 (CP) 上, 所 以 早 在 1983 年 Edwards 等 用 不 同 病 株 间 血 清 关 系, 结 合 寄 主 范 围 CP 的 多 肽 链 图 谱 和 核 酸 杂 交 方 法 将 CMV 分 成 亚 组 I(CMV-C) 和 亚 组 II(CMV-WL)(Hu, 1995) 这 两 个 亚 组 的 不 种 血 清 型 DTL 和 ToRS 制 备 的 抗 血 清, 不 仅 可 以 用 来 检 测 CMV, 还 可 用 于 区 分 CMV 的 不 同 亚 组 根 据 形 态 和 生 物 学 特 征 的 分 析 结 果, 李 华 平 (1996) 等 将 将 广 州 侵 染 香 蕉 的 CMV 分 为 斑 驳 类 (MM) 断 续 条 纹 类 (BS) 和 连 续 条 纹 类 (CS) 三 个 株 系, 但 上 述 两 种 血 清 型 的 抗 血 清 进 行 间 接 ELISA 检 测 后, 发 现 三 种 株 系 和 来 自 夏 威 夷 的 一 个 株 系 都 属 于 亚 组 I, 我 省 厦 门 市 从 菲 律 宾 引 种 的 香 蕉 品 种 检 测 并 分 离 到 的 CMV 证 实 属 于 亚 组 II( 徐 平 东,1996) 随 着 分 子 生 物 学 检 测 技 术 的 发 展, 比 ELISA 方 法 更 灵 敏 的 核 酸 斑 点 杂 交 (Dot-blot) 和 RT-PCR 技 术 被 用 于 香 蕉 CMV 检 测 (Srivastava, 1995; Hu, 1995), 并 将 RT-PCR 法 也 用 于 鉴 定 侵 染 香 蕉 的 CMV 株 系 (Singh, 1995) 由 于 CMV 属 于 三 分 体 基 因 组 正 链 RNA 病 毒, 因 此 采 用 PCR 方 法 检 测 时 需 先 将 RNA 反 转 录 为 DNA, 以 前 的 方 法 RT-PCR 需 要 分 两 步 来 进 行, 即 先 进 行 反 转 录, 再 取 部 分 反 转 录 产 物 进 行 PCR 扩 增, 本 文 作 者 用 自 己 设 计 的 一 步 法 RT-PCR 反 应 程 序 检 测 香 蕉 CMV, 与 两 步 法 进 行 比 较, 发 现 检 测 灵 敏 度 并 没 有 受 到 影 响, 将 反 转 录 及 PCR 两 个 反 应 在 单 管 和 单 一 的 缓 冲 液 中 完 成, 避 免 了 两 步 法 加 样 过 程 中 可 能 引 起 的 不 必 要 的 污 染, 而 且 节 省 反 应 时 间 ( 文 章 待 发 表 ) Hu 等 (1995) 用 ELISA Dot-blot 和 RT-PCR 三 种 方 法 来 检 测 广 州 和 夏 威 夷 的 香 蕉 CMV 病 样, 比 较 三 种 方 法 的 检 测 灵 敏 度, 结 果 证 明 用 香 蕉 病 组 织 粗 汁 液 试 验 时,RT-PCR 可 分 别 检 测 到 相 当 于 lμg 1ng 和 1ng 病 组 织 稀 释 度 中 的 病 毒. 这 说 明 RT-PCR 法 比 Dot-blot 法 灵 敏 1 倍, 而 Dot-blot 法 比 ELISA 法 又 灵 敏 1 倍 但 由 于 香 蕉 组 织 粗 汁 液 中 抑 制 物 质 对 RT-PCR 的 影 响, 因 此 只 有 当 香 蕉 病 组 织 粗 汁 液 稀 释 度 大 于 l 倍 ( 即 少 于 1μg 组 织 ) 时,RT-PCR 才 能 用 于 香 蕉 CMV 的 检 测 实 验 结 果 还 发 现 叶 脉 中 病 毒 含 量 比 叶 肉 组 织 中 高, 新 叶 中 比 老 叶 中 病 毒 含 量 高, 所 以 在 检 测 香 蕉 CMV 时, 取 样 以 新 叶 叶 脉 效 果 最 佳 Sharman(2) 用 一 种 多 重 的 免 疫 捕 捉 PCR(M-IC-PCR) 法 同 时 检 测 到 三 种 香 蕉 病 毒 复 合 感 染 的 香 蕉 粗 提 液 中 的 BBTV(DNA 病 毒 ) CMV(RNA 病 毒 ) 和 BBrMV(RNA 病 毒 ), 检 测 中 发 现, 用 比 色 板 检 测 系 统 来 检 测 地 高 辛 标 记 的 病 毒 特 异 性 探 针, 比 用 凝 胶 电 泳 法 灵 敏 5 倍, 与 ELISA 法 相 比, 不 同 病 毒 检 测 灵 敏 度 高 了 25 至 625 倍, 用 这 种 方 法 可 用 于 检 测 被 两 种 以 上 香 蕉 病 毒 复 合 侵 染 的 病 株, 但 用 这 种 方 法 时 正 确 选 择 不 同 病 毒 的 引 物 是 很 重 要 的, 引 物 选 择 不 当 可 能 引 起 异 源 模 板 和 引 物 之 间 不 利 的 互 作 而 得 不 到 正 确 的 结 果, 所 以 这 种 方 法 在 技 术 上 还 有 一 定 的 难 度 3 香 蕉 线 条 病 香 蕉 线 条 病 症 状 1974 年 就 在 科 特 迪 瓦 种 植 的 香 蕉 上 被 发 现, 但 因 其 症 状 与 CMV 症 状 及 香 蕉 生 理 失 调 症 状 相 似 而 被 忽 视, 直 到 1986 年 Lockhart 提 纯 了 该 病 毒 并 对 它 进 行 了 较 为 系 统 的 研 究 后, 才 确 定 此 种 症 状 是 由 BSV 引 起 的 该 病 近 年 在 世 界 各 地 有 流 行 趋 势, 尤 其 以 非 洲 各 国 发 生 最 为 普 遍 台 湾 于 1994 年 首 次 在 台 湾 种 植 的 香 蕉 上 发 现 该 病 (Su, 1997, 1998), 此 后 对 其 传 播 方 式 和 检 测 技 术 进 行 了 研 究 (Su, 1996, 1998) 在 中 国 大 陆 尽 管 广 东 曾 初 步 确 定 有 该 病 毒 病 的 发 生 ( 费 继 锋, 21), 但 还 没 有 发 现 该 病 的 正 式 报 道 BSV 能 侵 染 香 蕉 和 菜 蕉 (plantains, Musa spp.), 该 病 毒 侵 染 香 蕉 后 可 以 产 生 多 种 症 状, 典 型 症 状 是 叶 片 出 现 断 续 的 和 / 或 连 续 的 褪 绿 条 斑 及 梭 条 斑, 随 着 症 状 的 发 展, 可 逐 渐 成 为 坏 死 黑 色 条 斑, 假 茎 叶 柄 及 果 穗 有 时 也 会 出 现 条 纹 症 状 香 蕉 线 条 病 与 香 蕉 花 叶 病 的 症 状 非 常 相 似. 在 田 间 易 于 混 淆, 但 香 蕉 线 条 病 在 后 期 可 以 发 展 成 为 坏 死 条 斑, 从 而 加 以 区 分 香 蕉 线 条 病 毒 病 症 状 的 表 达 受 很 多 因 素 ( 包 括 香 蕉 品 种 BSV 株 系 及 环 境 条 件 等 ) 的 影 响 (Dahal, 1997), 从 而 导 致 症 状 表 达 不 稳 定 症 状 范 围 广, 症 状 的 发 生 有 时 很 严 重, 有 时 则 很 轻, 甚 至 隐 症, 所 以 通 过 病 征 来 诊 断 结 果 并 不 可 靠 由 于 BSV 最 重 要 的 传 播 方 式 是 通 过 无 性 繁 殖 材 料 ( 吸 芽 组 培 苗 等 ) 进 行, 因 此 有 效 的 检 测 方 法 是 控 制 此 病 害 的 关 键 BSV 的 检 测 方 法 主 要 有 血 清 学 方 法 免 疫 电 镜 (ISEM) 和 PCR 法 (Thottsppilly, 1997; Su, 1999), 在 常 规 PCR 的 基 础 上 又 发 展 了 IC-PCR(Harper, 1999) 和 Real-Time PCR(Delanoy, 23), 其 中 以 血 清 学 方 法 的 检 测 灵 敏 度 最 低, 即 使 用 三 抗 夹 心 法 (TAS-ELISA) 也 无 法 检 测 不 显 症 病 株 上 的 病 毒,ISEM 灵 敏 度 虽 高, 但 检 测 程 序 复 杂, 对 技 术 要 求 较 高 为 了 建 立 一 个 更 灵 敏 可 靠 的 以 PCR 为 基 础 的 诊 断 方 法,1998 年 Harper 对 BSV 病 毒 核 酸 进 行 克 隆 并 测 序, 将 其 测 序 结 果 与 其 它 杆 状 病 毒 组 核 酸 序 列 进 行 比 较 后 发 现 BSV 是 一 种 与 其 它 杆 状 病 毒 截 然 不 同 的 病 毒, 并 根 据 测 得 的 BSV 序 列 设 计 特 异 引 物, 用 于 线 条 病 的 PCR 检 测 PCR 法 可 以 检 测 到 免 疫 电 镜 下 看 不 到 病 毒 粒 子 的 样 品, 这 是 由 于 BSV 被 整 合 在 香 蕉 染 色 体 中,BSV 能 整 合 在 香 蕉 染 色 体 上 已 被 很 多 试 验 所 证 实 (Harper, 1998; 1999; Dallot, 21) 为 了 避 免 蕉 类 中 整 合 序 列 的 影 响, 有 效 检 测 游 离 状 态 的 病 毒 粒 体, 发 展 了

53 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 53 IC-PCR 方 法 应 用 于 游 离 态 BSV 的 检 测, 该 方 法 利 用 BSV 多 株 系 混 合 抗 血 清 诱 捕 病 毒 粒 体, 然 后 进 行 PCR 扩 增, IC-PCR 法 因 为 洗 去 了 抑 制 物 质 改 善 了 检 测 环 境, 所 以 比 常 规 PCR 方 法 更 灵 敏 可 靠 实 时 PCR(Real-Time PCR) 就 是 在 PCR 反 应 体 系 中 加 入 荧 光 基 团, 利 用 荧 光 信 号 积 累 实 时 监 测 整 个 PCR 进 程, 最 后 通 过 标 准 曲 线 对 未 知 模 板 进 行 定 量 分 析 的 方 法, 由 于 实 时 PCR 在 扩 增 过 程 中 动 态 检 测, 完 全 以 闭 管 方 式 进 行, 不 仅 操 作 简 便, 也 杜 绝 了 产 物 污 染 源, 所 以 与 常 规 PCR 相 比, 它 具 有 更 简 便 更 灵 敏 且 自 动 化 程 度 更 高 等 优 点 用 这 种 技 术 Delanoy 开 发 了 一 种 实 时 PCR 检 测 BSV 的 方 法, 首 先 根 据 整 合 在 香 蕉 染 色 体 上 的 BSV 序 列 设 计 BSV 特 异 性 引 物, 并 结 合 ABI 公 司 的 Taqman MGB(Minor groove binder)dna 探 针, 从 带 有 游 离 BSV 的 香 蕉 病 株 中 特 异 性 地 扩 增 出 1,336bp 的 病 毒 序 列, 用 Real-Time PCR 检 测 BSV 重 复 性 好, 不 论 是 对 提 纯 的 BSV 还 是 病 株 组 织 DNA 粗 提 液 都 有 效, 不 仅 检 测 速 度 快, 而 且 适 用 于 大 量 样 品 的 检 测 除 了 检 测 方 法 影 响 BSV 的 检 测 灵 敏 度 外, 检 测 准 确 性 还 与 采 样 时 期 及 部 位 有 关 环 境 条 件 ( 主 要 温 度 ) 也 影 响 症 状 表 达, 低 温 有 利 于 症 状 的 表 达, 此 时 病 毒 浓 度 高 另 外, 雨 季 也 有 利 于 症 状 表 达, 所 以 检 测 应 尽 量 在 低 温 冷 雨 季 节 进 行 (Dahal, 2), 有 研 究 表 明, 与 BBTV 和 CMV 不 同,BSV 在 老 叶 中 的 含 量 较 高 (Su, 1999), 取 老 叶 有 利 于 提 高 灵 敏 性 BSV 序 列 整 合 进 基 因 组 中, 这 就 不 仅 为 蕉 类 异 地 引 种 带 来 潜 在 的 威 胁, 而 且 也 影 响 其 组 培 育 种 有 效 的 检 测 方 法 已 经 成 为 香 蕉 种 质 安 全 转 移 的 最 大 限 制 因 素 由 于 香 蕉 线 条 病 毒 病 症 状 表 达 不 稳 定, 感 病 株 在 一 定 条 件 下 可 隐 症, 并 且 与 香 蕉 花 叶 病 症 状 易 于 混 淆, 所 以 通 过 症 状 进 行 诊 断 的 方 法 不 可 靠 另 外, BSV 不 能 通 过 机 械 摩 擦 传 播, 也 没 有 鉴 别 寄 主, 故 不 能 利 用 指 示 植 物 进 行 检 测, 而 且 BSV 在 植 株 内 的 分 布 极 不 均 匀, 即 使 利 用 当 前 最 灵 敏 可 靠 的 方 法, 也 无 法 保 证 完 全 准 确 的 检 测, 如 何 才 能 准 确 地 检 测 病 株 对 BSV 来 说 还 是 个 亟 待 解 决 的 问 题 4 香 蕉 苞 片 花 叶 病 香 蕉 苞 片 花 叶 病, 又 称 为 香 蕉 苞 片 嵌 纹 病, 是 一 种 相 对 较 新 发 现 的 香 蕉 病 毒 病, 这 种 病 于 1979 年 在 菲 律 宾 首 次 有 记 载, 并 在 菲 律 宾 传 播, 后 来 在 印 度 斯 里 兰 卡 越 南 和 西 萨 摩 亚 也 有 发 现 该 病 造 成 的 产 量 损 失 可 达 4%(Magnaye, 1979) 目 前 中 国 大 陆 和 台 湾 的 蕉 区 均 未 发 现 有 此 病, 但 本 文 作 者 22 年 在 漳 州 天 宝 采 集 香 蕉 花 叶 病 病 株 时, 曾 发 现 并 带 回 一 株 外 表 症 状 与 笔 者 在 台 大 植 病 系 见 到 的 苞 片 花 叶 标 准 病 株 症 状 极 其 相 似 的 病 株, 用 ELISA 和 RT-PCR 检 测 结 果 证 实 被 CMV 侵 染, 但 否 也 被 香 蕉 苞 片 嵌 纹 病 株 混 合 侵 染 还 不 能 确 定 ( 待 发 表 ) 此 病 的 症 状 比 较 特 别, 与 香 蕉 其 它 病 毒 病 症 状 都 不 同, 病 毒 侵 染 香 蕉 后, 病 叶 上 沿 着 叶 柄 产 生 深 绿 色 或 褐 色 的 梭 状 条 斑, 后 期 病 株 成 熟 花 序 苞 片 甚 至 果 实 上 都 会 出 现 红 褐 色 斑 点, 用 于 诊 断 的 症 片 是 拨 去 干 枯 的 叶 鞘, 可 见 到 假 茎 上 的 梭 状 条 纹 从 香 蕉 苞 片 花 叶 病 株 上 分 离 到 少 量 曲 状 病 毒 粒 子 和 一 个 38kDa 的 蛋 白 质, 估 计 它 是 病 毒 的 外 壳 蛋 白,Western blot 结 果 证 实 它 能 与 马 铃 薯 Y 病 毒 属 抗 体 产 生 反 应, 用 马 铃 薯 Y 病 毒 特 异 性 的 简 并 引 物 进 行 反 转 录 PCR, 并 对 扩 增 产 物 进 行 克 隆 及 测 序, 序 列 分 析 结 果 证 实 香 蕉 苞 片 花 叶 病 毒 (BBrMV) 是 马 铃 薯 Y 病 毒 属 的 一 个 新 成 员 (Bateson, 1995) 目 前 还 没 有 对 BBrMV 传 播 机 制 的 报 道, 但 它 可 由 多 种 蚜 虫 以 非 半 持 久 的 方 式 传 播, 如 棉 蚜 (Aphis gossypii) 香 蕉 交 脉 蚜 (Pentalonia nigronervosa) 和 玉 米 缢 管 蚜 (Phopalosiphum maidis), 此 外 还 可 由 组 培 苗 传 播, 因 此 已 被 许 多 国 家 定 为 进 境 香 蕉 组 培 苗 禁 止 传 带 的 病 毒 之 一 ( 张 建 军, 1998) 目 前 对 该 病 控 制 还 是 以 对 香 蕉 组 培 苗 预 防 检 测 为 主, 在 用 BBrMV 制 备 多 克 隆 抗 体 之 间, 对 BBrMV 的 检 测 大 多 是 用 马 铃 薯 Y 病 毒 其 它 成 员 的 抗 血 清 来 检 测, 但 Thomas(1997) 发 现 DAS-ELISA 检 测 结 果 BBrMV 与 马 铃 薯 Y 病 毒 属 其 它 成 员 之 间 只 有 很 微 弱 的 血 清 学 关 系, 例 如 它 与 蕉 麻 花 叶 病 毒 (Abaca mosaic virus, AbaMV) 引 起 的 症 状 极 其 相 似, 但 与 AbaMV 之 间 只 有 极 其 微 弱 甚 至 没 有 一 点 血 清 学 反 应, 而 用 马 铃 薯 Y 病 毒 简 并 引 物 对 这 两 个 病 株 进 行 RT-PCR 扩 增 产 物, 并 用 两 种 病 毒 地 高 辛 标 记 的 特 异 性 核 酸 探 针 对 PCR 产 物 进 行 Southern blot 杂 交, 结 果 未 发 现 有 交 叉 反 应 的 现 象, 说 明 用 这 种 反 转 录 PCR 结 合 特 异 性 的 探 针 对 BBrMV 进 行 检 测 是 可 行 的 后 来 Rodoni(1999) 对 BBrMV 的 外 壳 蛋 白 以 融 合 蛋 白 的 形 势 在 大 肠 杆 菌 中 表 达, 然 后 利 用 表 达 的 外 壳 蛋 白 制 备 了 高 滴 度 的 BBrMV 特 异 性 多 克 隆 抗 血 清, 用 于 间 接 法 DAS-ELISA 检 测 中, 但 与 IC-PCR 和 RT-PCR 检 测 灵 敏 度 比 较 结 果 还 是 以 RT-PCR 的 检 测 灵 敏 度 最 高 香 蕉 除 以 上 四 种 病 毒 外, 还 有 两 种 新 的 病 毒, 香 蕉 顶 梢 枯 死 病 毒 (Banana dieback virus, BDBV) 和 轻 花 叶 病 毒 (Banana mild mosaic virus, BanMMV), 但 是 有 关 这 两 个 病 毒 的 报 道 极 少 BDBV 于 1998 年 在 尼 日 利 亚 发 现, 至 今 也 只 有 尼 日 利 亚 的 香 蕉 上 有 这 种 病 毒, 香 蕉 被 BDBV 侵 染 后, 由 老 叶 至 新 叶 逐 渐 坏 死 直 到 死 亡, 然 后 吸 芽 也 以 相 同 的 方 式 渐 渐 地 变 短 以 至 死 亡 目 前 对 这 个 病 毒 的 传 播 媒 介 还 不 知 道, 但 已 经 制 备 了 与 病 毒 有 关 的 抗 血 清, 并 且 认 为 它 与 线 虫 传 多 面 体 病 毒 属 病 毒 有 血 清 学 关 系 BanMMV 是 一 种 在 香 蕉 上 新 发 现 的 丝 状 病 毒, 在 1997 年 INIBAP 的 年 度 报 告 中 第 一 次 提 到 这 种 病 毒, 后 来 才 命 名 为 香 蕉 丝 状 病 毒, 现 已 被 证 实 它 广 泛 分 布 于 香 蕉 的 各 种 质 中, 可 能 是 由 于 它 通 常 与 其 它 病 毒 复 合 感 染, 所 以 几 乎 没 有 关 于 这 种 病 毒 引 起 的 症 状 和 对 产 量 影 响 的 报 道 但 澳 大 利 亚 昆 士 兰 园 艺 研 究 所 Gambley 在 21 年 已 对 BanMMV 的 完 整 基 因 组 进 行 了 克 隆 及 测 序, 根 据 病 毒 复 制 酶 基 因 系 统 发 生 树 比 较, 这 种 病 毒 很 有 可 能 与 foveavirus 或 carlavirus 这 两 个 病 毒 属 有 关 对 这 两 种 病 毒 的 检 测 技 术 还 有 待 进 一 步 的 研 究 结 果 5 总 结

54 54 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 就 服 务 于 农 业 生 产 来 说, 研 究 植 物 病 害 的 最 终 目 的 是 为 了 能 有 效 地 控 制 病 害 的 发 生, 保 护 植 物 的 正 常 生 长 发 育 由 于 病 毒 的 特 性 和 发 生 流 行 特 点, 植 物 病 毒 病 害 不 能 象 真 菌 和 细 菌 性 病 害 那 样 防 治 对 它 们 的 控 制 主 要 依 赖 于 防 止 毒 源 的 发 生 发 展 和 传 播 为 此, 加 强 进 口 种 子 种 苗 的 检 疫 检 测, 强 化 对 大 田 和 温 室 ( 或 大 棚 ) 植 物 染 病 信 息 的 监 测 和 检 验, 特 别 是 对 近 年 来 正 积 极 推 广 的 脱 毒 组 培 苗 带 毒 率 的 严 格 控 制, 是 防 止 毒 源 发 生 的 最 有 效 的 途 径 19 年 以 前, 香 蕉 病 毒 病 的 鉴 定 和 检 测 主 要 依 赖 外 部 病 症 和 电 子 显 微 镜, 但 这 些 方 法 并 不 可 靠 先 进 的 生 物 技 术 为 香 蕉 病 毒 病 提 供 了 可 靠 而 且 灵 敏 的 检 测 方 法, 用 这 些 方 法 大 大 提 高 了 香 蕉 脱 毒 组 培 苗 的 脱 毒 效 果, 最 大 限 度 地 减 少 了 病 毒 通 过 组 培 苗 传 播 的 危 险 性 迄 今 为 止, 香 蕉 病 毒 检 测 技 术 已 经 历 了 传 统 生 物 学 方 法 电 子 显 微 技 术 检 测 方 法 免 疫 化 学 方 法 和 核 酸 分 子 检 测 方 法 四 个 阶 段, 其 中 以 抗 血 清 为 基 础 的 免 疫 化 学 方 法 因 其 快 速 灵 敏 成 本 低, 适 用 于 大 量 样 品 的 检 测 等 特 点 而 被 广 泛 应 用 ; 而 基 于 核 酸 分 子 组 成 差 异 的 核 酸 分 子 标 记 技 术 为 病 毒 的 准 确 鉴 定 提 供 了 更 加 精 确 可 靠 快 速 有 效 的 分 子 水 平 的 检 测 方 法 当 然 这 些 检 测 方 法 都 存 在 一 些 需 要 解 决 的 问 题 就 ELISA 方 法 来 说, 从 理 论 上 讲 凡 具 有 免 疫 原 性 的 病 毒 粒 体 都 可 以 制 备 出 相 应 的 抗 血 清, 但 香 蕉 组 织 中 的 干 扰 物 质 增 加 了 病 毒 的 提 纯 难 度, 影 响 了 抗 血 清 的 制 备 ; 另 外, 检 测 过 程 普 遍 出 现 的 非 特 异 性 反 应 也 是 值 得 注 意 的 问 题 而 无 论 是 核 酸 杂 交 常 规 PCR 检 测, 还 是 更 先 进 的 IC-PCR Real-Time PCR 至 少 在 目 前 都 存 在 着 检 测 费 用 高, 操 作 要 求 高, 不 易 推 广 等 问 题 尽 管 存 在 着 这 些 问 题, 但 随 着 知 识 的 积 累 和 生 物 技 术 水 平 的 提 高, 这 些 问 题 都 将 逐 步 得 到 解 决 参 考 文 献 1. Bateson MF, Dale JL., Banana bract mosaic virus: characterization using potyvirus specific degenerate PCR primers. Arch Virol. 14(3): Burns T M, Harding R M, Dale J L.1995, The genome organization of banana bunchy top virus: analysis of six ssdna components. J. Gen. Virol., 76: Dahal G., J. d'a. Hughes, and G. Thottappilly, Effect of Temperature on Symptom Expression and Reliability of Banana Streak Badnavirus Detection in Naturally Infected Plantain and Banana (Musa spp.). Plant Dis., 82: Dahal G.,J. Hughes, F. Gauhl, C. Pasberg-Gauhl, 2. Symptomatology and development of banana streak badnavirus, under natural conditions in Ibadan, Nigeria. I International Conference on Banana and Plantain for Africa. 5. Dale J.L. 1987, Banana bunchy top: an economically important tropical plant virus disease. Adv. Virus Res. 33: Dallot S, Acuna P, Rivera C, Ramirez P, Cote F, Lockhart BE, Caruana ML., 21. Evidence that the proliferation stage of micropropagation procedure is determinant in the expression of banana streak virus integrated into the genome of the FHIA 21 hybrid (Musa AAAB). Arch Virol 146(11): Delanoy M., M. Salmon, J. Kummert, E. Frison, and P. Lepoivre., 23. Development of Real-Time PCR for the Rapid Detection of Episomal Banana streak virus (BSV). Plant Disease, 87(1): Gambley CF, Thomas JE., 21. Molecular characterisation of Banana mild mosaic virus, a new filamentous virus in Musa spp.. Arch Virol 146(7): Gowen, S. (ed.) Bananas and Plantains. Chapman and Hall. London. 612 pp 1. Harding R M, Burns T M, Dale J L. 1991, Virus-like particles associated with banana bunchy top disease contain small single-stranded DNA [J]. J. Gen. Virol., 72: Harding R.M., Burns T.M., Hafner G., et al Nucleotide sequence of one component of the banana bunchy top virus genome contains a putative replicase gene. 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G., 2, Development of a multiplex immunocapture PCR with colourimetric detection for viruses of banana. J. of Virological Methods. 89(1-2): 25. Singh Z., Jones R.A.C., Jones M.G.K., 1995, Identification of cucumber mosaic virus subgroup I isolates from banana plants affected by infectious chlorosis disease using RT-PCR. Plant Disease, 79(7): Srivastava A, Raj SK, Haq QM, Srivastava KM, Singh BP, Sane PV Association of a cucumber mosaic virus strain with mosaic disease of banana, Musa paradisiaca--an evidence using immuno/nucleic acid probe. Indian J Exp Biol., 33(12): Su H. J., Epidemiological review on citrus greening and viral diseases of citrus and banana with special reference to disease-free nursery system. Molina A.B., Roa V.N., et al. Managing banana and citrus diseases---proceedings of a regional workshop on disease management of banana and citrus through the use of disease-free planting materials held in Davao City, Philippines[C]. 1998,13-23 ( 下 转 第 47 页 )

55 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 55 译 自 <Phytopathol. Pol.18: ,1999> 小 麦 黄 斑 枯 叶 菌 的 自 然 黑 色 素 缺 乏 突 变 体 W. Wakulinski, M. Schollenberger, Cz, Zamorski 著 黄 素 芳 朱 育 菁 译 1 引 言 小 麦 黄 斑 枯 叶 菌 (Pyrenophora tritici-repentis), 小 麦 德 氏 霉 (Drechslera tritici-repentis) 的 有 性 型, 是 禾 本 科 植 物 广 泛 存 在 的 一 种 致 病 菌 在 PDA 培 养 基 上 培 养, 该 菌 会 形 成 生 长 迅 速 的 棉 絮 状 的 灰 色 菌 落, 菌 落 的 反 面 颜 色 为 深 色 在 人 造 培 养 基 上, 该 菌 通 常 很 难 形 成 孢 子, 需 要 经 过 特 殊 的 处 理 其 分 生 孢 子 梗 不 分 枝, 笔 直 和 细 长, 在 顶 部 生 长 有 透 明 的 分 生 孢 子 这 些 分 生 孢 子 有 长 形 和 圆 柱 形 的, 顶 端 为 圆 形, 有 5-7 个 假 隔 膜 在 低 营 养 环 境 中 菌 株 很 容 易 发 育 成 小 的 黑 色 的 带 壳 子 囊 层, 这 是 一 种 不 完 全 的 特 异 的 子 囊 果, 既 没 有 子 囊 也 没 有 囊 孢 子 因 为 黄 斑 枯 叶 菌 是 同 源 结 合 的, 通 常 可 观 察 到 很 多 的 结 实 ( 受 精 ) 现 象 2 小 麦 黄 斑 枯 叶 菌 突 变 体 本 文 的 主 要 目 的 是 描 述 在 小 麦 黄 斑 枯 叶 菌 突 变 体 出 现 的 的 一 些 与 模 式 菌 不 同 的 形 态 特 征 我 们 从 波 兰 的 主 要 区 域 不 同 局 部 采 集 了 小 麦 和 黑 小 麦 的 叶 子, 从 中 分 离 出 13 个 独 立 菌 株 作 为 研 究 对 象 这 些 独 立 菌 株 在 SNA 培 养 基 上 的 次 培 养 菌 中 有 七 个 出 现 畸 形 生 长 的 桔 红 色 部 分 和 斑 点 我 们 从 中 获 得 不 同 于 母 代 的 形 态 在 SNA 上, 这 种 群 体 生 长 速 率 很 慢 而 且 气 生 菌 丝 体 很 少 经 过 1 天 的 实 验 在 这 些 群 体 中 我 们 没 有 发 现 任 何 的 子 囊 果 ( 如 图 1) 在 琼 脂 液 下 的 菌 丝 呈 稠 密 的, 具 有 橙 色 小 结 晶 物 的 螺 带 形 状,( 如 图 2) 在 富 营 养 的 PDA 中, 同 样 的 菌 株 呈 现 红 色 的 群 体 ( 如 图 3) 我 们 猜 想 缺 少 灰 色 或 黑 色 的 典 型 特 性 的 小 麦 黄 斑 枯 叶 菌 可 能 是 黑 色 素 缺 乏 突 变 体 黑 色 素 是 介 于 棕 黑 色 和 黑 色 之 间 的 一 种 物 质 目 前 它 的 化 学 结 构 还 不 太 清 楚 许 多 真 菌 的 细 胞 壁 是 由 这 些 多 成 份 的 化 合 物 构 成 的, 而 且 这 些 化 合 物 决 定 着 菌 种 的 抗 旱, 抗 紫 外 辐 射 温 差 抗 水 解 酶 消 化 的 性 能 有 无 黑 色 素 决 定 稻 瘟 病 菌 (Magnaporthe grisea) 和 瓜 类 炭 疽 病 菌 (Colletotrichum lagenarium) 附 胞 侵 染 过 程 是 否 有 效 真 菌 的 黑 色 素 缺 乏 突 变 体 没 有 了 典 型 的 黑 颜 色 假 如 我 们 在 研 究 中 获 得 橙 色 或 红 色 的 菌 种 对 这 种 特 征 有 一 种 推 论, 这 种 物 质 可 能 是 3- 甲 酯 -1,4,6,8- 四 羟 基 蒽 醌 这 种 红 色 的 蒽 醌 衍 生 物 最 早 是 从 Helminthosporium catenarium 菌 中 获 得 的 Engstrom et.al.(1993) 从 小 麦 黄 斑 叶 枯 菌 培 养 物 中 获 得 许 多 新 型 的 蒽 醌 衍 生 物 可 能 真 菌 菌 丝 的 黑 色 素 缺 乏 在 颜 色 表 达 中 是 显 性 的 对 该 现 象 还 有 待 进 一 步 的 研 究 3 小 麦 黄 斑 叶 枯 病 症 状 又 称 小 麦 黄 斑 病 该 病 主 要 为 害 叶 片, 可 单 独 形 成 黄 斑, 有 时 与 其 他 叶 斑 病 混 合 发 生 叶 片 染 病 初 生 黄 褐 色 斑 点, 后 扩 展 为 椭 圆 形 至 纺 锤 形 大 斑, 大 小 7~3 1~ 6(mm), 病 斑 中 央 色 深, 有 不 大 明 显 的 轮 纹, 边 缘 有 边 界 不 明 显, 外 围 生 黄 色 晕 圈, 后 期 病 斑 融 合, 致 叶 片 变 黄 干 枯, 各 麦 区 均 有 发 生, 为 害 严 重 病 原 Drechslera tritici-repentis(died)shoem 称 小 麦 德 氏 霉, 属 半 知 菌 亚 门 真 菌 异 名 Helminthosporium tritici-vulgaris Nisikado 有 性 态 为 Pyrenophora tritici-repentis (Died) Drechsler 子 囊 孢 子 无 色 至 黄 褐 色, 长 椭 圆 形, 具 横 隔 膜 3 个, 纵 隔 ~1 个, 大 小 42~ 69 14~29(μm) 无 性 态 分 生 孢 子 浅 色 至 枯 草 色, 圆 柱 形, 直 或 稍 弯, 顶 端 钝 圆, 下 端 呈 蛇 头 状 尖 削, 脐 孔 腔 型 凹 陷, 具 离 壁 隔 膜 1~9 个, 大 小 8~25 14~2(μm) 4 传 播 途 径 和 发 病 条 件 病 菌 随 病 残 体 在 土 壤 或 粪 肥 中 越 冬 翌 年 小 麦 生 长 期 子 囊 孢 子 侵 染, 发 病 后 病 部 产 生 分 生 孢 子, 借 风 雨 传 播 进 行 再 侵 染, 致 病 害 不 断 扩 展 没 有 发 现 任 何 的 子 囊 果 菌 株 呈 现 红 色 的 群 体 具 有 橙 色 小 结 晶 物 的 螺 带 形 状 收 稿 日 期 : 基 金 项 目 : 国 家 863 计 划 项 目 (22AA ) 作 者 简 介 : 黄 素 芳 1968-), 女, 学 士,

56 56 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 德 国 农 业 自 然 友 好 式 的 欧 盟 有 机 农 业 动 物 生 产 规 程 刘 波 冒 乃 和 ( 福 建 省 农 科 院 生 物 技 术 中 心 福 州 353) 摘 要 : 从 欧 盟 有 机 农 业 动 物 生 产 基 本 规 程 转 型 动 物 来 源 饲 料 疾 病 预 防 治 疗 饲 料 方 式 肥 料 饲 养 条 件 等 方 面, 系 统 地 阐 述 了 欧 盟 有 机 农 业 动 物 生 产 规 程, 简 述 了 欧 盟 有 机 农 业 动 物 饲 养 实 践 善 待 环 境 善 待 生 态 善 待 动 物 的 具 体 措 施 关 键 词 : 欧 洲 有 机 法 案 ; 有 机 农 业 ; 动 物 生 产 规 程 Principles on Friendly Raise in EU Organic Livestock Production Liu Bo, Mao Nai-he (Lab of Agri.Environment Protection,Biotechnology Center,FAAS Fuzhou 353) Abstract:From aspects of general principles,conversion,origin of the animals,feed,disease provention and veterinary treatment,hunsbandry management practices,livestock manure,housing condition,et al., were explained systematically the principles of EU organic livestock production,the idiographic measures for protection of environment and animals and plants,which guarantee sustainable development of the agricultural ecology. Key word:vo(ewg)nr.292/91,organic farming,principles of organic livestock production 在 一 个 相 对 封 闭 的 有 机 农 业 生 态 系 统 内, 动 物 生 产 通 过 饲 料 和 肥 料 把 种 植 生 产 和 动 物 养 殖 合 理 地 结 合 在 一 起, 对 建 立 系 统 内 良 性 物 质 循 环 保 持 和 发 展 土 壤 肥 力 意 义 重 大 欧 盟 有 机 农 业 动 物 饲 养 按 照 有 机 农 业 动 物 生 产 规 程 进 行, 纳 入 由 监 控 机 构 负 责 的 监 控 操 作 程 序 [1-3] 欧 洲 有 机 法 案 VO(EWG)Nr.292/91 是 欧 盟 有 机 农 业 发 展 的 法 律 保 证, 由 欧 洲 议 会 颁 布 于 1991 年 6 月 24 日, 又 称 有 机 农 业 和 有 机 农 产 品 与 有 机 食 品 标 志 法 案 此 文 动 物 生 产 涉 及 物 种 有 牛 ( 包 括 水 牛 和 美 洲 野 牛 ) 猪 羊 山 羊 奇 蹄 动 物 和 禽 类 [4] 1 有 机 农 业 动 物 生 产 的 基 本 规 程 欧 盟 有 机 农 业 动 物 生 产 把 自 然 友 好 的 理 念 落 实 在 动 物 生 产 的 原 则 和 措 施 中 禁 止 使 用 转 基 因 生 物 及 其 衍 生 物 综 合 性 生 产 有 机 农 业 生 态 系 统 内 的 物 质 和 能 量 的 流 向, 决 定 了 动 物 和 动 物 源 产 品 生 产 是 由 多 个 有 机 农 业 企 业 组 成 的 综 合 生 产 保 证 生 态 平 衡 动 物 和 动 物 源 产 品 生 产 必 须 保 证 农 业 生 态 系 统 的 平 衡, 满 足 植 物 对 营 养 的 需 要, 补 充 和 改 变 土 壤 有 机 物 质, 提 供 土 壤 和 植 物 间 植 物 和 动 物 间 动 物 和 土 壤 间 的 自 然 循 环 可 持 续 发 展 通 过 可 更 新 自 然 资 源 ( 动 物 源 经 济 肥 固 氮 菌 和 饲 料 作 物 ) 的 使 用, 植 物 栽 培 动 物 饲 养 牧 地 系 收 稿 日 期 : 作 者 简 介 : 刘 波 (1957-), 福 建 惠 安, 研 究 员, 博 士, 从 事 生 物 防 治 生 物 技 术 网 络 测 报 昆 虫 生 态 统 组 合 为 土 壤 保 持 改 良 农 业 可 持 续 发 展 提 供 了 可 能 土 地 相 关 性 不 依 赖 于 土 地 面 积 的 生 产 方 式 不 符 合 有 机 农 业 基 本 原 理 动 物 必 须 能 自 由 活 动 动 物 饲 养 数 直 接 和 可 利 用 土 地 面 积 相 结 合, 可 防 止 过 度 放 牧 和 土 壤 风 化 流 失, 使 动 物 排 遗 物 的 清 理 成 为 可 能 统 一 方 式 饲 养 原 则 一 个 有 机 农 业 生 产 单 元 的 所 有 动 物 都 必 须 满 足 有 机 农 业 动 物 生 产 的 规 程 欧 洲 有 机 法 案 还 规 范 了 企 业 中 饲 养 非 有 机 农 业 动 物 饲 养 的 特 例 允 许 和 非 有 机 农 业 动 物 在 一 个 共 同 的 牧 场 地 上 同 时 饲 养 的 特 例 [5] 2 有 机 农 业 动 物 生 产 的 转 型 2.1 有 机 农 业 动 物 生 产 的 土 地 转 型 生 产 有 机 农 业 植 物 和 植 物 源 饲 料 的 土 地 在 转 型 期 内 必 须 贯 彻 有 机 农 业 生 产 规 程, 来 自 有 机 农 业 牧 地 的 饲 料 至 少 需 要 两 年 转 型 期, 多 年 生 植 物 土 地 上 的 有 机 农 产 品 首 次 收 获 前 至 少 需 要 3 年 欧 洲 有 机 法 案 还 明 确 规 范 了 缩 短 土 地 转 型 期 的 特 例 2.2 有 机 农 业 动 物 及 动 物 源 产 品 的 转 型 有 机 农 业 动 物 最 短 饲 养 时 间 如 果 有 机 农 业 动 物 及 动 物 源 产 品 进 入 市 场, 动 物 必 须 按 照 有 机 农 业 规 程 来 饲 养, 最 短 饲 养 时 间 为 : 反 刍 动 物 幼 体 和 猪 6 个 月 ; 生 产 奶 乳 的 动 物 6 个 月 ; 产 肉 的 奇 蹄 动 物 和 牛 ( 包 括 水 牛 和 美 洲 野 牛 )12 个 月, 保 证 至 少 为 其 生 命 周 期 的 3/4; 产 肉 的 禽 类 1 个 星 期, 幼 雏 孵 化 后 3 天, 开 始 有 机 农 业 饲 养 ; 产 蛋 的 禽 类 6 个 星 期 欧 洲 有 机 法 案 还 规 范 了 23 年 12 月 31 日 前 的 特 例

57 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 有 机 农 业 生 产 单 元 的 整 体 转 型 在 整 个 生 产 单 元 ( 包 括 动 物 牧 场 地 饲 料 草 地 ) 同 时 转 型, 转 型 期 可 缩 短 为 24 个 月, 适 用 于 转 型 前 已 存 在 的 动 物 及 其 后 代 同 期 的 饲 料 草 地 牧 场 地 ; 主 要 依 靠 本 生 产 单 元 的 饲 料 饲 养 动 物 [6] 3 有 机 农 业 的 动 物 来 源 有 机 农 业 动 物 品 种 或 品 系 的 选 择 应 有 助 于 动 物 适 应 能 力 生 物 活 力 及 抗 病 力 的 加 强, 必 须 注 意 避 免 使 用 集 约 化 饲 养 中 具 有 典 型 疾 病 或 健 康 问 题 的 品 种 和 品 系, 如 : 猪 的 应 激 综 合 症 PSE 综 合 症 暴 死 症 习 惯 性 流 产 需 要 剖 腹 产 等, 优 先 选 择 本 地 品 种 和 品 系 动 物 必 须 来 自 有 机 农 业 生 产 单 元, 必 须 终 生 滞 留 在 有 机 农 业 生 产 系 统 内 欧 洲 有 机 法 案 还 明 确 规 范 了 有 机 农 业 动 物 来 源 特 例 [7] 4 有 机 农 业 的 饲 料 和 营 养 欧 洲 有 机 法 案 详 细 规 范 了 有 机 农 业 饲 料 和 动 物 营 养 的 原 则 与 措 施 应 满 足 不 同 发 育 阶 段 的 营 养 生 理 需 要, 优 先 考 虑 饲 料 对 动 物 产 品 质 量 的 作 用, 同 时 考 虑 饲 料 对 动 物 产 量 最 大 化 的 作 用 允 许 使 用 高 效 育 肥 法, 禁 止 强 制 性 的 填 喂 法 饲 养 必 须 使 用 有 机 农 业 饲 料 喂 养 动 物, 优 先 使 用 本 生 产 单 元 的 有 机 农 业 饲 料 所 有 哺 乳 动 物 幼 体 采 用 自 然 乳 奶 喂 养, 需 满 足 确 定 的 最 短 喂 养 期 : 牛 ( 包 括 水 牛 和 美 洲 野 牛 ) 和 奇 蹄 动 物 3 个 月 羊 和 山 羊 45 天 猪 4 天, 优 先 考 虑 母 乳 喂 养 应 据 不 同 季 节 的 草 地 可 使 用 资 源, 最 大 可 能 地 保 证 植 食 性 动 物 的 草 地 放 养 粗 饲 料 占 日 粮 干 重 比 例 至 少 为 6% 禽 类 育 肥 期 的 饲 料 至 少 65% 来 自 谷 类 在 青 贮 生 产 和 动 物 营 养 生 理 中, 只 允 许 使 用 收 录 在 欧 洲 有 机 法 案 的 饲 料 配 料 饲 料 添 加 剂 加 工 助 剂 和 化 学 成 份 清 楚 的 特 定 物 质 禁 止 使 用 抗 生 素 抗 寄 生 虫 药 物 催 长 剂 和 类 似 物 质 动 物 营 养 中 使 用 的 无 机 物 质 和 微 量 元 素 源 自 自 然 或 和 自 然 物 质 相 同 生 产 中 使 用 了 收 录 在 欧 洲 有 机 法 案 的 产 品, 可 规 定 详 细 描 述 特 殊 说 明 特 殊 标 签 欧 洲 有 机 法 案 还 明 确 规 范 了 对 转 型 期 饲 料 传 统 饲 料 传 统 饲 料 配 料 的 限 制 使 用 等 特 例 [8] 5 有 机 农 业 动 物 的 疾 病 预 防 和 兽 医 治 疗 5.1 有 机 农 业 动 物 的 疾 病 预 防 基 本 原 则 采 取 综 合 性 预 防 措 施 保 障 动 物 健 康, 限 制 有 机 农 业 动 物 疾 病 产 生 是 基 本 策 略 具 体 措 施 有 : 符 合 有 机 农 业 动 物 来 源 要 求 的 品 种 或 品 系 选 择, 可 保 证 使 用 抗 逆 性 强 的 良 种 ; 能 满 足 动 物 基 本 需 要 的 饲 养 实 践 高 效 饲 料 的 利 用 规 律 性 的 动 物 活 动 和 牧 场 地 放 牧, 可 提 高 动 物 的 自 然 免 疫 力 ; 合 适 饲 养 密 度 的 保 证, 可 避 免 超 密 度 饲 养 引 起 的 动 物 健 康 问 题 如 果 动 物 还 是 病 或 受 伤 了, 必 须 立 即 治 疗, 必 要 时 可 空 间 隔 离 5.2 有 机 农 业 动 物 药 品 使 用 的 基 本 原 则 相 对 于 化 学 合 成 的 对 抗 疗 法 的 动 物 药 品 或 抗 生 素, 优 先 选 择 植 物 治 疗 产 品 [ 如 植 物 提 取 物 ( 抗 生 素 例 外 ) 植 物 香 精 等 ] 顺 势 疗 法 产 品 [ 如 植 物 源 动 物 源 矿 物 源 物 质 ] 微 量 元 素 矿 物 源 饲 料 配 料 上 述 物 质 不 能 有 效 治 疗 时, 需 要 避 免 动 物 痛 苦 和 折 磨, 在 某 兽 医 负 责 下, 可 使 用 化 学 合 成 的 对 抗 疗 法 的 动 物 药 品 或 抗 生 素, 禁 止 该 类 物 质 用 于 预 防 禁 止 使 用 抗 生 素 抗 寄 生 虫 药 物 和 催 长 剂 禁 止 使 用 激 素 或 激 素 类 似 物 ( 用 于 繁 殖 催 情 控 制 和 发 情 同 步 期 控 制 ), 兽 医 治 疗 中 允 许 给 动 物 个 体 提 供 激 素 只 要 成 员 国 或 欧 盟 有 相 应 法 规, 就 可 进 行 兽 医 治 疗, 处 理 建 筑 物 器 械 和 设 施 在 生 产 单 元 所 在 区 域 已 出 现 确 认 疾 病, 可 以 使 用 免 疫 性 动 物 药 品 5.3 有 机 农 业 动 物 药 品 使 用 的 注 意 事 项 如 果 使 用 了 动 物 药 品, 必 须 详 细 记 录 药 品 类 型 药 品 有 效 物 质 具 体 病 情 剂 量 药 剂 提 供 方 式 医 治 疗 程 法 定 安 全 间 隔 期 等 接 受 治 疗 的 动 物 必 须 清 晰 标 注 : 大 牲 畜 个 体 标 注, 禽 类 或 小 牲 畜 单 一 或 批 次 式 标 注 在 作 为 有 机 农 业 动 物 或 动 物 源 产 品 进 入 流 通 前, 应 该 保 证 告 知 监 控 机 构 关 于 动 物 药 品 使 用 情 况 从 最 后 一 次 在 常 规 条 件 下 给 动 物 使 用 对 抗 疗 法 的 动 物 药 品 起, 到 从 上 述 动 物 获 得 有 机 食 品 的 安 全 间 隔 期 必 须 是 法 定 时 间 的 两 倍, 否 则 此 时 间 为 48 小 时 5.4 有 机 农 业 使 用 动 物 药 品 后 的 动 物 产 品 限 制 如 果 某 动 物 或 某 群 动 物 在 一 年 内, 超 过 两 次 或 最 多 三 次 使 用 了 化 学 合 成 的 对 抗 疗 法 的 动 物 药 品 或 抗 生 素, 或 者 生 产 动 物 的 生 命 周 期 短 于 1 年, 但 治 疗 次 数 超 过 1 次, 所 涉 动 物 或 动 物 源 产 品 不 允 许 作 为 有 机 农 业 产 品 出 售, 获 得 监 控 机 构 同 意 后, 动 物 需 经 过 规 定 的 转 型 期 ; 注 射 疫 苗 治 疗 寄 生 虫 病 成 员 国 引 入 的 法 定 清 除 计 划 可 以 例 外 [9] 6 有 机 农 业 动 物 饲 养 方 式 和 动 物 运 输 与 认 定 6.1 善 待 动 物 的 饲 养 方 式 适 合 物 种 特 性 的 饲 养 饲 养 应 满 足 动 物 生 理 和 习 性 需 求 适 合 动 物 的 活 动 条 件 和 居 住 条 件 自 然 繁 殖 原 则 上 有 机 农 业 动 物 繁 殖 须 以 自 然 交 配 方 式 进 行 允 许 人 工 授 精 禁 止 人 工 繁 殖 的 其 它 形 式 ( 如 克 隆 ) 禁 止 动 物 致 残 措 施 有 机 农 业 生 产 方 式 不 允 许 系 统 地 对 动 物 实 施 下 列 措 施 : 如 羊 尾 巴 上 围 扎 橡 皮 圈 尾 巴 的 截 短 牙 齿 的 锯 除 鸟 喙 的 修 整 角 的 去 除 基 于 动 物 安 全 ( 幼 兽 去 角 ) 动 物 卫 生 和 健 康 的 改 善 动 物 保 护 的 改 进, 特 定 措 施 可 由 监 控 机 构 予 以 批 准, 必 须 在 适 合 的 动 物 年 龄 由 专 业 合 格 人 员 施 行, 把 动 物 痛 苦 降 低 到 最 低 为 了 延 续 传 统 生 产 方 式 ( 仔 猪 肥 公 牛 阉 鸡 等 ) 和 保 证 品 质 量, 允 许 在 上 述 条 件 下 实 施 动 物 生 理 阉 割 原 则 上 禁 止 拴 绳 饲 养 欧 洲 有 机 法 案 还 规 范 了 拴 绳 饲 养 特 例 群 体 方 式 饲 养 群 体 大 小 必 须 适 合 动 物 发 育 阶 段 和 物 种 习 性 禁 止 导 致 动 物 贫 血 的 饲 养 屠 宰 禽 类 最 低 年 龄 肉 鸡 81 天, 阉 鸡 15 天, 北 京 鸭 49 天, 母 番 鸭 7 天, 公 番 鸭 84 天, 杂 交 鸭 ( 北 京 鸭 和 番 鸭 的 杂 交 )92 天, 珍 珠 鸡 94 天, 火 鸡 和 鹅 14 天 否 则 必 须 采 用 生 长 慢 的 品 种 减 少 动 物 紧 张 动 物 屠 宰 前 和 屠 宰 期 间, 采 用 的 手 段 和 措 施 必 须 把 动 物 紧 张 减 少 到 最 低

58 58 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 6.2 善 待 动 物 的 运 输 方 式 运 输 中 必 须 避 免 动 物 过 度 紧 张, 遵 守 成 员 国 或 欧 盟 的 适 用 法 规 装 载 和 装 御 中 不 允 许 使 用 电 棒 摧 赶 动 物 禁 止 使 用 对 抗 疗 法 的 镇 静 剂 6.3 可 回 溯 跟 踪 的 标 注 追 溯 跟 踪 动 物 肉 制 品 在 生 产 加 工 处 理 直 至 最 终 包 装 与 标 签 的 产 业 链 物 流, 动 物 和 动 物 源 产 品 必 须 标 注 可 识 别 只 要 技 术 上 可 行, 成 员 国 需 采 取 有 效 措 施 明 确 可 回 溯 性, 保 证 在 生 产 屠 宰 肢 解 等 加 工 环 节 直 至 消 费 者 层 次 进 行 有 效 监 控 向 消 费 者 保 证 相 应 的 产 品 符 合 欧 洲 有 机 法 案 [1] 7 有 机 农 业 的 动 物 源 经 济 肥 料 7.1 有 机 农 业 动 物 源 经 济 肥 料 的 量 化 管 理 有 机 农 业 生 产 单 元 整 体 使 用 的 肥 料 最 高 限 量 值 : 每 公 顷 农 用 土 地 每 年 不 允 许 超 过 17 公 斤 氮 素 只 能 在 有 机 农 业 企 业 间 进 行 合 同 式 合 作, 以 便 施 放 多 余 的 动 物 源 经 济 肥 料,17 公 斤 氮 素 的 计 算 基 础 是 所 有 合 作 的 有 机 农 业 生 产 单 元 欧 盟 成 员 国 也 可 酌 情 确 定 更 低 的 最 高 限 量 值 必 须 保 证 动 物 源 经 济 肥 料 的 仓 贮 能 力, 其 大 小 足 以 排 除 直 接 污 染 或 土 壤 渗 透 引 起 的 水 系 污 染 7.2 动 物 饲 养 密 度 的 控 制 适 宜 畜 禽 数 目 可 在 生 产 单 元 内 合 理 地 把 植 物 栽 培 和 动 物 饲 养 组 合 起 来, 把 对 环 境 土 地 地 表 和 地 下 水 源 的 负 担 减 少 至 最 低, 所 以 必 须 限 制 饲 养 密 度 相 当 每 年 每 公 顷 农 用 土 地 上 施 加 17 公 斤 氮 素 的 动 物 数 称 之 为 动 物 饲 养 单 位, 不 同 动 物 的 一 个 动 物 饲 养 单 位 有 不 同 的 动 物 个 体 数, 欧 洲 有 机 法 案 提 供 了 每 公 顷 允 许 饲 养 的 动 物 饲 养 单 位 的 动 物 个 体 数,6 个 月 以 上 的 奇 蹄 动 物 :2; 小 肉 牛 :5; 小 于 1 年 的 其 它 牛 :5;1 年 至 2 年 的 公 牛 :3.3;1 年 至 2 年 的 母 牛 :3.3; 2 年 以 上 的 公 牛 :2; 育 种 用 小 母 牛 :2.5; 肉 用 小 母 牛 :2.5; 奶 牛 :2; 淘 汰 奶 牛 :2; 其 它 奶 牛 :2.5; 育 种 用 雌 家 兔 : 1; 母 羊 :13.3; 母 山 羊 :13.3; 仔 猪 :74; 育 种 用 小 母 猪 : 6.5; 肉 用 猪 :14; 其 它 猪 :14; 肉 用 鸡 :58; 蛋 鸡 :23 [6,11] 8 有 机 农 业 动 物 的 活 动 条 件 和 饲 养 建 筑 要 求 8.1 有 机 农 业 动 物 饲 养 的 设 施 有 机 农 业 动 物 饲 养 应 满 足 动 物 生 理 和 习 性 的 需 求 动 物 必 须 有 进 入 饲 料 喂 养 地 和 饮 水 槽 的 畅 通 通 道 通 过 建 筑 物 的 绝 缘 暖 气 和 通 气 设 备 必 须 保 证 空 气 循 环 空 气 总 悬 浮 颗 粒 物 空 气 温 度 相 对 空 气 湿 度 和 气 体 浓 度 控 制 在 确 定 值 内, 保 证 对 动 物 无 害 必 须 保 证 有 足 够 的 自 然 通 风 和 采 光 可 据 当 地 气 候 条 件 具 体 物 种 的 需 求 在 游 牧 草 地 和 动 物 活 动 草 地 上 配 建 足 够 的 设 施, 保 护 动 物 免 受 雨 淋 风 刮 日 晒 严 寒 和 酷 署 气 候 条 件 允 许 的 地 区, 动 物 可 自 由 生 活, 并 不 规 定 一 定 要 有 厩 ( 棚 圈 舍 ) 8.2 动 物 饲 养 密 度 过 大 和 过 度 放 牧 的 预 防 过 度 放 牧 的 预 防 合 适 的 饲 养 密 度 可 避 免 牧 场 草 地 游 牧 草 地 动 物 活 动 草 地 荒 原 地 湿 地 草 原 其 它 自 然 和 类 自 然 土 地 的 过 度 放 牧 与 践 踏 动 物 的 舒 适 感 觉 动 物 饲 养 密 度 的 控 制 可 保 证 动 物 的 居 住 条 件 舒 适 感 觉, 饲 养 密 度 大 小 要 据 物 种 品 系 和 年 龄 确 定, 有 助 于 满 足 群 体 大 小 和 动 物 性 别 的 行 为 需 求 理 想 的 动 物 饲 养 数 目 能 保 证 动 物 自 然 站 立 舒 适 躺 卧 翻 身 自 身 清 洁 表 现 和 进 行 所 有 自 然 姿 态 和 自 然 活 动 动 物 活 动 条 件 欧 洲 有 机 法 案 附 件 Ⅷ 包 含 了 单 位 动 物 最 小 饲 养 面 积 和 最 小 自 由 活 动 地 面 积 以 及 其 它 饲 养 条 件 8.3 有 机 农 业 的 设 施 卫 生 对 厩 ( 棚 圈 舍 ) 设 备 器 械 应 该 保 证 以 适 合 的 方 式 清 洁 和 消 毒, 预 防 动 物 间 相 互 感 染 和 病 源 体 繁 殖 清 洁 和 消 毒 只 允 许 使 用 下 列 产 品 ; 钾 钠 肥 皂 ; 水 和 蒸 气 ; 石 灰 浆 ; 石 灰 ; 生 石 灰 ; 次 氯 酸 钠 ( 作 为 浸 液 ); 苛 性 钠 ; 苛 性 钾 ; 过 氧 化 氢 ; 自 然 植 物 香 精 ; 柠 檬 酸 过 醋 酸 甲 酸 乳 酸 乙 二 酸 和 醋 酸 ; 酒 精 ; 用 于 挤 奶 设 施 的 硝 酸 磷 酸 ; 用 于 乳 头 和 挤 奶 器 材 的 甲 醛 ; 碳 酸 钠 排 遗 物 未 食 的 余 料 地 面 遗 留 饲 料 必 须 及 时 清 除, 以 限 制 气 味 形 成 防 止 昆 虫 和 啮 齿 目 动 物 在 符 合 欧 洲 有 机 法 案 要 求 的 前 提 下, 只 使 用 下 列 植 物 源 和 动 物 源 产 品 消 灭 棚 舍 和 饲 养 设 施 中 的 昆 虫 和 其 它 寄 生 生 物 : 天 然 印 楝 素 蜂 蜡 明 胶 水 解 蛋 白 质 卵 磷 脂 植 物 油 ( 如 薄 荷 油 松 油 和 兰 芹 子 油 ) 天 然 除 虫 菊 酯 苦 木 ( 天 然 提 取 物 ) 鱼 藤 酮 ( 天 然 提 取 物 ) 灭 鼠 剂 印 楝 素 除 虫 菊 酯 鱼 藤 酮 的 使 用 需 要 获 得 监 控 机 构 的 认 可 [12,13] 9 结 束 语 自 然 友 好 的 理 念 处 处 体 现 在 欧 盟 有 机 农 业 动 物 饲 养 实 践 中, 按 照 有 机 农 业 动 物 生 产 规 程 从 事 饲 养, 保 证 了 有 机 农 业 动 物 及 动 物 源 产 品 的 高 安 全 和 高 质 量 保 护 了 动 植 物 和 环 境 保 证 了 农 业 生 态 的 可 持 续 发 展 [14-16] 参 考 文 献 1 刘 波, 冒 乃 和 等. 德 国 食 品 安 全 法 律 体 系 与 研 究 [M]. 北 京 : 中 国 农 业 出 版 社,23: 冒 乃 和, 刘 波. 德 国 农 业 发 展 的 方 向 有 机 农 业 [J]. 农 业 现 代 化 研 究, 22,23( 专 刊 ): 刘 波, 冒 乃 和. 欧 盟 有 机 农 业 植 物 及 植 物 源 产 品 的 监 控. 农 业 现 代 化 研 究 4 EU-Rat,Öko-Verordnung,EU:VO(EWG)Nr.292/91, 冒 乃 和, 刘 波. 欧 盟 有 机 农 业 动 物 和 动 物 源 产 品 的 监 控. 中 国 畜 牧 兽 医 6 冒 乃 和, 刘 波. 欧 盟 有 机 农 业 哺 乳 动 物 生 产 规 程. 畜 牧 与 兽 医. 7 冒 乃 和,. 刘 波 谈 欧 盟 有 机 农 业 饲 料 和 动 物 营 养 的 法 律 要 求. 中 国 饲 料 8 刘 波, 冒 乃 和. 自 然 友 好 的 欧 盟 有 机 农 业 动 物 生 产 规 程. 中 国 畜 牧 杂 志 9 冒 乃 和, 刘 波. 欧 盟 有 机 农 业 善 待 动 物 的 法 律 要 求. 生 物 学 通 报 1 刘 波, 冒 乃 和. 欧 盟 有 机 农 业 植 物 营 养 和 肥 料 使 用 的 法 律 要 求. 农 业 环 境 与 发 展 11 冒 乃 和, 刘 波. 自 然 友 好 的 欧 盟 有 机 农 业 禽 类 动 物 生 产 规 程. 中 国 家 禽 12 刘 波, 冒 乃 和. 欧 盟 有 机 农 业 植 物 保 护 的 法 律 要 求. 植 物 保 护 13 刘 波, 冒 乃 和. 欧 盟 有 机 农 业 植 物 生 产 规 程. 中 国 农 学 通 讯 14 冒 乃 和, 刘 波. 善 待 环 境 的 欧 盟 有 机 农 业 动 物 饲 养. 中 国 水 土 保 持 15 刘 波, 冒 乃 和. 德 国 有 机 农 业 发 展 的 法 律 基 础 和 扶 持 政 策 [J]. 世 界 农 业,23,5( 总 289): 冒 乃 和, 刘 波. 德 国 有 机 农 业 发 展 面 临 的 问 题 与 对 策 [J]. 世 界 农 业, 22,1( 总 282):26-28

59 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 59 市 场 信 息 全 国 主 要 菜 篮 子 产 品 批 发 价 格 日 报 表 日 期 : 农 业 部 单 位 : 元 / 公 斤 大 白 菜 西 红 柿 黄 瓜 青 椒 芹 菜 北 京 岳 各 庄 北 京 新 发 地 北 京 八 里 桥 北 京 大 洋 路 上 海 曹 安 天 津 何 庄 子 天 津 金 钟 天 津 红 旗 石 家 庄 桥 西 晋 大 同 振 华 呼 市 东 瓦 窑 包 头 市 友 谊 沈 阳 十 二 线 大 连 双 兴 长 春 蔬 菜 吉 林 江 山 齐 齐 哈 尔 牡 丹 江 蔬 菜 哈 尔 滨 新 发 黑 龙 江 鹤 岗 济 南 七 里 堡 青 岛 抚 顺 路 山 东 泰 山 青 岛 沧 口 山 东 威 海 青 岛 城 阳 山 东 滨 州 合 肥 周 谷 堆 南 京 紫 金 山 南 京 白 云 亭 江 苏 淮 海 徐 州 七 里 沟 江 苏 凌 家 塘 苏 州 南 环 桥 扬 州 联 谊 浙 江 温 州 浙 江 绍 兴 福 州 市 亚 峰 厦 门 市 滨 海 同 安 果 蔬 九 江 浔 阳 南 昌 农 产 品 洛 阳 蔬 菜 郑 州 陈 砦 洛 阳 菜 果 武 汉 武 泰 闸 武 汉 皇 经 堂 宜 昌 金 桥 长 沙 马 王 堆 湖 南 株 洲 广 州 白 云 山 深 圳 布 吉 东 莞 市 果 菜 广 东 汕 头 重 庆 盘 溪 重 庆 永 川 蓉 农 产 品 贵 阳 五 里 冲 西 安 胡 家 庙 汉 中 过 街 楼 甘 肃 天 水 新 疆 北 园 春 新 疆 凌 庆 秦 皇 岛 海 阳 冀 乐 亭 果 菜 冀 馆 陶 金 凤 河 北 高 邑 秦 皇 岛 昌 黎 河 北 南 大 堡 河 北 青 县 冀 魏 县 天 仙 河 北 赵 县 河 北 饶 阳 怀 来 京 西 唐 山 荷 花 坑 晋 新 绛 蔬 菜 晋 长 治 紫 坊 晋 运 城 蔬 菜 晋 临 汾 尧 丰 晋 晋 城 绿 欣 晋 孝 义 蔬 菜 晋 五 台 东 冶 晋 汾 阳 市 晋 阳 泉 菜 果 赤 峰 西 城 辽 宁 北 票 辽 宁 鞍 山 营 口 博 洛 铺 山 东 章 丘 山 东 肥 城 青 岛 东 庄 头 山 东 滕 州 山 东 龙 口 山 东 莘 县 山 东 宁 津

60 6 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 安 徽 亳 州 安 徽 和 县 安 徽 舒 城 安 徽 蚌 埠 安 徽 阜 阳 皖 北 蔬 菜 安 徽 马 鞍 山 裕 安 紫 竹 林 江 苏 沛 县 江 苏 丰 县 江 苏 宿 迁 嘉 善 浙 北 金 华 农 产 品 浙 嘉 兴 蔬 菜 浙 江 义 乌 闽 福 鼎 农 贸 江 西 永 丰 江 西 上 饶 河 南 新 野 许 昌 群 发 河 南 安 阳 商 丘 农 产 品 河 南 濮 阳 郑 州 毛 庄 三 门 峡 原 店 鄂 潜 江 江 汉 岳 阳 花 板 桥 昆 明 呈 贡 陕 西 云 阳 甘 肃 靖 远 甘 肃 康 家 崖 甘 肃 敦 煌 金 张 掖 巷 道 甘 肃 洛 门 甘 肃 永 登 宁 夏 宝 丰 吴 忠 农 贸 新 疆 通 汇 土 豆 白 萝 卜 茄 子 豆 角 胡 萝 卜 北 京 岳 各 庄 北 京 新 发 地 北 京 八 里 桥 北 京 大 洋 路 上 海 曹 安 天 津 何 庄 子 天 津 金 钟 天 津 红 旗 石 家 庄 桥 西 晋 大 同 振 华 呼 市 东 瓦 窑 包 头 市 友 谊 齐 齐 哈 尔 牡 丹 江 蔬 菜 济 南 七 里 堡 青 岛 抚 顺 路 青 岛 沧 口 山 东 威 海 青 岛 城 阳 山 东 滨 州 南 京 紫 金 山 南 京 白 云 亭 江 苏 淮 海 江 苏 宜 兴 江 苏 凌 家 塘 苏 州 南 环 桥 无 锡 朝 阳 扬 州 联 谊 浙 江 温 州 浙 江 绍 兴 福 州 市 亚 峰 厦 门 市 滨 海 同 安 果 蔬 九 江 浔 阳 南 昌 农 产 品 郑 州 陈 砦 武 汉 武 泰 闸 武 汉 皇 经 堂 宜 昌 金 桥 湖 南 株 洲 广 州 白 云 山 深 圳 布 吉 东 莞 市 果 菜 南 宁 五 里 亭 重 庆 盘 溪 贵 阳 五 里 冲 西 安 胡 家 庙 新 疆 北 园 春 秦 皇 岛 海 阳 冀 乐 亭 果 菜 冀 馆 陶 金 凤 河 北 高 邑 秦 皇 岛 昌 黎 河 北 青 县 河 北 赵 县 怀 来 京 西 唐 山 荷 花 坑 晋 新 绛 蔬 菜 晋 长 治 紫 坊 晋 运 城 蔬 菜 晋 襄 汾 市 场 晋 晋 城 绿 欣 赤 峰 西 城 辽 宁 鞍 山 山 东 章 丘 青 岛 东 庄 头 山 东 莘 县 山 东 宁 津 安 徽 蚌 埠 安 徽 马 鞍 山 裕 安 紫 竹 林 浙 嘉 兴 蔬 菜 闽 福 鼎 农 贸 商 丘 农 产 品

61 农 业 科 技 推 广 通 讯 23(6) 61 郑 州 毛 庄 三 门 峡 原 店 鄂 潜 江 江 汉 岳 阳 花 板 桥 常 德 甘 露 寺 南 充 桑 园 坝 陕 西 云 阳 甘 肃 康 家 崖 甘 肃 敦 煌 金 张 掖 巷 道 菜 花 韭 菜 蒜 薹 大 葱 葱 头 北 京 岳 各 庄 北 京 八 里 桥 北 京 大 洋 路 上 海 曹 安 天 津 何 庄 子 天 津 金 钟 天 津 红 旗 石 家 庄 桥 西 晋 大 同 振 华 呼 市 东 瓦 窑 包 头 市 友 谊 吉 林 江 山 齐 齐 哈 尔 牡 丹 江 蔬 菜 济 南 七 里 堡 青 岛 抚 顺 路 山 东 泰 山 青 岛 沧 口 山 东 威 海 山 东 滨 州 合 肥 周 谷 堆 南 京 紫 金 山 南 京 白 云 亭 福 州 市 亚 峰 同 安 果 蔬 郑 州 陈 砦 洛 阳 菜 果 武 汉 武 泰 闸 西 安 胡 家 庙 新 疆 北 园 春 新 疆 凌 庆 秦 皇 岛 海 阳 河 北 高 邑 秦 皇 岛 昌 黎 河 北 青 县 冀 魏 县 天 仙 河 北 赵 县 唐 山 荷 花 坑 晋 新 绛 蔬 菜 晋 长 治 紫 坊 晋 晋 城 绿 欣 辽 宁 北 票 辽 宁 鞍 山 山 东 章 丘 山 东 宁 津 安 徽 亳 州 安 徽 蚌 埠 河 南 安 阳 商 丘 农 产 品 三 门 峡 原 店 甘 肃 康 家 崖 甘 肃 洛 门 吴 忠 农 贸 油 菜 菠 菜 洋 白 菜 莴 笋 生 姜 北 京 岳 各 庄 北 京 新 发 地 北 京 八 里 桥 北 京 大 洋 路 上 海 曹 安 呼 市 东 瓦 窑 吉 林 江 山 牡 丹 江 蔬 菜 济 南 七 里 堡 青 岛 抚 顺 路 山 东 泰 山 青 岛 沧 口 山 东 威 海 青 岛 城 阳 山 东 滨 州 南 京 紫 金 山 江 苏 淮 海 同 安 果 蔬 广 州 白 云 山 新 疆 北 园 春 ================================================================================= ( 上 接 第 4 页 ) 16 LIU, B.; SENGONCA, C.; ZHU, Y. J., 2e. Cluster analysis of the culturing characteristics of the strain LSZ948, Bacillus thuringiensis. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), (in Chinese) 17 LIU,B;SENGONCA,C;ZHU Y.J;LIN,G.X.,2f.Effect of culture s solid material on the ability of spore generation for the strain LSZ948, Bacillus thuringiensis. Chin. J. biological control, 16 (suppl.), LIU, B.; SENGONGCA, C.; ZHU, Y. J.; LIN, G. X., 2g. Effect of C/N Change on spore generation for the strain LSZ948, Bacillus thuringiensis. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), LIU, B.; SENGONCA, C., 23c. Variation of spatial distribution of arthropods under treatments of BtA biocide and methomyl insecticide in cabbage plantations in Fuzhou region of the southeastern China. Chinese J. Biological Control (in print). 2 RUAN, C.Q.; LIU, B.; SENGONCA, C.; ZHU, Y. J.; 21. Study on the concentration technique of fermentation liquid for Bacillus thuringiensis. Wuyi Science J. 17, WU, S. Z.; LIN, K. M.; ZHENG, S. D.; LIU, B., 2. Biological control of the fly, Mycophila sp. and the mite, Acarus siro Linnaeus in the mushroom using BtA biocide. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), (in Chinese) 22 ZHU, Y. J.; LIU, B.; SENGONCA, C.; LIN, G. X., 2. Study on poison and residue of BtA, high efficient biocide. Chinese journal of biological control, 16 (suppl.), (in Chinese)