18期通排P13开始

Size: px

Start display at page:

Download "18期通排P13开始"

椅酿阙
5 years ago
Views:

1 科技导报 215,33(18) 吉林人参低聚肽的免疫调节作用何丽霞, 刘睿, 任金威, 陈启贺, 王军波, 张召锋, 李勇北京大学医学部公共卫生学院营养与食品卫生学系, 北京 1191 摘要为研究吉林人参低聚肽 (GOP) 对小鼠的免疫调节作用, 选取 28 只 SPF 级雌性 BALB/c 小鼠, 随机分为 7 组 : 空白对照组乳清蛋白组 ( mg/kg) 及 5 个 GOP 组 ( 3 6 mg/kg) 连续灌胃 3 d 后, 进行免疫 7 项实验测定, 观察 GOP 对小鼠免疫器官相对重量细胞免疫功能体液免疫功能单核 - 巨噬细胞功能和 NK 细胞活性的影响结果表明 :GOP 显著提高了 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力迟发型变态反应能力抗体生成细胞数小鼠碳廓清指数巨噬细胞吞噬率和吞噬指数 NK 细胞活性 (P<.5), 且效果优于乳清蛋白由此可知,GOP 可以通过增强细胞免疫功能体液免疫功能单核 - 巨噬细胞吞噬能力和 NK 细胞活性, 起到增强免疫力的作用关键词人参低聚肽 ; 免疫功能 ; 细胞免疫 ; 体液免疫 ; 巨噬细胞吞噬能力 ; 自然杀伤细胞活性中图分类号 R151.2 文献标志码 A doi /j.issn Immunomodulatory effects of Panax ginseng oligopeptide of Jilin Province HE Lixia, LIU Rui, REN Jinwei, CHEN Qihe, WANG Junbo, ZHANG Zhaofeng, LI Yong Department of Nutrition and Food Hygiene, School of Public Health, Peking University Health Science Center, Beijing 1191, China Abstract This paper investigates the immunomodulatory effects of Panax ginseng oligopeptide of Jilin providence. A total of 28 specific pathogen free (SPF) female BALB/c mice are randomly divided into 7 groups: the control group, the whey protein group (whey protein of mg/kg) and five groups of Panax ginseng oligopeptide (GOP) at the doses of,,, 3 and 6 mg/kg. After 3 days, seven assays are performed to determine the cell-mediated immunity, the humoral immunity, the macrophage phagocytosis and the natural killer (NK) cell activity in the mice, including the splenic lymphocyte proliferation and the delayed- type hypersensitivity assays (for cell-mediated immunity), the IgM antibody response of spleen to SRBC and serum hemolysin level assays (for humoral immunity), the carbon clearance assay and the phagocytic capacity of peritoneal cavity phagocytes assays (for macrophage phagocytosis) and the NK cell activity assays. The results show that the GOP helps significantly to increase the proliferation response of the splenic lymphocyte to the ConA, the delayed-type hypersensitivity to the SRBC, the IgM antibody response of the spleen to the SRBC, the serum hemolysin level, the mg/kg macrophage phagocytosis carbon clearance assay, the phagocytic rate (mg/kg) and the phagocytic index, and the NK cell activity ( mg/kg), and the effects are better than those of the whey protein. In conclusion, the GOP could improve the immune functions in mice, by enhancing the functions of the cell- mediated immunity, the humoral immunity, the macrophage phagocytosis and the NK cell activity. Keywords natural killer cell activity Panax ginseng oligopeptide; immune function; cell- mediated immunity; humoral immunity; macrophage phagocytosis; 人体免疫系统是人体抵御病原菌侵犯, 保持健康避免发生各种疾病的防御系统随着现代生活节奏加快工作压力加大及工业化生产对环境造成的破坏使人类免疫系统功能降低, 各种疾病的发病率呈现上升趋势而许多疾病的发收稿日期 : ; 修回日期 : 基金项目 : 国家科技支撑计划项目 (26BAD27B8) 作者简介 : 何丽霞, 博士研究生, 研究方向为生物活性肽与健康, 电子信箱 :helixiapku@163.com; 李勇 ( 通信作者 ), 教授, 研究方向为营养与疾病, 电子信箱 :liyong@bjmu.edu.cn 引用格式 : 何丽霞, 刘睿, 任金威, 等. 吉林人参低聚肽的免疫调节作用 [J]. 科技导报, 215, 33(18):

2 科技导报 215,33(18) 生发展与机体免疫系统的功能失调和免疫功能缺陷有密切联系, 因此从调节患者免疫功能着手, 治疗机体疾病已受到广泛重视作为中国传统的名贵中草药的人参 (Panax ginseng C. A. Mey.), 所含有的多种活性成分日益受到关注中国是世界上最大的人参生产国, 年产鲜参 2.28 万 t, 占世界总产量的 48% 左右 [1], 研究和开发人参的保健作用将为中国产生巨大的经济效益中国的人参为五加科植物, 主要产于吉林省自 212 年 9 月 4 日中国卫生部批准人参成为新资源食品后, 中国人参产业呈现了新的发展契机, 人参的应用将由单一的中药材拓展到食品饮料等领域中国现存最早的药物学专著神农本草经如是记载 : 人参, 味甘微寒, 主补五脏, 安精神, 定魂魄, 止惊悸, 除邪气, 明目, 开心益智久服, 轻身延年近年来国内外大量研究也证实人参具有增强免疫力改善记忆力抗肿瘤抗氧化抗衰老抗辐射抗疲劳等多种生物活性这可能源于人参根茎中含有的多种重要的生物活性物质, 如人参皂甙糖类氨基酸及肽类挥发油植物甾醇类有机酸含氮物质维生素和矿物质及某些酶类等 [1,2] 目前大多数研究集中在人参皂甙, 而对人参中的重要成分低聚肽类的研究较少, 仅 [3] [4~6] [7, 8] 有的也只在其提取结构确定和细胞水平的研究上, 在 [9,1] [11] 动物实验方面的也只在降糖和调节胰岛功能方面 ; 在免疫调节功能方面尚未见报道低聚肽在人体内不需消化可直接吸收, 比单个氨基酸吸收更有效, 可直接参与蛋白质的合成 [12], 可避免活性物质的浪费, 大大提高其生理调节作用为明确吉林人参低聚肽 (ginseng oligopeptides,gop) 具体的免疫调节作用, 本研究拟从特异性免疫和非特异性免疫两方面, 探讨 GOP 对小鼠的免疫调节作用 1 材料与方法 1.1 样品吉林人参低聚肽, 淡黄色固体粉末, 由吉林肽谷生物工程有限责任公司提供, 利用生物酶解技术从吉林人参中得到的小分子生物活性肽的混合物经高效液相色谱纯化后, 用质谱仪分析其分子质量分布可知, 混合物主要以小分子低聚肽为主, 质量分数为 95.42% 进一步用高效液相色谱仪分析其中游离氨基酸组成, 可知氨基酸总量占 3.94%, 其中精氨酸脯氨酸天门冬氨酸丙氨酸谷氨酸较多 1.2 主要试剂及仪器主要试剂 : 刀豆蛋白 A(ConA, 西格玛试剂 ) 胎牛血清 (Hyclone 公司 ) RPMI164(Hyclone 公司 ) 甲基噻唑基四唑 (MTT, 西格玛试剂 ) 姬姆萨染液 (Giemsa stain, 北京雷根生物技术有限公司 ) 乳酸锂 ( 西格玛试剂 ) 硝基氯化四氮唑 (INT, 西格玛试剂 ) 吩嗪二甲酯硫酸盐 (PMS, 西格玛试剂 ) 氧化性辅酶 I(NAD, 西格玛试剂 ) Triton X-1( 西格玛试剂 ) 绵羊红细胞 (SRBC, 北京大学医学部实验动物中心 ) 鼠 T 淋巴瘤细胞系 (YAC-1 细胞, 北京大学毒理学系 ) 主要仪器 :Eppendorf 高速冷冻离心机 ( 德国艾本德股份公司 ) Adventurer TM 通用型分析天平 ( 美国奥豪斯国际贸易有限公司 ) Bio-Rad55 型酶联免疫检测仪 ( 美国伯乐生命医学产品有限公司 ) Sanyo 二氧化碳培养箱 ( 日本三洋电机株式会社 ) CK4-SL 倒置显微镜 ( 奥林巴斯 ( 中国 ) 投资有限公司 ) 1.3 实验动物健康 SPF 级 BALB/c 雌性小鼠 28 只,6~8 周龄, 体重 18~ 22 g, 由北京大学医学部实验动物中心提供分笼饲养, 每笼 5 只, 自由饮食饮水饲养实验室符合国标清洁级, 温度范围 (25±1), 相对湿度 5%~6%, 室内照明控制在 12 h/12 h 光暗周期节律 1.4 实验分组与处理 BALB/c 雌性小鼠 28 只, 适应期后按体重随机分为 7 组 : 空白对照组乳清蛋白组 ( mg/kg) 及 5 个 GOP 组 ( 3 6 mg/kg), 各组小鼠再随机分为 4 个亚组 ( 每组 1 只 ), 每个亚组进行不同的实验测定空白对照组小鼠灌胃蒸馏水, 其余各组灌胃相应浓度的乳清蛋白及 GOP 水溶液各组小鼠均给以普通饲料, 自由进食和饮水每天灌胃 1 次, 连续灌胃 3 d, 参照保健食品检验与评价技术规范 (23 年版 ) [13] 进行测定 1.5 测定方法迟发型变态反应血清溶血素的测定抗体生成细胞检测取各组第 1 亚组 1 只小鼠, 实验 26 d 时腹腔注射.2 ml 2%( 体积分数 )SRBC 进行免疫,3 d 时测量左后足跖部厚度, 然后在测量部位皮下注射 2 μl 2%( 体积分数 ) SRBC, 注射后 24 h 测量左后足跖部厚度, 同一部分测 3 次, 取平均值, 观察迟发型变态反应能力 ( 足跖增厚法 ) 之后摘除眼球采血于离心管内, 放置约 1 h,2 r/min 离心 1 min, 收集血清, 进行血清溶血素 ( 半数溶血值 (HC 5) 法 ) 测定小鼠颈椎脱臼处死, 取出脾脏, 采用 Jerne 改良玻片法进行抗体生成细胞检测小鼠碳廓清实验取各组第 2 亚组 1 只小鼠, 按体重从小鼠尾静脉注入稀释的印度墨汁 (1 ml/kg), 待墨汁注入立即计时注入墨汁后 2 1 min, 分别从内眦静脉丛取血 2 μl, 并立即将其加到 2 ml.1% Na 2CO 3 溶液中用 721 分光光度计在 6 nm 波长处测光密度值 (OD), 以 Na 2CO 3 溶液作空白对照将小鼠处死, 取肝脏和脾脏, 用滤纸吸干脏器表面血污, 分别称重计算吞噬指数, 表示小鼠碳廓清的能力小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验取各组第 4 亚组 1 只小鼠, 每鼠腹腔注射 2% 鸡红细胞悬液 1 ml 间隔 3 min, 颈椎脱臼处死动物, 经腹腔注入生理盐水 2 ml, 轻揉腹部 2 次后, 切开腹壁吸出腹腔洗液 1 ml, 平均分滴于 2 片载玻片上, 放入垫有湿纱布的搪瓷盒内, 63

3 科技导报 215,33(18) 移至 37 CO 2 培养箱温育 3 min 孵毕, 于生理盐水中漂洗, 除去未贴片细胞晾干, 以 1 1 丙酮甲醇溶液固定,4%( 体积分数 )Giemsa- 磷酸缓冲液染色 3 min, 再用蒸馏水漂洗晾干油镜下计数巨噬细胞, 每张片计数 1 个, 计算吞噬百分率和吞噬指数 ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化实验及自然杀伤细胞 (NK) 细胞活性测定取各组第 3 亚组 1 只小鼠, 无菌取脾, 至于盛有适量无菌 Hank's 液平皿中, 用镊子轻轻将脾磨碎, 制成单个细胞悬液经 2 目筛网过滤, 用 Hank's 液洗 2 次 ( 每次 1 r/min 离心 1 min) 将细胞悬浮于 1 ml 的 RPMI 164 完全培养液 ( 含 1% 小牛血清 ) 中, 用 1% 冰醋酸稀释后计数 ( 活细胞数应在 95% 以上 ), 用台盼兰染色计数 ( 活细胞数应在 95% 以上 ) 最后用 RPMI 164 完全培养液调整细胞浓度为个 /ml, 采用乳酸脱氢酶法进行 NK 细胞活性检测 ; 调整细胞浓度为个 /ml, 采用 MTT 法进行淋巴细胞增殖能力的检测 ( 用加 ConA 孔的光密度值减去不加 ConA 孔的光密度值代表淋巴细胞的增殖能力 ) 1.6 统计方法数据均以 ( 平均值 ± 标准差 ) 表示采用 SPSS 17. 软件进行单因素方差分析, 差异显著者进行方差齐性检验, 方差齐者以 LSD 法对多组均数进行 post-hoc 分析, 方差不齐者以 Dunnett's T3 法对多组均数进行 post-hoc 分析以 P<.5 为差异显著性标准 2 结果 2.1 GOP 对小鼠体重和免疫器官相对重量的影响由表 1 可知, 各组初始体重和终末体重均无显著差异 (P>.5) GOP 3 mg/kg 组小鼠脾脏指数显著高于空白对照组 (P<.5), 但与乳清蛋白组差异不显著 (P>.5) GOP 3 g/kg 组小鼠胸腺指数显著高于空白对照组和乳清蛋白组 (P<.5),GOP g/kg 组小鼠胸腺指数显著乳清蛋白组 (P<.5), 但与空白对照组差异不显著 (P>.5) 2.2 GOP 对小鼠细胞免疫功能的影响 Table 1 表 1 GOP 对小鼠体重和免疫器官相对重量的影响 (xˉ ±s,n=1) Effects of Panax ginseng oligopeptide on relative weight of immune organs of mice ( xˉ ±s, n=1) 剂量 /(mg kg -1 ) 初始体重 /g 终末体重 /g 脾脏指数 /(mg g -1 ) 胸腺指数 /(mg g -1 ) 空白对照组 18.86± ± ± ±.16 乳清蛋白组 19.4± ± ±.2 1.9± ± ± ±.21 * 1.99± ± ± ± ± ± ± ± ±.19 # ± ± ±.12 * 2.9±.16 *# ± ± ± ±.17 注 : * 表示与空白对照组相比差异显著 (P<.5), # 表示与乳清蛋白组相比差异显著 (P<.5) 脾脏指数 = 脾脏 / 体重 ; 胸腺指数 = 胸腺 / 体重下表同 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力由表 2 可知, 与空白对照组比较,GOP 3 mg/kg 显著提高了 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力 (P<.5), 且表 2 GOP 对 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力的影响 (xˉ ±s,n=1) Table 2 Effects of Panax ginseng oligopeptide on proliferation response of mouse spleen cells to ConA (xˉ ±s, n=1) GOP 3 mg/kg 显著优于乳清蛋白组 (P<.5) 迟发型变态反应能力由图 1 可知, 与空白对照组比较, 乳清蛋白组和 5 个 GOP 组均显著提高了小鼠迟发型变态反应能力 (P<.5), 且 GOP 3 6 mg/kg 组小鼠迟发型变态反应能力均显著优剂量 /(mg kg -1 ) ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力 (ΔOD) 空白对照组乳清蛋白组 ±.5.49±.11.43±.9.48±.7.51±.9 *.61±.9 *#.49±.12 图 1 GOP 对小鼠迟发型变态反应能力的影响 (xˉ ±s,n=1) Fig. 1 Effects of Panax ginseng oligopeptide on delayedtype hypersensitivity of mice ( xˉ ±s, n=1) 64

4 科技导报 215,33(18) 于乳清蛋白组 (P<.5) GOP 和 3 mg/kg 可显著提高小鼠的 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力和迟发变态反应能力, 且 GOP 3 mg/kg 效果显著优于乳清蛋白因此可以判定 GOP 具有促进小鼠细胞免疫功能的作用 2.3 GOP 对小鼠体液免疫功能的影响本实验通过抗体生成细胞 (IgM-PFC) 和血清溶血素 (HC 5) 含量的检测对吉林人参低聚肽在小鼠体液免疫功能中的作用进行观察, 结果见表 3 由表 3 可知,GOP 3 6 mg/kg 组小鼠的抗体生成细胞数 ( 溶血空斑数 ) 显著高于空白对照组和乳清蛋白组 (P<.5),GOP mg/kg 组显著高于空白对照组 (P<.5), 而乳清蛋白组与空白对照组差异不显著 (P>.5) 乳清蛋白组和 GOP mg/kg 组小鼠血清溶血素含量显著高于空白对照组 (P<.5) 由此提示,GOP 可显著增强小鼠的体液免疫功能表 4 GOP 对小鼠单核 - 巨噬细胞吞噬功能的影响 (xˉ ±s,n=1) Table 4 Effects of Panax ginseng oligopeptay on macrophage phagocytosis in mice ( xˉ ±s, n=1) 剂量 / 碳廓清指数巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力 (mg kg -1 ) α 吞噬率 /% 吞噬指数空白对照组乳清蛋白组 ± ±.28 * 7.76± ±.27 * 7.89±.37 * 8.27±.58 *# 8.58±.23 *# 19.98± ± ± ±3.51 *# 22.48±3.85 *# 25.±1.93 *# 21.1± ±.6.43±.1.44±.9.53±.8 *#.49±.11 *.58±.8 *#.48±.6 表 3 Table 3 空白对照组乳清蛋白组 2.4 GOP 对小鼠单核 - 巨噬细胞吞噬功能的影响本研究通过小鼠碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验观察了吉林人参低聚肽对小鼠单核 - 巨噬细胞吞噬功能的影响, 结果见表 4 由表 4 可知, 与空白对照组比较, 乳清蛋白 GOP 3 6 mg/kg 均可显著提高小鼠碳廓清能力 (P<.5), GOP mg/kg 也有提高小鼠碳廓清能力的趋势 (P=.83) 其中,GOP 3 6 mg/kg 组显著高于乳清蛋白组 (P<.5) GOP 对小鼠体液免疫功能的影响 (xˉ ±s,n=1) Effects of Panax ginseng oligopeptay on humoral immunity of mice ( xˉ ±s, n=1) 剂量 / (mg kg -1 ) GOP 3 mg/kg 组小鼠巨噬细胞吞噬率显著高于空白对照组和乳清蛋白对照组 (P<.5) GOP 3 mg/kg 组小鼠巨噬细胞吞噬指数显著高于空白对照组 (P<.5), 且 GOP 3 mg/kg 组小鼠巨噬细胞吞噬指数显著高于乳清蛋白组 (P<.5) 3 6 溶血空斑数 (/5 1 6 细胞 ) 的对数转换值 (lgpfc) 1.35± ± ±.11 * 1.4± ±.1 * 1.5±.8 *# 1.51±.9 *# 样品半数溶血值 HC ± ±4.96 * ±16.9 * ± ± ± ± GOP 对小鼠 NK 细胞活性的影响由表 5 可知,GOP mg/kg 组小鼠 NK 细胞活性显著高于空白对照组和乳清蛋白组 (P<.5),GOP mg/kg 组小鼠 NK 细胞活性有高于空白对照组的趋势 (P<.1), 说明 GOP 可以增强小鼠 NK 细胞活性表 5 Table 5 空白对照组乳清蛋白组 3 讨论 GOP 对小鼠 NK 细胞活性的影响 (xˉ ±s,n=1) Effects of Panax ginseng oligopeptay on NK cell activity in mice ( xˉ ±s, n=1) 剂量 /(mg kg -1 ) 3 6 NK 细胞活性 /% 37.16± ± ±16.52 *# 58.36±14.84 *# 51.94± ± ±8.17 人参中肽类的研究始于 2 世纪 6 年代, 当时仅在于提 [3] 取 198 年 Ando 等从人参根水解液中分离出含有 14 个氨基酸残基的肽类物质后, 开始了对提取肽结构的鉴定 1985 [4] 年张金等从人参根中分离出了 14 肽, 与 Ando 等分离出的肽 [9,1] 仅一个氨基酸差别到 199 年 Wang 等使用此 14 肽按 mg/kg 的剂量给大鼠一次静脉注射或小鼠多次皮下注射给药的研究表明了, 人参多肽有明显降低大鼠和小鼠血 [11] 糖和肝糖原的作用 27 年金军华等推测人参和人参多肽的降糖作用可能与胰岛素分泌无关人参中肽类的研究也仅局限于此, 此后至今, 国内外的研究也仅集中于人参复方 65

5 科技导报 215,33(18) 制剂及水提物 ( 人参皂甙人参多糖人参糖肽次级代谢产物 ) 等研究上, 即便有关人参多肽或寡肽的研究, 也仅仅停留在对其的结构鉴定及分离上, 有关免疫调节作用的相关研究更是寥寥无几 [14] 但杨睿悦研究表明, 海洋寡肽可以显著提高 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力抗体生成细胞溶血空斑数血清溶血素含量及 NK 细胞活性可见寡肽能在细胞免疫体液免疫功能和 NK 细胞活性增强方面发挥较好的作用为此, 本实验对人参低聚肽在免疫方面的调节作用进行研究乳清蛋白是干酪生产过程中产生的副产品乳清经过特殊工艺浓缩精制而成的一类蛋白质, 易消化吸收, 含有多种活性物质, 有很高的生物利用效价和功能特性, 如抗菌和抗病毒调节免疫抗氧化降血脂等作用, 其主要功能成分为乳球蛋白乳白蛋白牛乳血清白蛋白及免疫球蛋白等多种蛋白质成分单纯的蛋白质摄入增加可能会影响机体的免疫功能, 本研究通过设立乳清蛋白组, 将 GOP 组与乳清蛋白组进行比较, 排除单纯增加蛋白质摄入引起的假阳性结果, 获得 GOP 对于免疫系统的调节作用是否基于寡肽的作用免疫系统的作用又分为固有免疫和适应性免疫两个方面, 其中细胞免疫和体液免疫属于适应性免疫作用, 巨噬细胞和 NK 细胞的作用则属于固有免疫功能在细胞免疫功能方面一般用 2 个实验进行评价 :ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力和迟发型变态反应能力 ; 体液免疫功能方面则用抗体生成细胞数和血清溶血素含量的检测进行评价 ; 单核 - 巨噬细胞功能用小鼠碳廓清实验和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验进行评价增强免疫力功能的判定是在细胞免疫功能体液免疫功能单核 - 巨噬细胞功能 NK 细胞活性 4 个方面任 2 个方面结果阳性即可判定样品具有增强免疫力功能作用而前三者其中任意 2 个实验的结果为阳性或任一个实验的 2 个剂量组结果为阳性, 可判定在这 3 个功能方面为阳性 NK 细胞活性测定实验中一个以上剂量组结果为阳性则可判定 NK 细胞活性结果阳性 [13] 本研究显示,GOP 3 mg/kg 显著提高了 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力和迟发型变态反应能力, 且 GOP 3 mg/kg 显著优于乳清蛋白, 说明 GOP 具有促进小鼠细胞免疫功能的作用在体液免疫功能方面, 本研究结果显示, GOP 3 6 mg/kg 组小鼠的抗体生成细胞数显著高于空白对照组和乳清蛋白组说明 GOP 具有促进小鼠体液免疫功 [14,15] 能的作用这与杨睿悦等的研究结果类似与适应性免疫相关的 T 淋巴细胞亚群 CD4 + 和 CD8 + 的数量和比例是评价免疫调节稳态的关键指标 CD4 + T 细胞 (Th 细胞 ) 又可分为 Th1 细胞和 Th2 细胞, 其中 Th1 细胞可以分泌炎症因子白介素 (IL)-2 IL-12 肿瘤坏死因子 (TNF) 干扰素 -γ(ifn-γ) 等, 从而诱导细胞免疫反应 ;Th2 细胞可以分泌 IL 等, 诱导体液免疫和过敏反应 [16] 从本实验结果来看, 细胞免疫和体液免疫功能的增强可能与 CD4 + T 细胞增加细胞因子分泌增多有关系与其不同的是, 碳廓清实验显示, 乳清蛋白 GOP ~6 mg/kg 组均显著提高小鼠碳廓清指数,GOP 3 6 mg/kg 效果显著优于乳清蛋白而巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的实验显示,GOP ~3 mg/kg 组吞噬率显著高于空白对照组和乳清蛋白组, 吞噬指数 GOP 和 3 mg/kg 组显著优于空白对照组和乳清蛋白组, 由此可判定 GOP 可显著增强小鼠单核 - 巨噬细胞吞噬能力单核 - 吞噬细胞系统是机体适应性免疫系统的重要组成部分, 当颗粒状异物注入人血液循环后, 颗粒状异物迅速被单核 - 巨噬细胞清除, 主要被存在于肝脏和脾脏中的巨噬细胞所吞噬小鼠碳廓清实验中测得的碳廓清指数主要反映网状内皮系统的吞噬功能和单核 - 巨噬细胞的吞噬能力而腹腔巨噬细胞是腹腔局部免疫的第一道防线, 对防止腹腔感染具有重要作用此外, 巨噬细胞还是一类抗原递呈细胞, 能够摄取加工处理抗原, 并将抗原递呈给淋巴细胞, 可以辅助和调节 T B 细胞识别抗原并对抗原产生应答本研究中单核 - 巨噬细胞吞噬能力的提高说明 GOP 具有提高机体抗感染的能力 NK 细胞是不同于 T B 淋巴细胞的第三类淋巴细胞, 其不表达特异性抗原识别受体, 是反应机体固有免疫功能的重要指标 NK 细胞可直接杀伤肿瘤和病毒感染的靶细胞, 在机体免疫监视和早期抗感染免疫过程中起重要作用 NK 细胞活化后, 还可以分泌 INF-γ 和 TNF-alpha 等细胞因 [17] 子, 产生免疫调节作用与 Yang 等结果相似, 本研究中 GOP 对 NK 细胞活性的影响在较低剂量组效果更好,GOP mg/kg 组小鼠 NK 细胞活性显著高于空白对照组和乳清蛋白组,GOP mg/kg 组小鼠 NK 细胞活性有高于空白对照组的趋势, 由此可以判定 GOP 可增强小鼠 NK 细胞活性总之,GOP 能够增强机体的免疫功能, 具备作为一种新型免疫力增强制剂的潜力, 有关其免疫调节作用机制有待于进一步研究与探讨, 从而为进一步开发 GOP 的保健作用提供理论依据 4 结论实验表明,GOP 可以通过增强细胞免疫功能和体液免疫功能, 提高适应性免疫功能, 通过增强单核 - 巨噬细胞吞噬功能和 NK 细胞活性, 提高固有免疫功能, 从而起到增强免疫力的作用致谢 : 北京大学医学部公共卫生学院毒理学系魏雪涛副教授在实验室工作和动物处理过程中给予支持与帮助, 本课题组熊梦昀鲍雷蔡夏夏李祥孙彬李迪李慧祝德营顾娇娇姜燕飞毛瑞雪武欣王楠刘灿孙靖琴同学在动物饲养和处理过程中给予帮助参考文献 (References) [1] 霍卫. 人参国际市场需求保持增长 [N]. 中国医药报 : 数据时空, Huo Wei. Ginseng international market demand to maintain growth[n]. China Pharmaceutical News: Data Ttemporal,

科技导报 215,33(18) www.kjdb.org [2] Hou J P. The chemical constituents of ginseng plants[j]. Comparative Medicine East and West, 1977, 5(2): 123-145. [3] Ando T, Muraoka T, Yamasaki N, et al.

6 科技导报 215,33(18) [2] Hou J P. The chemical constituents of ginseng plants[j]. Comparative Medicine East and West, 1977, 5(2): [3] Ando T, Muraoka T, Yamasaki N, et al. Preparation of anti- lipolytic substance from Panax ginseng[j]. Planta Medica, 198, 38(1): [4] 张今, 赵宗健. 人参中氨基酸及多肽的研究 [J]. 高等学校化学学报, 1985, 6(4): Zhang Jin, Zhao Zongjian. A study on amino acids and peptides in Ginseng[J]. Chemical Journal of Chinese Universities, 1985, 6(4): [5] 张今, 杜文嫒, 张红缨, 等. 胰岛素样人参肽的氨基酸序列测定 [J]. 吉林大学自然科学学报, 1988(4): -78. Zhang Jin, Du Wen'ai, Zhang Hongying, et al. The assay of amino acid sequence of ginseng insulin-like peptide[j]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Jilinensis, 1988(4): -78. [6] 张今, 杜文媛, 张红缨, 等. 人参多肽的提纯与氨基酸序列测定 [J]. 科学通报, 1988(12): Zhang Jin, Du Wenyuan, Zhang Hongying, et al. The purification of ginseng polypeptides and their amino acid sequence determination[j]. Chinese Science Bulletin, 1988(12): [7] Kajiwara H, Hemmings A M, Hirano H. Evidence of metal binding activities of pentadecapeptide from Panax ginseng[j]. Journal of Chromatography B: Biomedical Applications, 1996, 687(2): [8] Yagi A, Akita K, Ueda T, et al. Effect of a peptide from Panax ginseng on the proliferation of baby hamster kidney-21 cells[j]. Planta Medica, 1994, 6(2): [9] Wang B X, Yang M, Jin Y L, et al. Studies on the hypoglycemic effect of ginseng polypeptide[j]. Acta Pharmaceutica Sinica, 199, 25(6): [1] Wang B X, Yang M, Jin Y L, et al. Studies on the mechanism of ginseng polypeptide induced hypoglycemia[j]. Acta Pharmaceutica Sinica, 199, 25(1): [11] 金军华, 张延, 李怡, 等. 人参人参多肽及降糖 4 号对大鼠胰岛功能的影响 [J]. 中国老年保健医学, 27, 5(1): Jin Junhua, Zhang Yan, Li Yi, et al. Effects of ginseng, ginseng polypeptides and hypoglycemic No. 4 on islet function in rats[j]. Chinese Journal of Geriatric Care, 27, 5(1): [12] 李勇. 肽临床营养学 [M]. 北京 : 北京大学医学出版社, 212. Li Yong. Peptide clinical nutrition[m]. Beijing: Peking University Medical Press, 212. [13] 中华人民共和国卫生部. 保健食品检验与评价技术规范 [S]. 北京 : 中华人民共和国卫生部, 23. People's Republic of China Ministry of Health. Technical standards for testing & assessment of health food[s]. Beijing: People's Republic of China Ministry of Health, 23. [14] 杨睿悦. 海洋寡肽及其配伍的免疫调节作用和机制研究 [D]. 北京 : 北京大学, 29. Yang Ruiyue. Effects of marine oligopeptide and its combination on immune function and the possible mechanisms[d]. Beijing: Peking University, 29. [15] 杨睿悦, 张佳丽, 王楠, 等. 海洋蛋白肽和核苷酸配伍对小鼠免疫调节作用 [J]. 中华预防医学杂志, 21, 26(1): Yang Ruiyue, Zhang Jiali, Wang Nan, et al. Immunomodulatory effect of marine protein peptides combined with nucleotides in mice[j]. China Journal of Public Health, 21, 26(1): [16] Constant S L, Bottomly K. Induction of Th1 and Th2 CD 4 + T cell responses: The alternative approaches[j]. Annual Review of Immunology, 1997, 15(1): [17] Yang R Y, Zhang Z F, Pei X R, et al. Immunomodulatory effects of marine oligopeptide preparation from Chum Salmon (Oncorhynchus keta) in mice[j]. Food Chemistry, 29, 113(2): ( 编辑田恬 ) 学术动态中国科协第 2 期青年科技创新沙龙在北京召开 215 年 8 月 8 日, 由中国科协常委会青年工作专委会中国科协组织人事部主办, 主题为围绕脑科学与认知科学, 推动学科交叉与协同创新的中国科协第 2 期青年科技创新沙龙在中国科技馆举办, 中国青年科技奖获得者中国科学院数学与系统科学研究院研究员吕金虎主持沙龙,4 余名一线科研人员与会交流围绕沙龙主题, 中国人工智能学会理事长中国工程院院士李德毅作脑认知的形式化特邀报告, 中国科技法学会会长段瑞春作产学研协同创新战略思考特邀报告北京航空航天大学计算机学院教授陈小武作数据驱动的可视内容智能计算互动报告, 中国科学院生物物理研究所副所长刘力作小果蝇, 大乾坤互动报告, 中国科学院微电子研究所研究员刘明作新型存储器技术互动报告详见中国科协网 67

Microsoft Word 佟长青-二校

Microsoft Word 佟长青-二校 6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 佟长青 1, 翟兴月 2, 杜影 3, 李伟 (1., 116023; 2., 116023; 3., 116021) 1* 摘要 : 目的方法 40 HC 50 4, 0 0.3 0.6 0.9 g/(kg bw), 30 d 结果 0.3 g/(kg