35期

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标论熊
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1 中国农学通报 0,9(5):89-95 Chinese Agricultural Science Bulletin 基于线粒体控制区全序列的鄱阳湖水系鲢增殖放流群体与野生群体的遗传多样性分析陈文静, 张燕萍, 段辛斌, 徐先栋, 汪澄强 ( 江西省水产科学研究所, 南昌 009; 中国水产科学研究院长江水产研究所, 武汉 40) 摘要 : 为了确定增殖放流活动是否会导致鄱阳湖水系天然鲢出现遗传结构分化, 本研究利用线粒体控制区序列研究了鄱阳湖水系增殖放流群体与野生鲢群体的遗传多样性水平和遗传结构通过 PCR 扩增与序列测定增殖放流和野生鲢群体获得了长度为 95 bp 的线粒体控制区基因片段 54 条线粒体控制区序列经比对后, 发现 4 个变异位点, 共定义了 4 个单倍型, 其中有一单倍型 (Hap6) 为三个种群所共享遗传多样性分析表明 : 赣江的单倍型多样性 (0.77±0.077) 和核苷酸多样性 ( ±0.0068) 均低于瑞昌和增殖放流群体 ;AMOVA 分析表明 : 遗传变异主要来自种群内, 占 77.6%, 而野生群体与增殖群体间只有.9%, 各种群间成对的 Fst 及遗传距离均表现种群间出现了一定程度的种群分化, 但系统进化树显示出一种混杂的单位型分布格局, 没有出现明显的谱系结构和地理聚群单倍型岐点分布呈现为双峰以及中性检验 Tajima 的 D(0.7006,P=0.84>0.0) 和 Fu 的 Fs(-.007,P=0.40) 结果综合表明, 鄱阳湖水系野生鲢群体与增殖放流群体可能未经历过近期的种群扩张事件以上结果表明, 赣江群体单倍型多样性及核苷酸多样性最低, 应加以保护 ; 增殖放流鲢群体引起鄱阳湖水系自然鲢遗传结构的分化, 应进一步规范放流, 并制定操作规程关键词 : 水产养殖 ; 鲢 ; 增殖放流 ; 线粒体 DNA 控制区 ; 种群遗传结构中图分类号 :S9 文献标志码 :A 论文编号 :0-57 Genetic Diversity Analysis of Hypophthal michthys molitrix Between Wild and Stock Enhancement Based on Mitochondrial Control Region Sequences in the Poyang Lake Water System Chen Wenjing, Zhang Yanping, Duan Xinbin, Xu Xiandong, Wang Dengqiang ( Jiangxi Fisheries Research Institute, Nanchang 009; Yangtze River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Wuhan 40) Abstract: The aim was to determine whether the enhancement activities will lead to changes genetic structure of natural silver carp in the Poyang Lake River, a 95 bp fragment of the mitochondrial D-Loop complete sequences was used to study the genetic diversity and population structure of Hypophthal michthys molitrix between wild and stock enhancement in the Poyang Lake water system. Complete sequences of the mitochondrial DNA control region (95 bp) of 54 silver carps from Ruichang (), Gan river () and stock enhancement (SL) were directly sequenced, of which 4 mutations of nucleotide acids and a total of 4 haplotypes were indentified, in which only one haplotype (Hap6) was shared by three populations in the Poyang Lake water system. Haplotpic diversity (0.77±0.077) and nucleotide diversity ( ±0.0068) of the the 基金项目 : 农业部长江中上游渔业资源环境重点野外科学观测试验站赣江及鄱阳湖四大家鱼增殖放流遗传多样性评估 (YWTZ/00) 第一作者简介 : 陈文静, 女,965 年出生, 研究员, 硕士, 研究方向为渔业资源与环境通信地址 :009 江西省南昌市富有路 099 号,Tel: , cwjjxsks@yahoo.com.cn 通讯作者 : 段辛斌, 男,97 年出生, 副研究员, 研究方向为渔业资源通信地址 :40 湖北省武汉市东湖新技术开发区武大园一路 8 号,Tel: , dxb@yfi.ac.cn 收稿日期 :0-05-, 修回日期 :0-09-7

2 90 中国农学通报 populations in Gan river were lower than those of and SL population. The AMOVA analysis indicated that the genetic variation mainly occurred within populations instead of among populations. Although on geographic clustering was observed in the phylogenetic tree, significant population subdivision was supported by both of the pairwise Fst values and average pairwise differences. The bimodal mismatch distribution of pairwise haplotype difference and the negatively selective neutrality test (Tajima s D =0.7006, P=0.84>0.0; Fu s Fs=-.007, P=0.40>0.0) suggest that a recent population expansion of Poyang Lake water system had not occurred. Based on the above results, the genetic diversity of Gan River population were the very lowest, Gan River should be as priority conservation areas; silver carp of stock enhancement induced the genetic structure differentiation of natural silver carp in the Poyang Lake, the releasing procedure should be standardized and operation procedure should be planed. Key words: aquaculture; Hypophthal michthys molitrix; stock enhancement; mitochondrial control region; population genetic structure 0 引言鄱阳湖由于江湖之间物质和能量的频繁交换, 加上静水流水生镜的互补作用, 孕育出相当复杂的淡水生物群落, 鱼类资源极为丰富鄱阳湖被誉为长江中下游天然的鱼类资源库鱼类基因的宝库和经济鱼类的原种基地, 在中国淡水渔业中占有重要的地位近些年由于酷渔滥捕兴建水利工程 ( 万安石虎塘泰和峡江永太和龙头山等水利枢纽 ) 围湖造田以及环境污染等原因, 阻隔了四大家鱼到达赣江中上游产卵场的洄游通道, 并改变了其上下游的水位水温水流速度等水文因子, 破坏了四大家鱼的自然繁殖, 使得鄱阳湖四大家鱼资源处于严重衰退中, 产量不断下降多年的实践证明, 渔业资源增殖放流是目前恢复水生生物资源量的重要手段, 但对增殖放流效果如鱼类资源变化遗传多样性变化缺乏科学评价自从 005 年以来, 中国沿江多个省份都在开展增殖放流工作, 尤其是 00 年起, 江西省进行大规模四大家鱼增殖放流以后, 放流效果如何, 以及是否会改变鄱阳湖水系及长江鲢遗传多样性等问题成为人们关注的问题为了科学有效地评价增殖放流效果, 采用亲子鉴定的方法对鄱阳湖四大家鱼增殖放流效果进行科学评价, 众多研究表明线粒体 DNA 分子结构简单, 严格母系遗传, 具有较高的突变性, 突变固定后形成的多态性位点反映出群体遗传特性种群分化和种属关系等特 [-] 点在 mtdna 中,D-loop 区为非编码区, 受进化压力较小, 它的进化速率通常是线粒体基因组其他区段的.8~5 倍, 是线粒体基因组中最具多态性的片段, 已成为探讨种群内部遗传多样性和分子系统地理学的良 [4-7] 好材料, 也是鱼类群体遗传学研究的重要标记对线粒体内不同基因序列的比较发现, 多数鱼类线粒体基因组中控制区的进化速度最快, 使研究种群内遗传 [8] 结构及遗传分化的首选序列但是有关鄱阳湖水系增殖放流四大家鱼的线粒体 D-Loop 片段结构及变异情况的研究尚未见报道, 为此笔者初步对采自瑞昌和赣江的野生鲢及增殖放流鲢个群体的线粒体控制区全序列进行了分析, 首次探讨了增殖放流群体的遗传多样性水平和遗传结构, 评价个群体遗传多样性, 以期为增殖放流效果评估选择合适的分子标记提供依据, 同时为鄱阳湖水系四大家鱼种资资源现状的评价管理合理开发利用提供科学依据材料与方法. 样本采集于 00 年 57 月分别在赣江和瑞昌随机采集野生鲢鱼苗样本各 0 余尾, 增殖放流鲢鱼夏花种苗 50 尾用 95% 的乙醇保存备用. 总 DNA 的提取野生及增殖放流鲢取其尾鳍约 00 mg, 用常规 SDS/ 蛋白酶 K 消化酚 - 氯仿抽提乙醇沉淀总 DNA, 获得的 DNA 经室温干燥后加入适量无菌 ddho 溶解, 用 % 的琼脂糖凝胶电泳检测总 DNA 的提取结果, 并用核酸蛋白定量仪 (Bio-Rad Smartspic plus) 检测纯度和测定浓度, 放于 -0 保存备用. mtdna 控制区片段扩增及序列测定鲢鱼 PCR 扩增引物为 : HymMHCIF: 5'-TGATGGTTCTAACAGCTCAGCTC-' 和 HymMHCIR:5'- CAAATTTCAGTTCTGAGATCA-' 引物由上海生工生物技术服务有限公司合成 PCR 反应体系包括 0 Buffer(5 mmol/l MgCl ) 5 μl,dntp( mmol/l) μl,taqdna 酶 ( U/μL) 0. μl, 正反向引物 (0 μmol/l) 各 μl, 加适量模板 DNA μl, 反应总体积为 50 μl PCR 扩增条件为

3 陈文静等 : 基于线粒体控制区全序列的鄱阳湖水系鲢增殖放流群体与野生群体的遗传多样性分析 9 94 变性 0 s,55 退火 0 s 和 7 延伸 0 s,5 个循环, 在正式循环前,95 预变性 5 min, 循环完毕后, 7 延伸 8 min,6 0 min PCR 产物用.0% 的琼脂糖电泳检测, 将条带清晰的 PCR 产物直接送至北京辉远生物科技有限公司进行双向全序列测序扩增和测序所用的引物相同.4 数据处理测定的 DNA 序列经手工校对后, 用 MegAlign 软件进行序列比对通过 MEGA 4.0 软件计算序列的碱基组成变异位点简约信息位点和转换颠换值, 采用邻接 (Neighbor-joining, NJ) 法构建基于 Kimura-parameter(K-p) 模型的单倍型关系树用 DnaSP 5.0 计算群体间遗传距离单倍型多样性 (Hd) 和核苷酸多样性 (Pi) 及种群间基因流情况 (Nm) 以 Arlequin. 软件中的分析方差分析 (AMOVA) 方法估算遗传变异在群体间和群体内的分布及遗传变异固定指数 (Fst) 值, 采用 000 次置换分析其统计学显著性采用 Tajima s D 和 Fu s FS 中性检验和核苷酸不配对称分布 (Mismatch Distribution) 来检测鄱阳湖水系四大家鱼群体的历史动态结果与分析. 鄱阳湖水系鲢 D-Loop 序列特征经 Clustal 比对后的鲢线粒体控制区全序列长 95 bp 片段, 其中缺失位点个, 变异位点 4 个, 均为简约信息位点, 符合线粒体控制区序列变异大的特点 ; T C A G 4 种碱基的比例分别为.% 9.6% 4.0% 和.%, 其中 G 的含量明显低于其他碱基的含量,A+ T(67.%) 的含量明显高于 C+G(.9%) 的含量, 符合鱼类线粒体 DNA 的特点转换 / 颠换比为 4.44, 表明鳊鄱阳湖水系鲢的线粒体控制区序列变异未饱和, 可用于系统发育分析. 鄱阳湖水系鲢的单倍型地理分布鄱阳湖水系野生及增殖放流白鲢群体 54 尾个体中发现 4 个单倍型 ( 占所测样本的 44.4%), 各单倍体变异见表, 可看出单倍型出现频率最高.%, 为增殖放流群体独有单倍型出现频率次之的是单倍型表鄱阳湖水系野生及增殖放流鲢单倍型分布及单倍型变异位点单倍型地理分布单倍型 Hap SL 单倍型变异位点样本量 Hap_ GAGT-GCC-AGACCCCCTTAGTCGCGGCCATAAAATCC-CTAT Hap_ AAGT-GCCGGTGTTCTCTTAGTCGCGACCACGAGGCTC-CCAC Hap_ GGAC-ACT-AGACCCCCTTGGCCGCGACCACGAAATCT-CTAT Hap_4 GGAC-GCT-AGACCCCCTTGGTTGTGACCACGAAATCC-CTAT 4 Hap_5 GGAC-GCT-AGACCCCCTTGGCCGCGACCACGAAATCT-CTAT Hap_6 GAGC-GCC-AGACCCCCTTAGTCGCGGCCACAAAATCC-CTAT Hap_7 GAGT-GCC-AGACCCCCTTAGTCGCGGCCACAAAATCC-CTAT Hap_8 AAGTAGCCGGTGTCCTCTTAGTCGCGACCACGAGGTTC-CCAC Hap_9 GGAC-GCT-AGACACCCTTGGCCGCGACCACGAAATCT-CTAT Hap_0 GGAC-GCT-AGACCCCCTTAGTTGCGACTACGAAATCC-CTAT Hap_ AAGT-GCCGGTGTCCTCTTAGTCGCGACCACGAGGTTC-CCAC 4 Hap_ GGAC-GCT-AGATCCCCTTGGTCGCGACCACGAAATCT-CTAT Hap_ AAGT-GCCGATGTCCTCTTAGTCGCGACCACGAGGTTCCCCAC Hap_4 7 AAGT-GCCGGTGTCTTTTTAGTCGCGGCCGCGAGGTTC-CCAC 9 Hap_5 GAGC-GCC-AGACCCCCTTAGTCGCGGCCACGAAATCC-CTAT Hap_6 AAGT-GCCGGTGCTCTCTTAGTTACTGTCACGAGGTTC-CCGC Hap_7 GAGT-GCC-AGACCCTCTTAGTCGCGACCACAAAATCC-CTAT Hap_8 AAGT-GCCGGTGTCCTCTTAGTCGCGGCCACGAGGTTC-CCAC Hap_9 AAGT-GCCGGTGTCCTCTTAATCGCGACCATAAGGTTC-CCAC Hap_0 AAGT-GCCGGTGTCCTTTTAGTCGCGACCACGAGGTTC-CCAC Hap_ AAGTAGCCGGTGTCCTCCTAGTCACGACCACGGGGTTC-CTAC Hap_ GAGT-GCC-AGACCCCCTCAGTCGCGGCCATAAAATCC-CTAT

4 9 中国农学通报续表单倍型地理分布单倍型 Hap SL 单倍型变异位点样本量 Hap_ AAGT-GTCGGTGTTCTCTTAGTTACGGCCACGAGGTTC-CCAC Hap_4 AAGT-GCCGGTGTCTTTTTAGTCGCGGCCGCGAGGTTC-TCAC 合计 , 为 6.7% 单倍型出现的频率很低, 只有个样本同时还发现除单倍型外, 其他几种单倍型都只在一个群体中出现, 如 Hap 为赣江鲢群体独有单倍型 ;Hap 为瑞昌鲢群体独有单倍型 ;Hap 4 为增殖放流鲢群体独有单倍型, 是否暗示这些单倍型是区分不同群体的遗传标记, 是否可用于增殖放流效果评价. 种群遗传多样性和遗群体间的遗传分化分析结果表明, 各群体的遗传多样性差异不明显, 54 个序列的平均单倍型多样性 (Hd) 和平均核苷酸多样性 (Pi) 分别为 (0.9±0.0) 和 (0.08± )( 表 ), 单倍型多样性水平较高从单倍型多样性 (Hd) 和核苷酸多样性 (Pi) 看, 个群体中, 瑞昌野生群体 () 的单倍型多样性和核苷酸多样性均最高 (0.978±0.054 和 0.05±0.00), 赣江群体 () 最低 (0.77±0.077 和 ±0.0068), 说明在个白鲢群体中, 瑞昌野生群体的遗传多样性相对最丰富, 赣江群体的遗传多样性相对最低, 而增殖放流群体的遗传多样性仅次于瑞昌野生群体, 其遗传多样性也较为丰富用 Arlequin. 软件分析群体两两之间的遗传分化指数, 结果显示 ( 表 ), 赣江群体与瑞昌群体增殖放流群体间的遗传分化指数的差异显著性检验值 0.0<P<0.05, 赣江群体与瑞昌及增殖放流群体间有较高的遗传分化指数 ; 瑞昌群体与增殖放流群体间的具有较低的遗传分化指数 (0.085), 但个群体两两间的遗传分化指数均大于 0.05, 种群间存在一定的分化表群体内遗传多样性参数地理群体样品数单倍型 (h) 多态位点 (s) 单倍型多样性 (Hd) 核苷酸多态性 (Pi) 瑞昌 () ± ±0.00 赣江 () ± ± 增殖放流群体 (SL) ± ±0.004 合计 ± ± AMOVA 分析表明, 个群体间分子遗传变异占总变异的.9%, 种群内分子遗传变异占总变异的 77.6%, 固定遗传分化指数 Fst=0.88 (P<0.0)( 表 4) 另外, 根据 Kimura -parameter 模型计算出, 个群体内的平均遗传距离为 0.009~0.0, 群体间的平均遗传距离为 0.005~0.064( 表 5) 此结果表明, 个群体间的平均遗传距离大于群体内的遗传距离, 体现出群体的遗传分化种群间基因流分析表明, 表种群间的遗传分化指数群体 SL 个群体的平均 N m 值为.08, 表明群体间基因交流受到限制表 4 鲢种群间和种群内分子变异分析变异来源自由度平方和变异组分变异百分比固定指数 P 值群体间 < 0.0 群体内总计

5 陈文静等 : 基于线粒体控制区全序列的鄱阳湖水系鲢增殖放流群体与野生群体的遗传多样性分析 9 表 5 个群体内和群体间的平均 K-P 遗传距离群体 SL 观察值模拟值 SL 0.0 * * * 注 : * 表示群体内的平均遗传距离 ( 对角线 ), 对角线下方的数据表示群体间的平均遗传距离出现频率.4 序列中性检验和 Mismatch 分析个群体鲢鱼群体 D-Loop 序列的核苷酸不配对分布呈不规则的双峰曲线, 不符合种群扩张的单峰曲线模式, 也说明鄱阳湖水系增殖放流和野生鲢群体可能未经历大规模的种群扩张过程 ( 图 ) 另外, 将所有个体作为一个整体, 进行 Tajima s 中性检验得 D=0.7006(P=0.84>0.0),Fu's Fs=-.007 (P=0.40), 差异不显著.5 单倍型间的聚类关系用 MEGA 4.0 软件, 根据 Kimura -parameter 进化配对差异图群体的 Mismatch 分布参数模型, 构建单倍型的 NJ 分子系统发育树 ( 图 ) 可知 : 并没有明显的以地方群体为单位的家系分支或聚簇出现, 群体间互相散步交叉现象比较普遍个鲢群体的 D-Loop 区 4 个单倍型散乱无序地分布于各个分枝, 没有明显地聚群和谱系结构图利用 NJ 法构建的鄱阳湖水系野生与增殖群体鲢种群 D-Loop 单倍型的系统树

6 94 中国农学通报讨论遗传多样性是生物多样性的基础, 是物种长期生存和进化的前提, 也是物种进化潜能的保证种群遗传多样性与种群的生存繁衍直接相关, 决定种群能否 [9-0] [] 适应未来环境的变化李思发等使用 RFLP 技术扩增了长江中下游鲢 mtdna 上特定区段, 结果显示长江中下游鲢群体的遗传多样性较高, 群体间存在明显差异, 并认为长江中下游鲢群体可能是从个祖先 [] [] 群体进化而来王长忠等朱晓东等利用微卫星标记研究分析也表明长江中下游可能存在两个祖先群体, 各不同地理群体间存在着一定的差异本研究共测序得到了赣江瑞昌和增殖放流个群体 54 尾鲢 mtdna 控制区片段 95 bp, 检测出总核苷酸变异为点 4 个, 多态位点 40 个, 多态位点比例为 0.04 个群体单倍型 4 种, 其中江西瑞昌群体检测出 9 个单倍型, [4] 赣江 8 个, 增殖放流群体个张四明等采用 PCR 技术对江西瑞昌鲢群体的线粒体 DNA 限制性片段长度多态性的研究, 检测出 6 种单倍型, 而未见鄱阳湖水系增殖放流鲢群体线粒体 DNA 的相关报道从单倍型出现比例 ( 单倍型个数 / 样本数 ) 来看, 增殖放流鲢 (8/5=0.) 比赣江野生鲢 (9/0=0.9) 和瑞昌野生鲢 (/9=0.68) 低单倍型多样性 (Hd) 和核苷酸多样性 (Pi) 是评估 DNA 序列遗传多样性的重要指数,Hd 和 Pi 越大, 居群多样性程度越高, 遗传多样性越丰富 [5] 瑞昌野生群体遗传多样性最为丰富, 赣江群体 () 最低 (0.77±0.077 和 ±0.0068), 表明赣江野生鲢线粒体控制区的核苷酸多样性不如瑞昌野生和增殖放流 [6] 鲢群体丰富, 这与张建铭报道相一致, 可能是因为万安泰和以及龙头山等水利枢纽阻碍了四大家鱼基因交流和溯江产卵, 从而使得赣江四大家鱼资源匮乏, 遗传多样性偏低, 应加以保护 54 个 D-Loop 序列的核苷酸不配对分布曲线呈双峰形, 中性检测的 Tajima s D(0.7006,P=0.84>0.05), Fu's Fs(-.007,P=0.40>0.05) 未偏离中性分布此结果表明鄱阳湖水系的增殖放流群体和野生鲢群体可能未经历大规模的种群扩张过程或遗传瓶颈放流活动力度的加大, 使人们更加的关注这是否会导致长江乃至通江湖泊鲢出现遗传结构分化的问题遗传分化指数 (Genetic Differentiation Index) 是衡量群体间遗传变异程度的可靠参数, 群体间亲缘关系越近, 则遗传分化指数越小当 Fst<0.05 时, 说明种群间无分化 ; 当 0.05<Fst<0.5 时, 说明种群间呈低度分化 ; 当 Fst>0.5 时, 说明种群间呈高度分化 [7] 本研究中, 所有群体总体遗传分化指数 Fst=0.8>0.5, 说明所有群体间呈现高度分化两两群体之间, 除 SL 和之间 0.05<Fst=0.085<0.5, 表明增殖放流群体与瑞昌野生群体之间呈现低度分化外, 其他群体间 F ST 均大于 0.5 说明放流鲢群体对鄱阳湖水系鲢的遗传结构带来了分化, 对其种质资源的保护受到影响另外, 个群体的平均基因流远小于 4(Nm=.08), 说明所研究的鲢群体间并不是随机交配的 AMOVA 分析也显示, 群体内个体间的变异是总变异的主要来源, 但也有.9% 的变异发生在群体间, 群体间差异极显著 (Fst=0.88,P<0.0) 个群体间的平均 K-P 遗传距离与群体内的也不处于不同水平, 体现群体的遗传分化因此, 建议各部门严格选择天然野生的鲢 F 代苗种进行放流, 避免投放定向选择和近亲繁殖的苗种 ; 另外, 为了保护鄱阳湖水系天然种群的遗传结构, 有必要长期开展鄱阳湖水系鲢遗传结构分析鄱阳湖水系野生及增殖放流鲢群体 54 尾个体中发现 4 个单倍型 ( 占所测样本的 44.4%) 其中单倍型出现频率最高.%, 占增殖放流分析个体的 48%, 为增殖放流群体独有单倍型, 是否暗示单倍型是区分不同群体的遗传标记, 是否可用于增殖放流效果评价, 有待于进一步验证综上所述, 瑞昌鲢群体的遗传多样性在个群体中最丰富, 应优先保护 ; 增殖放流群体的遗传多样性略低于瑞昌野生群体, 这可能是因为建立者效应 (Founder Effect) 或遗传漂变以及人工选择导致鲢人工繁殖种群遗传变异性降低 ; 赣江群体单倍型多样性及核苷酸多样性最低, 也应加以保护 ; 增殖放流鲢群体引起鄱阳湖水系自然鲢的遗传结构低度分化, 应进一步规范放流, 并制定有关的操作规程 ; 另外本研究发现单倍型为增殖放流鲢群体独特的单倍型, 其将作为鄱阳湖水系鲢增殖放流效果评估的分子标记参考文献 [] Cano R, Brown W M, Wison A C. Poymorphic Sites and the Mechanism of Evolution in Human Mitochondria DNA [J]. Genetics, 984,06: [] Gyensten U, Wharton D, Josesson A. Paternal Inheritance of Mitochondrial DNA in Mice [J].Nature, 99,5(6): [] Avise J C, Arnod J, Ba R M, et al. Intraspecific Phylogeograhy: the Mitochondrial DNA Bridge Between Population Genetics and Systematics[J]. Annual Review of Ecology and Systematics, 987, 8: [4] 肖武汉, 张亚平. 鱼类线粒体 DNA 的遗传与进化 [J]. 水生生物学报, 000,4(4):84-9. [5] Ishiguro N, Miya M, Nishida M. Complete mitochondrial DNA sequence of ayu Plecoglossus altivelis [J].Fisheries Sci, 00,67():

7 陈文静等 : 基于线粒体控制区全序列的鄱阳湖水系鲢增殖放流群体与野生群体的遗传多样性分析 [6] 张四明, 吴清江, 张亚平. 从线粒体 DNA 控制区核苷酸序列论达式鲟亚洲和北美洲中吻鲟的分类地位 [J]. 动物学报,00,47(6): [7] Kocher T D, Thomas W K, Meyer A, et a. Dynamics of mitochondrial DNA evolution in animals: amplification and sequencing with conserved primers [J]. Proceedings of the National Academy of Sciences,USA,989,86: [8] Nagata J, Masuda R, Tamate H B, et al. Two Genetically Distinct Lineages of the Sika Deer, Cervus Nippon, in Japanese Islands: Comparison of Mitochondrial D Loop Region Sequences [J]. Molecular Phylogenetics and Evolution, 999,:5-59. [9] 陈骁, 杨圣云, 潘聪. 中国南部海域条纹斑竹鲨线粒体 DNA 控制区遗传多态性研究 [J]. 海洋学报, 008,0(6):5-. [0] Allendorf F W, Leary R F. Heterozygosity and fitness in natural populations of animals[m]. In: Soule. M.E (ed.). Conservation Biology: the Science of Scarcity and Diversity. Sunderland: Sinauer Associaties, 986: [] 李思发, 吕庆国, 贝纳切兹 L. 长江中下游鲢鳙草青四大家鱼线粒体 DNA 多样性分析 [J]. 动物学报,998,44():8-9. [] 王长忠, 梁宏伟, 邹桂伟, 等. 长江中上游两个鲢群体遗传变异的微卫星分析 [J]. 遗传,008,0(0):4-48. [] 朱晓东, 耿波, 李娇, 等. 利用 0 个微卫星标记分析长江中下游鲢群体的遗传多样性 [J]. 遗传,007,9(6): [4] 张四明, 汪登强, 邓怀, 等. 长江中游水系鲢和草鱼群体 mtdna 遗传变异的研究 [J]. 水生生物学报,00,6():4-47. [5] Chamber S M. Genetic principles for managers [M]. In: Schonewald-cox C M. S M Chamber, B MacBryde, W L Thomas (eds.) Genetics and Conservation, Menlo Park, Benjamin/ Cummings,98: [6] 张建铭, 吴志强, 胡茂林. 赣江峡江段四大家鱼资源现状的研究 [J]. 水生态学杂志,00,():4-7. [7] Hamada H, Pitrino M, Kakunaga T. A novel repeated element with Z-DNA-forming potential is widely found in evolutionarily diverse eukaryotic genomes [M]. Proceedings of the National Academy of Sciences USA,98,79:

Chinese Journal of Applied Entomology mtdna ND1 * 1** Oedaleus asiaticus Bienko mtd

Chinese Journal of Applied Entomology mtdna ND1 * 1** Oedaleus asiaticus Bienko mtd 2011 48 4 811 819 mtdna ND1 * 1** 1 2 1 1 3 1. 010010 2. 063001 3. 010019 7 Oedaleus asiaticus Bienko 1 2 31 mtdna ND1 Myrmeleotettix palpalis Angaracris barabensis UPGMA NJ 347 bp A + T 76. 6% 22 7. 26%