连易水, 等. 乳腺癌组织中黑素瘤抗原 -A11 的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖 831 [KEY WORDS] Cell, MCF-7 Breast neoplasms; Antigens, neoplasm; Gene expression; Melanoma antigen-a11; [TUM

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1 830 临床研究 Clinical Research 肿瘤 2011 年 9 月第 31 卷第 9 期 TUMOR Vol. 31, September, 2011 DOI: /j.issn Copyright 2011 by TUMOR 乳腺癌组织中黑素瘤抗原 -A11 的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖 连易水 1, 桑梅香 2, 周欣亮 1, 丁春艳 1 1, 2, 单保恩河北医科大学第四医院 1. 科研中心,2. 肿瘤研究所免疫室, 石家庄 [ 摘要 ] 目的 : 探讨黑素瘤抗原 (melanoma antigen,mage) A11 在乳腺癌组织及相应癌旁组织中的表达, 以及 MAGE-A11 对乳腺癌细胞增殖的影响 方法 : 应用免疫组织化学法检测 60 例乳腺癌组织及其相应癌旁组织中 MAGE-A11 蛋白的表达, 分析其与乳腺癌患者临床病理学特征之间的关系 将 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒转染人乳腺癌 MCF-7 细胞后, 应用 MTT 法及集落形成实验检测 MAGE-A11 对乳腺癌细胞增殖的影响 结果 : 60 例乳腺癌组织中有 31 例 MAGE-A11 蛋白阳性表达, 阳性率为 51.7%, 相应的癌旁组织中均未发现 MAGE-A11 蛋白的表达 ;MAGE-A11 蛋白的表达与乳腺癌患者的年龄 病理类型 组织学分级 临床分期 肿瘤大小 淋巴转移 雌激素受体 (estrogen receptor,er)-α 孕激素受体(progestrogen receptor,pr) 及乳腺癌扩增因子 1(amplified in breast cancer 1,AIB-1) 的表达均无明显关系 (P > 0.05), 与人表皮生长因子受体 2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)/C-erbB2 和 ER-β 的表达有关 (P < 0.05) 转染 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒后,MCF-7 细胞的增殖率和集落形成数均有明显增加 (P < 0.05) 结论: 乳腺癌组织中 MAGE-A11 蛋白的表达与 C-erbB2 和 ER-β 的表达有关, 且 MAGE-A11 可促进人乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖 [ 关键词 ] 乳腺肿瘤 ; 抗原, 肿瘤 ; 基因表达 ; 黑素瘤抗原 -A11; 细胞,MCF-7 [ 中图分类号 ] R737.9 [ 文献标志码 ] A [ 文章编号 ] (2011) Expression of melanoma antigen-a11 in breast cancer tissues and its promoting effect on the proliferation of breast cancer cells LIAN Yi-shui 1, SANG Mei-xiang 2, ZHOU Xin-liang 1, DING Chun-yan 1, SHAN Bao-en 1, 2 1. Department of Research Center; 2. Department of Immunology, Tumor Research Institute, Fourth Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang , China [ABSTRACT] Objective: To investigate the expression of melanoma antigen (MAGE) -A11 in breast cancer tissues and their corresponding para-cancerous tissues and the effect of MAGE-A11 expression on the proliferation of breast cancer cells. Methods: The expression of MAGE-A11 protein in breast cancer tissues and their corresponding para-cancerous tissues from 60 cases was detected by immunohistochemisty. The relationship between the expression of MAGE-A11 protein and the clinicopathological features was analyzed. Human breast cancer MCF-7 cells were transfected with pcmv-ac-mage-a11-gfp plasmid. The effect of MAGE-A11 expression on the proliferation of breast cancer cells was detected by MTT method and colony formation assay. Results: Of 60 samples of breast cancer tissue, 31 had positive expression of MAGE-A11, and the positive expression rate was 51.7%. The expression of MAGE-A11 protein was negative in 60 samples of para-cancerous tissue. The expression of MAGE-A11 protein was not related to the age, pathological type, histological grade, clinical stage, tumor size, lymph node metastasis, estrogen receptor (ER) -α, progestrogen receptor (PR), and amplified in breast cancer 1 (AIB-1) in patients with breast cancer (P>0.05), while the human epidermal growth factor receptor 2 (HER-2)/ C-erbB2 and ER-β were related to the expression of MAGE-A11 protein (P<0.05). The proliferation rate and the number of colony-forming units of MCF-7 cells were significantly increased after transfection with pcmv-ac-mage-a11-gfp plasmid (P <0.05). Conclusion: The expression of MAGE-A11 protein is related to the expressions of C-erbB2 and ER-β in breast cancer tissues. MAGE-A11 may promote the proliferation of human breast cancer MCF-7 cells. [ 基金项目 ] 河北省卫生厅科研基金资助项目 ( 编号 : ) Correspondence to: SHAN Bao-en( 单保恩 ) baoenshan@yahoo.com.cn Received Accepted

2 连易水, 等. 乳腺癌组织中黑素瘤抗原 -A11 的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖 831 [KEY WORDS] Cell, MCF-7 Breast neoplasms; Antigens, neoplasm; Gene expression; Melanoma antigen-a11; [TUMOR, 2011, 31 (9): ] 人黑素瘤抗原 (melanoma antigen,mage)-a 家族包括 12 个成员, 其在正常的人体组织中均不表达, 睾丸和胎盘组织则除外 [1], 而在许多肿瘤组织中高表达 [2-5], 因此被认为是一种肿瘤特异性抗原 该家族中, 研究较多且较深入的是 MAGE-A1 和 MAGE-A3 本研究应用免疫组织化学法检测 MAGE-A11 在乳腺癌组织及其相应癌旁组织中的表达, 并分析其与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系 ; 通过将 MAGE-A11 基因转染乳腺癌细胞后, 观察其对乳腺癌细胞增殖的影响 1 资料与方法 1.1 研究对象收集 2007 年在河北医科大学第四医院进行乳腺癌手术切除的 60 例患者的乳腺癌组织及其相应癌旁组织 ( 距离癌组织边缘 5 cm 以上 ) 标本, 患者术前均经针吸细胞学或冰冻病理切片证实为乳腺癌, 且术前未行放 化疗和内分泌治疗 60 例乳腺癌患者的临床病理特征见表 1 其中, 年龄 < 40 岁的 8 例,40 ~ 60 岁的 38 例, 60 岁的 14 例 ; 按照 1997 年国际抗癌联盟 (Union for International Cancer Control,UICC) 乳腺癌 TNM 分期标准 :Ⅰ 期 14 例,Ⅱ 期 37 例, Ⅲ 期 9 例 ; 按照全国乳腺癌专业会议制定的病理分类方案 : 浸润性导管癌 47 例, 浸润性小叶癌 13 例 ; 组织学分级 :Ⅰ 级 2 例,Ⅱ 级 43 例,Ⅲ 级 15 例 ; 肿瘤体积 < 2 cm 3 者 17 例,2 ~ 5 cm 3 者 15 例,> 5 cm 3 者 28 例 ; 无淋巴结转移者 30 例, 有淋巴结转移者 30 例 ; 雌激素受体 (estrogen receptor,er)-α 阴性者 22 例,ER-α 阳性者 38 例 ; ER-β 阴性者 33 例,ER-β 阳性者 27 例 ; 人表皮生长因子受体 2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)/C-erbB2 阴性者 30 例, C-erbB2 阳性者 30 例 ; 孕激素受体 (progestrogen receptor,pr) 阴性者 29 例,PR 阳性者 31 例 ; 乳腺癌扩增因子 1(amplified in breast cancer 1, AIB-1) 阴性者 27 例,AIB-1 阳性者 33 例 获得的组织标本均经病理学诊断确诊, 标本用 10% 中性甲醛溶液固定, 常规石蜡包埋, 制成厚 4 μm 的组织切片用于免疫组织化学检测 1.2 免疫组织化学法检测乳腺癌组织中 MAGE-A11 蛋白的表达将获得的石蜡切片按 SP 免疫组织化学试剂盒 ( 北京中杉金桥生 表 1 MAGE-A11 蛋白的阳性表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系 Table 1 Cor relation of the positive e xpression of melanoma antigen (MAGE)-A11 in breast cancer tissues and the clinicopathological features (n) Clinicopathological feature N MAGE-A χ 2 P value Age/year < Pathological type I n v a s i v e d u c t a l b r e a s t 47 cancer I nvasive lobular breast 13 cancer 7 6 Histological grade Ⅰ Ⅱ Ⅲ Clinical stage Ⅰ Ⅱ Ⅲ Tumor size, V/cm < > Lymph node metastasis No Yes ER-α ER-β C-erbB PR AIB ER: Estrogen receptor; C-erbB2: Human epidermal growth factor receptor 2; PR: Progestrogen receptor; AIB-1: Amplified in breast cancer 1. 物技术有限公司产品 ) 说明书所述的操作方法检测 MAGE-A11 蛋白的表达水平 兔抗人 MAGE-A11 多克隆抗体 ( 美国 Epitomics 公司产品 ) 以 1 : 200 稀释, 生物素化山羊抗兔二抗和辣

3 832 连易水 等. 乳腺癌组织中黑素瘤抗原 -A11 的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖 根过氧物酶标记的链酶卵白素 三抗 为试剂盒 中的原液 加 DAB 试剂显色后 用苏木精对比 染色 中性树胶封固 以人正常睾丸组织作为阳 性对照 以乳腺正常组织作为阴性对照 结果判断 在光学显微镜下随机选取 20 个 高 倍 200 视 野 每 个 视 野 计 数 200 个 细 胞 以 细 胞 质 或 细 胞 核 呈 棕 黄 色 细 颗 粒 者 为 MAGE-A11 阳 性 按 阳 性 细 胞 的 染 色 强 度 分 为 无染色 与背景颜色相似 为 0 分 轻度染 色 淡 黄 色 为 1 分 中 度 染 色 棕 黄 色 为 2 分 重度染色 棕褐色 为 3 分 按阳性细胞 所 占 百 分 率 分 为 5% 为 0 分 6% 10% 为 1 分 11% 20% 为 2 分 21% 50% 为 3 分 50% 为 4 分 以上 2 项评分之和作为该患者的 总评分 2 分为阴性 3 分为阳性 1.3 细 胞 及 细 胞 培 养 人 乳 腺 癌 MCF-7 细 胞 由 日 本 千 叶 县 癌 中 心 惠 赠 用 含 10% 胎 牛 血 清 100 U/mL 青 霉 素 100 μg/ml 链 霉 素 8% NaHCO3 的 RPMI 1640 培 养 液 美 国 Gibco 公 司产品 置于 37 CO2 体积分数为 5% 的条 件下培养 1.4 MAGE-A11 基 因 转 染 人 乳 腺 癌 MCF-7 细 胞 取 对 数 生 长 期 人 乳 腺 癌 MCF-7 细 胞 按 LipofectAMINE2000 转 染 试 剂 盒 美 国 Invitrogen 公 司 产 品 说 明 书 所 述 的 方 法 将 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表 达 质 粒 和 对 照 用 的 空 载 体 pcmv-ac-gfp 美 国 OriGene Technologies Inc. 公司产品 转染至 MCF-7 细胞 中 转染 48 h 后进行后续实验 1.5 蛋 白 质 印 迹 法 检 测 MAGE-A11 基 因 对 MCF-7 细胞中 MAGE-A11 蛋白表达的影响 收 集 质 粒 转 染 后 48 h 的 MCF-7 细 胞 用 PBS 洗 涤 2 次 离心后弃上清液 收集细胞 超声裂解 细胞并用 BCA 法进行蛋白定量 取 30 μg/ 孔进 行 10% SDA-PAGE 蛋白转移至聚偏二氟乙烯 polyvinilidene difluoride PVDF 膜 上 加 5% 脱脂奶粉 4 封闭过夜 加 1 : 稀释的兔抗 人 MAGE-A11 多克隆抗体或兔抗人 β-actin 内 参照 单克隆抗体 美国 Sigma 公司产品 室温 反 应 1 h PBS 洗 膜 3 次 加 入 1 : 稀 释 的 辣根过氧化物酶标记的抗兔二抗 室温反应 1 h PBS 洗 膜 3 次 加 入 电 化 学 发 光 试 剂 美 国 Thermo Scientific 公司产品 后 在红外荧光扫 描成像系统中显影并进行定性分析 携带绿色荧 光蛋白 green fluorescent protein GFP 标签的 MAGE-A11 蛋白的相对分子质量为 实 验重复 3 次 1.6 MTT 法 检 测 MAGE-A11 基 因 对 MCF-7 细 胞生长的影响 将 MCF-7 细胞接种于直径 6 cm 的培养皿中 待细胞生长至 60% 融合时按 1.4 节的 方法将 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒和 对照用的空载体 pcmv-ac-gfp 进行转染 转染 48 h 后 以 个细胞 / 孔的密度接种于 96 孔 板中 培养过夜后待细胞贴壁 继续培养 0 24 和 48 h 后 分别加入 10 μl/ 孔 MTT 100 mg/ml 溶液 继续培育 4 h 后 在酶联免疫检测仪上检测 波长为 490 nm 处各孔的吸光度 D 值 每组设 5 个复孔 按以下公式计算细胞贴壁 24 和 48 h 后 的增殖率 细胞增殖率 实验组平均 D 值 /0 h 组 平均 D 值 100% 实验重复 3 次 1.7 集 落 形 成 实 验 检 测 MAGE-A11 基 因 对 MCF-7 细胞集落形成的影响 将 MCF-7 细胞接 种于直径 6 cm 的培养皿中 待细胞生长至 60% 融 合 时 按 1.4 节 的 方 法 将 pcmv-ac-mage-a11gfp 表达质粒和对照用的空载体 pcmv-ac-gfp 进行转染 转染 48 h 后 细胞以 个 / 皿的 密度接种于直径为 10 cm 的培养皿中 待细胞培 养过夜后贴壁 加入终质量浓度为 600 μg/ml 的 G418 进行筛选 每周换液 1 次 2 周后对细胞进 行 Wright-Giemsa 染色 计数细胞克隆 以肉眼 可见的直径 1 mm 的克隆为阳性克隆 每组重 复 3 个培养皿 实验重复 3 次 计算平均值 1.8 统计学方法 应用 SPSS 11.5 统计软件进行 统计学分析 计数资料采用连续校正的 χ2 检验 计量资料比较采用两样本均数 t 检验 P 0.05 为差异有统计学意义 2 结 果 2.1 MAGE-A11 蛋白在乳腺癌及其相应癌旁组 织中的表达 图 1 免疫组织化学检测结果显示 A B F ig. 1 Expressions of MAGE-A11 protein in breast cancer tissues (A) and their corresponding para-cancerous tissues (B) detected by immunohistochemistry (SP, 400). 图 1 免疫组织化学法检测乳腺癌组织 A 及其相应癌 旁组织 B 中 MAGE-A11 蛋白的表达 SP, 400

4 连易水, 等. 乳腺癌组织中黑素瘤抗原 -A11 的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖 833 MAGE-A11 蛋白主要定位于细胞质, 部分定位于细胞核 60 例乳腺癌肿瘤组织标本中有 31 例 MAGE-A11 蛋白表达阳性, 阳性率为 51.7%; 在相应癌旁组织中未见 MAGE-A11 蛋白表达, 两者比较差异有统计学意义 (χ 2 = , P = 0.000) 2.2 MAGE-A11 蛋白表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系 MAGE-A11 蛋白表达与乳腺癌患者的年龄 病理类型 组织学分级 临床分期 肿瘤大小 淋巴转移 ER-α PR 及 AIB-1 表达均无明显关系 (P > 0.05), 与 C-erbB2 和 ER-β 的表达有关 (P < 0.05);C-erbB2 和 ER-β 阳性的乳腺癌患者, 其 MAGE-A11 蛋白的阳性表达率分别高于 C-erbB2 和 ER-β 阴性的乳腺癌患者, 见表 MAGE-A11 基因转染后 MCF-7 细胞获得 MAGE-A11 蛋白的表达蛋白质印迹法检测结果显示, 转染 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒之后,MCF-7 细胞中 MAGE-A11 蛋白的表达水平较高 ; 转染空载体 pcmv-ac-gfp 后, 细胞中 MAGE-A11 蛋白的表达水平较低, 说明重组质粒成功转染, 可用于后续实验, 见图 MAGE-A11 可促进乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖和集落形成 ( 图 3) MTT 检测结果显示, 转染 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒后,MCF-7 细胞的增殖率明显高于转染空载体 pcmv-ac- MAGE-A11 β-actin 1 2 Fig. 2 Expression of MAGE-A11 protein in MCF-7 cells after transfection with pcmv-ac-gfp (1, as the control) or pcmv-ac-mage-a11-gfp (2) detected by Western blotting. 图 2 蛋白质印迹法检测 pcmv-ac-mage-a11-gfp 转染后 MCF-7 细胞中 MAGE-A11 蛋白的表达 A Cell viability /% pcmv-av-gfp p CMV-AC-MAGE- A11-GFP t/h P < 0.05 B The number of colony P < 0.05 Fig. 3 Promoting effects of MAGE-A11 on proliferation of MCF-7 cells detected by MTT assay (A) or colony formation assay (B, 1: Transfected with pcmv-ac-gfp; 2: Transfected with pcmv-ac-mage-a11-gfp) (n = 3). 图 3 MAGE-A11 促进乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖 (n = 3) 1 2 GFP 后的对照组细胞 (P < 0.05) 集落形成实验结果显示, 转染 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒后 MCF-7 细胞的克隆形成数明显高于转染空载体 pcmv-ac-gfp 后的对照组细胞 (P < 0.05) 3 讨论 关于 MAGE-A 家族成员在肿瘤中表达的研究已经很多, 但由于该家族成员之间在序列上的高度保守性, 造成针对每个家族成员的特异性抗体的制备非常困难, 因此大多数研究是应用 RT- PCR 基因微阵列和 RNA 原位杂交技术检测该家 [6, 族成员在基因水平上的表达情况 7] MAGE-A [8, 家族成员除了在黑素瘤中表达外, 在肝癌 9] 非小细胞肺癌 [10] 膀胱癌 [11] 外阴癌 [12] 结直肠肿瘤 [13] 唾液腺肿瘤 [14] 宫颈癌 [15] 卵巢肿 [16] [17] 瘤和霍奇金淋巴瘤中也均有表达 本研究应用免疫组织化学法检测了 MAGE-A11 蛋白在 60 例乳腺癌组织及其相应癌旁组织中的表达状况, 并分析了 MAGE-A11 蛋白表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的关系 结果显示,60 例乳腺癌组织有 31 例 MAGE-A11 蛋白表达阳性, 阳性率为 51.7%, 所有癌旁组织中均未发现 MAGE-A11 蛋白的表达, 说明 MAGE-A11 蛋白在乳腺癌中是肿瘤特异性抗原 统计学分析结果显示,MAGE-A11 蛋白表达与乳腺癌患者的年龄 病理类型 组织学分级 临床分期 肿瘤大小 淋巴转移 ER-α PR 及 AIB-1 表达均无明显关系 C-erbB2 阳性的乳腺癌患者中 MAGE-A11 蛋白的阳性表达率明显高于 C-erbB2 阴性的乳腺癌患者 在乳腺癌中,C-erbB2 阳性表达是乳腺癌患者预后不良的一个重要指标, 因此笔者推测, 乳腺癌组织中 MAGE-A11 蛋白的高表达可能是乳腺癌患者预后不良的一个重要标志, 对于该推论还需进一步通过大样本病例研究进行证实 此外,ER-β 阳性的乳腺癌患者中 MAGE-A11 蛋白的阳性表达率明显高于 ER-β 阴性的乳腺癌患者 ER 作为临床常见的乳腺癌检测指标, 可指导乳腺癌患者的治疗,ER 阳性的患者往往接受为期 5 年的三苯氧胺内分泌治疗 笔者考虑, 乳腺癌组织中 MAGE-A11 蛋白的表达也可能会成为乳腺癌治疗的一个参考指标 为何 MAGE-A11 蛋白的表达仅与 ER-β 的表达有关而与 ER-α 的表达无关, 需要进一步研究 研究发现,MAGE-A11 可以和雄激素受体

5 834 连易水, 等. 乳腺癌组织中黑素瘤抗原 -A11 的表达及其促进乳腺癌细胞的增殖 (androgen receptor,ar)n 末端特定的氨基酸基序 FXXLF 结合, 并通过上皮生长因子依赖性 MAGE-A11 的磷酸化和泛素化增加 AR 的转录活性 [18] 高表达 MAGE-A11 可通过增加 AR 依赖性的细胞增殖而促进前列腺癌的生长 [19] 本研究结果显示, 转染 pcmv-ac-mage-a11-gfp 表达质粒后,MCF-7 细胞的增殖率和克隆形成数明显增加, 说明 MAGE-A11 可促进人乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖, 对其具体的作用机制还需进一步研究 总之, 乳腺癌组织中 MAGE-A11 蛋白的表达与乳腺癌患者的 C-erbB2 及 ER 表达有关, 且 MAGE-A11 可促进人乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖, 提示 MAGE-A11 在乳腺癌的发生和发展中扮演了癌基因的角色, 有可能成为乳腺癌治疗的新靶点 [ 参考文献 ] [1] OHMAN FORSLUND K, NORDQVIST K. The melanoma antigen genes any clues to their functions in normal tissues[j]. Exp Cell Res, 2001, 265 (2): [2] CHOMEZ P, DE BACKER O, BERTRAND M, et al. An overview of the MAGE gene family with the identification of all human members of the family[j]. Cancer Res, 2001, 61 (14): [3] XIAO J, CHEN H S. Biological functions of melanoma-associated antigens[j]. World J Gastroenterol, 2004, 10 (13): [4] BRASSEUR F, MARCHAND M, VANWIJCK R, et al. Human gene MAGE- 1, which codes for a tumorrejection antigen, is expressed by some breast tumors[j]. Int J Cancer, 1992, 52 (5): [5] JUNGBLUTH A A, BUSAM K J, KOLB D, et al. Expression of MAGE-antigens in normal tissues and cancer[j]. Int J Cancer, 2000, 85 (4): [6] SUGITA M, GERACI M, GAO B, et al. Combined use of oligonucleotide and tissue microarrays identifies cancer/testis antigens as biomarkers in lung carcinoma[j]. Cancer Res, 2002, 62 (14): [7] KUFER P, ZIPPELIUS A, LUTTERBUSE R, et al. Heterogeneous expression of MAGE-A genes in occult disseminated tumor cells: a novel multimarker reverse transcription-polymerase chain reaction for diagnosis of micrometastatic disease[j]. Cancer Res, 2002, 62 (1): [8] CHEN H, CAI S, WANG Y, et al. Expression of the MAGE -1 gene in human hepatocellular carcinomas[j]. Clin Med J (Engl), 2000, 113 (12): [9] 谢小薰, 何少健, 肖绍文, 等. 三种 MAGE 基因在广西肝细胞癌中的表达 [J]. 肿瘤, 2005, 25 (6): [10] PEIKERT T, SPECKS U, FARVER C, et al. Melanoma antigen A4 is expressed in non-small cell lung cancers and promotes apoptosis[j]. Cancer Res, 2006, 66 (9): [11] BERGERON A, PICARD V, LARUE H, et al. High frequency of MAGE-A4 and MAGE-A9 expression in high-risk bladder cancer[j]. Int J Cancer, 2009, 125 (6): [12] BELLATI F, NAPOLETANO C, TARQUINI E, et al. Cancer testis antigen expression in primary and recurrent vulvar cancer: association with prognostic factors[j]. Eur J Cancer, 2007, 43 (17): [13] KIM K H, CHOI J S, KIM I J, et al. Promoter hypomethylation and reactivation of MAGE-A 1 and MAGE-A 3 genes in colorectal cancer c e l l l i n e s a n d c a n c e r t i s s u e s [ J ]. W o r l d J Gastroenterol, 2006, 12 (35): [14] LIU J, WANG G, OKUTOMI T, et al. Expression of MAGE-A 1 and MAGE-A 3 genes in human salivary gland carcinomas[j]. Clin Med J (Engl), 2003, 116 (6): [15] NAPOLETANO C, BELLATI F, TARQUINI E, et al. MAGE-A and NY-ESO-1 expression in cervical cancer: prognostic factors and effects of chemotherapy[j]. Am J Obstat Gynecol, 2008, 198 (1): 99. e1-7. [16] Y A K I R E V I C H E, S A B O E, L A V I E O, e t a l. Expression of the MAGE-A4 and NY-ESO-1 cancer-testis antigens in serous ovarian neoplasms[j]. Clin Cancer Res, 2003, 9 (17): [17] CHAMBOST H, VAN BAREN N, BRASSEUR F, et al. Expression of gene MAGE-A4 in Reed-Sternberg cells[j]. Blood, 2000, 95 (11): [18] BAI S, HE B, WILSON E M. Melanoma antigen gene protein MAGE-11 regulates androgen r e c e p t o r f u n c t i o n b y m o d u l a t i n g t h e interdomain interaction[j]. Mol Cell Biol, 2005, 25 (4): [19] BAI S, WILSON E M. Epidermal-growth-factordependent phosphorylation and ubiquitinylation of MAGE-11 regulates its interaction with the androgen receptor[j]. Mol Cell Biol, 2008, 28 (6): [ 本文编辑 ] 张毅

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