6 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中缬氨酸需求量的研究 901 差异, 均为 1.35g 1.2 实验饲料实验饲料以鱼粉和晶体氨基酸混合物为蛋白源, 氨基酸模式参照测定的实验草鱼全鱼 40% 粗蛋白中氨基酸含量 ( 缬氨酸除外 ), 饲料缬氨酸水平以晶体缬氨酸调节, 用天冬氨酸和谷氨酸 (1 1

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巍秃阎
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1 文章编号 : (2017) DOI: /jsou 草鱼鱼种对饲料中缬氨酸需求量的研究孙丽慧, 陈建明, 沈斌乾, 姜建湖, 黄爱霞, 潘茜 (1. 浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖实验室, 浙江湖州 ;2. 浙江省淡水水产研究浙江省鱼类健康与营养重点实验室, 浙江湖州 ) 摘要 : 以鱼粉和晶体氨基酸为蛋白源, 制作 7 组缬氨酸梯度水平分别为 g/(kg 干饲料 ) 的等氮等能半精制饲料, 饲喂初始体质量为 1.35g 的草鱼鱼种 75d, 结果表明 : 草鱼鱼种增重率随饲料缬氨酸水平的提高而显著增加, 当饲料缬氨酸水平达 12.6g/(kg 干饲料 ) 时草鱼鱼种增重率达最大值, 继续增加饲料缬氨酸水平, 草鱼鱼种增重率显著下降 (P<0.05) 草鱼鱼种蛋白质累积率表现出与增重率相同的趋势草鱼鱼种饲料效率在饲料缬氨酸水平为 g/(kg 干饲料 ) 时达最大值 (P< 0.05) 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种鱼体必需氨基酸支链氨基酸总氨基酸含量及体组成无显著影响 (P> 0.05) 草鱼鱼种肝脏谷丙转氨酶活性在饲料缬氨酸水平为 11.0g/(kg 干饲料 ) 时达最高值 (P<0.05), 但各组之间并无明显规律性, 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种肝脏谷草转氨酶活性无显著影响 (P>0.05) 分别以鱼体增重率蛋白质累积率和饲料效率为指标, 以抛物线回归模型分析, 求得草鱼鱼种对饲料缬氨酸的需求量为 12.79~13.68g/(kg 干饲料 ), 占饲料蛋白的 3.76% ~4.02% 关键词 : 草鱼鱼种 ; 缬氨酸 ; 需求量 ; 增重率 ; 饲料效率 ; 蛋白质累积率中图分类号 :S963.1 文献标志码 :A 缬氨酸作为鱼类的 10 种必需氨基酸之一 [1], 对鱼类的生长性能和蛋白利用有重要的影响, 其在鱼体内除直接为蛋白质合成提供原料外, 还具有维持球状蛋白的三维结构和参与包裹在神经外的髓磷脂的合成等功能, 为维持神经系统正常机能所必需目前, 国内外鱼类缬氨酸营养需求的研究已有不少报道, 近年来确定了印度鲮 (Cirhinus mrigala) [2] 印度野鲮 (Labeo rohita) [3] 异育银鲫 (Carasiusauratusgibelio) [4] 真鲷 (Pagrusmajor) [5] 建鲤 (Cyprinuscarpiovar. Jian) [6] 牙鲆 (Paralichthyolivaceus) [7] 团头鲂 (MegalobramaamblycephalaYih) [8] 等多种养殖鱼类的缬氨酸需求量草鱼 (CtenopharyngodonidelaValenciennes) 是我国养殖量最大的淡水鱼, 早期对其营养需求的研究主要集中在蛋白质脂肪和碳水化合物等方面 [9 12], 其研究成果对草鱼配合饲料的开发和应用起到了极大的推进作用近些年对其必需氨基酸需求的研究已有报道, 但并不完善, 目前仅见对精氨酸 [13] 赖氨酸 [14] 苏氨酸 [15] 异亮氨 [16] [17] 酸和苯丙氨酸等需求量的报道本实验是通过调节饲料中缬氨酸水平探讨缬氨酸对草鱼鱼种生长和饲料利用等指标的影响, 从而得出其最佳的缬氨酸需求量, 为完善草鱼氨基酸平衡的高效配合饲料提供科学依据 1 材料与方法 1.1 实验鱼实验鱼为本所实验基地同塘培育的当年夏花鱼种选取体质健硕规格相仿的 1050 尾实验鱼, 放入已经编号的玻璃缸中, 随机分成 7 组, 每组 3 个重复, 每个重复放 50 尾鱼用实验基础饲料驯养一周, 使其适应养殖系统和实验饲料后, 进行正式实验每组实验鱼的初始体质量无收稿日期 : 修回日期 : 基金项目 : 国家大宗淡水鱼产业技术体系湖州综合试验站 (CARS 45 39) 作者简介 : 孙丽慧 (1984 ), 女, 硕士, 研究方向为水产动物营养与饲料科学 E mail:miduo @126.com 通信作者 : 陈建明,E mail:aqua_labjm@163.com

2 6 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中缬氨酸需求量的研究 901 差异, 均为 1.35g 1.2 实验饲料实验饲料以鱼粉和晶体氨基酸混合物为蛋白源, 氨基酸模式参照测定的实验草鱼全鱼 40% 粗蛋白中氨基酸含量 ( 缬氨酸除外 ), 饲料缬氨酸水平以晶体缬氨酸调节, 用天冬氨酸和谷氨酸 (1 1) 调整百分比实验饲料缬氨酸实测值为 g/(kg 干饲料 ), 实验饲料设计配方的原料组成见表 1 实验饲料制作时, 先将原料粉碎, 并过 60 目筛, 再按比例混合并搅拌均匀后, 用绞肉机挤压成型, 制成直径 1mm 左右的硬颗粒于烘箱 50 烘干, 冷却后放入塑料袋, 保存于 4 冰箱中表 1 实验饲料组成及营养水平 ( 干物质基础 ) Tab.1 Compositionandnutrientlevelsoftheexperimentaldiet(DM basis) g/kg 项目 Items 原料 Ingredient 饲料 Diets 缬氨酸 Valine 天冬氨酸 Asparticacid 谷氨酸 Glutamicacid 其他氨基酸 1 Aminoacidmixture 鱼粉 Fishmeal 糊精 Dextrin 纤维素 Celulose 多矿 2 Mineralmixture 多维 3 Vitaminmixture 维 C 酯 VCphosphateeaser 氯化胆碱 Cholinechloride 鱼油 Fishoil 玉米油 Cornoil 羧甲基纤维素 CarboxymethylceluloseSodium 合计 Total 营养水平 Nutrientlevels 粗蛋白 CP 粗脂肪 EE 粗灰分 Ash 总氨基酸 TAA 缬氨酸 Valine 注 :1. 其他氨基酸组成 [g/(kg 干饲料 )]: 甲硫氨酸,7.09; 苏氨酸,10.99; 苯丙氨酸,11.41; 赖氨酸,20.30; 精氨酸,16.36; 组氨酸,6. 27; 异亮氨酸,10.25; 亮氨酸,19.71; 色氨酸,3.09; 天冬氨酸,25.69; 谷氨酸,39.99; 甘氨酸,21.04; 丙氨酸,17.11; 丝氨酸,11.17; 酪氨酸,8.26; 胱氨酸,3.41; 脯氨酸,11.48;2. 多矿组成 [g/(kg 预混料 )]: 硫酸亚铁,25; 硫酸铜,0.5; 硫酸锌,16.667; 硫酸锰,0.833; 氯化钠,50; 硫酸镁,66.667; 碘化钾,0.083; 亚硒酸钠,0.0083; 氯化钴,0.833; 沸石粉, ; 微晶纤维素, ;3. 多维组成 [mg/(kg 干饲料 )]: 维生素 A,17; 维生素 D 3,5;α 生育酚醋酸盐,270; 维生素 B 6,89; 维生素 B 2,30; 泛酸,200; 烟酸,7.2; 维生素 K,40; 叶酸,2.2; 维生素 B 1,23; 肌醇,4000; 维生素 B 12,0.2;D 生物素,2.4;α 纤维素,5314 Note:1.Aminoacidmixture(g/(kgdrydiet)):Met,7.09;Thr,10.99;Phe,11.41;Lys,20.30;Arg,16.36;His,6.27;Ile,10.25; Leu,19.71;Trp,3.09;Asp,25.69;Glu,39.99;Gly,21.04;Ala,17.11;Ser,11.17;Tyr,8.26;Cys,3.41;Pro,11.48;2.Mineral mixture(g/(kgmixture)):feso 4 7H 2 O,25;CuSO 4 H 2 O,0.5;ZnSO 4 o7h 2 O,16.667;MnSO 4 H 2 O,0.833;NaCl,50;MgSO 4,66.667; KI,0.083;Na 2 SeO 3,0.0083;CoCl 3 6H 2 O,66.667;KI,0.083;Na 2 SeO 3,0.0083;0.833;zeolite, ;Celulose, ;3.Vitamin mixture(mg/(kgdrydiet)):v A,17;V D3,5;α tocopherylacetate,270;v B6,89;V B2,30;pantothenicacid,200;nicotinicacid,7.2;V K, 40;folicacid,2.2;V B1,23;inositol,4000;V B12,0.2;D biotin,2.4;α celulose, 饲养条件实验于 2014 年 8 月 15 号至 10 月 28 号在本单位实验基地进行养殖系统为室内玻璃缸循环水养殖系统, 缸内配有生物过滤装置和气石, 每缸养殖水体 0.8m 0.5m 0.4m, 实验用水为经过充分曝气的自来水, 日换水量为总水体的一倍, 连续充气采用饱食投喂, 投饲时间为上午 8:00 中午 12:00 和下午 4:00 实验期间, 水温为自然水温 :25~30 ; 水质 :ph 为 7.4~8.0; 溶氧大于 5.0mg/L; 氨氮 0.14~0.20mg/L; 亚硝

3 902 上海海洋大学学报 26 卷酸盐 0.02~0.05mg/L 实验期间每天记录投饲量 1.4 取样及分析实验开始时随机取鱼 30 尾作为初始鱼样实验结束时, 将实验鱼停饲 24h 后称终末体质量每缸随机取鱼 10 尾为一混合样, 用于测定鱼体成分及氨基酸组成 ; 另取 5 尾鱼称量全长和体质量, 于冰盘上解剖取内脏和肝脏称重, 用于计算肥满度脏体指数和肝体指数, 肝脏分装于 2 个冷冻管, 先放入液氮罐中速冻, 再保存到 -20 冰箱中用于测定肝脏谷丙转氨酶 (ALT) 和谷草转氨酶 (AST) 活性水分粗蛋白粗脂肪和粗灰分的测定参照 AOAC 的方法 [18] : 水分测定采用 105 烘干恒重法 ; 粗蛋白测定采用凯氏定氮法 ; 粗脂肪测定采用以乙醚为抽提液的索氏抽提法 ; 粗灰分采用马福炉 550 焚烧法测定 ; 样品氨基酸组成测定采用酸水解法, 通过 6mol/L 的浓盐酸 110 真空水解 24h 的预处理后, 用氨基酸分析仪测定 ; 肝脏 ALT AST 活性的测定按照南京建成生物工程研究所提供的测试盒说明书采用赖氏法进行测定 1.5 计算公式实验鱼的增重率 (Weightgainrate,WGR) 饲料效率 (Feedeficiency,FE) 成活率 (Survival rate, SR) 蛋白质累积率 (Protein retention eficiency,pre) 脏体比 (Visceraindex,VSI) 肝体比 (Hepatosomatic index, HSI) 和肥满度 (Conditionfactor,CF) 计算公式如下 : W GR (%)=100 (W t -W o )/W o (1) 式中 :W GR 为增重率 ;W t 为草鱼终末体质量 (g); W o 为草鱼初始体质量 (g) F E =(W t -W o )/W f (2) 式中 :F E 为饲料效率 ;W t 为草鱼终末体质量 (g); W o 为草鱼初始体质量 (g);w f 为摄食饲料干质量 (g) S R (%)=100 (N t /N o ) (3) 式中 :S R 为成活率 ;N t 为每缸鱼剩余条数 ;N o 为每缸鱼最初条数 P RE (%)=100 (P r /P f ) (4) 式中 :P RE 为蛋白质累积率 ;P r 为鱼体蛋白质累积量 (g);p f 为蛋白质摄取量 (g) V SI (%)=100 (W v /W b ) (5) 式中 :V SI 为脏体比 ;W v 为内脏质量 (g);w b 为鱼体质量 (g) H SI (%)=100 (W h /W b ) (6) 式中 :H SI 为肝体比 ;W h 为肝脏质量 (g);w b 为鱼体质量 (g) C F (%)=100 (W b /L 3 ) (7) 式中 :C F 为肥满度 ;W b 为鱼体质量 (g);l 为体长 (cm) 1.6 数据处理及统计分析实验数据以平均数加总标准误表示, 用 SPSS16.0 for Windows 分析软件 (One way ANOVA) 对所得实验数据进行单因素方差分析, 若差异显著再做 SNK 多重比较显著水平 P 采用 0.05,P<0.05 为差异显著采用抛物线回归分析模型分别拟合鱼体增重率蛋白质累积率和饲料效率与饲料缬氨酸水平之间的关系, 求得草鱼鱼种对缬氨酸的最佳需求量 2 结果 2.1 草鱼鱼种生长情况由表 2 可知, 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种终末体质量增重率饲料效率和蛋白质累积率均有显著影响 (P<0.05) 草鱼鱼种终末体质量增重率蛋白质累积率随饲料缬氨酸水平的升高而显著增加, 当饲料缬氨酸水平达 12.6g/(kg 干饲料 ) 时达最大值, 继续增加饲料缬氨酸水平, 草鱼鱼种终末体质量增重率蛋白质累积率显著下降草鱼鱼种饲料效率随饲料缬氨酸水平的提高显著升高, 在饲料缬氨酸水平为 12.6 和 14.1 g/(kg 干饲料 ) 时达最大值 (P<0.05), 继续增加饲料缬氨酸水平, 饲料效率无显著变化

4 6 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中缬氨酸需求量的研究 903 饲料缬氨酸水平 /(g/kg) Dietaryvalinelevels 表 2 饲料缬氨酸水平对鱼体生长及体形指标的影响 Tab.2 Efectsofdietaryvalinelevelongrowthperformanceofgrascarp 初体质量 /g IBW 末体质量 /g FBW 成活率 SR 增重率 WGR 饲料效率 FE 蛋白质累积率 PRE 脏体比 VSI 肝体比 HSI 肥满度 CF a a 0.50 a a b b 0.54 a a c c 0.65 b b d d 0.71 bc cd f f 0.74 c e ef ef 0.74 c de de e 0.70 bc bc 总标准误 pooledse P 值 Pvalue 注 : 同列无字母或数据肩标相同字母表示差异不显著 (P>0.05), 不同字母表示差异显著 (P<0.05) 表 5 同 Note:Inthesamecolum,valueswithnoleterorthesameletersuperscriptsmeannosignificantdiference(P>0.05),whilediferentleter superscriptsmeansignificantdiference(p<0.05).thesameintab 草鱼鱼种鱼体必需氨基酸支链氨基酸和总氨基酸含量从表 3 可知, 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种鱼体必需氨基酸支链氨基酸和总氨基酸无显著影响 (P>0.05) 表 3 饲料缬氨酸水平对鱼体必需氨基酸支链氨基酸和总氨基酸含量的影响 Tab.3 Esentialaminoacids,branched chainaminoacidsandtotalaminoacidscontentofgrascarp 饲料缬氨酸水平 /(g/kg) 苏氨酸 Dietary valine Thr levels 缬氨酸 Val 异亮氨酸 Ile 亮氨酸 Leu 蛋氨酸 Met 苯丙氨酸 Phe 赖氨酸 Lys 组氨酸 His 精氨酸 Arg 总支链氨基酸 TBAA 1 总必需其他氨氨基酸基酸 TEAA 2 OtherAA 总氨基酸 TAA 总标准误 pooledse P 值 Pvalue 注 :1. 支链氨基酸为缬氨酸异亮氨酸亮氨酸 ;2. 必需氨基酸为苏氨酸缬氨酸异亮氨酸亮氨酸蛋氨酸苯丙氨酸赖氨酸组氨酸精氨酸 ( 色氨酸未检测 ) Note:1.BAAareVal,Ile,Leu;2.EAAareThr,Val,Ile,Leu,Met,Phe,lys,His,Arg(Trpcontentisnotdetected) 2.3 草鱼鱼种对饲料缬氨酸的需求量采用抛物线模型拟合草鱼鱼种的增重率数据和饲料缬氨酸水平之间的关系, 得二次多项式 : Y= X X (R 2 = ) 式中 :Y 表示草鱼鱼种增重率 ;X 表示饲料中的缬氨酸水平图 1 所示曲线最高处对应的缬氨酸水平为 13.68g/(kg 干饲料 ), 约占饲料蛋白的 4.02% 采用抛物线模型拟合草鱼鱼种的蛋白质累积率和饲料缬氨酸水平之间的关系, 得二次多项式 : Y= X X (R 2 = ) 式中 :Y 表示草鱼鱼种蛋白质累积率 ;X 表示饲料

5 904 上海海洋大学学报 26 卷中的缬氨酸水平图 2 所示曲线最高处对应的缬氨酸水平为 12.79g/(kg 干饲料 ), 约占饲料蛋白的 3.76% 图 1 饲料中缬氨酸水平对草鱼鱼种增重率的影响 Fig.1 EfectofdietaryvalineonWGR ofjuvenilegrascarp 图 3 饲料中缬氨酸水平对草鱼鱼种饲料效率的影响 Fig.3 EfectofdietaryvalineonFE ofjuvenilegrascarp 表 4 草鱼鱼种全鱼组成 ( 鲜重 ) Tab.4 Wholefishcompositionof grascarp(wetmaterbasis) 饲料缬氨酸水平 /(g/kg) Dietary valinelevels 水分粗蛋白粗脂肪粗灰分 Moisture CP EE Ash 图 2 饲料中缬氨酸水平对草鱼鱼种蛋白质累积率的影响 Fig.2 EfectofdietaryvalineonPRE ofjuvenilegrascarp 采用抛物线模型拟合草鱼鱼种的饲料效率和饲料缬氨酸水平之间的关系, 得二次多项式 : Y= X X (R 2 = ) 式中 :Y 表示草鱼鱼种饲料效率 ;X 表示饲料中的缬氨酸水平图 3 所示曲线最高处对应的缬氨酸水平为 13.06g/(kg 干饲料 ), 约占饲料蛋白的 3.84% 2.4 草鱼鱼种全鱼体组成从表 4 可知, 饲料缬氨酸水平对草鱼全鱼水分粗蛋白粗脂肪和粗灰分无显著影响 (P> 0.05) 初始鱼 Initialfish 总标准误 pooledse Pvalue 草鱼鱼种肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性从表 5 可知, 草鱼鱼种肝脏谷丙转氨酶活性在饲料缬氨酸水平 11.0g/(kg 干饲料 ) 时达最大值, 但各处理组之间并未表现出明显规律性 (P< 0.05) 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种肝脏谷草转氨酶无显著影响 (P>0.05) 3 讨论 3.1 饲料中缬氨酸水平对草鱼鱼种生长饲料利用和蛋白质累积率的影响研究表明, 缬氨酸是鱼类的必需氨基酸 [19] 在本实验中, 饲料中缬氨酸含量不足时, 草鱼鱼种的鱼体生长减缓, 饲料效率和鱼体蛋白质累积

6 6 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中缬氨酸需求量的研究 905 率下降其原因可能是当草鱼鱼种摄食缬氨酸含量不足的饲料后, 因必需氨基酸不平衡, 一方面限制了利用氨基酸合成体蛋白, 另一方面造成体内有过多的其他氨基酸被分解, 使鱼体因排出多余的氨而额外消耗能量, 从而影响了草鱼的生长和饲料的利用本实验中, 当饲料缬氨酸含量超过 12.6g/(kg 干饲料 ) 时, 随着饲料中缬氨酸含量的升高, 草鱼鱼种生长减缓, 鱼体蛋白质累积率显著降低, 其原因可能是缬氨酸过量引起新的氨基酸不平衡, 或者是机体因代谢过量的缬氨酸而消耗能量, 加重机体代谢负担, 从而造成鱼体生长减慢及饲料的浪费 [20] 该结果与对印度鲮 (Cirhinusmrigala Hamilton) [2] 南亚野鲮 (LabeorohitaHamilton) [3] 和喀拉 (Catlacatla Hamilton) [21] 等研究结果相似但对异育银鲫 (Carasius auratus gibelio) [4] 真鲷 (Pagrus major) [5] 和团头鲂 (Megalobrama amblycephala Yih) [8] 的研究结果则表明, 饲料中缬氨酸过量时, 鱼体增重趋于平稳, 并未显著降低造成这种差异的原因可能是实验鱼的种类实验剂量和饲养条件的不同表 5 草鱼鱼种肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性 Tab.5 ALTandASTactivityin hepatopancreasofgrascarp 谷丙转氨酶谷草转氨酶饲料缬氨酸水平 /(g/kg) /(U/g) /(U/g) Dietaryvalinelevels ALT AST ab a c d ab bc ab 总标准误 pooledse P 值 Pvalue 草鱼鱼种缬氨酸需求量鱼类缬氨酸需求量主要通过生长实验根据剂量效应曲线测定, 如折线模型和抛物线模型等以往研究中常用指标主要有 : 特定生长率增重率饲料转化率全鱼蛋白质沉积率肌肉氨基酸沉积率等本实验中, 分别以鱼体增重率蛋白质累积率和饲料效率为指标, 经抛物线回归模型分析, 求得草鱼鱼种对饲料缬氨酸的需求量为 12.79~13.68g/(kg 干饲料 ), 占饲料蛋白的 3.76% ~4.02% 此需求量高于真鲷 (Pagrus major) [5] 的 2%, 莫桑比克罗非鱼 (Oreochromis mosambicus) [22] 的 2.20%, 喀拉 (Catlacatla Hamilton) [21] 的 3.6%, 与团头鲂 (Megalobrama amblycephalayih) [8] 的 3.71% ~3.88%, 印度鲮 (CirhinusmrigalaHamilton) [2] 的 3.8%, 南亚野鲮 (LabeorohitaHamilton) [3] 的 3.8%, 大西洋鲑 (Salmosalar) [23] 的 3.9%, 建鲤 (Cyprinuscarpio var.jian) [6] 的 4.0% 和日本鳗鲡 (Anguila japonicas) [24] 的 4.0% 接近, 低于异育银鲫 (Carasiusauratusgibelio) [4] 的 4.53% 以上鱼类缬氨酸需求量的差异可能受鱼的种类实验条件和分析方法的影响此外, 有研究称支链氨基酸间的拮抗作用也会影响某种支链氨基酸的需求量 [25 26], 但在鱼类中拮抗作用机理并未完全清楚, 而不同鱼类之间表现也不尽相同 [27 30] 有研究表明, 当饲料中其他支链氨基酸含量满足其最低需求时, 则拮抗作用的影响较小 [31 32] 本实验中, 氨基酸模式设计均参照草鱼全鱼氨基酸模式, 使其满足其他支链氨基酸的需求, 以期减小支链氨基酸间的拮抗作用对缬氨酸需求量的影响 3.3 饲料中缬氨酸水平对草鱼鱼种全鱼体组成的影响国内外关于饲料缬氨酸水平对鱼体组成的影响已有报道, 且不同研究者得到的结论不完全 [4] 一致李桂梅等用缬氨酸水平范围为 0.54% ~2.29% 干物质的饲料饲喂异育银鲫 [Carasiusauratusgibelio,(3.17±0.01)g]65d 后发现饲料缬氨酸水平仅对鱼体粗灰分有显著影响 RAHIMNEJAD 和 LEE [5] 用含不同水平缬氨酸 (0.27% ~2.38% 干饲料 ) 的饲料饲养真鲷 [Pagrusmajor,(32.04±0.2)g]12 周后发现饲料缬氨酸水平对鱼体水分粗蛋白和粗脂肪均有 [6] 显著影响 DONG 等研究发现饲料缬氨酸水平对幼建鲤 (9.67g) 全鱼粗蛋白粗脂肪和灰分影 [33] 响显著周歧存等研究发现饲料缬氨酸水平仅对凡纳滨对虾 (Litopenaeusvannamei) 幼虾 (0.3 g) 全虾及肌肉粗蛋白有显著影响但也有研究者认为饲料缬氨酸水平不影响鱼体组成,HAN [7] 等发现饲料缬氨酸水平对牙鲆 (0.43g±0.01 [34] g) 鱼体组成影响不显著李燕发现饲料缬氨

7 906 上海海洋大学学报 26 卷酸水平对鲈鱼 (8.0g) 和大黄鱼 (Pesudosciaenacrocea [35] R.,6.0g) 鱼体组成均无显著影响窦秀丽研究表明饲料缬氨酸水平对鲈鱼 (183.28g±1.42 g) 鱼体组成影响不显著本实验条件下, 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种全鱼体组成也无显著影响造成这种差异的原因可能是鱼的种类生长阶段及实验剂量范围不同等鱼类的生长实际上是对饲料中蛋白质的沉积, 蛋白质的沉积则通过氨基酸的合成来实现目前, 关于饲料缬氨酸水平对鱼体氨基酸含量的 [35] 影响研究较少窦秀丽研究表明饲料缬氨酸水平对鲈鱼 (Lateolabraxjaponicus) 肌肉必需氨基酸组成无显著影响本实验结果与之相同, 饲料缬氨酸水平对草鱼鱼种鱼体各必需氨基酸及其总量各支链氨基酸及其总量均无显著影响 (P> 0.05) 出现该结果的原因可能是由于肌肉的氨基酸组成相对保守, 不容易受饲料中营养水平的影响 [36] 3.4 饲料中缬氨酸水平对草鱼肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性的影响 ALT 和 AST 广泛分布于鱼体各组织器官中, 通常存在于细胞膜细胞质和线粒体中, 是鱼类最重要的两种转氨酶, 在氨基酸代谢中起重要作用, 其活力与氨基酸代谢强弱有关 [4] 鱼类进行各项生命活动的酶活反应场所是肝脏, 故 ALT 和 [6] AST 在肝脏中活力较高 DONG 等研究发现缬氨酸显著增加幼建鲤肝脏谷丙转氨酶和谷草转 [4] 氨酶活力, 李桂梅等研究发现饲料缬氨酸水平对异育银鲫肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力均无显著影响, 而本实验中, 肝脏中 AST 活力不受饲料中缬氨酸含量的显著影响,ALT 活力在饲料缬氨酸水平为 11.0g/kg 时达最高值 (P< 0.05), 但各组之间并未表现出明显规律性, 饲料缬氨酸水平与鱼类肝脏 ALT 和 AST 活力的关系有待进一步探讨参考文献 : [1] NationalResearchCouncil,DivisiononEarthandLifeStudies, BoardonAgricultureandNaturalResources,etal.Nutrient requirementsoffishandshrimp[m].washington,dc, USA:NationalAcademiesPres,2011. [2] AHMEDI,KHANM A.Dietarybranched chainaminoacid valine,isoleucineand leucine requirementsoffingerling Indianmajorcarp,Cirhinusmrigala(Hamilton)[J].The BritishJournalofNutrition,2006,96(3): [3] ABIDISF,KHANM A.DietaryvalinerequirementofIndian majorcarp,labeorohita(hamilton) fry[j].journalof AppliedIchthyology,2004,20(2): [4] 李桂梅, 解绶启, 雷武, 等. 异育银鲫幼鱼对饲料中缬氨酸需求量的研究 [J]. 水生生物学报,2010,34(6): LIGM,XIESQ,LEIW,etal.Dietaryvalinerequirement forjuvenilegibelcarp(carasiusauratusgibelio)[j].acta HydrobiologicaSinica,2010,34(6): [5] RAHIMNEJADS,LEEKJ.Dietaryvalinerequirementof juvenileredseabream Pagrusmajor[J]. Aquaculture, 2013, : [6] DONG M,FENG L,KUANG SY,etal.Growth,body composition,intestinalenzymeactivitiesandmicrofloraof juvenilejiancarp(cyprinuscarpiovar.jian) fedgraded levelsofdietaryvaline[j].aquaculturenutrition,2013,19 (1):1 14. [7] HANYZ,HANRZ,KOSHIOS,etal.Interactiveefects ofdietaryvalineandleucineontwosizesofjapaneseflounder Paralichthysolivaceus[J].Aquaculture,2014,432: [8] REN M C,HABTE TSION H M,LIU B,etal.Dietary valine requirement of juvenile blunt snout bream (MegalobramaamblycephalaYih,1955)[J].Journalof AppliedIchthyology,2015,31(6): [9] 廖朝兴, 黄忠志. 草鱼种在不同生长阶段对饲料蛋白质需要的研究 [J]. 淡水渔业,1987(1):1 5. LIAOCX,HUANGZZ.Proteinrequirementsofgrasfryat diferentgrowthstages[j].freshwaterfisheries,1987(1): 1 5. [10] 赵库, 杨春富. 饲料蛋白质含量及颗粒大小对草鱼种生长的影响 [J]. 淡水渔业,2000,30(6): ZHAOK,YANGCF.Efectofproteincontentandgrainsize offeedongrowthofgrascrapfingerling[j].freshwater Fisheries,2000,30(6): [11] 曹俊明, 关国强, 刘永坚, 等. 饲料蛋白质脂肪碳水化合物水平对草鱼生长和组织营养成分组成的影响 [J]. 水产科技情报,1997,24(2): CAOJM,GUANGQ,LIUYJ,etal.Efectsofdiferent dietarylevelsofprotein,fatandcarbohydrateongrowthrate andtisuenutritionalcompositioningrascarp[j].fisheries Science&TechnologyInformation,1997,24(2): [12] 曹俊明, 田丽霞, 陈竹, 等. 饲料中不同脂肪酸对草鱼生长和组织营养成分组成的影响 [J]. 华南理工大学学报 ( 自然科学版 ),1996,24(s): CAOJM,TIANLX,CHENZ,etal.Efectofdietaryfaty acidsongrowthandtisuechemicalcomposition ofgras carp,ctenopharyngodonidelus[j].journalofsouthchina UniversityofTechnology(NaturalScience),1996,24(s): [13] GAOYJ,YANGH J,GUODQ,etal.Dietaryarginine

8 6 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中缬氨酸需求量的研究 907 requirementofjuvenilegrascarpctenopharyngodonidela (Valenciennesin Cuvier& Valenciennes, 1844)[J]. AquacultureResearch,2015,46(12): [14] WANGS,LIUYJ,TIANLX,etal.Quantitativedietary lysinerequirementofjuvenilegrascarpctenopharyngodon idela[j].aquaculture,2005,249(1/4): [15] 文华, 高文, 罗莉, 等. 草鱼幼鱼的饲料苏氨酸需要量 [J]. 中国水产科学,2009,16(2): WENH,GAOW,LUOL,etal.Determinationofdietary threonine requirement for juvenile gras carp, Ctenopharyngodonidela[J].JournalofFisherySciencesof China,2009,16(2): [16] 尚晓迪, 罗莉, 文华, 等. 草鱼幼鱼对异亮氨酸的需要量 [J]. 水产学报,2009,33(5): SHANGXD,LUOL,WENH,etal.Studyonisoleucine requirementforjuvenilegrascarp,cenopharyngodonidelus [J].JournalofFisheriesofChina,2009,33(5): [17] 孙丽慧, 陈建明, 潘茜, 等. 草鱼鱼种对饲料中苯丙氨酸需求量的研究 [J]. 上海海洋大学学报,2016,25(3): SUNLH,CHENJM,PANQ,etal.Dietaryphenylalanine requirementforfingerling gras carp (Ctenopharyngodon idela)[j].journalofshanghaioceanuniversity,2016,25 (3): [18] AOAC.Oficialmethodsofanalysis[M].15thed.Arlington: AsociationofOficialAgriculturalChemists,1990:98, 450,606,589. [19] WILSONRP.Aminoacidsandproteins[M]//HALVERJ E,HARDY R W. Fish Nutrition.3rd ed. New York: AcademicPres,2002: [20] WALTONM J.Aspectsofaminoacidmetabolism inteleost fish[m]//cowey C B, MACKIE A M, BELL JG. NutritionandFeedinginFish.London:AcademicPres, 1985: [21] RAVIJ,DEVARAJKV.Quantitativeesentialaminoacid requirementsforgrowthofcatla,catlacatla(hamilton) [J].Aquaculture,1991,96(3/4): [22] JAUNCEY K, TACON A G J, JACKSON A J. The quantitativeesentialaminoacidrequirementsoforeochromis (sarotherodon)mosambicus[c]//fishelsonl,yaron Z.Proceedingsofthe FirstInternationalSymposium on Tilapia in Aquaculture. Nazareth, Israel: Tel Aviv University,1983: [23] ROLLIN X. Criticalstudyofindispensable amino acids requirementsofatlanticsalmon(salmosalarl.)fry[d]. Belgium:UniversitéCatholiquedeLouvain,1999. [24] Commitee on AnimalNutrition, Board on Agriculture, NationalResearch Council. Nutrientrequirementsoffish [M].Washington,DC:NationalAcademyPres,1993. [25] D MELLO JPF,LEWISD.Aminoacidinteractionsin chick nutrition: 2. Interelationships between leucine, isoleucineandvaline[j].britishpoultryscience,1970,11 (3): [26] D MELLO JPF,LEWISD.Aminoacidinteractionsin chicknutrition:4.growth,foodintakeandplasmaamino acidpaterns[j].britishpoultryscience,1971,12(3): [27] CHANCER E,MERTZET,HALVER JE.Nutritionof salmonoid fishes. XI. Isoleucine, leucine, valine and phenylalaninerequirementsofchinook salmon and inter relationsbetweenisoleucineandleucineforgrowth[j].the JournalofNutrition,1964,83: [28] HUGHESSG,RUMSEY G L,NESHEIM M C.Dietary requirementsforesentialbranched chainaminoacidsbylake trout[j].transactionsoftheamericanfisheriessociety, 1983,112(6): [29] YAMAMOTO T, SHIMA T, FURUITA H. Antagonistic efectsofbranched chain aminoacidsinduced byexces protein bound leucine in diets for rainbow trout (Oncorhynchusmykis)[J].Aquaculture,2004,232(1/ 4): [30] CHOOPS,SMITHTK,CHOCY,etal.Dietaryexceses ofleucineinfluencegrowthandbodycompositionofrainbow trout[j].thejournalofnutrition,1991,121(12): [31] BARBOUR G,LATSHAW JD.Isoleucinerequirementof broilerchicksasafectedbytheconcentrationsofleucineand valineinpracticaldiets[j].britishpoultryscience,1992, 33(3): [32] BURNHAM D,EMMANSG C,GOUSR M.Isoleucine requirementsofthechicken:theefectofexcesleucineand valineontheresponsetoisoleucine[j].britishpoultry Science,1992,33(1): [33] 周歧存, 王用黎, 黄文文, 等. 凡纳滨对虾幼虾的缬氨酸需要量 [J]. 动物营养学报,2015,27(2): ZHOUQ C,WANG Y L,HUANG W W,etal.Valine requirementofjuvenilepacificwhiteshrimp, Litopenaeus vanname[j].chinesejournalofanimalnutrition,2015,27 (2): [34] 李燕. 鲈鱼和大黄鱼支链氨基酸与组氨酸营养生理的研究 [D]. 青岛 : 中国海洋大学,2010. LIY.Optimalrequirementsofbranchchainaminoacidsand histidineindietsofjapaneseseabas,lateolabraxjaponicus and largeyelow croakerpesudosciaena crocea R.[D]. Qingdao:OceanUniversityofChina,2010. [35] 窦秀丽. 鲈鱼 (Lateolabraxjaponicus) 生长中后期缬氨酸组氨酸和苏氨酸营养需求的研究 [D]. 大连 : 大连海洋大学,2014. DOUXL.Thestudyontheoptimumrequirementofdietary valine, histidine and threonine of Japanese seabas (Lateolabraxjaponicus)inthemiddleandlategrowingstage [D].Dalian:DalianOceanUniversity,2014. [36] 路凯. 花鲈对亮氨酸异亮氨酸和色氨酸需求量的研究 [D]. 青岛 : 中国海洋大学,2015.

9 908 上海海洋大学学报 26 卷 LUK.Studiesonrequirementsofleucine,isoleucineand tryptophan in diets of Japanese seabas, Lateolabrax maculatus[d].qingdao:oceanuniversityofchina,2015. Dietary valine requirementfor juvenile gras carp (Ctenopharyngodon idela) SUNLihui,CHENJianming,SHENBinqian,JIANGJianhu,HUANGAixia,PANQian (1.AgricultureMinistryKeyLaboratoryofHealthyFreshwaterAquaculture,ZhejiangInstituteofFreshwaterFisheries,Huzhou ,Zhejiang,China;2.KeyLaboratoryofFishHealthandNutritionofZhejiangProvince,ZhejiangInstituteofFreshwater Fisheries,Huzhou ,Zhejiang,China) Abstract:A75dfeedingtrailwasconductedtodeterminethedietaryvalinerequirementforjuvenilegras carp(ctenopharyngodonidela).sevenisonitrogenousdietswithgradedlevelsofvalinerangingfrom6.3to 15.8g/kgofdrydietwerefedtotriplicategroupsoffishwithanaverageinitialbodyweightof1.35g, respectively.theresultsshowedthattheweightgainrate,feedeficiencyandproteinretentioneficiencywere significantlyafected(p<0.05).weightgainrateandproteinretentionincreasedsignificantlywithincreasing dietaryvalinelevelsfrom6.3to12.6g/kg,butdecreasedsignificantlywithfurtherincreaseto15.8g/kg. Feedeficiencyincreasedsignificantlywithincreasingdietaryvalinelevelsfrom6.3to12.6g/kg,butkept stablewithincreaseto15.8g/kg.fishesentialaminoacids,leucine,isoleucine,totalaminoacidsand wholefishcontentwerenotafectedsignificantlybydietaryvalinelevels(p>0.05).alt(glutamic pyruvic transaminase)activityinhepatopancreasreachedthemaximumvalueatthedietaryvalinelevelof11.0g/kg, buttherewasnosignificantdiferencebetweenthegroups.ast(glutamic oxalacetictransaminase)activityin hepatopancreaswasnotafectedsignificantlybydietaryvalinelevels(p>0.05).second degreepolynomial regresionanalysisbasedonweightgainrate,proteinretentioneficiencyandfeedeficiencyindicatedthatthe requirementsofdietaryvalineforfingerlinggrascarpwere g/kgofdrydiet,3.76% 4.02% of dietaryprotein,respectively. Keywords:juvenilegrascarp;valine;requirement;weightgainrate;feedeficiency;proteinretention eficiency

3 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中苯丙氨酸需求量的研究 389 正式实验实验鱼共 420 尾, 随机分成 7 组, 每组 3 重复, 每个重复放鱼 20 尾每组实验鱼的初始体质量为 13.21g 1.2 实验饲料实验饲料以酪蛋白明胶和晶体氨基酸混合物为蛋白源, 氨基酸模式与测定的实验草鱼

3 期孙丽慧, 等 : 草鱼鱼种对饲料中苯丙氨酸需求量的研究 389 正式实验实验鱼共 420 尾, 随机分成 7 组, 每组 3 重复, 每个重复放鱼 20 尾每组实验鱼的初始体质量为 13.21g 1.2 实验饲料实验饲料以酪蛋白明胶和晶体氨基酸混合物为蛋白源, 氨基酸模式与测定的实验草鱼文章编号 :1674-5566(2016)03-0388-08 DOI:10.12024/jsou.20150901545 草鱼鱼种对饲料中苯丙氨酸需求量的研究孙丽慧, 陈建明, 潘茜, 沈斌乾, 姜建湖, 黄爱霞 (1. 浙江省淡水水产研究所农业部淡水渔业健康养殖实验室, 浙江湖州 313001;2. 浙江省淡水水产研究所浙江省鱼类健康与营养重点实验室, 浙江湖州 313001) 摘要 : 为了研究草鱼鱼种对饲料中苯丙氨酸的需求量,