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1 第 8 卷第 9 期食品安全质量检测学报 Vol. 8 No 年 9 月 Journal of Food Safety and Quality Sep., 2017 蔓越莓复合提取物对小鼠免疫功能的影响 * 李瑞鹏, 欧慧瑜, 郭秋平 ( 广州医药研究总院有限公司药物非临床评价研究中心, 广州 ) 摘要 : 目的评价蔓越莓越橘玫瑰茄复合提取物作为保健食品增强免疫力的作用方法分别以和 0.78 g/kg 剂量连续灌胃小鼠 30 d 后, 通过小鼠淋巴细胞转化试验抗体生成细胞测定血清溶血素检测迟发型变态反应小鼠碳廓清实验腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和自然杀伤细胞 (natural killer, NK 细胞 ) 活性测定等试验, 评价其对小鼠免疫力的影响结果蔓越莓越橘玫瑰茄复合提取物能促进淋巴细胞转化, 增加抗体生成细胞的数量, 增强 NK 细胞的活性结论蔓越莓越橘玫瑰茄复合提取物可以增强小鼠的免疫力关键词 : 蔓越莓 ; 越橘 ; 玫瑰茄 ; 免疫力 Effects of composite extraction of Oxycoccos on immunity in mice LI Rui-Peng, OU Hui-Yu, GUO Qiu-Ping * (Drug Nonclinical Evaluation and Research Center of Guangzhou Pharmaceutical Research Institute, Guangzhou , China) ABSTRACT: Objective To evaluate the effects of composite extraction of Oxycoccos, Vaccinium vitis-idaea and Hibiscus sabdariffa on immunity enhancement in mice. Methods The composite extraction (0.26, 052 and 0.78 g/kg) was consistently administered intragastricly for 30 days. Subsequently, immune function indexes including lymphocyte transformation, antibody production cells, serum hemolysin, delayed type hypersensitivity, carbon clearance, phagocytosis of chicken erythrocytes by peritoneal macrophages, and NK (natural killer) cell activity were measured to evaluate the effects of immunity enhancement. Results Under the condition of this experiment, the transformation of spleen lymphocyte was stimulated, the quantity of antibody-producing cells was increased and the activity of natural killer cells was enhanced. Conclusion It is suggested that the composite extraction of Oxycoccos, Vaccinium vitis-idaea and Hibiscus sabdariffa could enhance the immune function of mice. KEY WORDS: Oxycoccos; Vaccinium vitis-idaea; Hibiscus sabdariffa; immunity 1 引言蔓越莓含有维生素 C 原花青素酚酸和黄酮醇等成分, 具有抗氧化延缓衰老防治泌尿道感染等作用 [1-3] 研究表明蔓越莓全果粉可以提高正常小鼠的溶血空斑数, 增强体液免疫功能 [4] 越橘中含有花色苷等酚类物质, 具有抗氧化降低大脑皮层 DNA 损伤等活性 [5,6] 玫瑰茄主要含有黄酮苷原儿茶酸花青素等成分, 具有抗氧化抗炎抑菌等作用 [7,8] 研究表明玫瑰茄多糖也具有增强小鼠体液免疫功能和细胞免疫功能的作用 [9] 上述 3 种植物提取物均含有原花青素等成分, 后者能显著提高小鼠的免疫功能 [10] 本研究通过免疫力功能评价试验, 探讨蔓越莓越橘玫瑰茄复合提取物增强免疫力的功效, 为增强免疫力的保健食品开发提供理论依据 * 通讯作者 : 郭秋平, 高级工程师, 主要研究方向为功能性评价和毒理学评价 vipvivenguoguo@163.com *Corresponding author: GUO Qiu-Ping, Senior Engineer, Drug Nonclinical Evaluation and Research Center of Guangzhou Pharmaceutical Research Institute, Guangzhou , China. vipvivenguoguo@163.com

2 3376 食品安全质量检测学报第 8 卷 2 材料与方法 2.1 试验药物蔓越莓越橘玫瑰茄复合提取物 (3 种原料的质量比为 4:2:5, 批号 : , 由广州医药研究总院有限公司研制 ), 推荐成人日服用量为 1.56 g, 其中含原花青素 8 g/100 g 试验时样品均用蒸馏水配制和稀释 2.2 试验动物 SPF 级 (specific pathogen free, 无特定病原体 )Balb/c 小鼠 ( 体重 18~22 g), 雄性, 由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供, 动物生产许可证号 : SCXK( 湘 ) 动物饲养于 SPF 级环境, 温度 20~22, 相对湿度 50%~70%, 12 h 照明 /12 h 黑暗交替, 动物自由摄食和饮水, 适应性喂养 1 周后进行试验 2.3 试剂绵羊红细胞 (sheep red blood cells, SRBC)( 成都达硕生物科技有限公司 ); 鸡红细胞 (chicken red blood cell, CRBC), 采自健康公鸡心脏血 ; 氧化型辅酶 Ⅰ ConA( 刀豆蛋白 A) 噻唑蓝 (methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)( 美国 Sigma 公司 ); 一得阁墨汁 ( 北京一得阁工贸公司 ); 补体为 4 只健康豚鼠的混合血清, YAC-1 细胞 SA 缓冲液 1640 培养液小牛血清 ( 成都哈里生物公司 ); 乙基苯基聚乙二醇 (NP-40, 美国 Fluka 公司 ); 乳酸锂 ( 国药集团化学试剂有限公司 ); 吩嗪硫酸甲酯 (phenazine methyl sulfate, PMS)( 中国 Biosharp 公司 ); 青霉素链霉素 ( 华北制药股份有限公司 ) 2.4 仪器电子天平 ( 北京赛多利斯科学仪器有限公司 ); 3-18k 高速冷冻离心机 ( 德国 Sigma 公司 ); Elx800 酶标仪 ( 美国 Bio Tek 公司 ); 3111 型 CO 2 培养箱 ( 美国 Thermo Fisher 公司 ); SW-CJ-2FD 型净化工作台 ( 苏州净化设备有限公司 ) 2.5 方法基础饲料 (10% 水分 20.5% 粗蛋白质 4% 粗脂肪 5% 粗纤维 8% 粗灰分 1.32% 赖氨酸 0.78% 蛋氨酸 + 胱氨酸 ) 适应性喂养后, 将雄性 Balb/c 小鼠随机分为 4 组, 分别为阴性对照组, 蔓越莓复合提取物高中低剂量组, 每组 80 只蔓越莓复合提取物的剂量分别为和 0.78 g/kg, 相当于人日推荐剂量的和 30 倍试验时, 蔓越莓复合提取物用蒸馏水溶解, 按 10 ml/kg 体积给小鼠灌胃, 每天 1 次, 连续灌胃给药 30 d 阴性对照组灌胃给予等体积的蒸馏水脏器系数测定小鼠连续灌胃 30 d 后, 称取动物体重, 处死动物, 取出脾脏胸腺, 分别称取脾脏胸腺重量, 计算脏器系数 (mg/10 g)= 脏器重量 / 动物体重迟发型变态反应在连续灌胃 25 d 后给每只小鼠腹腔注射 0.2 ml 2%SRBC 免疫, 继续灌胃 4 d 后, 测量左后足跖厚度, 测量 3 次计算平均值 ; 然后在测量部位皮下注射 20%SRBC 液, 每只 20 μl 注射后 24 h 测量左后足跖厚度, 测量 3 次后计算平均值计算注射前后足跖厚度的差值, 以差值表示小鼠足跖厚度增厚的程度受试组的差值显著高于对照组的差值, 判断为阳性结果 ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验连续灌胃 30 d 后, 处死小鼠, 在无菌条件下取出脾脏, 用镊子将脾撕碎, 过 200 目筛后, 用 Hank s 液洗 3 次, 用完全 1640 培养液配成 /ml 细胞悬液 [11] 将每份脾细胞悬液加入 24 孔培养板中, 1 ml/ 孔, 每份样品 2 个孔, 一孔加 75 μl ConA 液, 另一孔作为对照, 置于 CO 2 孵箱培养 68 h 后, 取出培养板, 每孔轻轻吸取 0.7 ml 上清, 加入 0.7 ml 不含小牛血清的 1640 培养液和 50 μl MTT 液, 继续培养 4 h 取出培养板, 每孔加入 1 ml 酸性异丙醇, 将紫色结晶完全溶解, 用酶标仪在 570 nm 波长处测定吸光度值 (OD), 以 ConA 孔 OD 值减去未加 ConA 孔 OD 值代表淋巴细胞增殖能力若受试组的光密度差值显著高于对照组, 判断为阳性结果血清溶血素测定在小鼠连续灌胃 25 d 后给每只小鼠腹腔注射 0.2 ml 2%SRBC 免疫, 继续灌胃 5 d 后, 取小鼠血液于离心管中 2000 r/min 离心 10 min, 收集血清, 用生理盐水将血清作倍比稀释, 每份稀释 12 孔, 将不同稀释度的血清置于血凝板中, 每孔加 100 μl, 再加入 0.5%SRBC 液 100 μl, 混匀, 37 恒温水浴 3 h 后观察结果, 记录每孔的凝集程度按下面公式计算抗体积数抗体水平 =(S 1 +2S 2 +3S 3 ns n ), 其中 1, 2, 3 n 代表对倍稀释的指数, S 代表凝集程度的级别受试物抗体积数显著高于对照组, 为阳性结果抗体生成细胞检测在小鼠连续灌胃 25 d 后给每只小鼠腹腔注射 0.2 ml 2%SRBC 免疫, 继续灌胃 5 d 后, 处死小鼠取出脾脏, 用镊子将脾撕碎后过 200 目筛, 用 Hank s 液洗 3 次, 用完全 1640 培养液配成 /ml 脾细胞悬液在含有 0.5 ml 表层培养基的小试管中加入 50 μl 10%SRBC 液及 20 μl 脾细胞悬液, 迅速混匀, 加于挂膜玻片上, 凝固后, 将玻片扣放在片架上, 置 CO 2 孵箱培养 1.5 h, 在玻片架凹槽内加入用 SA 缓冲液稀释的补体, 继续培养 1.5 h 后, 计算溶血抗体生成细胞数, 以空斑数 /10 6 脾脏细胞表示, 受试组的空斑数显著高于对照组的空斑数, 判断为阳性结果小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验连续灌胃 30 d 后, 每只小鼠腹腔注射 20%CRBC 悬液 1 ml, 30 min 后处死, 固定在鼠板上, 正中剪开腹壁皮肤, 经腹腔注入生理盐水 2 ml, 转动鼠板 1 min, 吸出腹腔洗

3 第 9 期李瑞鹏, 等 : 蔓越莓复合提取物对小鼠免疫功能的影响 3377 液 1 ml, 平均滴于 2 张载玻片上, 置于湿盒 min 后, 取出在生理盐水中漂洗晾干固定, 4%Giemsa PBS 染色 3 min, 蒸馏水漂洗晾干, 镜检按下面公式计算吞噬百分率及吞噬指数吞噬百分率 (%)= 吞噬红细胞的巨噬细胞数 / 计数的巨噬细胞总数 100% 吞噬指数 = 被吞噬的鸡红细胞总数 / 计数的巨噬细胞总数受试组的吞噬百分率或吞噬指数与对照组相比有显著性差异, 可判断为阳性结果小鼠碳廓清实验连续灌胃 30 d 后, 按 0.1 ml/10 g 从小鼠尾静脉注入 1:4 稀释的墨汁, 立即计时, 分别于 2 min 10 min 从小鼠眼眶静脉丛采血 20 μl, 加到含 2 ml 0.1%Na 2 CO 3 溶液的试管中, 混匀, 用酶标仪在 600 nm 波长处测定 OD 值 ( 用 0.1%Na 2 CO 3 溶液作空白对照 ) 将小鼠处死后, 取出肝脏和脾脏, 用滤纸吸干脏器表面血污后分别称重, 按下面公式计算吞噬指数 a K=(lgOD 1 -lgod 2 )/(t 2 -t 1 ), OD 1 为 t 1 时间血标本的 OD 值, OD 2 为 t 2 时间血标本的 OD 值吞噬指数 a= 体重 /( 肝重 + 脾重 ) K 1 /3 受试物的吞噬指数 a 显著高于对照组的吞噬指数 a 判断为阳性结果 NK 细胞活性测定连续灌胃 30 d 后, 处死动物, 取出小鼠脾脏, 剪碎, 过 200 目筛, 用 Hank s 液洗 3 次, 用完全 1640 培养液配成个 /ml 细胞悬液在 96 孔培养板中加入小鼠细胞悬液, 每只小鼠细胞悬液做平行 3 个孔, 每孔加 100 μl, 并加靶细胞液 (YAC-1 细胞, 个 /ml)100 μl, 同时做靶细胞自然释放孔 ( 靶细胞 100 μl+ 培养液 100 μl) 及最大释放孔 ( 靶细胞 100 μl+1%np μl) 各 3 孔, 在 37 5%CO 2 条件下培养 4 h 后取出 1500 r/min 离心 5 min 吸取各孔上清 100 μl 置于另一培养板中, 每孔再加入 100 μl 基质液, 10 min 后加 1 mol/l HCl 30 μl 终止反应, 在 492 nm 波长处测定 OD 值, 按下面公式计算 NK 细胞活性率 NK 细胞活性率 (%)=( 各反应孔 OD- 自然释放孔 OD)/( 最大释放孔 OD- 自然释放孔 OD) 100% 受试组的 NK 细胞活性显著高于对照组 NK 细胞活性, 判断为阳性结果 2.6 统计学处理方法结果以平均值 ± 标准差的形式表示, 使用 SPSS 22.0 统计软件进行结果分析, 若 P<0.05 则具有统计学意义 3 结果与分析 3.1 蔓越莓复合提取物对小鼠体重的影响连续灌胃给药 30 d 后, 各剂量组小鼠体重与阴性对照组比较无显著差异 (P>0.05), 见表蔓越莓复合提取物对正常小鼠胸腺脾脏质量的影响各剂量组与阴性对照组相比, 其脾脏的脏器系数无显著性差异 (P>0.05), 各剂量组与阴性对照组相比, 其胸腺的脏器系数无显著性差异 (P>0.05), 见表 2 表 1 蔓越莓复合提取物对小鼠体重的影响 ( x s) Table 1 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the body weight of mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 初始体重 (g) 结束体重 (g) 阴性对照组 ± ±1.23 低剂量组 ± ±0.62 中剂量组 ± ±1.08 高剂量组 ± ±0.70 表 2 蔓越莓复合提取物对正常小鼠脏器系数的影响 ( x s ) Table 2 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the organ/body weight ratio of mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 脾脏系数 (mg/10 g 体重 ) 胸腺系数 (mg/10 g 体重 ) 阴性对照组 ± ±3.80 低剂量组 ± ±2.12 中剂量组 ± ±2.75 高剂量组 ± ±3.14

4 3378 食品安全质量检测学报第 8 卷 3.3 蔓越莓复合提取物对小鼠细胞免疫的影响蔓越莓复合提取物对小鼠迟发型变态反应的影响抗原攻击后 24 h, 各剂量组与对照组小鼠相比, 其足跖肿胀差值无显著性差异 (P>0.05), 表明其对迟发型变态反应无影响, 结果见表 3 表 3 蔓越莓复合提取物对小鼠迟发型变态反应的影响 ( x s ) Table 3 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the delayed type hypersensitivity in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 足跖肿胀差值 (mm) 阴性对照组 ±0.12 低剂量组 ±0.15 中剂量组 ±0.10 高剂量组 ± 蔓越莓复合提取物对 ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化的影响结果显示, 与阴性对照组相比, 高剂量组光密度差值显著增高 (P<0.05), 可增强淋巴细胞的增殖能力 ; 而低剂量和中剂量组光密度差值无显著性差异 (P>0.05) 结果见表 4 表 4 蔓越莓复合提取物对 ConA 诱导的小鼠淋巴细胞转化的影响 ( x s ) Table 4 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the lymphocyte transformation induced by ConA in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 光密度差值阴性对照组 ±0.14 低剂量组 ±0.13 中剂量组 ±0.11 高剂量组 ±0.13* 注 : * 与阴性对照组比较, P< 蔓越莓复合提取物对小鼠体液免疫的影响蔓越莓复合提取物对小鼠血清溶血素的影响与阴性对照组相比, 各剂量组抗体积数无显著性差异 (P>0.05), 表明其对血清溶血素的产生无影响, 见表 5 表 5 蔓越莓复合提取物对小鼠血清溶血素的影响 ( x s ) Table 5 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the serum hemolysin in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 抗体积数阴性对照组 ±16.57 低剂量组 ±13.67 中剂量组 ±19.86 高剂量组 ± 蔓越莓复合提取物对抗体生成细胞的影响结果显示, 与阴性对照组相比, 高剂量组抗体生成细胞无显著性差异 (P>0.05), 而低剂量和中剂量组抗体生成细胞显著增加 (P<0.05), 见表 6 表 6 蔓越莓复合提取物对小鼠抗体生成细胞的影响 ( x s ) Table 6 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the antibody producing cells in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 抗体生成细胞数 /10 6 ( 脾细胞 ) 阴性对照组 ± 低剂量组 ±116.15* 中剂量组 ±143.67* 高剂量组 ± 注 : * 表示与阴性对照组相比, P< 蔓越莓复合提取物对小鼠吞噬细胞吞噬功能的影响蔓越莓复合提取物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响各剂量组与阴性对照组相比, 其腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数无显著性差异 (P>0.05), 表明复合提取物对腹腔巨噬细胞吞噬能力无影响, 见表 7 表 7 蔓越莓复合提取物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 ( x s ) Table 7 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the phagocytosis of peritoneal macrophages in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 吞噬百分率 (%) 吞噬指数阴性对照组 ± ±0.04 低剂量组 ± ±0.04 中剂量组 ± ±0.03 高剂量组 ± ± 蔓越莓复合提取物对小鼠碳廓清的影响结果显示, 各剂量组与阴性对照组相比, 碳廓清吞噬指数 a 无显著性差异 (P>0.05) 表明复合提取物对巨噬细胞的吞噬能力无影响, 结果见表 8 表 8 蔓越莓复合提取物对小鼠单核 - 巨噬细胞碳廓清功能的影响 ( x s ) Table 8 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the carbon clearance of mononuclear macrophage in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) 吞噬指数 a 阴性对照组 ±0.89 低剂量组 ±1.06 中剂量组 ±0.98 高剂量组 ±0.79

5 第 9 期李瑞鹏, 等 : 蔓越莓复合提取物对小鼠免疫功能的影响蔓越莓复合提取物对小鼠 NK 细胞活性的影响与阴性对照组相比, 低剂量组 NK 细胞活性率无显著性差异 (P>0.05), 中剂量组和高剂量组 NK 细胞活性率显著增高 (P<0.05), 见表 9 表 9 蔓越莓复合提取物对小鼠 NK 细胞活性率的影响 ( x s ) Table 9 Effects of composite extraction of Oxycoccos on the activity of NK cells in mice ( x s ) 组别剂量 (g/kg) 动物数 ( 只 ) NK 细胞活性率 (%) 阴性对照组 ±5.64 低剂量组 ±5.88 中剂量组 ±6.83* 高剂量组 ±6.78* 注 : * 表示与阴性对照组相比, P< 结论与讨论免疫反应作为机体的重要防线, 在抵御外来细菌的侵袭中具有重要作用 [12,13] 蔓越莓富含原花青素槲皮素等多元酚类化合物, 是一种具有保健作用的水果 [14] 研究表明蔓越莓可预防心血管疾病保护胃黏膜治疗尿路感染等 [15,16] 为观察蔓越莓复合提取物对小鼠免疫功能的影响, 本研究将不同剂量的蔓越莓复合提取物连续 30 d 以灌胃的方式给予小鼠, 并对体液免疫细胞免疫单核 - 巨噬细胞 NK 细胞等方面进行研究研究表明, 蔓越莓果粉可提高正常小鼠的溶血空斑数, 增强体液免疫功能 [17] 玫瑰茄多糖也具有增强小鼠体液免疫功能和细胞免疫功能的作用 [9] 蔓越莓越橘和玫瑰茄都富含原花青素等多元酚类化合物, 研究报道原花青素能促进脾淋巴细胞的增殖, 增强抗体生成细胞能力, 增加腹腔巨噬细胞的吞噬功能, 增加 NK 细胞的杀伤能力, 从而增强小鼠的免疫功能 [18] 本研究中, 蔓越莓复合提取物可促进淋巴细胞增殖, 表明其具有调节细胞免疫的作用 ; 该复合提取物可增加抗体生成细胞的数量, 表明其具有调节体液免疫的作用 ; 该复合提取物还可增强 NK 细胞的活性这些结果均与文献报道一致因此, 蔓越莓复合提取物可通过多种途径增强机体的免疫力但是其作用的机制还有待进一步的研究在本试验条件下, 灌胃给予小鼠蔓越莓复合提取物各剂量 30 d, 对小鼠体重无影响, 高剂量能促进淋巴细胞的增殖, 增强 NK 细胞的活性, 低剂量和中剂量还能增加抗体生成细胞数量根据保健食品检验与评价技术规范中增强免疫力功能检验规定, 蔓越莓复合提取物具有增强免疫力的功效参考文献 [1] 姚立君, 李赫宇, 李许伟, 等. 蔓越莓营养与保健功能研究进展 [J]. 食品研究与开发, 2013, 34(8): Yao LJ, Li HY, Li XW, et al. Research progress on nutrition and health functions of cranberry [J]. Food Res Dev, 2013, 34(8): [2] Mathison BD, Kimble LL, Kaspar KL, et al. Consumption of cranberry beverage improved endogenous antioxidant status and protected against bacteria adhesion in healthy humans: a randomized controlled trial [J]. Nutr Res, 2014, 34(5): [3] 詹凡, 肖翠蓉. 蔓越橘预防尿路感染机制及营养食品的开发 [J]. 食品安全质量检测学报, 2016, 7(9): Zhan F, Xiao CR. Mechanism of cranberry for prevention of urinary tract infection and its development in nutrition food [J]. J Food Saf Qual, 2016, 7(9): [4] 徐彩菊, 鹿伟, 宋燕华, 等. 蔓越莓全果粉对小鼠免疫功能的影响 [J]. 浙江预防医学杂志, 2016, 28(5): Xu CJ, Lu W, Song YH, et al. A study on the effect of whole cranberry powder on immune function of ICR mice in vivo [J]. Zhejiang Prev Med, 2016, 28(5): [5] 王蕾, 包谛, 王振宇, 等. 红豆越橘提取物对小鼠慢性应激损伤的防护作用 [J]. 食品工业科技, 2016, 37(6): Wang L, Bao D, Wang ZY, et al. Protective effect of Lingonberry extraction on chronic stressed mice [J]. Sci Technol Food Ind, 2016, 37(6): [6] 李兴泰, 冮洁, 匡海学, 等. 红豆越橘果总黄酮保护线粒体及其机制 [J]. 食品科学, 2013, 34(19): Li XT, Gang J, Kuang HX, et al. Mitochondrial protection activity of total flavonoids from Vaccinium vitis-idaea fruits and underlying mechanism [J]. Food Sci, 2013, 34(19): [7] Badejo AA, Damilare A, Ojuade TD. Processing effects on the antioxidant activities of beverage blends developed from Cyperus esculentus, Hibiscus sabdariffa, and Moringa oleifera extracts [J]. Prev Nutr Food Sci, 2014, 19(3): [8] 顾关云, 蒋昱. 玫瑰茄的化学成分与生物活性 [J]. 现代药物与临床, 2010, 25(2): Gu GY, Jiang Y. Study on phytochemistry and bioactivies of Hibiscus sabdariffa [J]. Drug Clin, 2010, 25(2): [9] 张赛男. 玫瑰茄多糖对小鼠体液免疫和细胞免疫功能的影响 [J]. 辽宁农业职业技术学院学报, 2015, 17(1): 1 2. Zhang SN. Study on the influence of Hibiscus sabdariffa polysaccharide on humoral immunity and cellular immunity function in mice [J]. J Liaoning Agric Vocat Tech Coll, 2015, 17(1): 1 2. [10] 刘英姿, 罗有梁, 周铁忠. 碎米花杜鹃原花青素 A-1 对小鼠免疫细胞的影响 [J]. 中药药理与临床, 2012, 28(2): Liu YZ, Luo YL, Zhou TZ. Effects of proanthocyanidin A-1 from Rhododendron spiciferum on mice immunocyte [J]. Pharmacol Clin Chin Mater Med, 2012, 28(2): [11] Xu CJ, Ding GQ, Fu JY, et al. Immunoregulatory effects of ethyl-acetate fraction of extracts from Tetrastigma hemsleyanum Diels et. Gilg on immune functions of ICR mice [J]. Biomed Environ Sci, 2008, 21(4): [12] Iwasaki A, Medzhitov R. Control of adaptive immunity by the innate

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Microsoft Word 佟长青-二校 6 10 Vol. 6 No. 10 2015 10 Journal of Food Safety and Quality Oct., 2015 佟长青 1, 翟兴月 2, 杜影 3, 李伟 (1., 116023; 2., 116023; 3., 116021) 1* 摘要 : 目的方法 40 HC 50 4, 0 0.3 0.6 0.9 g/(kg bw), 30 d 结果 0.3 g/(kg