3 期宋长友, 等 : 不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量研究 397 响, 确定不同规格团头鲂的最适赖氨酸需要量, 为进一步优化团头鲂人工配合饲料提供理论依据 表 1 实验饲料配方及营养成分组成 (%, 干物质基础 ) Tab.1 Formulationandproximatecomposition

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1 文章编号 : (2016) DOI: /jsou 不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量研究 1 2 1,2 1,2 1,2 2 2 宋长友, 任鸣春, 谢骏, 戈贤平, 刘波, 周群兰, 缪凌鸿, 陈汝丽, 夏斯蕾, 张武肖, 赵振新 (1. 南京农业大学无锡渔业学院, 江苏无锡 ;2. 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心, 江苏无锡 ) 摘要 : 为探讨不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量, 以不同生长阶段的团头鲂 [ 规格 Ⅰ:(52.49±0.18)g, 规格 Ⅱ:(101.85±1.8)g] 为研究对象, 配制赖氨酸含量为 1.29% 1.71% 2.09% 2.48% 2.88% 和 3.27% 的等氮等能饲料进行 10 周养殖实验 结果表明 : 与对照组相比,(1)2.88% 和 3.27% 组显著提高了规格 Ⅰ 的增重率 特定生长率和蛋白质效率, 显著降低了饵料系数和摄食量 ;2.48% 组显著提高了规格 Ⅱ 的特定生长率, 显著降低了饵料系数,3.27% 组提高了规格 Ⅱ 的特定生长率和摄食量 ;(2)2.88% 和 3.27% 组分别显著提高了规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的鱼体粗脂肪含量 ;(3)2.48% 组显著降低了规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的血清谷丙转氨酶活性, 显著提高了规格 Ⅰ 的尿素含量 ;3.27% 组显著提高了规格 Ⅱ 的血清白蛋白 总蛋白和球蛋白含量 ; 表明适宜水平赖氨酸可能对鱼体肝脏具有保护作用, 能够提高其代谢及免疫力 ;(4)2.48% 2.88% 和 3.27% 组均显著提高了规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的血清赖氨酸含量, 显著降低了规格 Ⅰ 的血清精氨酸和总必需氨基酸含量 以鱼体特定生长率为评价指标, 经折线模型回归分析得到规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的最适赖氨酸需要量分别为饲料干重的 2.07% 和 2.19%( 饲料粗蛋白含量的 6.27% 和 6.63%) 关键词 : 团头鲂 ; 不同生长阶段 ; 赖氨酸 ; 需要量 ; 生长中图分类号 :S963 文献标志码 :A 团头鲂 (Megalobramaamblycephala) 俗称武昌鱼 鳊鱼 隶属硬骨鱼纲 (Osteichthyes), 鲤形目 (Cypriniformes), 鲤科 (Cyprinidae), 亚科 (Culterinae), 鲂属 (Megalobrama), 原产于湖北省武昌县 [1], 近年来养殖范围逐渐扩大, 产量逐年上升, 已成为我国重要的大宗淡水养殖鱼类之一 蛋白质和氨基酸是鱼类生长和发育过程中所必需的重要营养素 鱼类有十种必需氨基酸, 饲料中缺乏必需氨基酸会导致饲料利用率低下 鱼体生长缓慢 赖氨酸常被称为第一限制性氨基酸 [2], 是常用植物性蛋白原料中最易缺乏的必需氨基酸 [3], 含量过高或不足会导致鱼体氨基酸不平衡, 影响鱼类对饲料蛋白源的利用, 不利于鱼类生长 [4] 目前, 国内外学者已对鲤 (Cyprinuscarpio) 鲫 (Carasiusauratus) 草鱼 (Ctenopharyngodon idelus) 和青鱼 (Mylopharyngodonpiceus) 等多种鱼类的日粮赖氨酸需要量进行了研究, 也开展了许多团头鲂基本营养需要量的研究, 如蛋白质 [5] 碳水化合物 [6] [7] [8] 脂肪和精氨酸等 但多数研究仅选取了其中一个生长阶段, 不能反映鱼类整个生长过程的营养需求 鱼类在不同生长发育阶段的营养需求存在差异 [9-10], 而关于相同养殖条件下鱼类不同生长阶段营养需求的比较, 国内 [11] 外均少有报道 廖英杰等报道团头鲂幼鱼的赖氨酸需要量为 2.36%, 但有关养成期较大规格团头鲂的赖氨酸需要量还未见报道 本实验旨在研究并比较不同赖氨酸水平饲料对不同规格团头鲂生长 血液生化及游离必需氨基酸的影 收稿日期 : 修回日期 : 基金项目 : 公益性行业 ( 农业 ) 科研专项经费 ( ); 现代农业产业技术体系建设专项资金项目 (CARS-46) 作者简介 : 宋长友 (1988 ), 男, 博士研究生, 研究方向为水产动物营养与饲料 E mail:scy_0317@163.com 通信作者 : 刘波,E mail:liub@ frc.cn

2 3 期宋长友, 等 : 不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量研究 397 响, 确定不同规格团头鲂的最适赖氨酸需要量, 为进一步优化团头鲂人工配合饲料提供理论依据 表 1 实验饲料配方及营养成分组成 (%, 干物质基础 ) Tab.1 Formulationandproximatecompositionoftheexperimentaldiets(%,drymater) 原料 ingredient 组别 groups 鱼粉 fishmeal 酪蛋白 casein 明胶 gelatin 豆油 soybeanoil 大豆磷脂 soybeanlecithin 氨基酸混合物 aminoacidpremix 氯化胆碱 cholinechloride 维生素 CvitaminC 维生素预混料 vitaminpremix 磷酸二氢钙 monocalciumphosphate 矿物质预混料 mineralpremix 糊精 dextrin 微晶纤维素 microcystalinecelulose 羧甲基纤维素 carboxymethylcelulose 乙氧基喹啉 ethoxyquin 甘氨酸 glycine L 赖氨酸盐酸盐 L lysine HCl 合计 total 成分分析 /%(dryweight)proximateanalysis 赖氨酸 lysine 粗蛋白 crudeprotein 粗脂肪 crudelipid 粗灰分 ash 总能 grosenergy(kj/g) 注 :1. 晶体氨基酸 ( 每 100g 饲料 ): 组氨酸,0.31g; 异亮氨酸,0.68g; 亮氨酸,0.87g; 蛋氨酸,0.43g; 苯丙氨酸,0.66g; 苏氨酸,0.71g; 缬氨酸,0.56g; 天冬氨酸,1.46g; 丝氨酸,0.55g; 甘氨酸,1.37g; 丙氨酸,1.25g; 胱氨酸,0.14g; 酪氨酸,0.27g; 色氨酸,0.12g; 谷氨 酸,1.11g 2. 维生素预混料 ( 每千克饲料 ): 维生素 A,9000IU; 维生素 D,2500IU; 维生素 E,45mg; 维生素 K 3,2.2mg; 维生素 B 1,3.2mg; 维生素 B 2, 10.9mg; 维生素 B 6,50mg; 维生素 B 12,1.16mg; 生物素,0.5mg; 泛酸盐,10mg; 叶酸,1.65mg; 肌醇,150mg; 烟酸,25mg 3. 矿物质添加剂 ( 每千克饲料 ):CuSO 4 5H 2 O,0.025g;FeSO 4 7H 2 O,0.28g;ZnSO 4 7H 2 O,0.22g;MnSO 4 4H 2 O,0.09g; Na 2 SeO 3 5H 2 O, g;KI, g;CoCl 2 6H 2 O,0.001g Notes:1.Crystalineaminoacids(per100gdiet):L histidine,0.31g;l isoleucine,0.68g;leucine,0.87g;l methionine,0.43g;l phenylalanine,0.66g;l threonine,0.71g;l valine,0.56g;l asparticacid,1.46g;serine,0.55g;glycine,1.37g;alanine,1.25g; L cystine,0.14g;l tyrosine,0.27g;tryptophan,0.12g;glutamicacid,1.11g. 2.Vitaminpremix(perkgdiet):VitaminA,9000IU;VitaminD,2500IU;VitaminE,45mg;VitaminK 3,2.2mg;VitaminB 1,3.2mg; VitaminB 2,10.9mg;VitaminB 6,50mg;VitaminB 12,1.16mg;Biotin,0.5mg;Pantothenate,10mg;Folicacid,1.65mg;Inositol,150 mg;niacinacid,25mg. 3.Mineralpremix(perkgdiet):Cupricsulphatepentahydrate,0.025g;Feroussulphateheptahydrate,0.28g;Zincsulphateheptahydrate, 0.22g; Manganese sulphatetetrahydrate, 0.09 g; Sodium selenatepentahydrate, g; Potasium iodide, g; Cobalt chloridepentahydrate,0.001g. 1 材料与方法 1.1 实验饲料本实验采用单因子梯度实验设计, 以鱼粉 酪蛋白和明胶为蛋白源, 豆油为脂肪源, 糊精为糖源配制蛋白为 32.67% 脂肪为 6.59% 的基础 饲料 以团头鲂鱼体氨基酸含量为标准, 添加相应晶体氨基酸, 使除赖氨酸以外各种氨基酸含量均达到鱼体中含量 ( 见表 2) 实验饲料为在基础饲料中添加 0 0.5% 1.0% 1.5% 2.0% 和 2.5% 的不同水平晶体赖氨酸, 并以甘氨酸为填充剂调整至相同氨基酸比例, 以酪蛋白和明胶作

3 398 上海海洋大学学报 25 卷 为等氮替代物, 按表 1 所示配方制作 6 组等氮等能的半精制饲料 实际测得饲料中赖氨酸含量分别为 1.29% 1.71% 2.09% 2.48% 2.88% 和 3.27% 晶体赖氨酸(L 氨基酸盐酸盐,99%) 购于上海斐雅科技发展有限公司, 各原料粉碎过 50 目筛, 按配比充分混匀后, 用小型饲料制粒机 (SLP 45 型, 中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所 ) 制成粒径 1~2mm 的沉性颗粒饲料,30 烘干后放于 -20 冰箱保存备用 氨基酸 aminoacids 表 2 饲料中氨基酸组成 (%, 干物质基础 ) Tab.2 Aminoacidcompositionoftheexperimentaldiets(%,drymater) 15% 酪蛋白提供 suppliedby 15% casein 必需氨基酸 esentialaminoacids 3.75% 明胶提供 suppliedby 3.75% gelatin 5% 鱼粉提供 suppliedby 5% fishmeal 晶体氨基酸提供 suppliedbycrystaline aminoacidpremix 总计 total 33% 鱼体蛋白 33% whole bodyprotein 赖氨酸 Lys 组氨酸 His 异亮氨酸 Ile 亮氨酸 Leu 精氨酸 Arg 蛋氨酸 Met 苯丙氨酸 Phe 苏氨酸 Thr 缬氨酸 Val 非必需氨基酸 non esentialaminoacids 天冬氨酸 Asp 丝氨酸 Ser 甘氨酸 Gly 丙氨酸 Ala 胱氨酸 Cys 酪氨酸 Tyr 谷氨酸 Glu 注 : 为变量 ; 色氨酸在水解过程中被破坏, 没有检测到 Note: isvariable;tryptophancouldnotbedetectedafteracidhydrolysis. 1.2 养殖实验实验鱼由中国水产科学研究院淡水渔业研究中心南泉基地提供, 养殖实验在该基地水泥池塘 ( 规格 :60m 30m) 进行, 池塘平均水深 2.5 m 不同规格团头鲂分别进行单独实验, 用对照组饲料 ( 赖氨酸含量 1.29%) 投喂驯化 7d 后, 分别随机选取规格一致 体质健康的团头鲂 324 尾 ( 规格 Ⅰ:52.49±0.18g/ 尾, 规格 Ⅱ:101.85± 1.85g/ 尾 ), 分别随机分成 6 组, 其中 1.29% 赖氨酸为对照组,1.71% 2.09% 2.48% 2.88% 3.27% 为实验组 每组 3 个重复, 每个重复 18 尾鱼, 分别放养于 18 个网箱 ( 规格 Ⅰ:1m 1m 1 m, 规格 Ⅱ:2m 1m 1m) 中 实验期间每天定时定点 (8:00,12:00 和 16:00) 投喂至表观饱食, 并根据天气 摄食和生长情况适当调整投喂量 实验期间水体温度 27~30, 溶氧 >5.0mg/L, 氨氮 <0.05mg/L,pH7.2~ 样品采集方法 养殖实验结束前, 对实验鱼禁食 24h, 分别对每个网箱进行计数 称重 每个网箱随机选取 3 尾实验鱼并单独称重, 用 MS 222( 浓度 100mg/ L) 快速深度麻醉,2.5mL 医用注射器 ( 肝素钠润湿 ) 尾静脉取血, 转移至 1.5mL 抗凝管中离心 (4,7500r/min,10min), 分离血清并保存于 -80 备用 每个网箱另取 3 尾实验鱼,-20 保存, 用于测定全鱼体成分 1.4 样品测定方法 常规生长指标测定每个规格每个网箱全部称重并计数, 依据相应公式计算增重率 特定生长率 饵料系数 摄食量 蛋白质效率和成活率 全鱼体成分分析干物质 粗蛋白 粗灰分依据 AOAC 颁布的 [12] 方法测定, 干物质用常压干燥法, 粗蛋白 (N

4 3 期宋长友, 等 : 不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量研究 ) 用凯氏定氮法, 粗脂肪用索氏抽提法, 先将样品在电炉上炭化后用马弗炉 560 灼烧法测定灰分 血液指标及血清游离氨基酸测定谷丙转氨酶 (ALT) 谷草转氨酶 (AST) 白蛋白 (ALB) 总蛋白 (TP) 球蛋白 (GLB) 和尿素 (Urea) 等血液生化指标用深圳迈瑞 BS-400 全自动生化分析仪测定, 所用试剂均购于深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 血清游离氨基酸先用三氯乙酸沉淀血清中的蛋白, 再用江南大学食品科技学院测试中心安捷伦 1100 液相色谱分析仪测定 饲料氨基酸测定将各赖氨酸水平饲料粉碎, 用 6mol/L 的 HCl 在 110 下水解 24h, 再用江南大学食品科技学院测试中心安捷伦 液相色谱分析仪测定其中的氨基酸含量 1.5 相关指标计算公式 W GR (%)=100 (W t -W 0 )/W 0 (1) 式中 :W GR 为增重率 ;W 0 为初始鱼体均重 ;W t 为终末鱼体均重 S GR (% /d)=100 (lnw t -lnw 0 )/t (2) 式中 :S GR 为特定生长率 ;W 0 为初始鱼体均重 ;W t 为终末鱼体均重 ;t 为饲喂天数 P ER (%)=100 (W t -W 0 )/(F I P i ) (3) 式中 :P ER 为蛋白质效率 ;W 0 为初始鱼体均重 ;W t 为终末鱼体均重 ;F I 为每尾鱼平均摄食饲料总量 ( 风干样重 );P i 为饲料蛋白含量 F CR =F I /(W t -W 0 ) (4) 式中 :F CR 为饵料系数 ;F I 为每尾鱼平均摄食饲料总量 ( 风干样重 );W 0 为初始鱼体均重 ;W t 为终末鱼体均重 S R (%)=100 N t /N (5) 式中 :S R 为成活率 ;N t 为收获尾数 ;N 为放养尾数 1.6 数据统计与分析 用 SPSS19.0 对实验数据进行单因素方差分析 (One wayanova), 差异显著时再进行多重比较 (Duncan sprocedure),p<0.05 表示差异显著, 所有结果均以平均值 ± 标准误 (mean±se) 表示 通过折线模型 (Broken line) 回归分析, 根据特定生长率与饲料中赖氨酸含量的相关性, 得出不同规格团头鲂的最适赖氨酸需要量 2 结果与分析 2.1 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂生长性能的影响不同水平赖氨酸对不同规格团头鲂生长性能的影响如表 3 所示, 随日粮中赖氨酸水平的提高, 规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的鱼体末重 增重率 特定生长率和蛋白质效率呈先升高后趋于平缓的趋势, 饵料系数呈先降低后趋于平缓的趋势 与对照组相比,2.48% 2.88% 和 3.27% 组显著提高了规格 Ⅰ 的增重率 特定生长率和蛋白质效率 (P< 0.05), 显著降低了规格 Ⅰ 的饵料系数和摄食量 (P<0.05);2.48% 组显著降低了规格 Ⅱ 的饵料系数 (P<0.05),2.48% 和 3.27% 组显著提高了规格 Ⅱ 的特定生长率和增重率 (P<0.05); 规格 Ⅰ 的成活率, 规格 Ⅱ 的蛋白质效率和成活率均无显著差异 (P>0.05) 相同赖氨酸添加水平下, 规格 Ⅰ 的增重率和特定生长率均高于规格 Ⅱ, 而蛋白质效率和成活率均低于规格 Ⅱ 经折线模型回归分析发现规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的特定生长率与赖氨酸添加水平呈非线性关系, 如图 1 和图 2 所示, 当赖氨酸添加水平分别为 2.068%( 饲料粗蛋白含量的 6.27%) 和 2.189% ( 饲料粗蛋白含量的 6.63%) 时, 规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的特定生长率最大 2.2 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂体成分的影响如表 4 所示, 规格 Ⅰ 的鱼体粗蛋白 水分和灰分, 规格 Ⅱ 的鱼体粗蛋白均无显著性差异 (P> 0.05) 与对照组相比,2.88% 组显著提高了规格 Ⅰ 的鱼体粗脂肪含量 (P<0.05);3.27% 组显著提高了规格 Ⅱ 的鱼体粗脂肪含量 (P<0.05), 显著降低了水分含量 (P<0.05) 相同赖氨酸水平下, 规格 Ⅰ 的鱼体粗蛋白和粗脂肪含量均高于规格 Ⅱ, 而水分和灰分含量均低于规格 Ⅱ 2.3 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂血液生化指标的影响由表 5 可知, 与对照组相比,2.48% 组显著降低了规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的 ALT 活性 (P<0.05), 显著降低了规格 Ⅰ 的 Urea 含量 (P<0.05);3.27% 组显著提高了规格 Ⅱ 的 TP ALB 和 GLB 含量 (P< 0.05); 规格 Ⅰ 的 AST TP ALB GLB ALB/GLB 以及规格 Ⅱ 的 AST Urea 均差异不显著 (P>0.05)

5 400 上海海洋大学学报 25 卷 表 3 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂生长性能的影响 Tab.3 EfectsofdietarylysinelevelongrowthperformanceindiferentgrowthstagesofM.amblycephala 赖氨酸含量 /% lysinecontent 规格 Ⅰ(initialbodyweightof52.49g) 初始体重 /gibw 52.6± ± ± ± ± ±0.11 终末体重 /gfbw 119.7±2.07 b 124.2±0.47 ab 126.9±0.58 ab 129.4±2.91 a 128.8±2.08 a 131.6±4.76 a 增重率 /% WGR ±4.45 b ±1.13 ab ±1.13 ab ±5.36 a ±4.36 a ±9.36 a 特定生长率 /(% /d)sgr 1.47±0.03 b 1.54±0.01 ab 1.58±0.04 ab 1.60±0.03 a 1.60±0.03 a 1.63±0.07 a 饵料系数 FCR 2.28±0.12 a 2.04±0.07 ab 1.96±0.03 b 1.88±0.09 b 1.89±0.06 b 1.86±0.04 b 摄食量 /(% /d)fi 3.16±0.10 a 2.97±0.11 ab 2.91±0.05 ab 2.82±0.09 b 2.83±0.06 b 2.84±0.06 b 蛋白质效率 /PER 1.34±0.07 b 1.48±0.05 ab 1.54±0.03 ab 1.61±0.08 a 1.64±0.06 a 1.60±0.08 a 成活率 /% SR 93.3± ± ± ± ± ±1.67 规格 Ⅱ(initialbodyweightof101.85g) 初始体重 /gibw 102.4± ± ± ± ± ±1.41 终末体重 /gfbw ±0.77 b ±1.96 b ±7.05 ab ±8.03 a ±4.90 ab ±6.33 ab 增重率 /% WGR 87.87±1.23 c 89.33±2.68 bc ±5.37 abc ±7.47 a ±4.76 abc ±3.43 ab 特定生长率 /(% /d)sgr 1.13±0.01 c 1.13±0.03 bc 1.25±0.05 abc 1.29±0.06 a 1.25±0.01 abc 1.27±0.03 ab 饵料系数 FCR 1.80±0.02 a 1.75±0.04 ab 1.64±0.10 ab 1.58±0.09 b 1.76±0.05 ab 1.66±0.03 ab 摄食量 /(% /d)fi 2.33±0.01 b 2.34±0.01 ab 2.39±0.02 ab 2.39±0.03 ab 2.38±0.02 ab 2.39±0.01 a 蛋白质效率 /PER 1.70± ± ± ± ± ±0.03 成活率 /% SR ± ± ± ± ± ±1.88 注 : 同行肩标无字母或字母相同表示差异不显著 (P>0.05), 肩标字母不同表示差异显著 (P<0.05), 下表同 Note:MeansinthesamecolumnsharingthesameorwithoutsuperscriptleterarenotsignificantlydiferentdeterminedbyDuncan stest(p>0. 05),whilearesignificantlydiferent(P<0.05).Thesameasfolowing. 图 1 饲料赖氨酸水平对规格 Ⅰ 团头鲂特定生长率的影响 Fig.1 EfectsofdietarylysinelevelonSGRof M.amblycephala(initialbodyweightof52.49g) 酸含量先降低后升高, 在 2.09% 时显著低于其他组 (P<0.05) 2.88% 组规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的血清游离苯丙氨酸含量均显著提高 (P<0.05), 而血清苏氨酸含量均显著降低 (P<0.05);2.48 和 2.88% 组规格 Ⅰ 的血清游离总必需氨基酸的含量显著升高 (P<0.05) 规格 Ⅰ 的血清游离异亮氨酸 蛋氨酸和规格 Ⅱ 的血清游离组氨酸 蛋氨酸含量无显著性差异 (P>0.05) 2.4 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂血清必需氨基酸含量的影响如表 6 所示, 随着饲料中赖氨酸水平的提高, 规格 Ⅰ 血清赖氨酸含量呈先升高后降低的趋势, 并在添加量为 2.88% 时达到最高 (P< 0.05); 血清精氨酸含量呈逐渐降低的趋势 规格 Ⅱ 的血清赖氨酸含量呈逐渐升高趋势, 在 3.27% 时显著高于其他组 (P<0.05); 血清精氨 图 2 饲料赖氨酸水平对规格 Ⅱ 团头鲂特定生长率的影响 Fig.2 EfectsofdietarylysinelevelonSGRof M.amblycephala(initialbodyweightof101.85g)

6 3 期宋长友, 等 : 不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量研究 401 表 4 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂体成分的影响 (%, 干物质基础 ) Tab.4 EfectsofdietarylysinelevelonbodycompositionindiferentgrowthstagesofM.amblycephala (%,drymater) 赖氨酸含量 /% lysinecontent 规格 Ⅰ(initialbodyweightof52.49g) 粗蛋白 crudeprotein 19.47± ± ± ± ± ±0.89 粗脂肪 crudefat 8.36±0.84 b 6.69±0.36 b 7.52±0.39 b 7.49±0.95 b 11.09±0.88 a 9.09±0.99 ab 水分 moisture 66.26± ± ± ± ± ±1.65 灰分 ash 3.24± ± ± ± ± ±0.72 规格 Ⅱ(initialbodyweightof101.85g) 粗蛋白 crudeprotein 15.60± ± ± ± ± ±0.30 粗脂肪 crudefat 6.75±0.31 b 6.75±0.38 b 5.68±0.13 b 6.13±0.24 b 7.00±1.26 b 8.74±0.50 a 水分 moisture 69.18±0.05 a 68.96±1.00 a 70.10±1.01 a 69.81±0.32 a 68.30±2.05 a 66.08±0.90 b 灰分 ash 3.48±0.57 ab 3.50±0.19 ab 3.58±1.20 ab 3.67±0.12 a 3.38±0.36 b 3.37±0.56 b 表 5 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂血液生化指标的影响 Tab.5 EfectsofdietarylysinelevelonbloodbiochemicalindicesindiferentgrowthstagesofM.amblycephala 赖氨酸含量 /% lysinecontent 规格 Ⅰ(initialbodyweightof52.49g) 谷丙转氨酶 /(U/L)ALT 1.32±0.13 a 1.18±0.10 a 1.20±0.10 a 0.85±0.60 b 1.33±0.12 a 1.50±0.17 a 谷草转氨酶 /(U/L)AST 50.57± ± ± ± ± ±3.49 总蛋白 /(mmol/l)tp 30.24± ± ± ± ± ±0.86 白蛋白 /(mmol/l)alb 13.03± ± ± ± ± ±0.54 球蛋白 /(mmol/l)glb 17.57± ± ± ± ± ±0.58 白球比 ALB/GLB 0.72± ± ± ± ± ±0.03 尿素 /(mmol/l)urea 0.60±0.03 b 0.68±0.05 ab 0.71±0.05 ab 0.75±0.06 a 0.64±0.02 ab 0.62±0.02 b 规格 Ⅱ(initialbodyweightof101.85g) 谷丙转氨酶 /(U/L)ALT 1.27±0.15 a 1.15±0.13 a 0.97±0.09 ab 0.70±0.07 b 1.15±0.18 a 1.23±0.13 a 谷草转氨酶 /(U/L)AST 35.67± ± ± ± ± ±3.67 总蛋白 /(mmol/l)tp 35.07±1.31 b 33.56±1.63 b 33.72±0.38 b 33.67±0.75 b 33.02±0.93 b 38.72±1.50 a 白蛋白 /(mmol/l)alb 14.26±0.27 b 13.43±0.56 b 13.54±0.24 b 14.13±0.42 b 13.55±0.40 b 16.13±0.63 a 球蛋白 /(mmol/l)glb 20.18±0.74 b 19.18±0.15 b 20.18±0.23 b 19.53±0.40 b 19.47±0.55 b 22.57±0.90 a 白球比 ALB/GLB 0.73±0.02 ab 0.72±0.03 ab 0.68±0.02 b 0.75±0.02 a 0.70±0.00 ab 0.72±0.02 ab 尿素 /(mmol/l)urea 0.69± ± ± ± ± ± 讨论 3.1 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂生长性能影响的比较赖氨酸是鱼体正常生长所必需的氨基酸, 饲料中添加赖氨酸对不同规格团头鲂的生长均有影响 赖氨酸水平为 1.27% ~2.48% 时, 规格 Ⅰ 的特定生长率和蛋白质效率均随赖氨酸水平的增加而升高, 而摄食量逐渐降低, 说明在一定范围内, 规格 Ⅰ 生长速度的提高可能增加了饲料利用和蛋白转化能力 ; 规格 Ⅱ 的特定生长率和摄食量随赖氨酸添加量的增加而趋于平缓, 蛋白质效 率没有显著变化, 说明规格 Ⅱ 的生长速度提高与摄食量的增加有关 这些数据表明饲料中添加赖氨酸对不同规格团头鲂生长影响的因素并不相同, 这与牛磺酸对不同规格大菱鲆 (Scophthalmus maximus) [13] 和真鲷 (Pagrus major) [14] 生长的影响一致 两种规格团头鲂的生长速度在赖氨酸水平超过 2.48% 后趋于稳定, 这可能是因为过量的赖氨酸导致脱氨基作用加重, 能量消耗增加 [8], 也可能是由于体内赖氨酸与精氨酸的拮抗作用影响了两种氨基酸的吸收 转运及代谢 [15], 进而影响了生长

7 402 上海海洋大学学报 25 卷 表 6 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂血清必需氨基酸含量的影响 Tab.6 Efectsofdietarylysinelevelontheconcentrationofserum esentialaminoacidsin diferentgrowthstagesofm.amblycephala 必需氨基酸 /(mg/l) EAA 赖氨酸含量 /% lysinecontent 规格 Ⅰ(initialbodyweightof52.49g) 赖氨酸 Lys 15.76±1.21 d 31.93±0.65 c 35.87±0.14 c 57.75±3.74 ab 61.12±4.8 a 50.26±0.94 b 组氨酸 His 41.87±1.37 ab 51.51±1.28 a 44.16±2.01 ab 39.20±3.86 b 48.38±2.31 ab 45.03±4.23 ab 异亮氨酸 Ile 7.10± ± ± ± ± ±0.66 亮氨酸 Leu 13.21±0.52 a 12.56±1.32 ab 10.06±0.74 b 11.93±0.67 ab 10.60±0.58 ab 11.97±0.85 ab 精氨酸 Arg 37.28±0.29 a 36.60±1.71 ab 26.77±1.76 cd 31.63±1.95 bc 24.86±1.91 d 23.26±0.27 d 苯丙氨酸 Phe 15.65±0.70 b 16.18±1.88 b 15.07±1.02 b 9.92±0.49 c 23.71±1.23 a 16.60±1.62 b 苏氨酸 Thr 58.90±0.33 a 60.65±2.53 a 46.96±1.57 b 57.95±3.80 a 41.64±3.54 b 44.42±1.34 b 缬氨酸 Val 15.25±0.98 b 15.45±1.02 b 14.26±0.70 b 15.67±1.15 b 15.76±0.95 b 20.97±0.35 a 蛋氨酸 Met 9.31± ± ± ± ± ±0.50 总必需氨基酸 EAA ±8.15 b ±6.05 a ±6.26 b ±0.12 a ±12.49 a ±7.05 ab 规格 Ⅱ(initialbodyweightof101.85g) 赖氨酸 Lys 22.33±2.60 d 22.26±1.51 d 27.27±0.86 d 50.40±0.25 c 57.15±1.92 b 72.77±1.08 a 组氨酸 His 39.69± ± ± ± ± ±1.42 异亮氨酸 Ile 10.40±0.72 a 8.53±0.09 b 8.29±0.69 b 9.65±0.06 ab 8.67±0.18 ab 10.07±0.63 ab 亮氨酸 Leu 19.14±1.18 ab 15.05±0.38 b 15.32±1.29 b 18.23±0.06 ab 16.67±0.94 ab 20.53±0.90 a 精氨酸 Arg 30.40±1.49 ab 29.17±0.91 ab 25.54±0.71 b 28.22±1.89 ab 28.97±0.53 ab 33.45±2.44 a 苯丙氨酸 Phe 12.50±1.27 c 12.48±0.77 c 13.41±0.08 bc 12.57±0.87 c 18.24±0.90 a 17.05±1.77 ab 苏氨酸 Thr 79.40±1.61 a 47.92±2.59 b 41.95±3.42 bc 37.81±2.13 c 40.71±2.19 bc 40.21±0.64 bc 缬氨酸 Val 23.41±2.13 ab 24.50±1.24 a 17.30±1.87 c 21.19±0.09 abc 19.20±0.16 bc 23.82±1.60 ab 蛋氨酸 Met 10.05± ± ± ± ± ±0.01 总必需氨基酸 EAA ±10.94 ab ±4.25 cd ±1.30 d ±2.68 bc ±1.37 b ±10.49 a 3.2 不同规格团头鲂的赖氨酸需要量比较 水产动物必需氨基酸的需要量因动物种类 [16,17] [18] 生长阶段 食性以及统计模型等的不同而不同, 不同生长阶段因能量需要不同也存在很大差异 本研究除鱼体规格不同, 其他因素均相同, 以特定生长率为评价指标, 通过折线模型回归分析得到规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的赖氨酸最适需要量分别为饲料干重的 2.07 和 2.19%, 低于团头鲂幼鱼 (2.36%) [11] 的最适需要量, 这与其他报道一样, 相对较大规格团头鲂 (52.49g) 的赖氨酸需要量大于团头鲂幼鱼 (3.34g), 但是超过 52.49g 后团头鲂的赖氨酸需要量变化不大 饵料系数是衡量鱼体对配合饲料利用程度的重要指标, 饵料系数的高低除与饲料质量有关, 也与鱼体对饲料的消化 吸收和代谢相关 [19] 本研究中, 相同赖氨酸添加水平下规格 Ⅰ 的饵料系数高于规格 Ⅱ, 可能原因是规格 Ⅰ 生长速度较快, 代谢也比规格 Ⅱ 旺盛, 消耗的能量相对较多, 需要摄取更多的饲料才能满足生长 [20], 具体原因有待进一步研究 3.3 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂体成分影响的比较 本试验中赖氨酸对两种规格团头鲂的鱼体粗蛋白含量没有显著影响, 与澳洲银鲈 (Bidyanus bidyanus) [21] 和许氏平 (sebasteschlegeli) [22] 的研究结果一致, 也有研究表明大西洋鳕鱼 (Atlantic cod) [23] 和军曹鱼 (Rachycentron canadum) [2] 的鱼体粗蛋白含量随赖氨酸水平的提高呈先增加后趋于平稳的趋势 两种规格团头鲂的鱼体粗脂肪含量随饲料赖氨酸水平的增加先趋于稳定, 超过 2.48% 后呈升高趋势, 说明赖氨酸水平超过鱼体最适需要量后, 过剩的赖氨酸通过脱氨基作用用于脂肪合成和沉积 [24], 这与鲶鱼研究结果一致 [25] 相同赖氨酸水平下, 规格 Ⅰ 的鱼体粗蛋白和粗脂肪含量均高于规格 Ⅱ, 灰分均低于规格 Ⅱ, 可能是因为相同赖氨酸水平下规格 Ⅰ 的摄食量高于规格 Ⅱ, 可提供更多的营养, 增加了蛋白和脂肪的积累, 导致规格 Ⅰ 的鱼体粗蛋白和粗脂肪高于规格 Ⅱ

8 3 期宋长友, 等 : 不同生长阶段团头鲂的赖氨酸需要量研究 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂血清生化指标影响的比较 鱼体的血液生化指标受机体代谢 营养水平 健康状况及免疫功能的影响 [26] 谷丙转氨酶 (ALT) 和谷草转氨酶 (AST) 是鱼体肝脏中重要的氨基转移酶 [27], 正常情况下在血清中活性较低, 当发生肝脏损伤或病变时才大量释放到血清中 本研究中, 规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的血清 ALT 呈先降低后升高趋势, 与许氏平 [22] 的研究结果一致, 且均在添加量为 2.48% 时显著低于其他组, 这说明日粮赖氨酸不平衡对团头鲂肝脏有一定的影响 相同赖氨酸添加水平下, 规格 Ⅰ 的 ALT 和 AST 活性均高于规格 Ⅱ, 表明随着团头鲂规格的增大, 赖氨酸对肝脏的保护作用逐渐增强 [28] 血清总蛋白 (TP) 包括白蛋白 (ALB) 和球蛋白 (GLB), 它们的含量可反映机体蛋白质的吸收 代谢和免疫情况 [29] 本研究中规格 Ⅰ 的 TP 和 ALB 没有显著差异, 可能是由于规格 Ⅰ 的生长速度较快,TP 和 ALB 主要用于营养物质的吸收和利用 [30] ; 而规格 Ⅱ 的 TP 和 ALB 均在添加量为 3.27% 时显著高于其他组, 可能是因为高剂量组鱼体的蛋白质合成旺盛, 吸收到血液中的蛋白质含量较高, 进而导致 TP 和 ALB 含量显著高于其 [31] 他组, 与赖氨酸对犊牛的影响结果一致 血清尿素含量是衡量动物体内蛋白质和氨基酸代谢状况的最直观指标 [32] 研究发现, 当饲料中氨基酸缺乏和不平衡时, 鱼体的氨基酸分解代谢增强, 血清尿素含量也随之升高 [32-33], 与本研究中规格 Ⅰ 的血清尿素含量变化趋势一致 而规格 Ⅱ 的血清尿素含量没有显著变化, 说明在未达到最适赖氨酸需求量时, 尿素含量变化不显著, 与 CHEN 等对斑节对虾 (Penaeusmonodon) 的研究结果一致 [34] 3.5 饲料赖氨酸水平对不同规格团头鲂血清中游离必需氨基酸影响的比较 鱼体血清中游离氨基酸含量受摄食赖氨酸含量的影响 [35], 能够反映机体的氨基酸吸收情况 本试验中, 规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的血清赖氨酸含量随饲料中赖氨酸水平的提高逐渐升高, 在 2.88% 时达到最高, 这与团头鲂幼鱼 [11] 五条 (Seriolaquinqueradiata) [36] 等的研究结果一致, 超过 2.88% 后, 规格 Ⅰ 的血清赖氨酸含量显著降低, 可能是因为鱼体储存氨基酸能力有限, 过量 的赖氨酸被排出体外 ; 而规格 Ⅱ 继续升高, 可能是因为规格 Ⅱ 的蛋白质及脂质合成需要吸收更多的氨基酸才能满足 本研究中, 在最适赖氨酸需要量范围内, 规格 Ⅰ 和规格 Ⅱ 的血清精氨酸与赖氨酸含量呈相反趋势, 表明团头鲂对赖氨酸和精氨酸的吸收存在拮抗作用 [31], 与大西洋鲑 (Salmosalar) [37] 的结论一致 参考文献 : [1] 柯鸿文. 一种优良淡水鱼团头鲂 (Megalobrama amblycephala) 的繁殖和饲养 [J]. 水生生物学集刊, 1975,5(3): KOH W.Anexcelentfresh waterfoodfish,megalobrama amblycephala,anditspropagatingandculturing[j].acta HydrobiologicaSinica,1975,5(3): [2] ZHOU Q C,WU ZH,CHISY,etal.Dietarylysine requirementofjuvenilecobia(rachycentroncanadum)[j]. Aquaculture,2007,273(4): [3] SMALLB C,SOARESJR.Quantitativedietarylysine requirementofjuvenilestripedbasmoronesaxatilis[j]. AquacultureNutrition,2000,6(4): [4] 周贤君, 解绶启, 谢从新, 等. 异育银鲫幼鱼对饲料中赖氨酸的利用及需要量研究 [J]. 水生生物学报,2006,30 (3): ZHOUXJ,XIESQ,XIECX,etal.Theutilizationand requirementofdietarylysineforjuvenilegibelcarp[j].acta HydrobiologicaSinica,2006,30(3): [5] LIX F,LIU W B,JIANG YY,etal.Efectsofdietary protein and lipid levels in practical diets on growth performanceand bodycomposition ofbluntsnoutbream (Megalobramaamblycephala)fingerlings[J].Aquaculture, 2010,303(1/4): [6] ZHOUC,LIUB,GEX,etal.Efectofdietarycarbohydrateon the growth performance, immune response, hepatic antioxidantabilitiesandheatshockprotein70expresionof Wuchangbream,Megalobramaamblycephala[J].Journalof AppliedIchthyology,2013,29(6): [7] 蒋阳阳, 李向飞, 刘文斌, 等. 不同蛋白质和脂肪水平对 1 龄团头鲂生长性能和体组成的影响 [J]. 水生生物学报,2012,36(5): JIANGYY,LIXF,LIUW B,etal.Efectsofdiferent proteinandlipidlevelsonthegrowthperformanceandbody composition of blunt snout bream (Megalobrama amblycephala) yearlings[j].actahydrobiologicasinica, 2012,36(5): [8] REN M C,LIAO Y J,XIE J,etal.Dietaryarginine requirementofjuvenilebluntsnoutbream, Megalobrama amblycephala[j].aquaculture,2013, : [9] 姚林杰, 叶元土, 蔡春芳, 等. 团头鲂两个生长阶段适宜

9 404 上海海洋大学学报 25 卷 蛋白 / 脂肪比的需要量 [J]. 水产学报,2014,38(6): YAOLJ,YEYT,CAICF,etal.Researchontheoptimal protein to lipid (energy) ratio ofbluntsnoutbream (Megalobramaamblycephala) intwogrowthstages[j]. JournalofFisheriesofChina,2014,38(6): [10] 林淑琴. 不同生长阶段大黄鱼的蛋白质和蛋 / 能比营养研究 [D]. 青岛 : 中国海洋大学,2013. LINSQ.Efectsofdietaryproteinlevelsanditsratioto energyongrowthperformancesandmetabolicresponsesof largeyelowcroakeratdiferentstages[d].qingdao:ocean UniversityofChina,2013. [11] 廖英杰, 刘波, 任鸣春, 等. 赖氨酸对团头鲂幼鱼生长 血清生化及游离必需氨基酸的影响 [J]. 水产学报, 2013,37(11): LIAOYJ,LIU B,REN M C,etal.Efectsoflysineon growth,physiologicalandbiochemicalindexesofbloodand esentialaminoacidsofseruminjuvenilebluntsnoutbream (Megalobramaamblycephala)[J].JournalofFisheriesof China,2013,37(11): [12] AsociationofOficialAnalyticalChemists(AOAC).Oficial MethodsofAnalysis[M].16thed.Washington:Asociation ofoficialanalyticalchemists,1995. [13] QIGS,AIQH,MAIKS,etal.Efectsofdietarytaurine supplementationtoacasein baseddietongrowthperformance and taurine distribution in two sizes ofjuvenile turbot (ScophthalmusmaximusL.)[J]. Aquaculture, 2012, : [14] MATSUNARIH,FURUITA H,YAMAMOTO T,etal. Efectofdietarytaurineandcystineongrowthperformanceof juvenileredseabream Pagrusmajor[J]. Aquaculture, 2008,274(1): [15] KAUSHIK S J, FAUCONNEAU B. Efects oflysine administrationonplasmaarginineandonsomenitrogenous catabolitesinrainbow trout[j].comparativebiochemistry andphysiologyparta:physiology,1984,79(3): [16] KIM K,KAYESTB,AmundsonCH.Requirementsfor lysineandargininebyrainbowtrout(oncorhynchusmykis) [J].Aquaculture,1992,106(3/4): [17] LUOZ,LIUYJ,MAIKS,etal.Advanceinresearcheson argininerequirementforfish: areview[j]. Journalof fisheriesofchina,2004,28(4): [18] ZHOUF,XIONGW,XIAOJX,etal.Optimum arginine requirement of juvenile black sea bream, Sparus macrocephalus[j].aquacultureresearch,2010,41(10): [19] 李爱杰. 水产动物营养与饲料学 [M]. 北京 : 中国农业出版社,1996. LIA J.Aquaticanimalnutritionandfeedscience[M]. Beijing:ChinaAgriculturalPres,1996. [20] 陈义方, 林黑着, 牛津, 等. 不同规格南美白对虾蛋白质 需要量的研究 [J]. 广东农业科学,2011,38(13): CHEN Y F, LIN H Z, NIU J, etal. Dietaryprotein requirements for three sizes of pacific white shrimp, Litopenaeusvannamei[J].GuangdongAgriculturalSciences, 2011,38(13): [21] YANG SD,LIU FG,LIOU CH.Asesmentofdietary lysinerequirementforsilverperch (Bidyanusbidyanus) juveniles[j].aquaculture,2011,312(1/4): [22] 严全根, 解绶启, 雷武, 等. 许氏平 幼鱼的赖氨酸需求量 [J]. 水生生物学报,2006,30(4): YANQ G,XIESQ,LEIW,etal.Quantitativedietary lysinerequirementforjuvenilesebastesschlegeli[j].acta HydrobiologicaSinica,2006,30(4): [23] GRISDALE HELLANDB,HATLENB,MUNDHEIM H,et al. Dietary lysine requirementand eficiency oflysine utilizationforgrowth ofatlanticcod[j]. Aquaculture, 2011,315(3/4): [24] CHATZIFOTISS,TAKEUCHIT,SEIKAIT.Theefectof dietarycarnitinesupplementationongrowthofredseabream (Pagrusmajor) fingerlingsattwolevelsofdietarylysine [J].Aquaculture,1996,147(3/4): [25] TANTIKITTIC,CHIMSUNGN.Dietarylysinerequirement offreshwatercatfish(mystusnemuruscuv.& Val.)[J]. AquacultureResearch,2001,32(S1): [26] 周玉, 郭文场, 杨振国. 鱼类血液学指标研究的进展 [J]. 上海水产大学学报,2001,10(2): ZHOUY,GUOW C,YANGZG.Advancesinthestudyof haemotologicalindicesoffish[j]. JournalofShanghai FisheriesUniversity,2001,10(2): [27] FYNN AIKINSK,HUGHESSG,VANDENBERG G W. Protein retention and liveraminotransferase activitiesin Atlanticsalmonfeddietscontainingdiferentenergysources [J]. Comparative Biochemistry and Physiology PartA: Physiology,1995,111(1): [28] 刘颖. 饲料蛋白水平及蛋白质量对彭泽鲫养殖全期生长的影响 [D]. 北京 : 中国农业科学院,2008. LIUY.Long termefectsofdietaryproteinlevelsandprotein qualityongrowthperformanceoncruciancarp(carasius aruatus,pengze):two yearstudy[d].beijing:chinese AcademyofAgriculturalSciences,2008. [29] AFFONSOEG,DACOSTASILVAE,TAVARES DIASM, etal.efectofhighlevelsofdietaryvitamincontheblood responsesofmatrinx (Bryconamazonicus)[J].Comparative BiochemistryandPhysiologyPartA:Molecular&Integrative Physiology,2007,147(2): [30] 万金娟, 刘波, 戈贤平, 等. 日粮中不同水平维生素 C 对团头鲂幼鱼免疫力的影响 [J]. 水生生物学报,2014,38 (1): WANJJ,LIUB,GEXP,etal.EfectsofdietaryvitaminC onthenon specificimmunity,threehspsmrnaexpresion and disease resistance of juvenile Wuchang bream

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